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【生物】黑龙江省哈尔滨市三中2018-2019学年高二下学期期中考试试题（解析版）
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黑龙江省哈尔滨市三中2018-2019学年
高二下学期期中考试试题
一、选择题
1.下表关于基因工程中有关基因操作的名词及对应的内容，正确的组合是( )
选项
供体
剪刀
针线
载体
受体
A
质粒
限制性核酸内切酶
DNA连接酶
提供目的基因的生物
大肠杆菌等
B
提供目的基因的生物
DNA连接酶
限制性核酸内切酶
质粒
大肠杆菌等
C
提供目的基因的生物
限制性核酸内切酶
DNA连接酶
质粒
大肠杆菌等
D
大肠杆菌等
DNA连接酶
限制性核酸内切酶
提供目的基因的生物
质粒
A. A B. B C. C D. D
【答案】C
【解析】
【分析】
1、基因工程又叫DNA重组技术，是指按照人们的意愿，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品 。
2、基因工程的工具：
（1）限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。
（2）DNA连接酶：连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键。
（3）运载体：常用的运载体：质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒。
【详解】供体是指提供目的基因的生物；限制酶能切割DNA分子，是基因的剪刀；DNA连接酶能将DNA片段连接起来，是基因的针线；运载体包括质粒、噬菌体或动植物病毒；基因工程的受体可以是动物细胞、植物细胞或微生物细胞，但常以大肠杆菌等微生物细胞作为受体。综上所述，C正确，ABD错误。故选C。
2.利用基因工程技术生产羧酸酯酶(CarE)制剂的流程如图所示，下列叙述正确的是( )
A. 过程①需使用转录酶
B. 过程②需使用解旋酶和PCR获取目的基因
C. 过程③使用的感受态细胞可用NaCl溶液制备
D. 过程④可利用DNA分子杂交鉴定目的基因是否已导入受体细胞
【答案】D
【解析】
【分析】
据图分析，图中过程①表示利用mRNA通过反转录法合成相应的DNA；过程②表示利用PCR技术对目的基因进行扩增；过程③表示将目的基因导入受体细胞；过程④表示通过筛选获得工程菌。
【详解】过程①表示利用mRNA通过反转录法合成目的基因，需要逆转录酶的催化，A错误；过程②表示利用PCR技术对目的基因进行扩增，该过程中不需要利用解旋酶，解旋是通过高温解链实现的，B错误；将目的基因导入微生物细胞时采用感受态转化法，因此过程③使用的感受态细胞可用的CaCl2溶液制备，C错误；过程④可利用DNA分子杂交鉴定目的基因是否已导入受体细胞，D正确。
【点睛】解答本题的关键是识记基因工程的操作步骤，通过操作步骤确定图中各标号表示的生理过程，明确PCR技术中不需要解旋酶，并掌握将目的基因导入微生物的方法。
3. 下列四条DNA片段，可能是由同一种限制酶切割而成的是 ( )
A. ①② B. ②③ C. ③④ D. ②④
【答案】D
【解析】
试题分析：因限制酶具有特异性，所以同一种限制酶切割而形成的黏性末端相同或互补，故D正确
考点：本题考查基因工程的限制酶切割出黏性末端的特点，意在考查考生对限制酶所切割的黏性末端的特点的理解和认识。
4.下列关于DNA连接酶的作用的叙述，正确的是( )
A. 将单个核苷酸加到某DNA片段末端，形成磷酸二酯键
B. 将断开的两个DNA片段的骨架连接起来，重新形成磷酸二酯键
C. 连接两条DNA链上碱基之间的氢键
D. 只能将双链DNA片段互补的黏性末端连接起来
【答案】B
【解析】
【分析】
有关DNA连接酶，考生可以从以下几方面把握：
（1）根据酶的来源不同分为两类： E．coliDNA连接酶、T4DNA连接酶．这二者都能连接黏性末端，此外T4DNA连接酶还可以连接平末端，但连接平末端时的效率比较低。
（2）DNA连接酶连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键。
（3）DNA连接酶和DNA聚合酶的区别：（需理解）
①DNA连接酶是在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键，而DNA聚合酶只能将单个脱氧核苷酸加到已有的核苷酸片段上，形成磷酸二酯键；
②DNA连接酶是同时连接双链的切口，而DNA聚合酶只是在单链上将一个个脱氧核苷酸连接起来；
③DNA连接酶不需要模板，而DNA聚合酶需要模板。
【详解】DNA连接酶能连接两个DNA片段，而不是将单个核苷酸连接到已有的DNA链上，A错误； 将断开的两个DNA片段的骨架连接起来，重新形成磷酸二酯键，B正确；两个DNA链中的氢键的形成不需要酶的作用，C错误；DNA连接酶包括E·coliDNA连接酶和T4DNA连接酶，其中T4DNA连接酶既能连接黏性末端，也能连接平末端，只不过连接平末端的效率较低，D错误。故选B。
5.下列哪项不是基因工程中经常使用的载体( )
A. 细菌质粒 B. λ噬菌体的衍生物
C. 动植物病毒 D. 细菌拟核区的DNA
【答案】D
【解析】
【分析】
1、常用的运载体：质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒。（质粒是一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。）
2、作为运载体必须具备的条件：①要具有限制酶的切割位点； ②要有标记基因（如抗性基因），以便于重组后重组子的筛选③能在宿主细胞中稳定存在并复制；④是安全的，对受体细胞无害，而且要易从供体细胞分离出来。
【详解】常用的运载体：质粒、λ噬菌体的衍生物、动植物病毒；质粒是一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。综上所述，ABC不符合题意，D符合题意。故选D。
【点睛】本题考查基因工程的相关知识，重点考查基因工程的操作工具，尤其是运载体，要求考生识记常用的运载体，掌握作为运载体必须具备的条件，能根据题干要求作出准确判断。
6.甲、乙两图表示从细菌细胞中获取目的基因的两种方法，以下说法错误的是（ ）
A. 甲方法可建立该细菌的基因组文库 B. 乙方法可建立该细菌的cDNA文库
C. 甲方法要以脱氧核苷酸为原料 D. 乙方法需要逆转录酶参与
【答案】C
【解析】
甲方法不需要以脱氧核苷酸为原料。
7.蓝藻拟核DNA上有控制叶绿素合成的chlL基因。某科学家通过构建该种生物缺失chlL基因的变异株细胞，以研究chlL基因对叶绿素合成的控制，技术路线如下图所示，下列相关叙述错误的是( )
A. ①②过程应使用不同的限制酶
B. ①②过程都要使用DNA连接酶
C. 终止密码子是基因表达载体的重要组成部分
D. 若操作成功，可用含红霉素的培养基筛选出该变异株
【答案】C
【解析】
【分析】
分析题图：图示为变异株的培育过程。①是chIL基因与质粒重组形成质粒1的过程；②是红霉素抗性基因和质粒1重组形成质粒2的过程；③是将重组质粒2导入有chIL基因的蓝藻细胞，并同源替换chIL基因，最终获得无chIL基因的蓝细菌。
【详解】①②过程切割的位点不同，应该使用不同的限制性核酸内切酶，A正确； ①②过程都是形成重组质粒的过程，因此都要使用限制酶和DNA连接酶，B正确； 终止子是基因表达载体的重要组成部分，终止密码子在mRNA上，不在基因上，C错误； ②过程插入了红霉素抗性基因，可作为标记基因，若操作成功，可用含红霉素的培养基筛选出该变异株，D正确。 故选C。
【点睛】本题以蓝细菌为素材，结合变异株的培育过程图，考查基因工程的原理及技术，要求考生识记基因工程的原理、工具及操作步骤。
8.多聚酶链式反应(PCR技术)是体外酶促反应合成特异DNA片段的一种方法，由高温变性、低温退火及适温延伸等几步反应组成一个周期，循环进行，使目的DNA得以迅速扩增，其简要过程如图所示。下列关于PCR技术叙述不正确的是( )
A. PCR技术是在实验室中以少量DNA制备大量DNA的技术
B. 反应中新合成的DNA又可以作为下一轮反应的模板
C. PCR技术中以核糖核苷酸为原料，以指数方式扩增
D. 应用PCR技术与探针杂交技术可以检测基因突变
【答案】C
【解析】
本题考查PCR的相关内容。由于PCR技术就是体外大量扩增DNA的技术，即以少量DNA制备大量DNA的技术，原理是DNA复制，所以所需原料是脱氧核苷酸，并以指数方式扩增。应用PCR技术与探针杂交技术可以检测基因突变。故选C
9.如图为基因表达载体的模式图，若结构X是表达载体所必需的，则X最可能是( )
A. 氨苄青霉素抗性基因 B. 启动子
C. 限制酶 D. DNA连接酶
【答案】B
【解析】
【分析】
基因表达载体的构建：
1、过程：用同一种限制酶切割目的基因和运载体，再用DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成重组DNA分子。
2、目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在并且可以遗传给下一代并表达和发挥作用。
3、基因表达载体的组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因
（1）启动子在基因的首段，它是RNA聚合酶的结合位点，能控制着转录的开始；
（2）终止子在基因的尾端，它控制着转录的结束；
（3）标记基因便于目的基因的鉴定和筛选。
【详解】基因表达载体由启动子、终止子、标记基因和目的基因组成。图中有终止子、标记基因（抗生素基因）、目的基因（插入的基因）、复制原点等，还缺少启动子，所以X最可能是启动子。故选B。
10.基因工程的操作步骤：①使目的基因与运载体相结合；②将目的基因导入受体细胞；③检测目的基因的表达是否符合特定性状要求；④提取目的基因。正确的操作顺序是
A. ③②④① B. ②④①③
C. ④①②③ D. ③④①②
【答案】C
【解析】
基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤：提取目的基因、目的基因与运载体的结合、目的基因导入受体细胞、目的基因的检测和表达，故选C。
11.基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选。已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—。根据下图示判断下列操作正确的是( )
A. 目的基因和质粒均用限制酶Ⅱ切割
B. 质粒用限制酶Ⅱ切割，目的基因用限制酶Ⅰ切割
C. 目的基因和质粒均用限制酶Ⅰ切割
D. 质粒用限制酶Ⅰ切割，目的基因用限制酶Ⅱ切割
【答案】D
【解析】
限制酶Ⅰ的识别序列和切点是-G↓GATCC-，限制酶II的识别序列和切点是-↓GATC-，可知限制酶Ⅱ能够识别和切割限制酶Ⅰ切割后的黏性末端。据题图可知，目的基因两端分别是限制酶Ⅰ的识别序列和切点（是-G↓GATCC-）和限制酶Ⅱ的识别序列和切点（是-↓GATC-），只有用限制酶Ⅱ才能同时将目的基因切割下来；质粒有GeneⅠ和GeneⅡ表示两种标记基因，分别有限制酶Ⅱ的识别序列和限制酶Ⅰ的识别序列，如果用限制酶Ⅱ切割，则GeneⅠ 和GeneⅡ都被破坏，造成重组质粒无标记基因；用限制酶Ⅰ切割，则破坏GeneⅡ，保留GeneⅠ，其黏性末端和切割目的基因所在DNA的黏性末端相同，可以连接形成重组DNA，故选D。
12. 下列关于目的基因导入受体细胞的描述不正确的是
A. 基因枪法导入植物体细胞的方法比较经济有效
B. 显微注射技术是转基因动物中采用最多的方法
C. 大肠杆菌最常用的转化方法是：使细胞的生理状态发生改变
D. 农杆菌转化法是将目的基因导入植物细胞最常用的方法
【答案】A
【解析】
试题分析：采用花粉管通道法将目的基因导入植物体细胞的方法比较经济有效，故A错误；将目的基因导入受体细胞最有效的方法是显微注射法，故B正确；受体细胞是微生物时，采用钙离子处理，使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态（感受态），故C正确；将目的基因导入植物细胞最常用的方法是农杆菌转化法，故D正确。
考点：本题主要考查将目的基因导入受体细胞的方法，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。
13.将目的基因导入玉米茎尖分生区细胞和小鼠受精卵，应分别采用的方法是( )
A. 显微注射技术 农杆菌转化法 B. 基因枪法 花粉管通道法
C. 花粉管通道法 显微注射技术 D. 基因枪法 显微注射技术
【答案】D
【解析】
【分析】
将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。
（1）将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；
（2）将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；
（3）将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。
【详解】玉米是单子叶植物，基因枪法是将目的基因导入单子叶植物细胞最常用的方法；显微注射法是将目的基因导入动物细胞最常用的方法。因此，将目的基因导入玉米茎尖分生区细胞和小鼠受精卵，应分别采用的方法是基因枪法和显微注射法。故选D。
14. 我国转基因抗虫棉是在棉花细胞中转入Bt毒蛋白基因培育出来的，它对棉铃虫具有较强的抗性。下列叙述错误的是( )
A. Bt毒蛋白基因是从苏云金芽孢杆菌中分离的
B. Bt毒蛋白基因可借助花粉管通道进入棉花细胞中
C. 培育的转基因棉花植株需要做抗虫的接种实验
D. 用DNA聚合酶连接经切割的Bt毒蛋白基因和载体
【答案】D
【解析】
试题分析：目的基因和载体需要用同一种限制性内切酶切割，露出相同的黏性末端两者才能连接在一起，而DNA聚合酶只能用于DNA的自我复制，它们两者的功能时不同的。转基因抗虫棉是我国科学家的研究成果，是将苏云金芽孢杆菌中Bt毒蛋白基因分离出来，然后借助花粉管通道进入棉花细胞中，最后用抗虫的接种实验来进行检测。
考点：转基因抗虫棉
点评：本题考查了转基因抗虫棉的相关知识和基因工程的工具，属于对识记层次的考查。
15.下面是四种不同质粒的示意图，其中ori为复制必需的序列，amp为氨苄青霉素抗性基因，tet为四环素抗性基因，箭头表示同一种限制酶的酶切位点。下列有关叙述正确的是( )
A. 基因amp和tet是一对等位基因，常作为基因工程中的标记基因
B. 质粒指细菌细胞中能自我复制的小型环状的DNA和动植物病毒的DNA
C. 限制酶的作用部位是DNA分子中特定的两个核苷酸之间的氢键
D. 用质粒4将目的基因导入大肠杆菌，该菌不能在含四环素的培养基上生长
【答案】D
【解析】
【分析】
分析题图：图示质粒都含有氨苄青霉素抗性基因和四环素抗性基因，其中1中复制原点被破坏，2中复制原点和两种抗性基因都完好，3中氨苄青霉素抗性基因被破坏，4中四环素抗性基因被破坏。
【详解】基因amp和tet在同一个DNA分子上，不是一对等位基因，A错误；质粒指细菌细胞中或酵母菌细胞中能自我复制的小型环状的DNA，动植物病毒的DNA不属于质粒，B错误；限制性内切酶的作用部位是DNA分子中特定的两个核苷酸之间的磷酸二酯键，C错误；重组质粒4中，氨苄青霉素抗性基因完好，四环素抗性基因被破坏，因此用质粒4将目的基因导入大肠杆菌，该菌不能在含四环素的培养基上生长，D正确。故选D。
【点睛】本题结合图解，考查基因工程的原理及技术，重点考查基因工程的运载体，要求考生识记基因工程常用的工具，掌握作为运载体的条件，能结合图中信息准确判断各选项。
16. 利用外源基因在受体细胞中表达，可生产人类所需要的产品。下列各项中能说明目的基因完成了在受体细胞中表达的是
A. 棉花二倍体细胞中检测到细菌的抗虫基因
B. 大肠杆菌中检测到人胰岛素基因及其mRNA
C. 山羊乳腺细胞中检测到人生长激素DNA序列
D. 酵母菌细胞中提取到人干扰素蛋白
【答案】D
【解析】
目的基因完成了在受体细胞中表达，表达的应该是蛋白质，所以只有D。
17. 目前人类利用基因工程的方法成功培育出转基因抗虫棉，以下说法正确的是( )
A. 苏云金芽孢杆菌的毒蛋白基因与质粒结合后直接进入棉花的叶肉细胞表达
B. 抗虫基因导入棉花叶肉细胞后，可通过传粉、受精的方法，使抗虫性状遗传下去
C. 标记基因的作用是鉴别受体细胞中是否含有目的基因
D. 转基因抗虫棉经过种植，棉铃虫不会产生抗性，这样可以有效消灭棉铃虫
【答案】C
【解析】
试题分析：苏云金芽孢杆菌的毒蛋白基因与质粒结合后，需要将重组质粒导入农杆菌中，运用农杆菌转化法将目的基因导致棉花的体细胞中，A错误；如果抗虫基因导入棉花叶肉细胞的细胞质中，产生的花粉粒中不含该基因，如果导入细胞核基因中，该转基因植物相当于杂合子，后代会发生性状分离，B错误；基因表达载体中含有标记基因，标记基因用于重组后重组子的筛选，C正确；由于生物变异是不定向的，因此棉铃虫可能抗性，这种抗性逐渐积累，最终可能导致抗虫棉失去杀虫效果，D错误。
考点：基因工程的应用
18. 下列哪项不是植物基因工程技术的主要应用（ ）
A. 提高农作物的抗逆性 B. 生产某些天然药物
C. 改良农作物的品质 D. 作器官移植的供体
【答案】D
【解析】
试题分析：植物基因工程应用于抗虫、抗病、抗逆转基因植物，利用转基因改良植物的品质。ABC正确；作器官移植的供体是动物基因工程的应有，D错误；答案是D。
考点：本题考查基因工程的相关知识，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。
19.《人类基因治疗》报道，在美国佛罗里达大学基因治疗中心接受基因治疗的三名遗传性失明患者都重新获得了一定的视力，并且没有严重的副作用。基因治疗是指( )
