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北师大版 (2019)选择性必修3 生物技术与工程第二节 微生物纯培养物的选择精品课后作业题
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这是一份北师大版 (2019)选择性必修3 生物技术与工程第二节 微生物纯培养物的选择精品课后作业题，共8页。
同步课时训练
【基础练习】
1.下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是( )
A.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、尿素、琼脂、蒸馏水
B.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、琼脂、蒸馏水
C.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、尿素、琼脂、蒸馏水
D.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、蒸馏水
2.下列不能测定样品微生物数的方法是( )
A.稀释涂布平板法B.显微镜直接计数法
C.滤膜法D.平板划线法
3.某同学在稀释倍数为106的培养基中测得平板上菌落数的平均值为234，那么每克样品中的菌落数是（涂布平板时所用稀释液的体积为0.2mL)( )
×108×109×108×109
4.下列关于从土壤中分离细菌的操作步骤中，正确的是( )
①土壤取样
②称取10g土壤取出加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中
③吸取0.1mL进行平板涂布
④依次稀释至稀释度
A.①→②→③→④ B.①→③→②→④ C.①→②→④→③ D.①→④→②→③
5.在做分离分解尿素的细菌实验时,A同学从培养基上筛选出大约150个菌落,而其他同学只选择出大约50个菌落.产生A同学结果的原因可能有( )
① 土样不同
② 培养基污染
③ 操作失误
④ 没有设置对照
A.① ② ③ B.② ③ ④ C.① ③ ④ D.① ② ③ ④
6.在细菌培养实验中进行计数时，应计数的是( )
A.各个稀释度样品的培养基上的细菌数B.合理稀释度样品的培养基上的细菌数
C.各个稀释度样品的培养基上的菌落数D.合理稀释度样品的培养基上的菌落数
【能力提升】
7.筛选是分离和培养微生物新类型常用的手段，下列技术中不能筛选成功的是( )
A.在全营养的LB培养基(普通培养基)中，筛选大肠杆菌
B.在尿素固体培养基中，筛选能够分解尿素的微生物
C.用以纤维素为唯一碳源的培养基，筛选能分解纤维素的微生物
D.在培养基中加入不同浓度的氯化钠，筛选抗盐突变体的微生物
8.下列有关“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验的叙述，正确的是( )
A.实验中采集的土样经高温灭菌后，可以用于制取土壤稀释液
B.分离土壤中能分解尿素的细菌时，应选择以尿素为唯一氮源的培养基
C.测定土壤样品中的活菌数目，常用显微镜直接计数法
D.接种土壤微生物稀释液时，平板划线法通过连续划线的操作使微生物均匀分布
9.检测员将1 mL水样稀释10倍后，用抽样检测的方法检测每毫升蓝藻的数量；将盖玻片放在计数室上，用吸管吸取少许培养液使其自行渗入计数室，并用滤纸吸去多余液体。已知每个计数室由25×16＝400个小格组成，容纳液体的总体积为0.1 mm3.
现观察到图中该计数室所示a、b、c、d、e 5个中格内(每个中格内含16个小格)共有蓝藻n个，则上述水样中约有蓝藻多少个／mL ( )
A.5n×105 B.5n×106 C.8n×105 D.8n×106
10.下列有关“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验”的叙述，正确的是( )
A.分离土壤中的尿素分解菌实验中，采集的土样经高温灭菌后，可以用于制取土壤稀释液
B.测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量，选用的稀释度范围不同
C.测定土壤样品中的活菌数目，常用显微镜直接计数法
D.接种土壤微生物稀释液时，平板划线法可以采取连续划线的方法使微生物均匀分布
（多选题）11.某些土壤细菌可将尿素分解成CO2和NH3，供植物吸收和利用。下列关于土壤中分解尿素的细菌分离和计数的相关叙述，错误的是( )
