高中生物《第37讲基因工程》课件

这是一份高中生物《第37讲基因工程》课件，共60页。PPT课件主要包含了目的基因，知识梳理，限制酶，也可以切割质粒，诊断与思考，解题探究，方法技巧，基因文库，PCR，启动子等内容，欢迎下载使用。

考纲要求 1.基因工程的诞生(Ⅰ)。 2.基因工程的原理及技术(Ⅱ)。
1.基因工程的概念(1)供体：提供_________。(2)操作环境：_____。(3)操作水平：_____水平。(4)原理：_________。(5)受体：表达目的基因。(6)本质：性状在_____体内的表达。(7)优点：克服_______________的障碍，定向改造生物的_________。
2.DNA重组技术的基本工具(1)限制性核酸内切酶(简称：_______)①来源：主要是从__________中分离纯化出来的。②作用：识别特定的____________并切开特定部位的两个核苷酸之间的___________。③结果：产生_________或平末端。(2)DNA连接酶①种类：按来源可分为E•cli DNA连接酶和______________。②作用：将双链DNA片段“缝合”起来，恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的____________。
③DNA连接酶和限制酶的关系
能自我复制有一个至多个＿＿＿＿＿＿＿＿有特殊的＿＿＿＿＿
(3)载体①种类：＿＿＿、λ噬菌体的衍生物、动植物病毒等。②质粒的特点
1.判断下列说法的正误(1)限制酶只能用于切割目的基因(　　)(2)DNA连接酶能将两碱基间通过形成的氢键连接起来(　　)(3)E•cli DNA连接酶既可连接平末端，又可连接黏性末端(　　)(4)质粒是小型环状DNA分子，是基因工程常用的载体(　　)(5)载体的作用是携带目的基因导入受体细胞中，使之稳定存在并表达(　　)
2.下图中的图1和图2分别表示的是EcRⅠ限制酶和SmaⅠ限制酶的作用示意图。请据图回答：(1)请说出EcRⅠ限制酶和SmaⅠ限制酶识别的碱基序列及切割的位点。(2)以上实例说明限制酶有何特性？
提示　EcRⅠ限制酶识别的碱基序列是GAATTC，切割位点在G和A之间；　　　　　　　　　SmaⅠ限制酶识别的碱基序列是CCCGGG，切割位点在G和C之间。
提示　说明限制酶具有专一性。
题组一　限制性核酸内切酶、DNA连接酶等酶的作用1.如图为DNA分子在不同酶的作用下所发生的变化，图中依次表示限制酶、DNA聚合酶、DNA连接酶、解旋酶作用的正确顺序是(　　) 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　A.①②③④ 　B.①②④③　　C.①④②③ D.①④③②
2.若要利用某目的基因(见图甲)和P1噬菌体载体(见图乙)构建重组DNA(见图丙)，限制性核酸内切酶的酶切位点分别是BglⅡ(A↓GATCT)、EcRⅠ(G↓AATTC)和Sau3AⅠ(↓GATC)。下列分析合理的是(　　)A.用EcRⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体B.用BglⅡ和EcRⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体C.用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体D.用EcRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体
关键是要看清切割后目的基因插入的方向
3.下列关于载体的叙述中，错误的是(　　)A.载体与目的基因结合后，实质上就是一个重组DNA分子B.对某种限制酶而言，载体最好只有一个切点，但还要有其他多种酶的切点C.目前常用的载体有质粒、λ噬菌体的衍生物和动植物病毒D.载体具有某些标记基因，便于对其进行切割
题组二　载体的作用及特点分析
