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【生物】天津市一中2018-2019学年高二下学期期末考试试卷(解析版)
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天津市一中2018-2019学年高二下学期期末考试试卷
一、单选题
1.有关限制性内切酶 Hind Ⅲ和 Xho I 的识别序列及切割位点分别为 A↓AGCTT 和C↓TCGAG，相关叙述正确的是（ ）
A. 两种限制酶的识别序列在 DNA 分子中出现的概率不同
B. 两种限制酶切割形成的粘性末端都是-AGCT
C. 分别用这两种酶切割目的基因和质粒后能形成重组质粒
D. 实验中可通过控制反应时间、酶的浓度等控制酶切效果
【答案】D
【解析】
由题可知，限制性内切酶HindⅢ和Xho I的识别序列刚好互补（AG与TC互补），因此两种限制酶的识别序列在DNA分子中出现的概率相同，A错误；HindⅢ切割形成的粘性末端是-AGCTT，而Xho I切割形成的粘性末端都是-TCGAG，B错误；两种限制酶切割形成的粘性末端不相同，不能互补，C错误；实验中可通过控制反应时间、酶的浓度等控制酶切效果，D正确。
【考点定位】基因工程的原理及技术
【名师点睛】一种限制酶只能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。
2.图1为某种质粒简图，图2表示某外源DNA上的目的基因，小箭头所指分别为限制性核酸内切酶EcoRⅠ、BamHⅠ、HindⅢ的酶切位点。下列有关叙述错误的是( )
A. 在基因工程中若只用一种限制酶完成对质粒和外源DNA的切割，则可选EcoRⅠ
B. 如果将一个外源DNA分子和一个质粒分别用EcoRⅠ酶切后，再用DNA连接酶连接，形成一个含有目的基因的重组DNA，此重组DNA中EcoRⅠ酶切点有1个
C. 为了防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化，酶切时可使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时处理
D. 一个图1所示的质粒分子经EcoRⅠ切割后，含有2个游离的磷酸基团
【答案】B
【解析】
目的基因两侧都有，且质粒也有的限制酶是EcoRⅠ，所以在基因工程中若只用一种限制酶完成对质粒和外源DNA的切割，可选EcoRⅠ，A正确；如果将一个外源DNA分子和一个质粒分别用EcoRⅠ酶切后，再用DNA连接酶连接，形成一个含有目的基因的重组DNA，此重组DNA中EcoRⅠ酶切点有2个，B错误；为了防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化，酶切时可使用BamHⅠ和Hind Ⅲ两种限制酶同时处理，C正确；一个图1所示的质粒分子经EcoRⅠ切割后，产生两个黏性末端，含有2个游离的磷酸基团，D正确。
3.下列如图所示的黏性末端的说法，错误的是（ ）
A. 甲乙黏性末端是由不同的限制酶切割而成的
B. 甲乙黏性末端可形成重组DNA分子
C. DNA连接酶作用位点在a点，催化两个DNA片段之间相连
D. 切割甲的限制酶能识别并切割由甲、乙片段连接形成的重组DNA分子
【答案】D
【解析】
切割甲的限制酶的识别序列是-GAATTC-,切割乙的限制酶的识别序列是-CAATTG,所以切割甲、乙的限制酶不同，A正确；甲和乙的黏性末端中未配对的碱基正好能互补配对，所以可以被DNA连接酶连接形成重组DNA分子，B正确；DNA连接酶连接的是DNA片段,所以该酶能催化磷酸基团和脱氧核糖之间形成磷酸二酯键，C正确；甲､乙片段形成的重组DNA分子的序列是-CAATTC-,而甲酶的识别序列是-GAATTC-,且在G和A之间切割，由此可见,甲酶不能识别由甲､乙片段形成的重组DNA分子，D错误｡
4.限制性内切酶能识别特定的 DNA 序列并迕行剪切，不同的限制性内切酶可以对不同的 核酸序列迕行剪切。现以 3 种不同的限制性内切酶 X、Y、Z 对 6.2kb 大小的线状 DNA 迕行剪切后。用凝胶电泳分离各核酸片段，实验结果如图所示：（备注：X 酶 Y 酶 Z 酶的切点分别用A、B、C 代表）
请问：3 种不同的限制性内切酶在此 DNA 片段上相应切点的位置是（ ）
A.
B.
C.
D.
【答案】D
【解析】
Y酶将DNA序列进行剪切，长度为1.0和5.2，切点1个，而图谱中Y切点位0.3和5.9，A错误；Z酶将DNA序列并进行剪切，长度为3.6、1.4和1.2，切点2个，而图谱中Z切点位3.6和2.6，B错误；X酶将DNA序列并进行剪切，长度为4.2、1.7和0.3，切点2个，而图谱中X切点位0.3和5.9，C错误；据图分析，X酶切点2个，Y酶切点1个，Z酶切点2个，而且长度符合，D正确。
【点睛】本题考查限制酶的相关知识，意在考查学生识图能力、信息的提取与应用能力、通过比较与综合做出合理判断的能力等，实际上只要明确以下两点，问题迎刃而解．1、题均根据各种大小的DNA分子片段类型看有几个切点；2、再根据两种酶组合后DNA分子片段大小将上述各自的切点移位组合。
5.下图为农杆菌Ti质粒的T-DNA区段结构示意图。农杆菌附着植物细胞后， T-DNA首先在农杆菌中从右边界到左边界被剪切、复制，然后进入植物细胞并整合到染色体上，继而诱发细胞异常生长和分裂，形成植物肿瘤。以下有关叙述错误的是
A. Ti质粒存在于农杆菌的拟核DNA之外
B. 植物肿瘤的形成与A、B两个基因的表达有关
C. 清除植物肿瘤组织中的农杆菌后肿瘤不再生长
D. 利用T-DNA进行转基因时需保留LB、RB序列
【答案】C
【解析】
【分析】
农杆菌Ti质粒的基因被剪切后整合到植物的染色体上，因为其质粒上的细胞分裂素和生长素基因，诱发细胞异常生长和分裂，形成植物肿瘤。本题考查基因工程中目的基因的表达及相关知识，意在考查考生运用所学知识与观点，通过比较、分析与综合等方法对相关生物学问题进行解释、推理，做出合理判断或得出正确结论的能力。
【详解】A、质粒是细菌、放线菌和酵母菌等生物中拟核（或细胞核）以外的DNA分子，存在于细胞质中，具有自主复制能力，使其在子代细胞中也能保持恒定的拷贝数，并表达所携带的遗传信息，是闭合环状的双链DNA分子，Ti质粒存在于农杆菌的拟核DNA之外，正确；
B、因为质粒整合到植物后能诱发细胞异常生长和分裂，形成植物肿瘤，这与质粒上的细胞分裂素和生长素基因过量表达有关，正确；
C、清除植物肿瘤组织中的农杆菌后，还有Ti质粒整合到植物DNA上的，通过基因的复制表达也会导致肿瘤继续生长，错误；
D、农杆菌能整合的前提是Ti质粒上的LB、RB序列被剪切，才能连接整合到植物细胞DNA上，正确；
故选C。
6.如图为某种质粒的简图，小箭头所指分别为限制性核酸内切酶EcoRⅠ、BamHⅠ的酶切位点，P为转录的启动部位。已知目的基因的两端有EcoRⅠ、BamHⅠ的酶切位点，受体细胞为无任何抗药性的原核细胞。下列有关叙述正确的是( )
A. 将含有目的基因的DNA与质粒分别用EcoRⅠ酶切，在DNA连接酶作用下，生成由两个DNA片段之间连接形成的产物有两种
B. DNA连接酶的作用是将酶切后得到的黏性末端连接起来形成一个重组质粒，该过程形成两个磷酸二酯键
C. 为了防止目的基因反向粘连和质粒自身环化，酶切时可选用的酶是EcoRⅠ和BamHⅠ
D. 能在含青霉素的培养基中生长的受体细胞表明该目的基因已成功导入该细胞
【答案】C
【解析】
本题结合图形考查基因表达载体的构建，要求考生理解构建基因表达载体的方法，明确构建的基因表达载体应含有哪些部件及这些部件的功能，此题难度稍大。
根据题意，目的基因的两端有EcoRⅠ、BamHⅠ的酶切位点，将含有目的基因的DNA与用EcoRⅠ酶切，会得到含目的基因的DNA片段和不含目的基因的DNA片段；根据质粒的简图可知，将质粒用EcoRⅠ酶切，会得到与质粒周长等长的链状DNA；因此将含有目的基因的DNA与质粒分别用EcoRⅠ酶切，在DNA连接酶作用下，可生成含目的基因的原DNA片段两个之间进行连接、由含目的基因的DNA片段与质粒周长等长的链状DNA相互连接形成的链状DNA、二倍于原质粒周长的环状DNA三种类型，A错误；DNA连接酶的作用是将酶切后得到的黏性末端连接起来形成一个重组质粒，该过程形成四个磷酸二酯键，B错误；EcoRⅠ和BamHⅠ的识别序列不同，获取目的基因和切割质粒时，同时选用EcoRⅠ和BamHⅠ切割，目的基因两端形成的末端不同，切割开的质粒两端形成的末端不同，再用DNA连接酶连接，可以防止目的基因反向粘连和质粒自身环化，C正确；题图显示，在构建基因表达载体的过程中质粒中的青霉素抗性基因和四环素抗性基因都不会被破坏，因此能在含青霉素和四环素的培养基中生长的受体细胞不能表明目的基因已成功导入该细胞，D错误。
【点睛】易错知识点拨：
基因工程中，构建基因表达载体选择限制酶的种类时，要保证所选的限制酶能切割质粒和获取目的基因，又要保证使用DNA连接酶连接时，既能让质粒与目的基因相互连接形成重组质粒，又能有效避免质粒自身环化或目的基因自身环化；本题中若单独使用EcoRⅠ或BamHⅠ处理，虽然都能保证质粒与目的基因相互连接形成重组质粒，但都不能有效避免质粒自身环化或目的基因自身环化，因此要同时满足上述两个条件，应同时使用EcoRⅠ和BamHⅠ处理。
7.绿叶海天牛（简称甲）吸食滨海无隔藻（简称乙）后，身体就逐渐变绿，这些 “夺 来”的叶绿体能够在甲体内长期稳定存在，有科学家推测其原因是在甲的染色体 DNA 上可能存在乙编码叶绿体部分蛋白的核基因。为证实上述推测，以这种变绿的甲为材料迕行 实验，方法和结果最能支持上述推测的是（ ）
A. 通过 PCR 技术能从甲消化道内获得的 DNA 中克隆出属于乙的编码叶绿体蛋白的核基 因
B. 通过核酸分子杂交技术，在甲体内检测到乙的编码叶绿体蛋白的核基因转录出的 RNA
C. 给甲提供 14CO2，一段时间后检测到其体内的部分有机物出现放射性
D. 用乙编码叶绿体蛋白的核基因做探针与甲的染色体 DNA 杂交，结果显示出杂交带
【答案】D
【解析】
【分析】
目的基因的检测与鉴定:
1、分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因---DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。
2、个体水平上的鉴定:抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。
【详解】A、通过PCR技术从甲体内的DNA中克隆出属于乙的编码叶绿体蛋白的核基因,这只能说明甲体内含有乙的编码叶绿体蛋白的核基因，但不能说明甲的染色体DNA上存在乙编码叶绿体部分蛋白的核基因，A错误；
B、通过核酸分子杂交技术，在甲体内检测到乙的编码叶绿体蛋白的核基因转录出的RNA，这只能说明甲体内含有乙的编码叶绿体蛋白的核基因，但不能说明甲的染色体DNA上存在乙编码叶绿体部分蛋白的核基因，B错误；
C、给甲提供14CO2，一段时间后检测到其体内的部分有机物出现放射性,这说明甲中含有叶绿体，但不能说明甲的染色体DNA上存在乙编码叶绿体部分蛋白的核基因，C错误;
D、用乙编码叶绿体蛋白的核基因做探针与甲的染色体DNA杂交，结果显示出杂交带，这说明甲的染色体DNA上存在乙编码叶绿体部分蛋白的核基因，D正确。
故选D。
8.下列关于蛋白质工程说法不正确的是( )
A. 蛋白质工程能将人抗体某些区段替代鼠单克隆抗体区段，降低鼠单克隆抗体免疫原性
B. 蛋白质工程可对酶的催化活性、底物专一性、抗氧化性、热变性、碱变性等加以改变
C. 理论上通过对关键氨基酸的置换与增删是进行蛋白质工程的唯一方法
D. 蛋白质工程的崛起主要是工业生产和基础理论研究的需要
【答案】C
【解析】
【分析】
蛋白质工程的基本途径：从预期蛋白质的功能出发→设计预期的蛋白质的结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列。
【详解】为了降低鼠单克隆抗体免疫原性，可以通过蛋白质工程将人抗体某些区段替代鼠单克隆抗体区段，A正确；可以通过蛋白质工程修饰相应的基因改变酶的催化活性、底物专一性、抗氧化性、热变性、碱变性，B正确；蛋白质工程可以通过对基因的修饰改造蛋白质，也可以创造新的蛋白质，C错误；蛋白质工程可以应用于药物、微电子等领域，是工业生产和基础理论研究的需要，D正确。故选C。
9.现有甲、乙两种植物(均为二倍体纯种)，其中甲种植物的光合作用能力高于乙种植物， 但乙种植物很适宜在盐碱地种植，丏相关性状均为核基因控制。要利用甲、乙两种植物的 优势，培育出高产、耐盐的植株，有多种生物技术手段可以利用。下列所采用的技术手段 中，不可行的是（ ）
A. 利用植物体细胞杂交技术，可获得满足要求的四倍体杂种目的植株
B. 将乙种植物耐盐基因导入到甲种植物的受精卵中，可培育出目的植株
C. 两种植物杂交后，得到的 F1 再利用单倍体育种技术，可较快获得纯种的目的植株
D. 诱导两种植物的花粉融合,并培育成幼苗,幼苗用秋水仙素处理,可培育出目的植株
【答案】C
【解析】
试题分析：两种植物存在着生殖隔离，无法完成杂交，即使能够杂交，所得F1也不能产生正常可育的配子，因而不能用于单倍体育种。故选C
考点：本题考查育种的相关内容。
点评：本题意在考查考生的理解应用能力，属于中等难度题。
10.下列生物工程技术中，一定要来自同一个物种的是（ ）
①获取目的基因的细胞和受体细胞
②动物细胞融合中的两个细胞
③牛胚胎移植中胚胎的供体与受体
④植物体细胞杂交中两个体细胞
A. ①②③④ B. ③
C. ①②③ D. ②③
【答案】B
【解析】
分析】
1、细胞核移植指将一个动物细胞的细胞核移植至去核的卵母细胞中，产生与供细胞核动物的遗传成份一样的动物的技术。
2、胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎，或者通过体外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其它雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术。
3、植物的体细胞杂交是将不同植物的细胞通过细胞融合技术形成杂种细胞，进而利用植物的组织培养将杂种细胞培育成多倍体的杂种植株。
【详解】①基因工程中获取目的基因的细胞和受体细胞，不是来自同一个物种，①错误；
②动物细胞融合中的两个细胞，不一定来自同一个物种，如单克隆抗体中的人鼠细胞融合，②错误；
③胚胎移植中胚胎的供体与受体也必须是来自同一个物种，这样才不产生排斥反应，移植才成功，③正确；
④植物体细胞杂交就是为了克服远缘杂交不亲和，典型的白菜-甘蓝杂交、土豆-番茄杂交，④错误；
故选B。
11.下图为培育甘蔗脱毒苗的两条途径，研究发现经②过程获得的幼苗脱毒效果更好。下列叙述不正确的是（ ）
A. 带叶原基的芽与植物体其他组织中的病毒含量相同
B. ②过程的作用是使组织中的病毒在图中处理温度下部分或全部失活
C. 过程③、④所用培养基中生长素和细胞分裂素的含量和比例不同
D. 上图中脱毒苗的培育过程体现了植物细胞的全能性
【答案】A
【解析】
植物的茎尖或根尖不带病毒或病毒极少，其他部位带的病毒很多，带叶原基的芽是茎尖，A项符合题意；②过程的作用是使组织中的病毒在图中处理温度下部分或全部失活，B项不符合题意；③是脱分化、④是再分化，两个过程所用培养基中生长素和细胞分裂素的含量和比例不同，C项不符合题意；细胞的全能性是已经分化的细胞发育成完整个体的潜能。图示过程是离体的带叶原基的芽脱分化形成愈伤组织，再分化形成幼苗，体现了植物细胞的全能性，D项不符合题意。
【名师点睛】解答本题的关键有：一是看懂图、二是能利用植物组织培养的原理和条件的有关知识解题。
12.犬细小病毒(CPV)单克隆抗体(Cpv McAb)可抑制病毒对宿主细胞的侵染及病毒的复制，进而杀灭幼犬体内病毒。下列相关叙述，错误的是
A. 在Cpv McAb的制备过程中用到了动物细胞培养和动物细胞融合技术
B. 给幼犬注射CPV后，CPV抗体检测呈阳性，说明发生了体液免疫反应
C. 经选择性培养基筛选出来的杂交瘤细胞即可直接生产Cpv McAb
D. 对杂交细胞培养时，需要无菌无毒环境，且温度、气体环境等要适宜
【答案】C
【解析】
【分析】
由题文和选项的描述可知，该题考查学生对单克隆抗体的制备过程及动物细胞培养的相关知识的识记和理解能力。
【详解】在单克隆抗体的制备过程中，使用的动物细胞工程技术有动物细胞培养和动物细胞融合技术，A正确；给幼犬注射CPV后，会激发体液免疫，产生相应的抗体，因此若 CPV抗体检测呈阳性，说明发生了体液免疫反应，B正确；经选择性培养基筛选出来的杂交瘤细胞并不都符合人们需要，还需经过克隆化培养和抗体检测，筛选出能分泌CPV McAb的杂交瘤细胞，C错误；对杂交细胞培养时，需要无菌无毒环境，且温度、气体环境等要适宜，D正确。
13.某研究小组为测定某种药物对体外培养细胞的毒性，准备对某种动物的肝肿瘤细胞（甲）和正常肝细胞（乙）进行动物细胞培养。下列叙述正确的是
A. 制备肝细胞悬液时，可用胃蛋白酶处理肝组织块
B. 培养液需含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、生长素和动物血清等
C. 为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的抗生素
D. 甲、乙细胞在持续的传代培养过程中，均会出现停止增殖的现象
【答案】C
【解析】
在利用肝组织块制备肝细胞悬液时，常用胰蛋白酶，不能使用胃蛋白酶，因为胃蛋白酶需要在强酸环境下才能起作用，但这样的环境不适于细胞生存，A错误；动物细胞培养的培养液需含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、生长素和动物血清等，B正确；为防止杂菌污染，可向培养液中加入适量的抗生素，C正确；甲（肿瘤细胞）失去接触抑制，而乙（正常肝细胞）具有接触抑制，因此甲、乙细胞在持续的培养过程中，乙会出现停止增殖的现象，D错误。
【点睛】解答本题的关键是了解到甲细胞是肿瘤细胞，具有无限增值的能力，不会出现停止增值的现象。
14.核苷酸合成有两个途径，物质A可以阻断其中的全合成途径(如下图)。正常细胞内含有补救合成途径所必需的转化酶和激酶，制备单克隆抗体时选用的骨髓瘤细胞中缺乏转化酶。现用加入H、A、T三种物质的“HAT培养基”来筛选特定的杂交瘤细胞。关于筛选原理的叙述，正确的是 （ ）
