四川省眉山市眉山中学2024-2025学年高二上学期12月期中生物试卷（Word版附解析）

这是一份四川省眉山市眉山中学2024-2025学年高二上学期12月期中生物试卷（Word版附解析），共20页。试卷主要包含了单选题，非选择题等内容，欢迎下载使用。
一、单选题
1. 下列说法正确的是（ ）
A. 北方冬小麦在冬天来临前，结合水的含量逐渐上升
B. 植物细胞有丝分裂末期形成细胞板和ATP转化为ADP的过程都会产生水
C. 通过被动运输方式转运的物质只能从高浓度溶液向低浓度溶液运输
D. 细胞进行主动运输的过程中不一定会消耗ATP
【答案】D
【解析】
【分析】物质跨膜运输的方式：
1、自由扩散：物质从高浓度到低浓度，不需要载体，不耗能，例如气体、小分子脂质；
2、协助扩散：物质高浓度到低浓度，需要膜转运蛋白的协助，不耗能，如葡萄糖进入红细胞；
3、主动运输：物质从低浓度到高浓度，需要载体蛋白的协助，耗能，如离子、氨基酸、葡萄糖等。
【详解】A、北方冬小麦在冬天来临前，生物的抗逆性增强，所以结合水的相对含量会增强，即结合水/自由水会上升，A错误；
B、ATP转化为ADP的过程属于水解过程，需消耗水，B错误；
C、水通过被动运输方式转运，水从水的相对含量高的一侧向相对含量低的一侧扩散，即从低浓度溶液向高浓度溶液扩散（运输），C错误；
D、细胞进行主动运输的过程中不一定会消耗ATP，主动运输利用的能量形式可以是光能，或离子的梯度化学能，或ATP，D错误。
故选D。
2. 下列说法正确的是（ ）
A. 减少化石燃料的大量使用能消除温室效应的形成
B. 硝化细菌是自养需氧型生物，其碳源是CO2，氮源是NH3，能源来自NH3的氧化
C. T4DNA连接酶可连接黏性末端和平末端，不具有专一性
D. 短杆菌合成短杆菌肽时需要线粒体提供能量
【答案】B
【解析】
【分析】硝化细菌是化能自养型微生物，其代谢类型为自养需氧型；乳酸菌为异养厌氧型生物；根瘤菌能固定N2，其代谢类型为异养需氧型；衣藻是光能自养型生物，其代谢类型为自养需氧型。
【详解】A、减少化石燃料的大量使用能减少二氧化碳的排放，因而能减缓温室效应的形成，A错误；
B、硝化细菌是自养需氧型生物，其碳源是CO2，氮源是NH3，能源来自NH3的氧化，为化能自养型生物，B正确；
C、T4DNA连接酶可连接黏性末端和平末端，依然具有专一性，C错误；
D、短杆菌为原核生物，其细胞中没有线粒体，D错误。
故选B。
3. 下列说法正确的是（ ）
A. 肺部细胞的遗传物质位于细胞核、结核分枝杆菌的遗传物质位于拟核
B. 控制蛋白质激素合成的遗传信息位于核仁中
C. 诱导多能干细胞分化成的多种细胞中核酸和蛋白质都不完全相同
D. 个体A提供卵母细胞，个体B提供细胞核，进行动物体细胞核移植得到的胚胎发育得到的组织移植到个体A或者B均不会发生免疫排斥
【答案】C
【解析】
【分析】动物和人体内少数具有分裂和分化能力的细胞称为干细胞，干细胞存在于早期胚胎、骨髓和脐带血等多种组织和器官中，包括胚胎干细胞和成体干细胞等。
【详解】A、肺部细胞的遗传物质主要位于细胞核中、结核分枝杆菌的遗传物质主要位于拟核中，A错误；
B、控制蛋白质激素合成的遗传信息位于细胞核中，B错误；
C、诱导多能干细胞分化成的多种细胞的过程是通过细胞分化实现的，该过程中基因进行了选择性表达，因此，RNA和蛋白质都不完全相同，但DNA不变，C正确；
D、个体A提供卵母细胞，个体B提供细胞核，进行动物体细胞核移植得到的胚胎发育得到的组织移植到个体B可能不会发生免疫排斥，因为该组织的绝大部分性状是由个体B提供的细胞核决定的，D错误。
故选C。
4. 下列说法正确的是（ ）
A. 为避免培育过程中的基因污染，可将外援a-淀粉酶基因与目的基因一起转入水稻中
B. 微生物、动物细胞培养基中需添加一定量的抗生素以防止污染
C. 粗提取的DNA溶于2ml/L的NaCl溶液中，加入二苯胺试剂后显蓝色
D. 向鸡血细胞液中加蒸馏水搅拌，课件玻璃棒上有白色絮状物
【答案】A
【解析】
【分析】NA粗提取和鉴定的原理：
1、DNA的溶解性：DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同（DNA在0.14ml/L的氯化钠中溶解度最低）；DNA不溶于酒精溶液，但细胞中的某些蛋白质溶于酒精；
2、DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性不同；
3、DNA的鉴定：在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色。
【详解】A、将外援a-淀粉酶基因与目的基因一起转入水稻中，由于a-淀粉酶基因可以阻断淀粉储藏使花粉失去活性，因而可以防止转基因花粉的传播，防止基因污染，A正确；
B、抗生素能杀死细菌，动物细胞培养基中需添加一定量的抗生素以防止污染，但是微生物的培养不需要加抗生素，防止将所需要培养的菌种杀死，B错误；
C、将析出的DNA溶解在2ml/L的NaCl溶液中，加入二苯胺试剂后需要沸水浴才会呈现蓝色，C错误；
D、向鸡血细胞液中加蒸馏水搅拌，可使破裂细胞，释放DNA，但不会观察到玻璃棒上有白色絮状物，D错误。
故选A。
5. 下列说法错误的是（ ）
A. 当所需微生物在混合菌种中不是优势种时，可通过稀释涂布平板法将其分离
B. 纤维素为唯一碳源的固体培养基中添加刚果红可以初步分离和鉴定纤维素分解菌
C. 当所选质粒上标记基因为氨苄青霉素抗性基因时，作为受体大肠杆菌应不含氨苄青霉素抗性基因，以便于筛选
