（新人教版）新高考生物一轮复习精讲课件76 微生物的培养技术及应用（含答案）

这是一份（新人教版）新高考生物一轮复习精讲课件76 微生物的培养技术及应用（含答案），共42页。PPT课件主要包含了教学过程，概念图，课堂练习巩固，典型习题，规律总结，微生物的培养及应用，选择培养与计数，营养物质，生长繁殖，培养基的配制等内容，欢迎下载使用。

Teaching Prcess
2.课堂教 学内容
(1)概念：人们按照微生物对　　　　的不同需求，配制出供其________的营养基质。(2)用途：用以　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。
培养、分离、鉴定、保存微生物或积累其代谢物
一 . 微生物的培养技术及应用
(3)类型：按物理状态分类
合成蛋白质、核酸等物质
除了上述主要营养物质外，还需要满足微生物生长对_________________　　　　的需求。例如，在培养乳酸杆菌时，需要在培养基中添加_____ ；在培养霉菌时，一般需要将培养基调至　　；在培养细菌时，一般需要将培养基调至　　　　　　；在培养厌氧微生物时，需要提供_____的条件。
(1)目的：获得　　　　　　。(2)关键：　　　　　　。(3)区别：消毒与灭菌的比较
(3)区别：消毒与灭菌的比较
选择无菌技术的原则：一要考虑无菌技术的效果，灭菌的效果比消毒要好；二要考虑操作对象的承受能力，活体生物材料、操作者的手等只能采用消毒，而不能用灭菌。
(4)其他操作 ①做好消毒和灭菌工作后，要注意避免已经灭菌处理的材料用具与_____　　　接触。 ②为了避免周围环境中微生物的污染，接下来的许多操作都应在超净工作台上并在　　　　　附近进行。
　　教材隐性知识：源于选择性必修3 P10“相关信息”：生物消毒法是指利用生物或其　　　除去环境中的部分微生物的方法。
(2)酵母菌纯培养的操作步骤
湿热灭菌(高压蒸汽灭菌)法
请思考以下问题：①平板冷凝后，要将平板倒置的原因是什么？
答案　因为平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，平板倒置后，既可避免培养基表面的水分过快地挥发，又可防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。
②在接种前随机取若干个灭菌后的未接种的平板，先行培养了一段时间，这样做的目的是　　　　　　　　　　　　　　。
检测培养基平板灭菌是否合格
(3)平板划线法操作步骤
据图思考以下问题：①第二次及其以后的划线操作总是从上一次划线末端开始，这样做的目的是什么？
答案　能使微生物的数目随着划线次数的增加而逐渐减少，最终得到由单个微生物繁殖形成的纯培养物。
②操作第一步即取菌种之前及每次划线之前都需要进行火焰灼烧灭菌，划线操作结束时，仍需灼烧接种环，每次灼烧的目的填写下表：
杀死接种环上原有的微生物
杀死接种环上残存的菌种，避免微生物污染环境和感染操作者
③平板划线时最后一次划线为何不能与第一次划线相连？
答案　最后一次划线已经将酵母菌稀释成单个细胞，如果与第一次划线相连，则增加了酵母菌数目，得不到纯化的效果。
例1.请回答下列与大肠杆菌有关的问题：(1)下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方。
该培养基属于 (填“固体”或“液体”)培养基，该培养基中的氮源是 。(2)在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行　　(填“消毒”或“灭菌”)；操作者的双手需要进行清洗和　　。
(3)将配制好的培养基分装到试管中，加棉塞后若干支试管扎成一捆，包上牛皮纸并用皮筋勒紧放入　　　　　　　中灭菌，温度为121 ℃，时间为15～30 min。灭菌完毕拔掉电源，待锅内压力自然降到大气压时，将试管取出。(4)从一支试管向另一支试管接种时应注意，接种环要在酒精灯__________________(填“火焰的不充分燃烧层”或“火焰的充分燃烧层”)灭菌，并且待接种环　　 后蘸取菌种。
例2.(2022·山西高三适应考试)自然界里有多种微生物，将其进行合理的筛选、培养和应用，能给医药和化工等生产领域带来巨大经济效益。回答下列问题：(1)对培养基进行灭菌时，多采取 法，而对接种环或涂布器灭菌时则用 法，若要将微生物采用平板划线法进行分离操作，在固体培养基表面连续进行了5次划线，则需要对接种环灼烧 次。平板划线在做第二次及其以后的划线操作时，要从上次划线的 开始划线，最后一次划的线不能与第一次划的线 。
