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2022届高考生物一轮复习专题训练80 梳理微生物培养的相关技术（解析版）
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这是一份2022届高考生物一轮复习专题训练80 梳理微生物培养的相关技术（解析版），共7页。试卷主要包含了下列涂布平板操作过程错误的是等内容，欢迎下载使用。
1．(2021·辽宁沈阳一中月考)下面有关微生物培养、分离等的叙述，错误的是( )
A．检验自来水中大肠杆菌数是否超标，可用稀释涂布平板法来分离并计数
B．检测同种水样中细菌的数量时，牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落数大于选择培养基
C．配制培养基时要注意各种营养成分，必须含有碳源、氮源、无机盐、水及生长因子
D．对于经常使用的菌种可采用试管固体斜面临时保存，但该方法保存的菌种易变异
答案 C
解析 当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌，A正确；检测同种水样中细菌的数量时，由于选择培养基具有选择作用，因此会导致牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落数大于选择培养基，B正确；培养基不一定都含有碳源、氮源，如培养自养型微生物的培养基中不需加入碳源、分离自生固氮菌的培养基中，不需加入氮源，C错误；对于经常使用的菌种可采用试管固体斜面临时保存，但该方法保存的菌种易被污染或产生变异，D正确。
2．下列涂布平板操作过程错误的是( )
A．将涂布器在酒精灯火焰上灼烧，直到烧红
B．取少量菌液滴加在培养基表面
C．将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，待酒精燃尽后，冷却8～10 s再用
D．涂布时可转动培养皿，使菌液涂布均匀
答案 A
解析 将沾有少量酒精的涂布器在酒精灯火焰上引燃，待酒精燃尽后，冷却8～10 s再用，A项错误、C项正确；涂布时，涂布器可以不动，可转动培养皿，使菌液涂布均匀，D项正确。
3．(2021·山东金乡一中高三月考)原油中含有大量有害的、致癌的多环芳烃。土壤中有些细菌可以利用原油中的多环芳烃为碳源，在培养基中形成分解圈。为筛选出能高效降解原油的菌株并投入除污，某小组同学设计了相关实验。下列有关实验的叙述，不正确的是( )
A．应选择被原油污染的土壤取样
B．配制以多环芳烃为唯一碳源的选择培养基
C．将土壤稀释液灭菌后接种到选择培养基上
D．能形成分解圈的即为所需菌种
答案 C
解析 筛选能够利用多环芳烃为碳源的菌种，在被原油污染的土壤中含有所需菌种，所以需配制来源于被原油污染的土壤稀释液，A正确；配制选择性培养基，该培养基与通用培养基成分的主要区别是以原油(多环芳烃)为唯一碳源，B正确；在无菌环境下，将土壤稀释液接种到选择培养基上，将土壤稀释液灭菌后会杀死原有菌种，C错误；题述“有些细菌可以利用原油中的多环芳烃为碳源，在培养基中形成分解圈”，所在选择性培养基上能形成分解圈的即为所需菌种，D正确。
4．在涂布有大肠杆菌的培养基上进行抑菌实验，在a、b、c处分别贴浸有不同抗生素(浓度相同)的无菌滤纸片，d处滤纸片浸有无菌水。培养后的结果如图。以下判断错误的是( )
A．a处抑菌效果小于b处
B．b处的滤纸片没有沥干
C．c处抗生素无效
D．d为对照
答案 A
解析 透明圈大的抑菌效果好，透明圈小的抑菌效果弱。d为空白对照，与d处的比较可说明a处抑菌效果与b处相当，A项错误。
5．(2021·安徽六安市城南中学高三月考)通过实验测定土壤中的细菌数量，下列与此操作有关的叙述中，不正确的是( )
A．用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板
B．取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1 mL，分别涂布于各组平板上
C．将培养皿倒置，37 ℃恒温培养24～48小时
D．选择菌落数在300个以上的培养皿进行计数
答案 D
