河南省洛阳市2023-2024学年高二下学期6月期末生物试卷（解析版）

这是一份河南省洛阳市2023-2024学年高二下学期6月期末生物试卷（解析版），共22页。试卷主要包含了考试结束后，将答题卡交回等内容，欢迎下载使用。
1．答卷前，考生务必将自己的姓名、考号填写在答题卡上。
2．考试结束后，将答题卡交回。
一、选择题：本题共25小题，每小题2分，共50分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。
1. 甲型流感病毒和肺炎支原体都是引发急性呼吸道传染病的常见病原体。下列关于这两种病原体的叙述错误的是（ ）
A. 两者的正常生命活动都离不开细胞
B. 两者的遗传物质都集中在拟核区域
C. 两者的蛋白质都是在核糖体中合成
D. 两者的生命活动都是靠能量驱动的
【答案】B
【分析】单细胞生物一个细胞就是一个个体，能完成相应的各种生命活动；多细胞生物由很多细胞组成，其生命活动依赖各种分化细胞；病毒不具有细胞结构，但寄生在宿主细胞中，利用宿主细胞中的物质生活和繁殖。
【详解】A、病毒需要寄生在宿主细胞中才能进行正常的生命活动，肺炎支原体是单细胞生物，两者的正常生命活动都离不开细胞，A正确；
B、病毒没有拟核区，B错误；
C、病毒的蛋白质在宿主细胞的核糖体上合成，肺炎支原体的蛋白质在自身的核糖体上合成，C正确；
D、无论是病毒还是细胞生物，生命活动都是靠能量驱动的，D正确。
故选B。
2. 组成细胞的各种元素大多以化合物的形式存在。下列相关叙述错误的是（ ）
A. 细胞中的水与蛋白质、多糖等物质结合，成为生物体的构成成分
B. 以碳链为骨架的生物大分子构成细胞生命大厦的基本框架
C. 人体内Na+缺乏会引起神经细胞的兴奋性升高
D. 蛋白质和DNA经高温处理均会变性，但后者可复性
【答案】C
【分析】碳元素具有4个共价键，易形成碳链，是构成细胞中所有有机化合物的基本骨架；糖类、蛋白质、核酸等有机化合物以碳链为骨架的有机化合物，构成细胞生命大厦的基本框架。
【详解】A、细胞中的水与蛋白质、多糖等物质结合，可以成为生物体的构成成分，A正确；
B、生物大分子以碳链为基本骨架，是构成细胞生命大厦的基本框架，B正确；
C、神经冲动的产生需要Na+内流，因此人体内Na+缺乏会引起神经细胞的兴奋性降低，C错误；
D、蛋白质和经高温处理均会变性（空间结构改变），这种改变是不可逆的，但DNA经高温处理变性是可复性的，D正确。
故选C。
3. 人们的生活离不开酶；酶为生活添姿彩。下列关于酶的说法错误的是（ ）
A. 溶菌酶能够溶解细菌的细胞壁，具有抗菌消炎的作用
B. 加酶洗衣粉中的酶是经过酶工程改造的，比一般的酶稳定性强
C. 在肉炒熟后加入以蛋白酶为主要成分的嫩肉粉，可使肉类口感鲜嫩
D. 果胶酶能分解果肉细胞壁中的果胶成分，提高果汁产量，使果汁变得清亮
【答案】C
【分析】酶是活细胞所产生的具有催化作用的有机物。
【详解】A、溶菌酶能够溶解细菌的细胞壁，具有抗菌消炎的作用，在临床上常与抗生素复合使用增强疗效，A正确；
B、加酶洗衣粉中的酶不是直接来自生物体的，而是经过酶工程改造的，稳定性强，所以具有更强的去污能力，B正确；
C、酶的活性易受温度影响，高温会使酶变性失活，因此最佳的使用方法应该是在室温下将嫩肉粉与肉片混匀，让蛋白酶促进蛋白质水解反应一段时间后，再炒熟，C错误；
D、植物细胞壁的成分是纤维素和果胶，果胶酶能分解果肉细胞壁中的果胶成分，提高果汁产量，使果汁变得清亮，D正确。
故选C。
4. 《中国居民膳食指南（2022）》提出的“控糖”建议是：控制添加糖的摄入量，每天摄入不超过50g，最好控制在25g以下。下列叙述正确的是（ ）
A. 蔗糖和果糖是日常生活中常见的两种单糖类食品甜味剂
B. 食物中天然存在的淀粉和纤维素不属于“控糖”的范畴
C. 人体内的糖类绝大多数以糖原的形式存在于内环境中
D. 摄糖超标引起的肥胖有一部分原因是脂肪无法转化成糖类
【答案】B
【分析】糖类分为单糖、二糖和多糖，二糖包括麦芽糖、蔗糖、乳糖，麦芽糖是由2分子葡萄糖形成的，蔗糖是由1分子葡萄糖和1分子果糖形成的，乳糖是由1分子葡萄糖和1分子半乳糖形成的；多糖包括淀粉、纤维素和糖原，淀粉是植物细胞的储能物质，糖原是动物细胞的储能物质，纤维素是植物细胞壁的组成成分。
【详解】A、蔗糖是由一分子果糖和一分子葡萄糖合成的，是二糖，不是单糖，A错误；
B、食物中天然存在的纤维素不能被利用，故不属于“控糖”的范畴，B正确；
C、生物体内的糖类大多数以多糖的形式存在，人体内的糖类绝大多数会以糖原的形式存在于肝脏或者肌肉，C错误；
D、摄糖超标引起的肥胖，并不是因为脂肪无法转化成糖，而是因为糖摄入过多导致过剩，多余的糖转化为脂肪，进而引起肥胖，D错误。
故选B。
5. 在真核细胞中，由细胞膜、核膜以及各种细胞器膜等共同构成生物膜系统。下列叙述正确的是（ ）
A. 动物细胞中的核膜、中心体膜和细胞膜都含有胆固醇
B. 有氧呼吸过程中，水的生成发生在线粒体外膜上
C. 高尔基体的膜成分可以转移到溶酶体膜和细胞膜上
D. 叶绿体内膜向内折叠形成的类囊体上分布着光合色素
【答案】C
【分析】细胞中具膜的细胞器有内质网、高尔基体、液泡、溶酶体、叶绿体、线粒体等，核糖体、中心体没有生物膜包被。
【详解】A、中心体没有膜，A错误；
B、有氧呼吸过程中，第三阶段生成水，故水的生成发生在线粒体内膜上，B错误；
C、溶酶体是由高尔基体断裂形成的，高尔基体的膜成分可以转移到溶酶体膜，分泌蛋白运输过程中，高尔基体膜可以转移到细胞膜上，C正确；
D、类囊体膜不属于叶绿体内膜，D错误。
故选C。