A. 免疫的B细胞及其互相融合细胞因全合成途径被A阻断而在HAT培养基上不能增殖
B. 骨髓瘤细胞及其互相融合细胞因无法进行上述两个途径而在HAT培养基上不能增殖
C. 杂交瘤细胞因为可以进行上述两个途径所以能在HAT培养基上大量增殖
D. HAT培养基上筛选出的所有杂交瘤细胞既能大量增殖又能产生高纯度的目标抗体
【答案】B
【解析】
免疫的B细胞及其互相融合细胞的全合成途径被A阻断，但还存在补救合成途径，A错误；由于骨髓瘤细胞及其相互融合细胞缺乏转化酶，因此补救合成途径也不能进行，在HAT培养基上不能增殖，B正确；杂交瘤细胞因为可以进行补救途径所以能在HAT培养基上大量繁殖，C错误；HAT培养基上筛选出的杂交瘤细胞能大量增殖，但不能保证都能产生高纯度的目标抗体，D错误。
15.软骨发育不全为常染色体显性遗传病，基因型为HH 的个体早期死亡。一对夫妻均为该病患者，希望通过胚胎工程技术辅助生育一个健康的孩子。下列做法正确的是( )
A. 将一个囊胚进行多等分，从中筛选所需胚胎，培养至原肠胚期后移植到子宫
B. 从桑椹胚中分离少量滋养层细胞，培养后检测基因型
C. 从羊水中提取细胞进行检测，并根据检测结果淘汰基因型为hh的胚胎
D. 经超数排卵处理后进行体外受精
【答案】D
【解析】
来自同一个胚胎的后代具有相同的遗传物质，因此不需要将囊胚进行多等分，而应分离少量滋养层细胞，培养后检测基因型，从中筛选所需胚胎，培养到桑椹胚或囊胚进行移植，A错误；需要从囊胚中分离少量滋养层细胞，培养后检测基因型，B错误；应从囊胚中分离少量滋养层细胞进行检测，因为羊水中细胞可能不是胚胎脱落的细胞，筛选出基因型为hh的个体进行移植，C错误；培育试管婴儿时，需先进行超数排卵处理，再进行体外受精，D正确。
16.图1表示的是科学家获得iPS细胞（类似于胚胎干细胞），再将iPS细胞转入小鼠乙体内培养的过程，图2表示研究人员利用小鼠（2N=40）获取单倍体胚胎干细胞的一种方法，以下分析错误的是：
A. 图1过程中，成纤维细胞转变为iPS细胞，类似于植物组织培养中的脱分化过程
B. 研究人员将iPS细胞团注射入缺乏T细胞的小鼠体内，细胞团能继续生长.由此可推测图1中iPS细胞团逐渐退化的原因可能是小鼠乙发生免疫反应造成的
C. 图2中，研究人员使小鼠丙超数排卵，再利用SrC12溶液处理后体外培养至④囊胚期，再筛选出单倍体干细胞
D. 研究发现，单倍体胚胎干细胞有发育全能性，该技术培育的单倍体动物可成为研究显性基因功能的理想细胞模型
【答案】D
【解析】
【分析】
据图一分析，小鼠甲提取出成纤维细胞与特异性基因结合，形成iPS细胞，导入小鼠乙。据图二分析，对小鼠丙处理，从而获得更多的卵母细胞，再利用SrC12溶液处理、激活卵母细胞，并在体外培养至囊胚，进而培育成单倍体。
【详解】图1过程中，成纤维细胞转变为iPS细胞，即从高度分化的细胞形成分化程度低的细胞，过程类似于植物组织培养中的脱分化过程，A正确；将iPS细胞团注射入缺乏T细胞的小鼠体内，细胞团能继续生长．由此可推测图1中iPS细胞团逐渐退化的原因是小鼠乙（受体）发生免疫反应，使得iPS细胞团失去生命力，B正确；图2中，对实验小鼠丙注射促性腺激素使其超数排卵，从而获得更多的卵母细胞，再利用SrC12溶液处理、激活卵母细胞，并在体外培养至④囊胚期，再利用流式细胞仪筛选出单倍体细胞，C正确；单倍体胚胎干细胞也能分化，形成不同功能的细胞、组织和器官，该技术培育的单倍体动物可成为研究隐性基因功能的理想细胞模型，因为显性基因在正常的生物体内也能表达，D错误；故选D。
【点睛】本题考查动物细胞培养、胚胎工程等相关知识，意在考查学生的识图和推理能力，难度不大。
17.进行生物工程设计，实验选材很重要。下列选材不当的一组是（ ）
实验目的
实验材料
材料特点
A
动物细胞核移植
卵(母)细胞
细胞大,细胞质物质能有效调控核发育
B
胚胎干细胞培养
胚胎内细胞团
未进行组织器官分化的细胞，有很强 的分裂能力
C
表达生长激素的转基因动物
乳腺细胞 作受 体细胞
分泌乳汁产生药物
D
基因治疗重度免疫缺陷症
T 淋巴细胞
与机体特异性免疫机能有关
A. A B. B C. C D. D
【答案】C
【解析】
【分析】
1、卵母细胞适于作为受体细胞,因为卵(母)细胞大,容易操作；卵(母)细胞质多,营养丰富；含有促使细胞全能性表达的物质。
2、囊胚的内细胞团细胞属于胚胎干细胞,具有很强的分裂能力，可以用胚胎干细胞培养。
3、采用基因工程技术培养乳腺生物反应器时，受体细胞是受精卵，因为受精卵全能性最高。
4、采用基因治疗重度免疫缺陷症时，需要取患者的T淋巴细胞，因为T细胞是机体重要的免疫细胞。
【详解】A、动物细胞核移植时，常采用去核卵母细胞作为受体细胞，因为卵细胞大，营养丰富，且细胞质物质能有效调控核发育，A正确；
B、囊胚的内细胞团细胞属于胚胎干细胞，具有很强的分裂能力，可以用胚胎干细胞培养，B正确；
C、采用基因工程技术培养乳腺生物反应器时，受体细胞是受精卵，因为受精卵全能性最高，C错误；
D、采用基因治疗重度免疫缺陷症时，需要取患者的T淋巴细胞，因为T细胞是机体重要的免疫细胞，D正确。
故选C。
18.下列关于细胞工程的有关叙述，正确的是( )
A. 利用花药离体培养得到单倍体植株，从紫草的愈伤组织中提取紫草素，利用细胞工程培育“番茄 、马铃薯”杂种植株，都利用了植物组织培养技术
B. 在进行组织培养时，由根尖细胞形成愈伤组织的过程中，不可能会发生细胞脱分化和基因突变，而可能发生细胞分化和基因重组
C. 动物细胞融合与植物体细胞杂交相比，诱导融合的方法、所用的技术手段、所依据的原理均相同，都能形成杂种细胞和杂种个体
D. 动物难以克隆的根本原因是基因组中的基因不完整
【答案】A
【解析】
花药离体培养和杂种细胞培育成杂种植株都利用了植物组织培养技术，A正确；在进行组织培养时，由根尖细胞形成愈伤组织的过程中，因细胞分裂则可能发生基因突变，但因不发生减数分裂，所以不会发生基因重组，B错误；动物细胞融合与植物体细胞杂交相比，诱导融合的方法，所用的技术手段，所依据的原理均不相同，而且只有植物体细胞杂交能产生杂种植株，C错误；动物难以克隆的根本原因是其全能性较低，D错误。
19.下列关于生殖细胞的发生和受精过程的叙述，正确的是
A. 卵细胞膜反应是防止多精入卵的第一道屏障
B. 雄原核形成的同时，卵子完成减数第二次分裂
C. 卵子是从动物的初情期开始，经过减数分裂形成的
D. 精子与卵子相遇后，会发生顶体反应，阻止其他精子入卵
【答案】B
【解析】
精子触及卵黄膜的瞬间，发生透明带反应，阻止其他精子进入，是防止多精入卵受精的第一道屏障，A错误；当精子与处于减二中期的次级卵母细胞结合时（即受精时），次级卵母细胞才被激活分裂出第二极体和卵子，因此卵子完成减数第二次分裂，B正确；卵细胞的形成是从胎儿时期开始的，并不是从初情期开始，C错误；精子与卵子相遇后，会发生顶体反应，防止多精入卵的两道屏障是透明带反应和卵黄膜的封闭作用，D错误。
【点睛】解答本题要注意以下几点：1、透明带反应和卵黄膜的封闭作用是防止多精入卵的两道屏障，其中透明带反应是第一道屏障。2、雄原核形成与卵子完成减数第二次分裂是同时进行的。
20.下图表示卵子的发生过程。与此相关的叙述中，不合理的是
A. 图中A是第一极体，B是合子，E是受精，阶段C是胎儿期，阶段D是初情期后
B. 当观察到第二极体时，可以表明卵子已经完成了受精
C. 能发生染色体着丝点分裂的阶段是①④
D. ①阶段存在的变异方式有基因突变、基因重组和染色体变异
【答案】D
【解析】
【分析】
分析题图：C表示卵子的形成和在卵巢内的贮备，是胎儿出生前完成的；D表示减数分裂过程，在初情期后进行，且减数第二次分裂过程中是在受精作用过程中完成的。图中A是第一极体，B是受精卵，E是受精过程。①是减数第一次分裂间期；③是减数第一次分裂，④是减数第二次分裂，同时发生受精作用。
【详解】图中①是减数第一次分裂间期，卵原细胞演变为初级卵母细胞；③为减数第一次分裂，只有在受精后，次级卵母细胞才能最终完成减数第二次分裂，因此E是受精，B是合子。卵泡的形成是在胎儿期，减数分裂是从初情期开始的，因此阶段C为胎儿期，阶段D为初情期后，A正确；第二极体是减数第二次分裂后产生的，而减数第二次分裂发生在受精过程中，因此当观察到第二极体时，可以表明卵子已经完成了受精，B正确；着丝点分裂可发生在有丝分裂中，也可发生在减数第二次分裂中，因此①④均能发生着丝点分裂，C正确；①是减数第一次分裂间期，该过程中的变异类型一般只有基因突变，没有基因重组和染色体变异，D错误。
故选D。
【点睛】本题结合图解，考查细胞的减数分裂、卵子的发生等知识，要求考生识记细胞减数分裂不同时期的特点；识记卵子的发生过程，能正确分析题图，再结合所学的知识准确判断各选项。
21.下列有关哺乳动物精子和卵子发生的叙述，错误的是（ ）
A. 精细胞经变形后，高尔基体发育形成精子的顶体
B. 不同种动物的精子形态相似，但大小不同，体型越大的动物精子越大
C. 卵母细胞发育至减数第二次分裂中期时，才具备受精能力
D. 哺乳动物卵泡的形成和在卵巢内的储备，是在出生前完成的，这是精子和卵子在发生上的重要区别
【答案】B
【解析】
【分析】
精子变形：细胞核→精子头的主要部分；高尔基体→头部的顶体；中心体→精子的尾；线粒体→线粒体鞘（尾的基部）；细胞内其他物质→原生质滴（最后脱落）；不同种动物精子的形态相似，大小略有有不同，与动物的体形大小无关。受精前的卵子的准备，动物排出的可能是初级卵母细胞也可能是次级卵母细胞，都要在输卵管内进一步成熟，达到减数第二次分裂中期时，才具备与精子受精的能力。
【详解】精细胞经变形后，高尔基体发育形成精子头部的顶体，A正确；不同精子形态相似且大小和动物体型大小无关，B错误；卵子在输卵管内发育到减数第二次分裂中期时才具备受精的能力，C正确；哺乳动物卵泡的形成和在卵巢内的贮备是胎儿出生前即（胎儿时期）完成的，这是精子和卵子在发生上的重要区别，D正确。
【点睛】解答本题的关键是识记精子和卵子形成的时间、精子变形的过程，掌握精子形成三个阶段发生的具体内容，明确不同精子形态相似且大小和动物体型大小无关。
22.下列关于胚胎发育和胚胎工程的叙述，正确的是（ ）
A. 卵裂时期胚胎中细胞的相对表面积不断减小
B. 供体超数排卵过程需要是注射有关激素，目是获得更多的卵原细胞并完成减数分裂
C. 对胚胎细胞中 DNA 迕行 PCR 扩增，用 SRY 特异性探针检测，出现阴性反应者为雄性
D. 胚胎干细胞具有细胞核大、核仁明显和具有发育的全能性等特点
【答案】D
【解析】
【分析】
1、胚胎发育过程：(1)卵裂期：细胞进行有丝分裂，数量增加，胚胎总体积不增加；(2)桑椹胚：32个细胞左右的胚胎之前所有细胞都能发育成完整胚胎的潜能属全能细胞；(3)囊胚：细胞开始分化，其中个体较大的细胞叫内细胞团将来发育成胎儿的各种组织，而滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘;胚胎内部逐渐出现囊胚腔。(4)原肠胚：内细胞团表层形成外胚层，下方细胞形成内胚层，由内胚层包围的囊腔叫原肠腔，细胞分化在胚胎期达到最大限度。
2、胚胎干细胞具有胚胎细胞的特性，体积较小，细胞核大，核仁明显；在功能上，具有发育的全能性，可分化为成年动物任何一种组织细胞；另一方面,在体外培养条件下，ES细胞可不断增殖而不发生分化，可进行冷冻保存，也可以进行某些遗传改造。
【详解】A、卵裂期胚胎中细胞数目在不断增加，体积减小，相对表面积增大，A错误；
B、过程需要是注射有关激素（促性腺激素），目的是获得更多的卵原细胞，但所获得的卵原细胞还未完成减数分裂，B错误；
C、对胚胎细胞中DNA进行PCR扩增，用SRY特异性探针检测，出现阴性反应者，说明其不含Y染色体，即胚胎为雌性，C错误；
D、胚胎干细胞具有细胞核大、核仁明显和具有发育的全能性等特点，D正确。
故选D。
23.下图为利用二倍体小鼠所做实验的操作流程。有关叙述错误的是
A. 图中囊胚的细胞基因型都相同 B. 过程①需运用早期胚胎培养技术
C. 代孕母鼠需进行同期发情处理 D. 嵌合体幼鼠是二倍体
【答案】A
【解析】
【分析】
分析题图，图示是利用二倍体小鼠所做的实验，首先将白鼠和黑鼠的受精卵分别培养形成8细胞胚，再合并为16细胞胚，进一步发育为囊胚，最后移植到代孕母体分娩形成嵌合体幼鼠。
【详解】图中囊胚是由白鼠和黑鼠的胚胎合并形成的，因此该胚胎中的细胞的基因型不都相同，A错误；过程①需运用早期胚胎培养技术，B正确；代孕母鼠需进行同期发情处理，以便移植外来胚胎，C正确；嵌合体幼鼠仍然是是二倍体，因为没有发生两个二倍体细胞融合为一个四倍体细胞的过程，D正确。
24.在“果醋制作过程”中，获得较多的醋酸杆菌菌种的最简便方法是（ ）
A. 从变酸的葡萄酒表面获得菌膜，再培养、分离
B. 不必人为加入菌种在葡萄等水果表面本身就存在大量醋酸杆菌
C. 从泡菜坛盖边沿的水槽中的表面获得菌膜，再培养、分离
D. 从土壤中分离提取
【答案】A
【解析】
【分析】
参与果醋制作的菌种是醋酸杆菌，醋酸杆菌是一种好氧细菌，只有当氧气充足的时候才能进行旺盛的生命活动。变酸的酒表面的菌膜是醋酸杆菌在液面上大量繁殖而形成的，因此从变酸的葡萄酒表面获得菌膜，再培养、分离可以获得较多的醋酸杆菌菌种。
【详解】A. 变酸的葡萄酒表面的菌膜就是醋酸菌在液面大量繁殖而形成的，可以用此菌膜培养、分离获得醋酸菌，A正确；
B. 在葡萄等水果表面存在大量的酵母菌，不是醋酸杆菌，B错误；
C. 泡菜坛盖边沿的水槽中表面获得菌膜是酵母菌形成的，C错误；
D. 土壤是酵母菌的大本营，D错误。
25.微生物的代谢速度与高等动植物相比快得多，下列哪项不是这一生命现象的原因（ ）
A. 表面积与体积的比很大
B. 与外界环境物质交换迅速
C. 适宜条件下微生物的繁殖速度非常快
D. 微生物体内酶的种类比其他生物多
【答案】D
【解析】
【分析】
探究细胞表面积与体积之比，与物质运输速率之间的关系：体积越大，相对表面积越小，物质运输的效率越低；实验中测量不同大小的琼脂块上NaOH扩散的深度相同；实验所用的琼脂小块上含有酚酞，NaOH和酚酞相遇，呈紫红色。
【详解】微生物的代谢速度与高等动植物相比快得多，这一生命现象的原因有：表面积与体积的比很大、与外界环境物质交换迅速、适宜条件下微生物的繁殖速度非常快；而微生物体内酶的种类比其他生物多不是微生物的代谢速度与高等动植物相比快得多的原因。
故选D。
【点睛】本题考查探究细胞表面积与体积的关系，意在考查考生的识记能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系，形成知识网络结构的能力；能运用所学知识，准确判断问题的能力，属于考纲识记和理解层次的考查。
26.食醋生产过程中，具有协同作用的微生物是（ ）
①曲霉 ②大肠杆菌 ③酵母菌 ④醋酸菌
A. ②③④ B. ①②④
C. ①③④ D. ①②③
【答案】C
【解析】
分析】
食醋酿造与果醋酿造所用原料不同，食醋酿造一般用粮食，内含大量淀粉，需先用曲霉使淀粉水解成糖，使蛋白质水解成氨基酸，然后用酵母菌使糖转变成酒精，最后用醋酸菌使酒精氧化成醋酸．由此可见，食醋生产过程中，具有协同作用的菌类是曲霉、酵母菌和醋酸菌，据此答题。
【详解】①食醋生产过程中，需要曲霉将淀粉水解成糖，将蛋白质水解成氨基酸，①正确；
②食醋生产过程中，不需要大肠杆菌，②错误；
③食醋生产过程中，需要酵母菌将糖转变成酒精，③正确；
④食醋生产过程中，需要醋酸菌将酒精氧化成醋酸，④正确．
故选C。
【点睛】本题考查果酒和果醋的制作，尤其是果醋的制作，要求考生识记果醋的制作过程，能理论联系实际，合理分析食醋制作过程中涉及的微生物及相应的作用，再根据题干要求选出正确的答案。
27.关于微生物的叙述中，正确的是（ ）
A. 所有的微生物都是形体微小、结构简单、对人类有害的
B. 根据微生物对碳源需要的差别，可以使用含不同碳源的培养基选择优良的单一纯种
C. 所有微生物均属于原核生物界、真菌界、原生生物界
D. 细菌、放线菌、酵母菌都属于原核生物
【答案】B
【解析】
【分析】
1、由原核细胞构成的生物叫原核生物，由真核细胞构成的生物叫真核生物；原核细胞与真核细胞相比，最大的区别是原核细胞没有被核膜包被的成形的细胞核，没有核膜、核仁和染色体,原核细胞只有核糖体一种细胞器，但原核生物含有细胞膜、细胞质等结构，也含有核酸和蛋白质等物质。
2、常考的真核生物有绿藻、衣藻、真菌(如酵母菌、霉菌、蘑菇)、原生动物(如草履虫、变形虫)及动、植物等；常考的原核生物有蓝藻(如颤藻、发菜、念珠藻、蓝球藻)、细菌(如乳酸菌、硝化细菌、大肠杆菌等)、支原体、放线菌等；此外，病毒没有细胞结构，既不是真核生物也不是原核生物。
3、微生物是包括细菌、病毒、真菌以及一些小型的原生动物、显微藻类等在内的一大类生物群体，它们的共同特点是：个体微小，结构简单。
【详解】A、大多数微生物对人类是有益的、如酵母菌,少数微生物对人类是有害的、如黄曲霉能引起肝癌，A错误；
B、根据微生物对碳源需要的差别，可以使用含不同碳源的培养基选择优良的单一纯种，B正确；
C、病毒是一类不具有细胞结构的微生物,病毒不属于原核生物界、真菌界、原生生物界，C错误；
D、细菌和放线菌均属于原核生物,而酵母菌属于真核生物，D错误。
故选B
28.微生物的代谢速度与高等动植物相比快得多，下列哪项不是这一生命现象的原因（ ）
A. 表面积与体积的比很大
B. 与外界环境物质交换迅速
C. 适宜条件下微生物的繁殖速度非常快
D. 微生物体内酶的种类比其他生物多
【答案】D
【解析】
【分析】
探究细胞表面积与体积之比，与物质运输速率之间的关系：体积越大，相对表面积越小，物质运输的效率越低；实验中测量不同大小的琼脂块上NaOH扩散的深度相同；实验所用的琼脂小块上含有酚酞，NaOH和酚酞相遇，呈紫红色。
【详解】微生物的代谢速度与高等动植物相比快得多，这一生命现象的原因有：表面积与体积的比很大、与外界环境物质交换迅速、适宜条件下微生物的繁殖速度非常快；而微生物体内酶的种类比其他生物多不是微生物的代谢速度与高等动植物相比快得多的原因。
故选D。
【点睛】本题考查探究细胞表面积与体积的关系，意在考查考生的识记能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系，形成知识网络结构的能力；能运用所学知识，准确判断问题的能力，属于考纲识记和理解层次的考查。