A. 把健康外源基因导入有基因缺陷的细胞中，达到治疗疾病的目的
B. 对有缺陷的细胞进行修复，从而使其恢复正常，达到治疗疾病的目的
C. 运用人工诱变方法，使有基因缺陷的细胞发生基因突变，从而恢复正常
D. 运用基因工程技术，把有缺陷的基因切除，达到治疗疾病的目的
【答案】A
【解析】
【分析】
基因治疗（治疗遗传病最有效的手段）
1．概念：把正常基因导入病人体内有缺陷的细胞中，使该基因的表达产物发挥功能，从而达到治疗疾病的目的。例：将腺苷酸脱氨酶（ADA）基因导入患者的淋巴细胞，治疗复合型免疫缺陷症。
2、种类：体外基因治疗和体内基因治疗（注意两者的区别），其中效果比较可靠的是体外基因治疗。
体外基因治疗：先从病人体内获得某种细胞进行培养，然后再体外完成转移，再筛选成功转移的细胞增植培养，最后重新输入患者体内，如腺苷酸脱氨酶基因的转移。
体内基因治疗：用基因工程的方法直接向人体组织细胞中转移基因的方法。
【详解】基因治疗是把正常基因导入病人体内，使该基因的表达产物发挥功能，以达到治疗疾病的目的，A正确；基因治疗只是把正常基因导入病人体内，并没有对有基因缺陷的细胞进行修复， B错误；基因缺陷指的是某基因缺失，不能通过人工诱变产生正常基因，C错误；基因治疗是把正常基因导入病人体内，达到治疗疾病的目的，并没有切除基因，D错误。 故选A。
20.关于基因工程的应用，下列说法不正确的是( )
A. 干扰素是动物或人体细胞受到病毒侵染时产生的一种糖蛋白
B. 基因治疗是治疗遗传病的最有效手段
C. 体内基因治疗是基因治疗的一种形式
D. 体外基因治疗仅指体外完成基因转移这个环节
【答案】D
【解析】
【分析】
基因治疗是指把正常基因导入病人体内有缺陷的细胞中，使该基因的表达产物发挥功能，从而达到治疗疾病的目的。例：将腺苷酸脱氨酶（ADA）基因导入患者的淋巴细胞，治疗复合型免疫缺陷症。
【详解】干扰素的化学本质是糖蛋白，是动物或人体细胞受到病毒侵染后产生的一种糖蛋白，它几乎能抵抗所有病毒引起的感染，是一种抗病毒的特效药，A正确；基因治疗是治疗遗传病的最有效手段，B正确；基因治疗分为体内基因治疗和体外基因治疗，体内基因治疗是基因治疗的一种形式，C正确；体外基因治疗先从病人体内获得某种细胞进行培养，然后在体外完成转移，再筛选成功转移的细胞扩增培养，最后重新输入患者体内，D错误。故选D。
21.下列有关蛋白质工程和基因工程的叙述错误的是
A. 基因工程是通过基因操作把外源基因转入适当的生物体内，并在其中进行表达，它的产品还是该基因编码的天然存在的蛋白质
B. 蛋白质工程的产品已不再是天然的蛋白质，而是经过改造的，具有了人类所需要的优点的蛋白质
C. 蛋白质工程利用基因工程的手段，按照人类自身的需要，定向地改造天然的蛋白质，甚至于创造全新的蛋白质分子
D. 蛋白质工程是在分子水平上对蛋白质分子直接进行操作，定向改变分子的结构
【答案】D
【解析】
基因工程是通过基因操作把外源基因转入适当的生物体内，并在其中进行表达，它的产品还是该基因编码的天然存在的蛋白质，A正确；蛋白质工程是指以蛋白质的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行基因改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需要，B正确；蛋白质工程利用基因工程的手段，按照人类自身的需要，定向地改造天然的蛋白质，甚至于创造全新的蛋白质分子，C正确；对蛋白质结构的改造是通过改造基因来实现的，所以蛋白质工程是在分子水平对基因直接进行操作，进而改造蛋白质分子，D错误。
22.将富含赖氨酸的蛋白质编码基因导入玉米细胞，可以提高玉米中的赖氨酸含量；更换赖氨酸形成过程中的天冬氨酸激酶和二氢吡啶二羧酸合成酶的个别氨基酸，使两种酶的活性提高，也可以提高玉米中的赖氨酸含量。以上两种技术分别属于( )
A. 基因工程、基因工程 B. 蛋白质工程、蛋白质工程
C. 基因工程、蛋白质工程 D. 蛋白质工程、基因工程
【答案】C
【解析】
【分析】
1、蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。（基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质）
2、蛋白质工程的基本途径：从预期的蛋白质功能出发，设计预期的蛋白质结构，推测应有的氨基酸序列，找到相对应的脱氧核苷酸序列（基因）以上是蛋白质工程特有的途径；以下按照基因工程的一般步骤进行。（注意：目的基因只能用人工合成的方法）
【详解】将富含赖氨酸的蛋白质编码基因导入玉米细胞属于基因工程，富含赖氨酸的蛋白质是自然界中已有的蛋白质，基因工程只是把该蛋白质基因从一种生物转入玉米体内，并使之合成该蛋白质；更换赖氨酸合成过程中的天冬氨酸激酶和二氢吡啶二羧酸合成酶的个别氨基酸，是对自然界中已有的蛋白质进行改造，属于蛋白质工程。故选C。
【点睛】明确基因工程和蛋白质工程的主要区别，要生产的蛋白质是否是自然界已存在的。
23.蛛丝的强度和柔韧度得益于蛛丝蛋白的特殊布局，使它产生一个由坚硬的结晶区和非结晶区构成的混合区域。有人试图通过破解蛛丝蛋白的结构从而推测出其相应的基因结构，以指导对蚕丝蛋白的修改，让蚕也吐出像蛛丝蛋白一样坚韧的丝。此过程运用的技术及流程分别是 ( )
A. 基因突变；DNA→RNA→蛋白质
B. 基因工程；RNA→RNA→蛋白质
C. 基因工程；DNA→RNA→蛋白质
D. 蛋白质工程；蛋白质→RNA→DNA→RNA→蛋白质
【答案】D
【解析】
通过破解蛛丝蛋白的结构从而推测出其相应的基因结构，蛋白质工程，具体流程为蛋白质→RNA→DNA→RNA→蛋白质，D正确。
【名师点睛】
本题主要考查蛋白质工程与基因工程的比较
(1)区别
项目
蛋白质工程
基因工程
过程
预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列
获取目的基因→基因表达载体的构建→将目的基因导入受体细胞→目的基因的检测与鉴定
实质
定向改造或生产人类所需的蛋白质
定向改造生物的遗传特性，以获得人类所需的生物类型和生物产品
结果
可生产自然界没有的蛋白质
只能生产自然界已有的蛋白质
(2)联系
①蛋白质工程是在基因工程的基础上，延伸出来的第二代基因工程。
②基因工程中所利用的某些酶需要通过蛋白质工程进行修饰、改造。
24.“DNA的粗提取与鉴定”实验中，操作正确的是( )
A. 取制备好的鸡血细胞液5～10 mL注入烧杯中，加入物质的量浓度为0.14 mol/L的NaCl溶液20 mL，同时用玻璃棒沿同一方向快速搅拌5 min，可使血细胞破裂，释放出DNA
B. 整个DNA提取过程中，两次加蒸馏水的目的都是为了降低溶液中NaCl的浓度，使DNA分子的溶解度达到最低，析出DNA分子
C. 整个DNA提取操作中，两次加入2 mol/L的NaCl溶液，目的都是使DNA尽可能多地溶解在NaCl溶液中
D. DNA鉴定操作中，只要向溶有DNA的NaCl溶液中加入4 mL的二苯胺试剂，即可出现蓝色
【答案】C
【解析】
试题分析：取制备好的鸡血细胞液注入烧杯中,迅速加入蒸馏水并用玻璃棒沿同一方向搅拌,使血细胞破裂,将DNA释放出来，A错误；整个DNA提取过程中,使用两次蒸馏水,第一次是使血细胞吸水胀破,释放核DNA,第二次是用来稀释NaCl溶液,使DNA析出，B错误；整个DNA提取操作中，两次加入2 mol/L的NaCl溶液，目的都是使DNA尽可能多地溶解在NaCl溶液中，C正确；在DNA鉴定操作中,DNA遇二苯胺试剂呈蓝色需在沸水浴条件下完成，D错误。
考点：本题考查“DNA的粗提取与鉴定”实验的知识。意在考查能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，能独立完成“生物知识内容表”所列的生物实验，包括理解实验目的、原理、方法和操作步骤，掌握相关的操作技能，并能将这些实验涉及的方法和技能进行综合运用的能力。
25. 当植物细胞脱离了原来所在植物体的器官或组织而处于离体状态时，下列有可能使其表现出全能性，并发育成完整植株的是( )。
A. 细胞分裂素 B. 生长素
C. 一定的营养物质 D. 以上三者均是
【答案】D
【解析】
试题分析：植物组织培养的培养基的组成：由无机成分（水和无机盐）、有机营养成分、激素（生长素和细胞分裂素）、琼脂，故选D。
考点：本题考查植物组织培养的有关知识，意在考查考生识记能力和理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。
26.植物组织培养依据的原理、培养过程的顺序及诱导的植物激素分别是( )
①细胞的全能性
②离体植物器官、组织或细胞
③根、芽
④生长素和细胞分裂素
⑤生长素和乙烯
⑥愈伤组织
⑦再分化
⑧脱分化
⑨植物体
A. ①、②⑦⑥⑧③⑨、④
B. ①、②⑧⑥⑦③⑨、④
C. ①、⑥②⑨⑧③⑦、⑤
D. ①、②⑨⑧⑥⑦③、⑤
【答案】B
【解析】
植物组织培养依据的原理为植物细胞的全能性；培养过程的顺序及诱导的植物激素分别是离体植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织，再分化形成根、芽等，进而形成新的植物体。
27. 人参皂甙干粉工厂化生产，下列哪种技术是必需的（ ）
A. 杂交育种 B. 植物组织培养
C. 多倍体育种 D. 单倍体育种
【答案】B
【解析】
试题分析：植物组织培养技术的应用：植物繁殖的新途径（微型繁殖、作物脱毒、人工种子）、作物新品种的培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产．
解：人参皂甙的工厂化生产过程：利用植物组织培养技术将外植体培育到愈伤组织，再进行植物细胞培养，进而获得人参皂甙．
故选：B．
考点：植物培养的条件及过程．
28.下图是“白菜—甘蓝”杂种植株的培育过程。下列说法正确的是( )
A. 植物体细胞杂交技术已经能使杂种植物按照人们的需要表现出亲代的优良性状
B. 愈伤组织是由杂种细胞再分化形成，具有发育的全能性
C. 上述过程中包含了有丝分裂、细胞分化和减数分裂等过程
D. “白菜—甘蓝”杂种植株具有的性状是基因选择性表达的结果
【答案】D
【解析】
【分析】
分析题图：图示为“白菜-甘蓝”杂种植株的培育过程，首先去壁获得原生质体；其次诱导原生质体融合，再生出新的细胞壁，形成杂种细胞；最后才有植物组织培养技术将杂种细胞培育成杂种植株。
【详解】目前植物体细胞杂交技术还没有能使杂种植物按照人们的需要表现出亲代的优良性状，A错误；愈伤组织形成时并没有形成完整个体，因此不能说明高度分化的植物细胞具有全能性，B错误； 上述过程中发生了有丝分裂和细胞分化，但没发生有减数分裂，C错误； “白菜-甘蓝”杂种植株具有的性状是基因选择性表达的结果，D正确。 故选D。
【点睛】本题结合“白菜-甘蓝”杂种植株的培育过程图解，考查植物体细胞杂交和植物组织培养的相关知识，要求考生识记植物组织培养的原理、过程及条件；识记植物体细胞杂交的过程，能结合所学的知识准确判断各选项。
29. A种植物细胞（基因型为Aa），B种植物细胞（基因型为Bb）；去掉细胞壁后，诱导两种细胞的原生质体融合，形成单核的杂种细胞。若经过组织培养得到的杂种植株是
A. 二倍体，基因型为AaBb B. 二倍体，基因型为AAaaBBbb
C. 四倍体，基因型为AaBb D. 四倍体，基因型为AAaaBBbb
【答案】C
【解析】
植物体细胞杂交，染色体组数是两个细胞染色体级数之和，基因是两种生物基因组合，所以两二倍体细胞后变成四倍体，基因变成AaBb。
30.在下列培育新个体的过程中，没有利用植物组织培养技术的是( )
A. 花药离体培养获得单倍体植株
B. 将抗冻蛋白基因导入番茄体细胞后培育的抗冻番茄
C. 细胞工程培育“番茄—马铃薯”杂种植株
D. 秋水仙素处理萌发的种子或幼苗获得多倍体植株
【答案】D
【解析】
【分析】
用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗得到多倍体植株属于多倍体育种，处理对象为独立的个体，无需进行组织培养。植物组织培养是一种无性繁殖的技术，将离体的单个植物细胞培养成完整的植株的过程，体现植物细胞的全能性。植物基因工程、单倍体育种和植物体细胞杂交过程中均运用了植物组织培养技术。
【详解】由配子直接发育的个体称为单倍体，花药中的花粉是植物的配子，所以采用花药离体培养得到单倍体植株，此过程在自然状态下不能实现，需采用植物组织培养，A错误；在培育转基因番茄的过程中，需要将抗冻蛋白基因与相应载体连接构建基因表达载体，再导入受体细胞培育成转基因植株，需采用植物组织培养，B错误；培育“番茄-马铃薯”杂种植株，先要制备“番茄-马铃薯”杂种细胞，然后借助于植物组织培养的技术手段将杂种细胞培育成杂种植株，C错误；用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗得到的多倍体植株，需要用秋水仙素处理萌发的种子和幼苗，不需要借助于植物组织培养技术，D正确。故选D。
【点睛】本题着重考查了植物组织培养技术在生物工程育种中的应用，属于对识记、理解层次的考查。植物组织培养技术已经得到广泛应用，包括：植物繁殖的新途径（如微型繁殖、作物脱毒、人工种子）、作物新品种的培育（如单倍体育种、突变体的应用）、细胞产物的工厂化生产（如从培养的红豆杉细胞中提取抗肿瘤药物紫杉醇）。
31.下列有关植物体细胞杂交的叙述，不正确的是( )
A. 用酶解法去掉细胞壁，分离出有活力的原生质体
B. 诱导两种植物的原生质体融合，进而形成杂种细胞
C. 植物体细胞杂交技术的最终目的是获得杂种细胞
D. 植物体细胞杂交技术可以克服不同种间远缘杂交不亲和的障碍
【答案】C
【解析】
【分析】
植物体细胞杂交技术的实质是将来自两个不同植物原生质体的融合，这就需要使用纤维素酶和果胶酶去除植物细胞壁获得原生质体，再应用化学法（聚乙二醇）或物理方法诱导原生质体融合。杂种细胞再生出新的细胞壁是体细胞融合完成的标志，细胞壁的形成与细胞内高尔基体有重要的关系）。把杂种细胞培育成植株（植物组织培养技术）。其原理是植物细胞具有全能性和细胞膜具有流动性。
【详解】A.植物体细胞杂交过程中，需要用酶（纤维素酶和果胶酶）解法去掉细胞壁，分离出有活力的原生质体，A正确；植物体细胞杂交过程中，需采用物理或化学方法诱导两种植物的原生质体融合，进而形成杂种细胞，B正确；植物体细胞杂交的最终目的是获得杂种植株，C错误；植物体细胞杂交技术最大的优点是克服远缘杂交不亲和的障碍，D正确。故选C。
32. 下列关于动物细胞工程的叙述，正确的是
A. 生物导弹是用癌细胞的单克隆抗体杀死癌细胞
B. 动物细胞培养的基础是细胞具有全能性
C. 细胞融合是利用了细胞膜的结构特点
D. 制备单克隆抗体的第二次筛选是选出杂交瘤细胞
【答案】C
【解析】
试题分析：生物导弹是用癌细胞的单克隆抗体精确制导，用携带的药物杀死癌细胞，A错误；动物细胞培养的基础是细胞增殖，B错误；细胞融合是利用了细胞膜的结构特点—流动性，C正确；制备单克隆抗体的第二次筛选是选出杂交瘤细胞，D正确。
考点：本题考查动物细胞工程的相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。
33.下列关于动物细胞培养的叙述，错误的是( )
A. 用于培养的细胞大都取自胚胎或幼龄动物的器官或组织
B. 将所取的组织先用胰蛋白酶等处理使其分散成单个细胞
C. 在培养瓶中要定期用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离，制成细胞悬液
D. 动物细胞培养只能传至50代左右，所培养的细胞都会衰老死亡
【答案】D
【解析】
【分析】
本题考查动物细胞培养的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力，运用所学知识综合分析问题的能力。
【详解】用于培养的细胞大都取自胚胎或幼龄动物的器官或组织，因为胚胎或幼龄动物的器官或组织分裂能力旺盛，A正确；动物细胞培养时，应用胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）处理组织使其分散成单个细胞，B正确；细胞存在接触抑制，因此在培养瓶中要定期用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离，制成悬浮液进行传代培养，C正确；动物细胞培养传50代左右，部分细胞可能会出现变异变成不死性细胞，D错误。
【点睛】动物细胞培养过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。
34.核移植的受体细胞是MII期卵母细胞,下列有关说法错误的是（ ）
A. MII期卵母细胞质中含有促进细胞核全能性表达的物质
B. MII期卵母细胞体积比较大,操作起来相对容易
C. 可以把供体细胞直接注入去核的卵母细胞中
D. MII期卵母细胞对克隆动物的遗传特性没有任何影响
【答案】D
【解析】
【分析】
细胞核移植过程中的几点注意：
①细胞核移植技术中注入去核卵母细胞中的不是供体细胞核，而是整个细胞，伴随着两细胞融合，体现细胞膜的结构特点：具有一定的流动性。
②受体细胞为减数第二次分裂中期的次级卵母细胞，此时在透明带内包含着第一极体，在去核的同时连同第一极体一并去掉。
③该技术形成重组细胞发育成一个新个体，体现了细胞核的全能性而非动物细胞的全能性。
④用卵母细胞做受体细胞的原因：a．卵母细胞体积大，便于操作；b．含有促使细胞核表达全能性的物质；c．营养物质丰富。
⑤克隆属于无性繁殖，产生新个体的性别、绝大多数性状与供核亲本一致。
【详解】通常用处于MII中期去核的卵母细胞作为受体细胞的原因除了它体积大、易操作、营养物质丰富外，还因为它的细胞质中含有促进细胞核全能性表达的物质，A正确；MII期卵母细胞体积比较大，操作起来相对容易，B正确；根据分析可知，可以把供体细胞直接注入去核的卵母细胞中，C正确；生物的性状是由细胞核和细胞质共同决定的，克隆动物的细胞核中遗传物质来自于供体核，细胞质中的遗传物质来自于MII期卵母细胞，D错误。