6. Na+-K+ATPase是细胞膜上一种具有ATP水解酶活性的载体蛋白，每水解一个ATP分子能逆浓度梯度泵出3个Na+、泵入2个K+。若利用Na+-K+ATPase的抑制剂（乌本苷）处理人成熟的红细胞，则细胞将会不断吸水膨胀，甚至破裂。下列分析正确的是（ ）
A. Na+-K+ATPase维持了细胞内低K+高Na+的离子环境
B. Na+-K+ATPase被磷酸化后，其空间结构和活性发生变化
C. 乌本苷影响Na+、K+的主动运输，使红细胞内渗透压低于细胞外
D. 水分子主要是借助细胞膜上的载体蛋白以协助扩散方式进入红细胞内
【答案】B
【分析】由题干信息：Na+ -K+ATPase 是细胞膜上一种具有 ATP 水解酶活性的载体蛋白，每水解一个ATP 分子能逆浓度梯度泵出 3 个 Na+、泵入 2 个 K+，可知细胞内K+高于细胞外，细胞外Na+高于细胞内。
物质出入细胞的方式有：自由扩散、协助扩散、主动转运、胞吞和胞吐。
【详解】A、题干信息Na+-K+ATPase是细胞膜上的载体蛋白，能逆着浓度梯度泵出3个Na+、泵入2个K+，由此可知Na+ -K+ATPase 维持了细胞内高K＋低 Na＋的离子环境，A错误；
B、Na+ -K+ATPase 磷酸化过程中发生空间结构的变化，其与Na+、K+的亲和力发生变化，故活性也发生变化，B正确；
C、题干信息：Na+ -K+ATPase 是细胞膜上一种具有ATP水解酶活性的载体蛋白，每水解一个ATP 分子能逆浓度梯度泵出 3 个 Na+、泵入 2 个 K+，可知，Na+-K+ATPase转运Na+、K+属于主动转运；利用 Na+ -K+ATPase 的抑制剂（乌本苷）处理人成熟的红细胞，则细胞将会不断吸水膨胀，甚至破裂，说明乌本苷影响 Na+、K+的主动运输，使红细胞内渗透压高于细胞外，C错误；
D、水分子主要是借助细胞膜上的水通道蛋白以协助扩散方式进入红细胞内，D错误。
故选B。
7. 研究发现温度越高蛋白质分子热运动越快，分子内的氢键等弱键的断裂程度增加，立体结构被破坏程度增加。如图为β-葡萄糖苷酶在不同条件下分别处理20min、60min、120min后的实验结果。下列叙述错误的是（ ）

A. 该实验的自变量有温度、处理时间
B. 该酶活性随温度升高、处理时间延长而降低
C. 图示结果说明处理时间会影响酶的最适温度
D. 处于高温环境越久，越多酶分子结构被破坏
【答案】B
【分析】酶的作用条件较温和：在最适宜的温度和pH条件下，酶的活性最高；温度和pH偏高或偏低，酶的活性都会明显降低；在过酸、过碱或温度过高条件下酶会变性失活，而在低温条件下酶的活性降低，但不会失活。
【详解】A、由图可知，该实验的自变量有温度、处理时间，因变量是相对酶活性，A正确；
B、由图可知，在37℃之前，该酶的活性随温度的升高而提高，处理60min的酶活性比处理20min的酶活性大，因此无法得出该酶活性随温度、处理时间延长而降低的结论，B错误；
C、β-葡萄糖苷酶在处理20min时，该酶活性的最适温度为42℃，β-葡萄糖苷酶在处理60min时，该酶活性的最适温度为37℃，β-葡萄糖苷酶在处理120min时，该酶活性的最适温度为37℃，C正确；
D、温度越高蛋白质分子热运动越快，蛋白质分子内的氢键等弱键的断裂程度也增加，蛋白质立体结构被破坏程度增加，由此推测处于高温环境越久，越多酶分子结构被破坏，D正确。
故选B。
8. 研究人员将³²P标记的磷酸注入活的离体肝细胞，1~2min后迅速分离得到细胞内的 ATP。结果发现ATP的末端磷酸基团被³²P标记，并测得ATP.与注入的³²P标记磷酸的放射性强度几乎一致。下列有关叙述正确的是（ ）
A. ATP合成所需的能量由磷酸提供
B. ³²P标记的 ATP水解产生的 ADP没有放射性
C. ATP与ADP相互转化主要发生在细胞核内
D. 该实验表明，细胞中的 ADP 全部转化为ATP
【答案】B
【分析】ATP又叫腺苷三磷酸，简称为ATP，其结构式是：A-P～P～P，A-表示腺苷、T-表示三个、P-表示磷酸基团，“～”表示特殊的化学键。
【详解】A、ATP合成所需的能量由光合作用或细胞呼吸提供，A错误；
B、根据题意可知，ATP的末端磷酸基团被32P标记，已知ATP水解产生ADP的过程脱去了末端的磷酸基团，故32P标记的ATP水解产生的ADP没有放射性，B正确；
C、ATP与ADP相互转化较快，但该实验不能说明二者的相互转化主要发生在细胞核内，C错误；
D、该实验只分离了细胞内的ATP，不能说明细胞内全部ADP都转化成了ATP，D错误。
故选B。
9. 我国劳动人民积累了丰富的生产生活经验，并在实践中应用。下列叙述错误的是（ ）
A. 施肥之后及时灌溉，有利于矿质元素溶解在水中被根系吸收
B. 利用酵母菌菌种在控制通气的情况下，可生产各种酒和食醋等
C. 在同一块田地上依次种植不同的作物，有利于充分利用土壤营养
D. 农作物生长发育过程中，及时去除衰老变黄的叶片有利于有机物积累
【答案】B
【分析】参与果酒制作的微生物是酵母菌；参与果醋制作的微生物是醋酸菌，醋酸菌能将糖源或酒精转变成醋酸。
【详解】A、自由水是良好的溶剂，施肥之后及时灌溉，土壤中的矿质元素会溶解在水中，从而有利于根系吸收，A正确；
B、利用麦芽、葡萄、粮食和酵母菌以及发酵罐等，在控制通气的情况下，可以生产各种酒，但生产食醋利用了醋酸杆菌，B错误；
C、不同的作物对营养元素的需求和对病虫害的抗性都有所不同，在同一块田地上依次种植不同的作物，可以提高土壤肥力，从而有利于充分利用土壤营养，C正确；
D、农作物生长发育过程中，及时去除衰老变黄的叶片，能降低有机物的消耗，从而有利于有机物积累，D正确。
故选B。
