还剩18页未读，
继续阅读
【生物】山东省微山县第二中学2018-2019学年高二下学期第二学段教学质量监测试卷 （解析版）
展开
山东省微山县第二中学2018-2019学年高二下学期
第二学段教学质量监测试卷
一、单项选择题
1.限制酶切割DNA时( )
A. 专一识别特定的核苷酸序列
B. 切断的是碱基对之间的氢键
C. 任意切割，没有特定的核苷酸序列
D. 识别多种核苷酸序列，但切口只有一个
【答案】A
【解析】
【分析】
有关限制酶，考生可以从以下几方面把握：
①主要从原核生物中分离纯化出来；②特异性:能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂；③结果：形成黏性末端或平末端。
【详解】限制酶能专一识别特定的核苷酸序列，A正确；限制酶使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，B错误；限制酶要识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，不能任意切割，C错误；限制酶切割时，能识别特定的核苷酸序列，并在特定位点切割，D错误。
2.下列有关DNA连接酶的叙述正确的是( )
①催化具有相同黏性末端的DNA片段之间连接
②催化具有不同黏性末端的DNA片段之间连接
③催化两个黏性末端互补碱基间氢键的形成
④催化脱氧核糖与磷酸之间的磷酸二酯键的形成
A. ①② B. ③④ C. ①④ D. ②③
【答案】C
【解析】
【分析】
DNA连接分为E.coliDNA连接酶和T4DNA连接酶，这二者都能连接粘性末端，此外T4DNA连接酶还可以连接平未端，但连接平末端时的效率比较低；DNA连接酶将断开的两个DNA片段的骨架连接起来，重新形成磷酸二酯键。
【详解】DNA连接酶可以催化具有相同的黏性末端的DNA片段之间连接，①正确、②错误；DNA连接酶催化脱氧核糖与磷酸之间的磷酸二酯键的形成，而两个黏性末端互补碱基间氢键的形成不需要DNA连接酶的催化，③错误、④正确。因此，正确的是①④，故选C。
【点睛】解答本题的关键是识记DNA连接酶的作用位置和作用特点，明确DNA连接酶作用是将两个断开的DNA片段连接起来，形成的是磷酸二酯键。
3.下图是两种限制酶识别并切割的DNA分子的特定核苷酸序列。有关说法正确的是( )
A. 二者的识别序列相同，切出的黏性末端相同
B. 二者的识别序列相同，切出的黏性末端不同
C. 二者的识别序列不同，切出的黏性末端相同
D. 二者的识别序列不同，切出的黏性末端不同
【答案】C
【解析】
【分析】
限制性核酸内切酶是可以识别特定的核苷酸序列，并在每条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键进行切割的一类酶，简称限制酶；经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。
【详解】限制酶BamHⅠ的识别序列为—GGATCC—，切出的黏性末端是—GATC—；限制酶BglⅡ的识别序列为—AGATCT—，切出的黏性末端是—GATC—，可见二者识别序列不同，切出的黏性末端相同，C正确。
4. 质粒是基因工程最常用的载体，下列关于质粒的说法正确的是( )
A. 质粒在宿主细胞内都要整合到染色体DNA上
B. 质粒是独立于细菌拟核DNA之外的小型细胞器
C. 基因工程操作中的质粒一般都是经过人工改造的
D. 质粒上碱基之间数量存A＋G＝U＋C
【答案】C
【解析】
试题分析：质粒只要能够在宿主细胞中复制并稳定保存即可，不一定都要整合到染色体DNA上；质粒是独立于细菌拟核DNA之外的小型环状DNA，故其碱基种类为A、G、C、T四种；ABD三项错误。为了使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，同时使目的基因能够表达和发挥作用，一般要在目的基因的手段插入启动子，尾端插入终止子，故答案选C。
考点：基因表达载体的构建
点评：本题重在考查学生的识记能力和理解能力，属于中档题。
5.下图为DNA分子在不同酶的作用下所发生的变化，图中依次表示限制性核酸内切酶、DNA聚合酶、DNA连接酶、解旋酶作用的正确顺序是( )
A. ①②③④ B. ①②④③
C. ①④②③ D. ①④③②
【答案】C
【解析】
【分析】
与DNA分子相关的酶作用及生理过程如图：
【详解】①项，图中为双链DNA分子形成黏性末端的过程。限制性内切酶可以识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，形成黏性末端或平末端，故①对应限制性内切酶。
②项，图中为黏性末端恢复成完整的双链DNA的过程。DNA连接酶可以恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键，将黏性末端连接起来，故②对应DNA连接酶。
③项，图中为双链DNA分子双链被解开的过程。解旋酶可以将DNA双链变成两条单链，故③对应解旋酶。
④项，图中为两条解旋的DNA链在模板链存在条件下，形成DNA双链的过程。DNA聚合酶可以以一条DNA链为模板，将单个核苷酸通过磷酸二酯键形成一条与模板链互补的DNA链，故④对应DNA聚合酶。
所以图中依次表示限制性内切酶、DNA聚合酶、DNA连接酶、解旋酶作用的顺序为①④②③，故本题正确答案为C。
6.下列获取目的基因的方法中需要模板链的是( )
①从基因文库中获取目的基因 ②利用PCR技术扩增目的基因 ③反转录法 ④通过DNA合成仪利用化学方法人工合成
A. ①②③④ B. ①②③ C. ②③④ D. ②③
【答案】D
【解析】
【分析】
获取目的基因的方法主要有两种：
(1)从供体细胞的DNA中直接分离基因，最常用的方法是"鸟枪法"；
(2)人工合成基因，这种方法有两条途径，一是以目的基因转录的信使RNA为模板，反转录成互补的单链DNA，再在酶的作用下合成双链DNA，即目的基因；另一条途径是根据蛋白质的氨基酸序列，推测出信使RNA序列，再推测出结构基因的核苷酸序列，然后用化学的方法以单核苷酸为原料合成。
【详解】从基因文库中获取目的基因不需要模板链，①错误；利用PCR技术扩増目的基因需要模板链，②正确；反转录法合成目的基因需要以mRNA为模板链，③正确；通过DNA合成仪利用化学方法人工合成目的基不需要模板链，④错误。
综上，本题符合题意的是②③，答案为D。
【点睛】本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理、工具及操作步骤，掌握获取目的基因的几种方法，能根据题干要求准确判断各选项，属于考纲识记层次的考查。
7. 植物学家在培育抗虫棉时，对目的基因作了适当的修饰，使得目的基因在棉花植株的整个生长发育期都表达，以防止害虫侵害。这种对目的基因所作的修饰发生在
A. 终止子 B. 标记基因 C. 结构基因 D. 启动子
【答案】D
【解析】
试题分析：在目的基因表达过程中的非编码区中有启动子，即RNA聚合酶结合位点，对目的基因的表达必须先有RNA聚合酶与之结合，才可转录来，所以D选项正确。
8.基因表达载体的构建所需的条件有（ ）
①同一种限制酶 ②具有某些标记基因的质粒 ③RNA聚合酶 ④目的基因 ⑤DNA
连接酶⑥启动子⑦终止子
A. ①②③④⑤⑥⑦ B. ①②④⑤⑥⑦
C. ②④⑥⑦ D. ①②④⑤
【答案】B
【解析】
【分析】
基因表达载体的构建(基因工程的核心)：
1、基因表达载体的构建过程：首先用相同的限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和运载体，再用DNA连接酶连接目的基因和运载体形成重组DNA分子；
2、目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在并且可以遗传给下一代并表达和发挥作用；3、基因表达载体的组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因；
(1)启动子在基因的首段,它是RNA聚合酶的结合位点,能控制着转录的开始；(2)终止子在基因的尾端,它控制着转录的结束；(3)标记基因便于目的基因的鉴定和筛选。
【详解】构建基因表达载体时,需要用同一种限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和运载体, ①正确；运载体要具有某些标记基因,便于筛选含有重组DNA分子的受体细胞, ②正确；RNA聚合酶能催化转录过程,而基因表达载体的构建过程不需要RNA聚合酶, ③错误；基因表达载体的组成中包括目的基因, ④正确；构建基因表达载体时,需要用DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成重组DNA分子，⑤正确；基因表达载体的组成中包括启动子, ⑥正确；基因表达载体的组成中包括终止子, ⑦正确。
综上，①②④⑤⑥⑦符合题意，答案为B。
9.目的基因导入受体细胞后，是否可以稳定维持和表达其遗传特性，只有通过鉴定和检测才能知道。下列属于目的基因检测和鉴定的是( )
①检测受体细胞是否有目的基因
②检测受体细胞是否有致病基因
③检测目的基因是否转录mRNA
④检测目的基因是否翻译蛋白质
A. ①②③ B. ②③④ C. ①③④ D. ①②④
【答案】C
【解析】
【分析】
目的基因的检测与鉴定：
1、分子水平上的检测
检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因：DNA分子杂交技术；