故选D。
35.下列关于克隆的说法不正确的是( )
A. 由一个受精卵发育为一个完整的个体叫做克隆
B. 基因克隆是指某目的基因复制的过程
C. 动物体细胞核移植技术需通过细胞核移植形成重组细胞
D. 动物克隆的技术基础是动物细胞的培养
【答案】A
【解析】
【分析】
克隆原意是指以幼苗或嫩枝插条，以无性繁殖或营养繁殖的方式培育植物，如扦插和嫁接。克隆是指生物体通过体细胞进行的无性繁殖，以及由无性繁殖形成的基因型完全相同的后代个体组成的种群。通常是利用生物技术由无性生殖产生与原个体有完全相同基因组织后代的过程。
【详解】由一个受精卵发育为一个完整的个体的过程叫做胚胎发育，不叫克隆，A错误； 基因克隆是指某目的基因的复制，B正确； 动物体细胞克隆要通过细胞核移植形成重组细胞，进而形成克隆动物，故C正确； 动物细胞培养是动物细胞工程的基础，D正确。故选A。
36. 下列关于细胞工程的叙述，正确的是 （ ）
A. 去除植物细胞壁和将动物组织分散成单个细胞的酶相同
B. 灭活的病毒可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合
C. 小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫的B淋巴细胞融合可制备单克隆抗体
D. 动物细胞培养和植物组织培养都需要经过脱分化过程
【答案】C
【解析】
试题分析：去除植物细胞壁需要用纤维素酶和果胶酶处理，将动物组织分散成单个细胞需用胰蛋白酶处理，A错误；诱导植物原生质体融合或动物细胞融合均可采用物理方法（如电激）或化学方法，灭活的病毒只能诱导动物细胞融合，B错误；小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫的B淋巴细胞融合后可形成既能合成抗体，又能无限增殖的杂交瘤细胞，将杂交瘤细胞培养可大量单克隆抗体，C正确；动物细胞培养不需要经过脱分化处理，植物组织培养需要经过脱分化和再分化过程，D错误。
考点：单克隆抗体的制备过程；组织培养基的成分及作用；植物体细胞杂交的过程；细胞融合的方法；动物细胞与组织培养过程
37. 培养人细胞与小鼠细胞的融合细胞发现，细胞会随机丢失来自人细胞的染色体，在仅含有人的1号染色体的融合细胞中，合成出人的尿苷单磷酸激酶。下列有关叙述中，不合理的是
A. 与人或小鼠细胞相比，融合细胞发生了遗传物质的改变
B. 研究方法中需要选择适当的培养基和细胞融合诱导技术
C. 在融合细胞中，人的1号染色体DNA与小鼠DNA发生了重组
D. 这种研究可能发现人的某一特定基因与特定染色体的关系
【答案】C
【解析】
试题分析：融合细胞细胞会随机丢失来自人细胞的染色体，这就发生遗传物质的改变，A正确；适当的培养基用来选择融合细胞，常用PEG,灭活病毒和电激来诱导细胞融合，B正确；在仅含有人的l号染色体的融合细胞中，合成出人的尿苷单磷酸激酶，表明人的l号染色体有人的尿苷单磷酸激酶基因，并无证据说明人的1号染色体DNA与小鼠DNA发生了重组，C错；因为融合细胞会随机丢失来自人细胞的染色体，可以借助此方法来研究某个细胞的特定性状与特定染色体的关系，D正确。
考点：本题考查细胞融合相关知识，意在考查考生能运用所学知识与观点，通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理，做出合理的判断或得出正确的结论的能力和能对实验现象和结果进行解释、分析和处理能力。
38.单克隆抗体制备过程中，对骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后，要用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞。在这种培养基上不能存活、增殖的细胞是( )
①B淋巴细胞 ②骨髓瘤细胞 ③B淋巴细胞自身融合细胞 ④骨髓瘤细胞自身融合细胞 ⑤杂交瘤细胞
A. ①②③④ B. ①③⑤ C. ②④ D. ①③
【答案】A
【解析】
【分析】
单克隆抗体的制备：
1、细胞B淋巴细胞：能产生特异性抗体，在体外不能无限繁殖；骨髓瘤细胞：不产生专一性抗体，体外能无限繁殖。
2、杂交瘤细胞的特点：既能大量增殖，又能产生特异性抗体。
3、两次筛选：①筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交细胞以及自身融合的细胞）；②筛选出能够产生特异性抗体的细胞群。
4、两次抗体检测：专一抗体检验阳性。
5、提取单克隆抗体：从培养液或小鼠腹水中提取。
6、单克隆抗体的优点：特异性强、灵敏度高，并可能大量制备。
【详解】特定培养基培养细胞的目的是筛选出既能大量增殖、又能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，因此其他的细胞都不能在此培养基上生存。在这种培养基上不能存活和繁殖的细胞有：①B淋巴细胞、②小鼠骨髓瘤细胞、③B淋巴细胞自身融合细胞、④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞。故选A。
39. 下图是科学家利用供体生物DNA中的无限增殖调控基因，制备单克隆抗体的过程。下列相关叙述错误的是
A. 经限制酶处理后的目的基因与载体的黏性末端相同
B. Ⅰ是经特定抗原免疫过的B淋巴细胞
C. 此种制备单克隆抗体的方法涉及转基因及动物细胞融合技术
D. 经检测和筛选后的Ⅱ，既能无限增殖又可分泌单克隆抗体
【答案】C
【解析】
在同一种限制性内切酶作用，使无限增殖调控基因与质粒具有相同的粘性末端，A正确；I代表受体细胞，要具有分泌抗体的能力，则为已免疫的B细胞，B正确；该过程涉及基因工程和动物细胞培养，没有动物细胞融合技术，C错误；Ⅱ是含有无限增殖调控基因的效应B细胞，既有无限增殖的能力，又能分泌特异性抗体，D正确。
【考点定位】基因工程的原理及技术；单克隆抗体的制备过程
【名师点睛】采用基因工程的方法获得单克隆抗体，用相同限制酶处理目的基因和运载体使其具有相同的粘性末端，便于拼接，再导入到浆细胞或已免疫的B细胞或效应B细胞中，Ⅱ是含有无限增殖调控基因的效应B细胞，既能无限增殖又能分泌特异性抗体。
40. 将特定药物与单克隆抗体相结合制成的“生物导弹”，能够用于杀死人类的某些癌细胞，其过程如图所示。下列相关叙述不正确的是（ ）
A. ①过程的原理和植物原生质体融合的原理基本相同
B. 经①形成的杂交瘤细胞能无限增殖并产生单一抗体
C. ②过程需要筛选并克隆单个杂交瘤细胞
D. 抗体的靶向作用使③过程具有高度特异性
【答案】B
【解析】
试题分析：①过程表示脾细胞与骨髓瘤细胞融合，与植物原生质体融合的原理相同，都是细胞膜的流动性，A项正确；经①形成的杂合细胞可能有三种，要经过筛选得到杂交瘤细胞，去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞，B项错误；②过程需要筛选出能够产生特异性抗体并能无限增殖的杂交瘤细胞，然后才能进行克隆化培养，C项正确；将特定药物与单克隆抗体相结合制成的“生物导弹”，注入体内，借助单克隆抗体的导向作用，能将药物定向带到癌细胞所在位置，在原位杀死癌细胞，疗效高，副作用小，D项正确。
考点：本题考查单克隆抗体的相关知识，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构的能力。
41.在单克隆抗体制备中，关于杂交瘤细胞制备的叙述，正确的是( )
A. 可利用电激等物理方法诱导动物细胞融合
B. 可利用细胞中染色体组数筛选出杂交瘤细胞
C. 利用了细胞膜的流动性和基因重组等原理
D. 筛选得到的杂交瘤细胞可直接用于生产单克隆抗体
【答案】A
【解析】
【分析】
单克隆抗体的制备过程：
（1）制备产生特异性抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原，然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞。
（2）获得杂交瘤细胞。
①将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中形成的B淋巴细胞融合；
②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体。
（3）克隆化培养和抗体检测
（4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖。
（5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。
【详解】单克隆抗体制备中可利用电激等物理方法直接诱导两个细胞的融合，A正确； 因为观察细胞染色体需要对细胞解离等处理，细胞已会死亡，所以不能通过观察染色体的数目和形态筛选杂交瘤细胞，B错误； 利用了细胞膜的流动性和细胞增殖等原理，C错误； 用选择培养基筛选得到的杂交瘤细胞需要再专一抗体检测和克隆化培养后才能用于生产单克隆抗体，D错误。 故选A。
42.下列有关哺乳动物精子和卵细胞的发生以及受精作用的叙述，正确的是( )
A. 采集到的精子和卵细胞相遇即可发生受精作用
B. 排卵是指卵泡从卵巢中排出
C. 卵细胞形成时的分裂过程均在卵巢内完成
D. 卵子是否受精的标志是在卵细胞膜和透明带之间观察到两个极体
【答案】D
【解析】
【分析】
1、受精包括受精前的准备阶段和受精阶段。
（1）准备阶段1-精子获能。刚刚排出的精子，不能立即与卵子受精，必须在雌性动物生殖道发生相应的生理变化后，才能获得受精能力。
（2）准备阶段2-卵子的准备，动物排出的可能是初级卵母细胞也可能是次级卵母细胞，都要在输卵管内进一步成熟，达到减数第二次分裂中期时，才具备与精子受精的能力。
2、卵细胞形成过程，其中减数第一次分裂是在雌性动物排卵前后完成的，场所在卵巢；减数第二次分裂是在受精过程中完成的，场所在输卵管中。
3、受精作用完成的标志：在卵黄膜和透明带之间的间隙可以观察到两个极体（一个是第一极体，还有一个是第二极体）。
【详解】采集到的精子必需经过获能处理，卵细胞必需发育到减数第二次分裂的中期才具有受精能力，A错误；排卵就是卵细胞从卵泡中排出，可能是初级卵母细胞或次级卵母细胞，B错误；卵细胞形成时的分裂过程在卵巢和输卵管中完成，C错误；在卵黄膜和透明带之间观察到两个极体，说明卵细胞已经完成了受精，这是判断卵细胞是否受精的重要标志，D正确。故选D。
43.猪或牛的初级卵母细胞的减数第一次分裂完成于( )
A. 排卵前后，在卵巢内 B. 排卵前，在卵巢内
C. 排卵后，在输卵管内 D. 受精时，在输卵管内
【答案】B
【解析】
【分析】
卵子的发生
（1）场所：卵子的发生是在卵巢内完成的。
（2）时间：卵原细胞通过有丝分裂不断增加其数量，并演变为初级卵母细胞，被卵泡细胞包围，形成卵泡，是在胎儿时期完成的（卵泡=初级卵母细胞+卵泡细胞）。MⅠ是在雌性动物排卵前后完成的，结果是产生次级卵母细胞和第一极体；次级卵母细胞再分裂产生一个成熟的卵子和第二极体（MⅡ在输卵管中完成的，这一点请特别注意）。
【详解】在卵细胞的形成过程中，初级卵母细胞的减数第一次分裂是在雌性动物排卵前完成的；并且卵子的发生是在卵巢内完成的，即减数第一次分裂在卵巢内。故选B。
【点睛】本题考查了卵子发生的时间和场所，知识点比较简单，属于考纲中识记层次的考查。特别注意MⅡ在输卵管中完成的，因此之前都是在卵巢中完成的。
44.下列关于受精过程的叙述,错误的是( )
A. 获能后的精子与卵子相遇后,释放顶体酶穿过透明带进入放射冠
B. 透明带反应是防止多精入卵的第一道屏障
C. 精子与卵细胞膜相互融合,精子入卵
D. 雄原核形成的同时,卵子完成减数第二次分裂
【答案】A
【解析】
【分析】
受精过程：顶体反应，释放顶体酶→穿越放射冠→穿越透明带（透明带反应）→卵细胞膜反应（卵黄膜封闭作用）→卵子完成减数第二次分裂并释放第二极体→雌雄原核的形成、核膜消失，雌、雄原核融合形成合子→第一次卵裂开始。
【详解】获能后的精子与卵子相遇后，首先发生顶体反应，释放顶体酶溶解卵丘细胞间的物质，精子穿过放射冠进入透明带， A错误；透明带反应和卵黄膜封闭作用是防止多精入卵的两道屏障，其中透明带反应是防止多精入卵的第一道屏障，B正确； 精子与卵细胞膜相互融合，精子入卵，C正确； 精子进入卵黄膜后，卵子完成第二次减数分裂并释放第二极体，同时形成雌雄原核，D正确。故选A。
45.下列不是精子、卵子发生的区别是（ ）
A. 初级精母细胞、初级卵母细胞的形成时间
B. 减数第一次分裂和减数第二次分裂的时间连续性
C. 成熟生殖细胞是否经过变形
D. 成熟生殖细胞中染色体的数量
【答案】D
【解析】
【分析】
哺乳动物精子和卵子发生的不同点：
(1)精子的减数两次分裂是连续的，场所唯一(MⅠ和MⅡ的场所都是睾丸)；而卵子的两次分裂是不连续的，场所不同。(MⅠ场所在卵巢，MⅡ场所在输卵管中)
(2)精子和卵子发生的时间不同：精子的发生是从初情期一直到生殖机能衰退；多数哺乳动物卵子的形成和在卵巢内的贮备是胎儿出生前完成的；MⅠ是在雌性动物排卵前后完成的，MⅡ是在受精过程中完成的；
(3)精子的形成过程需要变形；卵细胞的形成过程不需要变形。
【详解】初级精母、卵母细胞的形成时间不同，初级精母细胞是在初情期之后形成的，而初级卵母细胞是在胎儿时期形成的，A错误； 精子形成过程中，减数第一次分裂和减数第二次分裂是连续的，而卵细胞形成过程中，减数第一次分裂和减数第二次分裂不是连续，B错误； 精子形成过程中需要经过变形阶段，而卵细胞形成过程中不需要经过变形阶段，C错误； 精子和卵细胞中染色体数目相同，D正确。故选D。
46. 下图是应用生物工程技术，实现利用牛的乳腺细胞生产人体血清白蛋白的操作流程。下列有关叙述错误的是（ ）
A. 细胞①中已含有人体血清白蛋白基因
B. 获取细胞②的技术为核移植
C. 与图示技术相比，试管牛培育过程特有的生物技术是体外受精
D. 早期胚胎发育到囊胚期时，需要取其内细胞团做DNA分析，进行性别鉴定
【答案】D
【解析】
结合题意和图解信息，细胞①是供核细胞，应含有所需的目的基因——人体血清白蛋白基因，A正确；图中细胞②为通过核移植技术得到的重组细胞，B正确；图示技术不涉及体外受精过程，而试管牛培育过程需要有体外受精，C正确；早期胚胎发育到囊胚期时，需要取其滋养层细胞做DNA分析，进行性别鉴定，D错误。
47.下列关于培育良种“试管动物”的叙述，正确的是( )
A. 从附睾中取出的是已获能的成熟精子
B. 采集卵母细胞前必须对良种母畜进行配种
C. 供体包括提供配子且遗传性状优良的雌性和雄性个体
D. 将早期胚胎移植到代孕母畜中，经发育可获得表现型与受体相同的后代
【答案】C
【解析】
【分析】
卵母细胞的采集和培养
（1）主要方法是：用促性腺激素处理，使其超数排卵，然后，从输卵管中冲取卵子，直接与获能的精子体外受精。
（2）第二种方法：从已屠宰母畜的卵巢中采集卵母细胞或直接从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞，叫活体采卵。这种方法采集的卵母细胞都要在体外经人工培养成熟后，才能与获能的精子受精。
【详解】精子在雌性生殖道获能，A错误。采集卵母细胞前必须对良种母畜进行超数排卵处理，B错误。遗传性状优良的雌性和雄性个体提供的精子和卵细胞在体外受精形成受精卵，体外发育为早期胚胎， C正确。代孕母畜提供胚胎发育场所子宫，不提供遗传物质，胚胎遗传物质取决于供体，D错误。故选C。
48. 下列有关哺乳动物胚胎发育和胚胎工程的叙述，不正确的是( )
A. 内细胞团细胞分裂、分化成各种组织和器官，滋养层细胞发育成胎膜和胎盘
B. 移植用的胚胎一般取发育到桑椹胚或囊胚时期的，不同生物移植时期是相同的
C. 胚胎分割移植时要注意将内细胞团均等分割
D. 卵裂期的胚胎中细胞数目不断增加，但胚胎的总体积并不增加或略有缩小
【答案】B
【解析】
试题分析：内细胞团细胞具有全能性，能分裂、分化成各种组织和器官，滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘，故A正确；移植用的胚胎一般取发育到桑椹胚或囊胚时期的，不同生物移植时期是不相同的，故B错；胚胎分割移植时要注意将内细胞团均等分割，否则会影响分割后胚胎的进一步发育，故C正确；卵裂期细胞进行有丝分裂，细胞数目不断增加，但胚胎的总体积并不增加或略有缩小，故D正确。
考点：本题主要考查胚胎工程，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。
49. 培育“试管山羊”的基本过程如下图所示。若要培育成功，下列叙述正确的是
A. 甲过程中可通过给母山羊注射有关激素使用其超数排卵
B. 乙过程的目的之，是促进卵母细胞和精子的成熟
C. 丙过程与乙过程中应采用相同成分的培养液
D. 丁过程中早期胚胎须移植到与供体性状相同的代孕母羊子宫内
【答案】A
【解析】
甲过程中可通过给母山羊注射促性腺激素使其超数排卵，A正确；丁过程胚胎最佳时期是桑椹胚或者囊胚，B错误；丙是早期胚胎发育过程，在发育培养液中完成，而乙是受精作用过程，在获能溶液或专门的受精溶液中完成，C错误；胚胎移植时要保证受体和供体的生理状态相同，而不是性状相同，D错误。
【考点定位】胚胎工程的相关知识
【名师点睛】特别提醒：
(1)试管动物生殖实质是正常的有性生殖，只不过受精、早期胚胎发育是在试管中(体外)进行。
(2)克隆动物生殖的实质是无性生殖，依赖动物细胞核(高度分化的体细胞的细胞核)具有全能性；特有的操作程序是核移植。
50.如图是胚胎干细胞分离途径示意图。下列说法正确的是( )
A. 图中a所示细胞将来能够发育成胎膜和胎盘
B. 胚胎干细胞的体积和细胞核都较小
C. 胚胎干细胞可以增殖而不发生分化
D. 利用胚胎干细胞培育的人造器官正在大规模应用
【答案】C
【解析】
【分析】
1、哺乳动物的胚胎干细胞简称ES或EK细胞，来源于早期胚胎或从原始性腺中分离出来。
2、具有胚胎细胞的特性，在形态上表现为体积小，细胞核大，核仁明显；在功能上，具有发育的全能性，可分化为成年动物体内任何一种组织细胞。另外，在体外培养的条件下，可以增殖而不发生分化，可进行冷冻保存，也可进行遗传改造。