解析 用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌即高压蒸汽灭菌后倒平板，待冷却后备用，A正确；取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1 mL，分别涂布于各组平板上，B正确；细菌培养时，要将培养皿倒置培养，防止冷凝水滴落到平板上造成污染，并置于37 ℃恒温箱中培养24～48小时，C正确；计数时，选择菌落数在30～300个的一组平板为代表进行计数，而不是选择菌落数在300个以上的培养皿进行计数，D错误。
6．(2021·河北衡水高三月考)秸秆还田可增加土壤肥力，缓解环境污染。为分离分解纤维素的微生物菌种，实现废物的资源化利用，研究人员设计了“土壤取样→选择培养→梯度稀释→涂布平板→挑选菌株”的实验流程。下列叙述错误的是( )
A．配制培养基时，应在高压蒸汽灭菌之后调节pH
B．选择培养时，应使用纤维素为唯一碳源的培养基
C．进行梯度稀释时，应在酒精灯火焰旁完成各种操作
D．挑选菌株后，应将使用过的培养基进行灭菌后再丢弃
答案 A
解析 配制培养基时，应在高压蒸汽灭菌之前调节pH，避免灭菌之后调pH造成杂菌污染，A错误；选择培养时，为分离分解纤维素的微生物菌种，应使用纤维素为唯一碳源的培养基，B正确；进行梯度稀释时，为了无菌操作，应在酒精灯火焰旁完成各种操作，C正确；挑选菌株后，为了防止造成污染，应将使用过的培养基进行灭菌后再丢弃，D正确。
7．平板划线法和稀释涂布平板法是接种微生物的两种常用方法，下列描述正确的是( )
A．都要将菌液进行一系列的梯度稀释
B．平板划线法是将不同稀释度的菌液通过接种环连续划在固体培养基表面
C．稀释涂布平板法是将不同稀释度的菌液倒入液体培养基中进行培养
D．都会在培养基表面形成单个的菌落
答案 D
解析 平板划线法不需要进行梯度稀释，稀释涂布平板法需要将不同稀释度的菌液涂布到固体培养基的表面。平板划线法和稀释涂布平板法都能在培养基表面形成单个的菌落。
8．下列有关微生物培养与应用的说法，正确的是( )
A．天然培养基是指直接取自自然界不需加工的培养基
B．接种前需对培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手等进行严格的灭菌处理
C．大肠杆菌的纯化培养过程包括培养基的配制和纯化大肠杆菌两个阶段
D．分离分解尿素的细菌时，尿素是培养基中唯一的氮源和碳源
答案 C
解析 天然培养基是成分不明确的培养基，并不是不需加工配制的培养基；实验操作者的双手需进行消毒处理而不能灭菌；分离分解尿素的细菌时，尿素是唯一氮源但不是唯一的碳源。
9．(2021·黑龙江绥化一中高三月考)某生物兴趣小组用无菌水将葡萄皮上的微生物冲洗到无菌的锥形瓶中，然后按图甲所示过程进行醋酸菌的纯化培养。回答下列问题：
(1)在菌种培养过程中，需将平板倒置，其主要目的是______________________________
____________________________________。在操作B、C后，可根据菌落特征对醋酸菌进行筛选，原理是_______________________________________________________________。
(2)图甲中，液体培养的目的是________________________________________________。
(3)图甲中，C过程采用的微生物计数方法是________________。经培养后菌落在平板上的分布如图乙所示，推测接种时的操作失误是____________________。
(4)若测得稀释倍数为106的培养基平板上，菌落数的平均值为254，则每毫升样品中的菌株数是(涂布平板时所用稀释液的体积为0.1 mL)________________个。用该方法统计的醋酸菌数目会比活菌的实际值________(填“小”或“大”)，原因是______________________
________________________________________________。
答案 (1)防止培养皿盖上的水珠落入培养基造成污染，同时避免培养基中的水分过快地挥发 一定的培养条件下，同种微生物表现出稳定的菌落特征 (2)增加醋酸菌的浓度 (3)活菌计数法(或稀释涂布平板法) 涂布不均匀 (4)2.54×109 小 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落