检测目的基因是否转录出了mRNA：分子杂交技术；
检测目的基因是否翻译成蛋白质：抗原-抗体杂交技术。
2.个体水平上的鉴定
抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。例:用虫食用棉花，观察其存活情况，来鉴定棉花是否具有抗虫特性。
【详解】检测受体细胞中是否有目的基因，可以利用DNA分子杂交技术，①正确；致病基因不属于目的基因, ②错误；检测目的基因是否转录出了mRNA可以利用分子杂交技术, ③正确；检测目的基因是否翻译成蛋白质可以利用抗原-抗体杂交技术, ④正确。
综上，①③④表述符合题意，所以C选项是正确的。
10.下列关于基因表达载体导入微生物细胞的叙述中，不正确的是( )
A. 常用原核生物作为受体细胞，是因为原核生物繁殖快，且多为单细胞，遗传物质相对较少
B. 受体细胞所处的一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态称为感受态
C. 感受态细胞吸收DNA分子需要适宜的温度和酸碱度
D. 感受态细胞吸收重组表达载体DNA分子的液体只要调节适宜的pH即可，没必要用缓冲液
【答案】D
【解析】
【分析】
感受态是指受体细胞经过特殊处理后，处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态，感受态细胞在吸收DNA分子时，需要将DNA分子溶于缓冲溶液中与感受态细胞混合，在一定温度下促进其吸收DNA分子，如果温度条件和酸碱度得不到保障的话，细胞的正常生理功能将受到影响。
【详解】相比多细胞的真核生物来讲，原核生物的繁殖速度更快，而且多为单细胞生物，结构简单，遗传物质也相对较少，便于操作，故A项正确；感受态是指受体细胞经过特殊处理后，处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态，故B项正确；感受态细胞在吸收DNA分子时，需要将DNA分子溶于缓冲溶液中与感受态细胞混合，在一定温度下促进其吸收DNA分子，如果温度条件和酸碱度得不到保障的话，细胞的正常生理功能将受到影响，故C项正确；调节pH时可以使用酸溶液、碱溶液或盐溶液。缓冲液通常是盐溶液，如果使用酸碱溶液调节感受态细胞所在环境的pH，会导致感受态细胞受到破坏，无法继续转化，而缓冲液的化学性质相对温和，在调节pH的同时也保障了细胞的正常生理活动，故D项错误。
综上，本题答案为D。
11. 在用基因工程技术构建抗除草剂的转基因烟草过程中，下列操作错误的是( )
A. 用限制性核酸内切酶切割烟草花叶病毒的核酸
B. 用DNA连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体
C. 将重组DNA分子导入烟草细胞
D. 用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞
【答案】A
【解析】
【分析】
限制性核酸内切酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取；②基因表达载体的构建；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与鉴定。
【详解】限制性核酸内切酶只能切割特定的脱氧核苷酸序列，而烟草花叶病毒的核酸是核糖核苷酸，A错误；构建基因表达载体时，需要用限制酶切割得到抗除草剂基因和切开运载体，再用DNA连接酶将两者连接形成重组DNA，B正确；基因表达载体构建好之后，需要将重组DNA分子导入受体细胞（烟草细胞），C正确；基因工程的最后一步是目的基因的检测和鉴定，可以用含有除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞，D正确。
【点睛】本题考查基因工程相关知识，包括基因工程的工具、操作步骤等知识点，相关内容不仅需要考生识记，还需要考生理解，特别是A选项，要求考生掌握限制酶的特点，明确限制酶只能切割特定的脱氧核苷酸序列，不能切割核糖核苷酸序列。
12.在判断抗虫基因是否成功转入棉花基因组的方法中，不属于分子检测的是( )
A. 通过观察害虫吃棉叶是否死亡
B. 检测目的基因片段与DNA探针能否形成杂交带
C. 检测目的基因转录形成的mRNA与DNA探针能否形成杂交带
D. 检测目的基因表达产物蛋白质能否与特定抗体形成杂交带
【答案】A
【解析】
A、通过观察害虫吃棉叶是否死亡，属于个体水平上的鉴定，A错误；
B、检测目的基因片段与DNA探针能否形成杂交带，采用的是DNA分子杂交技术，属于分子水平上的检测，B正确；
C、检测目的基因转录形成的mRNA与DNA探针能否形成杂交带，采用的是分子杂交技术，属于分子水平上的检测，C正确；
D、检测目的基因表达产物蛋白质能否与特定抗体形成杂交带，采用的是抗原-抗体杂交技术，属于分子水平上的检测，D正确。
【考点定位】基因工程的原理及技术
【名师点睛】目的基因的检测与鉴定：
（1）分子水平上的检测：
①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；
②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；
③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．
（2）个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等
13.转基因食品已大量进入我们的日常生活，如转基因西红柿、转基因草莓等，涉及的问题甚至关系到国家之间的贸易竞争，如图为“霸占中国市场的转基因大豆油”的部分图示。下列关于转基因大豆的叙述不正确的是( )
A. 培育过程中可能用到抗病、抗虫等抗性基因
B. 目的基因的受体细胞可以是大豆受精卵，也可以是体细胞
C. 转基因大豆的种植过程中减少了农药等的使用量，生产成本更低
D. 固氮菌的固氮基因也是必需的目的基因之一
【答案】D
【解析】
豆科植物可与含固氮基因的根瘤菌共生，故固氮基因并非必需的目的基因。
14. 上海医学遗传研究所成功培育出第一头携带白蛋白的转基因牛，还研究出一种可大大提高基因表达水平的新方法，使转基因动物乳汁中的药物蛋白含量提高30多倍，转基因动物是指（ ）
A. 提供基因的动物 B. 基因组中增加外源基因的动物
C. 能产生白蛋白的动物 D. 能表达基因信息的动物
【答案】B
【解析】
试题分析：转基因动物是接受目的基因的动物，而不是提供基因的动物，A错误；把供体的特定基因导入受体的基因组，使受体动物含有供体的基因，这样的受体动物就是转基因动物，B正确；供体细胞内也有白蛋白基因，转基因动物是受体动物，C错误；供体和受体都具有相关基因，都能表达基因信息，D错误。
考点：基因工程
15.1976年，美国的H·Boyer教授首次将人的生长抑制素释放因子的基因转入大肠杆菌体内，并获得表达，这是人类第一次获得的转基因生物。上述的“表达”是指该基因在大肠杆菌体内( )
A. 能进行DNA的复制 B. 能进行转录
C. 能合成人的生长激素 D. 能控制合成人的生长抑制素释放因子
【答案】D
【解析】
【分析】
将人的生长抑制素释放因子的基因转入大肠杆菌体内，并获得表达，这里目的基因是人的生长抑制素释放因子的基因，受体细胞是大肠杆菌，表达是指该基因在大肠杆菌体内合成人的生长抑制素释放因子。
【详解】这里的“表达”是指该基因在大肠杆菌体内合成人的生长抑制素释放因子，而不是进行DNA的复制，A错误；基因表达包括转录和翻译两个步骤，B错误；人的生长抑制素释放因子的基因表达产生的是人的生长抑制素释放因子，而不是生长激素，C错误；人的生长抑制素释放因子的基因表达是指合成人的生长抑制素释放因子，D正确。
16.下列不属于利用基因工程技术制取的药物是( )
A. 从大肠杆菌体内制取白细胞介素 B. 在酵母菌体内获得干扰素
C. 利用青霉菌获取青霉素 D. 在大肠杆菌内获得胰岛素
【答案】C
【解析】
【分析】
基因工程制药的实质是先用基因工程的方法将药物基因导入微生物细胞(如大肠杆菌、酵母菌等)中，并使该基因得到高效率表达产生药物，然后通过培养在培养液中提取药物的一种技术。
【详解】利用基因工程生产的人类蛋白药物有红细胞生长素、白细胞介素、干扰素、胰岛素等，A、B、D均属于利用基因工程技术制取的药物；青霉菌自身含有控制青霉素合成的基因，不需导入，高产青霉菌是利用诱变育种获得的，而不是基因工程育种，C符合题意。
17. 要合成自然界中不存在的蛋白质首先应设计( )
A. 基因结构 B. mRNA结构
C. 氨基酸序列 D. 蛋白质结构
【答案】D
【解析】
试题分析：应从蛋白质预期的功能出发设计蛋白质的结构，然后再推导出氨基酸序列合成其相关基因，故D正确。A、B、C都是蛋白质工程中的步骤但都不是第一步，故错误。
考点：本题考查蛋白质工程相关知识，意在考察考生对知识点的理解掌握程度。
18.蛋白质工程中对蛋白质分子进行设计时，主要包括哪几种( )
①进行少数氨基酸的替换
②对不同来源的蛋白质的拼接
③从预期蛋白质的功能出发去推测氨基酸排列顺序
④直接改变蛋白质的空间结构
A. ①② B. ①②③ C. ②③④ D. ①②④
【答案】B
【解析】
【分析】
1、蛋白质工程指以蛋白质的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行基因改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需要。
