【生物】河南省林州市第一中学2019-2020学年高二3月线上调研考试试题（解析版）

河南省林州市第一中学2019-2020学年
高二3月线上调研考试试题
一、单选题（每题1.5分，共45分）
1.下列关于“利用鸡血进行DNA的粗提取与鉴定”实验的叙述，正确的是（    ）
A、用蒸馏水将NaCl溶液浓度调至0.14 mol·L-1，滤去析出物
B、调节NaCl溶液浓度或加入木瓜蛋白酶，都可以去除部分杂质
C、将丝状物溶解在2 mol·L-1NaCl溶液中，加入二苯胺试剂即呈蓝色
D、由于DNA对高温耐受性较差，故需向DNA滤液中加入冷酒精
【答案】B
【解析】A项，用蒸馏水将NaCl溶液浓度调至0.14 mol·L-1，使DNA析出，A错误；
B项，NaCl溶液为2 mol·L-1，过滤除去不溶的杂质，木瓜蛋白酶能够分解蛋白质，B正确；
C项，在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色，C错误；
D项，DNA不溶于酒精，利用95%的冷却的酒精溶液将其析出，得到较为纯净的DNA，D错误。
故选B。
2.PCR技术扩增目的基因，需要的条件是（    ）
①目的基因    ②引物    ③四种脱氧核苷酸    ④DNA聚合酶    ⑤mRNA    ⑥核糖体
A、①②③④
B、②③④⑤
C、①③④⑤
D、①②③⑥
【答案】A
【解析】①PCR技术需要以目的基因为模板，①正确；
②PCR技术需要一对引物，②正确；
③四种脱氧核苷酸作为合成DNA的原料，③正确；
④PCR技术是在高温条件下进行的，因此需要耐高温的DNA聚合酶等，④正确；
⑤mRNA是合成蛋白质的模板，在DNA复制过程中不需要，⑤错误；
⑥核糖体是合成蛋白质的场所，在DNA复制过程中不需要，⑥错误。
3.用凝胶色谱法分离蛋白质时，相对分子质量大的蛋白质（    ）
A、路程较长，移动速度较慢
B、路程较长，移动速度较快
C、路程较短，移动速度较慢
D、路程较短，移动速度较快
【答案】 D
【解析】 当不同相对分子质量的蛋白质通过凝胶柱时，分子量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程长移动的速度慢，而分子量大的蛋白质分子不容易进入凝胶内部的通道，路程短，移动的速度快，最先洗脱出来。故选：D。
4.下列关于从细胞中提取分离血红蛋白的说法中错误的是（    ）
A、对样品的处理过程分为红细胞的洗涤、血红蛋白的释放、分离血红蛋白溶液和透析
B、洗涤血红蛋白的目的是去除一些杂蛋白，所用试剂为生理盐水
C、凝胶色谱法分离血红蛋白时相对分子质量大的蛋白质通过色谱柱的速度快
D、将样品加入色谱柱顶端时，下端的流出口应处于打开状态
【答案】D
【解析】血红蛋白的提取实验中，对样品的处理过程分为红细胞的洗涤、血红蛋白的释放、分离血红蛋白溶液和透析，A正确；
洗涤血红蛋白的目的是去除一些杂蛋白，所用试剂为生理盐水，B正确；
凝胶色谱法分离血红蛋白时相对分子质量大的蛋白质通过色谱柱的速度快，因为分子质量较小的蛋白质会进入凝胶颗粒内，因此，路径较长，运行速度慢，而分子质量较大的蛋白质则通过的路径短，运行速度快，故C正确；
将样品加入色谱柱顶端时，下端的流出口应处于关闭状态，加样完之后才打开下端出口，是样品渗入凝胶床内，等样品完全进入凝胶层后，关闭下端出口，然后再加入磷酸缓冲液进行洗脱，待红色的蛋白质接近色谱柱底端时，用试管收集流出液，每5 mL收集一管，连续收集，故D描述错误。
5.在装填色谱柱时，不得有气泡存在的原因是（    ）
A、气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序，降低分离效果
B、气泡阻碍蛋白质的运动
