【生物】黑龙江省哈尔滨市第三中学2018-2019学年高二下学期第一次阶段性测试试题 （解析版）

黑龙江省哈尔滨市第三中学2018-2019学年高二下学期
第一次阶段性测试试题
一、单选题
1.利用基因工程技术生产羧酸酯酶(CarE)制剂的流程如图所示，下列叙述正确的是( )

A. 过程①需使用转录酶
B. 过程②需使用解旋酶和PCR技术获取目的基因
C. 过程③使用的感受态细胞可用NaCl溶液制备
D. 过程④可利用DNA分子杂交鉴定目的基因是否已导入受体细胞
【答案】D
【解析】
【分析】
据图分析，图中过程①表示利用mRNA通过反转录法合成相应的DNA；过程②表示利用PCR技术对目的基因进行扩增；过程③表示将目的基因导入受体细胞；过程④表示通过筛选获得工程菌。
【详解】过程①表示利用mRNA通过反转录法合成目的基因，需要逆转录酶的催化，A错误；过程②表示利用PCR技术对目的基因进行扩增，该过程中不需要利用解旋酶，解旋是通过高温解链实现的，B错误；将目的基因导入微生物细胞时采用感受态转化法，因此过程③使用的感受态细胞可用的CaCl2溶液制备，C错误；过程④可利用DNA分子杂交鉴定目的基因是否已导入受体细胞，D正确。
【点睛】解答本题的关键是识记基因工程的操作步骤，通过操作步骤确定图中各标号表示的生理过程，明确PCR技术中不需要解旋酶，并掌握将目的基因导入微生物的方法。

2.如图，下列对基因工程的工具酶功能的相关叙述，错误的是( )

A. 切断a处的酶为限制性核酸内切酶
B. 连接a处的酶为DNA连接酶
C. 切断b处的酶为解旋酶
D. 连接b处的酶为DNA聚合酶
【答案】D
【解析】
试题分析：限制性内切酶和DNA连接酶均作用于a处的磷酸二酯键；解旋酶作用于b处的氢键；DNA聚合酶只能将单个脱氧核苷酸加到已有的核苷酸片段上，形成磷酸二酯键；故选D。
考点：限制性内切酶、DNA连接酶、解旋酶和DNA聚合酶的功能。
点评：本题考查相对综合，是学生能力提升的较好选择。

3.图1为某种质粒简图，图2表示某外源DNA上的目的基因，小箭头所指分别为限制性核酸内切酶EcoRⅠ、BamHⅠ、HindⅢ的酶切位点。下列有关叙述错误的是( )

A. 在基因工程中若只用一种限制酶完成对质粒和外源DNA的切割，则可选EcoRⅠ
B. 如果将一个外源DNA分子和一个质粒分别用EcoRⅠ酶切后，再用DNA连接酶连接，形成一个含有目的基因的重组DNA，此重组DNA中EcoRⅠ酶切点有1个
C. 为了防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化，酶切时可使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时处理
D. 一个图1所示的质粒分子经EcoRⅠ切割后，含有2个游离的磷酸基团
【答案】B
【解析】
目的基因两侧都有，且质粒也有的限制酶是EcoRⅠ，所以在基因工程中若只用一种限制酶完成对质粒和外源DNA的切割，可选EcoRⅠ，A正确；如果将一个外源DNA分子和一个质粒分别用EcoRⅠ酶切后，再用DNA连接酶连接，形成一个含有目的基因的重组DNA，此重组DNA中EcoRⅠ酶切点有2个，B错误；为了防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化，酶切时可使用BamHⅠ和Hind Ⅲ两种限制酶同时处理，C正确；一个图1所示的质粒分子经EcoRⅠ切割后，产生两个黏性末端，含有2个游离的磷酸基团，D正确。

4.科研人员以抗四环素基因为标记基因，通过基因工程的方法让大肠杆菌生产鼠的β-珠蛋白，治疗鼠的镰刀型细胞贫血症。下列相关实验设计中，不合理的是
A. 用编码序列加启动子、抗四环素基因等元件来构建表达载体
B. 利用小鼠DNA分子通过PCR克隆出β-珠蛋白基因的编码序列
C. 用含有四环素的培养基筛选出已经导入β-珠蛋白编码序列的大肠杆菌
D. 用Ca2＋处理大肠杆菌后，将表达载体导入具有四环素抗性的大肠杆菌中
【答案】D
【解析】
基因表中载体包括启动子、目的基因（β珠蛋白基因）、标记基因（抗四环素基因）、终止子等，A正确；β珠蛋白基因属于目的基因，可以利用PCR技术扩增，B正确；导入重组质粒的大肠杆菌能抗四环素，因此可以用含有四环素的培养基筛选出已经导入β珠蛋白编码序列的大肠杆菌，C正确；抗四环素基因是标记基因，用于筛选导入重组质粒的受体细胞，因此受体细胞（大肠杆菌）不能含有四环素抗性基因，D错误。

5.下列各组中酶的作用相似的是
A. 解旋酶、胰蛋白酶 B. DNA聚合酶、Taq酶
C. 纤维素酶、脂肪酶 D. DNA连接酶、限制酶
【答案】B
【解析】
解旋酶作用于氢键，胰蛋白酶作用于肽键，A错误；DNA聚合酶、Taq酶都作用于磷酸二酯键，B正确；纤维素酶和脂肪酶分别作用于纤维素和脂肪，C错误；DNA连接酶催化形成磷酸二酯键，而限制酶切割磷酸二酯键，D错误。

6.下列有关叙述，正确的是（ ）
A. “工程菌”是用细胞工程的方法，使外源基因得到高效表达的菌类细胞株系
B. 所有的限制酶都只能识别由6个特定的核苷酸组成的序列
C. 选用细菌作为受体细胞主要是因为细菌繁殖快、遗传物质少
D. 只要目的基因进入受体细胞就能成功实现表达
【答案】C
【解析】
本题考查基因工程的基本操作程序和基因工程的应用，要求考生识记并掌握基因工程的基本操作程序，理解“工程菌”的概念，进而做出正确的判断。
“工程菌”是用基因工程的方法，使外源基因得到高效表达的菌类细胞株系，A错误；不同的限制酶识别的核苷酸序列不同，大多数限制酶都能识别由6个特定的核苷酸组成的序列，也有少数限制酶的识别序列由4、5或8个核苷酸组成，B错误；选用细菌作为受体细胞主要是因为细菌繁殖快、遗传物质少，C正确；目的基因进入受体细胞不一定能成功实现表达，需要进行检测鉴定，D错误。