A.分解尿素的细菌是以尿素的分解产物CO2作为碳源的
B.倒平板时应将打开的培养皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上
C.培养基中KH2PO4等的作用之一是作为缓冲剂保持pH稳定
D.若实验组菌落平均数为37个/平板，空白对照平板上有3个菌落，则本组菌落数的平 均值为34个/平板
（多选题）12.下列关于“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验操作的叙述，正确的是( )
A.选择菌落数为30~300的实验组平板进行计数
B.将实验组和对照组平板倒置，放在25℃恒温培养箱中培养
C.利用稀释涂布平板法准确估计菌落数目的关键是恰当的稀释度
D.判断选择培养基是否起选择作用，需设置接种的普通培养基作为对照
（多选题）13.某检测小组为验证使用公筷的必要性，将聚餐时的每道菜品分为两份，一份使用公筷进食，一份不使用公筷进食。通过无菌操作采集样品，定量稀释后等量接种于牛肉膏蛋白胨培养基上，恒温培养适宜时间，进行细菌菌落总数统计，结果如下表，其中CFU/g表示每克样品在培养基上形成的菌落总数。下列叙述正确的是( )
A.每道菜品应用公筷和非公筷夹取相同次数，目的是排除无关变量的干扰
B.使用公筷可明显降低菜品细菌污染，使用非公筷会导致人员之间的交叉污染
C.实验采用稀释涂布平板法统计活菌数目，实验结果一般比实际值偏高
D.牛肉膏蛋白胨培养基需经高压蒸汽灭菌后调整pH，冷却后倒平板
（多选题）14.用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数,在对应稀释倍数为106的培养基中,对该实验有关的叙述错误的是( )
A.涂布了三个平板,统计的菌落数分别是210、240和250,取平均值233
B.涂布了一个平板,统计的菌落数是230
C.设置对照实验的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响,提高实验结果的可信度
D.统计某一稀释度的5个平板的菌落数依次为M1、M2、M3、M4、M5,以M3作为该样品菌落数估计值
15.邻苯二甲酸酯（PAEs）是塑料增塑剂，具有生殖毒性和神经毒性，会影响农产品的质量和危害人体健康。科研人员从活性污泥中分离得到PAEs高效降解菌，流程如下图所示。回答下列问题：
（1）培养PAEs高效降解菌时，培养基中的营养物质有水、_________和无机盐。富集培养的目的是_________。在样品稀释的过程中，须注意_________以防杂菌污染。
（2）图中用于筛选培养目的菌的平板上唯一的碳源物质是_________。用稀释涂布平板法统计菌落数目时，一般选择菌落数在_________个的平板进行计数。若平板上的平均菌落数为210个，接种稀释液的体积为0.2mL，则每毫升样品中的细菌数为_________。
（3）本实验利用菌落计数的原理是基于_________。
答案以及解析
1.答案：A
解析：在A项的培养基中既有尿素作为唯一氮源,又有其他各种成分,可以选择出分解尿素的细菌;而C项中缺少碳源,B项中无尿素作氮源,D项中有牛肉膏可提供氮源的成分。答案:A
2.答案：D
解析：A、稀释涂布平板法能推测出样品中大约含有多少活菌，A正确；
B、显微镜直接计数法可测定样品微生物数目，缺点是不能区分死菌与活菌，B正确；
C、滤膜法能测定样品微生物数，例如用滤膜法测定自来水中大肠杆菌的数目，C正确；
D、平板划线法可用于分离微生物，但不能测定样品微生物数目，D错误。
故选D。
3.答案：D
解析：根据题意可以知道，每克样品中的菌落数=平板上菌落数的平均值÷体积×稀释倍数=234÷0.2×106=1.17×109，D正确，ABC错误。故选D。
4.答案：C
解析：
5.答案：A
解析：在做分离分解尿素的细菌实验时，A同学获得的菌落远大于其他同学，可能是由于其所取的土样不同，含有的细菌数较多，①正确；也可能操作过程中没有保证无菌操作，如培养基灭菌不彻底、被杂菌污染，导致获得的菌落数较多，②③正确；没有设置对照不会导致其获得的菌落数明显增加的，④错误。
6.答案：D
解析：在细菌培养实验中进行计数时，应对样品进行不同程度的稀释，再涂布到培养基上进行培养，然后对合理稀释度样品的培养基上的菌落数进行计数。细菌培养实验中，一般难以对固体培养基上的细菌数进行统计。本题选D。
7.答案：A
解析：A. 在全营养的LB培养基中，几乎所有细菌都能生长，不能筛选大肠杆菌；A错误；