C、气泡能与蛋白质发生化学反应
D、气泡会在装填凝胶的时候使凝胶不紧密
【答案】A
【解析】装填凝胶色谱柱时，色谱柱内不能有气泡存在，因为气泡会扰乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序，使得到的红色带区歪曲、散乱，降低分离效果。故选：A。
6.将经处理破裂后的红细胞混合液以2000 r/min的速度离心10 min后，离心管中的溶液分为四层，从上到下的顺序依次是（    ）
A、血红蛋白、甲苯层、脂溶性物质层、沉淀层
B、甲苯层、沉淀层、血红蛋白、脂溶性物质层
C、脂溶性物质层、血红蛋白、甲苯层、沉淀层
D、甲苯层、脂溶性物质层、血红蛋白、沉淀层
【答案】D
【解析】混合液经离心后，按密度大小排列，在离心管中从上到下的顺序依次是：第一层为无色透明的甲苯层；第二层为白色薄层固体，是脂溶性物质沉淀层；第三层为红色透明液体，这是血红蛋白的水溶液；第四层为暗红色沉淀物，主要是红细胞破碎物沉淀。故选D。
7.下列关于血红蛋白提取和分离实验中样品处理步骤的描述，正确的是（    ）
A、红细胞的洗涤：加入蒸馏水，缓慢搅拌，低速短时间离心
B、血红蛋白的释放：加入生理盐水和甲苯，置于磁力搅拌器上充分搅拌
C、分离血红蛋白：将搅拌好的混合液离心、过滤后，用分液漏斗分离
D、透析：将血红蛋白溶液装入透析袋，置于pH为4.0的磷酸缓冲液中透析12 h
【答案】C
【解析】对红细胞进行洗涤时，应加入生理盐水，防止细胞破裂；将血红蛋白从红细胞中释放时，需要加入蒸馏水，以便使红细胞破裂释放出血红蛋白；透析时，应将透析袋置于pH为7.0的磷酸缓冲液中透析12 h。
8.在植物有效成分的提取过程中，常用萃取法、蒸馏法和压榨法，下列关于这三种方法叙述错误的是（    ）
A、蒸馏法的实验原理是利用水将芳香油溶解下来，再把水蒸发掉，剩余的就是芳香油
B、压榨法的实验原理是通过机械加压，压榨出果皮中的芳香油
C、萃取法的实验原理是使芳香油溶解在有机溶剂中，蒸发掉溶剂后就可获得芳香油
D、蒸馏法适用于提取玫瑰精油、薄荷油等挥发性强的芳香油
【答案】A
【解析】蒸馏法是利用水蒸气将挥发性较强的芳香油携带出来，适用于提取玫瑰精油、薄荷油等挥发性强的芳香油。压榨法通过机械加压，压榨出果皮中的芳香油，适用于柑橘、柠檬等易焦糊原料的提取。萃取法是使芳香油溶解在有机溶剂中，蒸发掉溶剂后就可获得芳香油，它的适用范围广，要求原料的颗粒要尽可能细小，能充分浸泡在有机溶剂中。
9.用蒸馏法提取玫瑰精油的装置安装顺序正确的是（    ）
①固定蒸馏瓶  ②固定热源  ③固定温度计  ④连接接液管及接收瓶 
⑤连接冷凝管
A、④–①–②–③–⑤
B、①–②–③–⑤–④
C、②–①–⑤–④–③
D、②–①–③–⑤–④
【答案】C
【解析】用蒸馏法提取玫瑰精油的装置，首先应固定酒精灯的位置，然后在其上方固定蒸馏瓶；再向右依次连接冷凝管、接液管及接收瓶，最后在蒸馏瓶上固定温度计。选C。
10.玫瑰精油提取的过程是（    ）
A、鲜玫瑰花＋水→水蒸气蒸馏→油水混合物→分离油层→除水
B、鲜玫瑰花＋水→油水混合物→水蒸气蒸馏→分离油层→除水
C、鲜玫瑰花＋水→油水混合物→除水→分离油层
D、鲜玫瑰花＋水→油水混合物→水蒸气蒸馏→分离油层→除水
【答案】A
【解析】提取玫瑰精油常用的方法是水蒸汽蒸馏法，实验流程是：鲜玫瑰花瓣+清水→水蒸汽蒸馏→获得油水混合物→分离油层→除水→玫瑰精油，故A正确。
11.压榨完橘皮而获得的油水混合物，除去糊状残渣应先用什么过滤？（    ）
A、布袋过滤
B、滤纸过滤
C、纱布过滤
D、离心
【答案】A
【解析】压榨完橘皮而获得的油水混合物，除去糊状残渣应先用普通布袋过滤，故选：A。
12.橘皮精油的提取中要用石灰水浸泡，其目的是（    ）