10. 若要测定某一水生生态系统中浮游植物所制造的有机物总量，可在该生态系统中的某一水深处取水样，将水样分成三等份，一份直接测定O2含量（X）；另两份分别装入不透光（甲）和透光（乙）的两个玻璃瓶中，密闭后放回取样处，若干小时后测定甲瓶中的O2含量（Y）和乙瓶中的O2含量（Z）。在甲、乙瓶中只有浮游植物且其呼吸作用相同的条件下，下列分析正确的是（ ）
A. X与Y的差值表示这段时间内，浮游植物呼吸作用消耗的O2总量
B. X与Z的差值表示这段时间内，浮游植物光合作用制造的O2总量
C. Y与Z的差值表示这段时间内，浮游植物光合作用制造有机物的总量
D. 若X>Z>Y，则这段时间内乙瓶中的浮游植物没有进行光合作用
【答案】A
【分析】甲、乙两瓶中只有浮游植物，X表示甲、乙两瓶中水样的初始O2含量；甲瓶O2含量的变化反映的是细胞呼吸耗氧量，因此Y＝X－细胞呼吸耗氧量；乙瓶O2含量变化反映的是净光合作用放氧量，所以Z＝X＋光合作用产生的氧气总量－细胞呼吸耗氧量=X＋净光合释放的氧气量。
【详解】A、X表示甲、乙两瓶中水样的初始O2含量，甲瓶O2含量的变化反映的是细胞呼吸耗氧量，Y＝X－细胞呼吸耗氧量，X－Y＝细胞呼吸耗氧量，即X 与Y 的差值表示这段时间内，浮游植物呼吸作用消耗的O2总量，A正确；
B、X表示甲、乙两瓶中水样的初始O2含量，乙瓶O2含量变化反映的是净光合作用放氧量，Z＝X＋光合作用产生的氧气总量－细胞呼吸耗氧量=X＋净光合释放的氧气量，Z－X＝净光合释放的氧气量，即X 与Z的差值表示这段时间内，浮游植物光合作用释放的O2总量，B错误；
C、Y＝X－细胞呼吸耗氧量，Z－X＝净光合释放的氧气量，Z－Y＝X＋光合作用产生的氧气总量－细胞呼吸耗氧量－（X－细胞呼吸耗氧量）=光合作用产生的氧气总量，即Y与Z的差值表示这段时间内，浮游植物光合作用产生的氧气总量，C错误；
D、若X>Z>Y，说明这段时间内乙瓶中的浮游植物光合作用小于呼吸作用，D错误。
故选A。
11. 下列有关细胞生命历程的叙述，正确的是（ ）
A. 抑癌基因甲基化导致基因突变或降低基因表达
B. 靶细胞与细胞毒性T细胞结合后裂解属于细胞凋亡
C. 肝脏细胞不能合成血红蛋白的原因是没有与血红蛋白合成有关的基因
D. 自由基学说认为自由基通过攻击磷脂直接导致核糖体损伤而使细胞衰老
【答案】B
【分析】自由基学说：各种氧化反应产生自由基，辐射以及有害物质入侵也会产生自由基，这些自由基攻击和破坏细胞内各种执行正常功能的生物分子，对生物膜损伤比较大，如当自由基攻击生物膜的组成成分磷脂分子时，产物同样是自由基；自由基还会攻击DNA，可能引起基因突变；攻击蛋白质，使蛋白质活性下降，导致细胞衰老。
【详解】A、抑癌基因甲基化不会导致基因碱基序列改变，不会导致基因突变，但会影响基因的表达，进而引起表型改变，A错误；
B、细胞凋亡是细胞自动结束生命的过程，故靶细胞与细胞毒性T细胞结合后裂解属于细胞凋亡属于细胞凋亡，B正确；
C、肝脏细胞不能合成血红蛋白原因是血红蛋白基因没有表达，C错误；
D、自由基学说认为，自由基会攻击和破坏细胞内各种执行正常功能的生物分子，如磷脂、DNA、蛋白质等引起细胞衰老，核糖体无膜结构不含磷脂，D错误。
故选B。
12. 洋葱根尖细胞染色体数为8对，细胞周期约12h，常用于观察细胞的有丝分裂。下列分析不正确的是（ ）
A. 在低倍镜下比高倍镜下能更快找到各种分裂期的细胞
B. 漂洗后用甲紫溶液或醋酸洋红液染色，便于观察细胞内染色体的形态和分布
C. 在中期，洋葱根尖细胞中16条染色体的着丝粒排列在赤道板上
D. 根据一个视野内中期细胞数的比例，可计算出洋葱根尖细胞分裂中期的时长
【答案】D
【分析】观察细胞有丝分裂实验的步骤：解离（解离液由盐酸和酒精组成，目的是使细胞分散开来）、漂洗（洗去解离液，便于染色）、染色（用龙胆紫、醋酸洋红等碱性染料）、制片（该过程中压片是为了将根尖细胞压成薄层，使之不相互重叠影响观察）和观察（先低倍镜观察，后高倍镜观察）。
【详解】A、低倍镜下，细胞放大倍数小，观察的细胞数目多，高倍镜下放大倍数大，观察细胞数目少，所以在低倍镜下比高倍镜下能更快找到各种分裂期细胞，A正确；
B、观察植物细胞有丝分裂实验中制片流程为：解离→漂洗→染色→制片，用清水将解离液漂洗后用碱性染料甲紫溶液或醋酸洋红液对染色体进行染色，便于观察其形态和分布，B正确；
C、有丝分裂中期含有16条染色体，每条染色体含有1个着丝粒，在中期，洋葱根尖细胞中16条染色体的着丝粒排列在赤道板上，C正确，
D、各期细胞数目所占比例与其分裂周期所占时间成正相关，故已知细胞周期时间，根据各时期细胞数目所占比例可计算各时期的时间，但应统计多个视野中的比例，题中只有 一个视野，无法准确推算，D错误。
故选D。
13. 某同学制作泡菜时，向泡菜坛中加入了一些“陈泡菜水”和质量分数为5%的食盐水，并在不同的腌制时间测定泡菜中亚硝酸盐的含量。下列说法错误的是（ ）
A. 泡菜制作过程中，加入“陈泡菜水”可加快发酵进程
B. 制作出的泡菜“咸而不酸”，可能是食盐浓度过高或发酵温度过低造成的
C. 泡菜腌制过程中检测亚硝酸盐含量的目的是为了了解乳酸菌的生长情况
D. 泡菜制作过程中应及时向坛盖边沿的水槽中补充水，以保证密封发酵
【答案】C
【分析】泡菜的制作所使用的微生物是乳酸菌，其代谢类型是异养厌氧型，在无氧条件下乳酸菌能够将蔬菜中的葡萄糖分解为乳酸。
【详解】A、“陈酸菜水”含有大量的乳酸菌，所以加入“陈酸菜水”可以提供乳酸菌加快发酵进程，A正确；
B、腌的泡菜只有咸味没有酸味的原因是盐放得多，抑制了乳酸菌的代谢活动，B正确；
C、泡菜发酵过程中检测亚硝酸盐含量的目的是把握取食泡菜的最佳时机，C错误；
D、盐水入坛前应煮沸冷却，以防杂菌污染，坛盖边沿的水槽中需注满水，以保证坛内乳酸菌发酵所需的无氧环境，D正确。