具有一个至多个限制酶切点，以便目的基因可以插入到载体中
如抗生素抗性基因，以便于对外源基因是否导入进行检测
4.如图是表达新基因用的质粒的示意图，若要将目的基因插入到质粒上的A处，则切割基因时可用的是(　　)A.HindⅢ 　　B.EcRⅠ　　　C.EcB 　D.PstⅠ
A处有BamHⅠ、EcB、ClaⅠ限制酶的切点，使用A～D中的EcB切割时，才能让目的基因插入到A处
1.确定限制酶的种类(1)根据目的基因两端的限制酶切点确定限制酶的种类①应选择切点位于目的基因两端的限制酶，如图甲可选择PstⅠ。②不能选择切点位于目的基因内部的限制酶，如图甲不能选择SmaⅠ。③为避免目的基因和质粒的自身环化和随意连接，也可使用不同的限制酶切割目的基因和质粒，如图甲也可选择用PstⅠ和EcRⅠ两种限制酶(但要确保质粒上也有这两种酶的切点)。
(2)根据质粒的特点确定限制酶的种类①所选限制酶要与切割目的基因的限制酶相一致，以确保具有相同的黏性末端。②质粒作为载体必须具备标记基因等，所以所选择的限制酶尽量不要破坏这些结构，如图乙中限制酶SmaⅠ会破坏标记基因；如果所选酶的切点不止一个，则切割重组后可能会丢失某些片段，若丢失的片段含复制起点区，则切割重组后的片段进入受体细胞后不能自主复制。
2.载体上标记基因的标记原理载体上的标记基因一般是一些抗生素的抗性基因。目的基因要转入的受体细胞没有抵抗相关抗生素的能力。当含有抗生素抗性基因的载体进入受体细胞后，抗性基因在受体细胞内表达，使受体细胞能够抵抗相应抗生素，所以在受体细胞的培养体系中加入该种抗生素就可以只保留转入载体的受体细胞，原理如下图所示：
考纲要求 1.基因工程的诞生(Ⅰ) 2.基因工程的原理及技术(Ⅱ)
a.目的基因b. _______c.终止子d._________
1.基因工程的操作过程与应用(1)基因工程的操作步骤①获取目的基因—②基因表达载体的构建—组成
a.从_________中获取b.利用_____技术扩增c.通过化学方法人工合成
(2)基因工程的应用：培育转基因植物和___________，生产基因工程药物，进行_____治疗。
a.利用_____________技术检测目的基因的有无b.利用_________技术检测目的基因的转录c.利用_______________技术检测目的基因的翻译d.利用_______________的鉴定检测重组性状的表达
a.植物： _____________ 、基因枪法、_____________b.动物：_________技术c.微生物：感受态细胞法
③将目的基因导入受体细胞—方法④目的基因的检测与鉴定
(3)目的基因导入不同受体细胞的过程
(4)基因治疗与基因诊断的不同点
2.蛋白质工程(1)流程图写出流程图中字母代表的含义：A._____，B.______，C._________，D._______，E. _________。(2)结果：改造了现有蛋白质或制造出___________。(3)应用：主要集中应用于对___________进行改造，改良生物性状。
1.判断下列说法的正误(1)抗虫基因即使成功地插入到植物细胞染色体上也未必能正常表达(　　)(2)应用DNA探针技术，可以检测转基因抗冻番茄植株中目的基因的存在及其完全表达(　　)(3)将人的干扰素基因重组到质粒后导入大肠杆菌，获得能产生人干扰素的菌株(　　)(4)利用乳腺生物反应器能够获得一些重要的医药产品，如人的血清白蛋白，这是因为将人的血清白蛋白基因导入了动物的乳腺细胞中(　　)
导入了动物的受精卵细胞内
目的基因的存在可以应用DNA探针技术，但表达则需用抗原-抗体杂交技术
(5)为培育出抗除草剂的作物新品种，导入抗除草剂基因时只能以受精卵为受体(　　)(6)蛋白质工程是在分子水平上对蛋白质分子直接进行操作，定向改变分子的结构(　　)(7)目前在抗菌性和溶血性均较强的多肽P1的基础上研发抗菌性强但溶血性弱的多肽药物，首先要做的是依据P1氨基酸序列设计多条模拟肽(　　)
只能说最好用受精卵为受体,因为受精卵全能性高。 其他体细胞也可作为受体细胞