A、与橘皮中的有机酸反应，防止损坏橘皮精油
B、破坏细胞结构，分解果胶，提高出油率
C、防止提取过程中橘皮精油的有效成分分解
D、防止蒸馏过程中原料发生焦糊
【答案】B
【解析】由于橘皮中含有大量的果蜡和果胶，压榨时容易滑脱，用石灰水浸泡是为了破坏细胞结构，分解果胶，防止橘皮压榨时滑脱，提高出油率。故选：B。
13.下列有关胡萝卜素的叙述，错误的是（    ）
A、胡萝卜素化学性质稳定，易溶于水，不溶于乙醇等物质
B、胡萝卜是提取天然β–胡萝卜素的原料
C、微生物的发酵生产是工业提取β–胡萝卜素的方法之一
D、提取胡萝卜素的过程中，干燥时间不能太长，温度不能太高
【答案】A
【解析】胡萝卜素的化学性质比较稳定，不溶于水，微溶于乙醇，易溶于石油醚等有机溶剂。
14.如图是提取胡萝卜素的装置，下列叙述正确的是（    ）

A、酒精灯加热的目的是促进有机溶剂的蒸发
B、酒精灯可以对烧瓶直接加热
C、冷凝管的作用是使蒸发的有机溶剂重新回到烧瓶
D、胡萝卜素和有机溶剂会发生化学反应
【答案】C
【解析】酒精灯加热的目的是促进胡萝卜素在有机溶剂中的溶解，A错误；
萃取时用的有机溶剂是易燃物，直接使用明火加热容易引起燃烧、爆炸，萃取过程不可放在酒精灯上直接加热，通常采用水浴加热，B错误；
在萃取过程中，为了防止加热时有机溶剂挥发需要在瓶口安装冷凝回流装置，冷凝管的作用是使蒸发的有机溶剂重新回到烧瓶，C正确；
胡萝卜素的化学性质稳定，不溶于水，易溶于有机溶剂，不会和有机溶剂发生反应，D错误。
15.选择石油醚作提取胡萝卜素萃取剂的原因是（    ）
A、石油醚不易燃烧
B、石油醚挥发性强
C、石油醚为水溶性有机溶剂
D、石油醚的沸点较高
【答案】D
【解析】提取胡萝卜素时，使用的萃取剂是有机溶剂，应该具有较高的沸点，能够充分溶解胡萝卜素，并且不与水混溶；石油醚的沸点较高，适合作为提取胡萝卜素的萃取剂，D正确，ABC错误。
16.以下关于用层析法鉴定胡萝卜素样品过程的说法，不正确的是（    ）
A、层析液不能没及样品原点
B、点样时，应快速细致，形成大小一致的圆点
C、滤纸卷成筒状是为了增大吸收面积
D、层析用的玻璃瓶应加盖玻璃板密封
【答案】C
【解析】层析液不能没及滤纸基线，否则点样处的胡萝卜素溶解在层析液中，会导致实验失败，A正确；
点样时，应快速细致，形成大小一致的圆点，点样斑点不能太大，B正确；
滤纸卷成筒状不能增大吸收面积，目的是使滤纸稳定地竖立在装置中，C错误；
层析液容易挥发，所以层析用的玻璃瓶应加盖玻璃板密封，D正确。
17.在基因工程中，常用的“剪刀”“针线”和“载体”分别指（    ）
A、限制酶、DNA连接酶、质粒
B、噬菌体、质粒、DNA连接酶
C、限制酶、RNA连接酶、质粒
D、大肠杆菌病毒、质粒、DNA连接酶
【答案】A
【解析】基因工程又叫DNA重组技术，是指按照人们的意愿，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由此可见，DNA重组技术至少需要三种工具：限制性核酸内切酶（限制酶）―分子“剪刀”，DNA连接酶―分子“针线”，质粒、动植物病毒或噬菌体―运载体，故选A。
18.限制酶和DNA连接酶是基因工程的工具酶，以下说法正确的是（    ）
A、DNA连接酶能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段上形成磷酸二酯键
B、限制酶只能切割双链DNA片段，不能切割烟草花叶病毒的核酸
C、E·coli DNA连接酶既能连接黏性末端，也能连接平末端
D、限制酶主要从原核生物中分离纯化而来，所以也能剪切自身的DNA
【答案】B
【解析】DNA连接酶连接的是两个DNA片段，故A错误；