D. 植物组织培养过程中将获得的外植体用75%的酒精和次氯酸钠溶液消毒
【答案】A
【解析】
【分析】实验室中筛选微生物的原理是：人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度、pH等），同时抑制或阻止其他微生物生长。选择培养的目的是增加目的菌的浓度，以确保能够从样品中分离得到所需要的微生物。刚果红可与纤维素形成红色复合物，但并不和纤维素水解后的纤维二糖和葡萄糖发生颜色反应；当纤维素被纤维素酶水解后，刚果红-纤维素复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，据此可筛选出纤维素分解菌。
【详解】A、稀释涂布平板法进行操作时，需要首先对菌液进行梯度稀释，当所需微生物在混合菌群中不
是优势中，稀释会进一步降低其密度，经涂布后很可能无法得到所需微生物的单菌落，A错误；
B、以纤维素为唯一碳源的固体培养基可以初步分离纤维素分解菌，培养基中添加刚果红可以鉴定纤维素分解菌，B正确；
C、氨苄青霉素抗性基因是重组质粒上的标记基因，用于筛选重组质粒的表达状况，所以作为受体的大肠杆菌不应含有氨苄青霉素抗性基因，以排除干扰，C正确；
D、外植体应先用75%的酒精消毒30s，然后用无菌水清洗2-3次，再用次氯酸钠溶液处理30min后，然后立即用无菌水清洗2-3次，D正确。
故选A。
6. 下列说法错误的是（ ）
A. 卵母细胞需培养成熟才可以与精子受精
B. 动物体细胞核移植过程中选择减二中期的卵母细胞有利于细胞核全能性的恢复
C. 移植后的囊胚进一步扩大，会导致滋养层破裂，胚胎从其中伸展出来
D. 胚胎移植的实质是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移
【答案】C
【解析】
【分析】1、胚胎移植的生理基础：
（1）供体与受体相同的生理变化，为供体的胚胎植入受体提供了相同的生理环境；
（2）胚胎在早期母体中处于游离状态，这就为胚胎的收集提供了可能；
（3）子宫不对外来胚胎发生免疫排斥反应，这为胚胎在受体内的存活提供了可能；
（4）胚胎遗传性状不受受体任何影响；
2、胚胎分割是指采用机械方法将早期胚胎切割成2等分、4等分或8等分等，经移植获得同卵双胚或多胚的技术，胚胎分割时需将囊胚的内细胞团均等分割。
【详解】A、卵母细胞需培养成熟（培养至减数第二次分裂中期）才可以与获能后的精子发生受精作用，A正确；
B、在动物体细胞核移植过程中，为了保证细胞核全能性的恢复，通常需要选择减数第二次分裂中期的卵母细胞，B正确；
C、囊胚进一步扩大，会导致透明带破裂，胚胎从其中伸展出来，这一过程叫做孵化，C错误；
D、胚胎移植中，受体对移入的外来胚胎基本上不会发生免疫排斥，所以不需要进行免疫学检测，胚胎移植的实质是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移，D正确。
故选C。
7. 下列关于发酵的说法，正确的是（ ）
A. 泡菜坛中素菜装量不能超过2/3，以防发酵液溢出
B. 盐水将菜料全部浸没的主要目的是用盐水杀死菜料表面的杂菌
C. 野樱莓酒发酵前，发酵瓶和榨汁机等需用体积分数为70%的酒精消毒
D. 发酵过程中需定期打开瓶盖，目的是及时排除酵母菌细胞呼吸产生的CO2
【答案】C
【解析】
【分析】参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。在有氧的情况下酵母菌生长繁殖速度快，把糖分解成二氧化碳和水。在无氧的环境中酵母菌把糖分解成酒精和二氧化碳。参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。
【详解】A、泡菜坛中素菜装量在2/3~4/5之间，其目的是防发酵液溢出，A错误；
B、盐水将菜料全部浸没的主要目的是为乳酸发酵制造无氧环境，B错误；
C、野樱莓酒发酵前，发酵瓶和榨汁机等需用体积分数为70%的酒精消毒，其目的是减少杂菌污染，C正确；
D、发酵过程中需定期拧松瓶盖，目的是及时排除酵母菌细胞呼吸产生的CO2，打开瓶盖会造成杂菌污染，D错误。
故选C。
8. 下列叙述正确的是（ ）
A. 采用体外受精技术获得紫羚羊胚胎的过程中涉及超数排卵
B. 胚胎分割技术提高了移植胚胎的成活率
C. 哺乳动物体外受精后的胚胎培养不需要额外提供营养物质
D. 通常采用培养法或化学诱导法使精子获得能量后进行体外受精
【答案】A
【解析】
【分析】动物细胞工程常用的技术手段有动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合、生产单克隆抗体等，其中动物细胞培养技术是其他动物工程技术的基础。
【详解】A、 采用体外受精技术获得紫羚羊胚胎的过程中涉及超数排卵，目的是获得更多的胚胎，A 正确；
B、胚胎分割可以获得多个胚胎，分割次数越多，分割后胚胎成活的概率越小， B 错误；
C、哺乳动物体外受精后的早期胚胎培养所需营养物质与体内基本相同，例如需要有糖、氨基酸、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然成分， C错误；
D、 精子获能是获得受精的能力，不是获得能量，D 错误。
故选A。
9. 关于“DNA的粗提取与鉴定”实验，下列说法错误的是（ ）
A. DNA的粗提取与鉴定实验不要求对实验结果精确定量
B. 过滤液沉淀过程在4℃冰箱中进行是为了防止DNA降解
C. 离心研磨液是为了加速DNA的沉淀