解析 (1)在菌种培养过程中，需要倒平板操作，待平板冷凝后，要将平板倒置，其主要目的是防止皿盖上的冷凝水落入培养基造成污染，也可以避免培养基中的水分过快地挥发。一定的培养条件下，同种微生物表现出稳定的菌落特征，故可根据菌落特征对醋酸菌进行筛选。(2)液体培养有利于醋酸菌的繁殖，从而增加醋酸菌的浓度。(3)图甲C过程采用的是稀释涂布平板法接种，可以采用活菌计数法对微生物进行计数。图乙所示菌落分布相对较集中，推测是接种时涂布不均匀导致的。(4)若测得稀释倍数为106的培养基平板上，菌落数的平均值为254，则每毫升样品中的菌株数＝254÷0.1×106＝2.54×109(个)。当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，故用该方法统计的醋酸菌数目会比活菌的实际值小。
10．大肠杆菌是寄生于人和动物肠道中的细菌，其代谢产物能与染料伊红美蓝反应，使菌落呈黑色。下面是其培养基配方：
回答下列问题：
(1)该培养基中，蛋白胨为大肠杆菌提供的主要营养有________________和维生素。从物理性质来看，该培养基属于________培养基。
(2)在接种大肠杆菌前，需先将灭菌后的空白培养基放在恒温箱中培养一段时间，观察是否有菌落生成，其目的是_______________________________________________________。
(3)为检测严重污染水体中大肠杆菌的数量，将水样适当稀释后，取样涂布在上述平板培养基中，应选择颜色为________的菌落进行计数。该方法是通过统计平板上的菌落数来推测样品中的活菌数，其原理是_______________________________________________________。
答案 (1)碳源、氮源 固体 (2)检测培养基制备是否合格(或灭菌是否彻底) (3)黑色 当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌
11．北方每年在小麦丰收的季节，焚烧秸秆火焰四起，烟雾弥漫，不但导致严重的雾霾而且造成资源的浪费。科学家为了解决这个问题，努力寻找分解秸秆中纤维素的微生物，他们做了如下实验，据图回答：
(1)根据图甲，选择培养纤维素分解菌要用__________。为了鉴别纤维素分解菌，常在培养基中加入________。为了统计样品中活菌的数目，常用方法除稀释涂布平板法外，还有________________的方法。
(2)图乙是培养出的单菌落示意图，最适合分解秸秆的两个菌落是________(填数字)，纤维素分解菌将纤维素最终分解为________________。从图中可以看出培养基上菌落数较少，推测可能的原因是______________________________________________________________。
(3)为了长期保存该微生物，可以采用________________的方法。
答案 (1)选择培养基 刚果红(CR) 显微镜直接计数
(2)1和4 葡萄糖 土壤中纤维素分解菌较少，稀释的倍数太大 (3)甘油管藏
解析 (1)从土壤样液中筛选能分解纤维素的细菌所用的培养基是选择培养基。在培养基中加入刚果红，刚果红会与纤维素形成红色复合物，如果纤维素被分解，则培养基表面会形成以纤维素分解菌为中心的透明圈 ，可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。统计样品中活菌的数目，常用稀释涂布平板法或显微镜直接计数。 (2)透明圈的大小反映了细菌分解纤维素能力大小，培养基中大的透明圈就是分解纤维素多的地方，所以图乙中最适合分解秸秆的两个菌落是1和4；纤维素是多糖，最终被分解菌分解成葡萄糖；从图中可以看出培养基上菌落数较少，推测可能是土壤中纤维素分解菌较少，稀释的倍数太大所致。(3)长期保存菌种可用甘油管藏的方法。
12．(2021·江西南昌二中高三期中)回答有关微生物培养的问题：
(1)厨房中的厨余垃圾多为湿垃圾，湿垃圾处理的有效方法之一是用微生物对其进行降解。如图表示筛选高效降解淀粉菌种的过程。
配制培养基后需进行灭菌处理，常用的灭菌方法是____________________。培养基中加入的碳源是________。据图，菌落①与菌落②周围产生了透明圈，产生透明圈的原因是_______________________________________________________________________。
