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四川省眉山中学2023-2024学年高二下学期期中考试生物试题
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这是一份四川省眉山中学2023-2024学年高二下学期期中考试生物试题，共12页。试卷主要包含了单选题，非选择题等内容，欢迎下载使用。
1．绍兴是黄酒之乡，“麦曲酶长，酵米复芳；白梅酒酿，伴淋寒香；压滤琼浆，煎煮陈藏”是对绍兴黄酒精致复杂酿造工艺的描述。在黄酒的主发酵过程中，“开耙”（搅拌）是极为关键的一步。下列相关叙述错误的是（ ）
A．接种麦曲有利于淀粉的糖化，有利于“酒酿”菌种发酵
B．煎煮的目的是除去发酵产品中的杂菌，利于酵母菌繁殖
C．陈藏有利于黄酒中物质充分混合，使酒更加芳香
D．发酵过程中“开耙”可适当提供O2，调节pH，活化酵母
2．某人利用乳酸菌制作泡菜，因操作不当导致泡菜腐烂，其原因可能是（ ）
①密闭缺氧的环境抑制了乳酸菌的生长繁殖
②密封不严，氧气抑制了乳酸菌的生长繁殖
③密封不严，氧气抑制了其他厌氧微生物的生长繁殖
④密封不严，氧气促进了好氧微生物的生长繁殖
A．①③B．②④C．②③D．①④
3．组织培养可快速繁殖植物，得到的试管苗常先移至草炭土或蛭石中炼苗，苗健壮后可移栽定植。关于菊花的组织培养及幼苗的移栽，下列说法错误的是 （ ）
A．MS培养基的碳源一般用蔗糖而不用葡萄糖，以减少微生物污染
B．MS培养基、NAA溶液、6-BA溶液均可配制成母液，以减少称量的误差
C．接种时用镊子夹取菊花茎段，注意茎段的形态学上下端，避免倒插
D．培养时一般先诱导愈伤组织生根再诱导其生芽
4．60C辐射可使部分花粉活力降低， 通过受精过程可诱导卵细胞发育成单倍体幼胚。科研人员利用此原理， 通过下图所示操作培养西葫芦优良品种。
下列相关叙述不正确的是（ ）
A．雌花套袋的目的是防止外来花粉的干扰
B．经②得到的部分幼苗体细胞染色体数目可能与④获得的品种相同
C．④处理可在有丝分裂前期抑制纺锤体的形成
D．③应挑选幼苗中叶片大、茎秆粗壮的个体即为单倍体
5．研究人员利用杏鲍菇(具有双核，AA) 和秀珍菇(具有单核，B) 进行体细胞杂交，以期培养食用菌新品种，流程如图。已知异源融合子因异源基因相混合而获得新的遗传特性，表现出对亲株的拮抗作用，能够在培养基上观察到一条拮抗带。融合后的菌丝，在进行细胞分裂时，会形成一个喙状结构，而单核菌丝不会。
注：高温灭活使原生质体AA仅能生存而无法繁殖。
下列叙述正确的是（ ）
A．步骤②中原生质体应在低渗溶液中进行培养并处理
B．促融后形成的融合菌株可能为AAAA、AAB、BB、AB
C．在培养基上可以观察到AA菌落、B菌落以及AAB菌落
D．若有喙状结构和无喙状结构同时出现在拮抗带，步骤③应选择有喙状结构的菌丝
6．科研人员在杂交瘤细胞的基础上获得了双杂交瘤细胞，能够产生双特异性抗体，该抗体可以同时结合两种抗原。抗体由两条重链和两条轻链组成，重链和轻链均分为恒定区和可变区，两条重链依赖于A1或B1进行组装（A1与B1相同），重链与轻链的组装依赖于恒定区A2、a或B2、b（a与b相同），如图1。因此双杂交瘤细胞产生的抗体种类较多，其中有一种抗体能同时与抗原α与β结合称为双特异性抗体，如图2。下列叙述错误的是（ ）
A．科研人员将抗原α、β分别注射到小鼠体内引起体液免疫，分泌相应抗体
B．制备杂交瘤细胞时，需要多次筛选得到两种杂交瘤细胞
C．诱导动物细胞融合的常用方法有PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等
D．图2中若1是A2，则2、3、4、5、6分别对应a、B2、b、α、β
7．2017年中国科学家利用“聪明的化学方法和操作技巧（10s内去核，15s内核移植）”成功培育了体细胞克隆猴，流程如下，下列叙述错误的是（ ）
A．科学家多年的反复实验带来的娴熟技术使卵细胞受损减少
B．核移植前用“灭活病毒短暂处理”主要目的是诱导细胞融合
C．上述技术有助于加速针对阿尔茨海默病、免疫缺陷、肿瘤等的新药研发进程
D．“聪明的化学方法”主要指图中①②，通过调节组蛋白修饰而抑制基因表达
8．近年来由于栖息地丧失和人为捕猎，亚洲黑熊数量骤减，近日动物学家在某林地发现了少量野生亚洲黑熊。他们期望通过体内授精、胚胎移植等方法拯救亚洲黑熊，其过程如下图。以下说法正确的是（ ）
A．胚胎工程一般采用促性腺激素释放激素处理A使其超数排卵
B．A超数排卵排出的细胞必须生长到MII期才能与C的获能后的精子发生受精
C．D受体雌性必须和动物园亚洲黑熊♀A、野生亚洲黑熊♀B同期发情处理
D．E后代遗传性状与A和C一致，F后代遗传性状与B一致
9．目前发现的双胞胎有同卵双胞胎、异卵双胞胎和“半同卵双胞胎”。1对“半同卵小姐弟双胞胎”形成过程如图所示，染色体全部来自父系的“合子”致死。下列相关叙述错误的是（ ）