D. 动、植物细胞DNA的提取无需在无菌条件下进行
【答案】C
【解析】
【分析】DNA的粗提取与鉴定的实验原理是：
1、DNA的溶解性，DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的氯化钠溶液中的溶解度不同，利用这一特点可以选择适当浓度的盐溶液可以将DNA溶解或析出，从而达到分离的目的；
2、DNA不溶于酒精溶液，细胞中的某些蛋白质可以溶解于酒精，利用这一原理可以将蛋白质和DNA进一步分离；
3、在沸水浴的条件下DNA遇二苯胺会呈现蓝色。
【详解】A、DNA的粗提取与鉴定实验对实验结果不需要精确定量，只是定性，A正确；
B、低温时DNA酶的活性较低，过滤液沉淀过程在4℃冰箱中进行是为了防止DNA降解，B正确；
C、离心研磨液是为了使细胞碎片沉淀，而不是加速DNA沉淀，C错误；
D、动、植物细胞DNA的提取不需要在无菌条件下进行，D正确。
故选C。
10. 下列关于消毒灭菌的说法，错误的是（ ）
A. 用滤膜法收集大肠杆菌的实验中，过滤待测水样用到的滤杯、滤膜和滤瓶均需进行消毒处理
B. 植物组织培养过程中获得的外植体需进行消毒处理，之后的脱分化、再分化过程均需进行严格的灭菌处理。
C. 对实验室进行消毒的方法是紫外线
D. 可用湿热灭菌法对实验中所使用的微量离心管、细胞培养瓶等进行灭菌
【答案】A
【解析】
【分析】消毒是指使用较为温和的物理、化学或生物等方法杀死物体表面或内部一部分微生物，灭菌则是指使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。
【详解】A、 过滤待测水样用到的滤杯、滤膜和滤瓶首先需要进行消毒灭菌处理，保证实验不受其它微生物干扰，A错误；
B、植物组织培养过程中获得的外植体需进行消毒处理，之后的脱分化、再分化过程均需进行严格的灭菌处理，防止杂菌污染，B正确；
C、对实验室进行消毒的方法是紫外线，也可加上石炭酸辅助，C正确；
D、可用湿热灭菌法对实验中所使用的微量离心管、细胞培养瓶等进行灭菌，湿热灭菌常用的操作是高压蒸汽灭菌法，D正确。
故选A。
11. 下列关于胚胎工程的说法错误的是（ ）
A. 蛙胚胎发育中从环境中获得的氧气和营养物质逐渐增加
B. 蛙胚胎发育过程中细胞不断分裂，也会有细胞衰老凋亡
C. 哺乳动物胚胎干细胞是从动物胚胎发育至囊胚期的内细胞团或胎儿的原始性腺细胞中分离得到的一类细胞
D. 从通过基因工程获得的羊重组细胞到早期胚胎过程中所使用的胚胎工程技术是早期胚胎培养
【答案】A
【解析】
【分析】胚胎发育过程：卵裂期、桑椹胚、囊胚、原肠胚；细胞分化胚胎期达到最大限度。
【详解】A、在胚胎发育过程中，蛙的胚胎从环境中获得氧气，但营养物质主要来自于受精卵，A错误；
B、胚胎发育过程中，细胞不断分裂，同时也会发生细胞的的衰老和凋亡，B正确；
C、胚胎干细胞存在于早期胚胎中，具有分化成成年动物体内的任何一种类型的细胞，并进一步形成机体的所有组织和器官甚至个体的潜能，可以从囊胚期的内细胞团或胎儿的原始性腺中获取，C正确；
D、从羊重组细胞到早期胚胎的过程中，所使用的胚胎工程技术是早期胚胎培养，D正确。
故选A。
12. 下列关于哺乳动物胚胎发育和胚胎工程的叙述，正确的是（ ）
A. 卵裂期胚胎中细胞数目和有机物总量在不断增加
B. 胚胎分割时需将原肠胚的内细胞团均等分割
C. 胚胎干细胞具有细胞核大、核仁小和蛋白质合成旺盛等特点
D. 胚胎干细胞是一类未分化细胞，可从早期胚胎中分离获取
【答案】D
【解析】
【分析】
1、胚胎发育过程：
（1）卵裂期：细胞进行有丝分裂，数量增加，胚胎总体积不增加；
（2）桑椹胚：32个细胞左右的胚胎[之前所有细胞都能发育成完整胚胎的潜能属全能细胞；
（3）囊胚：细胞开始分化，其中个体较大的细胞叫内细胞团将来发育成胎儿的各种组织；而滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘；胚胎内部逐渐出现囊胚腔[注：囊胚的扩大会导致透明带的破裂，胚胎伸展出来，这一过程叫孵化；
（4）原肠胚：内细胞团表层形成外胚层，下方细胞形成内胚层，由内胚层包围的囊腔叫原肠腔。
2、进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚，对囊胚阶段的胚胎进行分割时要注意将内细胞团均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。
3、胚胎移植的意义：大大缩短了供体本身的繁殖周期，充分发挥雌性优良个体的繁殖能力。
4、胚胎干细胞的特点：具有胚胎细胞的特性，体积较小，细胞核大，核仁明显；在功能上，具有发育的全能性，可分化为成年动物任何一种组织细胞。另一方面，在体外培养条件下，ES细胞可不断增殖而不发生分化，可进行冷冻保存，也可以进行某些遗传改造。
【详解】A、卵裂期胚胎中细胞数目在不断增加，但有机物总量在减少，因为该过程中有机物不断被呼吸作用消耗，A错误；
B、胚胎分割时需将囊胚的内细胞团均等分割，避免影响分割后胚胎的恢复和进一步发育，B错误；
C、胚胎干细胞具有细胞核大、核仁大和蛋白质合成旺盛等特点，C错误；
D、胚胎干细胞是一类未分化细胞，可从早期胚胎或原始性腺中分离获取，具有发育的全能性，D正确。
故选D。
【点睛】
13. 为检测某药物X的抗癌活性， 在细胞培养板的每个孔中加入相同数量的肝癌细胞，使其贴壁生长，实验组加入溶于二甲基亚矾的药物X，培养 72小时后进行计数，比较实验组和对照组每个孔中细胞数目。下列有关叙述错误的是（ ）