29.细菌放在固体培养基上培养，它会繁殖并形成菌落（如图）。某实验小组想检验两种抗生素的杀菌作用，下列实验方案最合适的是（ ）
A. B. C. D.
【答案】C
【解析】
根据题意分析本实验的目的是检验两种抗生素的杀菌作用，该实验应遵循对照原则，即设计只有细菌的空白对照组，实验组是含有A抗生素和含有B抗生素，然后进行对比分析，符合分析的图示只有C，故C正确。
30.某一种菌株要从环境中提取现成的亮氨酸（20 种氨基酸中的一种）才能生长，此菌 株对链霉菌敏感。实验者用诱变剂处理此菌株，想筛选出表中细菌菌株类型。根据实验目的，选用的培养基类型是（ ）
注：L—亮氨酸S—链霉素 “+”—加入 “-” —不加入 如：L-：不加亮氨酸S+：加入链霉素
选项
筛选出不需要
亮氨酸的菌株
筛选出抗链
霉素的菌株
筛选出不需要亮氨酸
的抗链霉素的菌株
A
L+ S+
L- S-
L+ S-
B
L- S-
L+ S+
L- S+
C
L- S+
L+ S+
L- S-
D
L+ S-
L- S-
L+ S+
A. A B. B C. C D. D
【答案】B
【解析】
试题分析：根据题目要求，筛选出不需要亮氨酸的菌株，即在没有亮氨酸的培养基上能够生长，应使用的培养基为L-、S可加可不加；筛选出抗链霉素的菌株应使用的培养基为S+、L可加可不加，筛选出不需要亮氨酸、抗链霉素的菌株应用的培养基L-、S+。
考点：本题主要考查微生物的选择的相关知识，意在考查考生对所学知识的理解，把握知识间内在联系的能力。
31.对不同微生物的培养过程中正确的是（ ）
A. 细菌培养时将 pH 调至酸性
B. 霉菌培养时将 pH 调至中性或微酸性
C. 培养厌氧微生物时需要提供无氧环境条件
D. 培养乳酸杆菌时在培养基中不需要添加维生素
【答案】C
【解析】
【分析】
本题是根据微生物的代谢特点配制培养基和控制培养条件的题目，根据选项涉及的具体问题梳理相关知识点，然后分析判断。
【详解】A、细菌培养时将pH调至中性或弱碱性，A错误；
B、霉菌培养时将pH调至酸性，B错误；
C、氧气会抑制厌氧微生物生长，故培养厌氧微生物时则需要提供无氧环境条件，C正确；
D、乳酸杆菌时在培养基中需要添加维生素，D错误。
故选C。
【点睛】本题主要考查学生根据微生物的代谢类型、营养需求、生存条件配制培养基和控制培养条件的能力。
32.不同的微生物对营养物质的需要各不相同。下列有关一种以CO2为唯一碳源的自养微生物营养的描述中，不正确的是
A. 氮源物质为该微生物提供必要的氮素
B. 碳源物质也是该微生物的能源物质
C. 无机盐是该微生物不可缺少的营养物质
D. 水是该微生物的营养要素之一
【答案】B
【解析】
CO2只能作为碳源，不能作为能源物质。
33.制备各种牛肉膏蛋白胨固体培养基，倒平板的具体描述正确的是（ ）
①待培养基冷却至 40℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板
②将灭过菌的培养皿盖放在桌面上，左手拔出棉塞
③右手拿锥形瓶，使瓶口迅速通过火焰
④用左手的拇指和食指打开皿盖
⑤右手将锥形瓶中培养基倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖
⑥等待平板冷却 5~10s，将平板倒过来放置，使皿盖在下，皿底在上
A. ①③④⑤ B. ④⑤⑥ C. ①②④⑥ D. ③⑤
【答案】D
【解析】
【分析】
1、倒平板操作的步骤：将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上，右手拿装有培养基的锥形瓶，左手拔出棉塞；右手拿锥形瓶，将瓶口迅速通过火焰；用左手的拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，右手将锥形瓶中的培养基倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖；等待平板冷却凝固后，将平板倒过来放置，使皿盖在下、皿底在上，这样可以防止皿盖上的水分滴到培养基上造成培养基的污染。
2、倒平板的方法：右手持盛培养基的试管或三角瓶置火焰旁边，用左手将试管塞或瓶塞轻轻地拨出，试管或瓶口保持对着火焰；然后用右手手掌边缘或小指与无名指夹住管（瓶）塞（也可将试管塞或瓶塞放在左手边缘或小指与无名指之间夹住．如果试管内或三角瓶内的培养基一次用完，管塞或瓶塞则不必夹在手中）．左手拿培养皿并将皿盖在火焰附近打开一缝，迅速例入培养基约15mL，加盖后轻轻摇动培养皿，使培养基均匀分布在培养皿底部，然后平置于桌面上，待凝后即为平板。
【详解】①等培养基冷却至50℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板，防止杂菌污染，①错误；
②不能将灭过菌的培养皿放在桌面上，因为桌面上可能有杂菌，②错误；
③右手拿锥形瓶，使瓶口迅速通过火焰，高温可防止杂菌污染，③正确；
④倒平板时皿盖只需要倾斜出一定角度，在酒精灯火焰旁进行，④错误；
⑤右手将锥形瓶中培养基倒入培养皿，左手立即盖上皿盖，并通过酒精灯火焰，⑤正确；
⑥等待平板冷却5～10分钟，将平板倒过来放置，使皿盖在下，皿底在上，⑥错误。
因此，只有③⑤两项正确。
故选D。
34.高压蒸汽湿热灭菌的排列不正确的是（ ）
①加水②排冷气③装置灭菌物品④98 kPa 下灭菌⑤加盖⑥0 kPa 下排气，打开灭菌锅
A. ①②④⑤③⑥ B. ②③⑤①④⑥
C. ①③⑤②④⑥ D. ②⑤①⑥④③
【答案】C
【解析】
【分析】
高压灭菌的原理是：在密闭的蒸锅内，其中的蒸汽不能外溢，压力不断上升，使水的沸点不断提高，从而锅内温度也随之增加，在0.1MPa的压力下，温度121℃，灭菌15-30min。高压蒸汽锅灭菌的操作步骤：
（1）首先将内层灭菌桶取出，再向外层锅内加入适量的水，使水面与三角搁架相平为宜；
（2）放回灭菌桶，并装入待灭菌物品；
（3）加盖，并将盖上的排气软管插入内层灭菌桶的排气槽内；
（4）加热，并同时打开排气阀，使水沸腾以排除锅内的冷空气；
（5）灭菌所需时间到后，切断电源，让灭菌锅内温度自然下降，当压力表的压力降至0时，打开排气阀，旋松螺栓，打开盖子，取出灭菌物品。
【详解】高压蒸汽灭菌操作步骤：首先将内层灭菌桶取出，再向外层锅内加入适量的水，即①；
再放回灭菌桶，并装入待灭菌物品即③；
然后加盖即⑤；
打开电源开关，同时打开排气阀，使水沸腾以排除锅内的冷空气即②；
待冷空气完全排尽后，关上排气阀，让锅内的温度随蒸汽压力增加而逐渐上升，当锅内压力升到所需压力时，控制热源，0.1MPa的压力下，温度121℃，灭菌15-30min即④；
灭菌所需时间到后，切断电源，让灭菌锅内温度自然下降，当压力表的压力降至0时，打开排气阀，旋松螺栓，打开盖子，取出灭菌物品即⑥；
故操作顺序应该是①③⑤②④⑥。
故选C。
35.发酵工程的第一个重要工作是选择优良的单一纯种。消灭杂菌，获得纯种的方法不包 括（ ）
A. 根据微生物遗传组成的差异，在培养基中加入不同比例的核酸
B. 根据微生物缺乏生长因子的种类，在培养基中增减不同的生长因子
C. 根据微生物对碳源需要的差别，使用含不同碳源的培养基
D. 根据微生物对抗菌素敏感性的差异，在培养基中加入不同的抗菌素
【答案】A
【解析】
【分析】
选择优良的单一纯种，就是在许多种微生物中，杀死其它微生物，使某种特定的微生物存活下来。可以采用特定的培养基获得纯种，如根据微生物对碳源需要的差别、微生物缺乏生长因子的种类、微生物对抗菌素敏感性的差异，来配置培养基获得单一纯种。
【详解】A、根据微生物遗传组成的差异，在培养基中加入不同比例的核酸（DNA和RNA），它不会直接影响到微生物自身的遗传组成，即使被微生物利用，也是被分解为核苷酸后利用，所以培养基中加入不同比例的核酸，不会对微生物起选择作用，A错误；
B、不同的微生物需要不同的生长因子，根据需要的菌可以加入在培养基中加入相应的生长因子进行分离，B正确；
C、根据微生物对碳源需要的差别，使用含不同碳源的培养基，例如培养自养型的菌，在培养基中不需加入碳源，C正确；
D、培养真菌时可以在培养基中加入青霉素来抑制细菌的生长，D正确。
故选A。
【点睛】本题考查培养基对微生物的选择作用，要求考生识记消灭杂菌，获得纯种的方法，能对选项作出准确的判断，属于考纲识记层次的考查，要求考生在平时的学习过程中，注意对相关知识进行归纳总结，构建知识网络结构。
36.突变型面包霉常需要在基本培养基上添加适当的氨基酸才能生长。现在用两种氨基酸 依赖型红色面包霉突变株 a 和 b，分别接种到下面的 6 种培养基上，两种突变株都不能在1、3、5 号培养基上生长，a、b 可以分别在 2、4 和 2、6 号培养基上生长。培养基成分 如下表，关于突变株 a 和 b 分别对于 B~T 中氨基酸需求的说法正确的是（ ）
培养基
1
2
3
4
5
6
添加氨基酸
BCDE
BEFG
CFHI
DEFI
GHIJ
EHGJ
A. 两种突变株对氨基酸的需求是相同的
B. 两种突变株都需要 G 氨基酸才能生长
C. 两种突变株必须同时供应 4 种氨基酸才能生长
D. 两种突变株都能在由 4、5 号两种培养基组成的混合培养基中生长
【答案】D
【解析】
【分析】
阅读题干和题图可知，两种突变株都不能在1、3、5 号培养基上生长，a、b 可以分别在 2、4 和 2、6 号培养基上生长。再根据获取的信息进行推理获取结论，然后判断选项。
【详解】根据题意知，a突变株不能在1、3、5号培养基上生长，但是可以在2、4培养基上生长，说明a生长需要E、F种氨基酸，b突变株不能在1、3、5号培养基生长，但是可以在2、6培养基上生长，说明b生长需要E、G种氨基酸，所以2种突变株都能在由4、5号的混合培养基中生长。
故选D。
37.下表是有关 4 种生物的能源、碳源、氮源和代谢类型的概述。其中正确的是（ ）
A. 根瘤菌、谷氨酸棒状杆菌 B. 硝化细菌、酵母菌
C. 酵母菌、谷氨酸棒状杆菌 D. 硝化细菌、根瘤菌
【答案】B
【解析】
【分析】
微生物的营养物质主要包括氮源、碳源、水和无机盐等，硝化细菌利用的能量是无机物氧化释放的能量，异养微生物利用的能量主要是糖类，微生物的代谢类型主要有自养需氧型、异养需氧型、异养厌氧型和兼性厌氧型。
【详解】A、根瘤菌和谷氨酸棒状杆菌的能源是分解糖类等有机物，谷氨酸棒状杆菌的代谢类型是异养需氧型，A错误；
B、硝化细菌的代谢类型是自养需氧型，能源是氨氧化释放的能量，氮源为氨，酵母菌的代谢类型为异养兼性厌氧型，碳源为糖类，氮源为氨或硝酸根离子，B正确；
C、谷氨酸棒状杆菌的能源是分解糖类等有机物，谷氨酸棒状杆菌的代谢类型是异养需氧型，C错误；
D、根瘤菌的能源是分解糖类等有机物，D错误。
故选B。
38. 将接种了红色细菌的培养皿置于紫外线下几天，结果培养皿中除长了一个白色菌落外，其余菌落都是红色的，据此，实验者应该（ ）
A. 暂不作结论
B. 断定是紫外线产生了白色菌落的变异
C. 如果不继续用紫外线照射，预期那个白色菌落将转变为红色
D. 断定白色菌落是一种可遗传的变异
【答案】A
【解析】
试题分析：出现白色菌落可能是变异的结果，也可能是杂菌污染的结果，故B、D错；因为变异后遗传物质发生了改变，所以变异一般是可遗传的，不用紫外线照射一般不会变回原来颜色，故C错；正确的做法是暂不作结论 经实验研究后再下结论。故选A
考点：本题考查变异和细菌培养的相关知识。
点评：本题意在考查考生的理解判断能力，属于中等难度题。
39.在 NaCl 溶液中反复溶解、析出并过滤，就能除去 DNA 溶液中的杂质的理由不包括（ ）
A. 用高浓度盐溶液溶解 DNA，能除去在高盐中不能溶解的杂质
B. 用低盐浓度使 DNA 析出，能除去溶解在低盐溶液中的杂质
C. 反复操作就能够除去与 DNA 溶解度不同的多种杂质
D. 反复操作就能够使各种杂质变性而沉淀析出
【答案】D
【解析】
【分析】
1、DNA粗提取的实验材料选取：凡是含有DNA的生物材料都可以考虑，但是使用DNA含量相对较高的生物组织，成功的可能性更大。
2、DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，利用这一特点，选择适当的盐浓度就能使DNA充分溶解，而使杂质沉淀，或者相反，以达到分离目的。
3、DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精．利用这一原理，可以将DNA与蛋白质进一步的分离。
【详解】ABC、由于DNA和蛋白质等物质在氯化钠的溶解度不同，因此可以控制氯化钠的浓度来去掉杂质，用高盐浓度的溶液溶解DNA，能除去在高盐中不能溶解的杂质，用低盐浓度使DNA析出，能除去溶解在低盐溶液中的杂质，反复操作就能够除去与DNA 溶解度不同的多种杂质，ABC正确；
D. 反复操作是根据溶解与不溶解，达到去除杂质的效果，而不是使各种杂质变性而沉淀析出，D错误。
故选D。
40.在 DNA 的粗提取不鉴定的实验中，初步析出 DNA 和提取纯净的 DNA 所用的药品和 浓度是：①0.1 g/mL 柠檬酸钠溶液；②2 mol/L NaCl 溶液；③0.14 mol/L NaCl 溶液；④ 体 积分数为 95% 的酒精溶液； ⑤ 0.015 mol/L NaCl 溶液 。以上几点正确 的是（ ）
A. ①③⑤ B. ③④ C. ②④ D. ②③④
【答案】B
【解析】
【分析】
DNA粗提取和鉴定的原理：
1、DNA的溶解性：DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液，但细胞中的某些蛋白质溶于酒精；DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性。
2、DNA鉴定：在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色。
【详解】①0.1g/mL的柠檬酸钠溶液作为抗凝剂防止血液凝固，没有用于DNA的初步析出和提纯，①错误；
②DNA可以溶于2mol/L的NaCl溶液，该溶液是为了溶解血细胞中的DNA，未用于DNA的初步析出和提纯，②错误；
③DNA在O.14mol/L的氯化钠溶液中溶解度最低，此时DNA会从溶液中析出，可用于初步析出DNA，③正确；
④由于DNA不溶于酒精，而其它杂质可以溶于酒精，因此利用体积分数为95%的酒精溶液，可提取较纯净的DNA，④正确；
⑤物质的量浓度为0.015mol/L的NaCl溶液浓度太低，DNA溶解度大，不能析出DNA，⑤错误；
故选B。
【点睛】本题考查了DNA的粗提取与鉴定的相关知识，包括实验的原理、操作步骤等，意在考查考生的识记能力和实验操作能力，难度适中，考生要识记材料选择的原则、实验原理，注意DNA虽能溶于氯化钠溶液，但是在O.14mol/L的氯化钠溶液中溶解度最低。
41.将粗提取的DNA丝状物分别加入0.14 mol/L NaCl溶液、2 mol/L NaCl溶液、体积分数为95%的酒精溶液中，然后用放有纱布的漏斗过滤，分别得到滤液P、Q、R以及存留在纱布上的黏稠物p、q、r，其中由于含DNA少可以丢弃的是( )
A. P、Q、R B. p、q、r
C. P、q、R D. p、Q、r
【答案】C
【解析】
0.14mol/LNaCl溶液以及体积分数为95％的酒精溶液中，DNA溶解度很低，所以纱布上的黏稠物p和r中DNA较多，2 mol/L NaCl溶液中DNA溶解度较高，所以滤液Q中DNA含量较多。
42. PCR一般要经过三十多次循环，从第二轮循环开始，上一次循环的产物也作为模板参与反应，由引物Ⅰ延伸而成的DNA单链作模板时 ( )。
A. 仍与引物Ⅰ结合进行DNA子链的延伸
B. 与引物Ⅱ结合进行DNA子链的延伸
C. 同时与引物Ⅰ和引物Ⅱ结合进行子链的延伸
D. 无需与引物结合，在酶的作用下从头合成子链
【答案】B
【解析】
当由引物Ⅰ延伸而成的DNA单链作模板时，此单链引物固定端为5′端，因此与它互补的子链应从另一端开始合成，即与引物Ⅱ结合延伸DNA子链。
43. 下列操作过程的叙述中错误的是
A. PCR反应中使用的微量离心管、枪头、缓冲液以及蒸馏水等在使用前必须进行高压灭菌
B. PCR所用的缓冲液和酶应分装成小份，并在－20 ℃储存
C. PCR所用的缓冲液和酶从冰箱拿出之后，迅速融化
D. 在微量离心管中添加反应成分时，每吸取一种试剂后，移液器上的吸液枪头都必须更换
【答案】C
【解析】
试题分析：为避免外源DNA等因素污染，PCR反应中使用的微量离心管、枪头、缓冲液以及蒸馏水等在使用前必须进行高压灭菌，A正确。CR缓冲液和酶应分装成小份，在-20 ℃储存，使用前，将所需试剂从冰箱取出，放在冰块上缓慢融化，B正确，C错。微量离心管中添加反应成分时，每吸取一种试剂后，移液器上的吸液枪头都必须更换，以免其他成分污染，D正确。
考点：本题考查PCR相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构能力。
44.下面关于 DNA 对高温的耐受性的说法不正确的是（ ）
A. DNA 对高温的耐受性一般要比蛋白质强
B. 超过 80℃后 DNA 将变性，即使恢复到常温，生物活性也不能恢复
C. 不同生物的 DNA 的“变性”温度不一定相同
D. 深海热泉附近生活的生物的 DNA 对高温的耐受性更强，其 DNA 中鸟嘌呤所占的比例更高
【答案】B
【解析】
【分析】
与蛋白质相比，DNA对高温的耐受性更强，多少蛋白质不能忍受60～80℃的高温，而DNA在80℃以上才能变性；DNA在80～100℃高温条件下，双螺旋结构解体，双链打开，即DNA变性，当温度降低后，双螺旋结构又会重新形成，即复性；由于DNA分子中的G、C碱基对的氢键是3个，A、T碱基对的氢键是2个，因此DNA分子中G、C碱基对的比例越大，DNA分子越稳定。
【详解】A、与蛋白质相比，DNA分子的热稳定性较强，A正确；
B、超过过80℃后DNA将变性，温度降低，DNA分子会复性，B错误；
C、DNA分子的稳定性与G、C碱基对的比例有关，因此不同生物的DNA的“变性”温度不一定相同，C正确；
D、热泉附近生活的生物的DNA对高温耐受性更强，其DNA中鸟嘌呤所占的比例更高，这是长期自然选择的结果，D正确。
故选B。
45.下列与利用NaCl溶液初步析出DNA黏稠物有关的叙述，不正确的是
A. 操作时缓缓滴加蒸馏水，以降低DNA的溶解度
B. 操作时用玻璃棒轻缓搅拌以保证DNA分子的完整
C. 加蒸馏水可以同时降低DNA和蛋白质的溶解度
D. 当丝状黏稠物不再增加时，NaCl溶液的浓度可认为是0.14 mol/L
【答案】C
【解析】
试题分析：DNA的粗提取与鉴定时，操作时缓缓向氯化钠溶液中滴加蒸馏水，可降低DNA的溶解度，A正确；操作时用玻璃棒轻缓搅拌以保证DNA分子的完整，B正确；加蒸馏水可以降低DNA的溶解度但不能降低蛋白质的溶解度，C错误；当丝状黏稠物不再增加时，NaCl溶液的浓度可认为是0.14mol/L，D正确。
考点：本题考查DNA的粗提取与鉴定的相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识网络的能力。
二、非选择题
46.将动物致病菌的抗原基因导入马铃薯制成植物疫苗饲喂转基因马铃薯可使动物获得免疫力。以下是不植物疫苗制备过程相关的图和表。
表 1 引和对序列表
引物对 A
P1 AACTGAAATGTAGCTATC
P2 TTAAGTCCATTACTCTAG
引物对 B
S1 GTCCGACTAGTGGCTGTG
S2 AGCTGGCGTTTAGCCTCG
表 2 几种限制酶识别序列及切割位点表
限制酶
Alu I
EcoR I
Pst I
Sma I
切割位点
AG↓CT
TC↑GA
G↓AATTC
CTTAA↑G
CTGCA↓G
G↑ACGTC
CCC↓GGG
GGG↑CCC
请根据以上图表回答下列问题。
（1）在采用常见 PCR 方法扩增目的基因的过程中，需要解旋酶吗？_____使用的DNA 聚合酶不同于一般生物体内的 DNA 聚合酶，其最主要的特点是___________________。
（2）PCR 过程中退火（复性）温度必须根据引物的碱基数量和种类来设定。表 1 为根据 模板设计的两对引物序列，图 2 为引物对不模板结合示意图。请判断哪一对引物可采用较 高的退火温度？___________________ 。
（3）画出 X 处的末端组成 ______________________________ 。
（4）图 1 步骤③所用的 DNA 连接酶对所连接的 DNA 两端碱基序列是否有与一性要求？________。
（5）为将外源基因转入马铃薯，图 1 步骤⑥转基因所用的细菌 B 通常为______________。
（6）对符合设计要求的重组质粒 T 迕行酶切，假设所用的酶均可将识别位点完全切开， 请根据图 1 中标示的酶切位点和表 2 所列的识别序列，对以下酶切结果作出判断。
①采用 EcoR I 和 Pst I 酶切，得到___________________ 种 DNA 片断。
②采用 EcoR I 和 Sma I 酶切，得到___________________ 种 DNA 片断。
（7）抗原基因在马铃薯体内会表达出抗原，抗原进入动物体内会刺激其_____细胞 增殖分化成_____细胞和_____细胞，从而获得免疫能力。
【答案】 (1). 不需要 耐高温 (2). 引物对 (3). B (4).