高压蒸汽灭菌(湿热灭菌)
(2)将接种后的固体培养基和一个未接种的固体培养基放入恒温箱中____培养，以减少培养基中水分的挥发。其中，培养未接种的固体培养基是为了 。
作为对照组，检验培养基是否被杂菌污染
1.区分选择培养基与鉴别培养基
二 . 微生物的选择培养和计数
常见选择培养基举例：①缺少氮源的培养基可以筛选能利用大气中N2的微生物。②含青霉素的培养基可淘汰细菌，筛选出真菌。③无有机碳源的培养基可筛选出自养微生物。
(1)稀释涂布平板法步骤 ①系列稀释操作：该操作常用在将细胞接种到培养基之前，通过液体稀释的方法分散细胞，随着稀释程度的增大，单位体积中的微生物细胞数量减少，细胞得以分散。操作步骤：
2.微生物的选择培养和数量测定
(1)稀释涂布平板法步骤 ②涂布平板操作步骤
(2)微生物的数量测定方法 ①显微镜直接计数法
②间接计数法——活菌计数法(即稀释涂布平板法)原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个单菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。
(2)微生物的数量测定方法
根据图示问答以下问题：Ⅰ.为了保证结果准确，一般选择菌落数在 的平板进行计数。Ⅱ.为什么用此种方法统计的菌落数目往往比活菌的实际数目低？
答案　因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。
Ⅲ.某同学在稀释倍数为106的培养基中测得平板上菌落数的平均值为234个(涂布平板时所用稀释液的体积为0.1 mL)，那么稀释倍数为106的试管中细菌的浓度是 个/mL，稀释倍数为10的锥形瓶中细菌的浓度为 个/mL，所以每克样品中的细菌数是 个。
3.土壤中分解尿素的细菌的分离与计数的实验操作
(3)实验结果分析与评价
对照的培养皿中无菌落生长
对照的培养皿中有菌落生长
　　教材隐性知识：选择性必修3 P19“探究·实践”：本活动初步筛选了能分解尿素的细菌，请进一步借助于生物化学的方法来鉴定所分离的菌种：_______________________________________________________________________________________________________________________________________________。
分解尿素的细菌合成的脲酶可以将尿素分解成氨，氨会使培养基的碱性增强，在培养基中加入酚红指示剂培养细菌，若指示剂变红，可确定该细菌能够分解尿素
例3.营养缺陷型菌株是野生型菌株经过人工诱变或自发突变失去合成某种成长因子的能力，只能在补充了相应的生长因子的基本培养基中才能正常生长的变异菌株。某研究小组对酵母菌用紫外线照射后将其接种到甲培养皿的培养基上，一段时间后将甲培养皿的菌落影印接种(不改变菌落位置)到乙、丙两培养皿的培养基中，进一步培养得到如下图所示结果。
下列分析正确的是( )A.接种到甲培养皿采用的是平板划线法B.甲、丙两培养皿中的培养基是基本培养基C.甲培养皿中菌落数有可能比接种的酵母菌数少D.甲、乙、丙三个培养皿都可能存在营养缺陷型菌落
总结：两种纯化方法的比较
例3.(2020·全国Ⅰ，37)某种物质S(一种含有C、H、N的有机物)难以降解，会对环境造成污染，只有某些细菌能降解S。研究人员按照下图所示流程从淤泥中分离得到能高效降解S的细菌菌株。实验过程中需要甲、乙两种培养基，甲的组分为无机盐、水和S，乙的组分为无机盐、水、S和Y。
回答下列问题：(1)实验时，盛有水或培养基的摇瓶通常采用 的方法进行灭菌。乙培养基中的Y物质是　　。甲、乙培养基均属于_____培养基。
(2)实验中初步估测摇瓶M中细菌细胞数为2×107个/mL，若要在每个平板上涂布100 μL稀释后的菌液，且保证每个平板上长出的菌落数不超过200个，则至少应将摇瓶M中的菌液稀释 倍。
(3)在步骤⑤的筛选过程中，发现当培养基中的S超过某一浓度时，某菌株对S的降解量反而下降，其原因可能是____________________________ (答出1点即可)。
S的浓度超过某一值时会抑制菌
(4)若要测定淤泥中能降解S的细菌细胞数，请写出主要实验步骤：_____________________________________________________________。