A．“半同卵双胞胎”的产生与透明带反应和卵细胞膜反应异常有关
B．细胞a的染色体组成为MP1,则细胞c的染色体组成为P1P1或MM
C．排卵是卵子从卵泡中排出的过程，图中卵子发育到减数分裂Ⅱ
D．这对小姐弟来源于母亲的染色体相同，来源于父亲的常染色体可能不同
10．6-磷酸葡萄糖脱氢酶（G-6PD）有F和S两种类型，分别由一对等位基因XF和XS编码。基因型为XFXS的女性体细胞中的两个X染色体，会有一个随机失活，且这个细胞的后代相应的X染色体均会发生同样的变化。将基因型为XFXS的女性皮肤组织用胰蛋白酶处理后先进行细胞的原代培养，再对不同的单细胞分别进行单克隆培养。分别对原代培养和单克隆培养的细胞进行G-6PD蛋白电泳检测，结果如下图所示。有关叙述错误的是（ ）。
A．原代培养的细胞中都含有XF基因和XS基因
B．单克隆培养的细胞1、2、4、5、8、9与3、6、7所含基因不同
C．原代培养细胞电泳图有2个条带是因为同时检测了多个细胞
D．用胰蛋白酶处理皮肤组织可使其分散成单个细胞
11．小鼠正常2细胞期胚胎经过电融合诱导形成四倍体胚胎，四倍体胚胎具有发育缺陷，只能发育形成胎盘等胚体以外的结构。ES细胞能够诱导分化形成所有的细胞类型，但很难分化形成胎盘。将ES细胞和四倍体胚胎聚合形成新的重构胚，可发育成完整小鼠个体，称为四倍体补偿技术。下列说法错误的是（ ）
A．通过四倍体补偿技术得到的小鼠个体的基因型与供体ES细胞的基因型不同
B．重构胚发育至桑葚胚或囊胚再移植到生理状态相同的小鼠子宫内才能发育成完整小鼠个体
C．重构胚中的ES细胞具有自我更新能力，但很难分化为胎盘等胚外组织
D．利用四倍体补偿技术，可将ES细胞经过体外遗传学修饰，得到经过人为修饰的目的小鼠
12．由于受到逆境胁迫影响，大豆的品质和产量往往难以满足人们的需求。科研人员以大豆子叶节的腋生分生组织为受体材料，用携带抗细菌基因载体的农杆菌侵染受体材料，获得独立的抗菌丛生芽，然后进一步培养为转基因抗菌株系。下列叙述错误的是（ ）
A．与叶肉细胞相比，用大豆子叶节的腋生分生组织进行植物组织培养更容易成功
B．农杆菌侵染受体材料时会将带有抗菌基因的T-DNA插入到受体材料的基因组中
C．需要用能杀死对应细菌的抗生素进行筛选来获得独立的抗菌丛生芽
D．获得独立的抗菌丛生芽需要注意培养基中生长素和细胞分裂素的浓度及比例
13．某同学利用洋葱为实验材料，进行DNA粗提取和鉴定实验。下列有关叙述错误的是（ ）
A．该同学也可选择鸡血、猪肝等动物细胞为实验材料提取DNA，但方法可能有所不同
B．向含有DNA的粗提取液中加入体积分数为95%的冷酒精后，出现的白色丝状物为DNA
C．将洋葱切碎加研磨液研磨、过滤后，滤液放置4℃冰箱中静置几分钟后，DNA存在于沉淀物中
D．鉴定DNA时，需先将DNA溶解在2ml/L NaCl溶液，再加入二苯胺试剂并进行沸水浴加热
14．人类r基因启动子上游的调控序列中含有BCL11A蛋白结合位点，该位点结合BCL11A蛋白后，r基因的表达被抑制。通过改变该结合位点的序列，解除对基因表达的抑制，可对某种地中海贫血症进行基因治疗。科研人员扩增了r基因上游不同长度的片段(Fn与R)，将这些片段分别插入表达载体中进行转化和荧光检测，以确定BCL11A蛋白结合位点的具体位置。相关信息如图所示。下列有关叙述错误的是（ ）
A．为将扩增后的产物定向插入载体，指导荧光蛋白基因表达，需用Munl和Xhl处理载体
B．从产物扩增到载体构建完成的整个过程需构建7种载体
C．将构建的载体导入去除BCL11A基因的受体细胞，可能出现含F1与R扩增产物的受体细胞无荧光，而含F2-F7与R扩增产物的受体细胞有荧光
D．向培养液中添加适量的雌激素，可导致部分受体细胞不再有荧光
15．脱氧核苷三磷酸(dNTP)和双脱氧核苷三磷酸(ddNTP，ddN-Pα~Pβ~Pγ)的结构均与核苷三磷酸(NTP)类似，其中dNTP核糖的第2位碳原子上的羟基(—OH)被氢原子取代而ddNTP核糖第2位和第3位碳原子上的羟基均被氢原子取代。DNA复制时，ddNTP可以与dNTP竞争核苷酸链延长位点，并终止DNA片段的延伸。现有一些序列为5’—GCCTAAGATCGTA—3’的DNA分子单链片段，拟通过PCR获得被32P标记且以碱基“A”为末端(3’为碱基A)、不同长度的子链DNA。在反应管中加入单链模板、引物、底物、TaqDNA聚合酶及缓冲溶液。下列叙述正确的是（ ）
A．ddNTP与dNTP竞争的延长位点是脱氧核苷酸链的5’末端
B．反应底物是dCTP、dGTP、dTTP和γ位32P标记的ddATP
C．实验结束后最多可得到3种被32P标记的子链DNA
D．TaqDNA聚合酶在PCR中的作用是形成氢键和磷酸二酯键