(5). 没有 (6). 农杆菌 (7). 2 (8). 1 (9). B (10). 浆 (11). 记忆
【解析】
【分析】
PCR技术：
1、概念：PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术。
2、原理：DNA复制。
3、前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物。
4、过程：①高温变性：DNA解旋过程；②低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链，PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开。
【详解】（1）PCR过程中是通过高温使氢键断裂的，因此不需要加入解旋酶，使用的DNA聚合酶具有耐高温的特性。
（2）耐高温的DNA分子中通常含有G与C碱基比例大，因为它们之间形成三个氢键，因此稳定性强。引物B中含C与G的碱基对较多，可采用较高的退火温度。
（3）通过图1看出X是经限制性酶EcoRI和AluI切割的末端，再通过表2可以得出，X 处的末端组成是：
（4）多种限制酶切割，形成不同的切割位点，所用的DNA连接酶对所连接的DNA两端碱基序列就没有专一性要求。
（5）植物基因工程中常用农杆菌做受体细胞。
（6）据图分析，用到了EcoR I酶和Alu I酶切割抗原DNA片段产生了X、Y两个片段，而用EcoR I酶和SmaI酶切割质粒产生了 M、N两个片段，且M、N片段间存在Pst I酶切点，因此再用EcoRⅠ和PstⅠ酶切割这两片段形成的重组质粒，由于保留了Pstl的切割位点，所以可以得到两种DNA分子。而用EcoRⅠ和SmaⅠ酶切重组质粒中，如图I-②过程只能产生一种DNA片断。
（7）抗原进入动物体内，刺激其B细胞，B细胞增殖分化成浆细胞和记忆B细胞，从而获得免疫能力。
【点睛】本题具有一定的难度，考查了运用PCR方法扩增目的基因的有关知识，意在考查考生的图解识别能力，尤其是限制酶的作用是解答本题的难点和关键点。
47.请回答有关下图的问题：
（1）图甲中序号④所示过程叫做_________，该过程遵循的碱基互补配对原则不同于翻译过程的是_____(请将模板碱基写在前)。
（2）如图乙，一个基因表达载体的组成，除了目的基因外，在基因尾端还必须有 [2]_____；图中[3]_____的作用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。
（3）若预期蛋白质欲通过乳腺生物反应器生产，则构建基因表达载体时，图乙中序号[1]代表的是___________________；且在图甲中⑨过程之前，要对精子进行筛选，保留含性染色体___________________的精子。
（4）为获得较多的受精卵进行研究，图甲中⑥过程一般用激素对供体做_________处理；为提高培育成功率，迕行⑩过程之前，要对_____动物做_____处理。若图甲中的卵母细胞来自从屠宰场收集的卵巢，则其在⑧之前需进行体外培养到_____ 期方能受精。
【答案】 (1). 反转录 (2). A–T (3). 终止子 (4). 标记基因 (5). 乳腺蛋白基因的启动子 (6). X (7). 超数排卵 (8). 供体和受体 (9). 同期发情 (10). MII 中期
【解析】
【分析】
分析甲图：①-⑤表示蛋白质工程，即预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有氨基酸序列→找到对应的脱氧核苷酸序列（基因），其中④是以细胞质中的mRNA为模板反转录形成DNA（目的基因）的过程，⑤表示基因表达载体的构建过程；⑥表示卵母细胞的采集；⑦表示精子的采集和获能；⑧表示卵母细胞的培养；⑨表示精子获能和体外受精；⑩表示胚胎移植过程。
分析乙图：重组质粒。
【详解】（1）图甲中序号④是由RNA到DNA的过程，是反转录过程；逆转录过程遵循的碱基互补配对原则是：A–T、G-C、C-G 、U-A，翻译过程碱基互补配对是A-U、G-C、C-G 、U-A，故该过程遵循的碱基互补配 对原则不同于翻译过程的是A–T。
（2）基因表达载体的结构包括目的基因、启动子、终止子及标记基因等，其中目的基因的尾端是终止子；标记基因的作用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。
（3）由于通过乳腺生物反应器来生产这种蛋白质，故图乙中序号[1]代表乳腺蛋白基因的启动子；对精子进行筛选，保留含性染色体X的精子，以受精后得到雌性个体，利用乳腺生物反应器生产。
（4）对雌性个体注射促性腺激素，可达到超数排卵的目的；胚胎移植之前要对供、受体进行同期发情处理；采集的卵子必须培养到减数第二次分裂中期才具有受精的能力。
【点睛】本题考查蛋白质工程、基因工程、胚胎工程的知识，意在考查能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系能用文字、图表以及数学方式等多种表达形式准确地描述生物学方面的内容，通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理，做出合理的判断或得出正确的结论的能力。
48. 某课题组为解决本地种奶牛产奶量低的问题，引进了含高产奶基因但对本地适应性差的纯种公牛。
（1）拟进行如下杂交：
♂A（具高产奶基因的纯种）×♀B（具适宜本地生长基因的纯种）→C
选择B作为母本，原因之一是胚胎能在母体内正常＿＿＿＿＿＿。若C中的母牛表现为适宜本地生长，但产奶量并未提高，说明高产奶是＿＿＿性状。为获得产奶量高且适宜本地生长的母牛，根据现有类型，最佳杂交组合是＿＿＿＿＿，后代中出现这种母牛的概率是＿＿＿（假设两对基因分别位于不同对常染色体上）。
（2）用以上最佳组合，按以下流程可加速获得优良个体。
精子要具有受精能力，需对其进行＿＿＿处理；卵子的成熟在过程＿＿＿中完成。在过程④的培养基中含有葡萄糖，其作用是＿＿＿＿＿＿＿＿＿。为筛选出具有优良性状的母牛，过程⑤前应鉴定胚胎的＿＿＿＿＿＿。子代母牛的优良性状与过程＿＿＿的基因重组有关。
（3）为了提高已有胚胎的利用率，可采用＿＿＿＿＿＿技术。
【答案】（1）生长发育或胚胎发育 隐性 ♂A×♀C 1/8
（2）获能或增强活力 ③ 供能 性别、高产奶和适应生长的基因 ②
（3）胚胎分割
【解析】
（（1）由于胚胎能在母体内进行正常的胚胎发育，所以可选择适宜当地生长的纯种牛做母本。用纯种高产奶牛作父本与适宜当地生长的纯种牛作母本杂交，获得了C牛，表现为适宜当地生长，但产奶量并没提高，这说明适宜当地生长对不适宜当地生长是显性，低产奶对高产奶是显性。由于控制奶牛的产奶量的基因和对本地的适应性的基因分别位于不同的染色体上，说明他们在遗传时遵循基因的自由组合定律。若控制奶牛的产奶量的等位基因为A和a，对本地的适应性的的等位基因为B和b，可推知雄牛A的基因型为aabb，雌牛B的基因型为AABB，C牛基因型为AaBb，可见要获得产奶量高且适宜当地生长的母牛（aaB-），由于A牛的适宜当地生长的能力差，最好做父本，由此可推知最佳的实验组合为♂A×♀C，此时后代出现所需牛（aaBb）的概率为1/4×1/2＝1/8。
（2）精子需获能后才具备受精的能力；母牛排卵时排出的卵子为次级卵母细胞，由此可推知减数第二次分裂形成卵细胞是在受精过程中完成的，即卵子的成熟是在体外受精过程中完成；在胚胎培养过程中，培养基中的葡萄糖能为胚胎发育过程提供能量；为了筛选出具有优良性状的母牛，在胚胎移植之前需对胚胎的性别、高产奶和适宜生长的基因进行鉴定；母牛在减数分裂过程中发生基因重组，产生具有优良性状基因的卵细胞，子代母牛的优良性状与此有关。
（3）通过胚胎分割技术可产生遗传性状相同的多个胚胎，从而提高胚胎的利用率。
【考点定位】本题主要是考查遗传规律在生产方面的应用，同时涉及胚胎工程的相关操作等知识点。
49.下表为一种营养液的配方，试根据表中的内容作答：
成分
含量
Ca(NO3)2
1 g
KH2PO4
0.25 g
KCl
0.12 g
MgSO4
0.30 g
Fe(NO3)2
0.30 g
Mo
极少
蒸馏水
1000 mL
（1）若用于植物培养，在培养的初期，植物出现萎蔫现象，最可能的原因是__________________。可采用的最简单的有效措施是__________________________。
（2）培养一段时间后，检测到培养液中留存的 NO3-较少而 Ca2+等离子较多，这一现象不 细胞膜的___________________ 有关。
（3）此培养液若用于培养微生物，则可以培养的微生物代谢类型是___________________。培养液 中含有的营养物质有___________________ 类，分别是___________________ 。如果不慎将过量的 NaCl 加人 培养基中，如不想浪费此培养基，可加入________________ ，用以培养_______________。若用于菌 种的鉴定，应该增加的成分是___________________ 。若除去 Ca(NO3)2、Fe(NO3)2，该培养基则可用于培养___________________ 。
【答案】 (1). 培养液浓度过高 (2). 加水稀释 (3). 选择透过性 (4). 自养型 (5). 3 (6). 无机盐，水，氮源 (7). 含碳有机物 (8). 金黄色葡萄球菌 (9). 琼脂 (10). 固氮微生物
【解析】
【分析】
1、培养基的基本成分：水、无机盐、碳源、氮源及特殊生长因子。
2、对异养微生物来说，含C、N的化合物既是碳源，也是氮源，即有些化合物作为营养要素成分时并不是起单一方面的作用。
3、自养型微生物与异养型微生物的培养基的主要差别在于碳源。
【详解】（1）植物萎蔫是缺水，最可能是培养液浓度过高，使植物不能从培养液中吸水，甚至失水。可加水稀释培养液。
（2）一段时间后，检测到培养液中留存的Ca2+较多，而NO3-较少，说明该植物吸收Ca2+较少，而NO3-较多，这一现象与细胞膜的选择透过性功能有关。
（3）此培养液中无有机物，所以只能培养自养型微生物，此培养液能提供水、无机盐、氮源三类营养物质。不慎将过量NaCl加入培养基中，若不想浪费此培养基，可再加入含碳有机物，用于培养金黄色葡萄球菌。鉴定微生物菌种用的是固体培养基，所以还应该加入琼脂。若除去成分Ca(NO3)2、Fe(NO3)2，则没有了氮源，加入(CH2O) , 则有了碳源，所以该培养基可用于培养固氮微生物。
【点睛】本题考查微生物的分离和培养，重点考查制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的过程，要求考生掌握培养基的制备步骤及相关的操作，相关知识点只需考生识记即可，属于考纲识记层次的考查。
50. 乙醇等"绿色能源"的开发备受世界关注。利用玉米秸秆生产燃料酒精的大致流程为：
（1）玉米秸秆预处理后，因该选用____酶进行水解，使之转化为发酵所需的葡萄糖。
（2）从以下哪些微生物中可以提取上述酶？________（多选）
A．酿制果醋的醋酸菌
B．生长在腐木上的霉菌
C．制作酸奶的乳酸菌
D．生产味精的谷氨酸棒状杆菌
E．反刍动物瘤胃中生存的某些微生物
（3）若从土壤中分离生产这种酶的微生物，所需要的培养基为______（按功能分），培养基中的碳源为___________ 。
（4）发酵阶段需要的菌种是_________，生产酒精是要控制的必要条件是________ 。
【答案】（1）纤维素（酶） （2）B、E (3)选择培养基；纤维素 （4）酵母菌；无氧（密封、密闭）
【解析】
试题分析：用植物秸秆生产酒精是利用微生物进行发酵的过程。植物秸秆中的有机物主要是纤维素，需要纤维素酶才能将其水解成葡萄糖，生长在腐木上的霉菌及反刍动物瘤胃中生存的某些微生物中含有纤维素酶，若从土壤中分离产生这种酶的微生物，所用的培养基为选择培养基，利用的碳源为纤维素。发酵阶段需要的菌种是酵母菌，生产酒精时要控制的必要条件是无氧（密封、密闭）。
考点：本题考查分解纤维素的微生物和果酒发酵。
点评：本题以"绿色能源"为背景，考查分解纤维素的微生物和果酒发酵，意在考查考生的识记能力和应用能力，属于容易题。
51.玉米是我国重要的粮食作物，下图是某生命科学研究院利用玉米种子作为实验材料的 所做的一些科学实验。请认真读图然后回答下列问题：
（1）实验装置A中的玉米种子，在萌发成为绿色幼苗的过程中，其代谢类型（营养方式）发生了从___________________到___________________的本质性的变化；但玉米的根系自始至终保持着的吸水方式是___________________。
（2）取B株幼苗的茎尖进行组织培养(图B→C)，发育成植株D，取其花药进行离体培养，幼苗经秋水仙素处理（如图E→F），又发育成为F植株。
①从生殖方式上分析，B→D属于___________________。
②从细胞分裂方式上分析，B→D→E→F过程中分别发生了___________________。
③从遗传特点上分析，自然状态下D和F自交的后代性状表现的特点是________________。
（3）①~②是将纯种黄色玉米种子搭载飞船进行失重和宇宙射线处理。③是从太空返回的玉米种子种植后的高大植株，④是③自花授粉所结的果穗，其上出现了从来没有见过的红粒性状。那么，这种性状的出现是______________结构改变引起的，属于___________________。
【答案】 (1). 异养 (2). 自养 (3). 渗透吸水 (4). 无性生殖 (5). 有丝分裂→减数分裂→有丝分裂 (6). D后代性状表现一致，F出现性状分离 (7). 基因 (8). 基因突变
【解析】
【分析】
经减数分裂产生的生殖细胞，如果两两结合为合子，合子生殖方式为有性生殖，如果卵细胞或者花粉单独发育为个体，则为单性生殖，也属于有性生殖；而体细胞直接发育成新个体的生殖方式为无性生殖。植物产生花粉或卵细胞都要经过减数分裂，而产生体细胞的细胞分裂方式则一般是有丝分裂。无性生殖产生的后代保持了亲本的特性且表现性状一致，而有性生殖由于发生了基因重组，后代会发生性状分离。无性生殖过程和个体发育过程中发生的变异一般为基因突变，不可能发生基因重组。
【详解】（1）种子在萌发成为绿色幼苗的过程中，从没有绿叶到生成绿叶，其代谢类型从异养到自养的本质性的变化；玉米的根系终保持着渗透吸水的方式。
（2）①幼苗B的茎尖进行离体培养发育成植株D,属于植物组织培养的过程，此过程进行有丝分裂，属于无性生殖的范畴，能保持亲本的优良性状；
②B植株进行有丝分裂形成植株D,植株D进行减数分裂形成E,再进行离体培养形成单倍体幼苗F,细胞分裂的方式也属于有丝分裂；
③自 然 状 态 下 D 和 F 自交 的 后 代， 性 状 表 现 的 特 点 ：D后代性状表现一致，F出现性状分离。
（3）①-②是将纯种黄色玉米种子搭载飞船进行失重和宇宙射线处理。③是从太空返回的玉米种子种植后的高大植株，④是③自花受粉所结的果穗，纯种玉米上出现了新性状。新性状的出现是因为玉米的基因结构改变引起的基因突变。
【点睛】本题考查组织培养、生殖方式、细胞分裂、遗传、变异等相关知识，多方面对所学知识进行了综合考查，难度较大，覆盖面广。
一、单选题
1.有关限制性内切酶 Hind Ⅲ和 Xho I 的识别序列及切割位点分别为 A↓AGCTT 和C↓TCGAG，相关叙述正确的是（ ）
A. 两种限制酶的识别序列在 DNA 分子中出现的概率不同
B. 两种限制酶切割形成的粘性末端都是-AGCT
C. 分别用这两种酶切割目的基因和质粒后能形成重组质粒
D. 实验中可通过控制反应时间、酶的浓度等控制酶切效果
【答案】D
【解析】
由题可知，限制性内切酶HindⅢ和Xho I的识别序列刚好互补（AG与TC互补），因此两种限制酶的识别序列在DNA分子中出现的概率相同，A错误；HindⅢ切割形成的粘性末端是-AGCTT，而Xho I切割形成的粘性末端都是-TCGAG，B错误；两种限制酶切割形成的粘性末端不相同，不能互补，C错误；实验中可通过控制反应时间、酶的浓度等控制酶切效果，D正确。
【考点定位】基因工程的原理及技术
【名师点睛】一种限制酶只能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。
2.图1为某种质粒简图，图2表示某外源DNA上的目的基因，小箭头所指分别为限制性核酸内切酶EcoRⅠ、BamHⅠ、HindⅢ的酶切位点。下列有关叙述错误的是( )
A. 在基因工程中若只用一种限制酶完成对质粒和外源DNA的切割，则可选EcoRⅠ
B. 如果将一个外源DNA分子和一个质粒分别用EcoRⅠ酶切后，再用DNA连接酶连接，形成一个含有目的基因的重组DNA，此重组DNA中EcoRⅠ酶切点有1个
C. 为了防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化，酶切时可使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时处理
D. 一个图1所示的质粒分子经EcoRⅠ切割后，含有2个游离的磷酸基团
【答案】B
【解析】
目的基因两侧都有，且质粒也有的限制酶是EcoRⅠ，所以在基因工程中若只用一种限制酶完成对质粒和外源DNA的切割，可选EcoRⅠ，A正确；如果将一个外源DNA分子和一个质粒分别用EcoRⅠ酶切后，再用DNA连接酶连接，形成一个含有目的基因的重组DNA，此重组DNA中EcoRⅠ酶切点有2个，B错误；为了防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化，酶切时可使用BamHⅠ和Hind Ⅲ两种限制酶同时处理，C正确；一个图1所示的质粒分子经EcoRⅠ切割后，产生两个黏性末端，含有2个游离的磷酸基团，D正确。
3.下列如图所示的黏性末端的说法，错误的是（ ）
A. 甲乙黏性末端是由不同的限制酶切割而成的
B. 甲乙黏性末端可形成重组DNA分子
C. DNA连接酶作用位点在a点，催化两个DNA片段之间相连
D. 切割甲的限制酶能识别并切割由甲、乙片段连接形成的重组DNA分子
【答案】D
【解析】
切割甲的限制酶的识别序列是-GAATTC-,切割乙的限制酶的识别序列是-CAATTG,所以切割甲、乙的限制酶不同，A正确；甲和乙的黏性末端中未配对的碱基正好能互补配对，所以可以被DNA连接酶连接形成重组DNA分子，B正确；DNA连接酶连接的是DNA片段,所以该酶能催化磷酸基团和脱氧核糖之间形成磷酸二酯键，C正确；甲､乙片段形成的重组DNA分子的序列是-CAATTC-,而甲酶的识别序列是-GAATTC-,且在G和A之间切割，由此可见,甲酶不能识别由甲､乙片段形成的重组DNA分子，D错误｡
4.限制性内切酶能识别特定的 DNA 序列并迕行剪切，不同的限制性内切酶可以对不同的 核酸序列迕行剪切。现以 3 种不同的限制性内切酶 X、Y、Z 对 6.2kb 大小的线状 DNA 迕行剪切后。用凝胶电泳分离各核酸片段，实验结果如图所示：（备注：X 酶 Y 酶 Z 酶的切点分别用A、B、C 代表）
请问：3 种不同的限制性内切酶在此 DNA 片段上相应切点的位置是（ ）
A.