限制酶只能切割DNA分子，烟草花叶病毒的核酸是RNA，不能切割，故B正确；
E·coli DNA连接酶只能连接黏性末端，不能连接平末端，故C错误；
限制酶主要从原核生物中分离纯化而来，但是不会剪切自身的DNA，故D错误。
19.基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选。已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是―G↓GATCC―，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是―↓GATC―。根据如图示判断下列操作正确的是（    ）

A、目的基因和质粒均用限制酶Ⅱ切割
B、目的基因和质粒均用限制酶Ⅰ切割
C、质粒用限制酶Ⅰ切割，目的基因用限制酶Ⅱ切割
D、质粒用限制酶Ⅱ切割，目的基因用限制酶Ⅰ切割

【答案】C
【解析】限制酶Ⅱ也能将限制酶Ⅰ识别序列切割，而限制酶Ⅰ不能将限制酶Ⅱ的识别序列切割。获得目的基因需将目的基因两端切割，所以用限制酶Ⅱ切割；切割质粒只能切出一个切口，所以用限制酶Ⅰ切割，故选C。
20.下列不属于获得目的基因方法的是（    ）
A、从基因文库中获取
B、利用人工合成法获得
C、利用PCR技术大量获得
D、利用农杆菌转化法获得
【答案】D
【解析】获得目的基因可以从基因文库中获取、利用人工合成法获得、利用PCR技术大量获得，农杆菌转化法是把目的基因导入受体细胞的方法，而不是获得目的基因的方法。
21.基因工程操作的核心步骤是（    ）
A、获取目的基因
B、将目的基因导入受体细胞
C、构建基因表达载体
D、目的基因的检测和鉴定
【答案】C
【解析】基因工程操作的核心步骤是构建基因表达载体，它决定目的基因是否能在受体细胞中稳定存在，并遗传给一代，同时决定目的基因是否能够表达和发挥作用
22.如图是利用基因工程技术培育转基因植物，生产可食用疫苗的部分过程示意图，其中PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ为四种限制性核酸内切酶。下列说法错误的是（    ）

A、抗卡那霉素基因的存在有利于将含有抗原基因的细胞筛选出来
B、表达载体构建时需要用到限制酶SmaⅠ
C、图示过程是基因工程的核心步骤
D、除图示组成外，表达载体中还应该含有启动子和终止子等结构
【答案】B
【解析】抗卡那霉素基因是标记基因，目的是便于鉴定和筛选含有目的基因的细胞，A正确；
构建过程中需要将目的基因完整切割下来，此时要用到限制酶PstⅠ、EcoRI，B错误；
图示过程为基因表达载体的构建过程，是基因工程中的核心步骤，C正确；
基因表达载体包括启动子、目的基因、终止子和标记基因等，D正确。
23.基因工程为花卉育种提供了新的技术保障。如图为花卉育种的过程（字母代表相应的物质或结构，数字代表过程或方法）。下列说法正确的是（    ）

A、①过程需要的酶有限制酶和DNA聚合酶
B、②过程常用的方法是农杆菌转化法
C、③、④过程为分化和再分化，该过程体现了植物细胞的全能性
D、转基因生物DNA上是否插入目的基因，可用抗原―抗体杂交技术检测
【答案】B
【解析】过程是构建基因表达载体，需要的酶有限制酶和DNA连接酶，A错误；
基因表达载体导入到植物细胞中常用农杆菌转化法，B正确；
③、④过程为脱分化和再分化，该过程体现了植物细胞的全能性，C错误；
检测DNA是否插入到生物体内，应用DNA分子杂交技术，D错误。
24.基因工程是在DNA分子水平上进行设计操作的，在基因工程操作的基本步骤中，一定不进行碱基互补配对的是（    ）
A、利用PCR技术扩增目的基因
B、目的基因与运载体的黏性末端结合
C、抗原―抗体杂交检测目的基因表达