16．CRISPR/Cas9基因编辑技术根据靶基因序列设计单链向导sgRNA，精确引导核酸酶Cas9切割与sgRNA配对的DNA，相关酶在修复断裂DNA的过程中会改变连接部位的碱基序列。科研人员通过删除编码PD-1蛋白基因的2、3、4片段造成蛋白质的功能缺失，制作PD-1基因敲除鼠的流程如图1所示。将体外转录获得的 Cas9mRNA和sgRNA 导入小鼠的受精卵中，获得了12只基因编辑小鼠。利用PCR鉴定小鼠的基因型，电泳结果如图2所示。已知P1和P2是PCR的引物。下列相关分析正确的是（ ）
A．敲除2、3、4片段引起的变异属于染色体变异
B．敲除前，根据敲除的位置需要设计3个sgRNA
C．图2中，4和12个体杂交的子代均为敲除纯合子
D．图2中，3、5、7个体的体内均能检测到PD-1
17．图为构建苘麻抗除草剂基因A重组质粒的技术流程，其中NptⅡ是卡那霉素抗性基因，GUS基因仅在真核细胞中表达，表达产物可催化底物呈蓝色。下列说法错误的是（ ）
A．PCR扩增A时可在引物中加入PstI和XhI的酶切位点
B．在培养基中添加卡那霉素初步筛选导入重组质粒的农杆菌
C．用农杆菌转化植物愈伤组织时选择呈现蓝色的农杆菌与植物进行培养
D．启动子若为除草剂诱导启动子将减少细胞物质和能量浪费
18．让羊产牛奶，科学家对此做了相关的构想，过程如下图所示。请据图判断，下列说法正确的是（ ）
A．图中涉及的现代生物技术有动物细胞核移植、胚胎移植、胚胎分割和动物细胞融合等
B．小羊a、小羊b、小羊c的性状表现不同，小羊a与羊N的性状表现相同
C．依据目前的生物技术和理论，还不能通过生物工程手段获得新物种“羊-牛”状
D．若研究发现羊N产奶率高是因为细胞中线粒体基因的表达产物丰富，则小羊a会有这一优良性
19．蛋白质工程是研究蛋白质结构和功能的重要手段，下列关于蛋白质工程的叙述，正确的是（ ）
A．蛋白质工程中可以不用构建基因表达载体
B．通过蛋白质工程改造后获得的性状不能遗传给后代
C．蛋白质工程是在分子水平上对蛋白质分子直接进行操作
D．蛋白质工程可以通过增加酶内部二硫键数目提高酶的热稳定性
20．关于现代生物技术的应用及其安全性与伦理问题，以下叙述正确的是（ ）
A．转基因食品千万不能吃，吃了会导致性早熟
B．反对设计试管婴儿的原因之一是有人滥用此技术设计婴儿性别
C．为了国家的安全，可以进行必要的小范围的生物武器研究
D．试管牛所采用的技术中包含体外受精、胚胎移植和克隆技术
二、非选择题
21．大量农作物的秸秆及其附属物的焚烧，曾经一度成为人们的热门话题。有的人认为，秸秆焚烧省时省力，焚烧后的灰烬可以肥田；有的人认为，秸秆焚烧产生的烟雾对环境有害，也易引发火灾；有的人认为，可以利用现代生物技术处理农作物秸秆及其附属物，以获得更大的经济效益和社会效益。请回答下列问题。
(1)分离土壤中的纤维素分解菌的培养基的特点是 。
(2)为了获得纤维素分解菌，可以把滤纸埋在土壤中，经过一段时间后，再从腐烂的滤纸上筛选纤维素分解菌。原因是 。
(3)玉米棒脱粒后的玉米芯含较多的木聚糖，为了得到使木聚糖转化为木寡糖等高附加值低聚糖的性状优良的菌种，可以从土壤中直接筛选，也可以通过 （两种方法）获得。从土壤中获得目的菌后，进一步纯化目的菌以获得单个菌落。菌落的定义是 。
(4)为了获得更多的发酵产品，可对发酵过程中的 （至少答两点）等条件进行监测和控制。
(5)培养大肠杆菌可以用稀释涂布平板法进行接种，该方法可以用来计数的原理为 。
(6)以下过程中所利用的主要微生物的细胞结构与大肠杆菌较相似的有________________。
A．制作果酒B．由果酒制作果醋C．制作泡菜D．制作腐乳
22．人参和西洋参是五加科人参属的药用植物，它们含有的人参皂苷具有抗肿瘤等作用。科研人员选用人参和西洋参有性杂交获得的杂种胚细胞以及人参种子胚、西洋参种子胚的愈伤组织进行悬浮细胞培养，建立其单细胞株系并对三者的部分特性进行比较研究，下图1是主要流程：
(1)过程④优化悬浮细胞培养体系，最重要的条件是蔗糖浓度的筛选，蔗糖浓度过低和过高均不利于悬浮细胞的培养，原因是 。
(2)科研人员研究了三种愈伤组织中的人参皂苷Re、Rg3、Rb1和M-Rb1含量，结果见图2，其中Re具有治疗心肌缺血的功能，Rg3具有抗癌作用。若要获得具有抗癌作用的药物应优先选择 。
(3)科研人员继续研究了Rg3和常见的化疗药物5-FU对肿瘤的抑制效果：
①首先培养胃癌细胞，培养液中加入胎牛血清的目的是 。培养条件中5%CO2的作用是 ，温度为37℃。每只裸鼠接种0.1mL胃癌细胞悬浊液，接种后2周可见背部长出肿块，证明接种成功。
②将上述40只裸鼠随机分为四组，生理盐水组对照组、5-FU组、Rg3组和5-FU+Rg3组（联合给药组）。各组均采用腹腔注射给药，给药前测定肿瘤的体积，给药后每2日测量1次肿瘤体积。请根据图3写出计算肿瘤体积变化的公式： 。根据实验结果可以得出的结论有 。
23．胚胎工程具有多方面的应用，通过该技术可充分发挥优良雌性个体的繁殖潜力；如图为体外受精和胚胎移植技术繁殖奶牛过程，据图回答下列问题：
(1)受精的标志是 。