B.
C.
D.
【答案】D
【解析】
Y酶将DNA序列进行剪切，长度为1.0和5.2，切点1个，而图谱中Y切点位0.3和5.9，A错误；Z酶将DNA序列并进行剪切，长度为3.6、1.4和1.2，切点2个，而图谱中Z切点位3.6和2.6，B错误；X酶将DNA序列并进行剪切，长度为4.2、1.7和0.3，切点2个，而图谱中X切点位0.3和5.9，C错误；据图分析，X酶切点2个，Y酶切点1个，Z酶切点2个，而且长度符合，D正确。
【点睛】本题考查限制酶的相关知识，意在考查学生识图能力、信息的提取与应用能力、通过比较与综合做出合理判断的能力等，实际上只要明确以下两点，问题迎刃而解．1、题均根据各种大小的DNA分子片段类型看有几个切点；2、再根据两种酶组合后DNA分子片段大小将上述各自的切点移位组合。
5.下图为农杆菌Ti质粒的T-DNA区段结构示意图。农杆菌附着植物细胞后， T-DNA首先在农杆菌中从右边界到左边界被剪切、复制，然后进入植物细胞并整合到染色体上，继而诱发细胞异常生长和分裂，形成植物肿瘤。以下有关叙述错误的是
A. Ti质粒存在于农杆菌的拟核DNA之外
B. 植物肿瘤的形成与A、B两个基因的表达有关
C. 清除植物肿瘤组织中的农杆菌后肿瘤不再生长
D. 利用T-DNA进行转基因时需保留LB、RB序列
【答案】C
【解析】
【分析】
农杆菌Ti质粒的基因被剪切后整合到植物的染色体上，因为其质粒上的细胞分裂素和生长素基因，诱发细胞异常生长和分裂，形成植物肿瘤。本题考查基因工程中目的基因的表达及相关知识，意在考查考生运用所学知识与观点，通过比较、分析与综合等方法对相关生物学问题进行解释、推理，做出合理判断或得出正确结论的能力。
【详解】A、质粒是细菌、放线菌和酵母菌等生物中拟核（或细胞核）以外的DNA分子，存在于细胞质中，具有自主复制能力，使其在子代细胞中也能保持恒定的拷贝数，并表达所携带的遗传信息，是闭合环状的双链DNA分子，Ti质粒存在于农杆菌的拟核DNA之外，正确；
B、因为质粒整合到植物后能诱发细胞异常生长和分裂，形成植物肿瘤，这与质粒上的细胞分裂素和生长素基因过量表达有关，正确；
C、清除植物肿瘤组织中的农杆菌后，还有Ti质粒整合到植物DNA上的，通过基因的复制表达也会导致肿瘤继续生长，错误；
D、农杆菌能整合的前提是Ti质粒上的LB、RB序列被剪切，才能连接整合到植物细胞DNA上，正确；
故选C。
6.如图为某种质粒的简图，小箭头所指分别为限制性核酸内切酶EcoRⅠ、BamHⅠ的酶切位点，P为转录的启动部位。已知目的基因的两端有EcoRⅠ、BamHⅠ的酶切位点，受体细胞为无任何抗药性的原核细胞。下列有关叙述正确的是( )
A. 将含有目的基因的DNA与质粒分别用EcoRⅠ酶切，在DNA连接酶作用下，生成由两个DNA片段之间连接形成的产物有两种
B. DNA连接酶的作用是将酶切后得到的黏性末端连接起来形成一个重组质粒，该过程形成两个磷酸二酯键
C. 为了防止目的基因反向粘连和质粒自身环化，酶切时可选用的酶是EcoRⅠ和BamHⅠ
D. 能在含青霉素的培养基中生长的受体细胞表明该目的基因已成功导入该细胞
【答案】C
【解析】
本题结合图形考查基因表达载体的构建，要求考生理解构建基因表达载体的方法，明确构建的基因表达载体应含有哪些部件及这些部件的功能，此题难度稍大。
根据题意，目的基因的两端有EcoRⅠ、BamHⅠ的酶切位点，将含有目的基因的DNA与用EcoRⅠ酶切，会得到含目的基因的DNA片段和不含目的基因的DNA片段；根据质粒的简图可知，将质粒用EcoRⅠ酶切，会得到与质粒周长等长的链状DNA；因此将含有目的基因的DNA与质粒分别用EcoRⅠ酶切，在DNA连接酶作用下，可生成含目的基因的原DNA片段两个之间进行连接、由含目的基因的DNA片段与质粒周长等长的链状DNA相互连接形成的链状DNA、二倍于原质粒周长的环状DNA三种类型，A错误；DNA连接酶的作用是将酶切后得到的黏性末端连接起来形成一个重组质粒，该过程形成四个磷酸二酯键，B错误；EcoRⅠ和BamHⅠ的识别序列不同，获取目的基因和切割质粒时，同时选用EcoRⅠ和BamHⅠ切割，目的基因两端形成的末端不同，切割开的质粒两端形成的末端不同，再用DNA连接酶连接，可以防止目的基因反向粘连和质粒自身环化，C正确；题图显示，在构建基因表达载体的过程中质粒中的青霉素抗性基因和四环素抗性基因都不会被破坏，因此能在含青霉素和四环素的培养基中生长的受体细胞不能表明目的基因已成功导入该细胞，D错误。
【点睛】易错知识点拨：
基因工程中，构建基因表达载体选择限制酶的种类时，要保证所选的限制酶能切割质粒和获取目的基因，又要保证使用DNA连接酶连接时，既能让质粒与目的基因相互连接形成重组质粒，又能有效避免质粒自身环化或目的基因自身环化；本题中若单独使用EcoRⅠ或BamHⅠ处理，虽然都能保证质粒与目的基因相互连接形成重组质粒，但都不能有效避免质粒自身环化或目的基因自身环化，因此要同时满足上述两个条件，应同时使用EcoRⅠ和BamHⅠ处理。
7.绿叶海天牛（简称甲）吸食滨海无隔藻（简称乙）后，身体就逐渐变绿，这些 “夺 来”的叶绿体能够在甲体内长期稳定存在，有科学家推测其原因是在甲的染色体 DNA 上可能存在乙编码叶绿体部分蛋白的核基因。为证实上述推测，以这种变绿的甲为材料迕行 实验，方法和结果最能支持上述推测的是（ ）
A. 通过 PCR 技术能从甲消化道内获得的 DNA 中克隆出属于乙的编码叶绿体蛋白的核基 因
B. 通过核酸分子杂交技术，在甲体内检测到乙的编码叶绿体蛋白的核基因转录出的 RNA
C. 给甲提供 14CO2，一段时间后检测到其体内的部分有机物出现放射性
D. 用乙编码叶绿体蛋白的核基因做探针与甲的染色体 DNA 杂交，结果显示出杂交带
【答案】D
【解析】
【分析】
目的基因的检测与鉴定:
1、分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因---DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。
2、个体水平上的鉴定:抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。
【详解】A、通过PCR技术从甲体内的DNA中克隆出属于乙的编码叶绿体蛋白的核基因,这只能说明甲体内含有乙的编码叶绿体蛋白的核基因，但不能说明甲的染色体DNA上存在乙编码叶绿体部分蛋白的核基因，A错误；
B、通过核酸分子杂交技术，在甲体内检测到乙的编码叶绿体蛋白的核基因转录出的RNA，这只能说明甲体内含有乙的编码叶绿体蛋白的核基因，但不能说明甲的染色体DNA上存在乙编码叶绿体部分蛋白的核基因，B错误；
C、给甲提供14CO2，一段时间后检测到其体内的部分有机物出现放射性,这说明甲中含有叶绿体，但不能说明甲的染色体DNA上存在乙编码叶绿体部分蛋白的核基因，C错误;
D、用乙编码叶绿体蛋白的核基因做探针与甲的染色体DNA杂交，结果显示出杂交带，这说明甲的染色体DNA上存在乙编码叶绿体部分蛋白的核基因，D正确。
故选D。
8.下列关于蛋白质工程说法不正确的是( )
A. 蛋白质工程能将人抗体某些区段替代鼠单克隆抗体区段，降低鼠单克隆抗体免疫原性
B. 蛋白质工程可对酶的催化活性、底物专一性、抗氧化性、热变性、碱变性等加以改变
C. 理论上通过对关键氨基酸的置换与增删是进行蛋白质工程的唯一方法
D. 蛋白质工程的崛起主要是工业生产和基础理论研究的需要
【答案】C
【解析】
【分析】
蛋白质工程的基本途径：从预期蛋白质的功能出发→设计预期的蛋白质的结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列。
【详解】为了降低鼠单克隆抗体免疫原性，可以通过蛋白质工程将人抗体某些区段替代鼠单克隆抗体区段，A正确；可以通过蛋白质工程修饰相应的基因改变酶的催化活性、底物专一性、抗氧化性、热变性、碱变性，B正确；蛋白质工程可以通过对基因的修饰改造蛋白质，也可以创造新的蛋白质，C错误；蛋白质工程可以应用于药物、微电子等领域，是工业生产和基础理论研究的需要，D正确。故选C。
9.现有甲、乙两种植物(均为二倍体纯种)，其中甲种植物的光合作用能力高于乙种植物， 但乙种植物很适宜在盐碱地种植，丏相关性状均为核基因控制。要利用甲、乙两种植物的 优势，培育出高产、耐盐的植株，有多种生物技术手段可以利用。下列所采用的技术手段 中，不可行的是（ ）
A. 利用植物体细胞杂交技术，可获得满足要求的四倍体杂种目的植株
B. 将乙种植物耐盐基因导入到甲种植物的受精卵中，可培育出目的植株
C. 两种植物杂交后，得到的 F1 再利用单倍体育种技术，可较快获得纯种的目的植株
D. 诱导两种植物的花粉融合,并培育成幼苗,幼苗用秋水仙素处理,可培育出目的植株
【答案】C
【解析】
试题分析：两种植物存在着生殖隔离，无法完成杂交，即使能够杂交，所得F1也不能产生正常可育的配子，因而不能用于单倍体育种。故选C
考点：本题考查育种的相关内容。
点评：本题意在考查考生的理解应用能力，属于中等难度题。
10.下列生物工程技术中，一定要来自同一个物种的是（ ）
①获取目的基因的细胞和受体细胞
②动物细胞融合中的两个细胞
③牛胚胎移植中胚胎的供体与受体
④植物体细胞杂交中两个体细胞
A. ①②③④ B. ③
C. ①②③ D. ②③
【答案】B
【解析】
分析】
1、细胞核移植指将一个动物细胞的细胞核移植至去核的卵母细胞中，产生与供细胞核动物的遗传成份一样的动物的技术。
2、胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎，或者通过体外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其它雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术。
3、植物的体细胞杂交是将不同植物的细胞通过细胞融合技术形成杂种细胞，进而利用植物的组织培养将杂种细胞培育成多倍体的杂种植株。
【详解】①基因工程中获取目的基因的细胞和受体细胞，不是来自同一个物种，①错误；
②动物细胞融合中的两个细胞，不一定来自同一个物种，如单克隆抗体中的人鼠细胞融合，②错误；
③胚胎移植中胚胎的供体与受体也必须是来自同一个物种，这样才不产生排斥反应，移植才成功，③正确；
④植物体细胞杂交就是为了克服远缘杂交不亲和，典型的白菜-甘蓝杂交、土豆-番茄杂交，④错误；
故选B。
11.下图为培育甘蔗脱毒苗的两条途径，研究发现经②过程获得的幼苗脱毒效果更好。下列叙述不正确的是（ ）
A. 带叶原基的芽与植物体其他组织中的病毒含量相同
B. ②过程的作用是使组织中的病毒在图中处理温度下部分或全部失活
C. 过程③、④所用培养基中生长素和细胞分裂素的含量和比例不同
D. 上图中脱毒苗的培育过程体现了植物细胞的全能性
【答案】A
【解析】
植物的茎尖或根尖不带病毒或病毒极少，其他部位带的病毒很多，带叶原基的芽是茎尖，A项符合题意；②过程的作用是使组织中的病毒在图中处理温度下部分或全部失活，B项不符合题意；③是脱分化、④是再分化，两个过程所用培养基中生长素和细胞分裂素的含量和比例不同，C项不符合题意；细胞的全能性是已经分化的细胞发育成完整个体的潜能。图示过程是离体的带叶原基的芽脱分化形成愈伤组织，再分化形成幼苗，体现了植物细胞的全能性，D项不符合题意。
【名师点睛】解答本题的关键有：一是看懂图、二是能利用植物组织培养的原理和条件的有关知识解题。
12.犬细小病毒(CPV)单克隆抗体(Cpv McAb)可抑制病毒对宿主细胞的侵染及病毒的复制，进而杀灭幼犬体内病毒。下列相关叙述，错误的是
A. 在Cpv McAb的制备过程中用到了动物细胞培养和动物细胞融合技术
B. 给幼犬注射CPV后，CPV抗体检测呈阳性，说明发生了体液免疫反应
C. 经选择性培养基筛选出来的杂交瘤细胞即可直接生产Cpv McAb
D. 对杂交细胞培养时，需要无菌无毒环境，且温度、气体环境等要适宜
【答案】C
【解析】
【分析】
由题文和选项的描述可知，该题考查学生对单克隆抗体的制备过程及动物细胞培养的相关知识的识记和理解能力。
【详解】在单克隆抗体的制备过程中，使用的动物细胞工程技术有动物细胞培养和动物细胞融合技术，A正确；给幼犬注射CPV后，会激发体液免疫，产生相应的抗体，因此若 CPV抗体检测呈阳性，说明发生了体液免疫反应，B正确；经选择性培养基筛选出来的杂交瘤细胞并不都符合人们需要，还需经过克隆化培养和抗体检测，筛选出能分泌CPV McAb的杂交瘤细胞，C错误；对杂交细胞培养时，需要无菌无毒环境，且温度、气体环境等要适宜，D正确。
13.某研究小组为测定某种药物对体外培养细胞的毒性，准备对某种动物的肝肿瘤细胞（甲）和正常肝细胞（乙）进行动物细胞培养。下列叙述正确的是
A. 制备肝细胞悬液时，可用胃蛋白酶处理肝组织块
B. 培养液需含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、生长素和动物血清等
C. 为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的抗生素
D. 甲、乙细胞在持续的传代培养过程中，均会出现停止增殖的现象
【答案】C
【解析】
在利用肝组织块制备肝细胞悬液时，常用胰蛋白酶，不能使用胃蛋白酶，因为胃蛋白酶需要在强酸环境下才能起作用，但这样的环境不适于细胞生存，A错误；动物细胞培养的培养液需含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、生长素和动物血清等，B正确；为防止杂菌污染，可向培养液中加入适量的抗生素，C正确；甲（肿瘤细胞）失去接触抑制，而乙（正常肝细胞）具有接触抑制，因此甲、乙细胞在持续的培养过程中，乙会出现停止增殖的现象，D错误。
【点睛】解答本题的关键是了解到甲细胞是肿瘤细胞，具有无限增值的能力，不会出现停止增值的现象。
14.核苷酸合成有两个途径，物质A可以阻断其中的全合成途径(如下图)。正常细胞内含有补救合成途径所必需的转化酶和激酶，制备单克隆抗体时选用的骨髓瘤细胞中缺乏转化酶。现用加入H、A、T三种物质的“HAT培养基”来筛选特定的杂交瘤细胞。关于筛选原理的叙述，正确的是 （ ）
A. 免疫的B细胞及其互相融合细胞因全合成途径被A阻断而在HAT培养基上不能增殖
B. 骨髓瘤细胞及其互相融合细胞因无法进行上述两个途径而在HAT培养基上不能增殖
C. 杂交瘤细胞因为可以进行上述两个途径所以能在HAT培养基上大量增殖
D. HAT培养基上筛选出的所有杂交瘤细胞既能大量增殖又能产生高纯度的目标抗体
【答案】B
【解析】
免疫的B细胞及其互相融合细胞的全合成途径被A阻断，但还存在补救合成途径，A错误；由于骨髓瘤细胞及其相互融合细胞缺乏转化酶，因此补救合成途径也不能进行，在HAT培养基上不能增殖，B正确；杂交瘤细胞因为可以进行补救途径所以能在HAT培养基上大量繁殖，C错误；HAT培养基上筛选出的杂交瘤细胞能大量增殖，但不能保证都能产生高纯度的目标抗体，D错误。
15.软骨发育不全为常染色体显性遗传病，基因型为HH 的个体早期死亡。一对夫妻均为该病患者，希望通过胚胎工程技术辅助生育一个健康的孩子。下列做法正确的是( )
A. 将一个囊胚进行多等分，从中筛选所需胚胎，培养至原肠胚期后移植到子宫
B. 从桑椹胚中分离少量滋养层细胞，培养后检测基因型
C. 从羊水中提取细胞进行检测，并根据检测结果淘汰基因型为hh的胚胎
D. 经超数排卵处理后进行体外受精
【答案】D
【解析】
来自同一个胚胎的后代具有相同的遗传物质，因此不需要将囊胚进行多等分，而应分离少量滋养层细胞，培养后检测基因型，从中筛选所需胚胎，培养到桑椹胚或囊胚进行移植，A错误；需要从囊胚中分离少量滋养层细胞，培养后检测基因型，B错误；应从囊胚中分离少量滋养层细胞进行检测，因为羊水中细胞可能不是胚胎脱落的细胞，筛选出基因型为hh的个体进行移植，C错误；培育试管婴儿时，需先进行超数排卵处理，再进行体外受精，D正确。
16.图1表示的是科学家获得iPS细胞（类似于胚胎干细胞），再将iPS细胞转入小鼠乙体内培养的过程，图2表示研究人员利用小鼠（2N=40）获取单倍体胚胎干细胞的一种方法，以下分析错误的是：
A. 图1过程中，成纤维细胞转变为iPS细胞，类似于植物组织培养中的脱分化过程