7.蛋白质工程中，对蛋白质结构进行设计改造，必须通过基因修饰或基因合成来完成，而不直接改造蛋白质的原因是（ ）
A. 改造基因易于操作且改造后能够遗传
B. 蛋白质的相对分子质量大
C. 缺乏改造蛋白质所必需的工具酶
D. 蛋白质中氨基酸的排列顺序千变万化，操作难度大
【答案】A
【解析】
本题考查蛋白质工程，要求考生能识记并理解蛋白质工程的设计思路，理解通过基因修饰或基因合成来完成对蛋白质的改造，而不是直接改造蛋白质。
蛋白质工程中，对蛋白质结构进行设计改造，必须通过基因修饰或基因合成来完成，而不直接改造蛋白质，若直接对蛋白质进行改造，工作量过大，改造的蛋白质数量有限，难以保证生产的需要；而通过基因修饰或基因合成来完成对蛋白质的改造，则易于操作且改造后能够遗传，生产的蛋白质量能保证生产的需要，所以A正确，BCD错误。

8.科学家在河南华溪蟹中找到了金属硫蛋白基因，并以质粒为载体，采用转基因方法培育出了汞吸收能力极强的转基因烟草。下列有关该烟草培育的说法正确的是( )
A. 金属硫蛋白基因需插入到质粒上，才能转移到受体细胞中
B. 为培育出转基因烟草植株，应选择的受体细胞一定是烟草的受精卵
C. 同种限制酶既可以切割目的基因又可以切割质粒，因此不具有专一性
D. 转基因烟草与原烟草相比基因组成发生变化，导致两者出现生殖隔离
【答案】A
【解析】
【分析】
基因工程的步骤：①提取目的基因；②目的基因与运载体结合（形成重组DNA分子）；③将重组DNA分子导入受体细胞；④目的基因的表达与检测。基因工程至少需要三种工具：限制性核酸内切酶、DNA连接酶、运载体，其中限制性核酸内切酶和DNA连接酶为工具酶。
【详解】质粒的T-DNA可以转移到受体细胞中染色体的DNA上，因此金属硫蛋白基因需插入到质粒的T-DNA上，才能转移到受体细胞中，A正确；由于植物细胞具有全能性，因此植物基因工程的受体细胞可以是受精卵或体细胞，B错误；限制性核酸内切酶具有专一性，识别特定的脱氧核苷酸序列和特定的位点，C错误；转基因烟草与原烟草相比基因组成发生了变化，但两者没有出现生殖隔离，D错误。

9.下列关于基因工程的叙述，正确的是
A. 基因治疗不是治疗遗传病最有效的手段
B. 限制性核酸内切酶和DNA连接酶是两类常用的工具酶
C. 目的基因可来自动、植物或微生物，而受体细胞只来自动植物
D. 启动子位于目的基因的末端，是启动翻译的一段DNA
【答案】B
【解析】
基因治疗是治疗遗传病的最有效的手段，A错误；限制性核酸内切酶和DNA连接酶是基因工程中两类常用的工具酶，B正确；目的基因可来自动、植物或微生物，受体细胞也可以来自动植物和微生物，C错误；启动子位于目的基因的起始端，是启动翻译的一段DNA，D错误。

10.将目的基因导入受体细胞是实施基因工程的第三步，有关说法不正确的是
A. 将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是农杆菌转化法
B. 转基因动物的培育过程中受体细胞一般选择受精卵
C. 显微注射技术是转基因微生物中采用最多的方法
D. 基因枪法是单子叶植物中常用的一种基因转化方法，但是成本较高
【答案】C
【解析】
将目的基因导入植物细胞，常用农杆菌转化法，A正确；将目的基因导入动物细胞，一般选择受精卵作为受体细胞，B正确；将目的基因导入微生物细胞一般用氯化钙处理法，使得微生物成为感受态，易于导入，C错误；基因枪法是单子叶植物中常用的一种基因转化方法，但是成本较高，D正确。

11.下列有关胚胎发育的说法中，不正确的是( )
A. 胚胎从透明带内伸展出来的过程称为孵化
B. 卵裂期胚胎中细胞数目和有机物总量在不断增加
C. 胚胎发育到囊胚期时出现囊胚腔
D. 原肠胚时期进一步分化产生三个胚层
【答案】B
【解析】
【分析】
胚胎发育过程：（1）卵裂期：细胞进行有丝分裂，数量增加，胚胎总体积不增加；（2）桑椹胚：32个细胞左右的胚胎[之前所有细胞都能发育成完整胚胎的潜能属全能细胞]；（3）囊胚：细胞开始分化，其中个体较大的细胞叫内细胞团将来发育成胎儿的各种组织；而滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘；胚胎内部逐渐出现囊胚腔；（4）原肠胚：内细胞团表层形成外胚层，下方细胞形成内胚层，由内胚层包围的囊腔叫原肠腔。
【详解】胚胎从透明带内伸展出来的过程称为孵化，A正确；卵裂期胚胎中细胞数目增多，但是有机物总量在不断减少，B错误；囊胚腔出现于囊胚期，C正确；原肠胚时期进一步分化产生三个胚层，包括外胚层、中胚层和内胚层，D正确。

12.内细胞团出现的时期（ ）
A. 原肠胚期 B. 卵表期 C. 桑棋胚期 D. 囊胚期
【答案】D
【解析】
【分析】
胚胎发育的过程：受精卵→卵裂期→桑椹胚→囊胚→原肠胚。①卵裂期：细胞进行有丝分裂，数量增加，胚胎总体积不增加；②桑椹胚：32个细胞左右的胚胎（之前所有细胞都能发育成完整胚胎的潜能属全能细胞）；③囊胚：细胞开始分化，其中个体较大的细胞叫内细胞团将来发育成胎儿的各种组织；而滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘；胚胎内部逐渐出现囊胚腔（注：囊胚的扩大会导致透明带的破裂，胚胎伸展出来，这一过程叫孵化）；④原肠胚：内细胞团表层形成外胚层，下方细胞形成内胚层，由内胚层包围的囊腔叫原肠腔。（细胞分化在胚胎期达到最大限度）。
【详解】囊胚期细胞开始出现分化，但该时期细胞的全能性仍比较高，其中聚集在胚胎一端个体较大的细胞称为内细胞团，故选D。

13.下列关于高等哺乳动物受精过程的叙述，正确的是( )
A. 获能的精子穿越透明带的同时释放顶体酶水解卵细胞膜
B. 体内受精发生的场所是输卵管
C. 精子的核和卵细胞的核融合后立即发生卵细胞膜反应
D. 精子入卵后立即与卵细胞核发生融合并马上开始有丝分裂
【答案】B
【解析】
【分析】
受精过程为：顶体反应→穿越放射冠→穿越透明带（透明带反应）→卵细胞膜反应（卵黄膜封闭作用）→卵子完成减数第二次分裂并释放第二极体→雌雄原核的形成、核膜消失，雌、雄原核融合形成合子→第一次卵裂开始。
【详解】获能后的精子与卵子相遇后，释放顶体酶穿过放射冠进入透明带，A错误；体内受精发生在雌性动物的输卵管，B正确；精子被微绒毛抱合，同时发生卵细胞膜反应，这是阻止多精入卵的第二道防线，C错误；精子入卵后，形成一个新的核即雄原核，同时被激活的卵子完成减数第二次分裂并排出第二极体后形成雌原核，雌、雄原核融合形成合子后才开始第一次卵裂，D错误。
【点睛】解答本题的关键是掌握受精的详细过程，弄清楚精子入卵通过放射冠、透明带和卵黄膜的先后顺序以及防止多精入卵的几道屏障，进而根据选项分析答题。