A. 细胞培养液中通常需要加入血清等天然成分
B. 对照组中应加入等体积的无菌水， 其他条件一致
C. 可用胰蛋白酶处理使贴壁的肝癌细胞脱落下来并进行计数
D. 若实验组细胞数远低于对照组， 可初步判断此药物有抗癌效果
【答案】B
【解析】
【分析】1、分析题干可知：自变量是药物X，因变量是检测癌细胞数量。2、动物细胞培养的条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素，防止培养过程中的污染；③定期更换培养液，以便清除代谢废物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害。（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。（3）温度和pH。（4）气体环境：95%空气和5%的CO2(CO2的作用是维持培养液的pH)。
【详解】A、培养动物细胞时，细胞培养液中通常需要加入血清，A正确；
B、实验组加入等体积相同浓度的溶于二甲基亚矾（溶剂）的药物X，故对照组中应加入等体积的二甲基亚矾（溶剂），B错误；
C、对于已经贴壁生长的动物细胞，可用胰蛋白酶处理，使肝癌细胞脱落下来并进行计数，C正确；
D、分析实验结果可知，添加药物X的实验组肝癌细胞数目远低于对照组，可以初步判断药物X的抗癌效果较好，D正确。
故选B。
14. 动物细胞培养是动物细胞工程的基础。下列有关叙述正确的是（ ）
A. 一般选择幼龄动物的细胞培养，原因是其细胞分化程度低
B. 进行细胞传代培养时，细胞每传一代，细胞数目增加一倍
C. 传代培养前需用胰蛋白酶处理贴壁细胞，制成细胞悬液
D. 为保证无菌的环境，需要定期更换培养液，清除代谢物
【答案】C
【解析】
【分析】1、选用幼龄动物的器官或组织进行细胞培养，是因为幼龄动物的器官或组织的分裂能力强；
2、为保证无菌、无毒的环境，需要对培养液和培养用具进行灭菌处理及在无菌条件下操作，定期更换培养液。
【详解】A、选用幼龄动物的器官或组织进行细胞培养，是因为幼龄动物的器官或组织的分裂能力强，A错误；
B、细胞培养中每更换一次培养瓶算是传一代，并不是细胞分裂一次，B错误；
C、贴壁细胞会出现相互抑制现象，需用胰蛋白酶处理进行传代培养，C正确；
D、为保证无菌、无毒的环境，需要对培养液和培养用具进行灭菌处理及在无菌条件下操作，而不是更换培养液，定期更换培养液,其目的是便于清除代谢物,防止代谢物积累对细胞的毒害，D错误。
故选C。
15. 研究人员欲从自然发酵的传统腐乳中筛选出新的毛霉菌株改良腐乳风味。该过程需利用酪素培养基，其原理是在培养基中添加酪素，如果菌株能产生蛋白酶并分泌到胞外，则能将酪素降解形成透明圈（如图所示）。下表为8种毛霉菌株分别接种到酪素培养基培养后测得的H/C值（透明圈直径与菌落直径的比值）。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 毛霉菌株还能产生脂肪酶，将脂肪分解成一分子脂肪酸和三分子甘油
B. 该酪素培养基既是固体培养基也是选择培养基
C. 据表初步筛选出的具有高蛋白酶活力的菌株编号为③
D. 由于基因突变是随机的，筛选得到的优良菌株也可能发生品质退化
【答案】D
【解析】
【分析】毛霉属于真核生物，在腐乳制作的原理主要是利用毛霉等微生物产生的蛋白酶、脂肪酶的催化作用，蛋白质最终被水解为氨基酸，脂肪被水解为甘油和脂肪酸，再通过调味料的作用进而使腐乳具有独特的风味。
【详解】A、脂肪酶将脂肪分解成一分子甘油和三分子脂肪酸，A错误；
B、酪素培养基的原理是在培养基中添加酪素，如果菌株能产生蛋白酶并分泌到胞外，则能将酪素降解形成透明圈（如图），据此可将能够降解酪素的微生物鉴别出来，因此该培养基属于鉴别培养基，由于其上能长成菌落，因此从物理状态来看，该培养基属于固体培养基，B错误；
C、H/C值是透明圈直径与菌落直径的比值，该值越大说明毛霉降解蛋白质能力越强，据此初步筛选出的三种具有高蛋白酶活力的菌株编号为②⑤⑧，C错误；
D、由于基因突变是随机的，筛选得到的优良菌种也可能发生品质退化，D正确。
菌株编号
①
②
③
④
⑤
⑥
⑦
⑧
H/C值
3.75
5.8
1.50
433
5.42
3.08
3.90
5.33
故选D。
16. 采用CRISPR/Cas9 基因编辑技术可将增强型绿色荧光蛋白（EGFP）基因定点插入到受精卵的Y染色体上，获得转基因雄性小鼠。该转基因小鼠与野生型雌性小鼠交配，通过观察荧光可确定早期胚胎的性别。下列操作错误的是（ ）
A. 基因编辑处理的受精卵在体外培养时，不同发育阶段的胚胎需用不同成分的培养液
B. 基因编辑处理的受精卵经体外培养至2细胞期，须将其植入同期发情小鼠的子宫，才可获得表达 EGFP的小鼠
C. 分离能表达EGFP的胚胎干细胞，通过核移植等技术可获得大量的转基因小鼠
D. 通过观察早期胚胎的荧光，能表达 EGFP 的即为雄性小鼠胚胎
【答案】B
【解析】
【分析】分析题意可知，通过基因编辑技术将EGFP基因定点插入到受精卵的Y染色体上，使含有该Y染色体的小鼠能够发出绿色荧光，转基因鼠将Y染色体传递给子代的雄性个体，通过观察荧光可确定早期胚胎的性别。
【详解】A、依据胚胎在不同发育阶段对培养条件的特定需要，受精卵在体外培养时，不同发育阶段的胚胎需用不同成分的培养液，A正确；
B、基因编辑处理的受精卵一般经体外培养至桑椹胚或囊胚阶段，进行胚胎移植，可获得表达EGFP的小鼠，B错误；