2.如图为抗虫棉的培育过程，请据图回答下列问题：(1)该基因工程中的目的基因和载体分别是什么？一般情况下，为什么要用同一种限制酶处理目的基因和载体？
提示　目的基因是Bt毒蛋白基因，载体是Ti质粒。用同一种限制酶处理目的基因和载体，可以获得相同的黏性末端，便于构建基因表达载体。
(2)该实例中，采用何种方法导入目的基因？为什么目的基因可以整合到染色体的DNA上？
提示　采用的方法是农杆菌转化法，由于Ti质粒上的T­-DNA可转移到受体细胞且能整合到受体细胞的染色体DNA上，而目的基因又插入到了T­-DNA上，所以目的基因可以整合到受体细胞的染色体DNA上。
2.如图为抗虫棉的培育过程，请据图回答下列问题：
(3)该实例中，检测目的基因是否表达常见的方法有哪两种？
提示　抗原—抗体杂交法、用棉叶饲喂棉铃虫。
题组一　目的基因的获取及基因表达载体的构建
1.下图表示用化学方法合成目的基因Ⅰ的过程。据图分析，下列叙述正确的是(　　)A.过程①需要DNA连接酶B.过程②需要限制性核酸内切酶C.目的基因Ⅰ的碱基序列是已知的D.若某质粒能与目的基因Ⅰ重组，则该质粒和目的基因Ⅰ的碱基序列相同
质粒和目的基因的碱基序列一般不相同
2.下图是利用基因工程技术生产可食用疫苗的部分过程，其中PstⅠ、SmaⅠ、EcRⅠ、ApaⅠ为四种限制性核酸内切酶。下列有关说法中正确的是(　　)A.图示过程是基因工程的核心步骤，所需的限制性核酸内切酶均来自原核生物B.图示中构建基因表达载体时，需用到一种限制性核酸内切酶
用到EcRⅠ、PstⅠ两种限制酶
2.下图是利用基因工程技术生产可食用疫苗的部分过程，其中PstⅠ、SmaⅠ、EcRⅠ、ApaⅠ为四种限制性核酸内切酶。下列有关说法中正确的是(　　)C.一种限制性核酸内切酶只能识别一种特定的核糖核苷酸序列D.抗卡那霉素基因的存在有利于将含有抗原基因的细胞筛选出来
题组二　基因工程的操作及应用实例分析3.下面图1为某植物育种流程，图2表示利用农杆菌转化法获得某种转基因植物的部分操作步骤。下列相关叙述错误的是(　　)A.图1子代Ⅰ与原种保持遗传稳定性，子代Ⅱ和子代Ⅲ选育原理相同B.图1子代Ⅲ选育显性性状需自交多代，子代Ⅴ可能发生基因突变和染色体变异
题组二　基因工程的操作及应用实例分析3.下面图1为某植物育种流程，图2表示利用农杆菌转化法获得某种转基因植物的部分操作步骤。下列相关叙述错误的是(　　)C.图2中①过程的完成需要限制酶和DNA连接酶的参与D.图2中⑥可与多个核糖体结合，并可以同时翻译出多种蛋白质
题组三　蛋白质工程概念和过程的辨析4.现代生物技术并不是各自独立的，而是相互联系、相互渗透的。下图表示利用乳腺生物反应器生产某种动物蛋白的流程示意图，请分析回答下列问题：(1)该生产流程中应用到的现代生物技术有____________、_______________________(写出其中两种)。(2)图中A、B分别表示_____________________、_____________。
基因工程(胚胎移植技术)
题组三　蛋白质工程概念和过程的辨析4.现代生物技术并不是各自独立的，而是相互联系、相互渗透的。下图表示利用乳腺生物反应器生产某种动物蛋白的流程示意图，请分析回答下列问题：(3)为提高培育成功率，进行②过程之前，对早期胚胎的处理是取其部分细胞用目的基因探针进行___________________检测，对受体动物的处理是用___________进行同期发情处理。
DNA(核酸)分子杂交
改造后的基因能够遗传(且改造基因
题组三　蛋白质工程概念和过程的辨析4.现代生物技术并不是各自独立的，而是相互联系、相互渗透的。下图表示利用乳腺生物反应器生产某种动物蛋白的流程示意图，请分析回答下列问题：(4)蛋白质工程中，要对蛋白质结构进行设计改造，必须通过基因修饰或基因合成来完成，而不直接改造蛋白质，原因是___________________________________________。
1.几种目的基因获取方法的比较