故选C。
14. 下列有关发酵工程及其相关应用的说法，正确的是（ ）
A. 发酵产品如果是代谢物，可采用过滤、沉淀等措施获得产品
B. 在青贮饲料中添加乳酸菌，可以使饲料保鲜，动物食用后可增强免疫力
C. 发酵工程所用菌种都是经选育的单一菌种，可以明显提高产品的产量和质量
D. 用纤维素的水解液为原料，通过发酵工程从微生物菌体中提取单细胞蛋白
【答案】B
【分析】发酵工程是指采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品，或直接把微生物应用于工业生产过程的一种技术，发酵工程的内容包括菌种选育、培养基的配置、灭菌、种子扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离提纯(生物分离工程)等方面。
【详解】 A、如果发酵产品是微生物细胞本身，可在发酵结束之后采用过滤、沉淀等方法将菌体分离和干燥，即得到产品；如果产品是代谢物，可根据产物的性质采取适当的提取、分离和纯化措施来获得产品，A错误；
B、青贮饲料中添加乳酸菌，可以提高饲料的品质，使饲料保鲜，动物食用后还能提高免疫力，B正确；
C、发酵工程所用菌种通常是经选育的单一菌种，也可能根据生产需要接种多种菌种，加上菌种性状优良，使得产品的产量和质量都明显高于传统发酵技术，C错误；
D、单细胞蛋白是以淀粉或纤维素的水解液、制糖工业的废液等为原料，通过发酵，获得的大量的微生物菌体，不是从微生物菌体中提取单细胞蛋白，D错误。
故选B。
15. HCG是受孕后体内分泌的一种糖蛋白激素。在妊娠早期，HCG的浓度迅速升高，检测尿中的HCG即可证实妊娠。科学家据此并结合细胞工程技术发明了早孕检测试剂，可在受精10天左右测出是否怀孕。下列叙述正确的是（ ）
A. 用纯化的HCG反复注射到小鼠体内，产生的抗体为单克隆抗体
B. 体外培养单个B细胞可以获得大量针对HCG的单克隆抗体
C. 等量B细胞和骨髓瘤细胞经诱导融合后的细胞均为杂交瘤细胞
D. 单克隆抗体除用作诊断试剂外，还可以运载药物、治疗疾病等
【答案】D
【分析】单克隆抗体的制备过程：（1）制备产生特异性抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原，然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞。（2）获得杂交瘤细胞。①将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中形成的B淋巴细胞融合；②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体。（3）克隆化培养和抗体检测（4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖。（5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。
【详解】A、融合B淋巴细胞与骨髓瘤细胞获得可以增殖并产生抗体的杂交瘤细胞，从而制备单克隆抗体，A错误；
B、单个B细胞高度分化无法增殖，不能产生大量抗体，B错误；
C、B细胞和骨髓瘤细胞经诱导融合后，可以产生B细胞和B细胞融合细胞、骨髓瘤细胞和骨髓瘤细胞融合细胞以及杂交瘤细胞，C错误；
D、单克隆抗体可以特异性作用于抗原，除用作诊断试剂外，还可以运载药物、治疗疾病等，D正确。
故选D。
16. 下列关于植物细胞工程应用的叙述，错误的是（ ）
A. 植物组织培养中，诱导愈伤组织形成过程中必须给予光照
B. 生产中培育脱毒苗常取茎尖分生组织进行组织培养
C. 植物组织培养过程中，细胞容易受到诱变因素的影响而产生突变
D. 利用植物细胞培养技术可以实现细胞产物的工厂化生产
【答案】A
【分析】植物细胞工程技术的应用：植物繁殖的新途径（微型繁殖、作物脱毒、人工种子）、作物新品种的培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产。
【详解】A、植物组织培养中，诱导愈伤组织形成过程中一般不需要给予光照，A错误；
B、茎尖分生组织所含病毒少，因此可以用于脱毒苗的培养，B正确；
C、植物组织培养过程中，细胞分裂较旺盛，细胞容易受到诱变因素的影响而产生突变，C正确；
D、利用植物细胞培养技术产生大量的植物细胞，从而可以实现细胞产物的工厂化生产，D正确。
故选A。
17. 某研究小组用野生黑芥、花椰菜两种植物细胞进行体细胞杂交，流程如图所示。下列相关叙述错误的是（ ）
A. 过程①所需的酶有纤维素酶和果胶酶，利用了酶具有专一性的特点
B. 过程②可用聚乙二醇诱导原生质体融合和细胞壁再生
C. 过程③中使用的关键激素是生长素和细胞分裂素
D. 植物体细胞杂交技术打破生殖隔离，实现远缘杂交育种
【答案】B
【分析】题图分析，过程①代表用酶解法去除细胞壁获得原生质体的过程，过程②为原生质体的融合，过程③为脱分化形成与愈伤组织的过程。
【详解】A、细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，因此过程①要利用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，获得原生质体，利用了酶具有专一性的特点，A正确；
B、过程②为原生质体融合，诱导原生质体融合可采用物理法，如振荡、离心等方法，也可以采用化学法诱导，如聚乙二醇PEG诱导，但PEG不能诱导细胞壁再生，B错误；
C、过程③为脱分化形成与愈伤组织的过程，使用的关键激素是生长素和细胞分裂素，C正确；