14.下列有关哺乳动物体内受精表达正确的是( )
A. 排卵是指卵泡从卵巢中排出
B. 卵子形成过程中，减数第一次分裂和减数第二次分裂是连续的
C. 透明带反应和卵细胞膜反应是防止多精子入卵的两道屏障
D. 精子无需穿过透明带也可以与卵细胞膜接触
【答案】C
【解析】
【分析】
受精过程为：顶体反应→穿越放射冠→穿越透明带（透明带反应）→卵细胞膜反应（卵黄膜封闭作用）→卵子完成减数第二次分裂并释放第二极体→雌雄原核的形成、核膜消失，雌、雄原核融合形成合子→第一次卵裂开始。
【详解】排卵是指卵子从卵泡中排出，A错误；卵子形成过程中，减数第一次分裂是在排卵前后完成的，减数第二次分裂是在受精过程中完成的，二者不连续，B错误；透明带反应和卵细胞膜反应是防止多精子入卵的两道屏障，C正确；精子必需穿过透明带才可以与卵细胞膜接触，D错误。

15.关于体内受精的顺序，正确的是
①释放第二极体
②第一次卵裂开始　
③顶体反应　
④穿越透明带　
⑤雌、雄原核的形成 　
⑥核膜消失
A. ④①③②⑤⑥ B. ③④①⑤⑥②
C. ④⑤①②③⑥ D. ③①④⑤⑥②
【答案】B
【解析】
获能后的精子与卵子相遇时，首先发生顶体反应，释放顶体酶，直接溶解卵丘细胞之间的物质，精子穿越放射冠，然后精子与透明带接触，顶体酶随后将透明带溶出一条孔道，精子穿越透明带，并接触卵细胞膜，精子入卵，尾部脱离，并且原有的核膜破裂，随后精子形成一个新的核膜，最后形成雄原核，同时被激活的卵子完成减数第二次分裂，排出第二极体后，形成雌原核，雌雄原核充分发育后，二者融合形成受精卵，继而开始分裂。所以体内受精的顺序是③④①⑤⑥②，故选B。

16.了解哺乳动物受精的规律对于我们进行胚胎工程的操作十分重要，以下说法不正确的是( )
A. 一个卵泡中能形成两到三个成熟的卵子
B. 不同种动物的精子的形态相似，大小略有不同，但与动物的体型大小无关
C. 在精子细胞的变形过程中，高尔基体发育为精子头部的顶体，中心体演变为精子的尾
D. 卵丘细胞随卵子一起从卵泡中排出
【答案】A
【解析】
【分析】
一个精原细胞可以产生四个精细胞，而一个卵原细胞只能形成一个卵细胞。精子的变形：细胞核→精子头的主要部分；高尔基体→头部的顶体；中心体→精子的尾；线粒体→线粒体鞘（尾的基部）；细胞内其他物质→原生质滴（最后脱落）。
【详解】一个卵泡只能形成一个成熟的卵子，A错误；不同种动物的精子的形态相似，大小略有不同，与动物的体型大小无关，B正确；在精子细胞的变形过程中，高尔基体发育为精子头部的顶体，中心体演变为精子的尾，C正确；排卵是指卵子从卵泡中排出，卵丘细胞会随卵子一起从卵泡中排出，D正确。

17.下列有关响乳动物精子和卵子发生的叙述，错误的是( )
A. 精原细胞通过有丝分裂增殖后，再进行减数分裂
B. 精子的形成是一个不连续的过程，这是与卵子形成的不同之处
C. 卵母细胞发育至减数第二次分裂中期时，才具备受精能力
D. 哺乳动物卵泡的形成和在卵巢内的储备，是在出生前完成的
【答案】B
【解析】
【分析】
哺乳动物精子和卵子发生的不同点：（1）精子的减数两次分裂是连续的，场所唯一（MⅠ和MⅡ的场所都是睾丸），而卵子的两次分裂是不连续的，场所不唯一．（MⅠ场所在卵巢，MⅡ场所在输卵管中）；（2）精子和卵子发生的时间不同：精子的发生是从初情期一直到生殖机能衰退；多数哺乳动物卵子的形成和在卵巢内的贮备是胎儿出生前完成的；MⅠ是在雌性动物排卵前后完成的，MⅡ是在受精过程中完成的；（3）精子的形成过程需要变形；卵细胞的形成过程不需要变形。
【详解】精原细胞通过有丝分裂增殖后，再进行减数分裂产生精细胞，A正确；卵子的形成是一个不连续的过程，这是与精子形成的不同之处，B错误；卵子在输卵管内发育到减数第二次分裂中期时，才具备受精的能力，C正确；哺乳动物卵泡的形成和在卵巢内的贮备是胎儿出生前即（胎儿时期）完成的，这是精子和卵子在发生上的重要区别，D正确。

18.关于卵子发生的叙述，错误的是( )
A. 卵原细胞增殖是通过有丝分裂完成的
B. 哺乳动物初级卵母细胞的形成发生在胎儿吋期
C. 卵子发生过程中存在细胞质不均等分裂现象
D. 哺乳动物体内精子数目是卵子数目的4倍
【答案】D
【解析】
【分析】
哺乳动物精子和卵子发生的不同点：（1）精子的减数两次分裂是连续的，场所唯一（MⅠ和MⅡ的场所都是睾丸）；而卵子的两次分裂是不连续的，场所不唯一（MⅠ场所在卵巢，MⅡ场所在输卵管中）。（2）精子和卵子发生的时间不同：精子的发生是从初情期一直到生殖机能衰退；多数哺乳动物卵子的形成和在卵巢内的贮备是胎儿出生前完成的；MⅠ是在雌性动物排卵前后完成的，MⅡ是在受精过程中完成的。（3）精子的形成过程需要变形；卵细胞的形成过程不需要变形。
【详解】卵原细胞通过有丝分裂的方式增值，A正确；哺乳动物初级卵母细胞的形成发生在胎儿期，B正确；卵子发生过程中存在两次细胞质不均等分裂现象，C正确；哺乳动物体内精子数目远远多于卵子数目，D错误。