2、蛋白质工程的基本途径：从预期的蛋白质功能出发，设计预期的蛋白质结构，推测应有的氨基酸序列，找到相对应的脱氧核苷酸序列(基因)以上是蛋白质工程特有的途径。
【详解】对已知结构的蛋白质进行少数氨基酸的替换,属于蛋白质工程中的分子设计, ①正确；对不同来源的蛋白质分子进行拼接组装属于蛋白质工程, ②正确；从预期蛋白质的功能出发去推测氨基酸排列顺序,属于蛋白质工程的基本途径, ③正确；因为蛋白质分子通常较大,直接改变蛋白质的空间结构不易操作,因此蛋白质工程是在基因的水平上实现的, ④错误。
综上，①②③符合题意，所以B选项是正确的。
19. 蛋白质工程的流程是
A. 基因→表达→形成氨基酸序列的多肽链→形成具有高级结构的蛋白质→行使生物功能
B. 对蛋白质进行分子设计→改造蛋白质分子→行使功能
C. 蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相应的脱氧核苷酸序列
D. 蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→合成相应mRNA
【答案】C
【解析】
试题分析：根据中心法则逆推以确定目的基因的碱基序列：预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有氨基酸序列→找到对应的脱氧核苷酸序列（基因）。
考点：蛋白质工程
【名师点睛】蛋白质工程的过程：根据中心法则逆推以确定目的基因的碱基序列：预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有氨基酸序列→找到对应的脱氧核苷酸序列（基因）；最终还是回到基因工程上来解决蛋白质的合成。
20.按操作目标，使用下列试剂生物处理组织细胞恰当的是 （ ）
A. 观察植物细胞的有丝分裂：果胶酶
B. 处理用于细胞融合的动物细胞：胰蛋白酶
C. 处理用于细胞融合的动物细胞：CaCl2
D. 处理用于细胞融合的植物细胞：盐酸
【答案】B
【解析】
【分析】
植物细胞工程中用纤维素酶和果胶酶去壁获得原生质体；进行动物细胞传代培养时用胰蛋白酶分散细胞；诱导动植物细胞融合的方法有物理法(电激等)、化学法(聚乙二醇PEG)，诱导动物细胞融合还有生物法(灭活的病毒)等。
【详解】观察植物细胞的有丝分裂需要用解离液，果胶酶用于植物细胞工程中去除细胞壁获得原生质体，A错误；进行动物细胞传代培养时用胰蛋白酶分散细胞，B正确；诱导动物细胞融合的方法有物理法(电激等)、化学法(聚乙二醇PEG)、生物法(灭活的病毒)等，C错误；诱导植物细胞融合的方法有物理法(电激等)、化学法(聚乙二醇PEG)，D错误。
【点睛】本题考查动物细胞与组织培养过程；观察细胞的有丝分裂；细胞融合的概念及方法。
21. 动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的是
A. 两者的基本原理相同，诱导融合的方法也完全相同
B. 两者都可以使远缘杂交成为可能
C. 所用的技术手段完全相同
D. 目前已实现了两个植物物种间的杂交，并使它们的性状全部得以体现
【答案】B
【解析】
试题分析：动物细胞融合的原理是细胞膜的流动性，植物体细胞杂交的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性，诱导融合方法基本相似，植物体细胞杂交一般不用灭火的病毒，故A错误；两者都可以实现种间的杂交，克服了远缘杂交不亲和的障碍，故B正确；动物细胞融合所用的诱导融合方法主要有物理法、化学法和灭火的病毒，而植物体细胞杂交的诱导方法主要有物理法和化学法，故C错误；植物体细胞杂交已经实现了种间或属间的杂交，但不一定能同时表达两种生物的性状。
考点：本题考查动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。
22.下列关于植物组织培养和动物细胞培养的相关叙述中，正确的是（ ）
A. 动物细胞培养的原理是细胞增殖
B. 动物细胞培养过程也需要进行脱分化处理
C. 目前利用动物细胞培养技术已能产生新的动物个体
D. 植物组织培养要用一定的方法将细胞分散开来
【答案】A
【解析】
【分析】
植物组织培养和动物细胞培养的比较:
比较项目
植物组织培养
动物细胞培养
原理
细胞的全能性
细胞增殖
培养基性质
固体培养基
液体培养基
培养基成分
营养物质(蔗糖)、植物激素等
营养物质(葡萄糖)、动物血清等
培养结果
植物体
细胞株、细胞系
培养目的
快速繁殖、培育无毒苗等
获得细胞或细胞产物
【详解】A、动物细胞培养的原理是细胞增殖，A正确；
B、动物细胞培养过程不需要进行脱分化处理，B错误；
C、目前利用动物细胞培养技术只能获得细胞或细胞产物，C错误；
D、植物组织培养不需要将细胞分散开来,D错误。
所以本题答案为A选项。
23. 动物细胞培养的正确过程是（ ）
A. 原代培养—传代培养—细胞株—细胞系
B. 原代培养—传代培养—细胞系—细胞株
C. 传代培养—细胞系—原代培养—细胞株
D. 原代培养—细胞株—传代培养—细胞系
【答案】A
【解析】
原代培养在先，传代培养在后；细胞传至50代前为细胞株，50代以后带有癌变特点的传代细胞为细胞系。
24. 在动物细胞培养过程中遗传物质一定发生改变的细胞是( )
A. 原代培养细胞
B. 传代培养10-50代的细胞
C. 传代培养10代以内细胞
D. 传代培养超过50代以上的细胞
【答案】D
【解析】
试题分析：原代培养的细胞具有继续增殖能力，遗传物质一般不发生改变，故A错。传代培养10-50代的细胞增殖减慢，部分细胞细胞核变化，不一定遗传物质改变，故B错。传代培养10代以内的细胞，细胞核型不变，遗传物质一般不变，故C错。传代培养超过50代以上的细胞，部分细胞癌变，故D正确。
考点：本题考查动物细胞培养相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构能力。
25. 在进行课题研究时，甲、乙、丙、丁四位同学所采用的方法中错误的是（ ）
A. 甲用酶解法去除植物细胞的细胞壁
B. 乙用青蛙的血清来配制小鼠细胞的培养液
C. 丙用化学法诱导原生质体的融合
D. 丁用体外培养法制备单克隆抗体
【答案】B
【解析】
试题分析：去除植物细胞的细胞壁可采用酶解法（纤维素酶和果胶酶），A正确；配制小鼠细胞的培养液应该加入小鼠的血清，B错误；诱导原生质体融合的方法包括物理法（离心、诊断、电刺激）和化学法（聚乙二醇），C正确；制备单克隆抗体的方法包括体外培养法和体内培养法，D正确。
考点：植物体细胞杂交
26. 下列关于生物工程的叙述中，错误的是 （ ）
A. 在培养根尖细胞形成愈伤组织的过程中，细胞会脱分化，同时可能可能发生染色体变异
B. 试管婴儿技术包括人工受精、胚胎体外培养和胚胎移植三个方面
C. 单克隆抗体的制备采用了动物细胞融合技术和动物细胞培养技术
D. 经细胞核移植培育出的新个体只具有一个亲本的遗传性状
【答案】D
【解析】
试题分析：在培养根尖细胞形成愈伤组织的过程中，细胞会脱分化，同时可能可能发生染色体变异，Ａ是正确；试管婴儿技术包括人工受精、胚胎体外培养和胚胎移植三个方面，Ｂ正确；单克隆抗体的制备采用了动物细胞融合技术和动物细胞培养技术,Ｃ正确；经细胞核移植培育出的新个体不单具有一个亲本的遗传性状，Ｄ错误。
考点：本题考查选修的相关知识，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。
27. 下面关于植物细胞工程的叙述，不正确的是
A. 叶肉细胞脱分化后可形成无定形状态的薄壁细胞
B. 愈伤组织的形成必须从培养基中获得水、无机盐和维生素等营养物质
C. 植物体细胞融合必须先制备原生质体
D. 常利用植物体细胞杂交技术获得人工种子
【答案】D
【解析】
试题分析：植物细胞脱分化后形成愈伤组织，即无定形状态的薄壁细胞，故A正确。愈伤组织离体细胞的脱分化形成的，必须依赖于培养基提供水、无机盐和维生素等营养物质，故B正确。植物体细胞融合必须先去掉细胞壁，即制备原生质体，故C正确。人工种子是以植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料，经过人工薄膜包装得到的种子，故D错误。
考点：本题考查植物细胞工程相关知识，意在考察考生对知识点的识记理解程度。
28.在植物体细胞杂交实验中，如果要获得性状优良的作物新品种，可以不考虑（ ）
A. 两种高等植物间的生殖隔离
B. 选择具有期望的某些优良性状的亲本
C. 亲本细胞的融合技术
D. 愈伤组织形成和再分化
【答案】A
【解析】
试题分析：植物体细胞杂交能克服远缘杂交不亲和的障碍，故不需考虑两种高等植物间的生殖隔离，A错误。培育优良品种需要选择具有优良性状的亲本，B正确。植物体细胞杂交需要用到亲本细胞的融合技术和植物组培技术，C正确。植物组培过程包括脱分化形成愈伤组织和再分化两步骤，D正确。
考点：本题考查植物体细胞杂交的相关知识，意在考查考生运用所学知识与观点，通过比较、分析与综合等方法对相关生物学问题进行解释、推理，做出合理判断或得出正确结论的能力。
29.在应用农杆菌侵染植物叶片获得转基因植株常规实验步骤中，不需要的是（ ）
A. 用携带目的基因的农杆菌侵染植物细胞
B. 用选择培养基筛法导入目的基因的细胞
C. 用聚乙二醇诱导转基因细胞的原生物质融合
D. 用适当比例的生长素和细胞分裂素诱导愈伤组织生芽
【答案】C
【解析】
【分析】
基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取；②基因表达载体的构建；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与鉴定。