3、胚胎干细胞可用于治疗人类的某些顽症，如帕金森综合症。还可培育出人造器官，解决目前临床上存在的供体器官不足和器官移植后免疫排斥的问题
【详解】图中A所示细胞为内细胞团细胞，将来能够发育成胎儿的各种组织，A错误； 胚胎干细胞的体积小，细胞核大，B错误； 在体外培养的条件下，胚胎干细胞可以增殖而不发生分化，C正确； 利用胚胎干细胞培育的人造器官，还正在临床试验阶段，D错误。 故选C。
【点睛】本题主要考查学生对知识的记忆和理解能力．胚胎干细胞克隆出的组织或器官，使得血细胞、脑细胞、骨骼和内脏器官都可以更换，这将给白血病、心脏病和癌在患者带来新的希望。治疗性克隆和克隆人是有严格区别的，若把胚胎干细胞形成的胚胎移植至人的子宫内继续发育，那就是克隆人。
51.胚胎分割是一种现代生物技术，下列关于这一技术的叙述，正确的是( )
A. 可以将早期胚胎任意分割成多份 B. 可以分割任意时期的胚胎
C. 可以获得同卵双胎或多胎 D. 属于有性生殖方式，不属于克隆
【答案】C
【解析】
【分析】
有关胚胎分割技术需要考生注意的知识点有：
1、胚胎分割--是指采用机械方法将早期胚胎切割成2等分、4等分或8等分等，经移植获得同卵双胚或多胚的技术。
2、特点：来自同一胚胎的后代具有相同的遗传物质，胚胎分割可以看做动物无性繁殖或克隆的方法之一。
3、主要仪器设备：实体显微镜和显微操作仪。
4、进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚。对囊胚阶段的胚胎进行分割时要注意将内细胞团均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。
5、存在问题：胚胎分割的分数越多，操作的难度越大，移植的成功率也越低。
【详解】胚胎分割是指采用机械方法将早期胚胎切割成2等分、4等分或8等分，而不是将早期胚胎任意分割成多份，A错误； 进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚，B错误；胚胎分割可以获得同卵双胎或多胎，C正确；来自同一胚胎的后代具有相同的遗传物质，所以胚胎分割可以看作动物无性繁殖或克隆的方法之一，D错误。故选C。
【点睛】本题知识点简单，考查胚胎分割的相关知识，要求考生识记胚胎分割的概念、操作仪器、操作对象及注意事项，能结合所学的知识准确判断各选项，属于考纲识记层次的考查。
52. 下列关于哺乳动物胚胎发育和胚胎工程的叙述，错误的是 （ ）
A. 移植胚胎的遗传特性在孕育过程中不受受体的影响
B. 胚胎干细胞具有体积大、细胞核小、核仁明显等特点
C. 体外受精时采集的精子需放入培养液中培养以达到获能状态
D. 胚胎分割是将早期胚胎切割成几等分，最终产生同卵多仔后代的技术
【答案】B
【解析】
移植胚胎的遗传特性在孕育过程中不受受体的影响，A正确；胚胎干细胞具有细胞体积小、细胞核大、核仁明显等特点，B错误；体外受精时采集的精子需放入培养液中培养以达到获能状态，C正确；胚胎分割是将早期胚胎切割成几等分，最终产生同卵多仔后代的技术，D正确。
53. 通过胚胎移植技术，可以实现良种牛的快速繁殖。下列相关叙述正确的是
A. 对供体和受体母牛都要进行相同激素处理
B. 受精和胚胎的早期培养都需要在体外进行
C. 对冲卵获得的原肠胚检查合格后方可移植
D. 胚胎分割移植实现同狼多胎的成功率较低
【答案】D
【解析】
胚胎移植对供体受体要求同期发情，胚胎移植一般是桑葚胚阶段或囊胚阶段，或更早时期，答案D。
考点定位：胚胎移植相关知识。
54. 下列关于生态工程的叙述中，错误的是( )
A. 它是无消耗、多效益的工程 B. 追求经济与生态的双赢
C. 实现了废物资源化的良性循环 D. 实现了能量的多级利用
【答案】A
【解析】
生态工程也需要消耗环境资源,所以A错。
55. 我国在西部地区实行退耕还林还草工程，这一工程属于( )
A. 农村综合发展型生态工程 B. 小流域综合治理生态工程
C. 大区域生态系统恢复工程 D. 湿地生态恢复工程
【答案】C
【解析】
退耕还林还草工程属于大区域生态系统恢复工程。
56.下列关于转基因生物与环境安全的叙述，错误的是 ( )
A. 重组的微生物在降解污染物的过程中可能产生二次污染
B. 种植抗虫棉可以减少农药的使用量，对环境没有任何负面影响
C. 如果转基因花粉中有毒蛋白或过敏蛋白，可能会通过食物链传递到人体内
D. 转基因生物可能会使某些地区的生态系统的稳定性遭到破坏
【答案】B
【解析】
【分析】
转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应、过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）。抗虫棉的种植，减少了农药的使用，有利于保护农田的土壤环境；但是抗虫棉不抗蚜虫、盲椿象、红蜘蛛等害虫，导致这些害虫大面积的爆发，破坏了自然界的生态平衡，对环境造成了负面影响；另外棉铃虫对抗性频率越来越大。重组的微生物在降解污染物的过程中可能产生一些中间产物，产生二次污染。
【详解】重组的微生物在降解污染物的过程中可能产生二次污染，A正确； 种植抗虫棉可以减少农药的使用量，对生态环境可能有负面影响，B错误； 如果转基因花粉中有毒蛋白或过敏蛋白，可能会通过食物链传递到人体内，C正确；转基因生物打破了自然物种原有的界限，改变了生态系统中的能量流动和物质循环，有可能使生态系统的稳定性遭到破坏，D正确。故选B。
57.下列有关生物技术安全性和伦理问题的观点，不合理的是（ ）
A. 对于转基因技术，我们应该趋利避害，理性看待
B. 我国禁止生殖性克隆和治疗性克隆
C. 我国不发展、不生产、不储存生物武器，并反对其扩散
D. 对于基因检测应该保护个人遗传信息隐私权
【答案】B
【解析】
对于转基因技术，我们应该趋利避害，理性看待，A正确；我国禁止生殖性克隆，不反对治疗性克隆，B错误；不发展、不生产、不储存生物武器，并反对其扩散，C正确；应用基因检测技术应该保护个人遗传信息隐私权，D正确。
58.下列哪项是对待生物技术的理性态度( )
A. 转基因技术是按照人们的意愿对生物进行设计，不存在负面影响
B. 转基因农作物对于解决粮食、能源等问题起了积极作用，也存在一定风险
C. 克隆技术如果被一些人利用将给社会造成灾难，应禁止任何克隆研究
D. 转基因技术如果被恐怖分子利用将可能导致人类灭绝，应停止转基因研究
【答案】B
【解析】
【分析】
转基因生物的安全性问题包括：
（1）食物安全：滞后效应、出现过敏源、食物的营养成分改变等。
（2）生物安全：基因扩散导致对生物多样性的威胁。
（3）环境安全：对生态系统稳定性及环境的影响。
【详解】转基因技术存在负面影响，A错误； 转基因农作物对于解决粮食、能源等问题起了积极作用，同时也存在一定风险，B正确； 克隆技术中治疗性克隆可用于治疗白血病等，C错误； 转基因技术有其优点和缺点，应正确判断，不能因噎废食，D错误。故选B。
【点睛】本题考查转基因生物的安全性问题，意在考查学生对转基因生物安全性问题的识记与理解，了解人们在食物安全、生物安全和环境安全三个方面进行的争论，再结合所学的知识作答即可，比较基础。
59. 下图是一个农业生态系统模式图，关于该系统的叙述，错误的是
A. 微生物也能利用农作物通过光合作用储存的能量
B. 沼气池中的微生物也是该生态系统的分解者
C. 沼渣、沼液作为肥料还田，使能量能够循环利用
D. 多途径利用农作物可提高该系统的能量利用率
【答案】C
【解析】
沼气池中的微生物能够利用农作物秸秆中有机物存储的能量，说明微生物也能利用农作物通过光合作用储存的能量，A项正确；沼气池中的微生物如产甲烷杆菌能将人畜粪便、农作物秸秆中的有机物分解产生甲烷（沼气的成分之一），此时的微生物属于该生态系统的分解者，B项正确；沼渣、沼液作为肥料还田，可提高土壤有机质含量和提高土壤肥力或供肥能力，但能量只能单向流动，逐级递减，而不能循环利用，C项错误；农作物为人类提供食物，为家畜提供饲料，产生的秸秆可以用来生产沼气，这种多途径利用农作物的方式，大大提高了生态系统中的能量利用效率，D项正确。
【考点定位】生态系统中的物质循环和能量流动的基本规律及其应用
60. 矿山废弃地生态修复工程的关键是（ ）
A. 优先选择农作物以提高经济效益
B. 选择合适的养殖动物以增加物种多样性
C. 植被恢复和土壤微生物群落的重建
D. 尽可能依靠自然演替恢复其生态功能
【答案】C
【解析】
矿区废弃地的生态恢复工程，应采用的措施包括人工制作表土、多层覆盖、特殊隔离、土壤侵蚀控制、植被恢复工程等。
二、简答题
61.利用现代生物技术，科研人员对马铃薯的培育进行了研究，请回答相关问题：
(1)培育马铃薯脱毒苗所依据原理的物质基础是_________________________________，培育过程涉及__________和________两个阶段。
(2)研究马铃薯茎尖外植体大小对幼苗的成苗率和脱毒率的影响，结果如图。据图可知：茎尖越小，脱毒率________，成苗率________，培养脱毒苗茎尖的适宜大小为________。
(3)若想培育出“番茄－马铃薯”植株，运用传统有性杂交能否得到可育的杂种植株？为什么？____________________________________________________________________。
(4)若马铃薯细胞中含m条染色体，番茄细胞中有n条染色体，则“番茄－马铃薯”细胞在有丝分裂后期含__________条染色体。
【答案】 (1). 体细胞中具有马铃薯生长发育所需的全部遗传物质 (2). 脱分化 (3). 再分化 (4). 越高 (5). 越低 (6). 0.27 mm (7). 否(或不能)，不同种的植物存在生殖隔离 (8). 2(m＋n)
【解析】
【分析】
植物的组织培养是根据植物细胞具有全能性这个理论，植物的组织培养广义又叫离体培养，指从植物体分离出符合需要的组织、器官或细胞，原生质体等，通过无菌操作，在无菌条件下接种在含有各种营养物质及植物激素的培养基上进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。
植物组织培养过程中需经过脱分化、再分化两个过程，培养条件也在随着培养过程的进行而发生变化，如再分化出根芽后要给予适宜的光照。
【详解】（1）培育马铃薯脱毒苗是对植物组织培养技术的应用，所依据的原理是植物细胞全能性，即体细胞中具有马铃薯生长发育的全套遗传物质；该培育过程涉及脱分化和再分化两个阶段。
（2）据图可知：茎尖越小，脱毒率越高，成苗率越低；培养脱毒苗茎尖的适宜大小为O.27mm。
（3）由于番茄和马铃薯属于两个不同物种，而不同种的植物存在生殖隔离，所以若想培育出“番茄-马铃薯”植株，运用传统有性杂交不能得到可育的杂种植株。
（4）若马铃薯细胞中含m条染色体，番茄细胞内有n条染色体，则“番茄-马铃薯”细胞中含有（m+n）条染色体，在有丝分裂后期含2（m+n）条染色体。
【点睛】本题主要考查植物组织培养技术的应用、植物体细胞杂交、细胞分裂等的相关知识，把握知识点的内在联系是解题的关键。考生可回忆相关知识点，然后结合题干信息解答问题。
62.抗人T淋巴细胞CD3抗原单克隆抗体主要用于治疗和预防肾脏等器官移植病人的急性排斥反应。如图是该抗体的研发和生产流程。请回答：
(1)图中甲是______细胞，乙是_____细胞。
(2)①过程需要加入________诱导细胞融合，之后需用特定的选择性培养基进行第一次筛选，目的是除去其他细胞，保留_____细胞。经上述筛选获得的细胞产生的抗体还不是单克隆抗体，这是因为____________________________________________________。经克隆化培养后，利用抗体能与_____分子特异性结合的原理，再次筛选得到能分泌所需抗体的细胞。
(3)②表示将丁细胞注射到小鼠____内，之后从相应液体中提取该单克隆抗体。该单克隆抗体能够治疗和预防器官移植时的排斥反应，这____(填“能”或“不能”)证明免疫排斥主要是细胞免疫引起的。
【答案】 (1). 人T淋巴(“人”和“T淋巴”) (2). B淋巴 (3). 聚乙二醇(PEG或灭活的病毒) (4). 杂交瘤 (5). 从小鼠脾脏内提取的B淋巴细胞不止一种(杂交瘤细胞不止一种) (6). CD3 (7). 腹腔 (8). 不能
【解析】
【分析】
1、单克隆抗体的制备：
（1）制备产生特异性抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原，然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞。
（2）获得杂交瘤细胞：
①将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中形成的B淋巴细胞融合；
②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体。
（3）克隆化培养和抗体检测；
（4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖；
（5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。
2、题图为制备单克隆抗体的过程：甲是人T淋巴细胞，乙是B淋巴细胞，①过程为细胞融合，②体内培养。
【详解】（1）注射的抗原是人T淋巴细胞，从小鼠体内提取的是B淋巴细胞。
（2）动物细胞融合的诱导物是聚乙二醇或灭活的病毒，之后需用特定的选择性培养基进行第一次筛选，目的是保留杂交瘤细胞。经上述筛选获得的细胞产生的抗体还不是单克隆抗体，这是因为从小鼠脾脏内提取的B淋巴细胞不止一种。需经克隆化培养后，利用该抗体能和CD3分子特异性结合的原理，再次筛选得到能分泌所需抗体的细胞。
（3）②表示将丁细胞注射到小鼠腹腔内。该单克隆抗体能够治疗和预防器官移植时的排斥反应，不能证明免疫排斥主要是细胞免疫所引起的。
【点睛】本题结合流程图，考查单克隆抗体的制备过程及应用，意在考查考生的识图能力和识记能力；制备单克隆抗体过程需要经过两次筛选，获取能大量增殖并能产生专一抗体的杂交瘤细胞，可以体内和体外提取单克隆抗体。
63.重组人纤溶酶原激活剂(rhPA)是临床血栓疾病治疗的主要生物药品。家兔具有多胎、妊娠期短、繁殖快、全年多发情，产仔率高等优点，可以作为乳腺生物反应器批量生产药物。下图是利用转基因兔生产重组人纤溶酶原激活剂(rhPA)的过程，请据图回答。
(1)构建rhPA基因表达载体需要用限制酶______切割质粒和目的基因，为获得乳腺特异性表达载体需用__________________酶切割重组质粒使之线性化。
(2)对母兔注射__________使其超数排卵，并与正常公兔配种。将乳腺特异性表达载体导入家兔受精卵中最有效的导入技术是_____________。
(3)将受精卵置于37 ℃的95%空气和5%CO2的气体环境中培养一段时间后移植到代孕兔的输卵管中，代孕兔需经_______________处理。
(4)子代兔需要经过筛选过程才能获得生产人纤溶酶原激活剂的生物反应器，原因有：____________________________________、________________________________________。
【答案】 (1). XhoⅠ (2). Sal Ⅰ和NotⅠ (3). 促性腺激素 (4). 显微注射技术 (5). 同期发情(发情/孕激素) (6). 只有部分子代兔导入了人纤溶酶原激活剂基因 (7). 公兔不能表达人纤溶酶原激活剂基因
【解析】
【分析】
动物乳腺生物反应器是基于转基因技术平台，使外源基因导入动物基因组中并定位表达于动物乳腺，利用动物乳腺天然、高效合成并分泌蛋白的能力，在动物的乳汁中生产一些具有重要价值产品的转基因动物的总称。
乳腺生物反应器是最理想的生物反应器，它的优点：（1）药物蛋白只在乳腺内，对动物的生理活动不影响。（2）长期收集也不会对动物造成伤害。（3）产品成本低。（4）无论纯化还是使用都很方便。
【详解】（1）据图分析可知，构建rhPA基因表达载体需要用限制酶XhoⅠ切割质粒和目的基因，为获得乳腺特异性表达载体需用SalⅠ和NotⅠ酶切割重组质粒使之线性化。
（2）对母兔注射促性腺激素使其超速排卵，并与正常公兔配种。将乳腺特异性表达载体导人家兔受精卵中最有效的导人技术是显微注射技术。
（3）将受精卵置于37℃的95%空气和5%CO2气体环境中培养一段时间后移植到代孕兔的输卵管中，代孕兔需经同期发情（孕激素）处理。
（4）只有部分子代兔导入了人组织纤溶酶原激活剂基因、公兔不能表达人组织纤溶酶原激活剂，故子代兔需要经过筛选过程才能获得生产人组织纤溶酶原激活剂的生物反应器。
【点睛】本题考查基因工程、细胞工程、胚胎工程的知识点，要求学生掌握基因工程的操作工具和步骤以及应用，掌握动物细胞的培养条件和体外受精的过程以及胚胎移植的操作。
64.下图是江苏某农村因地制宜建设的生态农业园示意图。请回答。
（1）该生态农业园建设依据的主要生态工程原理有______________________________（至少答出2个）。在“沼气发酵池→采摘园”过程中发生着__________（选填“仅物质”仅能量”或“物质和能量”）的传递。
（2）池塘养鱼时，通常采用多鱼种混合放养模式，主要体现群落的__________（选填“水平” 或“垂直”）结构在实践中的应用，这种养殖模式的优点是____________________。
（3）流入该生态系统的总能量是____________________。该生态农 业园增加了“蝇蛆养殖、食用菌种植”等项目，其意义是______________________________。
（4）请根据图示绘制出碳元素流经鸡鸭的过程图:______________________________。
【答案】 (1). 物质循环再生原理、物种多样性原理、协调与平衡原理等 (2). 仅物质 (3). 垂直 (4). 能充分利用生态系统的空间和食物资源 (5). 生产者固定的太阳能和人工输入的能量 (6). 实现了生态系统物质和能量的多级利用，减少了环境污染 (7).