C、分离能表达EGFP的胚胎干细胞，通过核移植、早期胚胎培养、胚胎移植等技术，可获得大量的转基因小鼠，C正确；
D、由分析可知，通过基因编辑技术将Y染色体用绿色荧光蛋白基因标记，通过观察早期胚胎的荧光，能表达EGFP的个体含有Y染色体，即为雄性小鼠胚胎，D正确。
故选B。
17. 某小组通过PCR（假设引物长度为8个碱基短于实际长度）获得了含有目的基因的DNA片段，并用限制酶进行酶切（下图），再用所得片段成功构建了基因表达载体。下列叙述错误的是（ ）
A. 其中一个引物序列为5＇TGCGCAGT-3＇
B. 步骤①所用的酶是SpeI和CfI
C. 用步骤①的酶对载体进行酶切，至少获得了2个片段
D. 酶切片段和载体连接时，可使用E．cli连接酶或T4连接酶
【答案】B
【解析】
【分析】E.cliDNA连接酶只能连接黏性末端；T4DNA连接酶既可连接平末端，又可连接黏性末端。
【详解】A、由于引物只能引导子链从5＇到3＇，根据碱基互补配对原则，其中一个引物序列为5＇TGCGCAGT-3＇，A正确；
B、根据三种酶的酶切位点，左侧的黏性末端是使用NheI切割形成的，右边的黏性末端是用CfI切割形成的，B错误；
C、用步骤①酶对载体进行酶切，使用了NheI和CfI进行切割，根据他们的识别位点以及原本DNA的序列，切割之后至少获得了2个片段，C正确；
D、图中形成的是黏性末端，而E.cliDNA连接酶只能连接黏性末端；T4DNA连接酶既可连接平末端，又可连接黏性末端，D正确。
故选B。
18. 早期胚胎细胞异常凋亡是目前克隆猪成功率低的主要原因，用实时荧光逆转录PCR技术（RT-qPCR）检测细胞凋亡抑制基因Bcl-2的表达水平，有助于了解胚胎发育不同时期Bcl-2表达水平与细胞凋亡的关系。下列说法错误的是（ ）
A. 对重组细胞进行培养时需加入血清、血浆等天然成分
B. 卵母细胞采集后，要在体外培养成熟再去核作为受体细胞
C. 根据RT-qPCR荧光强度可计算出基因Bcl-2在相应细胞中的翻译水平
D. 胚胎在受体子宫发育过程中，其遗传特性不受影响
【答案】C
【解析】
【分析】1、动物细胞核移植的概念：将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体．用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。
2、动物细胞核移植的原理：动物细胞核的全能性。
3、动物细胞核移植可分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植。体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植。原因：动物胚胎细胞分化程度低，恢复其全能性相对容易，动物体细胞分化程度高，恢复其全能性十分困难。
【详解】A、对重组细胞进行培养时,，其培养基的成分包括糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，通常需加入血清、血浆等天然成分，A正确；
B、采集的卵母细胞需培养到减数第二次分裂中期（MII中期）才能成熟，此时可以通过显微操作去除卵母细胞中的细胞核，再与供体的细胞核进行重组形成重组细胞，B正确；
C、用实时荧光逆转录PCR技术（RT-qPCR）检测细胞凋亡抑制基因Bcl-2的表达水平，逆转录是以RNA为模板，逆转录形成DNA，再用DNA进行扩增，通过PCR产物量的对数值与起始模板量（DNA）之间存在线性关系，推算出Bcl-2转录形成的RNA量，因此根据RT-qPCR荧光强度可计算出基因Bcl-2在相应细胞中的转录水平，C错误；
D、供体与受体具有相同的生理变化，子宫不会对外来胚胎发生免疫排斥反应，因此胚胎在受体子宫发育过程中，其遗传特性不受影响，D正确。
故选C。
19. THP9基因是野生玉米中控制高蛋白含量的优良基因，研究者利用基因工程技术将 THP9基因转到玉米
细胞内，从而获得转基因高蛋白玉米新品种。已知图中 THP9 基因转录的方向为从左往右。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 若采用PCR 技术对一个 THP9 基因进行扩增，则第n代复制共需要引物2ⁿ-1个
B. 构建基因表达载体时,用Mfe I 、HindⅢ切割质粒, 用 EcR I 、HindⅢ切割目的基因
C. 利用PCR 技术获取 THP9 基因时应选择引物1和引物4
D. PCR 过程中用到了缓冲液，缓冲液中一般要添加 Mg²⁺用于激活 RNA 聚合酶
【答案】B
【解析】
【分析】由图分析可知，要保证将目的基因切割下来，但是又不破坏目的基因，不能选择MfeⅠ切割目的基因，要保证质粒结构的完整性，不能选择BamHⅠ切割质粒。
【详解】A、开始的THP9基因只有一个，第n-1次结束后的基因有2n-1个，每个基因复制1次需要1对引物，第n次循环需要2n-1对引物，即2n个，A错误；
B、构建基因表达载体时，用Mfe Ⅰ、Hind Ⅲ切割质粒时，形成的黏性末端分别是AATT-3'和AGCT-3'，用EcR Ⅰ、Hind Ⅲ切割目的基因时，形成的黏性末端分别是AATT-3'和AGCT-3'，形成的黏性末端对应相同，可以成功将目的基因插入质粒，同时避免目的基因自身环化和反向连接，B正确；
C、利用PCR技术扩增基因时，引物从5'端朝着3'端延伸，故应与模板链3'端配对，故应选择引物2和引物3，C错误；
D、PCR的产物是DNA，所以在过程中用到了缓冲液，缓冲液中一般要添加Mg2+用于激活DNA聚合酶，D错误。