D、植物体细胞杂交技术的典型优势是打破生殖隔离，克服远缘杂交不亲和的障碍，D正确。
故选B。
18. 96孔板在现代生物技术与工程中具有普遍应用。下列生物技术中一般不适合用到96孔板的是（ ）
A. 高通量筛选某种高产突变菌种
B. 克隆化培养杂交瘤细胞和抗体检测
C. 早期胚胎的培养和胚胎分割
D. 精子的体外培养和筛选
【答案】C
【分析】96孔板是一种多孔板的实验室器材，具有多种应用，其主要作用包括细胞培养、基因研究、药物研发和食品安全、DNA测序与PCR、样品储存与处理、酶联免疫吸附实验、流量测量等。
【详解】高通量筛选某种高产突变菌种、克隆化培养杂交瘤细胞和抗体检测和精子的体外培养和筛选，都需要用到大量的培养基，且细胞都较小，适合用96孔板，而早期胚胎的培养和胚胎分割也需要用到大量的培养基，但胚胎的体积较大，不适合用到96孔板，C正确，ABD错误。
故选C。
19. 下列关于动物细胞核移植技术的叙述，错误的是（ ）
A. 哺乳动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植
B. 用物理或化学方法激活重构胚，使其完成分裂和发育进程
C. 显微操作法是在没有穿透卵母细胞透明带的情况下去核的
D. 以患者作为供体，通过核移植技术和诱导iPS细胞技术均能获得胚胎干细胞
【答案】C
【分析】动物细胞核移植技术是将动物一个细胞的细胞核移入去核的卵母细胞中，使这个重新组合的细胞发育成新胚胎，继而发育成动物个体的技术。
【详解】A、由于动物胚胎细胞分化程度较低，恢复其全能性相对容易，而动物体细胞分化程度高，恢复其全能性十分困难，所以体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植，A正确；
B、用物理或化学的方法(如电脉冲、钙离子载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等)激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程，B正确；
C、显微操作去核法是在没有刺破透明带或卵母细胞质膜情况下，去除细胞核或使卵母细胞核DNA变性的，从而达到去核的目的，C错误；
D、以患者作为供体，利用体细胞核移植技术和诱导iPS细胞都能生成干细胞生成带有核供体细胞遗传物质的胚胎干细胞，D正确。
故选C。
20. 胚胎分割技术成为提高胚胎利用率的重要手段之一。下列相关叙述错误的是（ ）
A. 可利用胚胎分割技术进行性别鉴定和遗传病筛查等
B. 对于不同发育阶段的胚胎，分割的具体操作不完全相同
C. 利用胚胎分割技术，同卵多胎较同卵双胎的成功率更高
D. 胚胎分割技术可产生遗传性状相同的后代用于遗传学研究
【答案】C
【分析】胚胎分割是指采用机械方法将早期胚胎切割成2等分、4等分或8等分等，经移植获得同卵双胚或多胚的技术。胚胎分割的特点：来自同一胚胎的后代具有相同的遗传物质，胚胎分割可以看做动物无性繁殖或克隆的方法之一。进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑葚胚或囊胚。对囊胚阶段的胚胎进行分割时要注意将内细胞团均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。
【详解】A、可利用胚胎分割技术进行胚胎的分割，从而进一步进行性别鉴定和遗传病筛查等，A正确；
B、对卵裂球进行分割时，用胰蛋白酶进行处理，对囊胚进行分割时，需要将内细胞团均等分割，因此说明对于不同发育阶段的胚胎，分割的具体操作不完全相同，B正确；
C、胚胎分割时，分割的份数越多，成功率越低，因此同卵多胎较同卵双胎的成功率更低，C错误；
D、胚胎分割技术实际上是无性繁殖，产生的后代遗传性状相同，可用于遗传学研究，D正确。
故选C。
21. 某科研团队开发了一种治疗抑郁的新药，利用刚出生的小鼠分离得到的神经元进行细胞培养，以研究这种药物对大脑神经元的影响。其中，动物细胞培养的特点是（ ）
①细胞贴壁生长②进行有丝分裂③多层生长④接触抑制⑤进行减数分裂⑥培养过程中遗传物质可能发生改变 ⑦分裂次数有限
A. ①②④⑥⑦B. ①②③④⑤C. ①③④⑥⑦D. ①③④⑤⑥
【答案】A
【分析】动物培养条件：
（1）无菌无毒环境：无菌—对培养液和所有培养用具进行无菌处理；在细胞培养液中添加一定量的抗生素；无毒—定期更换培养液，防止细胞代谢产物积累对自身造成危害。
（2）营养：成分：所需营养物质与体内基本相同，例如需要有糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然成分。培养基类型：合成培养基（将细胞所需的营养物质按其种类和所需数量严格配制而成的培养基）。
（3）温度和pH值：哺乳动物多以36.5±0.5℃为宜，多数细胞生存的适宜pH为7.2～7.4。
（4）气体环境：通常采用培养皿或松盖培养瓶，将其置于含95%空气加5%CO2的混合气体的培养箱中进行培养。O2是细胞代谢所必需的，CO2主要作用是维持培养液的pH。
【详解】①动物细胞培养时，悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁生长，①正确；
②动物细胞增殖的过程中，细胞的增殖方式是有丝分裂，②正确；
③动物细胞培养时不会多层生长，③错误；
④当细胞分裂生长到细胞表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，即接触抑制（癌细胞无接触抑制），④正确；