B. 在尿素固体培养基中，只有能分解尿素的微生物才能生长，不能分解尿素的微生物因缺乏氮源不能生长，能够筛选分解尿素的微生物；B正确；
C. 用纤维素为唯一碳源的培养基，只有能分解纤维素 的微生物才能生长，不能分解纤维素的微生物因缺乏碳源不能生长，能筛选分解纤维素的微生物；C正确；
D. 在培养基中加入不同浓度的氯化钠，筛选抗盐突变体植物；D正确。
故选：A。
8.答案：B
解析：实验中采集的土样经高温灭菌后，其中的微生物全部死亡，不能分离得到尿素分解菌，A错误；分离土壤中能分解尿素的细菌时，应选择以尿素为唯一氮源的培养基，B正确；测定土壤样品中的活菌数目，常用稀释涂布平板法，一般不用显微镜直接计数法，C错误；接种土壤微生物稀释液时，可借助平板划线法，通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面，但并不是使微生物均匀分布，D错误。
9.答案：A
解析：根据题意和图示分析已知：每个计数室由25×16=400个小格组成，容纳液体的总体积为0.1mm3，则水样中蓝藻数量=80个小方格细胞总数÷80×400×10000×稀释倍数=n×5×10000×10=5n×105．
故选：A．
10.答案：B
解析：本题主要考查微生物的分离与计数.土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验中,采集的土样经高温灭菌后,土样中的微生物全部死亡,无法得到尿素分解菌,A错误;土壤中各类微生物的数量不同,在测定不同微生物数量时,选用的稀释度范围不同,B正确测定土壤样品中的活菌数目,常用菌落计数法,一般不用显微镜直接计数法,C错误;接种土壤微生物稀释液时,可借助平板划线法,通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面,但并不能使微生物均匀分布,D错误.
11.答案：ABD
解析：A.分解尿素的细菌是异养型，不能以CO2作为碳源，A错误；
B.倒平板时，不能将打开的培养皿盖放到一边，以免微生物污染，正确的做法是：用左手将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，右手将锥形瓶中的培养基（约10～20 mL）倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖，B错误；
C.无机盐可以作为缓冲剂保持细胞生长过程中pH稳定，所以培养基中KH2PO4等的作用之一是作为缓冲剂保持pH稳定，C正确；
D.在完全正确的操作情况下，空白对照组中不应出现菌落。若空白对照组出现菌落，说明操作过程中存在微生物污染，属于实验失误，所有实验数据均不应采用，D错误。
故选ABD。
12.答案：ACD
解析：为让计数更为准确，计数时通常选择菌落数为30~300的实验组平板进行计数，A正确；将实验组和对照组平板倒置后，37℃恒温培养24~48小时，B错误；利用稀释涂布平板法准确估计菌落数目的关键是恰当的稀释度，稀释倍数太低，菌落会长在一起，稀释倍数太高，平板上菌落数目过少，不易进行计数，C正确；若要判断选择培养基是否起到了选择作用，需设置接种了的没有选择作用的普通培养基作为对照，D正确。
13.答案：AB
解析：A、每道菜品用公筷和非公筷夹取的次数属于无关变量，应该保持相同，以排除无关变量对实验结果的干扰，A正确；B、根据实验数据分析，与使用非公筷相比，使用公筷可明显降低菜品细菌污染，使用非公筷会导致菜品间的交叉污染，B正确；C、实验采用稀释涂布平板法统计活菌数目，实验结果一般比实际值偏低，这是因为当两个或多个细胞连在一起生长时，计数只计为一个菌落，C错误；D、牛肉膏蛋白胨培养基需先调pH，经高压蒸汽灭菌后再倒平板，且倒平板时，不能等冷却后再倒，培养基会发生凝固，D错误。
14.答案：BD
解析：A.该实验中，至少要涂布3个平板，选择菌落数在30~300的进行记数，求平均值，A正确； B.没有设置重复组，结果不具有说服力，B错误； C.设置对照实验的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度，C正确； D.统计某一稀释度的5个平板的菌落数依次为M1、M2、M3、M4、M5，首先选择菌落数在30~300的进行记数，然后求平均值，D错误。
故选：BD
15.答案：（1）碳源、氮源；增加目的菌的浓度，确保从样品中分离得到目的菌；无菌操作
（2）邻苯二甲酸酯（或PAFs）；30~300；1.05×108