农杆菌特点：易感染双子叶植物和裸子植物，对单子叶植物没有感染力；Ti质粒的T-DNA可转移至受体细胞，并整合到受体细胞的染色体上。
【详解】用携带目的基因的农杆菌侵染植物细胞属于基因工程中目的基因的导入步骤，A正确；目的基因导入受体细胞后需要筛选出含有目的基因的细胞，B正确；农杆菌侵染植物叶片获得转基因植株的过程不需要诱导原生质体融合，C错误；利用不同比例的生长素和细胞分裂素，可以诱导愈伤组织形成不定根或不定芽，D正确；故选C。
【点睛】本题考查了基因工程的相关知识，要求考生能够识记基因工程的操作步骤以及操作工具；明确农杆菌转化法在植物基因工程中的应用；并能够掌握植物组织培养技术的过程等知识。
30.下列技术或方法与原理相符的是（ ）
A. 人参细胞的大量培养和动物细胞培养——细胞增殖
B. 植物组织培养和单克隆抗体的制备——细胞的全能性
C. 早期胚胎培养和人鼠细胞融合——细胞膜的流动性
D. 转基因抗虫棉和克隆羊多利的培育——基因重组
【答案】A
【解析】
【分析】
细胞的全能性指高度分化的细胞仍然具有发育成完整个体的潜能；植物的组织培养是将离体的细胞培养成植株的过程，体现细胞的全能性；单克隆抗体的制备过程没有将细胞培养成个体，其原理属于细胞增殖；早期胚胎培养进行的是有丝分裂，没有体现细胞膜的流动性；人鼠细胞融合涉及细胞膜的融合过程，故体现细胞膜的流动性这一结构特点；转基因抗虫棉的培育利用的是基因工程技术，其原理是基因重组；克隆羊多利的培育运用的是核移植技术，其原理是动物细胞核的全能性。
【详解】人参细胞培养和动物细胞的培养中细胞要进行有丝分裂，故体现了细胞增殖这一原理，A项正确；植物的组织培养是将离体的细胞培养成植株的过程，体现细胞的全能性，单克隆抗体的制备过程没有将细胞培养成个体，其原理属于细胞增殖，B项错误；早期胚胎培养进行的是有丝分裂，体现了细胞的增殖能力，没有体现膜的流动性，人鼠细胞融合体现了细胞膜的流动性，C项错误；转基因抗虫棉的培育是基因工程，原理是基因重组，克隆羊多利的培育是核移植，胚胎移植，无基因重组，D项错误。
二、非选择题
31.某研究小组进行了甲型H1N1流感病毒的疫苗研制工作，如图为他们前期研究工作的简要操作流程图：
(1)实验步骤①所代表的反应过程是________；在步骤②之间扩增H基因常采用的方法是___________。
(2)步骤②构建重组表达载体A和重组表达载体B必须使用的酶是____________。
(3)构建重组表达载体时，一般需要将H基因与载体结合，常用作基因工程载体的是________；在检测受体细胞中是否已经导入目的基因时，常常要借助载体上________的表达。
【答案】 (1). 逆转录 (2). PCR(或多聚酶链式反应)技术 (3). 限制性核酸内切酶和DNA连接酶 (4). 质粒(或病毒) (5). 标记基因(或抗生素抗性基因)
【解析】
【分析】
基因工程：按照人们的意愿，把一种生物的个别基因复制出来，加以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞里，定向地改造生物的遗传性状；基因工程的步骤：①提取目的基因，②目的基因与运载体结合（形成重组DNA分子），③将重组DNA分子导入受体细胞，④目的基因的表达与检测；基因工程技术的关键是构建基因表达载体，它使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以传给下一代，同时使目的基因表达并发挥作用；基因工程中限制性核酸内切酶和DNA连接酶是构建重组质粒必需的工具酶。
【详解】（1）实验步骤①RNA→DNA所代表的反应过程是逆转录；在步骤②之前扩增H基因常采用的方法是PCR技术(或多聚酶链式反应技术)；
（2）需要限制酶来切割以获取目的基因，同时需要相同的限制酶切割运载体以获取与目的基因相同的黏性末端，再通过DNA连接酶连接目的基因和运载体，故步骤②构建重组表达载体A和重组表达载体B必须使用的酶是限制酶(限制性内切酶)和DNNA连接酶；
（3）构建重组表达载体时，一般需要将H基因与载体结合，常用做基因工程载体的是质粒(或病毒)；在检测受体细胞中是否已经导入目的基因时，常常要借助载体上标记基因(或抗生素抗性基因)的表达。
【点睛】本题考查基因工程原理及基本过程，难度较小，要求学生掌握相关的基础知识。
32.马铃薯是种植广泛的农作物，病毒侵染后导致产量大幅下降，培育脱毒和抗毒的马铃薯品种是提高产量的有效方法。请分析并回答。
(1)马铃薯茎尖病毒极少甚至无病毒，因此可将马铃薯茎尖接种在培养基中，培养基中添加生长素和细胞分裂素，诱导离体细胞经过_______________和_____________完成组织培养过程，从而形成脱毒苗。此过程说明植物细胞具有________________。
(2)为获得抗病毒的马铃薯植株，往往采用转基因技术，将病毒复制酶基因转移到马铃薯体内。其过程大致如下图所示。
①上述过程中，将目的基因导入马铃薯细胞使用了______________法。导入农杆菌时，首先要构建基因表达载体，这里需要的工具酶有___________和__________，还要用________处理土壤农杆菌，使之转变为感受态，然后将它们在缓冲液中混合培养以完成转化过程。目的基因导入马铃薯细胞后，是否可以稳定维持和表达，要通过检测与鉴定，马铃薯的DNA上是否插入了目的基因的检测方法是____________________,目的基因是否转录出了mRNA的检测方法是__________________，目的基因是否翻译成蛋白质的检测方法是____________；通过做抗病毒接种实验，可以检测马铃薯是否具有抗病毒的特性，属于________水平的检测。
②该转基因马铃薯产生的配子中____________(填“一定”或“不一定”)含有目的基因。
【答案】 (1). 脱分化 (2). 再分化 (3). 全能性 (4). 农杆菌转化法 (5). 限制性核酸内切酶(限制酶) (6). DNA连接酶 (7). Ca2＋ (8). DNA分子杂交技术 (9). 分子杂交技术 (10). 抗原——抗体杂交技术 (11). 个体 (12). 不一定
【解析】
【分析】
农杆菌转化法的转化过程：目的基因插人Ti质粒的T-DNA上→转入农杆菌→导入植物细胞→目的基因整合到植物细胞染色体上→目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达。
目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因：DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA：分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质：抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。
【详解】(1)植物组织培养过程需经过脱分化和再分化两个过程,通过这一技术将离体的植物组织细胞培育成一个个体，体现了植物细胞的全能性。
(2)①将外源基因导入植物体内用农杆菌转化法。该方法先将目的基因插入到农杆菌Ti质粒的T-DNA上,然后通过农杆菌的转化作用,使目的基因进入植物细胞并插入到植物细胞的染色体DNA上。导入农杆菌时,首先要构建基因表达载体,这里需要的工具酶有限制性核酸内切酶和DNA连接酶,还要用Ca2+处理土壤农杆菌,使之转变为感受态,使外源基因容易导入。目的基因导入马铃薯细胞后，可通过DNA分子杂交技术检测马铃薯的DNA上是否插入了目的基因，可通过分子杂交技术检测目的基因是否转录出了mRNA；可通过抗原—抗体杂交技术检测目的基因是否翻译成蛋白质；还可通过做抗病毒接种实验，可以检测马铃薯是否具有抗病毒的特性，属于个体水平的检测。
②因为在形成配子时同源染色体分离,配子中染色体数目减半,所以不一定会存在导入的目的基因。
【点睛】本题考查基因工程的操作及检测和鉴定方法。要求学生熟练掌握不同类型生物目的基因导入方法，以及目的基因的检测和鉴定方法。
33.1975年科学家首次利用B淋巴细胞杂交瘤技术制备出单克隆抗体。请根据图回答问题：
(1)制备单克隆抗体所用的B淋巴细胞一般从脾中采集，然后以__________________作诱导剂，使B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合。通过筛选和克隆培养，获得的杂交瘤细胞具有的特点是：______________________________________________________。
(2)单克隆抗体的特点是____________________________________。
【答案】 (1). 灭活的仙台病毒或聚乙二醇 (2). 既能产生特异性抗体，又能无限增殖 (3). 特异性强，纯度高(或：专一性强、灵敏度高)
【解析】
【分析】
诱导动物细胞融合,常用的诱导剂有灭活的仙台病毒或聚乙二醇；杂交瘤细胞具有B淋巴细胞和骨髓瘤细胞的遗传信息,故杂交瘤细胞的特点是既能无限增殖,又能产生特异性抗体；从选择培养基中获得能产生所需抗体的杂交瘤细胞后,可以通过体外培养或注射到小鼠腹腔中,获得单克隆抗体。单克隆抗体的优点是特异性强（专一性强）,灵敏度高,并可大量制备。
【详解】(1)诱导动物细胞融合时,常用的诱导剂有灭活的仙台病毒或聚乙二醇；融合后的杂交瘤细胞具有骨髓瘤细胞无限增殖的特点,又具有B淋巴细胞能产生特异性抗体的特点。
（2）单克隆抗体的优点是特异性强（专一性强）,灵敏度高,并可大量制备。