(2)某公司研发的一种培养大肠杆菌的培养基配方为蛋白胨10克、葡萄糖5克、蔗糖5克、KH2PO4 2克、显色剂(伊红美蓝)0.2 g、琼脂12克，将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1 000 mL。根据用途划分，该培养基属于____________培养基，若要分离能分解尿素的细菌，需对培养基作出的两项调整是_____________________________________________。
(3)对同一浓度的脲酶生产菌稀释液，分别用血细胞计数板计数和稀释涂布平板法计数，若不存在实验误操作，则前者的数量________(填“多于”“等于”或“小于”)后者，其原因是________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
答案 (1) 高压蒸汽灭菌法 淀粉 淀粉遇碘液显蓝色，产淀粉酶的菌落周围淀粉被水解，形成透明圈 (2)鉴别 将蛋白质换为尿素，伊红美蓝换成酚红 (3)多于 前者产脲酶菌是分散的或活菌和死菌一起计数，后者存在多个产脲酶菌形成一个菌落的情况或只计数活菌
解析 (1)培养基灭菌常用高压蒸汽灭菌法。本实验目的是筛选高效降解淀粉的菌种，为了抑制不能分解淀粉的菌种的繁殖，培养基中需加入淀粉作为唯一碳源。淀粉遇碘液显蓝色，产淀粉酶的菌落周围淀粉被水解，因此会形成透明圈，图中菌落①与菌落②周围产生了透明圈，说明菌落①与菌落②能产生淀粉酶。
(2)该培养基中含有显色剂(伊红美蓝)，可用于鉴别大肠杆菌，应该属于鉴别培养基。分离能分解尿素的细菌时应该以尿素为唯一氮源，因此需要将蛋白胨换成尿素；鉴定分解尿素的细菌，需要使用酚红指示剂，所以应该将伊红美蓝换成酚红。
13．尿素是一种重要的农业氮肥，但若不经细菌的分解，就不能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物种类和数量繁多，同学们试图筛选出能高效降解尿素的细菌，设计了“土壤中分解尿素细菌的筛选与计数实验”，过程如下所示：
(1)在接种前，进行①～⑤系列操作的意图是________________________________。据题意，每次为使菌液稀释10倍，应加入的无菌水量是________mL。
(2)为达到实验目的，本实验所配制的培养基成分不应包括____________(填入下列序号)，原因是________________________________________________________________________。
①水 ②无机盐(不含氮) ③NH4NO3 ④尿素 ⑤葡萄糖 ⑥牛肉膏 ⑦蛋白胨 ⑧琼脂
(3)本实验采用的接种工具是________。微生物的不同接种技术的操作方法各不相同，但其操作过程中都必须________________。
(4)某同学接种了3个培养皿，一段时间后3个培养皿中分别长出了54、46、50个菌落，根据实验结果，该1 g土壤样本中约有分解尿素的细菌________个。
答案 (1)使菌液按一定的梯度稀释 9 (2)③⑥⑦ 培养基中只有以尿素为唯一的氮源，才能起到选择作用 (3)涂布器 防止杂菌污染 (4)5×108
解析 1 g土样被稀释了106倍，则1 g土壤中细菌数为(54＋46＋50)÷3÷0.1×(1×106)＝5×108(个)。成分
蛋白胨
乳糖
磷酸二
氢钾
琼脂
蒸馏水
2%的伊红水溶液
0.5%的美蓝水溶液
含量
10 g
10 g
2 g
20～30 g
1 000 mL
20 mL
13 mL
1．(2021·辽宁沈阳一中月考)下面有关微生物培养、分离等的叙述，错误的是( )
A．检验自来水中大肠杆菌数是否超标，可用稀释涂布平板法来分离并计数
B．检测同种水样中细菌的数量时，牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落数大于选择培养基
C．配制培养基时要注意各种营养成分，必须含有碳源、氮源、无机盐、水及生长因子
D．对于经常使用的菌种可采用试管固体斜面临时保存，但该方法保存的菌种易变异
答案 C
解析 当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌，A正确；检测同种水样中细菌的数量时，由于选择培养基具有选择作用，因此会导致牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落数大于选择培养基，B正确；培养基不一定都含有碳源、氮源，如培养自养型微生物的培养基中不需加入碳源、分离自生固氮菌的培养基中，不需加入氮源，C错误；对于经常使用的菌种可采用试管固体斜面临时保存，但该方法保存的菌种易被污染或产生变异，D正确。