故选B。
20. 某研究小组利用转基因技术，将绿色荧光蛋白基因（GFP）整合到野生型小鼠Gata3基因一端，如图甲所示。实验得到能正常表达两种蛋白质的杂合子雌雄小鼠各1只，交配以期获得Gata3-GFP基因纯合子小鼠。为了鉴定交配获得的4只新生小鼠的基因型，设计了引物1和引物2用于PCR扩增，PCR产物电泳结果如图乙所示。

下列叙述错误的是（ ）
A. Gata3基因的启动子可以控制GFP基因的表达
B. 翻译时先合成Gata3蛋白，再合成GFP蛋白
C. 4号条带的小鼠是野生型，2号条带的小鼠是Gata3-GFP基因纯合子
D. 若用引物1和引物3进行PCR，能更好地区分杂合子和纯合子
【答案】D
【解析】
【分析】PCR技术是聚合酶链式反应的缩写，是一项根据DNA半保留复制的原理，在体外提供参与DNA复制的各种组分与反应条件，对目的基因的核苷酸序列进行大量复制的技术。
【详解】A、分析图中可知，启动子在编码区的左侧，GFP基因整合Gata3基因的右侧，启动子启动转录后，可以在Gata3基因转录后，使GFP基因转录，Gata3基因的启动子也能控制GFP基因的表达，A正确；
B、基因的转录和翻译均是从5′→3′，因启动子在左侧，转录和翻译方向均为从左向右，Gata3蛋白在GFP蛋白的左侧，所以翻译时先合成Gata3蛋白，再合成GFP蛋白，B正确；
C、整合GFP基因后，核酸片段变长，2号个体只有大片段，所以是Gata3-GFP基因纯合子，4号个体只有小片段，是野生型，C正确；
D、若用引物1和引物3进行PCR，杂合子和Gata3-GFP基因纯合子都能扩增出相应的片段则不能区分杂合子和纯合子，D错误。
故选D。
二、非选择题
21. 盐碱地蓬能生活在近海滩或者海水与淡水汇合的河口地区，它能在盐胁迫的逆境中正常生长，与其根部细胞独特的转运机制有关。如图是盐碱地蓬根细胞参与抵抗盐胁迫示意图（HKT1、AKT1、SOS1、NHX均为转运蛋白），请回答问题：

（1）盐碱地大多数植物难以生长的主要原因是_____。
（2）研究表明，Na+借助通道蛋白以_____方式大量进入根部细胞，同时抑制K+进入细胞，导致细胞中的Na+、K+比例异常，使得酶失活，影响蛋白质的合成从而影响植物生长。在此同时，根细胞会借助Ca2+调节转运蛋白的功能，进而调节细胞中的Na+、K+比例。由此推测，细胞质基质中的Ca2+对HKT1、AKT1作用依次为_____、_____（均选填“激活”或“抑制”），使细胞内蛋白质合成恢复正常。
（3）图示各结构中H+浓度分布存在差异，这种H+分布特点可以使根细胞将Na+协同转运到细胞膜外或液泡内。据图分析，该H+分布差异得以维持的原因是_____。
（4）若使用ATP抑制剂处理细胞，Na+排出量会明显减少，其原因是_____。
【答案】（1）土壤溶液浓度大于细胞液浓度，导致植物无法从土壤中获取到充足的水分
（2） ①. 协助扩散 ②. 抑制 ③. 激活
（3）在细胞膜和液泡膜上有H+-ATP泵，通过主动运输的方式来维持
（4）Na+的排出依靠的是H+顺浓度梯度的势能，维持H+的浓度差异需要消耗ATP
【解析】
【分析】分析题图，根细胞的细胞质基质中pH为7.5，而细胞膜外和液泡膜内pH均为5.5，细胞质基质中H+含量比细胞膜外和液泡膜内低，H+运输到细胞膜外和液泡内是逆浓度梯度运输，运输方式为主动运输。SOS1将H+运进细胞质基质的同时，将Na+排出细胞。NHX将H+运入细胞质基质的同时，将Na+运输到液泡内。
【小问1详解】
由于盐碱地含盐量高，土壤溶液浓度大于植物根部细胞细胞液浓度，导致植物无法从土壤中获得充足的水
分甚至萎蔫，大多数植物难以在盐碱地生长。
【小问2详解】
据题意可知，在高盐胁迫下，当盐浸入到根周围的环境时，Na+从高浓度的土壤溶液进入低浓度的细胞内，借助通道蛋白HKTI以协助扩散方式大量进入根部细胞；根据题意，蛋白质合成受影响是由于Na+大量进入细胞，K+进入细胞受抑制，导致细胞中Na+-K+的比例异常，使细胞内的酶失活而引起HKTl能协助Na+进入细胞，AKTl能协助K+进入细胞。要使细胞内的蛋白质合成恢复正常，则细胞质基质中的Ca2+抑制HKTI运输Na+、激活AKTl运输K+，使细胞中Na+/K+的比例恢复正常；同时，一部分离子被运入液泡内，导致细胞液的渗透压升高，促进根细胞吸水，从而降低细胞内盐的浓度。
【小问3详解】
在细胞膜和液泡膜上有H+-ATP泵，通过主动运输的方式来维持H+分布差异。
【小问4详解】
Na+的排出依靠的是H+顺浓度梯度的势能，维持H+的浓度差异需要消耗ATP，故使用ATP抑制剂处理细胞，Na+的排出量会明显减少。
22. 崂山湾位于山东省青岛市，是多种渔业生物的分布区。研究人员连续 3 年对崂山湾人工鱼礁区的生物资源和环境数据进行调查，发现其能量流动数据在 3 年中相对稳定，据此构建了该生态系统的能量流动模型（如图），为渔业管理提供了参考数据。
备注：数据单位为 t·km-2a-1；有机碎屑能量根据水体中溶解有机物和颗粒有机物的量进行估算。
（1）该生态系统由____以及非生物的物质和能量组成，能量流动沿着____进行。
（2）该生态系统中Ⅲ、Ⅳ营养级之间能量传递效率为____。
（3）分析图中数据可知，对营养级Ⅱ的捕捞量不宜再增加，理由是____。
（4）该生态系统中有机碎屑的能量可输入营养级Ⅱ，据此是否可认为该生态系统中能量可循环利用？请进行判断并说明理由。____
（5）根据图中 数据可初步判断该鱼礁区是处于生态平衡的系统，依据是____。