【点睛】本题考查单克隆抗体的制备及特点，本题要注意的是区别动物细胞融合、植物细胞融合的常用诱导剂。
第二学段教学质量监测试卷
一、单项选择题
1.限制酶切割DNA时( )
A. 专一识别特定的核苷酸序列
B. 切断的是碱基对之间的氢键
C. 任意切割，没有特定的核苷酸序列
D. 识别多种核苷酸序列，但切口只有一个
【答案】A
【解析】
【分析】
有关限制酶，考生可以从以下几方面把握：
①主要从原核生物中分离纯化出来；②特异性:能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂；③结果：形成黏性末端或平末端。
【详解】限制酶能专一识别特定的核苷酸序列，A正确；限制酶使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，B错误；限制酶要识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，不能任意切割，C错误；限制酶切割时，能识别特定的核苷酸序列，并在特定位点切割，D错误。
2.下列有关DNA连接酶的叙述正确的是( )
①催化具有相同黏性末端的DNA片段之间连接
②催化具有不同黏性末端的DNA片段之间连接
③催化两个黏性末端互补碱基间氢键的形成
④催化脱氧核糖与磷酸之间的磷酸二酯键的形成
A. ①② B. ③④ C. ①④ D. ②③
【答案】C
【解析】
【分析】
DNA连接分为E.coliDNA连接酶和T4DNA连接酶，这二者都能连接粘性末端，此外T4DNA连接酶还可以连接平未端，但连接平末端时的效率比较低；DNA连接酶将断开的两个DNA片段的骨架连接起来，重新形成磷酸二酯键。
【详解】DNA连接酶可以催化具有相同的黏性末端的DNA片段之间连接，①正确、②错误；DNA连接酶催化脱氧核糖与磷酸之间的磷酸二酯键的形成，而两个黏性末端互补碱基间氢键的形成不需要DNA连接酶的催化，③错误、④正确。因此，正确的是①④，故选C。
【点睛】解答本题的关键是识记DNA连接酶的作用位置和作用特点，明确DNA连接酶作用是将两个断开的DNA片段连接起来，形成的是磷酸二酯键。
3.下图是两种限制酶识别并切割的DNA分子的特定核苷酸序列。有关说法正确的是( )
A. 二者的识别序列相同，切出的黏性末端相同
B. 二者的识别序列相同，切出的黏性末端不同
C. 二者的识别序列不同，切出的黏性末端相同
D. 二者的识别序列不同，切出的黏性末端不同
【答案】C
【解析】
【分析】
限制性核酸内切酶是可以识别特定的核苷酸序列，并在每条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键进行切割的一类酶，简称限制酶；经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。
【详解】限制酶BamHⅠ的识别序列为—GGATCC—，切出的黏性末端是—GATC—；限制酶BglⅡ的识别序列为—AGATCT—，切出的黏性末端是—GATC—，可见二者识别序列不同，切出的黏性末端相同，C正确。
4. 质粒是基因工程最常用的载体，下列关于质粒的说法正确的是( )
A. 质粒在宿主细胞内都要整合到染色体DNA上
B. 质粒是独立于细菌拟核DNA之外的小型细胞器
C. 基因工程操作中的质粒一般都是经过人工改造的
D. 质粒上碱基之间数量存A＋G＝U＋C
【答案】C
【解析】
试题分析：质粒只要能够在宿主细胞中复制并稳定保存即可，不一定都要整合到染色体DNA上；质粒是独立于细菌拟核DNA之外的小型环状DNA，故其碱基种类为A、G、C、T四种；ABD三项错误。为了使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，同时使目的基因能够表达和发挥作用，一般要在目的基因的手段插入启动子，尾端插入终止子，故答案选C。
考点：基因表达载体的构建
点评：本题重在考查学生的识记能力和理解能力，属于中档题。
5.下图为DNA分子在不同酶的作用下所发生的变化，图中依次表示限制性核酸内切酶、DNA聚合酶、DNA连接酶、解旋酶作用的正确顺序是( )
A. ①②③④ B. ①②④③
C. ①④②③ D. ①④③②
【答案】C
【解析】
【分析】
与DNA分子相关的酶作用及生理过程如图：
【详解】①项，图中为双链DNA分子形成黏性末端的过程。限制性内切酶可以识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，形成黏性末端或平末端，故①对应限制性内切酶。
②项，图中为黏性末端恢复成完整的双链DNA的过程。DNA连接酶可以恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键，将黏性末端连接起来，故②对应DNA连接酶。
③项，图中为双链DNA分子双链被解开的过程。解旋酶可以将DNA双链变成两条单链，故③对应解旋酶。
④项，图中为两条解旋的DNA链在模板链存在条件下，形成DNA双链的过程。DNA聚合酶可以以一条DNA链为模板，将单个核苷酸通过磷酸二酯键形成一条与模板链互补的DNA链，故④对应DNA聚合酶。
所以图中依次表示限制性内切酶、DNA聚合酶、DNA连接酶、解旋酶作用的顺序为①④②③，故本题正确答案为C。
6.下列获取目的基因的方法中需要模板链的是( )
①从基因文库中获取目的基因 ②利用PCR技术扩增目的基因 ③反转录法 ④通过DNA合成仪利用化学方法人工合成
A. ①②③④ B. ①②③ C. ②③④ D. ②③
【答案】D
【解析】
【分析】
获取目的基因的方法主要有两种：
(1)从供体细胞的DNA中直接分离基因，最常用的方法是"鸟枪法"；
(2)人工合成基因，这种方法有两条途径，一是以目的基因转录的信使RNA为模板，反转录成互补的单链DNA，再在酶的作用下合成双链DNA，即目的基因；另一条途径是根据蛋白质的氨基酸序列，推测出信使RNA序列，再推测出结构基因的核苷酸序列，然后用化学的方法以单核苷酸为原料合成。
【详解】从基因文库中获取目的基因不需要模板链，①错误；利用PCR技术扩増目的基因需要模板链，②正确；反转录法合成目的基因需要以mRNA为模板链，③正确；通过DNA合成仪利用化学方法人工合成目的基不需要模板链，④错误。
综上，本题符合题意的是②③，答案为D。
【点睛】本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理、工具及操作步骤，掌握获取目的基因的几种方法，能根据题干要求准确判断各选项，属于考纲识记层次的考查。
7. 植物学家在培育抗虫棉时，对目的基因作了适当的修饰，使得目的基因在棉花植株的整个生长发育期都表达，以防止害虫侵害。这种对目的基因所作的修饰发生在
A. 终止子 B. 标记基因 C. 结构基因 D. 启动子
【答案】D
【解析】
试题分析：在目的基因表达过程中的非编码区中有启动子，即RNA聚合酶结合位点，对目的基因的表达必须先有RNA聚合酶与之结合，才可转录来，所以D选项正确。
8.基因表达载体的构建所需的条件有（ ）
①同一种限制酶 ②具有某些标记基因的质粒 ③RNA聚合酶 ④目的基因 ⑤DNA
连接酶⑥启动子⑦终止子
A. ①②③④⑤⑥⑦ B. ①②④⑤⑥⑦
C. ②④⑥⑦ D. ①②④⑤
【答案】B
【解析】
【分析】
基因表达载体的构建(基因工程的核心)：
1、基因表达载体的构建过程：首先用相同的限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和运载体，再用DNA连接酶连接目的基因和运载体形成重组DNA分子；
2、目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在并且可以遗传给下一代并表达和发挥作用；3、基因表达载体的组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因；
(1)启动子在基因的首段,它是RNA聚合酶的结合位点,能控制着转录的开始；(2)终止子在基因的尾端,它控制着转录的结束；(3)标记基因便于目的基因的鉴定和筛选。
【详解】构建基因表达载体时,需要用同一种限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和运载体, ①正确；运载体要具有某些标记基因,便于筛选含有重组DNA分子的受体细胞, ②正确；RNA聚合酶能催化转录过程,而基因表达载体的构建过程不需要RNA聚合酶, ③错误；基因表达载体的组成中包括目的基因, ④正确；构建基因表达载体时,需要用DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成重组DNA分子，⑤正确；基因表达载体的组成中包括启动子, ⑥正确；基因表达载体的组成中包括终止子, ⑦正确。
综上，①②④⑤⑥⑦符合题意，答案为B。
9.目的基因导入受体细胞后，是否可以稳定维持和表达其遗传特性，只有通过鉴定和检测才能知道。下列属于目的基因检测和鉴定的是( )
①检测受体细胞是否有目的基因
②检测受体细胞是否有致病基因
③检测目的基因是否转录mRNA
④检测目的基因是否翻译蛋白质
A. ①②③ B. ②③④ C. ①③④ D. ①②④
【答案】C
【解析】
【分析】
目的基因的检测与鉴定：
1、分子水平上的检测
检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因：DNA分子杂交技术；
检测目的基因是否转录出了mRNA：分子杂交技术；
检测目的基因是否翻译成蛋白质：抗原-抗体杂交技术。
2.个体水平上的鉴定
抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。例:用虫食用棉花，观察其存活情况，来鉴定棉花是否具有抗虫特性。
【详解】检测受体细胞中是否有目的基因，可以利用DNA分子杂交技术，①正确；致病基因不属于目的基因, ②错误；检测目的基因是否转录出了mRNA可以利用分子杂交技术, ③正确；检测目的基因是否翻译成蛋白质可以利用抗原-抗体杂交技术, ④正确。
综上，①③④表述符合题意，所以C选项是正确的。
10.下列关于基因表达载体导入微生物细胞的叙述中，不正确的是( )
A. 常用原核生物作为受体细胞，是因为原核生物繁殖快，且多为单细胞，遗传物质相对较少
B. 受体细胞所处的一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态称为感受态
C. 感受态细胞吸收DNA分子需要适宜的温度和酸碱度
D. 感受态细胞吸收重组表达载体DNA分子的液体只要调节适宜的pH即可，没必要用缓冲液
【答案】D
【解析】
【分析】
感受态是指受体细胞经过特殊处理后，处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态，感受态细胞在吸收DNA分子时，需要将DNA分子溶于缓冲溶液中与感受态细胞混合，在一定温度下促进其吸收DNA分子，如果温度条件和酸碱度得不到保障的话，细胞的正常生理功能将受到影响。
【详解】相比多细胞的真核生物来讲，原核生物的繁殖速度更快，而且多为单细胞生物，结构简单，遗传物质也相对较少，便于操作，故A项正确；感受态是指受体细胞经过特殊处理后，处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态，故B项正确；感受态细胞在吸收DNA分子时，需要将DNA分子溶于缓冲溶液中与感受态细胞混合，在一定温度下促进其吸收DNA分子，如果温度条件和酸碱度得不到保障的话，细胞的正常生理功能将受到影响，故C项正确；调节pH时可以使用酸溶液、碱溶液或盐溶液。缓冲液通常是盐溶液，如果使用酸碱溶液调节感受态细胞所在环境的pH，会导致感受态细胞受到破坏，无法继续转化，而缓冲液的化学性质相对温和，在调节pH的同时也保障了细胞的正常生理活动，故D项错误。
综上，本题答案为D。
11. 在用基因工程技术构建抗除草剂的转基因烟草过程中，下列操作错误的是( )
A. 用限制性核酸内切酶切割烟草花叶病毒的核酸
B. 用DNA连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体
C. 将重组DNA分子导入烟草细胞
D. 用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞
【答案】A
【解析】
【分析】
限制性核酸内切酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取；②基因表达载体的构建；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与鉴定。
【详解】限制性核酸内切酶只能切割特定的脱氧核苷酸序列，而烟草花叶病毒的核酸是核糖核苷酸，A错误；构建基因表达载体时，需要用限制酶切割得到抗除草剂基因和切开运载体，再用DNA连接酶将两者连接形成重组DNA，B正确；基因表达载体构建好之后，需要将重组DNA分子导入受体细胞（烟草细胞），C正确；基因工程的最后一步是目的基因的检测和鉴定，可以用含有除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞，D正确。
【点睛】本题考查基因工程相关知识，包括基因工程的工具、操作步骤等知识点，相关内容不仅需要考生识记，还需要考生理解，特别是A选项，要求考生掌握限制酶的特点，明确限制酶只能切割特定的脱氧核苷酸序列，不能切割核糖核苷酸序列。
12.在判断抗虫基因是否成功转入棉花基因组的方法中，不属于分子检测的是( )
A. 通过观察害虫吃棉叶是否死亡
B. 检测目的基因片段与DNA探针能否形成杂交带
C. 检测目的基因转录形成的mRNA与DNA探针能否形成杂交带
D. 检测目的基因表达产物蛋白质能否与特定抗体形成杂交带
【答案】A
【解析】
A、通过观察害虫吃棉叶是否死亡，属于个体水平上的鉴定，A错误；
B、检测目的基因片段与DNA探针能否形成杂交带，采用的是DNA分子杂交技术，属于分子水平上的检测，B正确；
C、检测目的基因转录形成的mRNA与DNA探针能否形成杂交带，采用的是分子杂交技术，属于分子水平上的检测，C正确；
D、检测目的基因表达产物蛋白质能否与特定抗体形成杂交带，采用的是抗原-抗体杂交技术，属于分子水平上的检测，D正确。
【考点定位】基因工程的原理及技术
【名师点睛】目的基因的检测与鉴定：
（1）分子水平上的检测：
①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；
②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；
③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．
（2）个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等
13.转基因食品已大量进入我们的日常生活，如转基因西红柿、转基因草莓等，涉及的问题甚至关系到国家之间的贸易竞争，如图为“霸占中国市场的转基因大豆油”的部分图示。下列关于转基因大豆的叙述不正确的是( )
A. 培育过程中可能用到抗病、抗虫等抗性基因
B. 目的基因的受体细胞可以是大豆受精卵，也可以是体细胞
C. 转基因大豆的种植过程中减少了农药等的使用量，生产成本更低
D. 固氮菌的固氮基因也是必需的目的基因之一
【答案】D
【解析】
豆科植物可与含固氮基因的根瘤菌共生，故固氮基因并非必需的目的基因。
14. 上海医学遗传研究所成功培育出第一头携带白蛋白的转基因牛，还研究出一种可大大提高基因表达水平的新方法，使转基因动物乳汁中的药物蛋白含量提高30多倍，转基因动物是指（ ）
A. 提供基因的动物 B. 基因组中增加外源基因的动物
C. 能产生白蛋白的动物 D. 能表达基因信息的动物
【答案】B
【解析】
试题分析：转基因动物是接受目的基因的动物，而不是提供基因的动物，A错误；把供体的特定基因导入受体的基因组，使受体动物含有供体的基因，这样的受体动物就是转基因动物，B正确；供体细胞内也有白蛋白基因，转基因动物是受体动物，C错误；供体和受体都具有相关基因，都能表达基因信息，D错误。
考点：基因工程
15.1976年，美国的H·Boyer教授首次将人的生长抑制素释放因子的基因转入大肠杆菌体内，并获得表达，这是人类第一次获得的转基因生物。上述的“表达”是指该基因在大肠杆菌体内( )
A. 能进行DNA的复制 B. 能进行转录
C. 能合成人的生长激素 D. 能控制合成人的生长抑制素释放因子
【答案】D
【解析】
【分析】
将人的生长抑制素释放因子的基因转入大肠杆菌体内，并获得表达，这里目的基因是人的生长抑制素释放因子的基因，受体细胞是大肠杆菌，表达是指该基因在大肠杆菌体内合成人的生长抑制素释放因子。
【详解】这里的“表达”是指该基因在大肠杆菌体内合成人的生长抑制素释放因子，而不是进行DNA的复制，A错误；基因表达包括转录和翻译两个步骤，B错误；人的生长抑制素释放因子的基因表达产生的是人的生长抑制素释放因子，而不是生长激素，C错误；人的生长抑制素释放因子的基因表达是指合成人的生长抑制素释放因子，D正确。
16.下列不属于利用基因工程技术制取的药物是( )
A. 从大肠杆菌体内制取白细胞介素 B. 在酵母菌体内获得干扰素
C. 利用青霉菌获取青霉素 D. 在大肠杆菌内获得胰岛素
【答案】C
【解析】
【分析】
基因工程制药的实质是先用基因工程的方法将药物基因导入微生物细胞(如大肠杆菌、酵母菌等)中，并使该基因得到高效率表达产生药物，然后通过培养在培养液中提取药物的一种技术。
【详解】利用基因工程生产的人类蛋白药物有红细胞生长素、白细胞介素、干扰素、胰岛素等，A、B、D均属于利用基因工程技术制取的药物；青霉菌自身含有控制青霉素合成的基因，不需导入，高产青霉菌是利用诱变育种获得的，而不是基因工程育种，C符合题意。
17. 要合成自然界中不存在的蛋白质首先应设计( )
A. 基因结构 B. mRNA结构
C. 氨基酸序列 D. 蛋白质结构
【答案】D
【解析】
试题分析：应从蛋白质预期的功能出发设计蛋白质的结构，然后再推导出氨基酸序列合成其相关基因，故D正确。A、B、C都是蛋白质工程中的步骤但都不是第一步，故错误。
考点：本题考查蛋白质工程相关知识，意在考察考生对知识点的理解掌握程度。
18.蛋白质工程中对蛋白质分子进行设计时，主要包括哪几种( )
①进行少数氨基酸的替换
②对不同来源的蛋白质的拼接
③从预期蛋白质的功能出发去推测氨基酸排列顺序
④直接改变蛋白质的空间结构
A. ①② B. ①②③ C. ②③④ D. ①②④
【答案】B
【解析】
【分析】
1、蛋白质工程指以蛋白质的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行基因改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需要。
2、蛋白质工程的基本途径：从预期的蛋白质功能出发，设计预期的蛋白质结构，推测应有的氨基酸序列，找到相对应的脱氧核苷酸序列(基因)以上是蛋白质工程特有的途径。