D、DNA探针检测受体细胞的目的基因
【答案】C
【解析】利用PCR技术扩增目的基因的原理是DNA的双链复制，DNA复制过程中遵循碱基互补配对，A不符合题意；
目的基因与运载体的粘性末端之间的碱基通过碱基互补配对连接在一起，形成基因表达载体，B不符合题意；
抗原与抗体都不含碱基，所以抗原抗体杂交不存在碱基互补配对，C符合题意；
25.下列关于“基因探针”的叙述，正确的是（    ）
A、基因探针既可以检测某一特定的DNA，也可检测RNA
B、基因探针是一小段具有随机脱氧核苷酸序列的单链DNA
C、基因探针既可以检测核酸分子，又可以检测特定的蛋白质
D、基因探针以其双链形式发挥作用，其放射性和荧光标记便于检测
【答案】A
【解析】基因探针是一段带有检测标记，且顺序已知的，与目的基因互补的核酸序列（DNA或RNA）。基因探针通过分子杂交与目的基因结合，产生杂交信号，能从浩瀚的基因组中把目的基因显示出来。根据杂交原理，作为探针的核酸序列至少必须具备以下两个条件：①应是单链，若为双链，必须先行变性处理。②应带有容易被检测的标记。它可以包括整个基因，也可以仅仅是基因的一部分；可以是DNA本身，也可以是由之转录而来的RNA。基因探针可以根据碱基配对的原理检测核酸分子，但不能检测特定的蛋白质，综上分析，A符合题意，BCD不符合题意。
26.下列各项不属于基因工程的应用的是（    ）
A、转基因抗虫棉的培育成功
B、利用DNA探针检测饮用水中有无病毒
C、利用工程菌生产胰岛素
D、将甲植物的叶绿体移入乙植物，使光合效率提高
【答案】D
【解析】转基因抗虫棉的培育成功属于植物基因工程的应用，A错误；
探针是用放射性同位素（或荧光分子）标记的含有目的基因单链DNA片段，所以属于基因工程在实际中的应用，B错误；
工程菌是指利用基因工程技术将外源基因导入受体细胞的过程，所以属于基因工程在实际中的应用，C错误；
将甲植物细胞内的叶绿体移入乙植物细胞内属于细胞工程，不属于基因工程在实际中的应用，D正确。
27.有关基因治疗说法正确的是（    ）
A、运用基因工程技术，把有缺陷的基因切除，达到治疗疾病的目的
B、运用人工诱变的方法，使有基因缺陷的细胞发生基因突变恢复正常
C、把健康的外源基因导入到有基因缺陷的细胞中，达到治疗疾病的目的
D、基因治疗的主要方法是让患者口服一些健康的外源基因
【答案】C
【解析】基因治疗只是把正常基因导入病人体内，没有对有基因缺陷的细胞进行基因切除，A错误；
人工诱变具有不定向性，并且是多害少利的，B错误；
基因治疗是把正常基因导入病人体内，是该基因的表达产物发挥功能，达到治疗疾病的目的，C正确；
基因治疗是把正常基因导入病人体内，达到治疗疾病的目的，若口服健康的外源基因，在消化道会被分解，从而失去其功能，D错误。
28.下列关于蛋白质工程说法，错误的是（    ）
A、蛋白质工程是在基因工程基础上延伸出来的二代基因工程
B、实施蛋白质工程的基本途径必须从预期蛋白质功能出发
C、蛋白质工程实施过程中可对关键氨基酸直接置换或增删
D、构建基因表达载体也是蛋白质工程的核心步骤
【答案】C
【解析】蛋白质工程中真正的操作对象仍然是基因，即对基因的修饰或原有记忆的改造，不是对蛋白质的结构或者氨基酸的结构进行改造，所以C错。
29.基因工程与蛋白质工程的区别是（    ）
A、基因工程需对基因进行分子水平操作，蛋白质工程不对基因进行操作
B、基因工程合成的是天然存在的蛋白质，蛋白质工程合成的可以不是天然存在的蛋白质
C、基因工程是分子水平操作，蛋白质工程是细胞水平（或性状水平）的操作
D、基因工程完全不同于蛋白质工程
【答案】
B【解析】A、基因工程需对基因进行分子水平操作，蛋白质工程是通过修改基因或创造合成新基因来改变生物的遗传和表达形状，合成新的蛋白质，A错误；