（3）一个菌落代表一个细菌单细胞菜名
细菌菌落总数(CFU/g)
餐前
餐后
公筷
非公筷
凉拌黄瓜
14000
16000
45000
香辣牛蛙
60
150
560
同步课时训练
【基础练习】
1.下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是( )
A.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、尿素、琼脂、蒸馏水
B.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、琼脂、蒸馏水
C.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、尿素、琼脂、蒸馏水
D.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、蒸馏水
2.下列不能测定样品微生物数的方法是( )
A.稀释涂布平板法B.显微镜直接计数法
C.滤膜法D.平板划线法
3.某同学在稀释倍数为106的培养基中测得平板上菌落数的平均值为234，那么每克样品中的菌落数是（涂布平板时所用稀释液的体积为0.2mL)( )
×108×109×108×109
4.下列关于从土壤中分离细菌的操作步骤中，正确的是( )
①土壤取样
②称取10g土壤取出加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中
③吸取0.1mL进行平板涂布
④依次稀释至稀释度
A.①→②→③→④ B.①→③→②→④ C.①→②→④→③ D.①→④→②→③
5.在做分离分解尿素的细菌实验时,A同学从培养基上筛选出大约150个菌落,而其他同学只选择出大约50个菌落.产生A同学结果的原因可能有( )
① 土样不同
② 培养基污染
③ 操作失误
④ 没有设置对照
A.① ② ③ B.② ③ ④ C.① ③ ④ D.① ② ③ ④
6.在细菌培养实验中进行计数时，应计数的是( )
A.各个稀释度样品的培养基上的细菌数B.合理稀释度样品的培养基上的细菌数
C.各个稀释度样品的培养基上的菌落数D.合理稀释度样品的培养基上的菌落数
【能力提升】
7.筛选是分离和培养微生物新类型常用的手段，下列技术中不能筛选成功的是( )
A.在全营养的LB培养基(普通培养基)中，筛选大肠杆菌
B.在尿素固体培养基中，筛选能够分解尿素的微生物
C.用以纤维素为唯一碳源的培养基，筛选能分解纤维素的微生物
D.在培养基中加入不同浓度的氯化钠，筛选抗盐突变体的微生物
8.下列有关“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验的叙述，正确的是( )
A.实验中采集的土样经高温灭菌后，可以用于制取土壤稀释液
B.分离土壤中能分解尿素的细菌时，应选择以尿素为唯一氮源的培养基
C.测定土壤样品中的活菌数目，常用显微镜直接计数法
D.接种土壤微生物稀释液时，平板划线法通过连续划线的操作使微生物均匀分布
9.检测员将1 mL水样稀释10倍后，用抽样检测的方法检测每毫升蓝藻的数量；将盖玻片放在计数室上，用吸管吸取少许培养液使其自行渗入计数室，并用滤纸吸去多余液体。已知每个计数室由25×16＝400个小格组成，容纳液体的总体积为0.1 mm3.
现观察到图中该计数室所示a、b、c、d、e 5个中格内(每个中格内含16个小格)共有蓝藻n个，则上述水样中约有蓝藻多少个／mL ( )
A.5n×105 B.5n×106 C.8n×105 D.8n×106
10.下列有关“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验”的叙述，正确的是( )
A.分离土壤中的尿素分解菌实验中，采集的土样经高温灭菌后，可以用于制取土壤稀释液
B.测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量，选用的稀释度范围不同
C.测定土壤样品中的活菌数目，常用显微镜直接计数法
D.接种土壤微生物稀释液时，平板划线法可以采取连续划线的方法使微生物均匀分布
（多选题）11.某些土壤细菌可将尿素分解成CO2和NH3，供植物吸收和利用。下列关于土壤中分解尿素的细菌分离和计数的相关叙述，错误的是( )
A.分解尿素的细菌是以尿素的分解产物CO2作为碳源的
B.倒平板时应将打开的培养皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上