【详解】对已知结构的蛋白质进行少数氨基酸的替换,属于蛋白质工程中的分子设计, ①正确；对不同来源的蛋白质分子进行拼接组装属于蛋白质工程, ②正确；从预期蛋白质的功能出发去推测氨基酸排列顺序,属于蛋白质工程的基本途径, ③正确；因为蛋白质分子通常较大,直接改变蛋白质的空间结构不易操作,因此蛋白质工程是在基因的水平上实现的, ④错误。
综上，①②③符合题意，所以B选项是正确的。
19. 蛋白质工程的流程是
A. 基因→表达→形成氨基酸序列的多肽链→形成具有高级结构的蛋白质→行使生物功能
B. 对蛋白质进行分子设计→改造蛋白质分子→行使功能
C. 蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相应的脱氧核苷酸序列
D. 蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→合成相应mRNA
【答案】C
【解析】
试题分析：根据中心法则逆推以确定目的基因的碱基序列：预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有氨基酸序列→找到对应的脱氧核苷酸序列（基因）。
考点：蛋白质工程
【名师点睛】蛋白质工程的过程：根据中心法则逆推以确定目的基因的碱基序列：预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有氨基酸序列→找到对应的脱氧核苷酸序列（基因）；最终还是回到基因工程上来解决蛋白质的合成。
20.按操作目标，使用下列试剂生物处理组织细胞恰当的是 （ ）
A. 观察植物细胞的有丝分裂：果胶酶
B. 处理用于细胞融合的动物细胞：胰蛋白酶
C. 处理用于细胞融合的动物细胞：CaCl2
D. 处理用于细胞融合的植物细胞：盐酸
【答案】B
【解析】
【分析】
植物细胞工程中用纤维素酶和果胶酶去壁获得原生质体；进行动物细胞传代培养时用胰蛋白酶分散细胞；诱导动植物细胞融合的方法有物理法(电激等)、化学法(聚乙二醇PEG)，诱导动物细胞融合还有生物法(灭活的病毒)等。
【详解】观察植物细胞的有丝分裂需要用解离液，果胶酶用于植物细胞工程中去除细胞壁获得原生质体，A错误；进行动物细胞传代培养时用胰蛋白酶分散细胞，B正确；诱导动物细胞融合的方法有物理法(电激等)、化学法(聚乙二醇PEG)、生物法(灭活的病毒)等，C错误；诱导植物细胞融合的方法有物理法(电激等)、化学法(聚乙二醇PEG)，D错误。
【点睛】本题考查动物细胞与组织培养过程；观察细胞的有丝分裂；细胞融合的概念及方法。
21. 动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的是
A. 两者的基本原理相同，诱导融合的方法也完全相同
B. 两者都可以使远缘杂交成为可能
C. 所用的技术手段完全相同
D. 目前已实现了两个植物物种间的杂交，并使它们的性状全部得以体现
【答案】B
【解析】
试题分析：动物细胞融合的原理是细胞膜的流动性，植物体细胞杂交的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性，诱导融合方法基本相似，植物体细胞杂交一般不用灭火的病毒，故A错误；两者都可以实现种间的杂交，克服了远缘杂交不亲和的障碍，故B正确；动物细胞融合所用的诱导融合方法主要有物理法、化学法和灭火的病毒，而植物体细胞杂交的诱导方法主要有物理法和化学法，故C错误；植物体细胞杂交已经实现了种间或属间的杂交，但不一定能同时表达两种生物的性状。
考点：本题考查动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。
22.下列关于植物组织培养和动物细胞培养的相关叙述中，正确的是（ ）
A. 动物细胞培养的原理是细胞增殖
B. 动物细胞培养过程也需要进行脱分化处理
C. 目前利用动物细胞培养技术已能产生新的动物个体
D. 植物组织培养要用一定的方法将细胞分散开来
【答案】A
【解析】
【分析】
植物组织培养和动物细胞培养的比较:
比较项目
植物组织培养
动物细胞培养
原理
细胞的全能性
细胞增殖
培养基性质
固体培养基
液体培养基
培养基成分
营养物质(蔗糖)、植物激素等
营养物质(葡萄糖)、动物血清等
培养结果
植物体
细胞株、细胞系
培养目的
快速繁殖、培育无毒苗等
获得细胞或细胞产物
【详解】A、动物细胞培养的原理是细胞增殖，A正确；
B、动物细胞培养过程不需要进行脱分化处理，B错误；
C、目前利用动物细胞培养技术只能获得细胞或细胞产物，C错误；
D、植物组织培养不需要将细胞分散开来,D错误。
所以本题答案为A选项。
23. 动物细胞培养的正确过程是（ ）
A. 原代培养—传代培养—细胞株—细胞系
B. 原代培养—传代培养—细胞系—细胞株
C. 传代培养—细胞系—原代培养—细胞株
D. 原代培养—细胞株—传代培养—细胞系
【答案】A
【解析】
原代培养在先，传代培养在后；细胞传至50代前为细胞株，50代以后带有癌变特点的传代细胞为细胞系。
24. 在动物细胞培养过程中遗传物质一定发生改变的细胞是( )
A. 原代培养细胞
B. 传代培养10-50代的细胞
C. 传代培养10代以内细胞
D. 传代培养超过50代以上的细胞
【答案】D
【解析】
试题分析：原代培养的细胞具有继续增殖能力，遗传物质一般不发生改变，故A错。传代培养10-50代的细胞增殖减慢，部分细胞细胞核变化，不一定遗传物质改变，故B错。传代培养10代以内的细胞，细胞核型不变，遗传物质一般不变，故C错。传代培养超过50代以上的细胞，部分细胞癌变，故D正确。
考点：本题考查动物细胞培养相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构能力。
25. 在进行课题研究时，甲、乙、丙、丁四位同学所采用的方法中错误的是（ ）
A. 甲用酶解法去除植物细胞的细胞壁
B. 乙用青蛙的血清来配制小鼠细胞的培养液
C. 丙用化学法诱导原生质体的融合
D. 丁用体外培养法制备单克隆抗体
【答案】B
【解析】
试题分析：去除植物细胞的细胞壁可采用酶解法（纤维素酶和果胶酶），A正确；配制小鼠细胞的培养液应该加入小鼠的血清，B错误；诱导原生质体融合的方法包括物理法（离心、诊断、电刺激）和化学法（聚乙二醇），C正确；制备单克隆抗体的方法包括体外培养法和体内培养法，D正确。
考点：植物体细胞杂交
26. 下列关于生物工程的叙述中，错误的是 （ ）
A. 在培养根尖细胞形成愈伤组织的过程中，细胞会脱分化，同时可能可能发生染色体变异
B. 试管婴儿技术包括人工受精、胚胎体外培养和胚胎移植三个方面
C. 单克隆抗体的制备采用了动物细胞融合技术和动物细胞培养技术
D. 经细胞核移植培育出的新个体只具有一个亲本的遗传性状
【答案】D
【解析】
试题分析：在培养根尖细胞形成愈伤组织的过程中，细胞会脱分化，同时可能可能发生染色体变异，Ａ是正确；试管婴儿技术包括人工受精、胚胎体外培养和胚胎移植三个方面，Ｂ正确；单克隆抗体的制备采用了动物细胞融合技术和动物细胞培养技术,Ｃ正确；经细胞核移植培育出的新个体不单具有一个亲本的遗传性状，Ｄ错误。
考点：本题考查选修的相关知识，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。
27. 下面关于植物细胞工程的叙述，不正确的是
A. 叶肉细胞脱分化后可形成无定形状态的薄壁细胞
B. 愈伤组织的形成必须从培养基中获得水、无机盐和维生素等营养物质
C. 植物体细胞融合必须先制备原生质体
D. 常利用植物体细胞杂交技术获得人工种子
【答案】D
【解析】
试题分析：植物细胞脱分化后形成愈伤组织，即无定形状态的薄壁细胞，故A正确。愈伤组织离体细胞的脱分化形成的，必须依赖于培养基提供水、无机盐和维生素等营养物质，故B正确。植物体细胞融合必须先去掉细胞壁，即制备原生质体，故C正确。人工种子是以植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料，经过人工薄膜包装得到的种子，故D错误。
考点：本题考查植物细胞工程相关知识，意在考察考生对知识点的识记理解程度。
28.在植物体细胞杂交实验中，如果要获得性状优良的作物新品种，可以不考虑（ ）
A. 两种高等植物间的生殖隔离
B. 选择具有期望的某些优良性状的亲本
C. 亲本细胞的融合技术
D. 愈伤组织形成和再分化
【答案】A
【解析】
试题分析：植物体细胞杂交能克服远缘杂交不亲和的障碍，故不需考虑两种高等植物间的生殖隔离，A错误。培育优良品种需要选择具有优良性状的亲本，B正确。植物体细胞杂交需要用到亲本细胞的融合技术和植物组培技术，C正确。植物组培过程包括脱分化形成愈伤组织和再分化两步骤，D正确。
考点：本题考查植物体细胞杂交的相关知识，意在考查考生运用所学知识与观点，通过比较、分析与综合等方法对相关生物学问题进行解释、推理，做出合理判断或得出正确结论的能力。
29.在应用农杆菌侵染植物叶片获得转基因植株常规实验步骤中，不需要的是（ ）
A. 用携带目的基因的农杆菌侵染植物细胞
B. 用选择培养基筛法导入目的基因的细胞
C. 用聚乙二醇诱导转基因细胞的原生物质融合
D. 用适当比例的生长素和细胞分裂素诱导愈伤组织生芽
【答案】C
【解析】
【分析】
基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取；②基因表达载体的构建；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与鉴定。