2.基因表达载体中启动子、终止子的来源(1)如果目的基因是从自然界中已有的物种中分离出来的，在构建基因表达载体时，不需要在质粒上目的基因的前后端接上特定的启动子、终止子，因为目的基因中已含有启动子、终止子。(2)如果目的基因是通过人工方法合成的，或通过cDNA文库获得的，则目的基因是不含启动子和终止子的。若只将基因的编码序列导入受体生物中，目的基因没有启动子、终止子，是无法转录的，因此，在构建基因表达载体时，需要在与质粒结合之前，在目的基因的前后端接上特定的启动子、终止子。
3.基因工程中的几种检测方法
4.蛋白质工程与基因工程的比较(1)区别
(2)联系①蛋白质工程是在基因工程的基础上，延伸出来的第二代基因工程。②基因工程中所利用的某些酶需要通过蛋白质工程进行修饰、改造。
知识网络 答题语句
1.限制酶具有特异性，即一种限制酶只能识别特定的核苷酸序列，并在特定的位点上切割DNA分子。2.DNA连接酶的作用部位是磷酸二酯键。3.质粒是常用的载体，它是一种小型的双链环状DNA分子，具有一个至多个限制酶切割位点及标记基因。4.目的基因的获取有从基因文库中获取和人工合成两类方法。5.基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因。6.目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法；导入动物细胞常用显微注射技术，导入微生物细胞常用感受态细胞法。
探究高考 明确考向
1.(2015•重庆，6)下列有关人胰岛素基因表达载体的叙述，正确的是(　　)A.表达载体中的胰岛素基因可通过人肝细胞mRNA反转录获得B.表达载体的复制和胰岛素基因的表达均启动于复制原(起)点C.借助抗生素抗性基因可将含胰岛素基因的受体细胞筛选出来D.启动子和终止密码子均在胰岛素基因的转录中起作用
人肝细胞不能合成胰岛素，则不含胰岛素的mRNA
2.(2014•广东，25)利用基因工程技术生产羧酸酯酶(CarE)制剂的流程如图所示，下列叙述正确的是(多选)(　　)A.过程①需使用逆(反)转录酶B.过程②需使用解旋酶和PCR获取目的基因C.过程③使用的感受态细胞可用NaCl溶液制备D.过程④可利用DNA分子杂交鉴定目的基因是否已导入受体细胞
从cDNA文库中获取目的基因
3.(2015•全国Ⅱ，40)已知生物体内有一种蛋白质(P)，该蛋白质是一种转运蛋白，由305个氨基酸组成。如果将P分子中158位的丝氨酸变成亮氨酸，240位的谷氨酰胺变成苯丙氨酸，改变后的蛋白质(P1)不但保留P的功能，而且具有了酶的催化活性。回答下列问题：(1)从上述资料可知，若要改变蛋白质的功能，可以考虑对蛋白质的__________________进行改造。(2)以P基因序列为基础，获得P1基因的途径有修饰___基因或合成___基因，所获得的基因表达时是遵循中心法则的，中心法则的全部内容包括_______________________的复制，以及遗传信息在不同分子之间的流动，即：____________________________________________________________。
DNA和RNA(或遗传物质)
DNA→RNA、RNA→DNA、RNA→蛋白质(或转录、逆转录、翻译)
3.(2015•全国Ⅱ，40)已知生物体内有一种蛋白质(P)，该蛋白质是一种转运蛋白，由305个氨基酸组成。如果将P分子中158位的丝氨酸变成亮氨酸，240位的谷氨酰胺变成苯丙氨酸，改变后的蛋白质(P1)不但保留P的功能，而且具有了酶的催化活性。回答下列问题(3)蛋白质工程也被称为第二代基因工程，其基本途径是从预期蛋白质功能出发，通过_________________和_______________，进而确定相对应的脱氧核苷酸序列，据此获得基因，再经表达、纯化获得蛋白质，之后还需要对蛋白质的生物______进行鉴定。