(2) 胚胎干细胞存在于 中，它的功能特点是 ；图中①处细胞名称是 ，也可从 ① 分离胚胎干细胞，若对该时期的胚胎进行分割需要注意 ，这样做的目的是 。
(3)为了提高牛奶厂产量，一般取 中的细胞进行牛胚胎性别鉴定，选择 性胚胎进行培育。
(4)对接受胚胎的个体需要选择 个体作为受体，在移植前要经过 。
24．氨基酸定点突变分析是研究蛋白质的结构和功能、酶催化机理以及对基因表达产物进行定向改造的重要技术。在基因内部引入点突变，是获得氨基酸定点突变的主要方式。下图是利用PCR介导的定点突变技术的原理图，其中三个引物分别为F1（5'—GGAATTCCATATGAGGATCCTCTTTC—3'）（GAATTC为EcRI识别位点，并切割G和A之间的磷酸二酯键，CATATG为NdeI的识别序列，并切割C和A之间的磷酸二酯键）、F2（5'—TGGGACGACTTCGCCTCGACCATGC—3'）（黑体GA为突变碱基）和R2（5'-CCCCCCGGGGGCGGCCAGCCGCTC—3'）（CCCGGG为SmaI的识别序列，并切割C和G之间的磷酸二酯键），野生型基因已连接在质粒PIK340上，且序列已知。
(1)第2轮PCR是在第1轮PCR的反应体系中进行的，虽然只加入了F1引物，但仍能得到突变基因的原因是 ，得到的突变基因与pT7Blue质粒连接时需用的酶是 。（填“E．cliDNA连接酶”或“T4DNA连接酶”）
(2)在IPTG和X-gal存在的条件下，Laz基因表达后，产生蓝色物质，否则为白色。据图分析，在固体培养基上添加IPTG和X-gal后，形成的白色菌落不一定是成功导入克隆载体的大肠杆菌，理由是 。若要选出成功导入克隆载体的大肠杆菌，还应在培养基中加入 。
(3)为验证白色菌落中是否成功导入克隆载体，用EcRI和SmaI双酶切提取的DNA进行琼脂糖凝胶电泳，结果如下图
①据左图分析，该突变基因的长度大约为 。
②为验证2～8号样品中是否发生了预期突变，随机抽取四组进行测序，并与野生型基因进行对比，结果如下图，该结果说明 。
(4)若该突变基因成功表达，则可获得氨基酸定点突变的蛋白质，该工程与基因工程的区别是 25．干扰素是一种糖蛋白，过去从人的血液中的白细胞中提取，产量很低。我国的科研人员侯云德院士等一批人，成功运用基因工程技术提高了其产量，如图为其原理过程图。请据图回答下面的问题：
(1)图中①过程叫做 。
(2)图中③物质能作为载体，必须具备的特点是 （写出任两点）。
(3)切割②和③过程所需的酶一般是相同的，其原因是 。
(4)该过程中离子有特殊的作用，例如PCR扩增目的基因时，DNA聚合酶需要 激活。导入受体细胞时，大肠杆菌用Ca+处理的目的是 。
(5) 人的干扰素基因能在大肠杆菌内表达，其根本原因是 。2023-2024学年度高中生物期中考试卷参考答案
1-5 BBDDD 6-10 DDBBB 11-15 ACCCC 16-20 CCCDB
21．（14分）
(1)以纤维素为唯一碳源（2分）
(2)滤纸富含纤维素，腐烂的滤纸上可能密布纤维素分解菌 （2分）
(3)诱变育种和基因工程育种（2分） 固体培养基上由微生物繁殖形成肉眼可见的子细胞群体（2分）
(4)温度、pH、溶解氧、罐压、通气量、搅拌、泡沫和营养（答出两点即可） （2分）
(5)当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个单菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。（2分）
(6) BC（全选对得2分，其余不得分）
22．（10分）
(1)蔗糖浓度过低不能给细胞提供足够的碳源和能源，过高会造成渗透压过高细胞失水死亡（2分）
(2)人参（的愈伤组织）（2分）
(3) ①补充未知的营养物质 （1分） 维持培养液的pH （1分） ②给药后肿瘤体积/给药前肿瘤的体积（2分） 5-FU和Rg3均能抑制肿瘤生长；5-FU和Rg3联合给药效果更好 （2分）
23．（12分）
(1) 观察到两个极体或雌、雄原核（2分）
(2) 早期胚胎（1分）
具有分化为成年动物体内任何一种类型的细胞，并进一步形成机体所有组织和器官甚至个体的潜能（2分）
内细胞团（1分） 将内细胞团均等分割 （1分） 避免影响胚胎的分裂和进一步发育（1分）
(3) 滋养层（1分） 雌（1分）
(4) 同种的生理状态相同的雌性（1分） 同期发情处理（1分）
24．（14分）
(1)引物1和含有突变位点的片段可以作为一对引物进行PCR （2分） T4DNA连接酶（2分）
(2)大肠杆菌细胞内没有Laz基因（2分） 氨苄青霉素（2分）
(3)1.13kb（2分） 2～8号样品中发生了预期突变（2分）
(4)可以生产自然界中不存在的蛋白质（2分）
25．（10分）
(1)提取目的基因 （1分）
(2)具有限制酶切割位点；在细胞中能够自主复制；有特殊的标记基因等（写出两点即可）（2分）
(3)为了产生相同的黏性末端（2分）