【答案】（1） ①. 生产者、消费者和分解者 ②. 食物链和食物网
（2）13.6% （3）营养级Ⅱ输入总能量为5322.8，呼吸消耗、传递给下一营养级和遗弃的总能量为 5235.4，其差值为87.4，与捕捞量大致相当
（4）不能。有机碎屑中的能量属于有机物中化学能，尚未被生物体通过细胞呼吸利用。
（5）该生态系统3年中组分和功能相对稳定，能量收支接近平衡
【解析】
【分析】一个营养级所同化的能量=呼吸散失的能量+被下一营养级同化的能量十分解者释放的能量。但对于最高营养级的情况有所不同，它所同化的能量=呼吸散失的能量+分解者分解释放的能量。
【小问1详解】
生态系统是一定区域的所有生物及无机环境，该生态系统由生产者、消费者和分解者以及非生物的物质和能量组成；能量流动的渠道是食物链和食物网。
【小问2详解】
能量传递效率是相邻两个营养级之间同化量的比值，该生态系统中Ⅲ、Ⅳ营养级之间能量传递效率为58.22/427.4×100%≈13.6%。
【小问3详解】
据图中数据分析可知，营养级Ⅱ输入总能量为5322.8，呼吸消耗、传递给下一营养级和遗弃总能量为 5235.4，其差值为87.4，与捕捞量大致相当。如果增加捕捞量会导致营养级Ⅱ生物量减少,破坏生态平衡，故对营养级Ⅱ的捕捞量不宜再增加。
【小问4详解】
由于有机碎屑中的能量属于有机物中化学能,尚未被生物体通过细胞呼吸利用，故不能认为该生态系统中能量可循环利用。
【小问5详解】
分析题意，该生态系统3年中组分和功能相对稳定,能量收支接近平衡，可初步判断该鱼礁区是处于生态平衡的系统。
23. 某牧场引进一只产肉性能优异的良种公羊，为了在短时间内获得具有该公羊优良性状的大量后代，该牧场利用胚胎工程技术进行了相关操作。回答下列问题，
（1）为了实现体外受精需要采集良种公羊的精液，精液保存的方法是____________。在体外受精前要对精子进行获能处理，其原因是____________；精子体外获能可采用化学诱导法，诱导精子获能的药物是___________（答出1点即可）。利用该公羊的精子进行体外受精需要发育到一定时期的卵母细胞，因为卵母细胞达到___________时才具备与精子受精的能力。
（2）体外受精获得的受精卵发育成囊胚需要在特定的培养液中进行，该培养液的成分除无机盐、激素、血清外，还含的营养成分有___________（答出3点即可）等。将培养好的良种囊胚保存备用。
（3）请以保存的囊胚和相应数量的非繁殖期受体母羊为材料进行操作，以获得具有该公羊优良性状的后代。主要的操作步骤是___________。
【答案】（1） ①. 冷冻保存 ②. 刚排出的精子必须在雌性生殖道内发生相应生理变化后才能获得受精能力 ③. 肝素或钙离子载体A23187 ④. MⅡ期
（2）维生素、氨基酸、核苷酸
（3）对受体母羊进行发情处理，合适的时间，将保存的囊胚移植入受体母羊的子宫
【解析】
【分析】试管动物技术是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精，并通过培养发育为早期胚胎后，再经移植后产生后代的技术。
【小问1详解】
精液可以冷冻保存，使用前再将精液解冻离心分离。刚排出的精子必须在雌性生殖道内发生相应生理变化后才能获得受精能力，故在体外受精前要对精子进行获能处理。通常采用的体外获能方法有培养法和化学诱导法，化学诱导法是将精子放在一定浓度的肝素或钙离子载体A23187溶液中，用化学药物诱导精子获能。卵母细胞需要培养到减数第二次分裂中期（MⅡ期）才能具备与精子受精的能力。
【小问2详解】
进行早期胚胎培养的培养液中，除了无机盐、激素、血清外，还含有维生素、氨基酸、核苷酸等。
【小问3详解】
要利用保存的囊胚和相应数量的非繁殖期受体母羊为材料，获得具有该公羊优良性状的后代，主要是利用胚胎移植技术，即对受体母羊进行发情处理，将保存的囊胚进行胚胎移植，对受体母羊进行是否妊娠的检查，一段时间后受体母羊产下具有该公羊优良性状的后代。
24. 某病毒对动物养殖业危害十分严重。我国学者拟以该病毒外壳蛋白A为抗原来制备单克隆抗体，以期快速检测该病毒，其主要技术路线如图所示。

回答下列问题：
（1）与小鼠骨髓瘤细胞融合前，已免疫的脾细胞（含浆细胞）_______（填“需要”或“不需要”）通过原代培养扩大细胞数量；添加脂溶性物质PEG可促进细胞融合，该过程中PEG对细胞膜的作用是______。
（2）在杂交瘤细胞筛选过程中，常使用特定的选择培养基（如HAT培养基），该培养基对_______和_______生长具有抑制作用。
（3）单克隆抗体筛选中，将抗体与该病毒外壳蛋白进行杂交，其目的是_________。
（4）构建重组质粒需要使用DNA连接酶。下列属于DNA连接酶底物的是_________。

【答案】（1） ①. 不需要
②. 使细胞接触处的磷脂分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合
（2） ①. 未融合的亲本细胞 ②. 融合的具有同种核的细胞
（3）通过抗体检测呈阳性来获得分泌所需抗体的杂交瘤细胞 （4）④
【解析】
【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。
【小问1详解】
浆细胞是高度分化的细胞，不能增殖，所以不需要通过原代培养扩大细胞数量。脂溶性物质PEG可使细胞接触处的磷脂分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。
【小问2详解】