2．下列涂布平板操作过程错误的是( )
A．将涂布器在酒精灯火焰上灼烧，直到烧红
B．取少量菌液滴加在培养基表面
C．将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，待酒精燃尽后，冷却8～10 s再用
D．涂布时可转动培养皿，使菌液涂布均匀
答案 A
解析 将沾有少量酒精的涂布器在酒精灯火焰上引燃，待酒精燃尽后，冷却8～10 s再用，A项错误、C项正确；涂布时，涂布器可以不动，可转动培养皿，使菌液涂布均匀，D项正确。
3．(2021·山东金乡一中高三月考)原油中含有大量有害的、致癌的多环芳烃。土壤中有些细菌可以利用原油中的多环芳烃为碳源，在培养基中形成分解圈。为筛选出能高效降解原油的菌株并投入除污，某小组同学设计了相关实验。下列有关实验的叙述，不正确的是( )
A．应选择被原油污染的土壤取样
B．配制以多环芳烃为唯一碳源的选择培养基
C．将土壤稀释液灭菌后接种到选择培养基上
D．能形成分解圈的即为所需菌种
答案 C
解析 筛选能够利用多环芳烃为碳源的菌种，在被原油污染的土壤中含有所需菌种，所以需配制来源于被原油污染的土壤稀释液，A正确；配制选择性培养基，该培养基与通用培养基成分的主要区别是以原油(多环芳烃)为唯一碳源，B正确；在无菌环境下，将土壤稀释液接种到选择培养基上，将土壤稀释液灭菌后会杀死原有菌种，C错误；题述“有些细菌可以利用原油中的多环芳烃为碳源，在培养基中形成分解圈”，所在选择性培养基上能形成分解圈的即为所需菌种，D正确。
4．在涂布有大肠杆菌的培养基上进行抑菌实验，在a、b、c处分别贴浸有不同抗生素(浓度相同)的无菌滤纸片，d处滤纸片浸有无菌水。培养后的结果如图。以下判断错误的是( )
A．a处抑菌效果小于b处
B．b处的滤纸片没有沥干
C．c处抗生素无效
D．d为对照
答案 A
解析 透明圈大的抑菌效果好，透明圈小的抑菌效果弱。d为空白对照，与d处的比较可说明a处抑菌效果与b处相当，A项错误。
5．(2021·安徽六安市城南中学高三月考)通过实验测定土壤中的细菌数量，下列与此操作有关的叙述中，不正确的是( )
A．用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板
B．取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1 mL，分别涂布于各组平板上
C．将培养皿倒置，37 ℃恒温培养24～48小时
D．选择菌落数在300个以上的培养皿进行计数
答案 D
解析 用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌即高压蒸汽灭菌后倒平板，待冷却后备用，A正确；取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1 mL，分别涂布于各组平板上，B正确；细菌培养时，要将培养皿倒置培养，防止冷凝水滴落到平板上造成污染，并置于37 ℃恒温箱中培养24～48小时，C正确；计数时，选择菌落数在30～300个的一组平板为代表进行计数，而不是选择菌落数在300个以上的培养皿进行计数，D错误。
6．(2021·河北衡水高三月考)秸秆还田可增加土壤肥力，缓解环境污染。为分离分解纤维素的微生物菌种，实现废物的资源化利用，研究人员设计了“土壤取样→选择培养→梯度稀释→涂布平板→挑选菌株”的实验流程。下列叙述错误的是( )
A．配制培养基时，应在高压蒸汽灭菌之后调节pH
B．选择培养时，应使用纤维素为唯一碳源的培养基
C．进行梯度稀释时，应在酒精灯火焰旁完成各种操作
D．挑选菌株后，应将使用过的培养基进行灭菌后再丢弃
答案 A
解析 配制培养基时，应在高压蒸汽灭菌之前调节pH，避免灭菌之后调pH造成杂菌污染，A错误；选择培养时，为分离分解纤维素的微生物菌种，应使用纤维素为唯一碳源的培养基，B正确；进行梯度稀释时，为了无菌操作，应在酒精灯火焰旁完成各种操作，C正确；挑选菌株后，为了防止造成污染，应将使用过的培养基进行灭菌后再丢弃，D正确。
7．平板划线法和稀释涂布平板法是接种微生物的两种常用方法，下列描述正确的是( )