【解析】
【试题分析】
本题考查生态工程、群落、生态系统的能量流动和物质循环的相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，能从题图中提取有效信息并结合这些信息，运用所学知识与观点，通过比较、分析与综合等方法对各小题进行解答。
（1）该生态农业园建设依据的主要生态工程原理有物质循环再生原理、物种多样性原理、协调与平衡原理等；沼气发酵池中有大量微生物，能将有机物分解成无机盐，采摘园里的植物只能利用沼液中的无机物，因此，在“沼气发酵池→采摘园”过程中发生着仅物质的传递。
（2）池塘养鱼时，通常采用多鱼种混合放养模式（如上层为食浮游生物的鳙鱼，中层为食草的草鱼，下层为杂食性的鲫鱼等），主要体现群落的群落的垂直结构在实践中的应用；这种养殖模式的优点是能充分利用生态系统的空间和食物资源，缓解生物间的竞争。
（3）流入该生态系统的总能量是生产者固定的太阳能和人工输入的能量。该生态农业园增加了“蝇蛆养殖、食用菌种植”等项目，其意义是实现了生态系统物质和能量的多级利用，减少了环境污染。
（4）根据图示可知，稻、麦和蔬菜等中的有机碳经鸡鸭的消化吸收。被同化为鸡鸭体内的有机碳，这些有机碳中有一部分通过自身的呼吸作用以CO2形式释放到环境中，一部分有机碳直接流向蝇蛆（分解者），还有一部分有机碳输出该生态系统，被人类利用。具体图解详见答案。
高二下学期期中考试试题
一、选择题
1.下表关于基因工程中有关基因操作的名词及对应的内容，正确的组合是( )
选项
供体
剪刀
针线
载体
受体
A
质粒
限制性核酸内切酶
DNA连接酶
提供目的基因的生物
大肠杆菌等
B
提供目的基因的生物
DNA连接酶
限制性核酸内切酶
质粒
大肠杆菌等
C
提供目的基因的生物
限制性核酸内切酶
DNA连接酶
质粒
大肠杆菌等
D
大肠杆菌等
DNA连接酶
限制性核酸内切酶
提供目的基因的生物
质粒
A. A B. B C. C D. D
【答案】C
【解析】
【分析】
1、基因工程又叫DNA重组技术，是指按照人们的意愿，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品 。
2、基因工程的工具：
（1）限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。
（2）DNA连接酶：连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键。
（3）运载体：常用的运载体：质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒。
【详解】供体是指提供目的基因的生物；限制酶能切割DNA分子，是基因的剪刀；DNA连接酶能将DNA片段连接起来，是基因的针线；运载体包括质粒、噬菌体或动植物病毒；基因工程的受体可以是动物细胞、植物细胞或微生物细胞，但常以大肠杆菌等微生物细胞作为受体。综上所述，C正确，ABD错误。故选C。
2.利用基因工程技术生产羧酸酯酶(CarE)制剂的流程如图所示，下列叙述正确的是( )
A. 过程①需使用转录酶
B. 过程②需使用解旋酶和PCR获取目的基因
C. 过程③使用的感受态细胞可用NaCl溶液制备
D. 过程④可利用DNA分子杂交鉴定目的基因是否已导入受体细胞
【答案】D
【解析】
【分析】
据图分析，图中过程①表示利用mRNA通过反转录法合成相应的DNA；过程②表示利用PCR技术对目的基因进行扩增；过程③表示将目的基因导入受体细胞；过程④表示通过筛选获得工程菌。
【详解】过程①表示利用mRNA通过反转录法合成目的基因，需要逆转录酶的催化，A错误；过程②表示利用PCR技术对目的基因进行扩增，该过程中不需要利用解旋酶，解旋是通过高温解链实现的，B错误；将目的基因导入微生物细胞时采用感受态转化法，因此过程③使用的感受态细胞可用的CaCl2溶液制备，C错误；过程④可利用DNA分子杂交鉴定目的基因是否已导入受体细胞，D正确。
【点睛】解答本题的关键是识记基因工程的操作步骤，通过操作步骤确定图中各标号表示的生理过程，明确PCR技术中不需要解旋酶，并掌握将目的基因导入微生物的方法。
3. 下列四条DNA片段，可能是由同一种限制酶切割而成的是 ( )
A. ①② B. ②③ C. ③④ D. ②④
【答案】D
【解析】
试题分析：因限制酶具有特异性，所以同一种限制酶切割而形成的黏性末端相同或互补，故D正确
考点：本题考查基因工程的限制酶切割出黏性末端的特点，意在考查考生对限制酶所切割的黏性末端的特点的理解和认识。
4.下列关于DNA连接酶的作用的叙述，正确的是( )
A. 将单个核苷酸加到某DNA片段末端，形成磷酸二酯键
B. 将断开的两个DNA片段的骨架连接起来，重新形成磷酸二酯键
C. 连接两条DNA链上碱基之间的氢键
D. 只能将双链DNA片段互补的黏性末端连接起来
【答案】B
【解析】
【分析】
有关DNA连接酶，考生可以从以下几方面把握：
（1）根据酶的来源不同分为两类： E．coliDNA连接酶、T4DNA连接酶．这二者都能连接黏性末端，此外T4DNA连接酶还可以连接平末端，但连接平末端时的效率比较低。
（2）DNA连接酶连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键。
（3）DNA连接酶和DNA聚合酶的区别：（需理解）
①DNA连接酶是在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键，而DNA聚合酶只能将单个脱氧核苷酸加到已有的核苷酸片段上，形成磷酸二酯键；
②DNA连接酶是同时连接双链的切口，而DNA聚合酶只是在单链上将一个个脱氧核苷酸连接起来；
③DNA连接酶不需要模板，而DNA聚合酶需要模板。
【详解】DNA连接酶能连接两个DNA片段，而不是将单个核苷酸连接到已有的DNA链上，A错误； 将断开的两个DNA片段的骨架连接起来，重新形成磷酸二酯键，B正确；两个DNA链中的氢键的形成不需要酶的作用，C错误；DNA连接酶包括E·coliDNA连接酶和T4DNA连接酶，其中T4DNA连接酶既能连接黏性末端，也能连接平末端，只不过连接平末端的效率较低，D错误。故选B。
5.下列哪项不是基因工程中经常使用的载体( )
A. 细菌质粒 B. λ噬菌体的衍生物
C. 动植物病毒 D. 细菌拟核区的DNA
【答案】D
【解析】
【分析】
1、常用的运载体：质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒。（质粒是一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。）
2、作为运载体必须具备的条件：①要具有限制酶的切割位点； ②要有标记基因（如抗性基因），以便于重组后重组子的筛选③能在宿主细胞中稳定存在并复制；④是安全的，对受体细胞无害，而且要易从供体细胞分离出来。
【详解】常用的运载体：质粒、λ噬菌体的衍生物、动植物病毒；质粒是一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。综上所述，ABC不符合题意，D符合题意。故选D。
【点睛】本题考查基因工程的相关知识，重点考查基因工程的操作工具，尤其是运载体，要求考生识记常用的运载体，掌握作为运载体必须具备的条件，能根据题干要求作出准确判断。
6.甲、乙两图表示从细菌细胞中获取目的基因的两种方法，以下说法错误的是（ ）
A. 甲方法可建立该细菌的基因组文库 B. 乙方法可建立该细菌的cDNA文库
C. 甲方法要以脱氧核苷酸为原料 D. 乙方法需要逆转录酶参与
【答案】C
【解析】
甲方法不需要以脱氧核苷酸为原料。
7.蓝藻拟核DNA上有控制叶绿素合成的chlL基因。某科学家通过构建该种生物缺失chlL基因的变异株细胞，以研究chlL基因对叶绿素合成的控制，技术路线如下图所示，下列相关叙述错误的是( )
A. ①②过程应使用不同的限制酶
B. ①②过程都要使用DNA连接酶
C. 终止密码子是基因表达载体的重要组成部分
D. 若操作成功，可用含红霉素的培养基筛选出该变异株
【答案】C
【解析】
【分析】
分析题图：图示为变异株的培育过程。①是chIL基因与质粒重组形成质粒1的过程；②是红霉素抗性基因和质粒1重组形成质粒2的过程；③是将重组质粒2导入有chIL基因的蓝藻细胞，并同源替换chIL基因，最终获得无chIL基因的蓝细菌。
【详解】①②过程切割的位点不同，应该使用不同的限制性核酸内切酶，A正确； ①②过程都是形成重组质粒的过程，因此都要使用限制酶和DNA连接酶，B正确； 终止子是基因表达载体的重要组成部分，终止密码子在mRNA上，不在基因上，C错误； ②过程插入了红霉素抗性基因，可作为标记基因，若操作成功，可用含红霉素的培养基筛选出该变异株，D正确。 故选C。
【点睛】本题以蓝细菌为素材，结合变异株的培育过程图，考查基因工程的原理及技术，要求考生识记基因工程的原理、工具及操作步骤。
8.多聚酶链式反应(PCR技术)是体外酶促反应合成特异DNA片段的一种方法，由高温变性、低温退火及适温延伸等几步反应组成一个周期，循环进行，使目的DNA得以迅速扩增，其简要过程如图所示。下列关于PCR技术叙述不正确的是( )
A. PCR技术是在实验室中以少量DNA制备大量DNA的技术
B. 反应中新合成的DNA又可以作为下一轮反应的模板
C. PCR技术中以核糖核苷酸为原料，以指数方式扩增
D. 应用PCR技术与探针杂交技术可以检测基因突变
【答案】C
【解析】
本题考查PCR的相关内容。由于PCR技术就是体外大量扩增DNA的技术，即以少量DNA制备大量DNA的技术，原理是DNA复制，所以所需原料是脱氧核苷酸，并以指数方式扩增。应用PCR技术与探针杂交技术可以检测基因突变。故选C
9.如图为基因表达载体的模式图，若结构X是表达载体所必需的，则X最可能是( )
A. 氨苄青霉素抗性基因 B. 启动子
C. 限制酶 D. DNA连接酶
【答案】B
【解析】
【分析】
基因表达载体的构建：
1、过程：用同一种限制酶切割目的基因和运载体，再用DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成重组DNA分子。
2、目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在并且可以遗传给下一代并表达和发挥作用。
3、基因表达载体的组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因
（1）启动子在基因的首段，它是RNA聚合酶的结合位点，能控制着转录的开始；
（2）终止子在基因的尾端，它控制着转录的结束；
（3）标记基因便于目的基因的鉴定和筛选。
【详解】基因表达载体由启动子、终止子、标记基因和目的基因组成。图中有终止子、标记基因（抗生素基因）、目的基因（插入的基因）、复制原点等，还缺少启动子，所以X最可能是启动子。故选B。
10.基因工程的操作步骤：①使目的基因与运载体相结合；②将目的基因导入受体细胞；③检测目的基因的表达是否符合特定性状要求；④提取目的基因。正确的操作顺序是
A. ③②④① B. ②④①③
C. ④①②③ D. ③④①②
【答案】C
【解析】
基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤：提取目的基因、目的基因与运载体的结合、目的基因导入受体细胞、目的基因的检测和表达，故选C。
11.基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选。已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—。根据下图示判断下列操作正确的是( )
A. 目的基因和质粒均用限制酶Ⅱ切割
B. 质粒用限制酶Ⅱ切割，目的基因用限制酶Ⅰ切割
C. 目的基因和质粒均用限制酶Ⅰ切割
D. 质粒用限制酶Ⅰ切割，目的基因用限制酶Ⅱ切割
【答案】D
【解析】
限制酶Ⅰ的识别序列和切点是-G↓GATCC-，限制酶II的识别序列和切点是-↓GATC-，可知限制酶Ⅱ能够识别和切割限制酶Ⅰ切割后的黏性末端。据题图可知，目的基因两端分别是限制酶Ⅰ的识别序列和切点（是-G↓GATCC-）和限制酶Ⅱ的识别序列和切点（是-↓GATC-），只有用限制酶Ⅱ才能同时将目的基因切割下来；质粒有GeneⅠ和GeneⅡ表示两种标记基因，分别有限制酶Ⅱ的识别序列和限制酶Ⅰ的识别序列，如果用限制酶Ⅱ切割，则GeneⅠ 和GeneⅡ都被破坏，造成重组质粒无标记基因；用限制酶Ⅰ切割，则破坏GeneⅡ，保留GeneⅠ，其黏性末端和切割目的基因所在DNA的黏性末端相同，可以连接形成重组DNA，故选D。
12. 下列关于目的基因导入受体细胞的描述不正确的是
A. 基因枪法导入植物体细胞的方法比较经济有效
B. 显微注射技术是转基因动物中采用最多的方法
C. 大肠杆菌最常用的转化方法是：使细胞的生理状态发生改变
D. 农杆菌转化法是将目的基因导入植物细胞最常用的方法
【答案】A
【解析】
试题分析：采用花粉管通道法将目的基因导入植物体细胞的方法比较经济有效，故A错误；将目的基因导入受体细胞最有效的方法是显微注射法，故B正确；受体细胞是微生物时，采用钙离子处理，使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态（感受态），故C正确；将目的基因导入植物细胞最常用的方法是农杆菌转化法，故D正确。
考点：本题主要考查将目的基因导入受体细胞的方法，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。
13.将目的基因导入玉米茎尖分生区细胞和小鼠受精卵，应分别采用的方法是( )
A. 显微注射技术 农杆菌转化法 B. 基因枪法 花粉管通道法
C. 花粉管通道法 显微注射技术 D. 基因枪法 显微注射技术
【答案】D
【解析】
【分析】
将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。
（1）将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；
（2）将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；
（3）将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。
【详解】玉米是单子叶植物，基因枪法是将目的基因导入单子叶植物细胞最常用的方法；显微注射法是将目的基因导入动物细胞最常用的方法。因此，将目的基因导入玉米茎尖分生区细胞和小鼠受精卵，应分别采用的方法是基因枪法和显微注射法。故选D。
14. 我国转基因抗虫棉是在棉花细胞中转入Bt毒蛋白基因培育出来的，它对棉铃虫具有较强的抗性。下列叙述错误的是( )
A. Bt毒蛋白基因是从苏云金芽孢杆菌中分离的
B. Bt毒蛋白基因可借助花粉管通道进入棉花细胞中
C. 培育的转基因棉花植株需要做抗虫的接种实验
D. 用DNA聚合酶连接经切割的Bt毒蛋白基因和载体
【答案】D
【解析】
试题分析：目的基因和载体需要用同一种限制性内切酶切割，露出相同的黏性末端两者才能连接在一起，而DNA聚合酶只能用于DNA的自我复制，它们两者的功能时不同的。转基因抗虫棉是我国科学家的研究成果，是将苏云金芽孢杆菌中Bt毒蛋白基因分离出来，然后借助花粉管通道进入棉花细胞中，最后用抗虫的接种实验来进行检测。
考点：转基因抗虫棉
点评：本题考查了转基因抗虫棉的相关知识和基因工程的工具，属于对识记层次的考查。
15.下面是四种不同质粒的示意图，其中ori为复制必需的序列，amp为氨苄青霉素抗性基因，tet为四环素抗性基因，箭头表示同一种限制酶的酶切位点。下列有关叙述正确的是( )
A. 基因amp和tet是一对等位基因，常作为基因工程中的标记基因
B. 质粒指细菌细胞中能自我复制的小型环状的DNA和动植物病毒的DNA
C. 限制酶的作用部位是DNA分子中特定的两个核苷酸之间的氢键
D. 用质粒4将目的基因导入大肠杆菌，该菌不能在含四环素的培养基上生长
【答案】D
【解析】
【分析】
分析题图：图示质粒都含有氨苄青霉素抗性基因和四环素抗性基因，其中1中复制原点被破坏，2中复制原点和两种抗性基因都完好，3中氨苄青霉素抗性基因被破坏，4中四环素抗性基因被破坏。
【详解】基因amp和tet在同一个DNA分子上，不是一对等位基因，A错误；质粒指细菌细胞中或酵母菌细胞中能自我复制的小型环状的DNA，动植物病毒的DNA不属于质粒，B错误；限制性内切酶的作用部位是DNA分子中特定的两个核苷酸之间的磷酸二酯键，C错误；重组质粒4中，氨苄青霉素抗性基因完好，四环素抗性基因被破坏，因此用质粒4将目的基因导入大肠杆菌，该菌不能在含四环素的培养基上生长，D正确。故选D。
【点睛】本题结合图解，考查基因工程的原理及技术，重点考查基因工程的运载体，要求考生识记基因工程常用的工具，掌握作为运载体的条件，能结合图中信息准确判断各选项。
16. 利用外源基因在受体细胞中表达，可生产人类所需要的产品。下列各项中能说明目的基因完成了在受体细胞中表达的是
A. 棉花二倍体细胞中检测到细菌的抗虫基因
B. 大肠杆菌中检测到人胰岛素基因及其mRNA
C. 山羊乳腺细胞中检测到人生长激素DNA序列
D. 酵母菌细胞中提取到人干扰素蛋白
【答案】D
【解析】
目的基因完成了在受体细胞中表达，表达的应该是蛋白质，所以只有D。
17. 目前人类利用基因工程的方法成功培育出转基因抗虫棉，以下说法正确的是( )
A. 苏云金芽孢杆菌的毒蛋白基因与质粒结合后直接进入棉花的叶肉细胞表达
B. 抗虫基因导入棉花叶肉细胞后，可通过传粉、受精的方法，使抗虫性状遗传下去
C. 标记基因的作用是鉴别受体细胞中是否含有目的基因
D. 转基因抗虫棉经过种植，棉铃虫不会产生抗性，这样可以有效消灭棉铃虫
【答案】C
【解析】
试题分析：苏云金芽孢杆菌的毒蛋白基因与质粒结合后，需要将重组质粒导入农杆菌中，运用农杆菌转化法将目的基因导致棉花的体细胞中，A错误；如果抗虫基因导入棉花叶肉细胞的细胞质中，产生的花粉粒中不含该基因，如果导入细胞核基因中，该转基因植物相当于杂合子，后代会发生性状分离，B错误；基因表达载体中含有标记基因，标记基因用于重组后重组子的筛选，C正确；由于生物变异是不定向的，因此棉铃虫可能抗性，这种抗性逐渐积累，最终可能导致抗虫棉失去杀虫效果，D错误。
考点：基因工程的应用
18. 下列哪项不是植物基因工程技术的主要应用（ ）
A. 提高农作物的抗逆性 B. 生产某些天然药物
C. 改良农作物的品质 D. 作器官移植的供体
【答案】D
【解析】
试题分析：植物基因工程应用于抗虫、抗病、抗逆转基因植物，利用转基因改良植物的品质。ABC正确；作器官移植的供体是动物基因工程的应有，D错误；答案是D。