在杂交瘤细胞筛选过程中，用特定的选择培养基进行筛选，在该培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具
有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞才能生长。
【小问3详解】
单克隆抗体筛选中，将抗体与该病毒外壳蛋白进行杂交，是运用了抗原-抗体杂交技术，抗体检测呈阳性的细胞，即为所需的杂交瘤细胞。
【小问4详解】
DNA连接酶能连接DNA片段，脱氧核苷酸的磷酸基团位于5'端，-OH位于3'端，①②③脱氧核苷酸链的两端基团有误；DNA连接酶能催化合成磷酸二酯键，即将一条脱氧核苷酸5'端的磷酸基团与另一条脱氧核苷酸链的3'端的-OH相连，④符合题意。
故选④。
25. 科学家研究嗜热土壤芽孢杆菌得出这种杆菌能产生β葡萄糖苷酶（BgIB），这是一种耐热纤维素酶，为了在工业生产中更好地应用，开展了以下试验，依题回答下列问题。
I.利用大肠杆菌表达BglB酶
（1）PCR扩增BgIB基因时，需要的条件有________（至少答3点）。

注：图中限制酶的识别序列及切割形成的黏性末端均不相同
（2）上图为质粒限制酶切图谱。BgIB基因不含图中限制酶识别序列。为使PCR扩增的BgIB基因重组进该质粒，扩增的BglB基因两端需分别引入____和______限制酶的识别序列。
（3）大肠杆菌不能降解纤维素，原因是_______，但转入上述构建好的表达载体后则获得了降解纤维素的能力，这是因为___________。
II.温度对BglB酶活性的影响
（4）据图1、2可知，80°C保温时间达到______分钟后，BglB酶会失活；为高效利用BgIB酶降解纤维素，反应温度最好控制在_______（单选）。
A.50°C B.60°C C.70°C D.80°C

注：酶的热稳定性是酶在一定温度下，保温一段时间后通过其活性的保持程度来反映的III.鉴定筛选出的大肠杆菌菌落中是否含有正确插入目的基因的重组质粒
（5）为鉴定筛选出的大肠杆菌菌落中是否含有正确插入目的基因的重组质粒，拟设计引物进行PCR鉴定。图3所示甲、乙、丙3条引物在正确重组质粒中相应位置，PCR鉴定时应选择的一对引物是___________。某学生尝试用图中另外一对引物，结果从某一菌落的质粒中扩增了400bp片段，原因是_____________________。

【答案】（1）目的基因、四种游离的脱氧核苷酸、引物、耐高温的DNA聚合酶
（2） ①. Nde I ②. BamH I
（3） ①. 不能产生分解纤维素的有关酶 ②. 转基因的大肠杆菌合成出有活性的BglB酶
（4） ①. 30 ②. B
（5） ①. 乙和丙 ②. 目的基因反向连接
【解析】
【分析】基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成；
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等，标记基因可便于目的基因的鉴定和筛选。
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法；
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因——DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA——分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质——抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。
【小问1详解】
PCR扩增BglB基因时，需要的条件有目的基因（扩增的模板）、四种游离的脱氧核苷酸（原料）、引物、耐高温的DNA聚合酶等。
【小问2详解】
用限制酶切割时，不能破坏质粒中的复制原点、启动子、终止子及标记基因（如抗生素抗性基因），而且要将目的基因插入启动子和终止子之间，Nde I、Xba I、BamH I符合条件，而Xba I的酶切位点在质粒中有两处，这样会影响目的基因插入的准确性，所以应选择Nde I和BamH I。目的基因的黏性末端应与质粒相同，所以扩增的BglB基因两端需分别引入Nde I和BamH I不同限制酶的识别序列。
【小问3详解】
大肠杆菌不能降解纤维素，是因为其不能产生分解纤维素的有关酶。导入目的基因后的大肠杆菌具有分泌BglB酶的能力，即可以降解纤维素，否则不能降解纤维素。
【小问4详解】
由图1可知，超过70°C，酶的活性随温度升高而降低，而在80°C时，酶的活性很低，长时间处于80°C，酶将失活，从图2得知，80°C保温时间达到30分钟后，相对活性为0；在60〜70°C范围内，酶的活性最高，但根据图2，在70°C时，随着反应时间的延长，酶的相对活性逐渐下降，因此为高效利用BglB酶降解纤维素，反应温度应控制在60°C，ACD错误，B正确。
故选B。
【小问5详解】
分析图3可知，理论上可以选择的引物组合有甲和丙、乙和丙两种。如果选择甲和丙这对引物，则无论目的基因是否正确插入，扩增的片段都是50bp+300bp+100bp=450bp，不符合要求；如果选择乙和丙这对引物，正向连接和反向连接后所得结果不同，所以应选择乙和丙这对引物进行PCR鉴定。如果目的基因和质粒反向连接，则引物乙会出现在重组质粒的外侧，此时若加入引物甲和乙，则可以扩增出300bp+100bp=400bp的片段。