A．都要将菌液进行一系列的梯度稀释
B．平板划线法是将不同稀释度的菌液通过接种环连续划在固体培养基表面
C．稀释涂布平板法是将不同稀释度的菌液倒入液体培养基中进行培养
D．都会在培养基表面形成单个的菌落
答案 D
解析 平板划线法不需要进行梯度稀释，稀释涂布平板法需要将不同稀释度的菌液涂布到固体培养基的表面。平板划线法和稀释涂布平板法都能在培养基表面形成单个的菌落。
8．下列有关微生物培养与应用的说法，正确的是( )
A．天然培养基是指直接取自自然界不需加工的培养基
B．接种前需对培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手等进行严格的灭菌处理
C．大肠杆菌的纯化培养过程包括培养基的配制和纯化大肠杆菌两个阶段
D．分离分解尿素的细菌时，尿素是培养基中唯一的氮源和碳源
答案 C
解析 天然培养基是成分不明确的培养基，并不是不需加工配制的培养基；实验操作者的双手需进行消毒处理而不能灭菌；分离分解尿素的细菌时，尿素是唯一氮源但不是唯一的碳源。
9．(2021·黑龙江绥化一中高三月考)某生物兴趣小组用无菌水将葡萄皮上的微生物冲洗到无菌的锥形瓶中，然后按图甲所示过程进行醋酸菌的纯化培养。回答下列问题：
(1)在菌种培养过程中，需将平板倒置，其主要目的是______________________________
____________________________________。在操作B、C后，可根据菌落特征对醋酸菌进行筛选，原理是_______________________________________________________________。
(2)图甲中，液体培养的目的是________________________________________________。
(3)图甲中，C过程采用的微生物计数方法是________________。经培养后菌落在平板上的分布如图乙所示，推测接种时的操作失误是____________________。
(4)若测得稀释倍数为106的培养基平板上，菌落数的平均值为254，则每毫升样品中的菌株数是(涂布平板时所用稀释液的体积为0.1 mL)________________个。用该方法统计的醋酸菌数目会比活菌的实际值________(填“小”或“大”)，原因是______________________
________________________________________________。
答案 (1)防止培养皿盖上的水珠落入培养基造成污染，同时避免培养基中的水分过快地挥发 一定的培养条件下，同种微生物表现出稳定的菌落特征 (2)增加醋酸菌的浓度 (3)活菌计数法(或稀释涂布平板法) 涂布不均匀 (4)2.54×109 小 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落
解析 (1)在菌种培养过程中，需要倒平板操作，待平板冷凝后，要将平板倒置，其主要目的是防止皿盖上的冷凝水落入培养基造成污染，也可以避免培养基中的水分过快地挥发。一定的培养条件下，同种微生物表现出稳定的菌落特征，故可根据菌落特征对醋酸菌进行筛选。(2)液体培养有利于醋酸菌的繁殖，从而增加醋酸菌的浓度。(3)图甲C过程采用的是稀释涂布平板法接种，可以采用活菌计数法对微生物进行计数。图乙所示菌落分布相对较集中，推测是接种时涂布不均匀导致的。(4)若测得稀释倍数为106的培养基平板上，菌落数的平均值为254，则每毫升样品中的菌株数＝254÷0.1×106＝2.54×109(个)。当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，故用该方法统计的醋酸菌数目会比活菌的实际值小。
10．大肠杆菌是寄生于人和动物肠道中的细菌，其代谢产物能与染料伊红美蓝反应，使菌落呈黑色。下面是其培养基配方：
回答下列问题：
(1)该培养基中，蛋白胨为大肠杆菌提供的主要营养有________________和维生素。从物理性质来看，该培养基属于________培养基。
(2)在接种大肠杆菌前，需先将灭菌后的空白培养基放在恒温箱中培养一段时间，观察是否有菌落生成，其目的是_______________________________________________________。