(4)Mg2+ （1分）使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态（使细胞处于感受态）（2分）
(5)它们共用一套遗传密码（2分）
1．绍兴是黄酒之乡，“麦曲酶长，酵米复芳；白梅酒酿，伴淋寒香；压滤琼浆，煎煮陈藏”是对绍兴黄酒精致复杂酿造工艺的描述。在黄酒的主发酵过程中，“开耙”（搅拌）是极为关键的一步。下列相关叙述错误的是（ ）
A．接种麦曲有利于淀粉的糖化，有利于“酒酿”菌种发酵
B．煎煮的目的是除去发酵产品中的杂菌，利于酵母菌繁殖
C．陈藏有利于黄酒中物质充分混合，使酒更加芳香
D．发酵过程中“开耙”可适当提供O2，调节pH，活化酵母
2．某人利用乳酸菌制作泡菜，因操作不当导致泡菜腐烂，其原因可能是（ ）
①密闭缺氧的环境抑制了乳酸菌的生长繁殖
②密封不严，氧气抑制了乳酸菌的生长繁殖
③密封不严，氧气抑制了其他厌氧微生物的生长繁殖
④密封不严，氧气促进了好氧微生物的生长繁殖
A．①③B．②④C．②③D．①④
3．组织培养可快速繁殖植物，得到的试管苗常先移至草炭土或蛭石中炼苗，苗健壮后可移栽定植。关于菊花的组织培养及幼苗的移栽，下列说法错误的是 （ ）
A．MS培养基的碳源一般用蔗糖而不用葡萄糖，以减少微生物污染
B．MS培养基、NAA溶液、6-BA溶液均可配制成母液，以减少称量的误差
C．接种时用镊子夹取菊花茎段，注意茎段的形态学上下端，避免倒插
D．培养时一般先诱导愈伤组织生根再诱导其生芽
4．60C辐射可使部分花粉活力降低， 通过受精过程可诱导卵细胞发育成单倍体幼胚。科研人员利用此原理， 通过下图所示操作培养西葫芦优良品种。
下列相关叙述不正确的是（ ）
A．雌花套袋的目的是防止外来花粉的干扰
B．经②得到的部分幼苗体细胞染色体数目可能与④获得的品种相同
C．④处理可在有丝分裂前期抑制纺锤体的形成
D．③应挑选幼苗中叶片大、茎秆粗壮的个体即为单倍体
5．研究人员利用杏鲍菇(具有双核，AA) 和秀珍菇(具有单核，B) 进行体细胞杂交，以期培养食用菌新品种，流程如图。已知异源融合子因异源基因相混合而获得新的遗传特性，表现出对亲株的拮抗作用，能够在培养基上观察到一条拮抗带。融合后的菌丝，在进行细胞分裂时，会形成一个喙状结构，而单核菌丝不会。
注：高温灭活使原生质体AA仅能生存而无法繁殖。
下列叙述正确的是（ ）
A．步骤②中原生质体应在低渗溶液中进行培养并处理
B．促融后形成的融合菌株可能为AAAA、AAB、BB、AB
C．在培养基上可以观察到AA菌落、B菌落以及AAB菌落
D．若有喙状结构和无喙状结构同时出现在拮抗带，步骤③应选择有喙状结构的菌丝
6．科研人员在杂交瘤细胞的基础上获得了双杂交瘤细胞，能够产生双特异性抗体，该抗体可以同时结合两种抗原。抗体由两条重链和两条轻链组成，重链和轻链均分为恒定区和可变区，两条重链依赖于A1或B1进行组装（A1与B1相同），重链与轻链的组装依赖于恒定区A2、a或B2、b（a与b相同），如图1。因此双杂交瘤细胞产生的抗体种类较多，其中有一种抗体能同时与抗原α与β结合称为双特异性抗体，如图2。下列叙述错误的是（ ）
A．科研人员将抗原α、β分别注射到小鼠体内引起体液免疫，分泌相应抗体
B．制备杂交瘤细胞时，需要多次筛选得到两种杂交瘤细胞
C．诱导动物细胞融合的常用方法有PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等
D．图2中若1是A2，则2、3、4、5、6分别对应a、B2、b、α、β
7．2017年中国科学家利用“聪明的化学方法和操作技巧（10s内去核，15s内核移植）”成功培育了体细胞克隆猴，流程如下，下列叙述错误的是（ ）
A．科学家多年的反复实验带来的娴熟技术使卵细胞受损减少
B．核移植前用“灭活病毒短暂处理”主要目的是诱导细胞融合
C．上述技术有助于加速针对阿尔茨海默病、免疫缺陷、肿瘤等的新药研发进程
D．“聪明的化学方法”主要指图中①②，通过调节组蛋白修饰而抑制基因表达
8．近年来由于栖息地丧失和人为捕猎，亚洲黑熊数量骤减，近日动物学家在某林地发现了少量野生亚洲黑熊。他们期望通过体内授精、胚胎移植等方法拯救亚洲黑熊，其过程如下图。以下说法正确的是（ ）
A．胚胎工程一般采用促性腺激素释放激素处理A使其超数排卵
B．A超数排卵排出的细胞必须生长到MII期才能与C的获能后的精子发生受精
C．D受体雌性必须和动物园亚洲黑熊♀A、野生亚洲黑熊♀B同期发情处理
D．E后代遗传性状与A和C一致，F后代遗传性状与B一致
9．目前发现的双胞胎有同卵双胞胎、异卵双胞胎和“半同卵双胞胎”。1对“半同卵小姐弟双胞胎”形成过程如图所示，染色体全部来自父系的“合子”致死。下列相关叙述错误的是（ ）
A．“半同卵双胞胎”的产生与透明带反应和卵细胞膜反应异常有关
B．细胞a的染色体组成为MP1,则细胞c的染色体组成为P1P1或MM
C．排卵是卵子从卵泡中排出的过程，图中卵子发育到减数分裂Ⅱ
D．这对小姐弟来源于母亲的染色体相同，来源于父亲的常染色体可能不同