农杆菌特点：易感染双子叶植物和裸子植物，对单子叶植物没有感染力；Ti质粒的T-DNA可转移至受体细胞，并整合到受体细胞的染色体上。
【详解】用携带目的基因的农杆菌侵染植物细胞属于基因工程中目的基因的导入步骤，A正确；目的基因导入受体细胞后需要筛选出含有目的基因的细胞，B正确；农杆菌侵染植物叶片获得转基因植株的过程不需要诱导原生质体融合，C错误；利用不同比例的生长素和细胞分裂素，可以诱导愈伤组织形成不定根或不定芽，D正确；故选C。
【点睛】本题考查了基因工程的相关知识，要求考生能够识记基因工程的操作步骤以及操作工具；明确农杆菌转化法在植物基因工程中的应用；并能够掌握植物组织培养技术的过程等知识。
30.下列技术或方法与原理相符的是（ ）
A. 人参细胞的大量培养和动物细胞培养——细胞增殖
B. 植物组织培养和单克隆抗体的制备——细胞的全能性
C. 早期胚胎培养和人鼠细胞融合——细胞膜的流动性
D. 转基因抗虫棉和克隆羊多利的培育——基因重组
【答案】A
【解析】
【分析】
细胞的全能性指高度分化的细胞仍然具有发育成完整个体的潜能；植物的组织培养是将离体的细胞培养成植株的过程，体现细胞的全能性；单克隆抗体的制备过程没有将细胞培养成个体，其原理属于细胞增殖；早期胚胎培养进行的是有丝分裂，没有体现细胞膜的流动性；人鼠细胞融合涉及细胞膜的融合过程，故体现细胞膜的流动性这一结构特点；转基因抗虫棉的培育利用的是基因工程技术，其原理是基因重组；克隆羊多利的培育运用的是核移植技术，其原理是动物细胞核的全能性。
【详解】人参细胞培养和动物细胞的培养中细胞要进行有丝分裂，故体现了细胞增殖这一原理，A项正确；植物的组织培养是将离体的细胞培养成植株的过程，体现细胞的全能性，单克隆抗体的制备过程没有将细胞培养成个体，其原理属于细胞增殖，B项错误；早期胚胎培养进行的是有丝分裂，体现了细胞的增殖能力，没有体现膜的流动性，人鼠细胞融合体现了细胞膜的流动性，C项错误；转基因抗虫棉的培育是基因工程，原理是基因重组，克隆羊多利的培育是核移植，胚胎移植，无基因重组，D项错误。
二、非选择题
31.某研究小组进行了甲型H1N1流感病毒的疫苗研制工作，如图为他们前期研究工作的简要操作流程图：
(1)实验步骤①所代表的反应过程是________；在步骤②之间扩增H基因常采用的方法是___________。
(2)步骤②构建重组表达载体A和重组表达载体B必须使用的酶是____________。
(3)构建重组表达载体时，一般需要将H基因与载体结合，常用作基因工程载体的是________；在检测受体细胞中是否已经导入目的基因时，常常要借助载体上________的表达。
【答案】 (1). 逆转录 (2). PCR(或多聚酶链式反应)技术 (3). 限制性核酸内切酶和DNA连接酶 (4). 质粒(或病毒) (5). 标记基因(或抗生素抗性基因)
【解析】
【分析】
基因工程：按照人们的意愿，把一种生物的个别基因复制出来，加以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞里，定向地改造生物的遗传性状；基因工程的步骤：①提取目的基因，②目的基因与运载体结合（形成重组DNA分子），③将重组DNA分子导入受体细胞，④目的基因的表达与检测；基因工程技术的关键是构建基因表达载体，它使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以传给下一代，同时使目的基因表达并发挥作用；基因工程中限制性核酸内切酶和DNA连接酶是构建重组质粒必需的工具酶。
【详解】（1）实验步骤①RNA→DNA所代表的反应过程是逆转录；在步骤②之前扩增H基因常采用的方法是PCR技术(或多聚酶链式反应技术)；
（2）需要限制酶来切割以获取目的基因，同时需要相同的限制酶切割运载体以获取与目的基因相同的黏性末端，再通过DNA连接酶连接目的基因和运载体，故步骤②构建重组表达载体A和重组表达载体B必须使用的酶是限制酶(限制性内切酶)和DNNA连接酶；
（3）构建重组表达载体时，一般需要将H基因与载体结合，常用做基因工程载体的是质粒(或病毒)；在检测受体细胞中是否已经导入目的基因时，常常要借助载体上标记基因(或抗生素抗性基因)的表达。
【点睛】本题考查基因工程原理及基本过程，难度较小，要求学生掌握相关的基础知识。
32.马铃薯是种植广泛的农作物，病毒侵染后导致产量大幅下降，培育脱毒和抗毒的马铃薯品种是提高产量的有效方法。请分析并回答。
(1)马铃薯茎尖病毒极少甚至无病毒，因此可将马铃薯茎尖接种在培养基中，培养基中添加生长素和细胞分裂素，诱导离体细胞经过_______________和_____________完成组织培养过程，从而形成脱毒苗。此过程说明植物细胞具有________________。
(2)为获得抗病毒的马铃薯植株，往往采用转基因技术，将病毒复制酶基因转移到马铃薯体内。其过程大致如下图所示。
①上述过程中，将目的基因导入马铃薯细胞使用了______________法。导入农杆菌时，首先要构建基因表达载体，这里需要的工具酶有___________和__________，还要用________处理土壤农杆菌，使之转变为感受态，然后将它们在缓冲液中混合培养以完成转化过程。目的基因导入马铃薯细胞后，是否可以稳定维持和表达，要通过检测与鉴定，马铃薯的DNA上是否插入了目的基因的检测方法是____________________,目的基因是否转录出了mRNA的检测方法是__________________，目的基因是否翻译成蛋白质的检测方法是____________；通过做抗病毒接种实验，可以检测马铃薯是否具有抗病毒的特性，属于________水平的检测。
②该转基因马铃薯产生的配子中____________(填“一定”或“不一定”)含有目的基因。
【答案】 (1). 脱分化 (2). 再分化 (3). 全能性 (4). 农杆菌转化法 (5). 限制性核酸内切酶(限制酶) (6). DNA连接酶 (7). Ca2＋ (8). DNA分子杂交技术 (9). 分子杂交技术 (10). 抗原——抗体杂交技术 (11). 个体 (12). 不一定
【解析】
【分析】
农杆菌转化法的转化过程：目的基因插人Ti质粒的T-DNA上→转入农杆菌→导入植物细胞→目的基因整合到植物细胞染色体上→目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达。
目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因：DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA：分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质：抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。
【详解】(1)植物组织培养过程需经过脱分化和再分化两个过程,通过这一技术将离体的植物组织细胞培育成一个个体，体现了植物细胞的全能性。
(2)①将外源基因导入植物体内用农杆菌转化法。该方法先将目的基因插入到农杆菌Ti质粒的T-DNA上,然后通过农杆菌的转化作用,使目的基因进入植物细胞并插入到植物细胞的染色体DNA上。导入农杆菌时,首先要构建基因表达载体,这里需要的工具酶有限制性核酸内切酶和DNA连接酶,还要用Ca2+处理土壤农杆菌,使之转变为感受态,使外源基因容易导入。目的基因导入马铃薯细胞后，可通过DNA分子杂交技术检测马铃薯的DNA上是否插入了目的基因，可通过分子杂交技术检测目的基因是否转录出了mRNA；可通过抗原—抗体杂交技术检测目的基因是否翻译成蛋白质；还可通过做抗病毒接种实验，可以检测马铃薯是否具有抗病毒的特性，属于个体水平的检测。
②因为在形成配子时同源染色体分离,配子中染色体数目减半,所以不一定会存在导入的目的基因。
【点睛】本题考查基因工程的操作及检测和鉴定方法。要求学生熟练掌握不同类型生物目的基因导入方法，以及目的基因的检测和鉴定方法。
33.1975年科学家首次利用B淋巴细胞杂交瘤技术制备出单克隆抗体。请根据图回答问题：
(1)制备单克隆抗体所用的B淋巴细胞一般从脾中采集，然后以__________________作诱导剂，使B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合。通过筛选和克隆培养，获得的杂交瘤细胞具有的特点是：______________________________________________________。
(2)单克隆抗体的特点是____________________________________。
【答案】 (1). 灭活的仙台病毒或聚乙二醇 (2). 既能产生特异性抗体，又能无限增殖 (3). 特异性强，纯度高(或：专一性强、灵敏度高)
【解析】
【分析】
诱导动物细胞融合,常用的诱导剂有灭活的仙台病毒或聚乙二醇；杂交瘤细胞具有B淋巴细胞和骨髓瘤细胞的遗传信息,故杂交瘤细胞的特点是既能无限增殖,又能产生特异性抗体；从选择培养基中获得能产生所需抗体的杂交瘤细胞后,可以通过体外培养或注射到小鼠腹腔中,获得单克隆抗体。单克隆抗体的优点是特异性强（专一性强）,灵敏度高,并可大量制备。
【详解】(1)诱导动物细胞融合时,常用的诱导剂有灭活的仙台病毒或聚乙二醇；融合后的杂交瘤细胞具有骨髓瘤细胞无限增殖的特点,又具有B淋巴细胞能产生特异性抗体的特点。
（2）单克隆抗体的优点是特异性强（专一性强）,灵敏度高,并可大量制备。
【点睛】本题考查单克隆抗体的制备及特点，本题要注意的是区别动物细胞融合、植物细胞融合的常用诱导剂。
相关资料
更多