4.(2015•四川，9)将苏云金杆菌Bt蛋白的基因导入棉花细胞中，可获得抗棉铃虫的转基因棉，其过程如下图所示：注：农杆菌中Ti质粒上只有T-DNA片段能转移到植物细胞中。(1)过程①需用同种____________________酶对含Bt基因的DNA和Ti质粒进行酶切。为将过程②获得的含重组质粒的农杆菌筛选出来，应使用_____培养基。
限制性核酸内切(限制)
4.(2015•四川，9)将苏云金杆菌Bt蛋白的基因导入棉花细胞中，可获得抗棉铃虫的转基因棉，其过程如下图所示：注：农杆菌中Ti质粒上只有T-DNA片段能转移到植物细胞中。(2)过程③中将棉花细胞与农杆菌混合后共同培养，旨在让_______进入棉花细胞；除尽农杆菌后，还须转接到含卡那霉素的培养基上继续培养，目的是_________________________________。
T­-DNA片段的植物细胞
4.(2015•四川，9)将苏云金杆菌Bt蛋白的基因导入棉花细胞中，可获得抗棉铃虫的转基因棉，其过程如下图所示：注：农杆菌中Ti质粒上只有T-DNA片段能转移到植物细胞中。(3)若过程④仅获得大量的根，则应在培养基中增加_______________以获得芽；部分接种在无激素培养基上的芽也能长根，原因是_____________________________________________。
生长素可诱导根的形成，细胞分裂素可诱导芽的形成
芽顶端合成的生长素向基部
4.(2015•四川，9)将苏云金杆菌Bt蛋白的基因导入棉花细胞中，可获得抗棉铃虫的转基因棉，其过程如下图所示：注：农杆菌中Ti质粒上只有T-DNA片段能转移到植物细胞中。(4)检验转基因棉的抗虫性状，常用方法是___________。种植转基因抗虫棉能减少_____的使用，以减轻环境污染。
1.如图为某种质粒的简图，小箭头所指分别为限制性核酸内切酶EcRⅠ、BamHⅠ的酶切位点，P为转录的启动部位。已知目的基因的两端有EcRⅠ、BamHⅠ的酶切位点，受体细胞为无任何抗药性的原核细胞。下列有关叙述正确的是(　　)A.将含有目的基因的DNA与质粒分别用EcRⅠ酶切，在DNA连接酶作用下，生成由两个DNA片段之间连接形成的产物有两种
有三种，目-目连接物，质-质连接物，目-质连接物
1.如图为某种质粒的简图，小箭头所指分别为限制性核酸内切酶EcRⅠ、BamHⅠ的酶切位点，P为转录的启动部位。已知目的基因的两端有EcRⅠ、BamHⅠ的酶切位点，受体细胞为无任何抗药性的原核细胞。下列有关叙述正确的是(　　)B.DNA连接酶的作用是将酶切后得到的黏性末端连接起来形成一个重组质粒，该过程形成两个磷酸二酯键C.为了防止目的基因反向粘连和质粒自身环化，酶切时可选用的酶是EcRⅠ和BamHⅠ
切割后得到的DNA片段两侧的黏性末端不同
也可能是只导入了不含目的基因的载体
1.如图为某种质粒的简图，小箭头所指分别为限制性核酸内切酶EcRⅠ、BamHⅠ的酶切位点，P为转录的启动部位。已知目的基因的两端有EcRⅠ、BamHⅠ的酶切位点，受体细胞为无任何抗药性的原核细胞。下列有关叙述正确的是(　　)D.能在含青霉素的培养基中生长的受体细胞表明该目的基因已成功导入该细胞
2. 2011年8月，吉林大学农学部奶牛繁育基地成功培育出一头携带转入赖氨酸基因的克隆牛犊“织女”，从其乳汁中获得大量的赖氨酸，它的诞生标志着国际克隆技术又取得了一次重大突破。以下与此有关的叙述中，正确的是(　　)A.该题中赖氨酸基因表达载体的受体细胞的性染色体组成可以是XX也可以是XYB.将赖氨酸基因导入牛的卵细胞中，通过组织培养也能形成转基因牛C.人们只在“织女”的乳汁中才能获取赖氨酸，是因为只在转基因牛的乳腺细胞中才有赖氨酸基因D.运用基因工程技术让牛合成大量的赖氨酸，该技术将导致定向变异
转基因动物的体细胞中都有赖氨酸基因，但是只在乳腺细胞中表达
3.下列关于蛋白质工程的说法，正确的是(　　)A.蛋白质工程是在分子水平上对蛋白质分子直接进行操作B.蛋白质工程能生产出自然界中不曾存在过的新型蛋白质分子C.对蛋白质的改造是通过直接改造相应的mRNA来实现的D.蛋白质工程的流程和天然蛋白质合成的过程是相同的
蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。由于基因决定蛋白质，因此，要对蛋白质的结构进行设计改造，还必须从基因入手。与基因工程不同，蛋白质工程能生产出自然界中不曾存在过的新型蛋白质分子。
4.科学家在某种农杆菌中找到了抗枯萎病的基因，并以Ti质粒作为载体，采用转基因方法培育出了抗枯萎病的金花茶新品种。下列有关叙述正确的是(　　)A.质粒是最常用的载体之一，质粒的存在与否对宿主细胞的生存有决定性的作用B.应将抗枯萎病基因导入受精卵，否则不能达到该基因在各组织细胞都表达的目的C.抗枯萎病基因能在金花茶细胞中表达，是因为两者的DNA结构相同D.通过该方法获得的抗枯萎病金花茶，将来产生的花粉中不一定含有该抗病基因
一般来说，质粒对受体细胞无害
植物细胞具全能性，则转基因植物的受体细胞可是受精卵或体细胞
原因是两者共用一套遗传密码，并且基因表达方式相同
导入受体细胞的抗枯萎病的基因是单个的，而花粉是减数分裂后的产物，因此有的花粉是不带有抗性基因的
5.干扰素是治疗癌症的重要药物，它必须从血液中提取，每升人血中只能提取0.5 μg，所以价格昂贵。美国加利福尼亚的某生物制品公司用如下方法生产干扰素。如图所示： 从上述方式中可以看出该公司生产干扰素运用的方法是(　　)A.个体间的杂交 B.基因工程 C.细胞融合 D.器官移植
上图为将人的淋巴细胞中控制干扰素合成的基因与质粒结合后导入酵母菌，并从酵母菌产物中提取干扰素，这项技术为基因工程。
6.抗菌肽对治疗癌症有一定作用，下图表示抗菌肽合成过程。相关说法正确的是(　　)A.用PCR克隆目的基因不需要DNA解旋酶B.基因表达载体包含起始密码和终止密码C.用显微注射法导入基因表达载体D.筛选菌种时用基因探针检测相关蛋白质
PCR技术中采用的是高温变性
导入微生物用感受态细胞法
7.SOD是一种抗氧化酶，它能将O－2转化成H2O2，增强植物的抗逆性。下图为培育农作物新品种的一种方式，与此有关的叙述中正确的是(　　) A.①过程常用的工具酶有限制性核酸内切酶、DNA连接酶和载体B.②、③分别表示脱分化、再分化，培养基中需添加植物激素C.SOD可能为O－2转化成H2O2的过程提供能量D.培育过程中需根据基因型的不同进行人工选择
酶不能为化学反应提供能量，只能降低化学反应的活化能
8.下图表示蛋白质工程的操作过程，相关说法不正确的是(　　) A.蛋白质工程中对蛋白质分子结构的了解是非常关键的工作B.蛋白质工程是完全摆脱基因工程技术的一项全新的生物工程技术C.a、b过程分别是转录、翻译D.蛋白质工程中可能构建出一种全新的基因
如蛋白质的空间结构、氨基酸的排列顺序
对蛋白质的改造是通过对基因的改造来完成的
9.苏云金杆菌(Bt)能产生具有杀虫能力的毒素蛋白。图1是转Bt毒素蛋白基因植物的重组DNA形成过程示意图；图2是毒素蛋白基因进入植物细胞后发生的两种生物大分子合成的过程，据图回答下列问题： (1)将图1①的DNA用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后，反应管中有___种DNA片段。过程②需要用到__________酶。
上述两种酶形成的末端不一样，若A表示HindⅢ， B表示BamHⅠ，形成的片段有AA，AB，BA，BB四种切法形成的四种片段。
9.苏云金杆菌(Bt)能产生具有杀虫能力的毒素蛋白。图1是转Bt毒素蛋白基因植物的重组DNA形成过程示意图；图2是毒素蛋白基因进入植物细胞后发生的两种生物大分子合成的过程，据图回答下列问题：(2)假设图1中质粒原来BamHⅠ识别位点的碱基序列变为了另一种限制酶BclⅠ识别位点的碱基序列，现用BclⅠ和HindⅢ切割质粒，则该图1中①的DNA右侧还能选择BamHⅠ进行切割，并能获得所需重组质粒吗？并请说明理由_____________________________。
能，切割后露出的黏性末端相同
BclⅠ与BamHⅠ酶切割后形成的黏性末端一样