考点：本题考查基因工程的相关知识，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。
19.《人类基因治疗》报道，在美国佛罗里达大学基因治疗中心接受基因治疗的三名遗传性失明患者都重新获得了一定的视力，并且没有严重的副作用。基因治疗是指( )
A. 把健康外源基因导入有基因缺陷的细胞中，达到治疗疾病的目的
B. 对有缺陷的细胞进行修复，从而使其恢复正常，达到治疗疾病的目的
C. 运用人工诱变方法，使有基因缺陷的细胞发生基因突变，从而恢复正常
D. 运用基因工程技术，把有缺陷的基因切除，达到治疗疾病的目的
【答案】A
【解析】
【分析】
基因治疗（治疗遗传病最有效的手段）
1．概念：把正常基因导入病人体内有缺陷的细胞中，使该基因的表达产物发挥功能，从而达到治疗疾病的目的。例：将腺苷酸脱氨酶（ADA）基因导入患者的淋巴细胞，治疗复合型免疫缺陷症。
2、种类：体外基因治疗和体内基因治疗（注意两者的区别），其中效果比较可靠的是体外基因治疗。
体外基因治疗：先从病人体内获得某种细胞进行培养，然后再体外完成转移，再筛选成功转移的细胞增植培养，最后重新输入患者体内，如腺苷酸脱氨酶基因的转移。
体内基因治疗：用基因工程的方法直接向人体组织细胞中转移基因的方法。
【详解】基因治疗是把正常基因导入病人体内，使该基因的表达产物发挥功能，以达到治疗疾病的目的，A正确；基因治疗只是把正常基因导入病人体内，并没有对有基因缺陷的细胞进行修复， B错误；基因缺陷指的是某基因缺失，不能通过人工诱变产生正常基因，C错误；基因治疗是把正常基因导入病人体内，达到治疗疾病的目的，并没有切除基因，D错误。 故选A。
20.关于基因工程的应用，下列说法不正确的是( )
A. 干扰素是动物或人体细胞受到病毒侵染时产生的一种糖蛋白
B. 基因治疗是治疗遗传病的最有效手段
C. 体内基因治疗是基因治疗的一种形式
D. 体外基因治疗仅指体外完成基因转移这个环节
【答案】D
【解析】
【分析】
基因治疗是指把正常基因导入病人体内有缺陷的细胞中，使该基因的表达产物发挥功能，从而达到治疗疾病的目的。例：将腺苷酸脱氨酶（ADA）基因导入患者的淋巴细胞，治疗复合型免疫缺陷症。
【详解】干扰素的化学本质是糖蛋白，是动物或人体细胞受到病毒侵染后产生的一种糖蛋白，它几乎能抵抗所有病毒引起的感染，是一种抗病毒的特效药，A正确；基因治疗是治疗遗传病的最有效手段，B正确；基因治疗分为体内基因治疗和体外基因治疗，体内基因治疗是基因治疗的一种形式，C正确；体外基因治疗先从病人体内获得某种细胞进行培养，然后在体外完成转移，再筛选成功转移的细胞扩增培养，最后重新输入患者体内，D错误。故选D。
21.下列有关蛋白质工程和基因工程的叙述错误的是
A. 基因工程是通过基因操作把外源基因转入适当的生物体内，并在其中进行表达，它的产品还是该基因编码的天然存在的蛋白质
B. 蛋白质工程的产品已不再是天然的蛋白质，而是经过改造的，具有了人类所需要的优点的蛋白质
C. 蛋白质工程利用基因工程的手段，按照人类自身的需要，定向地改造天然的蛋白质，甚至于创造全新的蛋白质分子
D. 蛋白质工程是在分子水平上对蛋白质分子直接进行操作，定向改变分子的结构
【答案】D
【解析】
基因工程是通过基因操作把外源基因转入适当的生物体内，并在其中进行表达，它的产品还是该基因编码的天然存在的蛋白质，A正确；蛋白质工程是指以蛋白质的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行基因改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需要，B正确；蛋白质工程利用基因工程的手段，按照人类自身的需要，定向地改造天然的蛋白质，甚至于创造全新的蛋白质分子，C正确；对蛋白质结构的改造是通过改造基因来实现的，所以蛋白质工程是在分子水平对基因直接进行操作，进而改造蛋白质分子，D错误。
22.将富含赖氨酸的蛋白质编码基因导入玉米细胞，可以提高玉米中的赖氨酸含量；更换赖氨酸形成过程中的天冬氨酸激酶和二氢吡啶二羧酸合成酶的个别氨基酸，使两种酶的活性提高，也可以提高玉米中的赖氨酸含量。以上两种技术分别属于( )
A. 基因工程、基因工程 B. 蛋白质工程、蛋白质工程
C. 基因工程、蛋白质工程 D. 蛋白质工程、基因工程
【答案】C
【解析】
【分析】
1、蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。（基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质）
2、蛋白质工程的基本途径：从预期的蛋白质功能出发，设计预期的蛋白质结构，推测应有的氨基酸序列，找到相对应的脱氧核苷酸序列（基因）以上是蛋白质工程特有的途径；以下按照基因工程的一般步骤进行。（注意：目的基因只能用人工合成的方法）
【详解】将富含赖氨酸的蛋白质编码基因导入玉米细胞属于基因工程，富含赖氨酸的蛋白质是自然界中已有的蛋白质，基因工程只是把该蛋白质基因从一种生物转入玉米体内，并使之合成该蛋白质；更换赖氨酸合成过程中的天冬氨酸激酶和二氢吡啶二羧酸合成酶的个别氨基酸，是对自然界中已有的蛋白质进行改造，属于蛋白质工程。故选C。
【点睛】明确基因工程和蛋白质工程的主要区别，要生产的蛋白质是否是自然界已存在的。
23.蛛丝的强度和柔韧度得益于蛛丝蛋白的特殊布局，使它产生一个由坚硬的结晶区和非结晶区构成的混合区域。有人试图通过破解蛛丝蛋白的结构从而推测出其相应的基因结构，以指导对蚕丝蛋白的修改，让蚕也吐出像蛛丝蛋白一样坚韧的丝。此过程运用的技术及流程分别是 ( )
A. 基因突变；DNA→RNA→蛋白质
B. 基因工程；RNA→RNA→蛋白质
C. 基因工程；DNA→RNA→蛋白质
D. 蛋白质工程；蛋白质→RNA→DNA→RNA→蛋白质
【答案】D
【解析】
通过破解蛛丝蛋白的结构从而推测出其相应的基因结构，蛋白质工程，具体流程为蛋白质→RNA→DNA→RNA→蛋白质，D正确。
【名师点睛】
本题主要考查蛋白质工程与基因工程的比较
(1)区别
项目
蛋白质工程
基因工程
过程
预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列
获取目的基因→基因表达载体的构建→将目的基因导入受体细胞→目的基因的检测与鉴定
实质
定向改造或生产人类所需的蛋白质
定向改造生物的遗传特性，以获得人类所需的生物类型和生物产品
结果
可生产自然界没有的蛋白质
只能生产自然界已有的蛋白质
(2)联系
①蛋白质工程是在基因工程的基础上，延伸出来的第二代基因工程。
②基因工程中所利用的某些酶需要通过蛋白质工程进行修饰、改造。
24.“DNA的粗提取与鉴定”实验中，操作正确的是( )
A. 取制备好的鸡血细胞液5～10 mL注入烧杯中，加入物质的量浓度为0.14 mol/L的NaCl溶液20 mL，同时用玻璃棒沿同一方向快速搅拌5 min，可使血细胞破裂，释放出DNA
B. 整个DNA提取过程中，两次加蒸馏水的目的都是为了降低溶液中NaCl的浓度，使DNA分子的溶解度达到最低，析出DNA分子
C. 整个DNA提取操作中，两次加入2 mol/L的NaCl溶液，目的都是使DNA尽可能多地溶解在NaCl溶液中
D. DNA鉴定操作中，只要向溶有DNA的NaCl溶液中加入4 mL的二苯胺试剂，即可出现蓝色
【答案】C
【解析】
试题分析：取制备好的鸡血细胞液注入烧杯中,迅速加入蒸馏水并用玻璃棒沿同一方向搅拌,使血细胞破裂,将DNA释放出来，A错误；整个DNA提取过程中,使用两次蒸馏水,第一次是使血细胞吸水胀破,释放核DNA,第二次是用来稀释NaCl溶液,使DNA析出，B错误；整个DNA提取操作中，两次加入2 mol/L的NaCl溶液，目的都是使DNA尽可能多地溶解在NaCl溶液中，C正确；在DNA鉴定操作中,DNA遇二苯胺试剂呈蓝色需在沸水浴条件下完成，D错误。
考点：本题考查“DNA的粗提取与鉴定”实验的知识。意在考查能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，能独立完成“生物知识内容表”所列的生物实验，包括理解实验目的、原理、方法和操作步骤，掌握相关的操作技能，并能将这些实验涉及的方法和技能进行综合运用的能力。
25. 当植物细胞脱离了原来所在植物体的器官或组织而处于离体状态时，下列有可能使其表现出全能性，并发育成完整植株的是( )。
A. 细胞分裂素 B. 生长素
C. 一定的营养物质 D. 以上三者均是
【答案】D
【解析】
试题分析：植物组织培养的培养基的组成：由无机成分（水和无机盐）、有机营养成分、激素（生长素和细胞分裂素）、琼脂，故选D。
考点：本题考查植物组织培养的有关知识，意在考查考生识记能力和理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。
26.植物组织培养依据的原理、培养过程的顺序及诱导的植物激素分别是( )
①细胞的全能性
②离体植物器官、组织或细胞
③根、芽
④生长素和细胞分裂素
⑤生长素和乙烯
⑥愈伤组织
⑦再分化
⑧脱分化
⑨植物体
A. ①、②⑦⑥⑧③⑨、④
B. ①、②⑧⑥⑦③⑨、④
C. ①、⑥②⑨⑧③⑦、⑤
D. ①、②⑨⑧⑥⑦③、⑤
【答案】B
【解析】
植物组织培养依据的原理为植物细胞的全能性；培养过程的顺序及诱导的植物激素分别是离体植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织，再分化形成根、芽等，进而形成新的植物体。
27. 人参皂甙干粉工厂化生产，下列哪种技术是必需的（ ）
A. 杂交育种 B. 植物组织培养
C. 多倍体育种 D. 单倍体育种
【答案】B
【解析】
试题分析：植物组织培养技术的应用：植物繁殖的新途径（微型繁殖、作物脱毒、人工种子）、作物新品种的培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产．
解：人参皂甙的工厂化生产过程：利用植物组织培养技术将外植体培育到愈伤组织，再进行植物细胞培养，进而获得人参皂甙．
故选：B．
考点：植物培养的条件及过程．
28.下图是“白菜—甘蓝”杂种植株的培育过程。下列说法正确的是( )
A. 植物体细胞杂交技术已经能使杂种植物按照人们的需要表现出亲代的优良性状
B. 愈伤组织是由杂种细胞再分化形成，具有发育的全能性
C. 上述过程中包含了有丝分裂、细胞分化和减数分裂等过程
D. “白菜—甘蓝”杂种植株具有的性状是基因选择性表达的结果
【答案】D
【解析】
【分析】
分析题图：图示为“白菜-甘蓝”杂种植株的培育过程，首先去壁获得原生质体；其次诱导原生质体融合，再生出新的细胞壁，形成杂种细胞；最后才有植物组织培养技术将杂种细胞培育成杂种植株。
【详解】目前植物体细胞杂交技术还没有能使杂种植物按照人们的需要表现出亲代的优良性状，A错误；愈伤组织形成时并没有形成完整个体，因此不能说明高度分化的植物细胞具有全能性，B错误； 上述过程中发生了有丝分裂和细胞分化，但没发生有减数分裂，C错误； “白菜-甘蓝”杂种植株具有的性状是基因选择性表达的结果，D正确。 故选D。
【点睛】本题结合“白菜-甘蓝”杂种植株的培育过程图解，考查植物体细胞杂交和植物组织培养的相关知识，要求考生识记植物组织培养的原理、过程及条件；识记植物体细胞杂交的过程，能结合所学的知识准确判断各选项。
29. A种植物细胞（基因型为Aa），B种植物细胞（基因型为Bb）；去掉细胞壁后，诱导两种细胞的原生质体融合，形成单核的杂种细胞。若经过组织培养得到的杂种植株是
A. 二倍体，基因型为AaBb B. 二倍体，基因型为AAaaBBbb
C. 四倍体，基因型为AaBb D. 四倍体，基因型为AAaaBBbb
【答案】C
【解析】
植物体细胞杂交，染色体组数是两个细胞染色体级数之和，基因是两种生物基因组合，所以两二倍体细胞后变成四倍体，基因变成AaBb。
30.在下列培育新个体的过程中，没有利用植物组织培养技术的是( )
A. 花药离体培养获得单倍体植株
B. 将抗冻蛋白基因导入番茄体细胞后培育的抗冻番茄
C. 细胞工程培育“番茄—马铃薯”杂种植株
D. 秋水仙素处理萌发的种子或幼苗获得多倍体植株
【答案】D
【解析】
【分析】
用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗得到多倍体植株属于多倍体育种，处理对象为独立的个体，无需进行组织培养。植物组织培养是一种无性繁殖的技术，将离体的单个植物细胞培养成完整的植株的过程，体现植物细胞的全能性。植物基因工程、单倍体育种和植物体细胞杂交过程中均运用了植物组织培养技术。
【详解】由配子直接发育的个体称为单倍体，花药中的花粉是植物的配子，所以采用花药离体培养得到单倍体植株，此过程在自然状态下不能实现，需采用植物组织培养，A错误；在培育转基因番茄的过程中，需要将抗冻蛋白基因与相应载体连接构建基因表达载体，再导入受体细胞培育成转基因植株，需采用植物组织培养，B错误；培育“番茄-马铃薯”杂种植株，先要制备“番茄-马铃薯”杂种细胞，然后借助于植物组织培养的技术手段将杂种细胞培育成杂种植株，C错误；用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗得到的多倍体植株，需要用秋水仙素处理萌发的种子和幼苗，不需要借助于植物组织培养技术，D正确。故选D。
【点睛】本题着重考查了植物组织培养技术在生物工程育种中的应用，属于对识记、理解层次的考查。植物组织培养技术已经得到广泛应用，包括：植物繁殖的新途径（如微型繁殖、作物脱毒、人工种子）、作物新品种的培育（如单倍体育种、突变体的应用）、细胞产物的工厂化生产（如从培养的红豆杉细胞中提取抗肿瘤药物紫杉醇）。
31.下列有关植物体细胞杂交的叙述，不正确的是( )
A. 用酶解法去掉细胞壁，分离出有活力的原生质体
B. 诱导两种植物的原生质体融合，进而形成杂种细胞
C. 植物体细胞杂交技术的最终目的是获得杂种细胞
D. 植物体细胞杂交技术可以克服不同种间远缘杂交不亲和的障碍
【答案】C
【解析】
【分析】
植物体细胞杂交技术的实质是将来自两个不同植物原生质体的融合，这就需要使用纤维素酶和果胶酶去除植物细胞壁获得原生质体，再应用化学法（聚乙二醇）或物理方法诱导原生质体融合。杂种细胞再生出新的细胞壁是体细胞融合完成的标志，细胞壁的形成与细胞内高尔基体有重要的关系）。把杂种细胞培育成植株（植物组织培养技术）。其原理是植物细胞具有全能性和细胞膜具有流动性。
【详解】A.植物体细胞杂交过程中，需要用酶（纤维素酶和果胶酶）解法去掉细胞壁，分离出有活力的原生质体，A正确；植物体细胞杂交过程中，需采用物理或化学方法诱导两种植物的原生质体融合，进而形成杂种细胞，B正确；植物体细胞杂交的最终目的是获得杂种植株，C错误；植物体细胞杂交技术最大的优点是克服远缘杂交不亲和的障碍，D正确。故选C。
32. 下列关于动物细胞工程的叙述，正确的是
A. 生物导弹是用癌细胞的单克隆抗体杀死癌细胞
B. 动物细胞培养的基础是细胞具有全能性
C. 细胞融合是利用了细胞膜的结构特点
D. 制备单克隆抗体的第二次筛选是选出杂交瘤细胞
【答案】C
【解析】
试题分析：生物导弹是用癌细胞的单克隆抗体精确制导，用携带的药物杀死癌细胞，A错误；动物细胞培养的基础是细胞增殖，B错误；细胞融合是利用了细胞膜的结构特点—流动性，C正确；制备单克隆抗体的第二次筛选是选出杂交瘤细胞，D正确。
考点：本题考查动物细胞工程的相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。
33.下列关于动物细胞培养的叙述，错误的是( )
A. 用于培养的细胞大都取自胚胎或幼龄动物的器官或组织
B. 将所取的组织先用胰蛋白酶等处理使其分散成单个细胞
C. 在培养瓶中要定期用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离，制成细胞悬液
D. 动物细胞培养只能传至50代左右，所培养的细胞都会衰老死亡
【答案】D
【解析】
【分析】
本题考查动物细胞培养的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力，运用所学知识综合分析问题的能力。
【详解】用于培养的细胞大都取自胚胎或幼龄动物的器官或组织，因为胚胎或幼龄动物的器官或组织分裂能力旺盛，A正确；动物细胞培养时，应用胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）处理组织使其分散成单个细胞，B正确；细胞存在接触抑制，因此在培养瓶中要定期用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离，制成悬浮液进行传代培养，C正确；动物细胞培养传50代左右，部分细胞可能会出现变异变成不死性细胞，D错误。
【点睛】动物细胞培养过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。
34.核移植的受体细胞是MII期卵母细胞,下列有关说法错误的是（ ）
A. MII期卵母细胞质中含有促进细胞核全能性表达的物质
B. MII期卵母细胞体积比较大,操作起来相对容易
C. 可以把供体细胞直接注入去核的卵母细胞中
D. MII期卵母细胞对克隆动物的遗传特性没有任何影响
【答案】D
【解析】
【分析】
细胞核移植过程中的几点注意：
①细胞核移植技术中注入去核卵母细胞中的不是供体细胞核，而是整个细胞，伴随着两细胞融合，体现细胞膜的结构特点：具有一定的流动性。
②受体细胞为减数第二次分裂中期的次级卵母细胞，此时在透明带内包含着第一极体，在去核的同时连同第一极体一并去掉。
③该技术形成重组细胞发育成一个新个体，体现了细胞核的全能性而非动物细胞的全能性。
④用卵母细胞做受体细胞的原因：a．卵母细胞体积大，便于操作；b．含有促使细胞核表达全能性的物质；c．营养物质丰富。
⑤克隆属于无性繁殖，产生新个体的性别、绝大多数性状与供核亲本一致。
【详解】通常用处于MII中期去核的卵母细胞作为受体细胞的原因除了它体积大、易操作、营养物质丰富外，还因为它的细胞质中含有促进细胞核全能性表达的物质，A正确；MII期卵母细胞体积比较大，操作起来相对容易，B正确；根据分析可知，可以把供体细胞直接注入去核的卵母细胞中，C正确；生物的性状是由细胞核和细胞质共同决定的，克隆动物的细胞核中遗传物质来自于供体核，细胞质中的遗传物质来自于MII期卵母细胞，D错误。
故选D。
35.下列关于克隆的说法不正确的是( )
A. 由一个受精卵发育为一个完整的个体叫做克隆
B. 基因克隆是指某目的基因复制的过程
C. 动物体细胞核移植技术需通过细胞核移植形成重组细胞
D. 动物克隆的技术基础是动物细胞的培养