19.关于哺乳动物精子的发生，下列说法中错误的是( )
A. 精子变形过程中，中心体演变精子的尾
B. 精子细胞変形后，体积略有増大或不変
C. 雄性动物从初情期开始直到生殖机能衰退，源源不断产生精子
D. 线粒体聚集在精子尾的基部形成线粒体鞘
【答案】B
【解析】
【分析】
精子的变形：细胞核→精子头的主要部分；高尔基体→头部的顶体；中心体→精子的尾；线粒体→线粒体鞘（尾的基部）；细胞内其他物质→原生质滴（最后脱落）。
【详解】精子变形过程中，中心体演变精子的尾，A正确；精子细胞変形后，体积略有减小，B错误；雄性动物从初情期开始直到生殖机能衰退，源源不断产生精子，C正确；精子变形过程程中，线粒体聚集在精子尾的基部形成线粒体鞘，D正确。

20.关于哺乳动物胚胎发育的说法正确的是( )
A. 卵裂期细胞进行了细胞分裂和分化
B. 胚胎总体积随分裂次数增加而不断増大
C. 沿透明带内壁扩展和排列的个体较大的细胞为滋养层细胞
D. 桑椹胚先于嚢胚出现
【答案】D
【解析】
【分析】
胚胎发育的过程：受精卵→卵裂期→桑椹胚→囊胚→原肠胚。①卵裂期：细胞进行有丝分裂，数量增加，胚胎总体积不增加；②桑椹胚：32个细胞左右的胚胎（之前所有细胞都能发育成完整胚胎的潜能属全能细胞）；③囊胚：细胞开始分化，其中个体较大的细胞叫内细胞团将来发育成胎儿的各种组织；而滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘；胚胎内部逐渐出现囊胚腔（注：囊胚的扩大会导致透明带的破裂，胚胎伸展出来，这一过程叫孵化）；④原肠胚：内细胞团表层形成外胚层，下方细胞形成内胚层，由内胚层包围的囊腔叫原肠腔。（细胞分化在胚胎期达到最大限度）。
【详解】卵裂期细胞进行了细胞分裂，但是还没有发生细胞分化，A错误；胚胎总体积随分裂次数增加而略有减小，B错误；沿透明带内壁扩展和排列的,个体较小的细胞,称为滋养层细胞,它们将来发育成胎膜和胎盘，C错误；胚胎发育的过程为受精卵→卵裂期→桑椹胚→囊胚→原肠胚，所以桑椹胚先于嚢胚出现，D正确。

21.如图所示为培育农作物新品种的一种方式。下列说法正确的是（ ）

A. ②③过程分别称为细胞分裂和细胞分化
B. 该育种过程说明已分化细胞中不表达的基因仍具有表达的潜能
C. 该育种与传统杂交育种相比，不需要添加植物生产调节剂
D. 该育种方式涉及到转基因技术、胚胎移植技术
【答案】B
【解析】
【分析】
据图分析，图中①表示基因工程过程中基因表达载体的构建；②③表示植物组织培养技术，其中②表示脱分化，③表示再分化；④表示在胚状体外面加入人工胚乳和人工种皮制备人工种子的过程。
【详解】根据以上分析已知，图中②表示脱分化，③表示再分化，A错误；该育种过程体现植物细胞的全能性，即说明已分化细胞中不表达的基因仍具有表达的潜能，B正确；该育种与传统杂交育种相比，需要添加植物生产调节剂，C错误；该育种方式涉及基因工程和植物组织培养，但是没有胚胎移植技术，D错误。

22.下列有关细胞工程的说法正确的是
A. 在愈伤组织形成过程中，除适宜的温度、pH和无菌条件外，还需要有植物激素进行调节
B. 植物体细胞杂交前需要用酶去除细胞壁获得原生质体，然后再用灭活的病毒促进融合
C. 动物细胞核移植技术可以使生物多样性大大增加
D. 动物细胞培养应在含5%CO2的恒温箱中培养, CO2的作用是为细胞提供碳源
【答案】A
【解析】
在脱分化形成愈伤组织的过程中，除适宜的温度、pH和无菌条件外，还需要生长激素和细胞分裂素进行调节，A正确；植物原生质体融合不能用灭活的病毒，该方法用于动物细胞融合，B错误；动物细胞核移植技术属于无性繁殖，不能使生物多样性增加，C错误；动物细胞培养应在含5%CO2的恒温箱中培养, CO2的作用是调节pH，D错误。

23.下列实验中，不能达成实验目的的是（ ）
A. 用限制性核酸内切酶获取目的基因
B. 用Taq聚合酶构建表达载体
C. 用胰蛋白酶制备动物细胞悬液
D. 用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁
【答案】B
【解析】
【分析】
基因工程用到的工具酶有限制酶和DNA连接酶，细胞工程中使用到的工具酶有纤维素酶、果胶酶、胰蛋白酶、胶原蛋白酶等，回忆和梳理不同的酶的功能，据此答题。
【详解】用限制酶切割外源DNA可以获得目的基因，A正确；Taq聚合酶是PCR技术中的耐高温的DNA聚合酶，用于目的基因的扩增，不能用于构建基因表达载体，B错误；在动物细胞培养过程中，可以用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理动物组织使细胞分散获得单个细胞，C正确；在植物体细胞杂交过程中，需要用纤维素酶和果胶酶处理获得原生质体，D正确。

24.某同学在学习“细胞工程”时，列表比较了动植物细胞工程的有关内容，你认为有几处错误( )

植物细胞工程
动物细胞工程
技术手段
植物组织培养 植物体细胞杂交
动物细跑培养和融合
特殊处理
酶解法去除细胞壁
胰蛋白酶处理制备细胞悬浮液
融合方法
物理方法 化学方法
物理方法 化学方法 生物方法
典型应用
人工种子 微型繁殖
单克隆抗体的制备等
培养液区别
植物激素诱导脱分化和再分化
动物血清或血浆

A. 0处 B. 1处 C. 2处 D. 3处
【答案】A
【解析】
【分析】
细胞工程包括植物细胞过程和动物细胞工程，植物细胞过程包括植物组织培养和植物体细胞杂交技术；动物细胞工程包括动物细胞培养和核移植技术、动物细胞融合和单克隆抗体的制备。
【详解】技术手段，植物细胞过程包括植物组织培养和植物体细胞杂交；动物细胞工程包括动物细胞培养、动物细胞融合等，正确；特殊处理：植物体细胞杂交时，采用酶解法（纤维素酶和果胶酶）去除细胞壁；动物细胞培养时，需要采用胰蛋白酶处理，制成细胞悬液，正确；融合方法：诱导植物细胞融合的方法有物理（离心、振动和电激等）和化学方法（聚乙二醇）；诱导动物细胞融合的方法有物理、化学和生物方法（灭活的病毒），正确；应用：植物细胞工程技术可应用于制备人工种子、微型繁殖等；动物细胞工程中的动物细胞融合技术可以用于制备单克隆抗体，正确；培养液：植物细胞工程中的培养基中需要用生长素和细胞分裂素以影响愈伤组织的生长和分化；动物细胞工程的培养液中需要加入动物血清、血浆等天然成分，正确。因此，以上说法都是正确的，故选A。
【点睛】解答本题的关键是识记植物细胞工程和动物细胞工程的技术手段、采用的方法、具体应用等知识，能列表比较两者，并能结合所学的知识作出准确的判断。