B、基因工程是将一种生物的基因转移到另一种生物体内，产生它本不能产生的蛋白质，进而表现出新的性状，但只能生产自然界已存在的蛋白质；蛋白质工程是通过修改基因或创造合成新基因来改变生物的遗传和表达形状，合成新的蛋白质，B正确；
C、基因工程是分子水平操作，蛋白质工程也是分子水平操作，C错误；
D、基因工程是蛋白质工程的关键技术，故蛋白质工程又被称为第二代基因工程，D错误。
30.蛋白质工程的基本流程正确的是（    ）
①蛋白质分子结构设计
②DNA合成
③预期蛋白质功能
④据氨基酸序列推出脱氧核苷酸序列
A、①→②→③→④
B、④→②→①→③
C、③→①→④→②
D、③→④→①→②
【答案】C
【解析】蛋白质工程的基本流程为：预期蛋白质功能→蛋白质分子结构设计→据氨基酸序列推出脱氧核苷酸序列→DNA合成。故选C项。
二、简答题
31.（10分）PCR技术有效地解决了因为样品中DNA含量太低而难以对样品进行研究的问题，而被广泛应用，此过程需要一种Taq DNA聚合酶。请回答有关问题：
(1)体内DNA复制过程中用解旋酶打开双链DNA，而PCR技术中应用                。（1分）
【答案】 高温使DNA分子热变性
【解析】PCR技术中通过高温使DNA分子变性、解旋。
(2)Taq DNA聚合酶是从水生耐热细菌Taq中分离的。（3分）
①Taq DNA聚合酶的功能是                                                        。
②Taq DNA聚合酶的化学本质为蛋白质，可用              法和            法进行分离。
【答案】①催化脱氧核苷酸之间形成磷酸二酯键 ②凝胶色谱    电泳
【解析】
①Taq DNA聚合酶催化脱氧核苷酸之间形成磷酸二酯键。
②Taq DNA聚合酶可用凝胶色谱法和电泳法进行分离。
(3)相对于细菌分离，DNA分子的分离和提取操作要复杂的多。（4分）
①在DNA提取中两次用到蒸馏水，其目的分别是                       、                       。
②实验中能否以哺乳动物成熟的红细胞为实验材料？                                        为什么？                                                                                 。
【答案】①使血细胞破裂，释放出DNA分子    稀释NaCl溶液，使DNA分子析出
②不能    哺乳动物成熟的红细胞中无核DNA分子
【解析】①在DNA提取中，向鸡血细胞中第一次加入蒸馏水目的是使血细胞破裂，释放出DNA分子，第二次加入蒸馏水的目的是稀释NaCl溶液，使DNA分子析出。
②哺乳动物成熟的红细胞无细胞核，不能用于提取DNA。
(4)PCR中加入的引物有             种，加入引物的作用是                       。（2分）
【答案】2    作为DNA复制的起点
【解析】PCR中加入的引物有2种，加入引物的作用是分别与两条单链的一端结合，作为DNA复制的起点。
32.（10分）利用生物技术可以从生物材料中提取一些特定的有效成分。请回答下列相关问题：
(1)玫瑰精油化学性质稳定，难溶于水，挥发性较强，适宜采用                    （方法）进行提取。经上述方法提取后可收集到乳白色的乳浊液，应向乳浊液中加入                    使其分层。（2分）
【答案】水蒸气蒸馏法    NaCl
【解析】玫瑰精油化学性质稳定，难溶于水，挥发性较强，适宜采用水蒸气蒸馏法进行提取。上述方法提取后可收集到乳白色的乳浊液，应向乳浊液加入NaCl增加水的密度，使其易于分层。