10．6-磷酸葡萄糖脱氢酶（G-6PD）有F和S两种类型，分别由一对等位基因XF和XS编码。基因型为XFXS的女性体细胞中的两个X染色体，会有一个随机失活，且这个细胞的后代相应的X染色体均会发生同样的变化。将基因型为XFXS的女性皮肤组织用胰蛋白酶处理后先进行细胞的原代培养，再对不同的单细胞分别进行单克隆培养。分别对原代培养和单克隆培养的细胞进行G-6PD蛋白电泳检测，结果如下图所示。有关叙述错误的是（ ）。
A．原代培养的细胞中都含有XF基因和XS基因
B．单克隆培养的细胞1、2、4、5、8、9与3、6、7所含基因不同
C．原代培养细胞电泳图有2个条带是因为同时检测了多个细胞
D．用胰蛋白酶处理皮肤组织可使其分散成单个细胞
11．小鼠正常2细胞期胚胎经过电融合诱导形成四倍体胚胎，四倍体胚胎具有发育缺陷，只能发育形成胎盘等胚体以外的结构。ES细胞能够诱导分化形成所有的细胞类型，但很难分化形成胎盘。将ES细胞和四倍体胚胎聚合形成新的重构胚，可发育成完整小鼠个体，称为四倍体补偿技术。下列说法错误的是（ ）
A．通过四倍体补偿技术得到的小鼠个体的基因型与供体ES细胞的基因型不同
B．重构胚发育至桑葚胚或囊胚再移植到生理状态相同的小鼠子宫内才能发育成完整小鼠个体
C．重构胚中的ES细胞具有自我更新能力，但很难分化为胎盘等胚外组织
D．利用四倍体补偿技术，可将ES细胞经过体外遗传学修饰，得到经过人为修饰的目的小鼠
12．由于受到逆境胁迫影响，大豆的品质和产量往往难以满足人们的需求。科研人员以大豆子叶节的腋生分生组织为受体材料，用携带抗细菌基因载体的农杆菌侵染受体材料，获得独立的抗菌丛生芽，然后进一步培养为转基因抗菌株系。下列叙述错误的是（ ）
A．与叶肉细胞相比，用大豆子叶节的腋生分生组织进行植物组织培养更容易成功
B．农杆菌侵染受体材料时会将带有抗菌基因的T-DNA插入到受体材料的基因组中
C．需要用能杀死对应细菌的抗生素进行筛选来获得独立的抗菌丛生芽
D．获得独立的抗菌丛生芽需要注意培养基中生长素和细胞分裂素的浓度及比例
13．某同学利用洋葱为实验材料，进行DNA粗提取和鉴定实验。下列有关叙述错误的是（ ）
A．该同学也可选择鸡血、猪肝等动物细胞为实验材料提取DNA，但方法可能有所不同
B．向含有DNA的粗提取液中加入体积分数为95%的冷酒精后，出现的白色丝状物为DNA
C．将洋葱切碎加研磨液研磨、过滤后，滤液放置4℃冰箱中静置几分钟后，DNA存在于沉淀物中
D．鉴定DNA时，需先将DNA溶解在2ml/L NaCl溶液，再加入二苯胺试剂并进行沸水浴加热
14．人类r基因启动子上游的调控序列中含有BCL11A蛋白结合位点，该位点结合BCL11A蛋白后，r基因的表达被抑制。通过改变该结合位点的序列，解除对基因表达的抑制，可对某种地中海贫血症进行基因治疗。科研人员扩增了r基因上游不同长度的片段(Fn与R)，将这些片段分别插入表达载体中进行转化和荧光检测，以确定BCL11A蛋白结合位点的具体位置。相关信息如图所示。下列有关叙述错误的是（ ）
A．为将扩增后的产物定向插入载体，指导荧光蛋白基因表达，需用Munl和Xhl处理载体
B．从产物扩增到载体构建完成的整个过程需构建7种载体
C．将构建的载体导入去除BCL11A基因的受体细胞，可能出现含F1与R扩增产物的受体细胞无荧光，而含F2-F7与R扩增产物的受体细胞有荧光
D．向培养液中添加适量的雌激素，可导致部分受体细胞不再有荧光
15．脱氧核苷三磷酸(dNTP)和双脱氧核苷三磷酸(ddNTP，ddN-Pα~Pβ~Pγ)的结构均与核苷三磷酸(NTP)类似，其中dNTP核糖的第2位碳原子上的羟基(—OH)被氢原子取代而ddNTP核糖第2位和第3位碳原子上的羟基均被氢原子取代。DNA复制时，ddNTP可以与dNTP竞争核苷酸链延长位点，并终止DNA片段的延伸。现有一些序列为5’—GCCTAAGATCGTA—3’的DNA分子单链片段，拟通过PCR获得被32P标记且以碱基“A”为末端(3’为碱基A)、不同长度的子链DNA。在反应管中加入单链模板、引物、底物、TaqDNA聚合酶及缓冲溶液。下列叙述正确的是（ ）
A．ddNTP与dNTP竞争的延长位点是脱氧核苷酸链的5’末端
B．反应底物是dCTP、dGTP、dTTP和γ位32P标记的ddATP
C．实验结束后最多可得到3种被32P标记的子链DNA
D．TaqDNA聚合酶在PCR中的作用是形成氢键和磷酸二酯键
16．CRISPR/Cas9基因编辑技术根据靶基因序列设计单链向导sgRNA，精确引导核酸酶Cas9切割与sgRNA配对的DNA，相关酶在修复断裂DNA的过程中会改变连接部位的碱基序列。科研人员通过删除编码PD-1蛋白基因的2、3、4片段造成蛋白质的功能缺失，制作PD-1基因敲除鼠的流程如图1所示。将体外转录获得的 Cas9mRNA和sgRNA 导入小鼠的受精卵中，获得了12只基因编辑小鼠。利用PCR鉴定小鼠的基因型，电泳结果如图2所示。已知P1和P2是PCR的引物。下列相关分析正确的是（ ）