B. 研究人员将iPS细胞团注射入缺乏T细胞的小鼠体内，细胞团能继续生长.由此可推测图1中iPS细胞团逐渐退化的原因可能是小鼠乙发生免疫反应造成的
C. 图2中，研究人员使小鼠丙超数排卵，再利用SrC12溶液处理后体外培养至④囊胚期，再筛选出单倍体干细胞
D. 研究发现，单倍体胚胎干细胞有发育全能性，该技术培育的单倍体动物可成为研究显性基因功能的理想细胞模型
【答案】D
【解析】
【分析】
据图一分析，小鼠甲提取出成纤维细胞与特异性基因结合，形成iPS细胞，导入小鼠乙。据图二分析，对小鼠丙处理，从而获得更多的卵母细胞，再利用SrC12溶液处理、激活卵母细胞，并在体外培养至囊胚，进而培育成单倍体。
【详解】图1过程中，成纤维细胞转变为iPS细胞，即从高度分化的细胞形成分化程度低的细胞，过程类似于植物组织培养中的脱分化过程，A正确；将iPS细胞团注射入缺乏T细胞的小鼠体内，细胞团能继续生长．由此可推测图1中iPS细胞团逐渐退化的原因是小鼠乙（受体）发生免疫反应，使得iPS细胞团失去生命力，B正确；图2中，对实验小鼠丙注射促性腺激素使其超数排卵，从而获得更多的卵母细胞，再利用SrC12溶液处理、激活卵母细胞，并在体外培养至④囊胚期，再利用流式细胞仪筛选出单倍体细胞，C正确；单倍体胚胎干细胞也能分化，形成不同功能的细胞、组织和器官，该技术培育的单倍体动物可成为研究隐性基因功能的理想细胞模型，因为显性基因在正常的生物体内也能表达，D错误；故选D。
【点睛】本题考查动物细胞培养、胚胎工程等相关知识，意在考查学生的识图和推理能力，难度不大。
17.进行生物工程设计，实验选材很重要。下列选材不当的一组是（ ）
实验目的
实验材料
材料特点
A
动物细胞核移植
卵(母)细胞
细胞大,细胞质物质能有效调控核发育
B
胚胎干细胞培养
胚胎内细胞团
未进行组织器官分化的细胞，有很强 的分裂能力
C
表达生长激素的转基因动物
乳腺细胞 作受 体细胞
分泌乳汁产生药物
D
基因治疗重度免疫缺陷症
T 淋巴细胞
与机体特异性免疫机能有关
A. A B. B C. C D. D
【答案】C
【解析】
【分析】
1、卵母细胞适于作为受体细胞,因为卵(母)细胞大,容易操作；卵(母)细胞质多,营养丰富；含有促使细胞全能性表达的物质。
2、囊胚的内细胞团细胞属于胚胎干细胞,具有很强的分裂能力，可以用胚胎干细胞培养。
3、采用基因工程技术培养乳腺生物反应器时，受体细胞是受精卵，因为受精卵全能性最高。
4、采用基因治疗重度免疫缺陷症时，需要取患者的T淋巴细胞，因为T细胞是机体重要的免疫细胞。
【详解】A、动物细胞核移植时，常采用去核卵母细胞作为受体细胞，因为卵细胞大，营养丰富，且细胞质物质能有效调控核发育，A正确；
B、囊胚的内细胞团细胞属于胚胎干细胞，具有很强的分裂能力，可以用胚胎干细胞培养，B正确；
C、采用基因工程技术培养乳腺生物反应器时，受体细胞是受精卵，因为受精卵全能性最高，C错误；
D、采用基因治疗重度免疫缺陷症时，需要取患者的T淋巴细胞，因为T细胞是机体重要的免疫细胞，D正确。
故选C。
18.下列关于细胞工程的有关叙述，正确的是( )
A. 利用花药离体培养得到单倍体植株，从紫草的愈伤组织中提取紫草素，利用细胞工程培育“番茄 、马铃薯”杂种植株，都利用了植物组织培养技术
B. 在进行组织培养时，由根尖细胞形成愈伤组织的过程中，不可能会发生细胞脱分化和基因突变，而可能发生细胞分化和基因重组
C. 动物细胞融合与植物体细胞杂交相比，诱导融合的方法、所用的技术手段、所依据的原理均相同，都能形成杂种细胞和杂种个体
D. 动物难以克隆的根本原因是基因组中的基因不完整
【答案】A
【解析】
花药离体培养和杂种细胞培育成杂种植株都利用了植物组织培养技术，A正确；在进行组织培养时，由根尖细胞形成愈伤组织的过程中，因细胞分裂则可能发生基因突变，但因不发生减数分裂，所以不会发生基因重组，B错误；动物细胞融合与植物体细胞杂交相比，诱导融合的方法，所用的技术手段，所依据的原理均不相同，而且只有植物体细胞杂交能产生杂种植株，C错误；动物难以克隆的根本原因是其全能性较低，D错误。
19.下列关于生殖细胞的发生和受精过程的叙述，正确的是
A. 卵细胞膜反应是防止多精入卵的第一道屏障
B. 雄原核形成的同时，卵子完成减数第二次分裂
C. 卵子是从动物的初情期开始，经过减数分裂形成的
D. 精子与卵子相遇后，会发生顶体反应，阻止其他精子入卵
【答案】B
【解析】
精子触及卵黄膜的瞬间，发生透明带反应，阻止其他精子进入，是防止多精入卵受精的第一道屏障，A错误；当精子与处于减二中期的次级卵母细胞结合时（即受精时），次级卵母细胞才被激活分裂出第二极体和卵子，因此卵子完成减数第二次分裂，B正确；卵细胞的形成是从胎儿时期开始的，并不是从初情期开始，C错误；精子与卵子相遇后，会发生顶体反应，防止多精入卵的两道屏障是透明带反应和卵黄膜的封闭作用，D错误。
【点睛】解答本题要注意以下几点：1、透明带反应和卵黄膜的封闭作用是防止多精入卵的两道屏障，其中透明带反应是第一道屏障。2、雄原核形成与卵子完成减数第二次分裂是同时进行的。
20.下图表示卵子的发生过程。与此相关的叙述中，不合理的是
A. 图中A是第一极体，B是合子，E是受精，阶段C是胎儿期，阶段D是初情期后
B. 当观察到第二极体时，可以表明卵子已经完成了受精
C. 能发生染色体着丝点分裂的阶段是①④
D. ①阶段存在的变异方式有基因突变、基因重组和染色体变异
【答案】D
【解析】
【分析】
分析题图：C表示卵子的形成和在卵巢内的贮备，是胎儿出生前完成的；D表示减数分裂过程，在初情期后进行，且减数第二次分裂过程中是在受精作用过程中完成的。图中A是第一极体，B是受精卵，E是受精过程。①是减数第一次分裂间期；③是减数第一次分裂，④是减数第二次分裂，同时发生受精作用。
【详解】图中①是减数第一次分裂间期，卵原细胞演变为初级卵母细胞；③为减数第一次分裂，只有在受精后，次级卵母细胞才能最终完成减数第二次分裂，因此E是受精，B是合子。卵泡的形成是在胎儿期，减数分裂是从初情期开始的，因此阶段C为胎儿期，阶段D为初情期后，A正确；第二极体是减数第二次分裂后产生的，而减数第二次分裂发生在受精过程中，因此当观察到第二极体时，可以表明卵子已经完成了受精，B正确；着丝点分裂可发生在有丝分裂中，也可发生在减数第二次分裂中，因此①④均能发生着丝点分裂，C正确；①是减数第一次分裂间期，该过程中的变异类型一般只有基因突变，没有基因重组和染色体变异，D错误。
故选D。
【点睛】本题结合图解，考查细胞的减数分裂、卵子的发生等知识，要求考生识记细胞减数分裂不同时期的特点；识记卵子的发生过程，能正确分析题图，再结合所学的知识准确判断各选项。
21.下列有关哺乳动物精子和卵子发生的叙述，错误的是（ ）
A. 精细胞经变形后，高尔基体发育形成精子的顶体
B. 不同种动物的精子形态相似，但大小不同，体型越大的动物精子越大
C. 卵母细胞发育至减数第二次分裂中期时，才具备受精能力
D. 哺乳动物卵泡的形成和在卵巢内的储备，是在出生前完成的，这是精子和卵子在发生上的重要区别
【答案】B
【解析】
【分析】
精子变形：细胞核→精子头的主要部分；高尔基体→头部的顶体；中心体→精子的尾；线粒体→线粒体鞘（尾的基部）；细胞内其他物质→原生质滴（最后脱落）；不同种动物精子的形态相似，大小略有有不同，与动物的体形大小无关。受精前的卵子的准备，动物排出的可能是初级卵母细胞也可能是次级卵母细胞，都要在输卵管内进一步成熟，达到减数第二次分裂中期时，才具备与精子受精的能力。
【详解】精细胞经变形后，高尔基体发育形成精子头部的顶体，A正确；不同精子形态相似且大小和动物体型大小无关，B错误；卵子在输卵管内发育到减数第二次分裂中期时才具备受精的能力，C正确；哺乳动物卵泡的形成和在卵巢内的贮备是胎儿出生前即（胎儿时期）完成的，这是精子和卵子在发生上的重要区别，D正确。
【点睛】解答本题的关键是识记精子和卵子形成的时间、精子变形的过程，掌握精子形成三个阶段发生的具体内容，明确不同精子形态相似且大小和动物体型大小无关。
22.下列关于胚胎发育和胚胎工程的叙述，正确的是（ ）
A. 卵裂时期胚胎中细胞的相对表面积不断减小
B. 供体超数排卵过程需要是注射有关激素，目是获得更多的卵原细胞并完成减数分裂
C. 对胚胎细胞中 DNA 迕行 PCR 扩增，用 SRY 特异性探针检测，出现阴性反应者为雄性
D. 胚胎干细胞具有细胞核大、核仁明显和具有发育的全能性等特点
【答案】D
【解析】
【分析】
1、胚胎发育过程：(1)卵裂期：细胞进行有丝分裂，数量增加，胚胎总体积不增加；(2)桑椹胚：32个细胞左右的胚胎之前所有细胞都能发育成完整胚胎的潜能属全能细胞；(3)囊胚：细胞开始分化，其中个体较大的细胞叫内细胞团将来发育成胎儿的各种组织，而滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘;胚胎内部逐渐出现囊胚腔。(4)原肠胚：内细胞团表层形成外胚层，下方细胞形成内胚层，由内胚层包围的囊腔叫原肠腔，细胞分化在胚胎期达到最大限度。
2、胚胎干细胞具有胚胎细胞的特性，体积较小，细胞核大，核仁明显；在功能上，具有发育的全能性，可分化为成年动物任何一种组织细胞；另一方面,在体外培养条件下，ES细胞可不断增殖而不发生分化，可进行冷冻保存，也可以进行某些遗传改造。
【详解】A、卵裂期胚胎中细胞数目在不断增加，体积减小，相对表面积增大，A错误；
B、过程需要是注射有关激素（促性腺激素），目的是获得更多的卵原细胞，但所获得的卵原细胞还未完成减数分裂，B错误；
C、对胚胎细胞中DNA进行PCR扩增，用SRY特异性探针检测，出现阴性反应者，说明其不含Y染色体，即胚胎为雌性，C错误；
D、胚胎干细胞具有细胞核大、核仁明显和具有发育的全能性等特点，D正确。
故选D。
23.下图为利用二倍体小鼠所做实验的操作流程。有关叙述错误的是
A. 图中囊胚的细胞基因型都相同 B. 过程①需运用早期胚胎培养技术
C. 代孕母鼠需进行同期发情处理 D. 嵌合体幼鼠是二倍体
【答案】A
【解析】
【分析】
分析题图，图示是利用二倍体小鼠所做的实验，首先将白鼠和黑鼠的受精卵分别培养形成8细胞胚，再合并为16细胞胚，进一步发育为囊胚，最后移植到代孕母体分娩形成嵌合体幼鼠。
【详解】图中囊胚是由白鼠和黑鼠的胚胎合并形成的，因此该胚胎中的细胞的基因型不都相同，A错误；过程①需运用早期胚胎培养技术，B正确；代孕母鼠需进行同期发情处理，以便移植外来胚胎，C正确；嵌合体幼鼠仍然是是二倍体，因为没有发生两个二倍体细胞融合为一个四倍体细胞的过程，D正确。
24.在“果醋制作过程”中，获得较多的醋酸杆菌菌种的最简便方法是（ ）
A. 从变酸的葡萄酒表面获得菌膜，再培养、分离
B. 不必人为加入菌种在葡萄等水果表面本身就存在大量醋酸杆菌
C. 从泡菜坛盖边沿的水槽中的表面获得菌膜，再培养、分离
D. 从土壤中分离提取
【答案】A
【解析】
【分析】
参与果醋制作的菌种是醋酸杆菌，醋酸杆菌是一种好氧细菌，只有当氧气充足的时候才能进行旺盛的生命活动。变酸的酒表面的菌膜是醋酸杆菌在液面上大量繁殖而形成的，因此从变酸的葡萄酒表面获得菌膜，再培养、分离可以获得较多的醋酸杆菌菌种。
【详解】A. 变酸的葡萄酒表面的菌膜就是醋酸菌在液面大量繁殖而形成的，可以用此菌膜培养、分离获得醋酸菌，A正确；
B. 在葡萄等水果表面存在大量的酵母菌，不是醋酸杆菌，B错误；
C. 泡菜坛盖边沿的水槽中表面获得菌膜是酵母菌形成的，C错误；
D. 土壤是酵母菌的大本营，D错误。
25.微生物的代谢速度与高等动植物相比快得多，下列哪项不是这一生命现象的原因（ ）
A. 表面积与体积的比很大
B. 与外界环境物质交换迅速
C. 适宜条件下微生物的繁殖速度非常快
D. 微生物体内酶的种类比其他生物多
【答案】D
【解析】
【分析】
探究细胞表面积与体积之比，与物质运输速率之间的关系：体积越大，相对表面积越小，物质运输的效率越低；实验中测量不同大小的琼脂块上NaOH扩散的深度相同；实验所用的琼脂小块上含有酚酞，NaOH和酚酞相遇，呈紫红色。
【详解】微生物的代谢速度与高等动植物相比快得多，这一生命现象的原因有：表面积与体积的比很大、与外界环境物质交换迅速、适宜条件下微生物的繁殖速度非常快；而微生物体内酶的种类比其他生物多不是微生物的代谢速度与高等动植物相比快得多的原因。
故选D。
【点睛】本题考查探究细胞表面积与体积的关系，意在考查考生的识记能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系，形成知识网络结构的能力；能运用所学知识，准确判断问题的能力，属于考纲识记和理解层次的考查。
26.食醋生产过程中，具有协同作用的微生物是（ ）
①曲霉 ②大肠杆菌 ③酵母菌 ④醋酸菌
A. ②③④ B. ①②④
C. ①③④ D. ①②③
【答案】C
【解析】
分析】
食醋酿造与果醋酿造所用原料不同，食醋酿造一般用粮食，内含大量淀粉，需先用曲霉使淀粉水解成糖，使蛋白质水解成氨基酸，然后用酵母菌使糖转变成酒精，最后用醋酸菌使酒精氧化成醋酸．由此可见，食醋生产过程中，具有协同作用的菌类是曲霉、酵母菌和醋酸菌，据此答题。
【详解】①食醋生产过程中，需要曲霉将淀粉水解成糖，将蛋白质水解成氨基酸，①正确；
②食醋生产过程中，不需要大肠杆菌，②错误；
③食醋生产过程中，需要酵母菌将糖转变成酒精，③正确；
④食醋生产过程中，需要醋酸菌将酒精氧化成醋酸，④正确．
故选C。
【点睛】本题考查果酒和果醋的制作，尤其是果醋的制作，要求考生识记果醋的制作过程，能理论联系实际，合理分析食醋制作过程中涉及的微生物及相应的作用，再根据题干要求选出正确的答案。
27.关于微生物的叙述中，正确的是（ ）
A. 所有的微生物都是形体微小、结构简单、对人类有害的
B. 根据微生物对碳源需要的差别，可以使用含不同碳源的培养基选择优良的单一纯种
C. 所有微生物均属于原核生物界、真菌界、原生生物界
D. 细菌、放线菌、酵母菌都属于原核生物
【答案】B
【解析】
【分析】
1、由原核细胞构成的生物叫原核生物，由真核细胞构成的生物叫真核生物；原核细胞与真核细胞相比，最大的区别是原核细胞没有被核膜包被的成形的细胞核，没有核膜、核仁和染色体,原核细胞只有核糖体一种细胞器，但原核生物含有细胞膜、细胞质等结构，也含有核酸和蛋白质等物质。
2、常考的真核生物有绿藻、衣藻、真菌(如酵母菌、霉菌、蘑菇)、原生动物(如草履虫、变形虫)及动、植物等；常考的原核生物有蓝藻(如颤藻、发菜、念珠藻、蓝球藻)、细菌(如乳酸菌、硝化细菌、大肠杆菌等)、支原体、放线菌等；此外，病毒没有细胞结构，既不是真核生物也不是原核生物。
3、微生物是包括细菌、病毒、真菌以及一些小型的原生动物、显微藻类等在内的一大类生物群体，它们的共同特点是：个体微小，结构简单。
【详解】A、大多数微生物对人类是有益的、如酵母菌,少数微生物对人类是有害的、如黄曲霉能引起肝癌，A错误；
B、根据微生物对碳源需要的差别，可以使用含不同碳源的培养基选择优良的单一纯种，B正确；
C、病毒是一类不具有细胞结构的微生物,病毒不属于原核生物界、真菌界、原生生物界，C错误；
D、细菌和放线菌均属于原核生物,而酵母菌属于真核生物，D错误。
故选B
28.微生物的代谢速度与高等动植物相比快得多，下列哪项不是这一生命现象的原因（ ）
A. 表面积与体积的比很大
B. 与外界环境物质交换迅速
C. 适宜条件下微生物的繁殖速度非常快
D. 微生物体内酶的种类比其他生物多
【答案】D
【解析】
【分析】
探究细胞表面积与体积之比，与物质运输速率之间的关系：体积越大，相对表面积越小，物质运输的效率越低；实验中测量不同大小的琼脂块上NaOH扩散的深度相同；实验所用的琼脂小块上含有酚酞，NaOH和酚酞相遇，呈紫红色。
【详解】微生物的代谢速度与高等动植物相比快得多，这一生命现象的原因有：表面积与体积的比很大、与外界环境物质交换迅速、适宜条件下微生物的繁殖速度非常快；而微生物体内酶的种类比其他生物多不是微生物的代谢速度与高等动植物相比快得多的原因。
故选D。
【点睛】本题考查探究细胞表面积与体积的关系，意在考查考生的识记能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系，形成知识网络结构的能力；能运用所学知识，准确判断问题的能力，属于考纲识记和理解层次的考查。