C.培养基中KH2PO4等的作用之一是作为缓冲剂保持pH稳定
D.若实验组菌落平均数为37个/平板，空白对照平板上有3个菌落，则本组菌落数的平 均值为34个/平板
（多选题）12.下列关于“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验操作的叙述，正确的是( )
A.选择菌落数为30~300的实验组平板进行计数
B.将实验组和对照组平板倒置，放在25℃恒温培养箱中培养
C.利用稀释涂布平板法准确估计菌落数目的关键是恰当的稀释度
D.判断选择培养基是否起选择作用，需设置接种的普通培养基作为对照
（多选题）13.某检测小组为验证使用公筷的必要性，将聚餐时的每道菜品分为两份，一份使用公筷进食，一份不使用公筷进食。通过无菌操作采集样品，定量稀释后等量接种于牛肉膏蛋白胨培养基上，恒温培养适宜时间，进行细菌菌落总数统计，结果如下表，其中CFU/g表示每克样品在培养基上形成的菌落总数。下列叙述正确的是( )
A.每道菜品应用公筷和非公筷夹取相同次数，目的是排除无关变量的干扰
B.使用公筷可明显降低菜品细菌污染，使用非公筷会导致人员之间的交叉污染
C.实验采用稀释涂布平板法统计活菌数目，实验结果一般比实际值偏高
D.牛肉膏蛋白胨培养基需经高压蒸汽灭菌后调整pH，冷却后倒平板
（多选题）14.用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数,在对应稀释倍数为106的培养基中,对该实验有关的叙述错误的是( )
A.涂布了三个平板,统计的菌落数分别是210、240和250,取平均值233
B.涂布了一个平板,统计的菌落数是230
C.设置对照实验的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响,提高实验结果的可信度
D.统计某一稀释度的5个平板的菌落数依次为M1、M2、M3、M4、M5,以M3作为该样品菌落数估计值
15.邻苯二甲酸酯（PAEs）是塑料增塑剂，具有生殖毒性和神经毒性，会影响农产品的质量和危害人体健康。科研人员从活性污泥中分离得到PAEs高效降解菌，流程如下图所示。回答下列问题：
（1）培养PAEs高效降解菌时，培养基中的营养物质有水、_________和无机盐。富集培养的目的是_________。在样品稀释的过程中，须注意_________以防杂菌污染。
（2）图中用于筛选培养目的菌的平板上唯一的碳源物质是_________。用稀释涂布平板法统计菌落数目时，一般选择菌落数在_________个的平板进行计数。若平板上的平均菌落数为210个，接种稀释液的体积为0.2mL，则每毫升样品中的细菌数为_________。
（3）本实验利用菌落计数的原理是基于_________。
答案以及解析
1.答案：A
解析：在A项的培养基中既有尿素作为唯一氮源,又有其他各种成分,可以选择出分解尿素的细菌;而C项中缺少碳源,B项中无尿素作氮源,D项中有牛肉膏可提供氮源的成分。答案:A
2.答案：D
解析：A、稀释涂布平板法能推测出样品中大约含有多少活菌，A正确；
B、显微镜直接计数法可测定样品微生物数目，缺点是不能区分死菌与活菌，B正确；
C、滤膜法能测定样品微生物数，例如用滤膜法测定自来水中大肠杆菌的数目，C正确；
D、平板划线法可用于分离微生物，但不能测定样品微生物数目，D错误。
故选D。
3.答案：D
解析：根据题意可以知道，每克样品中的菌落数=平板上菌落数的平均值÷体积×稀释倍数=234÷0.2×106=1.17×109，D正确，ABC错误。故选D。
4.答案：C
解析：
5.答案：A
解析：在做分离分解尿素的细菌实验时，A同学获得的菌落远大于其他同学，可能是由于其所取的土样不同，含有的细菌数较多，①正确；也可能操作过程中没有保证无菌操作，如培养基灭菌不彻底、被杂菌污染，导致获得的菌落数较多，②③正确；没有设置对照不会导致其获得的菌落数明显增加的，④错误。
6.答案：D
解析：在细菌培养实验中进行计数时，应对样品进行不同程度的稀释，再涂布到培养基上进行培养，然后对合理稀释度样品的培养基上的菌落数进行计数。细菌培养实验中，一般难以对固体培养基上的细菌数进行统计。本题选D。
7.答案：A
解析：A. 在全营养的LB培养基中，几乎所有细菌都能生长，不能筛选大肠杆菌；A错误；
B. 在尿素固体培养基中，只有能分解尿素的微生物才能生长，不能分解尿素的微生物因缺乏氮源不能生长，能够筛选分解尿素的微生物；B正确；
C. 用纤维素为唯一碳源的培养基，只有能分解纤维素 的微生物才能生长，不能分解纤维素的微生物因缺乏碳源不能生长，能筛选分解纤维素的微生物；C正确；