25.下列有关植物组织培养的叙述，正确的是（ ）
A. 愈伤组织是一团排列疏松的薄壁细胞组成，是再分化的产物，细胞具有全能型
B. 二倍体植株的花粉经脱分化与再分化后得到稳定遗传的植株
C. 用人工薄膜将胚状体、愈伤组织等分别包装可制成人工种子
D. 植物耐盐突变体可通过添加适量NaCl的培养基培养筛选而获得
【答案】D
【解析】
愈伤组织是脱分化的产物，A项错误；二倍体植株的花粉经脱分化与再分化后得到高度不育的单倍体，B项错误；制备人工种子应用用人工薄膜将胚状体包裹，C项错误；植物耐盐突变体可通过添加适量NaCl的培养基培养筛选而获得，D项正确。

26.将天竺葵与香茅草进行植物体细胞杂交产生了驱蚊香草，有关培育过程的叙述错误的是( )
A. 需要用酶解法去除细胞壁后获得原生质层
B. 新细胞壁的生成标志着细跑杂交成功
C. 克服了远缘杂交不亲和的障碍
D. 包含了有丝分裂和细胞分化的过程
【答案】A
【解析】
【分析】
植物体细胞杂交：来自两个不同植物的体细胞融合成一个杂种细胞（植物体细胞杂交技术），把杂种细胞培育成植株（植物组织培养技术）。
【详解】植物体细胞杂交时，需要用酶解法（纤维素酶和果胶酶）去除细胞壁以制备原生质体，A错误；植物体细胞杂交成功的标志是新细胞壁的形成，B正确；植物体细胞杂交技术最大的优点了克服了远缘杂交不亲和的障碍，C正确；杂种细胞培育成为杂种植株的过程利用了植物组织培养技术，该过程中发生了有丝分裂和细胞分化过程，D正确。
【点睛】解答本题的关键是掌握植物体细胞杂交技术的过程和原理，注意区分原生质体和原生质层，明确杂种细胞需要通过植物组织培养技术培养成杂种植株。

27.下列关于植物组织培养和动物细胞培养的叙述，正确的是
A. 都需要无菌的条件 B. 都从单个细胞开始
C. 都使用液体培养基 D. 都能实现细胞的全能性
【答案】A
【解析】
植物组织培养和动物细胞培养都需要防止杂菌污染，即需要无菌的条件，A正确；植物组织培养从外植体开始,即离体的器官、组织或细胞,动物细胞培养是从单个细胞开始，B错误；植物组织培养使用固体培养基，动物细胞培养使用液体培养基，C错误；植物组织培养的原理是植物细胞的全能性，动物细胞培养的原理是细胞增殖，D错误。

28.下列关于动物细胞培养的叙述，不正确的是( )
A. 通常将动物组织消化后的初次培养称为原代培养
B. 在原代培养过程中，细胞在培养液中悬浮生长和增殖
C. 发生接触抑制时需要再次使用胰蛋白酶处理细胞
D. 动物细胞培养时要求培养瓶或培养皿内表面光滑
【答案】B
【解析】
【分析】
动物细胞培养过程中涉及的几个概念：（1）原代培养：从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞；（2）传代培养：将原代细胞从培养瓶中取出，配制成细胞悬浮液，分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养，称为传代培养；（3）细胞株：原代培养细胞传至10代左右就不容易传下去，细胞生长停滞，大部分细胞衰老死亡，少数细胞能存活传到40～50代，这部分细胞称为细胞株；（4）细胞系：细胞株传到50左右不能再继续传代，部分细胞遗传物质改变，具有癌变细胞的特点，可以在培养条件下无限制的传代下去，这部分细胞称为细胞系。
【详解】通常将动物组织细胞消化后的初次培养称为原代培养，A正确；在原代培养过程中，细胞会出现贴壁生长的特点，B错误；发生接触抑制时，需要再次使用胰蛋白酶处理细胞，制成细胞修复液，C正确；动物细胞培养时，要求培养瓶或培养皿的内表面要光滑、无毒，易于贴附，D正确。

29.用体细胞核移植技术克隆哺乳动物的过程中，核供体动物、卵母细胞供体动物、代孕母体和克隆动物的性别情况可能是（ ）
A. 1只雌性 B. 2只雌性 C. 4只雌性或2只雌性 D. 3只雌性
【答案】C
【解析】
用体细胞核移植技术克隆哺乳动物的过程中，提供卵母细胞的供体动物和代孕母体肯定都是雌性；克隆动物的细胞核来源于核供体动物，其性别与核供体动物相同，同为雌性或雄性。如果核供体动物是雄性，则所有动物中只有2只雌性；如果核供体动物是雌性，则4只动物都是雌性。
故选：C。

30.用于核移植的供体细胞一般都选用( )
A. 受精卵
B. 传代10代以内的细胞
C. 传代50代以外的细胞
D. 处于减数分裂第二次分裂中期的次级卵母细胞
【答案】B
【解析】
【分析】
动物核移植是指将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体（克隆动物）。
【详解】核移植的供体细胞是应该是体细胞而不是受精卵，A错误；正常细胞在传代10代以内时能保持细胞正常的二倍体核型，适宜用于核移植的供体细胞，B正确；传代50代以外的细胞，遗传物质发生了改变，不适宜作为核移植的供体细胞，C错误；处于减数分裂第二次分裂中期的次级卵母细胞是核移植的受体细胞，D错误。

31.下列有关现代生物技术的叙述，错误的是
A. 转基因羊和克隆羊多利的培育克服了远缘杂交不亲合的障碍
B. 植物体细胞杂交和动物细胞融合都利用了细胞膜的流动性
C. 植物体细胞杂交和试管苗的培育都利用了细胞的全能性
D. 脱毒草莓和转基因抗病毒草莓的培育都需要使用植物组织培养技术
【答案】A
【解析】
【分析】
1、植物组织培养是指利用特定的培养将离体的植物细胞、组织或器官培养成完整植株的过程，所以花药的离体培养、基因工程中的受体细胞的培养、植物体细胞杂交后杂种细胞的培养以及植物的大量快速繁殖都要用到植物组织培养技术。
2、植物组织培养的过程是外植体→脱分化愈伤组织→再分化根、芽→试管苗．脱毒植物苗的取材一般是幼嫩的芽或茎，主要是这些部位不带病毒。
3、试管婴儿是采用体外受精、动物细胞培养和胚胎移植等技术形成的，属于有性生殖，该过程没有发生基因重组，但可能发生变异，也不能体现细胞的全能性。
4、克隆羊是采用核移植、胚胎移植等技术形成的，属于无性生殖，体现了动物体细胞核的全能性，该过程没有发生基因重组，但可能发生变异．这三者都应用了细胞工程技术。
【详解】克隆羊多利的培育是无性生殖，不能说明克服了远缘杂交不亲合的障碍，A错误；动物细胞融合、植物体细胞杂交都利用了细胞膜的结构特点：具有一定的流动性，B正确；植物体细胞杂交技术需要融合的杂种细胞培育成完整的杂种植株，因此体现杂种细胞的全能性；试管苗是植物组织培养技术的产物，利用了植物细胞的全能性，C正确；利用植物的幼嫩的芽或茎进行植物组织培养技术可以培育脱毒苗；转基因抗病毒草莓先用基因工程技术将抗病毒基因导入植物细胞中，再经过植物组织培养技术的培育获得抗病毒草莓，D正确。