29.细菌放在固体培养基上培养，它会繁殖并形成菌落（如图）。某实验小组想检验两种抗生素的杀菌作用，下列实验方案最合适的是（ ）
A. B. C. D.
【答案】C
【解析】
根据题意分析本实验的目的是检验两种抗生素的杀菌作用，该实验应遵循对照原则，即设计只有细菌的空白对照组，实验组是含有A抗生素和含有B抗生素，然后进行对比分析，符合分析的图示只有C，故C正确。
30.某一种菌株要从环境中提取现成的亮氨酸（20 种氨基酸中的一种）才能生长，此菌 株对链霉菌敏感。实验者用诱变剂处理此菌株，想筛选出表中细菌菌株类型。根据实验目的，选用的培养基类型是（ ）
注：L—亮氨酸S—链霉素 “+”—加入 “-” —不加入 如：L-：不加亮氨酸S+：加入链霉素
选项
筛选出不需要
亮氨酸的菌株
筛选出抗链
霉素的菌株
筛选出不需要亮氨酸
的抗链霉素的菌株
A
L+ S+
L- S-
L+ S-
B
L- S-
L+ S+
L- S+
C
L- S+
L+ S+
L- S-
D
L+ S-
L- S-
L+ S+
A. A B. B C. C D. D
【答案】B
【解析】
试题分析：根据题目要求，筛选出不需要亮氨酸的菌株，即在没有亮氨酸的培养基上能够生长，应使用的培养基为L-、S可加可不加；筛选出抗链霉素的菌株应使用的培养基为S+、L可加可不加，筛选出不需要亮氨酸、抗链霉素的菌株应用的培养基L-、S+。
考点：本题主要考查微生物的选择的相关知识，意在考查考生对所学知识的理解，把握知识间内在联系的能力。
31.对不同微生物的培养过程中正确的是（ ）
A. 细菌培养时将 pH 调至酸性
B. 霉菌培养时将 pH 调至中性或微酸性
C. 培养厌氧微生物时需要提供无氧环境条件
D. 培养乳酸杆菌时在培养基中不需要添加维生素
【答案】C
【解析】
【分析】
本题是根据微生物的代谢特点配制培养基和控制培养条件的题目，根据选项涉及的具体问题梳理相关知识点，然后分析判断。
【详解】A、细菌培养时将pH调至中性或弱碱性，A错误；
B、霉菌培养时将pH调至酸性，B错误；
C、氧气会抑制厌氧微生物生长，故培养厌氧微生物时则需要提供无氧环境条件，C正确；
D、乳酸杆菌时在培养基中需要添加维生素，D错误。
故选C。
【点睛】本题主要考查学生根据微生物的代谢类型、营养需求、生存条件配制培养基和控制培养条件的能力。
32.不同的微生物对营养物质的需要各不相同。下列有关一种以CO2为唯一碳源的自养微生物营养的描述中，不正确的是
A. 氮源物质为该微生物提供必要的氮素
B. 碳源物质也是该微生物的能源物质
C. 无机盐是该微生物不可缺少的营养物质
D. 水是该微生物的营养要素之一
【答案】B
【解析】
CO2只能作为碳源，不能作为能源物质。
33.制备各种牛肉膏蛋白胨固体培养基，倒平板的具体描述正确的是（ ）
①待培养基冷却至 40℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板
②将灭过菌的培养皿盖放在桌面上，左手拔出棉塞
③右手拿锥形瓶，使瓶口迅速通过火焰
④用左手的拇指和食指打开皿盖
⑤右手将锥形瓶中培养基倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖
⑥等待平板冷却 5~10s，将平板倒过来放置，使皿盖在下，皿底在上
A. ①③④⑤ B. ④⑤⑥ C. ①②④⑥ D. ③⑤
【答案】D
【解析】
【分析】
1、倒平板操作的步骤：将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上，右手拿装有培养基的锥形瓶，左手拔出棉塞；右手拿锥形瓶，将瓶口迅速通过火焰；用左手的拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，右手将锥形瓶中的培养基倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖；等待平板冷却凝固后，将平板倒过来放置，使皿盖在下、皿底在上，这样可以防止皿盖上的水分滴到培养基上造成培养基的污染。
2、倒平板的方法：右手持盛培养基的试管或三角瓶置火焰旁边，用左手将试管塞或瓶塞轻轻地拨出，试管或瓶口保持对着火焰；然后用右手手掌边缘或小指与无名指夹住管（瓶）塞（也可将试管塞或瓶塞放在左手边缘或小指与无名指之间夹住．如果试管内或三角瓶内的培养基一次用完，管塞或瓶塞则不必夹在手中）．左手拿培养皿并将皿盖在火焰附近打开一缝，迅速例入培养基约15mL，加盖后轻轻摇动培养皿，使培养基均匀分布在培养皿底部，然后平置于桌面上，待凝后即为平板。
【详解】①等培养基冷却至50℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板，防止杂菌污染，①错误；
②不能将灭过菌的培养皿放在桌面上，因为桌面上可能有杂菌，②错误；
③右手拿锥形瓶，使瓶口迅速通过火焰，高温可防止杂菌污染，③正确；
④倒平板时皿盖只需要倾斜出一定角度，在酒精灯火焰旁进行，④错误；
⑤右手将锥形瓶中培养基倒入培养皿，左手立即盖上皿盖，并通过酒精灯火焰，⑤正确；
⑥等待平板冷却5～10分钟，将平板倒过来放置，使皿盖在下，皿底在上，⑥错误。
因此，只有③⑤两项正确。
故选D。
34.高压蒸汽湿热灭菌的排列不正确的是（ ）
①加水②排冷气③装置灭菌物品④98 kPa 下灭菌⑤加盖⑥0 kPa 下排气，打开灭菌锅
A. ①②④⑤③⑥ B. ②③⑤①④⑥
C. ①③⑤②④⑥ D. ②⑤①⑥④③
【答案】C
【解析】
【分析】
高压灭菌的原理是：在密闭的蒸锅内，其中的蒸汽不能外溢，压力不断上升，使水的沸点不断提高，从而锅内温度也随之增加，在0.1MPa的压力下，温度121℃，灭菌15-30min。高压蒸汽锅灭菌的操作步骤：
（1）首先将内层灭菌桶取出，再向外层锅内加入适量的水，使水面与三角搁架相平为宜；
（2）放回灭菌桶，并装入待灭菌物品；
（3）加盖，并将盖上的排气软管插入内层灭菌桶的排气槽内；
（4）加热，并同时打开排气阀，使水沸腾以排除锅内的冷空气；
（5）灭菌所需时间到后，切断电源，让灭菌锅内温度自然下降，当压力表的压力降至0时，打开排气阀，旋松螺栓，打开盖子，取出灭菌物品。
【详解】高压蒸汽灭菌操作步骤：首先将内层灭菌桶取出，再向外层锅内加入适量的水，即①；
再放回灭菌桶，并装入待灭菌物品即③；
然后加盖即⑤；
打开电源开关，同时打开排气阀，使水沸腾以排除锅内的冷空气即②；
待冷空气完全排尽后，关上排气阀，让锅内的温度随蒸汽压力增加而逐渐上升，当锅内压力升到所需压力时，控制热源，0.1MPa的压力下，温度121℃，灭菌15-30min即④；
灭菌所需时间到后，切断电源，让灭菌锅内温度自然下降，当压力表的压力降至0时，打开排气阀，旋松螺栓，打开盖子，取出灭菌物品即⑥；
故操作顺序应该是①③⑤②④⑥。
故选C。
35.发酵工程的第一个重要工作是选择优良的单一纯种。消灭杂菌，获得纯种的方法不包 括（ ）
A. 根据微生物遗传组成的差异，在培养基中加入不同比例的核酸
B. 根据微生物缺乏生长因子的种类，在培养基中增减不同的生长因子
C. 根据微生物对碳源需要的差别，使用含不同碳源的培养基
D. 根据微生物对抗菌素敏感性的差异，在培养基中加入不同的抗菌素
【答案】A
【解析】
【分析】
选择优良的单一纯种，就是在许多种微生物中，杀死其它微生物，使某种特定的微生物存活下来。可以采用特定的培养基获得纯种，如根据微生物对碳源需要的差别、微生物缺乏生长因子的种类、微生物对抗菌素敏感性的差异，来配置培养基获得单一纯种。
【详解】A、根据微生物遗传组成的差异，在培养基中加入不同比例的核酸（DNA和RNA），它不会直接影响到微生物自身的遗传组成，即使被微生物利用，也是被分解为核苷酸后利用，所以培养基中加入不同比例的核酸，不会对微生物起选择作用，A错误；
B、不同的微生物需要不同的生长因子，根据需要的菌可以加入在培养基中加入相应的生长因子进行分离，B正确；
C、根据微生物对碳源需要的差别，使用含不同碳源的培养基，例如培养自养型的菌，在培养基中不需加入碳源，C正确；
D、培养真菌时可以在培养基中加入青霉素来抑制细菌的生长，D正确。
故选A。
【点睛】本题考查培养基对微生物的选择作用，要求考生识记消灭杂菌，获得纯种的方法，能对选项作出准确的判断，属于考纲识记层次的考查，要求考生在平时的学习过程中，注意对相关知识进行归纳总结，构建知识网络结构。
36.突变型面包霉常需要在基本培养基上添加适当的氨基酸才能生长。现在用两种氨基酸 依赖型红色面包霉突变株 a 和 b，分别接种到下面的 6 种培养基上，两种突变株都不能在1、3、5 号培养基上生长，a、b 可以分别在 2、4 和 2、6 号培养基上生长。培养基成分 如下表，关于突变株 a 和 b 分别对于 B~T 中氨基酸需求的说法正确的是（ ）
培养基
1
2
3
4
5
6
添加氨基酸
BCDE
BEFG
CFHI
DEFI
GHIJ
EHGJ
A. 两种突变株对氨基酸的需求是相同的
B. 两种突变株都需要 G 氨基酸才能生长
C. 两种突变株必须同时供应 4 种氨基酸才能生长
D. 两种突变株都能在由 4、5 号两种培养基组成的混合培养基中生长
【答案】D
【解析】
【分析】
阅读题干和题图可知，两种突变株都不能在1、3、5 号培养基上生长，a、b 可以分别在 2、4 和 2、6 号培养基上生长。再根据获取的信息进行推理获取结论，然后判断选项。
【详解】根据题意知，a突变株不能在1、3、5号培养基上生长，但是可以在2、4培养基上生长，说明a生长需要E、F种氨基酸，b突变株不能在1、3、5号培养基生长，但是可以在2、6培养基上生长，说明b生长需要E、G种氨基酸，所以2种突变株都能在由4、5号的混合培养基中生长。
故选D。
37.下表是有关 4 种生物的能源、碳源、氮源和代谢类型的概述。其中正确的是（ ）
A. 根瘤菌、谷氨酸棒状杆菌 B. 硝化细菌、酵母菌
C. 酵母菌、谷氨酸棒状杆菌 D. 硝化细菌、根瘤菌
【答案】B
【解析】
【分析】
微生物的营养物质主要包括氮源、碳源、水和无机盐等，硝化细菌利用的能量是无机物氧化释放的能量，异养微生物利用的能量主要是糖类，微生物的代谢类型主要有自养需氧型、异养需氧型、异养厌氧型和兼性厌氧型。
【详解】A、根瘤菌和谷氨酸棒状杆菌的能源是分解糖类等有机物，谷氨酸棒状杆菌的代谢类型是异养需氧型，A错误；
B、硝化细菌的代谢类型是自养需氧型，能源是氨氧化释放的能量，氮源为氨，酵母菌的代谢类型为异养兼性厌氧型，碳源为糖类，氮源为氨或硝酸根离子，B正确；
C、谷氨酸棒状杆菌的能源是分解糖类等有机物，谷氨酸棒状杆菌的代谢类型是异养需氧型，C错误；
D、根瘤菌的能源是分解糖类等有机物，D错误。
故选B。
38. 将接种了红色细菌的培养皿置于紫外线下几天，结果培养皿中除长了一个白色菌落外，其余菌落都是红色的，据此，实验者应该（ ）
A. 暂不作结论
B. 断定是紫外线产生了白色菌落的变异
C. 如果不继续用紫外线照射，预期那个白色菌落将转变为红色
D. 断定白色菌落是一种可遗传的变异
【答案】A
【解析】
试题分析：出现白色菌落可能是变异的结果，也可能是杂菌污染的结果，故B、D错；因为变异后遗传物质发生了改变，所以变异一般是可遗传的，不用紫外线照射一般不会变回原来颜色，故C错；正确的做法是暂不作结论 经实验研究后再下结论。故选A
考点：本题考查变异和细菌培养的相关知识。
点评：本题意在考查考生的理解判断能力，属于中等难度题。
39.在 NaCl 溶液中反复溶解、析出并过滤，就能除去 DNA 溶液中的杂质的理由不包括（ ）
A. 用高浓度盐溶液溶解 DNA，能除去在高盐中不能溶解的杂质
B. 用低盐浓度使 DNA 析出，能除去溶解在低盐溶液中的杂质
C. 反复操作就能够除去与 DNA 溶解度不同的多种杂质
D. 反复操作就能够使各种杂质变性而沉淀析出
【答案】D
【解析】
【分析】
1、DNA粗提取的实验材料选取：凡是含有DNA的生物材料都可以考虑，但是使用DNA含量相对较高的生物组织，成功的可能性更大。
2、DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，利用这一特点，选择适当的盐浓度就能使DNA充分溶解，而使杂质沉淀，或者相反，以达到分离目的。
3、DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精．利用这一原理，可以将DNA与蛋白质进一步的分离。
【详解】ABC、由于DNA和蛋白质等物质在氯化钠的溶解度不同，因此可以控制氯化钠的浓度来去掉杂质，用高盐浓度的溶液溶解DNA，能除去在高盐中不能溶解的杂质，用低盐浓度使DNA析出，能除去溶解在低盐溶液中的杂质，反复操作就能够除去与DNA 溶解度不同的多种杂质，ABC正确；
D. 反复操作是根据溶解与不溶解，达到去除杂质的效果，而不是使各种杂质变性而沉淀析出，D错误。
故选D。
40.在 DNA 的粗提取不鉴定的实验中，初步析出 DNA 和提取纯净的 DNA 所用的药品和 浓度是：①0.1 g/mL 柠檬酸钠溶液；②2 mol/L NaCl 溶液；③0.14 mol/L NaCl 溶液；④ 体 积分数为 95% 的酒精溶液； ⑤ 0.015 mol/L NaCl 溶液 。以上几点正确 的是（ ）
A. ①③⑤ B. ③④ C. ②④ D. ②③④
【答案】B
【解析】
【分析】
DNA粗提取和鉴定的原理：
1、DNA的溶解性：DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液，但细胞中的某些蛋白质溶于酒精；DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性。
2、DNA鉴定：在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色。
【详解】①0.1g/mL的柠檬酸钠溶液作为抗凝剂防止血液凝固，没有用于DNA的初步析出和提纯，①错误；
②DNA可以溶于2mol/L的NaCl溶液，该溶液是为了溶解血细胞中的DNA，未用于DNA的初步析出和提纯，②错误；
③DNA在O.14mol/L的氯化钠溶液中溶解度最低，此时DNA会从溶液中析出，可用于初步析出DNA，③正确；
④由于DNA不溶于酒精，而其它杂质可以溶于酒精，因此利用体积分数为95%的酒精溶液，可提取较纯净的DNA，④正确；
⑤物质的量浓度为0.015mol/L的NaCl溶液浓度太低，DNA溶解度大，不能析出DNA，⑤错误；
故选B。
【点睛】本题考查了DNA的粗提取与鉴定的相关知识，包括实验的原理、操作步骤等，意在考查考生的识记能力和实验操作能力，难度适中，考生要识记材料选择的原则、实验原理，注意DNA虽能溶于氯化钠溶液，但是在O.14mol/L的氯化钠溶液中溶解度最低。
41.将粗提取的DNA丝状物分别加入0.14 mol/L NaCl溶液、2 mol/L NaCl溶液、体积分数为95%的酒精溶液中，然后用放有纱布的漏斗过滤，分别得到滤液P、Q、R以及存留在纱布上的黏稠物p、q、r，其中由于含DNA少可以丢弃的是( )
A. P、Q、R B. p、q、r
C. P、q、R D. p、Q、r
【答案】C
【解析】
0.14mol/LNaCl溶液以及体积分数为95％的酒精溶液中，DNA溶解度很低，所以纱布上的黏稠物p和r中DNA较多，2 mol/L NaCl溶液中DNA溶解度较高，所以滤液Q中DNA含量较多。
42. PCR一般要经过三十多次循环，从第二轮循环开始，上一次循环的产物也作为模板参与反应，由引物Ⅰ延伸而成的DNA单链作模板时 ( )。
A. 仍与引物Ⅰ结合进行DNA子链的延伸
B. 与引物Ⅱ结合进行DNA子链的延伸
C. 同时与引物Ⅰ和引物Ⅱ结合进行子链的延伸
D. 无需与引物结合，在酶的作用下从头合成子链
【答案】B
【解析】
当由引物Ⅰ延伸而成的DNA单链作模板时，此单链引物固定端为5′端，因此与它互补的子链应从另一端开始合成，即与引物Ⅱ结合延伸DNA子链。
43. 下列操作过程的叙述中错误的是
A. PCR反应中使用的微量离心管、枪头、缓冲液以及蒸馏水等在使用前必须进行高压灭菌
B. PCR所用的缓冲液和酶应分装成小份，并在－20 ℃储存
C. PCR所用的缓冲液和酶从冰箱拿出之后，迅速融化
D. 在微量离心管中添加反应成分时，每吸取一种试剂后，移液器上的吸液枪头都必须更换
【答案】C
【解析】
试题分析：为避免外源DNA等因素污染，PCR反应中使用的微量离心管、枪头、缓冲液以及蒸馏水等在使用前必须进行高压灭菌，A正确。CR缓冲液和酶应分装成小份，在-20 ℃储存，使用前，将所需试剂从冰箱取出，放在冰块上缓慢融化，B正确，C错。微量离心管中添加反应成分时，每吸取一种试剂后，移液器上的吸液枪头都必须更换，以免其他成分污染，D正确。
考点：本题考查PCR相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构能力。
44.下面关于 DNA 对高温的耐受性的说法不正确的是（ ）
A. DNA 对高温的耐受性一般要比蛋白质强
B. 超过 80℃后 DNA 将变性，即使恢复到常温，生物活性也不能恢复
C. 不同生物的 DNA 的“变性”温度不一定相同
D. 深海热泉附近生活的生物的 DNA 对高温的耐受性更强，其 DNA 中鸟嘌呤所占的比例更高
【答案】B
【解析】
【分析】
与蛋白质相比，DNA对高温的耐受性更强，多少蛋白质不能忍受60～80℃的高温，而DNA在80℃以上才能变性；DNA在80～100℃高温条件下，双螺旋结构解体，双链打开，即DNA变性，当温度降低后，双螺旋结构又会重新形成，即复性；由于DNA分子中的G、C碱基对的氢键是3个，A、T碱基对的氢键是2个，因此DNA分子中G、C碱基对的比例越大，DNA分子越稳定。
【详解】A、与蛋白质相比，DNA分子的热稳定性较强，A正确；
B、超过过80℃后DNA将变性，温度降低，DNA分子会复性，B错误；
C、DNA分子的稳定性与G、C碱基对的比例有关，因此不同生物的DNA的“变性”温度不一定相同，C正确；
D、热泉附近生活的生物的DNA对高温耐受性更强，其DNA中鸟嘌呤所占的比例更高，这是长期自然选择的结果，D正确。
故选B。
45.下列与利用NaCl溶液初步析出DNA黏稠物有关的叙述，不正确的是
A. 操作时缓缓滴加蒸馏水，以降低DNA的溶解度
B. 操作时用玻璃棒轻缓搅拌以保证DNA分子的完整
C. 加蒸馏水可以同时降低DNA和蛋白质的溶解度
D. 当丝状黏稠物不再增加时，NaCl溶液的浓度可认为是0.14 mol/L
【答案】C
【解析】
试题分析：DNA的粗提取与鉴定时，操作时缓缓向氯化钠溶液中滴加蒸馏水，可降低DNA的溶解度，A正确；操作时用玻璃棒轻缓搅拌以保证DNA分子的完整，B正确；加蒸馏水可以降低DNA的溶解度但不能降低蛋白质的溶解度，C错误；当丝状黏稠物不再增加时，NaCl溶液的浓度可认为是0.14mol/L，D正确。
考点：本题考查DNA的粗提取与鉴定的相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识网络的能力。
二、非选择题
46.将动物致病菌的抗原基因导入马铃薯制成植物疫苗饲喂转基因马铃薯可使动物获得免疫力。以下是不植物疫苗制备过程相关的图和表。
表 1 引和对序列表
引物对 A
P1 AACTGAAATGTAGCTATC
P2 TTAAGTCCATTACTCTAG
引物对 B
S1 GTCCGACTAGTGGCTGTG
S2 AGCTGGCGTTTAGCCTCG
表 2 几种限制酶识别序列及切割位点表
限制酶
Alu I
EcoR I
Pst I
Sma I
切割位点
AG↓CT
TC↑GA
G↓AATTC
CTTAA↑G
CTGCA↓G
G↑ACGTC
CCC↓GGG
GGG↑CCC
请根据以上图表回答下列问题。
（1）在采用常见 PCR 方法扩增目的基因的过程中，需要解旋酶吗？_____使用的DNA 聚合酶不同于一般生物体内的 DNA 聚合酶，其最主要的特点是___________________。
（2）PCR 过程中退火（复性）温度必须根据引物的碱基数量和种类来设定。表 1 为根据 模板设计的两对引物序列，图 2 为引物对不模板结合示意图。请判断哪一对引物可采用较 高的退火温度？___________________ 。
（3）画出 X 处的末端组成 ______________________________ 。
（4）图 1 步骤③所用的 DNA 连接酶对所连接的 DNA 两端碱基序列是否有与一性要求？________。
（5）为将外源基因转入马铃薯，图 1 步骤⑥转基因所用的细菌 B 通常为______________。
（6）对符合设计要求的重组质粒 T 迕行酶切，假设所用的酶均可将识别位点完全切开， 请根据图 1 中标示的酶切位点和表 2 所列的识别序列，对以下酶切结果作出判断。
①采用 EcoR I 和 Pst I 酶切，得到___________________ 种 DNA 片断。
②采用 EcoR I 和 Sma I 酶切，得到___________________ 种 DNA 片断。
（7）抗原基因在马铃薯体内会表达出抗原，抗原进入动物体内会刺激其_____细胞 增殖分化成_____细胞和_____细胞，从而获得免疫能力。
【答案】 (1). 不需要 耐高温 (2). 引物对 (3). B (4).