(2)提取橘皮精油方法与玫瑰精油不同，橘皮精油采用                    （方法）提取。提取过程中，橘皮先要经过石灰水浸泡，目的是                                        。（2分）
【答案】压榨法    破坏细胞结构，分解果胶，防止橘皮压榨时滑脱，提高出油率
【解析】提取橘皮精油的方法为压榨法，其流程是采用石灰水浸泡→漂洗→压榨→过滤→静置→再次过滤→获得橘皮精油。提取过程中，橘皮先要经过石灰水浸泡，目的是破坏细胞结构，分解果胶，防止橘皮压榨时滑脱，提高出油率。
(3)β–胡萝卜素在人体肝脏中可被氧化成两分子的                ，因此可用于治疗因缺乏该物质引起的夜盲症等疾病。工业生产上，可以从胡萝卜中提取胡萝卜素，常采用            法进行提取，该种方法的效率主要取决于                                        。操作过程中需进行水浴加热的原因是                                        。对提取的胡萝卜素粗品进行鉴定时，可采用                    法。在鉴定过程中，通过观察萃取样品中是否出现了对应于标准样品中位于展开剂前沿的                    来确认是否提取到了胡萝卜素。（6分）
【答案】维生素A    萃取    萃取剂的性质和使用量    有机溶剂都是易燃物，直接使用明火加热容易引起燃烧、爆炸（或避免有机溶剂燃烧、爆炸）    纸层析    胡萝卜素层析带
【解析】β–胡萝卜素在人体肝脏中可被氧化成两分子的维生素A，因此可用于治疗因缺乏该物质引起的夜盲症等疾病。工业生产上，可以从胡萝卜中提取胡萝卜素，常采用萃取法进行提取，该种方法的效率主要取决于萃取剂的性质和使用量。操作过程中需进行水浴加热的原因是有机溶剂都是易燃物，直接使用明火加热容易引起燃烧、爆炸（或避免有机溶剂燃烧、爆炸）。对提取的胡萝卜素粗品进行鉴定时，可采用纸层析法。在鉴定过程中，通过观察萃取样品中是否出现了对应于标准样品中位于展开剂前沿的胡萝卜素层析带来确认是否提取到了胡萝卜素。
33.（7分）根据基因工程的有关知识，回答下列问题：
(1)限制性内切酶切割DNA分子后产生的片段，其末端类型有                和              。（2分）
【答案】平末端    黏性末端
【解析】限制性核酸内切酶（简称限制酶）切割DNA分子后，产生的片段末端类型有黏性末端和平末端。
(2)质粒运载体用EcoR I切割后产生的片段如图：
为使运载体与目的基因相连，含有目的基因的DNA除可用EcoR I切割外，还可用另一种限制性内切酶切割，该酶必须具有的特点是                                               。（1分）
【答案】切割产生的DNA片段末端与EcoR I切割产生的相同
【解析】目的基因与运载体具有相同的黏性末端才能连接，若用包括EcoR Ⅰ在内的两种限制酶切割目的基因，则另一种限制酶必须具有的特点是：切割产生的DNA片段末端与EcoR Ⅰ切割产生的相同。
(3)根据来源的不同，基因工程中所使用的DNA连接酶有两类，即                DNA连接酶和              DNA连接酶。（2分）
【答案】T4    E·coli
【解析】按其来源不同，基因工程中所使用的DNA连接酶有两类，即E·coli DNA连接酶（来源于大肠杆菌）和T4 DNA连接酶（来源于T4 D噬菌体）。
(4)基因工程中除质粒外，动植物病毒和              也可作为运载体。（1分）
【答案】噬菌体的衍生物