⑤动物细胞培养过程中，细胞的增殖方式是有丝分裂，不是减数分裂，⑤错误；
⑥⑦原代培养一般传代1～10代，十代后就不易传下去了，遗传物质可能发生改变，⑥⑦正确。
综上所述，动物细胞培养的特点是①②④⑥⑦，A正确，BCD错误。
故选A。
22. 四种限制酶的切割位点如图所示，下列相关叙述错误的是（ ）
A. 限制酶主要是从原核生物中分离纯化而来的
B. DNA连接酶和DNA聚合酶都是催化磷酸二酯键形成的酶
C. SmaI、EcRV切割后产生的DNA片段之间能用T4DNA连接酶连接
D. EcRI、PstI切割后产生的DNA片段之间能用E·cliDNA连接酶连接
【答案】D
【分析】限制酶的作用：识别双链DNA分子的特定核苷酸序列，并使每一条链中特定部位的磷酸二酯键断开。
【详解】A、限制酶主要是从原核生物中分离纯化出来的，能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，A正确；
B、DNA连接酶主要连接的是两个DNA片段，形成磷酸二酯键，而DNA聚合酶在DNA复制过程中起着关键作用，它能够将单个脱氧核苷酸连接到脱氧核苷酸链上，从而催化形成磷酸二酯键，B正确；
C、SmaI、EcRV两种酶切割后的DNA片段末端类型为平末端，T4DNA连接酶可以连接平末端，C正确；
D、EcRI、PstⅠ两种酶切割后的DNA片段都会产生黏性末端，但产生的黏性末端并不相同，E．cliDNA连接酶可以连接具有相同黏性末端的DNA片段，D错误。
故选D。
23. 棉蚜虫体内有多种寄生蜂的卵。现利用PCR技术对棉蚜虫及其体内寄生蜂种类进行检测，为了一次鉴定出多种目标昆虫，加入同一PCR体系的引物应满足的条件是（ ）
①每对引物扩增的序列对应一种昆虫②每对引物扩增的序列对应多种昆虫③每对引物扩增的产物长度不同④每对引物扩增的产物长度相同⑤所有引物之间不能相互配对⑥所有引物的长度相同
A. ①③⑤B. ②④⑥C. ②③⑥D. ①④⑤
【答案】A
【分析】引物是一小段能与DNA母链的一段碱基序列互补配对的短单链核酸，且引物之间不能发生碱基互补配对。
【详解】要用多对引物一次鉴定出多种生物，那么每种生物要有对应的引物与其DNA特有的碱基序列配对，引物之间不能互补配对，扩增的产物长度要有所不同，以便在电泳时可以区分出不同生物的片段，即①③⑤符合题意，A正确，BCD错误。
故选A。
24. 苏云金芽孢杆菌中的杀虫晶体蛋白Cry具有杀虫毒性，但Cry蛋白存在杀虫谱窄、毒力有限等问题，制约了其在农业生产中的进一步应用。科学家通过定点突变，将Cry蛋白第168位的组氨酸替换为精氨酸后，Cry蛋白对烟草天蛾的毒性提高了3倍；将Cry蛋白第282位、第283位的丙氨酸和亮氨酸分别替换成甘氨酸和丝氨酸后，Cry蛋白对舞毒蛾的毒性提高了7倍。下列相关叙述不正确的是（ ）
A. 对Cry蛋白的改造是通过改造编码Cry蛋白的基因来实现的
B. 与基因工程相比，蛋白质工程的实现也需要构建基因表达载体
C. 蛋白质工程难度较大，主要是蛋白质发挥功能所依赖的高级结构十分复杂
D. 如果将第168、282、283位的氨基酸全部替换，Cry蛋白对舞毒蛾的毒性将增加21倍
【答案】D
【分析】蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过改造或合成基因，来改造现有蛋白质，或制造一种新的蛋白质，以满足人类生产和生活的需求。
【详解】A、蛋白质的改造需要从根本上改造基因，因此对Cry蛋白的改造是通过改造编码Cry蛋白的基因来实现的，A正确；
B、需要将改造的基因导入受体细胞并表达相关产物，就需要构建基因表达载体因此与基因工程相比，蛋白质工程的实现也需要构建基因表达载体，B正确；
C、蛋白质的功能多样性，主要取决于蛋白质中氨基酸种类、数量、排列顺序以及蛋白质的空间结构，因此蛋白质工程难度较大，主要是蛋白质发挥功能所依赖的高级结构十分复杂，C正确；
D、如果将第168、282、283位的氨基酸全部替换，Cry蛋白可能会失去原有的功能，D错误。
故选D。
25. 为有效防范由各类生物因子、生物技术误用滥用等引起的生物性危害，生物安全已纳入国家安全体系。下列叙述正确的是（ ）
A. 干细胞的研究可用于治疗很多疾病，有不涉及伦理问题等优点
B. 克隆技术会导致社会伦理问题，治疗性克隆技术的应用也应禁止
C. 转入叶绿体中的基因不会随花粉传递给子代，避免造成基因污染
D. 试管婴儿技术要对胚胎进行遗传学诊断，不能用于解决不孕不育问题
【答案】C
【分析】转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应、过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）。对待转基因技术的利弊，正确的做法应该是趋利避害，不能因噎废食。
【详解】A、干细胞的研究可用于治疗很多疾病，但胚胎干细胞必须从胚胎中获取，这涉及伦理问题，因而限制了它在医学上的应用，A错误；
B、我国不反对治疗性克隆，但仍需要监管和监督，B错误；
C、子代受精卵中的细胞质几乎全部来自母方，因此转入叶绿体中的基因不会随花粉传递给子代，从而避免造成基因污染，C正确；
D、试管婴儿技术需要对胚胎进行遗传学诊断，常用于解决不孕不育问题，D错误。
故选C。
二、非选择题：本题共4小题，共50分。
26. 植物可通过改变呼吸代谢的途径来适应缺氧环境。在无氧条件下，某种植物幼苗的根细胞经呼吸作用释放CO2的速率随时间的变化趋势如图所示。回答下列问题。

（1）在无氧条件下，植物根细胞呼吸作用的场所是______________，此时根细胞吸收无机盐离子所需的能量是由细胞呼吸第______________阶段生成的ATP提供的。