9.苏云金杆菌(Bt)能产生具有杀虫能力的毒素蛋白。图1是转Bt毒素蛋白基因植物的重组DNA形成过程示意图；图2是毒素蛋白基因进入植物细胞后发生的两种生物大分子合成的过程，据图回答下列问题：(3)若上述假设成立，并成功形成重组质粒，则重组质粒(　　)A.既能被BamHⅠ也能被HindⅢ切开B.能被BamHⅠ但不能被HindⅢ切开C.既不能被BamHⅠ也不能被HindⅢ切开 D.能被HindⅢ但不能被BamHⅠ切开
9.苏云金杆菌(Bt)能产生具有杀虫能力的毒素蛋白。图1是转Bt毒素蛋白基因植物的重组DNA形成过程示意图；图2是毒素蛋白基因进入植物细胞后发生的两种生物大分子合成的过程，据图回答下列问题：(4)图2中α链是_______。不同组织细胞的相同DNA进行过程③时启用的起始点___________(在“都相同”“都不同”“不完全相同”中选择)，其原因是___________________________________。
不同组织细胞中基因会进行选择性表达
9.苏云金杆菌(Bt)能产生具有杀虫能力的毒素蛋白。图1是转Bt毒素蛋白基因植物的重组DNA形成过程示意图；图2是毒素蛋白基因进入植物细胞后发生的两种生物大分子合成的过程，据图回答下列问题：(5)要想检测导入的Bt毒素蛋白基因是否表达，在分子水平上可用_______________法进行检测，如果出现杂交带，说明目的基因已经表达蛋白质产品，转基因植物培育成功。
10.浙江大学农学院喻景权教授课题组研究发现，一种植物激素——油菜素内酯能促进农药在植物体内的降解和代谢。用油菜素内酯处理后，许多参与农药降解的基因(如P450基因和红霉素抗性基因)的表达和酶活性都得到提高，在这些基因“指导”下合成的蛋白酶能把农药逐渐转化为水溶性物质或低毒甚至无毒物质，有的则被直接排出体外。某课题组进一步进行了如下的实验操作，请回答下列问题：
(1)获得油菜素内酯合成酶基因的方法有_________________________________________________________________________________________。步骤①用PCR技术扩增基因时用到的耐高温酶通常是指_______________；步骤②用到的酶有___________________。
从cDNA文库中获取、从基因组文库中获取、人工合成目的基因或PCR扩增技术(任选其中两项即可)
(2)图中导入重组质粒的方法是_____________，在导入之前应用一定浓度的___________处理受体细菌。(3)导入重组质粒2以后，往往还需要进行检测和筛选，可用______________制成探针，检测是否导入了重组基因，在培养基中加入_______可将含有目的基因的细胞筛选出来。
(4)请你为该课题命名：_______________________________________。
探究油菜素内酯能否促进土壤中农药的分解
11.下图是某种动物蛋白质工程示意图，请据图回答下列问题：(1)目前，蛋白质工程中难度最大的是图中编号___所示的过程，实现③过程的依据有___________________________________________________________。(2)在⑤过程中，_______连接酶既可以“缝合”双链DNA片段互补的黏性末端，又可以“缝合”双链DNA片段的平末端。
氨基酸与密码子的对应关系；mRNA与DNA间的碱基互补配对原则
11.下图是某种动物蛋白质工程示意图，请据图回答下列问题：(3)为获得较多的受精卵进行研究，⑥过程需用激素做_________处理。若⑥过程所得的卵母细胞是从屠宰母畜的卵巢中获得的，则体外受精前的⑧过程表示在体外人工培养卵母细胞到_________________期。
11.下图是某种动物蛋白质工程示意图，请据图回答下列问题：(4)为提高培育成功率，进行⑩过程之前，需对胚胎进行质量检查，应取部分滋养层细胞，以_________为探针进行DNA分子杂交检测。对受体动物需要用特定的激素进行_________处理。