D. 在培养基中加入不同浓度的氯化钠，筛选抗盐突变体植物；D正确。
故选：A。
8.答案：B
解析：实验中采集的土样经高温灭菌后，其中的微生物全部死亡，不能分离得到尿素分解菌，A错误；分离土壤中能分解尿素的细菌时，应选择以尿素为唯一氮源的培养基，B正确；测定土壤样品中的活菌数目，常用稀释涂布平板法，一般不用显微镜直接计数法，C错误；接种土壤微生物稀释液时，可借助平板划线法，通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面，但并不是使微生物均匀分布，D错误。
9.答案：A
解析：根据题意和图示分析已知：每个计数室由25×16=400个小格组成，容纳液体的总体积为0.1mm3，则水样中蓝藻数量=80个小方格细胞总数÷80×400×10000×稀释倍数=n×5×10000×10=5n×105．
故选：A．
10.答案：B
解析：本题主要考查微生物的分离与计数.土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验中,采集的土样经高温灭菌后,土样中的微生物全部死亡,无法得到尿素分解菌,A错误;土壤中各类微生物的数量不同,在测定不同微生物数量时,选用的稀释度范围不同,B正确测定土壤样品中的活菌数目,常用菌落计数法,一般不用显微镜直接计数法,C错误;接种土壤微生物稀释液时,可借助平板划线法,通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面,但并不能使微生物均匀分布,D错误.
11.答案：ABD
解析：A.分解尿素的细菌是异养型，不能以CO2作为碳源，A错误；
B.倒平板时，不能将打开的培养皿盖放到一边，以免微生物污染，正确的做法是：用左手将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，右手将锥形瓶中的培养基（约10～20 mL）倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖，B错误；
C.无机盐可以作为缓冲剂保持细胞生长过程中pH稳定，所以培养基中KH2PO4等的作用之一是作为缓冲剂保持pH稳定，C正确；
D.在完全正确的操作情况下，空白对照组中不应出现菌落。若空白对照组出现菌落，说明操作过程中存在微生物污染，属于实验失误，所有实验数据均不应采用，D错误。
故选ABD。
12.答案：ACD
解析：为让计数更为准确，计数时通常选择菌落数为30~300的实验组平板进行计数，A正确；将实验组和对照组平板倒置后，37℃恒温培养24~48小时，B错误；利用稀释涂布平板法准确估计菌落数目的关键是恰当的稀释度，稀释倍数太低，菌落会长在一起，稀释倍数太高，平板上菌落数目过少，不易进行计数，C正确；若要判断选择培养基是否起到了选择作用，需设置接种了的没有选择作用的普通培养基作为对照，D正确。
13.答案：AB
解析：A、每道菜品用公筷和非公筷夹取的次数属于无关变量，应该保持相同，以排除无关变量对实验结果的干扰，A正确；B、根据实验数据分析，与使用非公筷相比，使用公筷可明显降低菜品细菌污染，使用非公筷会导致菜品间的交叉污染，B正确；C、实验采用稀释涂布平板法统计活菌数目，实验结果一般比实际值偏低，这是因为当两个或多个细胞连在一起生长时，计数只计为一个菌落，C错误；D、牛肉膏蛋白胨培养基需先调pH，经高压蒸汽灭菌后再倒平板，且倒平板时，不能等冷却后再倒，培养基会发生凝固，D错误。
14.答案：BD
解析：A.该实验中，至少要涂布3个平板，选择菌落数在30~300的进行记数，求平均值，A正确； B.没有设置重复组，结果不具有说服力，B错误； C.设置对照实验的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度，C正确； D.统计某一稀释度的5个平板的菌落数依次为M1、M2、M3、M4、M5，首先选择菌落数在30~300的进行记数，然后求平均值，D错误。
故选：BD
15.答案：（1）碳源、氮源；增加目的菌的浓度，确保从样品中分离得到目的菌；无菌操作
（2）邻苯二甲酸酯（或PAFs）；30~300；1.05×108
（3）一个菌落代表一个细菌单细胞菜名
细菌菌落总数(CFU/g)
餐前
餐后
公筷
非公筷
凉拌黄瓜
14000
16000
45000
香辣牛蛙
60
150
560
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