(5). 没有 (6). 农杆菌 (7). 2 (8). 1 (9). B (10). 浆 (11). 记忆
【解析】
【分析】
PCR技术：
1、概念：PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术。
2、原理：DNA复制。
3、前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物。
4、过程：①高温变性：DNA解旋过程；②低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链，PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开。
【详解】（1）PCR过程中是通过高温使氢键断裂的，因此不需要加入解旋酶，使用的DNA聚合酶具有耐高温的特性。
（2）耐高温的DNA分子中通常含有G与C碱基比例大，因为它们之间形成三个氢键，因此稳定性强。引物B中含C与G的碱基对较多，可采用较高的退火温度。
（3）通过图1看出X是经限制性酶EcoRI和AluI切割的末端，再通过表2可以得出，X 处的末端组成是：
（4）多种限制酶切割，形成不同的切割位点，所用的DNA连接酶对所连接的DNA两端碱基序列就没有专一性要求。
（5）植物基因工程中常用农杆菌做受体细胞。
（6）据图分析，用到了EcoR I酶和Alu I酶切割抗原DNA片段产生了X、Y两个片段，而用EcoR I酶和SmaI酶切割质粒产生了 M、N两个片段，且M、N片段间存在Pst I酶切点，因此再用EcoRⅠ和PstⅠ酶切割这两片段形成的重组质粒，由于保留了Pstl的切割位点，所以可以得到两种DNA分子。而用EcoRⅠ和SmaⅠ酶切重组质粒中，如图I-②过程只能产生一种DNA片断。
（7）抗原进入动物体内，刺激其B细胞，B细胞增殖分化成浆细胞和记忆B细胞，从而获得免疫能力。
【点睛】本题具有一定的难度，考查了运用PCR方法扩增目的基因的有关知识，意在考查考生的图解识别能力，尤其是限制酶的作用是解答本题的难点和关键点。
47.请回答有关下图的问题：
（1）图甲中序号④所示过程叫做_________，该过程遵循的碱基互补配对原则不同于翻译过程的是_____(请将模板碱基写在前)。
（2）如图乙，一个基因表达载体的组成，除了目的基因外，在基因尾端还必须有 [2]_____；图中[3]_____的作用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。
（3）若预期蛋白质欲通过乳腺生物反应器生产，则构建基因表达载体时，图乙中序号[1]代表的是___________________；且在图甲中⑨过程之前，要对精子进行筛选，保留含性染色体___________________的精子。
（4）为获得较多的受精卵进行研究，图甲中⑥过程一般用激素对供体做_________处理；为提高培育成功率，迕行⑩过程之前，要对_____动物做_____处理。若图甲中的卵母细胞来自从屠宰场收集的卵巢，则其在⑧之前需进行体外培养到_____ 期方能受精。
【答案】 (1). 反转录 (2). A–T (3). 终止子 (4). 标记基因 (5). 乳腺蛋白基因的启动子 (6). X (7). 超数排卵 (8). 供体和受体 (9). 同期发情 (10). MII 中期
【解析】
【分析】
分析甲图：①-⑤表示蛋白质工程，即预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有氨基酸序列→找到对应的脱氧核苷酸序列（基因），其中④是以细胞质中的mRNA为模板反转录形成DNA（目的基因）的过程，⑤表示基因表达载体的构建过程；⑥表示卵母细胞的采集；⑦表示精子的采集和获能；⑧表示卵母细胞的培养；⑨表示精子获能和体外受精；⑩表示胚胎移植过程。
分析乙图：重组质粒。
【详解】（1）图甲中序号④是由RNA到DNA的过程，是反转录过程；逆转录过程遵循的碱基互补配对原则是：A–T、G-C、C-G 、U-A，翻译过程碱基互补配对是A-U、G-C、C-G 、U-A，故该过程遵循的碱基互补配 对原则不同于翻译过程的是A–T。
（2）基因表达载体的结构包括目的基因、启动子、终止子及标记基因等，其中目的基因的尾端是终止子；标记基因的作用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。
（3）由于通过乳腺生物反应器来生产这种蛋白质，故图乙中序号[1]代表乳腺蛋白基因的启动子；对精子进行筛选，保留含性染色体X的精子，以受精后得到雌性个体，利用乳腺生物反应器生产。
（4）对雌性个体注射促性腺激素，可达到超数排卵的目的；胚胎移植之前要对供、受体进行同期发情处理；采集的卵子必须培养到减数第二次分裂中期才具有受精的能力。
【点睛】本题考查蛋白质工程、基因工程、胚胎工程的知识，意在考查能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系能用文字、图表以及数学方式等多种表达形式准确地描述生物学方面的内容，通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理，做出合理的判断或得出正确的结论的能力。
48. 某课题组为解决本地种奶牛产奶量低的问题，引进了含高产奶基因但对本地适应性差的纯种公牛。
（1）拟进行如下杂交：
♂A（具高产奶基因的纯种）×♀B（具适宜本地生长基因的纯种）→C
选择B作为母本，原因之一是胚胎能在母体内正常＿＿＿＿＿＿。若C中的母牛表现为适宜本地生长，但产奶量并未提高，说明高产奶是＿＿＿性状。为获得产奶量高且适宜本地生长的母牛，根据现有类型，最佳杂交组合是＿＿＿＿＿，后代中出现这种母牛的概率是＿＿＿（假设两对基因分别位于不同对常染色体上）。
（2）用以上最佳组合，按以下流程可加速获得优良个体。
精子要具有受精能力，需对其进行＿＿＿处理；卵子的成熟在过程＿＿＿中完成。在过程④的培养基中含有葡萄糖，其作用是＿＿＿＿＿＿＿＿＿。为筛选出具有优良性状的母牛，过程⑤前应鉴定胚胎的＿＿＿＿＿＿。子代母牛的优良性状与过程＿＿＿的基因重组有关。
（3）为了提高已有胚胎的利用率，可采用＿＿＿＿＿＿技术。
【答案】（1）生长发育或胚胎发育 隐性 ♂A×♀C 1/8
（2）获能或增强活力 ③ 供能 性别、高产奶和适应生长的基因 ②
（3）胚胎分割
【解析】
（（1）由于胚胎能在母体内进行正常的胚胎发育，所以可选择适宜当地生长的纯种牛做母本。用纯种高产奶牛作父本与适宜当地生长的纯种牛作母本杂交，获得了C牛，表现为适宜当地生长，但产奶量并没提高，这说明适宜当地生长对不适宜当地生长是显性，低产奶对高产奶是显性。由于控制奶牛的产奶量的基因和对本地的适应性的基因分别位于不同的染色体上，说明他们在遗传时遵循基因的自由组合定律。若控制奶牛的产奶量的等位基因为A和a，对本地的适应性的的等位基因为B和b，可推知雄牛A的基因型为aabb，雌牛B的基因型为AABB，C牛基因型为AaBb，可见要获得产奶量高且适宜当地生长的母牛（aaB-），由于A牛的适宜当地生长的能力差，最好做父本，由此可推知最佳的实验组合为♂A×♀C，此时后代出现所需牛（aaBb）的概率为1/4×1/2＝1/8。
（2）精子需获能后才具备受精的能力；母牛排卵时排出的卵子为次级卵母细胞，由此可推知减数第二次分裂形成卵细胞是在受精过程中完成的，即卵子的成熟是在体外受精过程中完成；在胚胎培养过程中，培养基中的葡萄糖能为胚胎发育过程提供能量；为了筛选出具有优良性状的母牛，在胚胎移植之前需对胚胎的性别、高产奶和适宜生长的基因进行鉴定；母牛在减数分裂过程中发生基因重组，产生具有优良性状基因的卵细胞，子代母牛的优良性状与此有关。
（3）通过胚胎分割技术可产生遗传性状相同的多个胚胎，从而提高胚胎的利用率。
【考点定位】本题主要是考查遗传规律在生产方面的应用，同时涉及胚胎工程的相关操作等知识点。
49.下表为一种营养液的配方，试根据表中的内容作答：
成分
含量
Ca(NO3)2
1 g
KH2PO4
0.25 g
KCl
0.12 g
MgSO4
0.30 g
Fe(NO3)2
0.30 g
Mo
极少
蒸馏水
1000 mL
（1）若用于植物培养，在培养的初期，植物出现萎蔫现象，最可能的原因是__________________。可采用的最简单的有效措施是__________________________。
（2）培养一段时间后，检测到培养液中留存的 NO3-较少而 Ca2+等离子较多，这一现象不 细胞膜的___________________ 有关。
（3）此培养液若用于培养微生物，则可以培养的微生物代谢类型是___________________。培养液 中含有的营养物质有___________________ 类，分别是___________________ 。如果不慎将过量的 NaCl 加人 培养基中，如不想浪费此培养基，可加入________________ ，用以培养_______________。若用于菌 种的鉴定，应该增加的成分是___________________ 。若除去 Ca(NO3)2、Fe(NO3)2，该培养基则可用于培养___________________ 。
【答案】 (1). 培养液浓度过高 (2). 加水稀释 (3). 选择透过性 (4). 自养型 (5). 3 (6). 无机盐，水，氮源 (7). 含碳有机物 (8). 金黄色葡萄球菌 (9). 琼脂 (10). 固氮微生物
【解析】
【分析】
1、培养基的基本成分：水、无机盐、碳源、氮源及特殊生长因子。
2、对异养微生物来说，含C、N的化合物既是碳源，也是氮源，即有些化合物作为营养要素成分时并不是起单一方面的作用。
3、自养型微生物与异养型微生物的培养基的主要差别在于碳源。
【详解】（1）植物萎蔫是缺水，最可能是培养液浓度过高，使植物不能从培养液中吸水，甚至失水。可加水稀释培养液。
（2）一段时间后，检测到培养液中留存的Ca2+较多，而NO3-较少，说明该植物吸收Ca2+较少，而NO3-较多，这一现象与细胞膜的选择透过性功能有关。
（3）此培养液中无有机物，所以只能培养自养型微生物，此培养液能提供水、无机盐、氮源三类营养物质。不慎将过量NaCl加入培养基中，若不想浪费此培养基，可再加入含碳有机物，用于培养金黄色葡萄球菌。鉴定微生物菌种用的是固体培养基，所以还应该加入琼脂。若除去成分Ca(NO3)2、Fe(NO3)2，则没有了氮源，加入(CH2O) , 则有了碳源，所以该培养基可用于培养固氮微生物。
【点睛】本题考查微生物的分离和培养，重点考查制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的过程，要求考生掌握培养基的制备步骤及相关的操作，相关知识点只需考生识记即可，属于考纲识记层次的考查。
50. 乙醇等"绿色能源"的开发备受世界关注。利用玉米秸秆生产燃料酒精的大致流程为：
（1）玉米秸秆预处理后，因该选用____酶进行水解，使之转化为发酵所需的葡萄糖。
（2）从以下哪些微生物中可以提取上述酶？________（多选）
A．酿制果醋的醋酸菌
B．生长在腐木上的霉菌
C．制作酸奶的乳酸菌
D．生产味精的谷氨酸棒状杆菌
E．反刍动物瘤胃中生存的某些微生物
（3）若从土壤中分离生产这种酶的微生物，所需要的培养基为______（按功能分），培养基中的碳源为___________ 。
（4）发酵阶段需要的菌种是_________，生产酒精是要控制的必要条件是________ 。
【答案】（1）纤维素（酶） （2）B、E (3)选择培养基；纤维素 （4）酵母菌；无氧（密封、密闭）
【解析】
试题分析：用植物秸秆生产酒精是利用微生物进行发酵的过程。植物秸秆中的有机物主要是纤维素，需要纤维素酶才能将其水解成葡萄糖，生长在腐木上的霉菌及反刍动物瘤胃中生存的某些微生物中含有纤维素酶，若从土壤中分离产生这种酶的微生物，所用的培养基为选择培养基，利用的碳源为纤维素。发酵阶段需要的菌种是酵母菌，生产酒精时要控制的必要条件是无氧（密封、密闭）。
考点：本题考查分解纤维素的微生物和果酒发酵。
点评：本题以"绿色能源"为背景，考查分解纤维素的微生物和果酒发酵，意在考查考生的识记能力和应用能力，属于容易题。
51.玉米是我国重要的粮食作物，下图是某生命科学研究院利用玉米种子作为实验材料的 所做的一些科学实验。请认真读图然后回答下列问题：
（1）实验装置A中的玉米种子，在萌发成为绿色幼苗的过程中，其代谢类型（营养方式）发生了从___________________到___________________的本质性的变化；但玉米的根系自始至终保持着的吸水方式是___________________。
（2）取B株幼苗的茎尖进行组织培养(图B→C)，发育成植株D，取其花药进行离体培养，幼苗经秋水仙素处理（如图E→F），又发育成为F植株。
①从生殖方式上分析，B→D属于___________________。
②从细胞分裂方式上分析，B→D→E→F过程中分别发生了___________________。
③从遗传特点上分析，自然状态下D和F自交的后代性状表现的特点是________________。
（3）①~②是将纯种黄色玉米种子搭载飞船进行失重和宇宙射线处理。③是从太空返回的玉米种子种植后的高大植株，④是③自花授粉所结的果穗，其上出现了从来没有见过的红粒性状。那么，这种性状的出现是______________结构改变引起的，属于___________________。
【答案】 (1). 异养 (2). 自养 (3). 渗透吸水 (4). 无性生殖 (5). 有丝分裂→减数分裂→有丝分裂 (6). D后代性状表现一致，F出现性状分离 (7). 基因 (8). 基因突变
【解析】
【分析】
经减数分裂产生的生殖细胞，如果两两结合为合子，合子生殖方式为有性生殖，如果卵细胞或者花粉单独发育为个体，则为单性生殖，也属于有性生殖；而体细胞直接发育成新个体的生殖方式为无性生殖。植物产生花粉或卵细胞都要经过减数分裂，而产生体细胞的细胞分裂方式则一般是有丝分裂。无性生殖产生的后代保持了亲本的特性且表现性状一致，而有性生殖由于发生了基因重组，后代会发生性状分离。无性生殖过程和个体发育过程中发生的变异一般为基因突变，不可能发生基因重组。
【详解】（1）种子在萌发成为绿色幼苗的过程中，从没有绿叶到生成绿叶，其代谢类型从异养到自养的本质性的变化；玉米的根系终保持着渗透吸水的方式。
（2）①幼苗B的茎尖进行离体培养发育成植株D,属于植物组织培养的过程，此过程进行有丝分裂，属于无性生殖的范畴，能保持亲本的优良性状；
②B植株进行有丝分裂形成植株D,植株D进行减数分裂形成E,再进行离体培养形成单倍体幼苗F,细胞分裂的方式也属于有丝分裂；
③自 然 状 态 下 D 和 F 自交 的 后 代， 性 状 表 现 的 特 点 ：D后代性状表现一致，F出现性状分离。
（3）①-②是将纯种黄色玉米种子搭载飞船进行失重和宇宙射线处理。③是从太空返回的玉米种子种植后的高大植株，④是③自花受粉所结的果穗，纯种玉米上出现了新性状。新性状的出现是因为玉米的基因结构改变引起的基因突变。
【点睛】本题考查组织培养、生殖方式、细胞分裂、遗传、变异等相关知识，多方面对所学知识进行了综合考查，难度较大，覆盖面广。
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