32.生物工程是一门生物科学与工程技术有机结合而兴起的一门综合性的科学技术，近些年来发展迅猛，硕果累累，下列关于生物工程的说法，不正确的是( )
A. 植物体细胞杂交和动物细胞融合技术的原理是-一样的，植物组织培养和动物细胞培养技术的原理是不同的
B. 从理论上讲，基因工程和细胞工程都可以定向改造生物的遗传性状
C. 基因工程的工具酶有限制酶、DNA连接酶等，细胞工程的工具酶有纤维素酶、胰蛋白酶等
D. 通过基因工程和发酵工程可以生产出乙肝疫苗、胰岛素、某些种类的单克隆抗体
【答案】A
【解析】
【分析】
生物技术是指人们以现代生命科学为基础，结合其他科学的原理，采用先进的科学手段，按照预先的设计改造生物体或加工生物原料，为人类生产出所需产品或达到某种目的。生物工程包括基因工程、细胞工程、胚胎工程、发酵工程等技术。
【详解】植物体细胞杂交和动物细胞融合技术的原理不完全相同，植物体细胞杂交技术的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性，而动物细胞融合技术的原理是细胞膜的流动性和细胞增殖，A错误；从理论上讲，基因工程和细胞工程都可以定向改造生物的遗传性状和克服远缘杂交不亲和障碍，B正确；基因工程的工具酶有限制酶、DNA连接酶等，细胞工程的工具酶有纤维素酶、果胶酶、胰蛋白酶、胶原蛋白酶等，C正确；通过基因工程和发酵工程可以生产出乙肝疫苗、胰岛素、某些种类的单克隆抗体等，D正确。
【点睛】植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较：
项目
细胞融合原理
细胞融合方法
诱导手段
用途
植物体细胞杂交
细胞膜的流动性，（细胞的全能性）
去除细胞壁后诱导原生质体融合
离心、电刺激、聚乙二醇等试剂诱导
克服远缘杂交不亲和，获得杂交植株
动物细胞融合
细胞膜的流动性
使细胞分散后，诱导细胞融合
离心、电刺激、聚乙二醇、灭活病毒等试剂诱导
制备单克隆抗体的技术之一

33.动物细胞培养与植物组织培养的重要区别在于( )
A. 培养基的物理状态和成分不同
B. 动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能培养成植株
C. 动物细胞培养不需要在无菌条件下进行
D. 动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能
【答案】A
【解析】
【分析】
植物组织培养和动物细胞培养的比较：
比较项目
植物组织培养
动物细胞培养
原理
细胞的全能性
细胞增殖
培养基性质
固体培养基
液体培养基
培养基成分
营养物质（蔗糖）、植物激素等
营养物质（葡萄糖）、动物血清等
培养结果
植物体
细胞株、细胞系
培养目的
快速繁殖、培育无毒苗等
获得细胞或细胞产物
分散处理
无
有
脱分化
有
无
【详解】动物细胞培养利用的液体培养基，而植物组织培养利用的是固体培养基，A正确；植物细胞可以培养成植株，也能培养成大量细胞（愈伤组织），B错误；动物细胞培养与植物组织培养过程中均需要灭菌处理，并且需要在无菌条件下进行，C错误；动植物细胞都可以传代培养，D错误。

34.下列有关细胞工程的叙述，不正确的是( )
A. 细胞工程应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法
B. 在细胞水平或细胞器水平上完成操作
C. 可分为植物细胞工程、动物细胞工程和细菌细胞工程
D. 可按照人的意愿改变改变细胞内的遗传物质或获得细胞产物
【答案】C
【解析】
【分析】
细胞工程是指应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法，通过细胞水平或细胞器水平上的操作，按照人的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品的一门综合性科学技术。根据操作对象的不同可分为植物细胞工程和动物细胞工程。
【详解】细胞工程应用的是细胞生物学和分子生物学的原理和方法，A正确；细胞工程可以通过在细胞水平或细胞器水平上的操作，按照人的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品，BD正确；根据操作对象的不同，细胞工程可以分为植物细胞工程和动物细胞工程两大领域，C错误。

35.下列关于细胞工程的有关叙述，不正确的是( )
A. 从紫草的愈伤组织中提取紫草素、利用细胞工程培育“番茄一马铃薯"杂种植株都利用了植物组织培养技术
B. 在进行组织培养时，由根尖细胞形成愈伤组织的过程中，可能会发生细胞脱分化、染色体变异或基因突变，理论上不会发生细胞分化和基因重组
C. 制备单克隆抗体的过程中需要进行两次筛选，两次筛选的原理不同
D. 动物细胞融合与植物体细胞杂交相比，诱导融合的方法、所用的技术手段、所依据的原理均相同，都能形成杂种个体
【答案】D
【解析】
【分析】
细胞工程包括植物细胞过程和动物细胞工程，植物细胞过程包括植物组织培养和植物体细胞杂交技术；动物细胞工程包括动物细胞培养和核移植技术、动物细胞融合和单克隆抗体的制备。
【详解】从紫草的愈伤组织中提取紫草素需采用植物组织培养技术将紫草细胞脱分化形成愈伤组织；利用细胞工程培育“番茄-马铃薯”杂种植株时，需要采用植物组织培养技术将杂种细胞培育成杂种植株，A正确；根尖细胞脱分化形成愈伤组织的过程中，细胞通过有丝分裂方式进行增殖，在有丝分裂过程中可以发生染色体变异或基因突变，但是不可能发生细胞分化和基因重组，B正确；制备单克隆抗体的过程中需要进行两次筛选，两次筛选的目的和原理不同，C正确；动物细胞融合与植物体细胞杂交相比，诱导融合的方法、所用的技术手段、所依据的原理均不完全相同，且植物体细胞杂交可以形成杂种植株，而动物细胞融合不能形成杂种个体，只能形成杂种细胞，D错误。
【点睛】植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较：