【解析】基因工程中常用的运载体是质粒，此外还有λ噬菌体的衍生物和动植物病毒。
(5)若用重组质粒转化大肠杆菌，一般情况下，不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞，原因是                                      。（1分）
【答案】未处理的大肠杆菌吸收质粒（外源DNA）的能力极弱
【解析】由于未处理的大肠杆菌吸收质粒（外源DNA）的能力极弱，因此若用重组质粒转化大肠杆菌，一般情况下，不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞，而通常用Ca2+处理大肠杆菌细胞，使其成为感受态细胞，此时细胞壁和细胞膜的通透性增大，容易吸收重组质粒。
34.（18分）生长激素缺乏症患者也被称为“袖珍人”，因生长激素不足而导致生长发育障碍，身材矮小。该病发病率为，是一种内分泌疾病。目前一般通过注射生长激素治疗，科研人员尝试利用奶牛乳腺生物反应器生产生长激素，以保证临床用量。请回答下列问题：
(1)该操作中的目的基因是                                        ，可以从                    直接获取外，还可以从供体动物的                    细胞中提取mRNA，在                    的催化下合成。（8分）
【答案】人生长激素基因    基因文库    垂体    逆转录酶
【解析】生长激素基因只在垂体细胞中才表达，因此要获取外源生长激素基因作为目的基因除了可以从基因组文库获取外，还可以利用从供体动物垂体细胞中提取mRNA，在逆转录酶催化下合成。
(2)如表为四种限制酶的识别序列和酶切位点，图为含有生长激素基因的DNA片段及其具有的限制酶切位点。若需利用酶切法（只用一种酶）获得生长激素基因，最应选择的限制酶是                    。（2分）

限制酶
Msp Ⅰ
BamH I
Mbo I
Sma I
酶切位点




【答案】Msp Ⅰ
【解析】由图可知，限制酶BamH I的切割位点位于目的基因上，用该限制酶切割会破坏目的基因；若用限制酶Sma I切割，只能切目的基因的一侧；由于限制酶Mbo I识别的特定序列能被限制酶Msp I切割，但限制酶Msp I识别的特定序列不能被限制酶Mbo I切割。因此，若需利用酶切法（只用一种酶）获得生长激素基因，最应选择的限制酶是Msp I。
(3)利用转基因牛、羊的乳汁提取药物的工艺简单，要使药用蛋白基因在奶牛乳腺中特异性表达，应将药用蛋白基因与                                                                          等调控元件重组在一起，导入性染色体组成为                    的受精卵中。如果将药用蛋白基因转移到动物的膀胱上皮细胞中，利用转基因牛、羊的尿液生产提取药物，比乳汁提取药物的更大优越性在于                                    、                                        。（8分）
【答案】奶牛乳腺蛋白基因的启动子    XX    不受性别限制    不受时间限制
【解析】利用转基因牛、羊的乳汁提取药物工艺简单，要使用蛋白基因在奶牛乳腺中特异性表达，应将药用蛋白基因与奶牛乳腺蛋白基因的启动子等调控元件重组在一起，导入性染色体组成为XX的受精卵中（因为只有雌性动物能分泌乳汁）。如果将药用蛋白基因转移到动物的膀胱上皮细胞中，利用转基因牛、羊的尿液生产提取药物比乳汁提取药物的更大优越性在于：不受性别、时间限制。