（2）在a点之前，植物根细胞中的丙酮酸在酶的催化作用下，转化成______________；在a点之后，植物根细胞中的丙酮酸在酶的催化作用下，分解成CO2和______________，该物质可与______________溶液在酸性条件下发生反应，使溶液由橙色变成______________。
（3）在缺氧条件下，该植物根细胞初始无氧呼吸途径进行的时间较短，这可减轻______________对细胞造成的伤害；改变后的无氧呼吸途径进行的时间虽较长，但呼吸产物可通过______________的方式运输到细胞外，由此可减少其对细胞的伤害。
【答案】（1）①. 细胞质基质 ②. 一
（2）①. 乳酸 ②. 酒精 ③. 重铬酸钾 ④. 灰绿色
（3）①. 乳酸在细胞中的积累 ②. 自由扩散
【分析】无氧呼吸分为两个阶段：第一阶段：葡萄糖分解成丙酮酸和[H]，并释放少量能量；第二阶段丙酮酸在不同酶的作用下转化成乳酸或酒精和二氧化碳，不释放能量。整个过程都发生在细胞质基质。
有氧呼吸的第一、二、三阶段的场所依次是细胞质基质、线粒体基质和线粒体内膜。有氧呼吸第一阶段是葡萄糖分解成丙酮酸和[H]，合成少量ATP；第二阶段是丙酮酸和水反应生成二氧化碳和[H]，合成少量ATP；第三阶段是氧气和[H]反应生成水，合成大量ATP。
（1）无氧条件下，植物根细胞会进行无氧呼吸，而无氧呼吸的场所是细胞质基质。无氧呼吸的第一阶段是将葡萄糖分解成丙酮酸，同时释放少量能量，合成少量ATP，第二阶段不产生ATP，因此根细胞吸收无机盐离子所需的能量是由细胞呼吸第一阶段生成的ATP提供的。
（2）植物进行有氧呼吸或无氧呼吸产生酒精时都有二氧化碳释放，图示在时间a之前，植物根细胞无CO2释放，分析题意可知，植物可通过呼吸代谢途径的改变来适应缺氧环境，据此推知在时间a之前，只进行产生乳酸的无氧呼吸，因此在a点之前，植物根细胞中的丙酮酸在酶的催化作用下，转化成乳酸。在a点之后，刚开始产生CO2较少，进行产生酒精的无氧呼吸，因此此时植物根细胞中的丙酮酸在酶的催化作用下，分解成CO2和酒精。酒精可与重铬酸钾在酸性条件下发生反应，使溶液由橙色变成灰绿色。
（3）据图可知，在缺氧条件下，该植物根细胞初始无氧呼吸途径是产生乳酸的无氧呼吸，该途径进行的时间较短，这可减轻乳酸对细胞造成的伤害。改变后的无氧呼吸途径是产生酒精的无氧呼吸，酒精可通过自由扩散的方式运输到细胞外，由此可减少其对细胞的伤害。
27. 回答下列与光合作用有关的问题。
（1）叶片是分离制备叶绿体的常用材料，若将叶肉细胞中的叶绿体与其他细胞器分离，可以采用的方法是______________。
（2）提取新鲜菠菜叶片中光合色素时，若未加入碳酸钙，提取液会偏____________色。分离光合色素时，由于不同色素在层析液中的溶解度不同，导致4种色素随层析液在滤纸条上的______________不同而出现色素带分层的现象。
（3）正常光照下，用含有0.1%CO2的溶液培养小球藻一段时间。当用绿光照射该溶液，短期内小球藻叶绿体中C3含量会______________，为C3还原提供能量的物质是______________。若停止供应CO2，短期内小球藻叶绿体中C3含量会______________。
（4）蔗糖和葡萄糖都是光合产物，但蔗糖是大多数植物长距离运输的主要有机物。与葡萄糖相比，以蔗糖作为运输物质的优点是______________。
【答案】（1）差速离心法
（2）①. 黄 ②. 扩散速度
（3）①. 增加 ②. ATP和NADPH ③. 减少
（4）蔗糖是非还原糖,性质较稳定（或蔗糖是二糖,对渗透压的影响较小）
【分析】光合作用色素的提取和分离实验中，最终获得的滤纸条上为分离出的光合色素，自上而下依次为胡萝卜素、叶黄素、叶绿素a和叶绿素b，胡萝卜素和叶黄素合称类胡萝卜素，主要吸收蓝紫光，叶绿素a和叶绿素b合称叶绿素，主要吸收红光和蓝紫光。
（1）不同的细胞器密度（质量）不相同，可以通过差速离心的方法将叶肉细胞中的叶绿体与其他细胞器分离。
（2）碳酸钙的作用是保护叶绿素，如果提取新鲜菠菜叶片中光合色素时，若未加入碳酸钙，叶绿素会有部分被降解，从而偏向类胡萝卜素的颜色，即提取液偏黄色。光合色素分离的原理是不同的色素在层析液中的溶解度不同，溶解度越大，扩散速度越快，胡萝卜素溶解度最大，扩散速度最快。
（3）光合色素几乎不吸收绿光，因此正常光突然改变为绿光，光照强度减弱，产生的ATP和NADPH减少，C3还原减少，而C3来源基本不变，因此C3含量会增加。为C3还原提供能量的物质是光反应产生的ATP和NADPH。若停止供应CO2，C3的产生减少，而消耗基本不变，因此C3含量会下降。
（4）与葡萄糖相比，以蔗糖作为运输物质优点是蔗糖是非还原糖,性质较稳定（或蔗糖是二糖,对渗透压的影响较小）。
28. 某种物质W（一种含有C、H的有机物）难以降解，会对环境造成污染。研究人员从淤泥中分离得到了能高效降解W的细菌菌株，其中用到的培养基成分如下所示。回答下列问题。
培养基甲：MgSO4、CaCl2、KH2PO4、K2HPO4、NH4NO3、FeCl3、蒸馏水
培养基乙：蛋白胨、牛肉膏、氯化钠、蒸馏水、琼脂
（1）从微生物生长所需营养物质的角度分析，分离淤泥中高效降解W的细菌时，需要在培养基甲中加入______________；高效降解W的细菌______________（填“能”或“不能”）在培养基乙中生长，理由是______________。
（2）通常采用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌。在使用该方法时，为达到良好的灭菌效果，需要在______________的条件下维持一定时间。