A．敲除2、3、4片段引起的变异属于染色体变异
B．敲除前，根据敲除的位置需要设计3个sgRNA
C．图2中，4和12个体杂交的子代均为敲除纯合子
D．图2中，3、5、7个体的体内均能检测到PD-1
17．图为构建苘麻抗除草剂基因A重组质粒的技术流程，其中NptⅡ是卡那霉素抗性基因，GUS基因仅在真核细胞中表达，表达产物可催化底物呈蓝色。下列说法错误的是（ ）
A．PCR扩增A时可在引物中加入PstI和XhI的酶切位点
B．在培养基中添加卡那霉素初步筛选导入重组质粒的农杆菌
C．用农杆菌转化植物愈伤组织时选择呈现蓝色的农杆菌与植物进行培养
D．启动子若为除草剂诱导启动子将减少细胞物质和能量浪费
18．让羊产牛奶，科学家对此做了相关的构想，过程如下图所示。请据图判断，下列说法正确的是（ ）
A．图中涉及的现代生物技术有动物细胞核移植、胚胎移植、胚胎分割和动物细胞融合等
B．小羊a、小羊b、小羊c的性状表现不同，小羊a与羊N的性状表现相同
C．依据目前的生物技术和理论，还不能通过生物工程手段获得新物种“羊-牛”状
D．若研究发现羊N产奶率高是因为细胞中线粒体基因的表达产物丰富，则小羊a会有这一优良性
19．蛋白质工程是研究蛋白质结构和功能的重要手段，下列关于蛋白质工程的叙述，正确的是（ ）
A．蛋白质工程中可以不用构建基因表达载体
B．通过蛋白质工程改造后获得的性状不能遗传给后代
C．蛋白质工程是在分子水平上对蛋白质分子直接进行操作
D．蛋白质工程可以通过增加酶内部二硫键数目提高酶的热稳定性
20．关于现代生物技术的应用及其安全性与伦理问题，以下叙述正确的是（ ）
A．转基因食品千万不能吃，吃了会导致性早熟
B．反对设计试管婴儿的原因之一是有人滥用此技术设计婴儿性别
C．为了国家的安全，可以进行必要的小范围的生物武器研究
D．试管牛所采用的技术中包含体外受精、胚胎移植和克隆技术
二、非选择题
21．大量农作物的秸秆及其附属物的焚烧，曾经一度成为人们的热门话题。有的人认为，秸秆焚烧省时省力，焚烧后的灰烬可以肥田；有的人认为，秸秆焚烧产生的烟雾对环境有害，也易引发火灾；有的人认为，可以利用现代生物技术处理农作物秸秆及其附属物，以获得更大的经济效益和社会效益。请回答下列问题。
(1)分离土壤中的纤维素分解菌的培养基的特点是 。
(2)为了获得纤维素分解菌，可以把滤纸埋在土壤中，经过一段时间后，再从腐烂的滤纸上筛选纤维素分解菌。原因是 。
(3)玉米棒脱粒后的玉米芯含较多的木聚糖，为了得到使木聚糖转化为木寡糖等高附加值低聚糖的性状优良的菌种，可以从土壤中直接筛选，也可以通过 （两种方法）获得。从土壤中获得目的菌后，进一步纯化目的菌以获得单个菌落。菌落的定义是 。
(4)为了获得更多的发酵产品，可对发酵过程中的 （至少答两点）等条件进行监测和控制。
(5)培养大肠杆菌可以用稀释涂布平板法进行接种，该方法可以用来计数的原理为 。
(6)以下过程中所利用的主要微生物的细胞结构与大肠杆菌较相似的有________________。
A．制作果酒B．由果酒制作果醋C．制作泡菜D．制作腐乳
22．人参和西洋参是五加科人参属的药用植物，它们含有的人参皂苷具有抗肿瘤等作用。科研人员选用人参和西洋参有性杂交获得的杂种胚细胞以及人参种子胚、西洋参种子胚的愈伤组织进行悬浮细胞培养，建立其单细胞株系并对三者的部分特性进行比较研究，下图1是主要流程：
(1)过程④优化悬浮细胞培养体系，最重要的条件是蔗糖浓度的筛选，蔗糖浓度过低和过高均不利于悬浮细胞的培养，原因是 。
(2)科研人员研究了三种愈伤组织中的人参皂苷Re、Rg3、Rb1和M-Rb1含量，结果见图2，其中Re具有治疗心肌缺血的功能，Rg3具有抗癌作用。若要获得具有抗癌作用的药物应优先选择 。
(3)科研人员继续研究了Rg3和常见的化疗药物5-FU对肿瘤的抑制效果：
①首先培养胃癌细胞，培养液中加入胎牛血清的目的是 。培养条件中5%CO2的作用是 ，温度为37℃。每只裸鼠接种0.1mL胃癌细胞悬浊液，接种后2周可见背部长出肿块，证明接种成功。
②将上述40只裸鼠随机分为四组，生理盐水组对照组、5-FU组、Rg3组和5-FU+Rg3组（联合给药组）。各组均采用腹腔注射给药，给药前测定肿瘤的体积，给药后每2日测量1次肿瘤体积。请根据图3写出计算肿瘤体积变化的公式： 。根据实验结果可以得出的结论有 。
23．胚胎工程具有多方面的应用，通过该技术可充分发挥优良雌性个体的繁殖潜力；如图为体外受精和胚胎移植技术繁殖奶牛过程，据图回答下列问题：
(1)受精的标志是 。
(2) 胚胎干细胞存在于 中，它的功能特点是 ；图中①处细胞名称是 ，也可从 ① 分离胚胎干细胞，若对该时期的胚胎进行分割需要注意 ，这样做的目的是 。
(3)为了提高牛奶厂产量，一般取 中的细胞进行牛胚胎性别鉴定，选择 性胚胎进行培育。
(4)对接受胚胎的个体需要选择 个体作为受体，在移植前要经过 。