泥加入无菌水中，涂布(或稀释涂布)到乙培养基上，培养后计数
(5)上述实验中，甲、乙两种培养基所含有的组分虽然不同，但都能为细菌的生长提供4类营养物质，即 。
水、碳源、氮源和无机盐
例4.(2021·山东，14)解脂菌能利用分泌的脂肪酶将脂肪分解成甘油和脂肪酸并吸收利用。脂肪酸会使醇溶青琼脂平板变为深蓝色。将不能直接吸收脂肪的甲、乙两种菌分别等量接种在醇溶青琼脂平板上培养。甲菌菌落周围呈现深蓝色，乙菌菌落周围不变色，下列说法错误的是( )A.甲菌属于解脂菌B.实验中所用培养基以脂肪为唯一碳源C.可将两种菌分别接种在同一平板的不同区域进行对比D.该平板可用来比较解脂菌分泌脂肪酶的能力
例5.(2021·山东，20)含硫蛋白质在某些微生物的作用下产生硫化氢导致生活污水发臭。硫化氢可以与硫酸亚铁铵结合形成黑色沉淀。为探究发臭水体中甲、乙菌是否产生硫化氢及两种菌的运动能力，用穿刺接种的方法，分别将两种菌接种在含有硫酸亚铁铵的培养基上进行培养，如图所示。若两种菌繁殖速度相等，下列说法错误的是（ ）A.乙菌的运动能力比甲菌强B.为不影响菌的运动需选用液体培养基C.该实验不能比较出两种菌产生硫化氢的量D.穿刺接种等接种技术的核心是防止杂菌的污染
填空默写1.(选择性必修3 P10)培养基的化学成分包括　　　　　　　　　　　等。2.(选择性必修3 P10)获得纯净的微生物培养物的关键是　　　　　　，无菌技术除了用来　　　　　　　　　　　　　　　　　　　外，还能___　　　　　　　　　　　　　　。3.(选择性必修3 P12)菌落是指______________________________________　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。采用_____　　法和　　　　　　法能将单个微生物分散在固体培养基上，之后经培养得到的单菌落一般是由单个微生物繁殖形成的纯培养物。
水、无机盐、碳源、氮源
防止实验室的培养物被其他外来微生物污染
效避免操作者自身被微生物感染
分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内
部可以繁殖形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞群体
4.(选择性必修3 P16)选择培养基是指________________________________　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。5.(选择性必修3 P12)平板冷凝后，要将平板倒置的原因是_____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。
在微生物学中，将允许特定种类的微
生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基
盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以减少培养基中的水分过快地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染
6.(选择性必修3 P13)操作的第一步灼烧接种环是为了__________________　　　　　　　　　　；每次划线前灼烧接种环是为了_________________________________________________________________________________________________，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到单菌落。划线结束后灼烧接种环，能__________________________________________________________。7.(选择性必修3 P13)在灼烧接种环之后，要等其冷却后再进行划线的原因是　　　　　　　　　　　　　　　。
束后，接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端
接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者
以免接种环温度太高，杀死菌种