【答案】A
【解析】
【分析】
克隆原意是指以幼苗或嫩枝插条，以无性繁殖或营养繁殖的方式培育植物，如扦插和嫁接。克隆是指生物体通过体细胞进行的无性繁殖，以及由无性繁殖形成的基因型完全相同的后代个体组成的种群。通常是利用生物技术由无性生殖产生与原个体有完全相同基因组织后代的过程。
【详解】由一个受精卵发育为一个完整的个体的过程叫做胚胎发育，不叫克隆，A错误； 基因克隆是指某目的基因的复制，B正确； 动物体细胞克隆要通过细胞核移植形成重组细胞，进而形成克隆动物，故C正确； 动物细胞培养是动物细胞工程的基础，D正确。故选A。
36. 下列关于细胞工程的叙述，正确的是 （ ）
A. 去除植物细胞壁和将动物组织分散成单个细胞的酶相同
B. 灭活的病毒可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合
C. 小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫的B淋巴细胞融合可制备单克隆抗体
D. 动物细胞培养和植物组织培养都需要经过脱分化过程
【答案】C
【解析】
试题分析：去除植物细胞壁需要用纤维素酶和果胶酶处理，将动物组织分散成单个细胞需用胰蛋白酶处理，A错误；诱导植物原生质体融合或动物细胞融合均可采用物理方法（如电激）或化学方法，灭活的病毒只能诱导动物细胞融合，B错误；小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫的B淋巴细胞融合后可形成既能合成抗体，又能无限增殖的杂交瘤细胞，将杂交瘤细胞培养可大量单克隆抗体，C正确；动物细胞培养不需要经过脱分化处理，植物组织培养需要经过脱分化和再分化过程，D错误。
考点：单克隆抗体的制备过程；组织培养基的成分及作用；植物体细胞杂交的过程；细胞融合的方法；动物细胞与组织培养过程
37. 培养人细胞与小鼠细胞的融合细胞发现，细胞会随机丢失来自人细胞的染色体，在仅含有人的1号染色体的融合细胞中，合成出人的尿苷单磷酸激酶。下列有关叙述中，不合理的是
A. 与人或小鼠细胞相比，融合细胞发生了遗传物质的改变
B. 研究方法中需要选择适当的培养基和细胞融合诱导技术
C. 在融合细胞中，人的1号染色体DNA与小鼠DNA发生了重组
D. 这种研究可能发现人的某一特定基因与特定染色体的关系
【答案】C
【解析】
试题分析：融合细胞细胞会随机丢失来自人细胞的染色体，这就发生遗传物质的改变，A正确；适当的培养基用来选择融合细胞，常用PEG,灭活病毒和电激来诱导细胞融合，B正确；在仅含有人的l号染色体的融合细胞中，合成出人的尿苷单磷酸激酶，表明人的l号染色体有人的尿苷单磷酸激酶基因，并无证据说明人的1号染色体DNA与小鼠DNA发生了重组，C错；因为融合细胞会随机丢失来自人细胞的染色体，可以借助此方法来研究某个细胞的特定性状与特定染色体的关系，D正确。
考点：本题考查细胞融合相关知识，意在考查考生能运用所学知识与观点，通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理，做出合理的判断或得出正确的结论的能力和能对实验现象和结果进行解释、分析和处理能力。
38.单克隆抗体制备过程中，对骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后，要用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞。在这种培养基上不能存活、增殖的细胞是( )
①B淋巴细胞 ②骨髓瘤细胞 ③B淋巴细胞自身融合细胞 ④骨髓瘤细胞自身融合细胞 ⑤杂交瘤细胞
A. ①②③④ B. ①③⑤ C. ②④ D. ①③
【答案】A
【解析】
【分析】
单克隆抗体的制备：
1、细胞B淋巴细胞：能产生特异性抗体，在体外不能无限繁殖；骨髓瘤细胞：不产生专一性抗体，体外能无限繁殖。
2、杂交瘤细胞的特点：既能大量增殖，又能产生特异性抗体。
3、两次筛选：①筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交细胞以及自身融合的细胞）；②筛选出能够产生特异性抗体的细胞群。
4、两次抗体检测：专一抗体检验阳性。
5、提取单克隆抗体：从培养液或小鼠腹水中提取。
6、单克隆抗体的优点：特异性强、灵敏度高，并可能大量制备。
【详解】特定培养基培养细胞的目的是筛选出既能大量增殖、又能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，因此其他的细胞都不能在此培养基上生存。在这种培养基上不能存活和繁殖的细胞有：①B淋巴细胞、②小鼠骨髓瘤细胞、③B淋巴细胞自身融合细胞、④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞。故选A。
39. 下图是科学家利用供体生物DNA中的无限增殖调控基因，制备单克隆抗体的过程。下列相关叙述错误的是
A. 经限制酶处理后的目的基因与载体的黏性末端相同
B. Ⅰ是经特定抗原免疫过的B淋巴细胞
C. 此种制备单克隆抗体的方法涉及转基因及动物细胞融合技术
D. 经检测和筛选后的Ⅱ，既能无限增殖又可分泌单克隆抗体
【答案】C
【解析】
在同一种限制性内切酶作用，使无限增殖调控基因与质粒具有相同的粘性末端，A正确；I代表受体细胞，要具有分泌抗体的能力，则为已免疫的B细胞，B正确；该过程涉及基因工程和动物细胞培养，没有动物细胞融合技术，C错误；Ⅱ是含有无限增殖调控基因的效应B细胞，既有无限增殖的能力，又能分泌特异性抗体，D正确。
【考点定位】基因工程的原理及技术；单克隆抗体的制备过程
【名师点睛】采用基因工程的方法获得单克隆抗体，用相同限制酶处理目的基因和运载体使其具有相同的粘性末端，便于拼接，再导入到浆细胞或已免疫的B细胞或效应B细胞中，Ⅱ是含有无限增殖调控基因的效应B细胞，既能无限增殖又能分泌特异性抗体。
40. 将特定药物与单克隆抗体相结合制成的“生物导弹”，能够用于杀死人类的某些癌细胞，其过程如图所示。下列相关叙述不正确的是（ ）
A. ①过程的原理和植物原生质体融合的原理基本相同
B. 经①形成的杂交瘤细胞能无限增殖并产生单一抗体
C. ②过程需要筛选并克隆单个杂交瘤细胞
D. 抗体的靶向作用使③过程具有高度特异性
【答案】B
【解析】
试题分析：①过程表示脾细胞与骨髓瘤细胞融合，与植物原生质体融合的原理相同，都是细胞膜的流动性，A项正确；经①形成的杂合细胞可能有三种，要经过筛选得到杂交瘤细胞，去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞，B项错误；②过程需要筛选出能够产生特异性抗体并能无限增殖的杂交瘤细胞，然后才能进行克隆化培养，C项正确；将特定药物与单克隆抗体相结合制成的“生物导弹”，注入体内，借助单克隆抗体的导向作用，能将药物定向带到癌细胞所在位置，在原位杀死癌细胞，疗效高，副作用小，D项正确。
考点：本题考查单克隆抗体的相关知识，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构的能力。
41.在单克隆抗体制备中，关于杂交瘤细胞制备的叙述，正确的是( )
A. 可利用电激等物理方法诱导动物细胞融合
B. 可利用细胞中染色体组数筛选出杂交瘤细胞
C. 利用了细胞膜的流动性和基因重组等原理
D. 筛选得到的杂交瘤细胞可直接用于生产单克隆抗体
【答案】A
【解析】
【分析】
单克隆抗体的制备过程：
（1）制备产生特异性抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原，然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞。
（2）获得杂交瘤细胞。
①将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中形成的B淋巴细胞融合；
②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体。
（3）克隆化培养和抗体检测
（4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖。
（5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。
【详解】单克隆抗体制备中可利用电激等物理方法直接诱导两个细胞的融合，A正确； 因为观察细胞染色体需要对细胞解离等处理，细胞已会死亡，所以不能通过观察染色体的数目和形态筛选杂交瘤细胞，B错误； 利用了细胞膜的流动性和细胞增殖等原理，C错误； 用选择培养基筛选得到的杂交瘤细胞需要再专一抗体检测和克隆化培养后才能用于生产单克隆抗体，D错误。 故选A。
42.下列有关哺乳动物精子和卵细胞的发生以及受精作用的叙述，正确的是( )
A. 采集到的精子和卵细胞相遇即可发生受精作用
B. 排卵是指卵泡从卵巢中排出
C. 卵细胞形成时的分裂过程均在卵巢内完成
D. 卵子是否受精的标志是在卵细胞膜和透明带之间观察到两个极体
【答案】D
【解析】
【分析】
1、受精包括受精前的准备阶段和受精阶段。
（1）准备阶段1-精子获能。刚刚排出的精子，不能立即与卵子受精，必须在雌性动物生殖道发生相应的生理变化后，才能获得受精能力。
（2）准备阶段2-卵子的准备，动物排出的可能是初级卵母细胞也可能是次级卵母细胞，都要在输卵管内进一步成熟，达到减数第二次分裂中期时，才具备与精子受精的能力。
2、卵细胞形成过程，其中减数第一次分裂是在雌性动物排卵前后完成的，场所在卵巢；减数第二次分裂是在受精过程中完成的，场所在输卵管中。
3、受精作用完成的标志：在卵黄膜和透明带之间的间隙可以观察到两个极体（一个是第一极体，还有一个是第二极体）。
【详解】采集到的精子必需经过获能处理，卵细胞必需发育到减数第二次分裂的中期才具有受精能力，A错误；排卵就是卵细胞从卵泡中排出，可能是初级卵母细胞或次级卵母细胞，B错误；卵细胞形成时的分裂过程在卵巢和输卵管中完成，C错误；在卵黄膜和透明带之间观察到两个极体，说明卵细胞已经完成了受精，这是判断卵细胞是否受精的重要标志，D正确。故选D。
43.猪或牛的初级卵母细胞的减数第一次分裂完成于( )
A. 排卵前后，在卵巢内 B. 排卵前，在卵巢内
C. 排卵后，在输卵管内 D. 受精时，在输卵管内
【答案】B
【解析】
【分析】
卵子的发生
（1）场所：卵子的发生是在卵巢内完成的。
（2）时间：卵原细胞通过有丝分裂不断增加其数量，并演变为初级卵母细胞，被卵泡细胞包围，形成卵泡，是在胎儿时期完成的（卵泡=初级卵母细胞+卵泡细胞）。MⅠ是在雌性动物排卵前后完成的，结果是产生次级卵母细胞和第一极体；次级卵母细胞再分裂产生一个成熟的卵子和第二极体（MⅡ在输卵管中完成的，这一点请特别注意）。
【详解】在卵细胞的形成过程中，初级卵母细胞的减数第一次分裂是在雌性动物排卵前完成的；并且卵子的发生是在卵巢内完成的，即减数第一次分裂在卵巢内。故选B。
【点睛】本题考查了卵子发生的时间和场所，知识点比较简单，属于考纲中识记层次的考查。特别注意MⅡ在输卵管中完成的，因此之前都是在卵巢中完成的。
44.下列关于受精过程的叙述,错误的是( )
A. 获能后的精子与卵子相遇后,释放顶体酶穿过透明带进入放射冠
B. 透明带反应是防止多精入卵的第一道屏障
C. 精子与卵细胞膜相互融合,精子入卵
D. 雄原核形成的同时,卵子完成减数第二次分裂
【答案】A
【解析】
【分析】
受精过程：顶体反应，释放顶体酶→穿越放射冠→穿越透明带（透明带反应）→卵细胞膜反应（卵黄膜封闭作用）→卵子完成减数第二次分裂并释放第二极体→雌雄原核的形成、核膜消失，雌、雄原核融合形成合子→第一次卵裂开始。
【详解】获能后的精子与卵子相遇后，首先发生顶体反应，释放顶体酶溶解卵丘细胞间的物质，精子穿过放射冠进入透明带， A错误；透明带反应和卵黄膜封闭作用是防止多精入卵的两道屏障，其中透明带反应是防止多精入卵的第一道屏障，B正确； 精子与卵细胞膜相互融合，精子入卵，C正确； 精子进入卵黄膜后，卵子完成第二次减数分裂并释放第二极体，同时形成雌雄原核，D正确。故选A。
45.下列不是精子、卵子发生的区别是（ ）
A. 初级精母细胞、初级卵母细胞的形成时间
B. 减数第一次分裂和减数第二次分裂的时间连续性
C. 成熟生殖细胞是否经过变形
D. 成熟生殖细胞中染色体的数量
【答案】D
【解析】
【分析】
哺乳动物精子和卵子发生的不同点：
(1)精子的减数两次分裂是连续的，场所唯一(MⅠ和MⅡ的场所都是睾丸)；而卵子的两次分裂是不连续的，场所不同。(MⅠ场所在卵巢，MⅡ场所在输卵管中)
(2)精子和卵子发生的时间不同：精子的发生是从初情期一直到生殖机能衰退；多数哺乳动物卵子的形成和在卵巢内的贮备是胎儿出生前完成的；MⅠ是在雌性动物排卵前后完成的，MⅡ是在受精过程中完成的；
(3)精子的形成过程需要变形；卵细胞的形成过程不需要变形。
【详解】初级精母、卵母细胞的形成时间不同，初级精母细胞是在初情期之后形成的，而初级卵母细胞是在胎儿时期形成的，A错误； 精子形成过程中，减数第一次分裂和减数第二次分裂是连续的，而卵细胞形成过程中，减数第一次分裂和减数第二次分裂不是连续，B错误； 精子形成过程中需要经过变形阶段，而卵细胞形成过程中不需要经过变形阶段，C错误； 精子和卵细胞中染色体数目相同，D正确。故选D。
46. 下图是应用生物工程技术，实现利用牛的乳腺细胞生产人体血清白蛋白的操作流程。下列有关叙述错误的是（ ）
A. 细胞①中已含有人体血清白蛋白基因
B. 获取细胞②的技术为核移植
C. 与图示技术相比，试管牛培育过程特有的生物技术是体外受精
D. 早期胚胎发育到囊胚期时，需要取其内细胞团做DNA分析，进行性别鉴定
【答案】D
【解析】
结合题意和图解信息，细胞①是供核细胞，应含有所需的目的基因——人体血清白蛋白基因，A正确；图中细胞②为通过核移植技术得到的重组细胞，B正确；图示技术不涉及体外受精过程，而试管牛培育过程需要有体外受精，C正确；早期胚胎发育到囊胚期时，需要取其滋养层细胞做DNA分析，进行性别鉴定，D错误。
47.下列关于培育良种“试管动物”的叙述，正确的是( )
A. 从附睾中取出的是已获能的成熟精子
B. 采集卵母细胞前必须对良种母畜进行配种
C. 供体包括提供配子且遗传性状优良的雌性和雄性个体
D. 将早期胚胎移植到代孕母畜中，经发育可获得表现型与受体相同的后代
【答案】C
【解析】
【分析】
卵母细胞的采集和培养
（1）主要方法是：用促性腺激素处理，使其超数排卵，然后，从输卵管中冲取卵子，直接与获能的精子体外受精。
（2）第二种方法：从已屠宰母畜的卵巢中采集卵母细胞或直接从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞，叫活体采卵。这种方法采集的卵母细胞都要在体外经人工培养成熟后，才能与获能的精子受精。
【详解】精子在雌性生殖道获能，A错误。采集卵母细胞前必须对良种母畜进行超数排卵处理，B错误。遗传性状优良的雌性和雄性个体提供的精子和卵细胞在体外受精形成受精卵，体外发育为早期胚胎， C正确。代孕母畜提供胚胎发育场所子宫，不提供遗传物质，胚胎遗传物质取决于供体，D错误。故选C。
48. 下列有关哺乳动物胚胎发育和胚胎工程的叙述，不正确的是( )
A. 内细胞团细胞分裂、分化成各种组织和器官，滋养层细胞发育成胎膜和胎盘
B. 移植用的胚胎一般取发育到桑椹胚或囊胚时期的，不同生物移植时期是相同的
C. 胚胎分割移植时要注意将内细胞团均等分割
D. 卵裂期的胚胎中细胞数目不断增加，但胚胎的总体积并不增加或略有缩小
【答案】B
【解析】
试题分析：内细胞团细胞具有全能性，能分裂、分化成各种组织和器官，滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘，故A正确；移植用的胚胎一般取发育到桑椹胚或囊胚时期的，不同生物移植时期是不相同的，故B错；胚胎分割移植时要注意将内细胞团均等分割，否则会影响分割后胚胎的进一步发育，故C正确；卵裂期细胞进行有丝分裂，细胞数目不断增加，但胚胎的总体积并不增加或略有缩小，故D正确。
考点：本题主要考查胚胎工程，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。
49. 培育“试管山羊”的基本过程如下图所示。若要培育成功，下列叙述正确的是
A. 甲过程中可通过给母山羊注射有关激素使用其超数排卵
B. 乙过程的目的之，是促进卵母细胞和精子的成熟
C. 丙过程与乙过程中应采用相同成分的培养液
D. 丁过程中早期胚胎须移植到与供体性状相同的代孕母羊子宫内
【答案】A
【解析】
甲过程中可通过给母山羊注射促性腺激素使其超数排卵，A正确；丁过程胚胎最佳时期是桑椹胚或者囊胚，B错误；丙是早期胚胎发育过程，在发育培养液中完成，而乙是受精作用过程，在获能溶液或专门的受精溶液中完成，C错误；胚胎移植时要保证受体和供体的生理状态相同，而不是性状相同，D错误。
【考点定位】胚胎工程的相关知识
【名师点睛】特别提醒：
(1)试管动物生殖实质是正常的有性生殖，只不过受精、早期胚胎发育是在试管中(体外)进行。
(2)克隆动物生殖的实质是无性生殖，依赖动物细胞核(高度分化的体细胞的细胞核)具有全能性；特有的操作程序是核移植。
50.如图是胚胎干细胞分离途径示意图。下列说法正确的是( )
A. 图中a所示细胞将来能够发育成胎膜和胎盘
B. 胚胎干细胞的体积和细胞核都较小
C. 胚胎干细胞可以增殖而不发生分化
D. 利用胚胎干细胞培育的人造器官正在大规模应用
【答案】C
【解析】
【分析】
1、哺乳动物的胚胎干细胞简称ES或EK细胞，来源于早期胚胎或从原始性腺中分离出来。
2、具有胚胎细胞的特性，在形态上表现为体积小，细胞核大，核仁明显；在功能上，具有发育的全能性，可分化为成年动物体内任何一种组织细胞。另外，在体外培养的条件下，可以增殖而不发生分化，可进行冷冻保存，也可进行遗传改造。
3、胚胎干细胞可用于治疗人类的某些顽症，如帕金森综合症。还可培育出人造器官，解决目前临床上存在的供体器官不足和器官移植后免疫排斥的问题
【详解】图中A所示细胞为内细胞团细胞，将来能够发育成胎儿的各种组织，A错误； 胚胎干细胞的体积小，细胞核大，B错误； 在体外培养的条件下，胚胎干细胞可以增殖而不发生分化，C正确； 利用胚胎干细胞培育的人造器官，还正在临床试验阶段，D错误。 故选C。
【点睛】本题主要考查学生对知识的记忆和理解能力．胚胎干细胞克隆出的组织或器官，使得血细胞、脑细胞、骨骼和内脏器官都可以更换，这将给白血病、心脏病和癌在患者带来新的希望。治疗性克隆和克隆人是有严格区别的，若把胚胎干细胞形成的胚胎移植至人的子宫内继续发育，那就是克隆人。
51.胚胎分割是一种现代生物技术，下列关于这一技术的叙述，正确的是( )