24．氨基酸定点突变分析是研究蛋白质的结构和功能、酶催化机理以及对基因表达产物进行定向改造的重要技术。在基因内部引入点突变，是获得氨基酸定点突变的主要方式。下图是利用PCR介导的定点突变技术的原理图，其中三个引物分别为F1（5'—GGAATTCCATATGAGGATCCTCTTTC—3'）（GAATTC为EcRI识别位点，并切割G和A之间的磷酸二酯键，CATATG为NdeI的识别序列，并切割C和A之间的磷酸二酯键）、F2（5'—TGGGACGACTTCGCCTCGACCATGC—3'）（黑体GA为突变碱基）和R2（5'-CCCCCCGGGGGCGGCCAGCCGCTC—3'）（CCCGGG为SmaI的识别序列，并切割C和G之间的磷酸二酯键），野生型基因已连接在质粒PIK340上，且序列已知。
(1)第2轮PCR是在第1轮PCR的反应体系中进行的，虽然只加入了F1引物，但仍能得到突变基因的原因是 ，得到的突变基因与pT7Blue质粒连接时需用的酶是 。（填“E．cliDNA连接酶”或“T4DNA连接酶”）
(2)在IPTG和X-gal存在的条件下，Laz基因表达后，产生蓝色物质，否则为白色。据图分析，在固体培养基上添加IPTG和X-gal后，形成的白色菌落不一定是成功导入克隆载体的大肠杆菌，理由是 。若要选出成功导入克隆载体的大肠杆菌，还应在培养基中加入 。
(3)为验证白色菌落中是否成功导入克隆载体，用EcRI和SmaI双酶切提取的DNA进行琼脂糖凝胶电泳，结果如下图
①据左图分析，该突变基因的长度大约为 。
②为验证2～8号样品中是否发生了预期突变，随机抽取四组进行测序，并与野生型基因进行对比，结果如下图，该结果说明 。
(4)若该突变基因成功表达，则可获得氨基酸定点突变的蛋白质，该工程与基因工程的区别是 25．干扰素是一种糖蛋白，过去从人的血液中的白细胞中提取，产量很低。我国的科研人员侯云德院士等一批人，成功运用基因工程技术提高了其产量，如图为其原理过程图。请据图回答下面的问题：
(1)图中①过程叫做 。
(2)图中③物质能作为载体，必须具备的特点是 （写出任两点）。
(3)切割②和③过程所需的酶一般是相同的，其原因是 。
(4)该过程中离子有特殊的作用，例如PCR扩增目的基因时，DNA聚合酶需要 激活。导入受体细胞时，大肠杆菌用Ca+处理的目的是 。
(5) 人的干扰素基因能在大肠杆菌内表达，其根本原因是 。2023-2024学年度高中生物期中考试卷参考答案
1-5 BBDDD 6-10 DDBBB 11-15 ACCCC 16-20 CCCDB
21．（14分）
(1)以纤维素为唯一碳源（2分）
(2)滤纸富含纤维素，腐烂的滤纸上可能密布纤维素分解菌 （2分）
(3)诱变育种和基因工程育种（2分） 固体培养基上由微生物繁殖形成肉眼可见的子细胞群体（2分）
(4)温度、pH、溶解氧、罐压、通气量、搅拌、泡沫和营养（答出两点即可） （2分）
(5)当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个单菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。（2分）
(6) BC（全选对得2分，其余不得分）
22．（10分）
(1)蔗糖浓度过低不能给细胞提供足够的碳源和能源，过高会造成渗透压过高细胞失水死亡（2分）
(2)人参（的愈伤组织）（2分）
(3) ①补充未知的营养物质 （1分） 维持培养液的pH （1分） ②给药后肿瘤体积/给药前肿瘤的体积（2分） 5-FU和Rg3均能抑制肿瘤生长；5-FU和Rg3联合给药效果更好 （2分）
23．（12分）
(1) 观察到两个极体或雌、雄原核（2分）
(2) 早期胚胎（1分）
具有分化为成年动物体内任何一种类型的细胞，并进一步形成机体所有组织和器官甚至个体的潜能（2分）
内细胞团（1分） 将内细胞团均等分割 （1分） 避免影响胚胎的分裂和进一步发育（1分）
(3) 滋养层（1分） 雌（1分）
(4) 同种的生理状态相同的雌性（1分） 同期发情处理（1分）
24．（14分）
(1)引物1和含有突变位点的片段可以作为一对引物进行PCR （2分） T4DNA连接酶（2分）
(2)大肠杆菌细胞内没有Laz基因（2分） 氨苄青霉素（2分）
(3)1.13kb（2分） 2～8号样品中发生了预期突变（2分）
(4)可以生产自然界中不存在的蛋白质（2分）
25．（10分）
(1)提取目的基因 （1分）
(2)具有限制酶切割位点；在细胞中能够自主复制；有特殊的标记基因等（写出两点即可）（2分）
(3)为了产生相同的黏性末端（2分）
(4)Mg2+ （1分）使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态（使细胞处于感受态）（2分）
(5)它们共用一套遗传密码（2分）
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