（3）若要测定淤泥中能降解W的细菌细胞数，请写出主要实验步骤______________。
（4）高效降解W的细菌用于环境保护实践时，还需要考虑的问题有______________（答出1点即可）。
【答案】（1）①. 物质W ②. 能 ③. 蛋白胨和牛肉膏可为降解W的细菌提供生长所需的碳源和氮源
（2）一定压力（100kPa）和温度（121℃）
（3）方法一：取淤泥加入无菌水中，稀释涂布到选择培养基（或加入物质W和琼脂的培养基甲）上，培养后选择合适的稀释度，统计菌落数；方法二：取淤泥加入无菌水中，接种到加入物质W的培养基甲中，培养一段时间用细菌计数板在显微镜下观察计数
（4）该菌在自然环境中能否大量分裂繁殖，是否产生对环境有害的代谢物，降解产物是否会污染环境等
【分析】微生物培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。对异养微生物来说，含C、N的化合物既是碳源，也是氮源，即有些化合物作为营养要素成分时并不是起单一方面的作用。
（1）虽然各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、碳源（提供碳元素的物质）、氮源（提供氮元素的物质）和无机盐，从微生物生长所需营养物质的角度分析，分离淤泥中高效降解W的细菌时，需要在培养基甲中加入W作为唯一碳源；培养基乙含有蛋白胨和牛肉膏等物质，蛋白胨和牛肉膏可为降解W的细菌提供生长所需的碳源和氮源，氯化钠能提供无机盐，因此高效降解W的细菌能在培养基乙中生长。
（2）通常采用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌，在使用该方法时，为达到良好的灭菌效果，需要在一定压力（100kPa）和温度（121℃）条件下维持15∼30min。
（3）若要测定淤泥中能降解W的细菌细胞数可以采用稀释涂布平板法和显微直接计数法，因此方法一：取淤泥加入无菌水中，稀释涂布到选择培养基（或加入物质W和琼脂的培养基甲）上，培养后选择合适的稀释度，统计菌落数；方法二：取淤泥加入无菌水中，接种到加入物质W的培养基甲中，培养一段时间用细菌计数板在显微镜下观察计数。
（4）将目的菌用于环境保护实践之前，还要对目的菌进行研究，检测其是否会产生对环境有害的代谢物；当使用大量目的菌时会不会使目的菌成为优势菌群，对其他微生物的生存构成威胁，从而打破微生物菌群的平衡等，因此高效降解W的细菌用于环境保护实践时，还需要考虑的问题有该菌在自然环境中能否大量分裂繁殖，是否产生对环境有害的代谢物，降解产物是否会污染环境等。
29. 锌转运蛋白在某种植物根部细胞特异性表达并定位于细胞膜，具有吸收和转运环境中Zn2+的功能。通过基因工程可对锌吸收缺陷型酵母进行转化。回答下列问题。
（1）在基因工程操作时，若要从该植物体中提取锌转运蛋白的mRNA，常选用幼根而不选用老根作为实验材料，原因是______________；提取RNA时，提取液中需要添加RNA酶抑制剂，其目的是______________；以mRNA为材料可以获得cDNA，其原理是______________。
（2）以cDNA为模板，利用PCR扩增并筛选锌转运蛋白基因，为便于锌转运蛋白基因与质粒连接，需在引物的______________端加上限制酶识别序列，且常在两条引物上设计加入不同的限制酶识别序列，主要目的是______________。
（3）为保证锌转运蛋白基因的表达，可将其插入到酵母菌质粒的______________之间。
（4）为鉴定转化酵母是否赋予锌吸收特性，可通过配制含适量Zn2+的（酵母菌）固体培养基、灭菌，分成a、b两半区域，a、b区分别涂布少量缺陷型酵母和转化酵母，已知锌吸收缺陷型酵母菌增殖速度较慢，在适宜条件下培养一段时间后，若______________，则证明有转化成功的酵母。
【答案】（1）①. 幼根组织细胞易破碎 ②. 防止RNA降解 ③. 在逆转录酶的作用下,以mRNA为模板按照碱基互补配对的原则合成cDNA
（2）①. 5′ ②. 使DNA片段能定向插入表达载体,防止目的基因自身环化
（3）启动子与终止子 （4）b区有些菌落明显大于a区的菌落
【分析】基因工程的基本操作程序：目的基因的筛选与获取；基因表达载体的构建；将目的基因导入受体细胞；目的基因的检测与鉴定。
（1）在基因工程操作中，选择幼根作为实验材料提取锌转运蛋白的mRNA，是因为幼根代谢旺盛，细胞分裂快，锌转运蛋白基因转录旺盛，mRNA含量高，同时相比老根，幼根组织细胞易破碎；在该基因工程操作中，目的是提取锌转运蛋白的mRNA，而在提取液中添加RNA酶抑制剂，可防止被RNA降解；若要以mRNA为材料可以获得cDNA，可以在逆转录酶的作用下,以mRNA为模板按照碱基互补配对的原则合成cDNA。
（2）PCR过程中，由于DNA子链是从引物的3’端延伸，因此在设计引物时，只能在两条引物的5’端加上限制性酶切位点。两种引物含不同的限制性酶识别序列，主要目的是为了使DNA片段能定向插入表达载体，同时防止构建基因表达载体时出现目的基因自身环化、质粒的自身环化或目的基因的反向连接。
（3）要将锌转运蛋白基因插入到质粒的启动子和终止子之间，才能保证锌转运蛋白基因的表达。
（4）配置含适量Zn2+的（酵母菌）固体培养基、灭菌，分成a、b两半区域，a区接种涂布少量的缺陷型酵母，b区接种涂布少量的转化酵母，由于锌吸收缺陷型酵母增殖较慢，转化成功的酵母赋予了锌吸收特性后增殖较快，在适宜的条件下培养一段时间后，若b区有些菌落明显大于a区的菌落，则证明有转化成功的酵母。