36. 下列关于细胞工程和基因工程的叙述，错误的是
A. 电刺激可诱导植物原生质体融合，但不能使动物细胞融合
B. 去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理
C. 目的基因和受体细胞均可来自动、植物或微生物
D. 限制性核酸内切酶和DNA连接酶是两类常用的工具酶
【答案】A
【解析】
试题分析：电刺激可诱导植物原生质体融合，也可使动物细胞融合，A错误；去除植物细胞的细胞壁需经纤维素酶与果胶酶，将动物组织分散成单个细胞需胰蛋白酶，B正确；目的基因和受体细胞均可来自动、植物或微生物，C正确；基因工程中限制性核酸内切酶和DNA连接酶是两类常用的工具酶，D正确。
考点：本题考查细胞工程和基因工程的知识。意在考查能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。

37.我国科学家独创的花粉管通道法，可以使目的基因借助花粉管通道进入受体细胞，是一种十分简便经济的方法，对此认识正确的是（ ）
A. 不必构建重组载体就可以直接导入
B. 此方法可用于转基因动物
C. 受体细胞只能是植物的卵细胞
D. 有时可以取代农杆菌转化法
【答案】D
【解析】
要让目的基因进入受体细胞后能稳定存在并得到复制和表达，不管采用什么导入方法，都需要构建重组载体才能实现，A错误；花粉管道法只适用于转基因植物的培育，B错误；植物受体细胞一般用植物体细胞，通常不选卵细胞，因为卵细胞取材不方便且数量少，C错误；如果是为了导入双子叶植物和裸子植物，一般采用农杆菌转化法，D正确。

38.目前，欧洲、亚洲许多国家都发现了禽流感疫情，并引起了人体感染，造成多人死亡。科学工作者经研究，发现了数种快速检验禽流感病原体的方法，以正确诊断禽流感，下列与禽流感病原体研究、诊断有关的说法中错误的是：
A. 镜检法：在光学显微镜下直接观察病人的痰液或血液，以发现病原体
B. PCR：体外基因复制技术，可在几十分钟内把病原体的基因扩展到数百万倍
C. 抗原抗体法：用特殊制备的病原体蛋白质与病人血清中的相关抗体特异性结合，发现病原体
D. DNA探针技术：用放射性同位素、荧光因子等标记的DNA 分子做探针，利用DNA分子杂交原理来检测病原体
【答案】A
【解析】
分析：目的基因的检测与鉴定：（1）分子水平上的检测：①DNA-DNA分子杂交技术；②DNA-RNA分子杂交技术；③抗原-抗体杂交技术。（2）个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定等。当用一段已知的基因序列作探针，与变性后的单链DNA接触时，如果两者互补结合成双链，表明被测DNA中含有已知的基因序列。
详解：
A. 病毒在光学显微镜下无法看到，只有在电子显微镜下才能观察到，A错误；
B. PCR用于体外快速扩增特定基因或DNA序列，B正确；
C. 病原体进入人体后会刺激机体产生特异性免疫反应，产生相应抗体，由于抗体与抗原结合具有特异性，因此用特殊制备的病原体蛋白质与病人血清中的相关抗体特异性结合，可发现病原体，C正确；
D. 可以利用DNA分子作为探针，通过DNA分子杂交技术检测病原体，D正确。
点睛：本题主要考查基因工程中常见的技术，要求学生能够识记基因工程中相关技术的应用，同时能够理论联系实际，运用生物学原理解释生活中的生物学问题。

39.“筛选”是生物工程中常用的技术手段，下列关于筛选的叙述中正确的有几项( )
①单克隆抗体制备过程中，在完成细胞融合后，第一次筛选出的是杂交瘤细胞
②单克隆抗体制备过程中，在完成细胞融合后，第二次筛选出的是针对目标抗原的抗体检验为阳性的杂交瘤细胞
③为了快速繁殖三倍体无子西瓜，需筛选出特定染色体组数的体细胞才能进行组织培养
A. 零项 B. 一项 C. 两项 D. 三项
【答案】D
【解析】
【分析】
单克隆抗体制备的两次筛选：①筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞）②筛选出能够产生特异性抗体的细胞群。三倍体无籽西瓜是由二倍体西瓜与四倍体西瓜杂交产生的，其体细胞中含有三个染色体组，联会紊乱，不能形成正常的配子。
【详解】单克隆抗体制备的过程中，在完成细胞融合后，第一次筛选出的是杂交瘤细胞，去除未融合的细胞和自身融合的细胞，①正确；单克隆抗体制备过程中，在完成细胞融合后，第二次筛选出的是针对目标抗原的抗体检验为阳性的杂交瘤细胞，即第二次筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，②正确；为了快速繁殖无子西瓜，可筛选出分化程度低的体细胞进行组织培养，③正确。综上所述，以上说法都是正确的，故选D。

40.下列属于克隆的过程是
①将目的基因与载体结合并在受体细胞中进行扩增
②由一个细胞经过有丝分裂形成细胞群
③通过植物组织培养将离体细胞培养成完整植株
④固体培养基上的一个细菌繁殖形成一个菌落
A. ①②③④ B. ①②③ C. ②③④ D. ①③④
【答案】A
【解析】
①将目的基因与载体结合并在受体细胞中进行扩增，原理是DNA复制，亲代和子代具有相同的遗传物质，属于分子水平的克隆；故①正确；②由一个细胞经过有丝分裂形成细胞群，子代细胞的遗传物质和亲代一致，属于细胞水平的克隆；故②正确；③植物组织培养将离体细胞培养成完整植株，能保持亲本的优良性状，属于个体水平的克隆；故③正确；④固体培养基上的一个细菌繁殖形成一个菌落，属于细胞水平分克隆；故④正确。
考点：克隆技术
点睛：广义上的克隆是指通过无性繁殖而产生的遗传物质均一的生物群，包含三个层次，即分子水平的克隆、细胞水平的克隆和个体水平的克隆。分子水平的克隆通常是指生物大分子核酸的克隆，又称为基因克隆；细胞水平的克隆是细胞的培养；个体水平的克隆，是指动物的克隆和植物的克隆。