A. 可以将早期胚胎任意分割成多份 B. 可以分割任意时期的胚胎
C. 可以获得同卵双胎或多胎 D. 属于有性生殖方式，不属于克隆
【答案】C
【解析】
【分析】
有关胚胎分割技术需要考生注意的知识点有：
1、胚胎分割--是指采用机械方法将早期胚胎切割成2等分、4等分或8等分等，经移植获得同卵双胚或多胚的技术。
2、特点：来自同一胚胎的后代具有相同的遗传物质，胚胎分割可以看做动物无性繁殖或克隆的方法之一。
3、主要仪器设备：实体显微镜和显微操作仪。
4、进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚。对囊胚阶段的胚胎进行分割时要注意将内细胞团均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。
5、存在问题：胚胎分割的分数越多，操作的难度越大，移植的成功率也越低。
【详解】胚胎分割是指采用机械方法将早期胚胎切割成2等分、4等分或8等分，而不是将早期胚胎任意分割成多份，A错误； 进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚，B错误；胚胎分割可以获得同卵双胎或多胎，C正确；来自同一胚胎的后代具有相同的遗传物质，所以胚胎分割可以看作动物无性繁殖或克隆的方法之一，D错误。故选C。
【点睛】本题知识点简单，考查胚胎分割的相关知识，要求考生识记胚胎分割的概念、操作仪器、操作对象及注意事项，能结合所学的知识准确判断各选项，属于考纲识记层次的考查。
52. 下列关于哺乳动物胚胎发育和胚胎工程的叙述，错误的是 （ ）
A. 移植胚胎的遗传特性在孕育过程中不受受体的影响
B. 胚胎干细胞具有体积大、细胞核小、核仁明显等特点
C. 体外受精时采集的精子需放入培养液中培养以达到获能状态
D. 胚胎分割是将早期胚胎切割成几等分，最终产生同卵多仔后代的技术
【答案】B
【解析】
移植胚胎的遗传特性在孕育过程中不受受体的影响，A正确；胚胎干细胞具有细胞体积小、细胞核大、核仁明显等特点，B错误；体外受精时采集的精子需放入培养液中培养以达到获能状态，C正确；胚胎分割是将早期胚胎切割成几等分，最终产生同卵多仔后代的技术，D正确。
53. 通过胚胎移植技术，可以实现良种牛的快速繁殖。下列相关叙述正确的是
A. 对供体和受体母牛都要进行相同激素处理
B. 受精和胚胎的早期培养都需要在体外进行
C. 对冲卵获得的原肠胚检查合格后方可移植
D. 胚胎分割移植实现同狼多胎的成功率较低
【答案】D
【解析】
胚胎移植对供体受体要求同期发情，胚胎移植一般是桑葚胚阶段或囊胚阶段，或更早时期，答案D。
考点定位：胚胎移植相关知识。
54. 下列关于生态工程的叙述中，错误的是( )
A. 它是无消耗、多效益的工程 B. 追求经济与生态的双赢
C. 实现了废物资源化的良性循环 D. 实现了能量的多级利用
【答案】A
【解析】
生态工程也需要消耗环境资源,所以A错。
55. 我国在西部地区实行退耕还林还草工程，这一工程属于( )
A. 农村综合发展型生态工程 B. 小流域综合治理生态工程
C. 大区域生态系统恢复工程 D. 湿地生态恢复工程
【答案】C
【解析】
退耕还林还草工程属于大区域生态系统恢复工程。
56.下列关于转基因生物与环境安全的叙述，错误的是 ( )
A. 重组的微生物在降解污染物的过程中可能产生二次污染
B. 种植抗虫棉可以减少农药的使用量，对环境没有任何负面影响
C. 如果转基因花粉中有毒蛋白或过敏蛋白，可能会通过食物链传递到人体内
D. 转基因生物可能会使某些地区的生态系统的稳定性遭到破坏
【答案】B
【解析】
【分析】
转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应、过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）。抗虫棉的种植，减少了农药的使用，有利于保护农田的土壤环境；但是抗虫棉不抗蚜虫、盲椿象、红蜘蛛等害虫，导致这些害虫大面积的爆发，破坏了自然界的生态平衡，对环境造成了负面影响；另外棉铃虫对抗性频率越来越大。重组的微生物在降解污染物的过程中可能产生一些中间产物，产生二次污染。
【详解】重组的微生物在降解污染物的过程中可能产生二次污染，A正确； 种植抗虫棉可以减少农药的使用量，对生态环境可能有负面影响，B错误； 如果转基因花粉中有毒蛋白或过敏蛋白，可能会通过食物链传递到人体内，C正确；转基因生物打破了自然物种原有的界限，改变了生态系统中的能量流动和物质循环，有可能使生态系统的稳定性遭到破坏，D正确。故选B。
57.下列有关生物技术安全性和伦理问题的观点，不合理的是（ ）
A. 对于转基因技术，我们应该趋利避害，理性看待
B. 我国禁止生殖性克隆和治疗性克隆
C. 我国不发展、不生产、不储存生物武器，并反对其扩散
D. 对于基因检测应该保护个人遗传信息隐私权
【答案】B
【解析】
对于转基因技术，我们应该趋利避害，理性看待，A正确；我国禁止生殖性克隆，不反对治疗性克隆，B错误；不发展、不生产、不储存生物武器，并反对其扩散，C正确；应用基因检测技术应该保护个人遗传信息隐私权，D正确。
58.下列哪项是对待生物技术的理性态度( )
A. 转基因技术是按照人们的意愿对生物进行设计，不存在负面影响
B. 转基因农作物对于解决粮食、能源等问题起了积极作用，也存在一定风险
C. 克隆技术如果被一些人利用将给社会造成灾难，应禁止任何克隆研究
D. 转基因技术如果被恐怖分子利用将可能导致人类灭绝，应停止转基因研究
【答案】B
【解析】
【分析】
转基因生物的安全性问题包括：
（1）食物安全：滞后效应、出现过敏源、食物的营养成分改变等。
（2）生物安全：基因扩散导致对生物多样性的威胁。
（3）环境安全：对生态系统稳定性及环境的影响。
【详解】转基因技术存在负面影响，A错误； 转基因农作物对于解决粮食、能源等问题起了积极作用，同时也存在一定风险，B正确； 克隆技术中治疗性克隆可用于治疗白血病等，C错误； 转基因技术有其优点和缺点，应正确判断，不能因噎废食，D错误。故选B。
【点睛】本题考查转基因生物的安全性问题，意在考查学生对转基因生物安全性问题的识记与理解，了解人们在食物安全、生物安全和环境安全三个方面进行的争论，再结合所学的知识作答即可，比较基础。
59. 下图是一个农业生态系统模式图，关于该系统的叙述，错误的是
A. 微生物也能利用农作物通过光合作用储存的能量
B. 沼气池中的微生物也是该生态系统的分解者
C. 沼渣、沼液作为肥料还田，使能量能够循环利用
D. 多途径利用农作物可提高该系统的能量利用率
【答案】C
【解析】
沼气池中的微生物能够利用农作物秸秆中有机物存储的能量，说明微生物也能利用农作物通过光合作用储存的能量，A项正确；沼气池中的微生物如产甲烷杆菌能将人畜粪便、农作物秸秆中的有机物分解产生甲烷（沼气的成分之一），此时的微生物属于该生态系统的分解者，B项正确；沼渣、沼液作为肥料还田，可提高土壤有机质含量和提高土壤肥力或供肥能力，但能量只能单向流动，逐级递减，而不能循环利用，C项错误；农作物为人类提供食物，为家畜提供饲料，产生的秸秆可以用来生产沼气，这种多途径利用农作物的方式，大大提高了生态系统中的能量利用效率，D项正确。
【考点定位】生态系统中的物质循环和能量流动的基本规律及其应用
60. 矿山废弃地生态修复工程的关键是（ ）
A. 优先选择农作物以提高经济效益
B. 选择合适的养殖动物以增加物种多样性
C. 植被恢复和土壤微生物群落的重建
D. 尽可能依靠自然演替恢复其生态功能
【答案】C
【解析】
矿区废弃地的生态恢复工程，应采用的措施包括人工制作表土、多层覆盖、特殊隔离、土壤侵蚀控制、植被恢复工程等。
二、简答题
61.利用现代生物技术，科研人员对马铃薯的培育进行了研究，请回答相关问题：
(1)培育马铃薯脱毒苗所依据原理的物质基础是_________________________________，培育过程涉及__________和________两个阶段。
(2)研究马铃薯茎尖外植体大小对幼苗的成苗率和脱毒率的影响，结果如图。据图可知：茎尖越小，脱毒率________，成苗率________，培养脱毒苗茎尖的适宜大小为________。
(3)若想培育出“番茄－马铃薯”植株，运用传统有性杂交能否得到可育的杂种植株？为什么？____________________________________________________________________。
(4)若马铃薯细胞中含m条染色体，番茄细胞中有n条染色体，则“番茄－马铃薯”细胞在有丝分裂后期含__________条染色体。
【答案】 (1). 体细胞中具有马铃薯生长发育所需的全部遗传物质 (2). 脱分化 (3). 再分化 (4). 越高 (5). 越低 (6). 0.27 mm (7). 否(或不能)，不同种的植物存在生殖隔离 (8). 2(m＋n)
【解析】
【分析】
植物的组织培养是根据植物细胞具有全能性这个理论，植物的组织培养广义又叫离体培养，指从植物体分离出符合需要的组织、器官或细胞，原生质体等，通过无菌操作，在无菌条件下接种在含有各种营养物质及植物激素的培养基上进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。
植物组织培养过程中需经过脱分化、再分化两个过程，培养条件也在随着培养过程的进行而发生变化，如再分化出根芽后要给予适宜的光照。
【详解】（1）培育马铃薯脱毒苗是对植物组织培养技术的应用，所依据的原理是植物细胞全能性，即体细胞中具有马铃薯生长发育的全套遗传物质；该培育过程涉及脱分化和再分化两个阶段。
（2）据图可知：茎尖越小，脱毒率越高，成苗率越低；培养脱毒苗茎尖的适宜大小为O.27mm。
（3）由于番茄和马铃薯属于两个不同物种，而不同种的植物存在生殖隔离，所以若想培育出“番茄-马铃薯”植株，运用传统有性杂交不能得到可育的杂种植株。
（4）若马铃薯细胞中含m条染色体，番茄细胞内有n条染色体，则“番茄-马铃薯”细胞中含有（m+n）条染色体，在有丝分裂后期含2（m+n）条染色体。
【点睛】本题主要考查植物组织培养技术的应用、植物体细胞杂交、细胞分裂等的相关知识，把握知识点的内在联系是解题的关键。考生可回忆相关知识点，然后结合题干信息解答问题。
62.抗人T淋巴细胞CD3抗原单克隆抗体主要用于治疗和预防肾脏等器官移植病人的急性排斥反应。如图是该抗体的研发和生产流程。请回答：
(1)图中甲是______细胞，乙是_____细胞。
(2)①过程需要加入________诱导细胞融合，之后需用特定的选择性培养基进行第一次筛选，目的是除去其他细胞，保留_____细胞。经上述筛选获得的细胞产生的抗体还不是单克隆抗体，这是因为____________________________________________________。经克隆化培养后，利用抗体能与_____分子特异性结合的原理，再次筛选得到能分泌所需抗体的细胞。
(3)②表示将丁细胞注射到小鼠____内，之后从相应液体中提取该单克隆抗体。该单克隆抗体能够治疗和预防器官移植时的排斥反应，这____(填“能”或“不能”)证明免疫排斥主要是细胞免疫引起的。
【答案】 (1). 人T淋巴(“人”和“T淋巴”) (2). B淋巴 (3). 聚乙二醇(PEG或灭活的病毒) (4). 杂交瘤 (5). 从小鼠脾脏内提取的B淋巴细胞不止一种(杂交瘤细胞不止一种) (6). CD3 (7). 腹腔 (8). 不能
【解析】
【分析】
1、单克隆抗体的制备：
（1）制备产生特异性抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原，然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞。
（2）获得杂交瘤细胞：
①将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中形成的B淋巴细胞融合；
②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体。
（3）克隆化培养和抗体检测；
（4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖；
（5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。
2、题图为制备单克隆抗体的过程：甲是人T淋巴细胞，乙是B淋巴细胞，①过程为细胞融合，②体内培养。
【详解】（1）注射的抗原是人T淋巴细胞，从小鼠体内提取的是B淋巴细胞。
（2）动物细胞融合的诱导物是聚乙二醇或灭活的病毒，之后需用特定的选择性培养基进行第一次筛选，目的是保留杂交瘤细胞。经上述筛选获得的细胞产生的抗体还不是单克隆抗体，这是因为从小鼠脾脏内提取的B淋巴细胞不止一种。需经克隆化培养后，利用该抗体能和CD3分子特异性结合的原理，再次筛选得到能分泌所需抗体的细胞。
（3）②表示将丁细胞注射到小鼠腹腔内。该单克隆抗体能够治疗和预防器官移植时的排斥反应，不能证明免疫排斥主要是细胞免疫所引起的。
【点睛】本题结合流程图，考查单克隆抗体的制备过程及应用，意在考查考生的识图能力和识记能力；制备单克隆抗体过程需要经过两次筛选，获取能大量增殖并能产生专一抗体的杂交瘤细胞，可以体内和体外提取单克隆抗体。
63.重组人纤溶酶原激活剂(rhPA)是临床血栓疾病治疗的主要生物药品。家兔具有多胎、妊娠期短、繁殖快、全年多发情，产仔率高等优点，可以作为乳腺生物反应器批量生产药物。下图是利用转基因兔生产重组人纤溶酶原激活剂(rhPA)的过程，请据图回答。
(1)构建rhPA基因表达载体需要用限制酶______切割质粒和目的基因，为获得乳腺特异性表达载体需用__________________酶切割重组质粒使之线性化。
(2)对母兔注射__________使其超数排卵，并与正常公兔配种。将乳腺特异性表达载体导入家兔受精卵中最有效的导入技术是_____________。
(3)将受精卵置于37 ℃的95%空气和5%CO2的气体环境中培养一段时间后移植到代孕兔的输卵管中，代孕兔需经_______________处理。
(4)子代兔需要经过筛选过程才能获得生产人纤溶酶原激活剂的生物反应器，原因有：____________________________________、________________________________________。
【答案】 (1). XhoⅠ (2). Sal Ⅰ和NotⅠ (3). 促性腺激素 (4). 显微注射技术 (5). 同期发情(发情/孕激素) (6). 只有部分子代兔导入了人纤溶酶原激活剂基因 (7). 公兔不能表达人纤溶酶原激活剂基因
【解析】
【分析】
动物乳腺生物反应器是基于转基因技术平台，使外源基因导入动物基因组中并定位表达于动物乳腺，利用动物乳腺天然、高效合成并分泌蛋白的能力，在动物的乳汁中生产一些具有重要价值产品的转基因动物的总称。
乳腺生物反应器是最理想的生物反应器，它的优点：（1）药物蛋白只在乳腺内，对动物的生理活动不影响。（2）长期收集也不会对动物造成伤害。（3）产品成本低。（4）无论纯化还是使用都很方便。
【详解】（1）据图分析可知，构建rhPA基因表达载体需要用限制酶XhoⅠ切割质粒和目的基因，为获得乳腺特异性表达载体需用SalⅠ和NotⅠ酶切割重组质粒使之线性化。
（2）对母兔注射促性腺激素使其超速排卵，并与正常公兔配种。将乳腺特异性表达载体导人家兔受精卵中最有效的导人技术是显微注射技术。
（3）将受精卵置于37℃的95%空气和5%CO2气体环境中培养一段时间后移植到代孕兔的输卵管中，代孕兔需经同期发情（孕激素）处理。
（4）只有部分子代兔导入了人组织纤溶酶原激活剂基因、公兔不能表达人组织纤溶酶原激活剂，故子代兔需要经过筛选过程才能获得生产人组织纤溶酶原激活剂的生物反应器。
【点睛】本题考查基因工程、细胞工程、胚胎工程的知识点，要求学生掌握基因工程的操作工具和步骤以及应用，掌握动物细胞的培养条件和体外受精的过程以及胚胎移植的操作。
64.下图是江苏某农村因地制宜建设的生态农业园示意图。请回答。
（1）该生态农业园建设依据的主要生态工程原理有______________________________（至少答出2个）。在“沼气发酵池→采摘园”过程中发生着__________（选填“仅物质”仅能量”或“物质和能量”）的传递。
（2）池塘养鱼时，通常采用多鱼种混合放养模式，主要体现群落的__________（选填“水平” 或“垂直”）结构在实践中的应用，这种养殖模式的优点是____________________。
（3）流入该生态系统的总能量是____________________。该生态农 业园增加了“蝇蛆养殖、食用菌种植”等项目，其意义是______________________________。
（4）请根据图示绘制出碳元素流经鸡鸭的过程图:______________________________。
【答案】 (1). 物质循环再生原理、物种多样性原理、协调与平衡原理等 (2). 仅物质 (3). 垂直 (4). 能充分利用生态系统的空间和食物资源 (5). 生产者固定的太阳能和人工输入的能量 (6). 实现了生态系统物质和能量的多级利用，减少了环境污染 (7).
【解析】
【试题分析】
本题考查生态工程、群落、生态系统的能量流动和物质循环的相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，能从题图中提取有效信息并结合这些信息，运用所学知识与观点，通过比较、分析与综合等方法对各小题进行解答。
（1）该生态农业园建设依据的主要生态工程原理有物质循环再生原理、物种多样性原理、协调与平衡原理等；沼气发酵池中有大量微生物，能将有机物分解成无机盐，采摘园里的植物只能利用沼液中的无机物，因此，在“沼气发酵池→采摘园”过程中发生着仅物质的传递。
（2）池塘养鱼时，通常采用多鱼种混合放养模式（如上层为食浮游生物的鳙鱼，中层为食草的草鱼，下层为杂食性的鲫鱼等），主要体现群落的群落的垂直结构在实践中的应用；这种养殖模式的优点是能充分利用生态系统的空间和食物资源，缓解生物间的竞争。
（3）流入该生态系统的总能量是生产者固定的太阳能和人工输入的能量。该生态农业园增加了“蝇蛆养殖、食用菌种植”等项目，其意义是实现了生态系统物质和能量的多级利用，减少了环境污染。
（4）根据图示可知，稻、麦和蔬菜等中的有机碳经鸡鸭的消化吸收。被同化为鸡鸭体内的有机碳，这些有机碳中有一部分通过自身的呼吸作用以CO2形式释放到环境中，一部分有机碳直接流向蝇蛆（分解者），还有一部分有机碳输出该生态系统，被人类利用。具体图解详见答案。
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