二、非选择题
41.下图为利用小鼠生产抗埃博拉病毒的单克隆抗体制备过程示意图，图中A～F分别表示生物技术或细胞名称，请同答下列有关问题：

（1）若A细胞是经抗原刺激的小鼠B淋巴细胞，其体外培养特点是__________，C过程不同于诱导植物原生质体融合的常用诱导因素是____________________。
（2）在杂种细胞的培养过程中，为了防止污染，通常还要在细胞培养液中添加一定量的__________，其培养液与植物组织培养的培养基相比，特有的天然成分__________。
（3）单克隆抗体的制备过程需要经过多次筛选，首先用特定的选择性培养基筛选出杂交瘤细胞，还需进行克隆化培养和__________，最终获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞，选出符合要求的细胞后，可在体外条件下培养或注射到__________内进行增殖。
（4）利用上述技术生产的单克隆抗体可制作成诊断盒，用于准确、快速诊断埃博拉病毒的感染者，这体现了单克隆抗体____________________的特性。单克隆抗体技术的基础是____________________________。
【答案】 (1). 能产生抗体但不能无限增殖 (2). 灭活的病毒 (3). 抗生素动物血清（或动物血浆） (4). 既能迅速大量繁殖，又能产生专一的抗体 (5). （专一）抗体检测 (6). 小鼠腹腔 (7). 特异性强、灵敏度高，并可能大量制备 (8). 动物细胞培养
【解析】
【分析】
本题考查的是单克隆抗体的制备过程，图像中，A B分别是浆细胞和骨髓瘤细胞，C代表动物细胞融合形成杂交瘤细胞，再经过筛选得到能够产生特异性抗体的杂交瘤细胞D，经过细胞培养后再进行体内培养和体外培养，就可以得到单克隆抗体。
【详解】（1）若A细胞是经抗原刺激的小鼠B淋巴细胞，即浆细胞，在体外培养时不能增殖，但是能产生特异性抗体， C过程是动物细胞融合，不同于诱导植物原生质体融合的常用诱导因素是用灭活的病毒诱导。
（2）在动物细胞的培养过程中，要保持无毒无菌环境，为了防止污染，通常还要在细胞培养液中添加一定量的抗生素，动物细胞培养液与植物组织培养的培养基相比，特有的天然成分动物血清或血浆。
（3）单克隆抗体的制备过程需要经过多次筛选，首先用选择性培养基筛选出杂交瘤细胞，还需进行克隆化培养和专一抗体检测阳性，最终获得能产生所需抗体的细胞，可在体外条件下培养或注射到小鼠的腹腔内进行增殖。
（4）单克隆抗体的应用有很多，可制作成诊断盒，用于准确、快速诊断病毒的感染者，这体现了单克隆抗体特异性强、灵敏度高，并可能大量制备的特性，动物细胞工程的基础是动物细胞培养技术。
【点睛】单克隆抗体的制备过程：
1.对小鼠注射特定的抗原蛋白,使小鼠产生免疫反应；2.得到相应的B淋巴细胞；3.将小鼠骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合,再用特定的选择培养基进行筛选；4.在该培养基上,未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡,只有融合的杂种细胞才能生长（这种杂种细胞的特点是既能迅速大量繁殖又能产生专一的抗体）5.对上述杂交瘤细胞还需进行克隆化培养和抗体检测,经多次筛选,就可获得足量的能分泌所需抗体的细胞；6.最后,将杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养,或注射到小鼠腹腔内增殖,这样,从细胞培养液或小鼠腹水中,就可以提取出大量的单克隆抗体了!

42.如国表示哺乳动物胚胎发育过程的几个阶段，请据图回答问题。

(1)写出图中各个阶段的名称：A_______，B_______，C________。
(2)写出图中各标号的名称：[3}__________，[7]_________，[8]_________。
(3)B时期开始出现_____________，[2]为内细胞团，将来发育成_______________。
【答案】 (1). 桑椹胚 (2). 囊胚 (3). 原肠胚 (4). 透明带 (5). 原肠腔 (6). 内胚层 (7). 细胞分化 (8). 胎儿的各种组织
【解析】
【分析】
据图分析，图示为哺乳动物胚胎发育的价格阶段，其中A为桑椹胚；B为囊胚，其中1为滋养层，2为内细胞团，3为透明带，4为囊胚腔；C为原肠胚，其中5为外胚层，6是滋养层，7为原肠腔，8为内胚层。
【详解】（1）根据以上分析已知，图中A为桑椹胚，B为囊胚，C为原肠胚。
（2）根据以上分析已知，图中3为透明带，7为原肠腔，8为内胚层。
（3）B时期为囊胚期，该时期开始出现细胞分化；2为内细胞团，将来发育为胎儿的各种组织。
【点睛】解答本题的关键是掌握哺乳动物胚胎发育的过程以及各个时期的特点，准确判断图中各个字母代表的时期以及各个数字代表的结构的名称，进而结合题干要求分析答题。

43.基因治疗是指将外源正常基因导入靶细胞，以纠正或补偿因基因缺陷和异常引起的疾病，以达到治疗的目的。干扰素基因缺失的小鼠不能产生成熟淋巴细胞，科研人员利用胚胎干细胞 细胞)对干扰素基因缺失的小鼠进行了基因治疗。请回答：
(1)为使干扰素基因在小鼠细胞中高效表达，需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入基因表达载体的_____________和_____________之间。
(2)将干扰素基因导入ES细胞的方法是_____________，采用_____________可以鉴定目的基因是否插入到受体细胞染色体DNA分子上，再将能正常表达干扰素的细胞转入到小鼠体内，这种治疗方法称为____________。
(3)干扰素基因缺失的小鼠易患某种细菌导致的肺炎，引起这种现象的原因是小鼠缺少成熟的淋巴细胞，降低了小鼠免疫系统的_____________功能。
(4)用于基因治疗的基因有三类，一类是把正常基因导入有基因缺陷的细胞中，以表达出正常性状来治疗，第二类是反义基因，即通过产生的mRNA分子与病变基因产生的_____________进行互补结合，来阻断非正常蛋白质的合成；第三类是编码可以杀死癌细胞的蛋白酶基因。
【答案】 (1). 启动子 (2). 终止子 (3). 显微注射技术DNA (4). 分子杂交 (5). 体外基因治疗 (6). 防卫 (7). mRNA
【解析】
【分析】
基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。
【详解】（1）基因表达载体的组成包括目的基因、标记基因、启动子、终止子，而来自cDNA文库的干扰素基因是通过逆转录得到的，无启动子和终止子等，所以应该将其插入在表达载体的启动子和终止子之间才能构成完整的基因并在受体细胞内表达。
（2）将目的基因（干扰素基因）导入动物细胞（ES细胞）常用显微注射法；检测目的基因是否插入到受体细胞染色体DNA分子上，可以采用DNA分子杂交技术；基因治疗包括体外基因治疗和体内基因治疗，如将能正常表达干扰素的细胞转入到小鼠体内为体外基因治疗。
（3）根据题意分析，干扰素基因缺失的小鼠体内由于缺少成熟的淋巴细胞，导致小鼠的免疫系统的防卫功能降低，因此小鼠容易患某种细菌导致的肺炎。
（4）根据题意分析，第二类是反义基因，其通过转录形成mRNA，然后与病变基因转录形成的mRNA进行互补配对，进而阻断病变基因形成的mRNA翻译出非正常的蛋白质。
【点睛】解答本题的关键是识记基因工程的概念、原理、操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能结合所学的知识和题干要求准确分析答题。