(3)为检测严重污染水体中大肠杆菌的数量，将水样适当稀释后，取样涂布在上述平板培养基中，应选择颜色为________的菌落进行计数。该方法是通过统计平板上的菌落数来推测样品中的活菌数，其原理是_______________________________________________________。
答案 (1)碳源、氮源 固体 (2)检测培养基制备是否合格(或灭菌是否彻底) (3)黑色 当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌
11．北方每年在小麦丰收的季节，焚烧秸秆火焰四起，烟雾弥漫，不但导致严重的雾霾而且造成资源的浪费。科学家为了解决这个问题，努力寻找分解秸秆中纤维素的微生物，他们做了如下实验，据图回答：
(1)根据图甲，选择培养纤维素分解菌要用__________。为了鉴别纤维素分解菌，常在培养基中加入________。为了统计样品中活菌的数目，常用方法除稀释涂布平板法外，还有________________的方法。
(2)图乙是培养出的单菌落示意图，最适合分解秸秆的两个菌落是________(填数字)，纤维素分解菌将纤维素最终分解为________________。从图中可以看出培养基上菌落数较少，推测可能的原因是______________________________________________________________。
(3)为了长期保存该微生物，可以采用________________的方法。
答案 (1)选择培养基 刚果红(CR) 显微镜直接计数
(2)1和4 葡萄糖 土壤中纤维素分解菌较少，稀释的倍数太大 (3)甘油管藏
解析 (1)从土壤样液中筛选能分解纤维素的细菌所用的培养基是选择培养基。在培养基中加入刚果红，刚果红会与纤维素形成红色复合物，如果纤维素被分解，则培养基表面会形成以纤维素分解菌为中心的透明圈 ，可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。统计样品中活菌的数目，常用稀释涂布平板法或显微镜直接计数。 (2)透明圈的大小反映了细菌分解纤维素能力大小，培养基中大的透明圈就是分解纤维素多的地方，所以图乙中最适合分解秸秆的两个菌落是1和4；纤维素是多糖，最终被分解菌分解成葡萄糖；从图中可以看出培养基上菌落数较少，推测可能是土壤中纤维素分解菌较少，稀释的倍数太大所致。(3)长期保存菌种可用甘油管藏的方法。
12．(2021·江西南昌二中高三期中)回答有关微生物培养的问题：
(1)厨房中的厨余垃圾多为湿垃圾，湿垃圾处理的有效方法之一是用微生物对其进行降解。如图表示筛选高效降解淀粉菌种的过程。
配制培养基后需进行灭菌处理，常用的灭菌方法是____________________。培养基中加入的碳源是________。据图，菌落①与菌落②周围产生了透明圈，产生透明圈的原因是_______________________________________________________________________。
(2)某公司研发的一种培养大肠杆菌的培养基配方为蛋白胨10克、葡萄糖5克、蔗糖5克、KH2PO4 2克、显色剂(伊红美蓝)0.2 g、琼脂12克，将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1 000 mL。根据用途划分，该培养基属于____________培养基，若要分离能分解尿素的细菌，需对培养基作出的两项调整是_____________________________________________。
(3)对同一浓度的脲酶生产菌稀释液，分别用血细胞计数板计数和稀释涂布平板法计数，若不存在实验误操作，则前者的数量________(填“多于”“等于”或“小于”)后者，其原因是________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
答案 (1) 高压蒸汽灭菌法 淀粉 淀粉遇碘液显蓝色，产淀粉酶的菌落周围淀粉被水解，形成透明圈 (2)鉴别 将蛋白质换为尿素，伊红美蓝换成酚红 (3)多于 前者产脲酶菌是分散的或活菌和死菌一起计数，后者存在多个产脲酶菌形成一个菌落的情况或只计数活菌
解析 (1)培养基灭菌常用高压蒸汽灭菌法。本实验目的是筛选高效降解淀粉的菌种，为了抑制不能分解淀粉的菌种的繁殖，培养基中需加入淀粉作为唯一碳源。淀粉遇碘液显蓝色，产淀粉酶的菌落周围淀粉被水解，因此会形成透明圈，图中菌落①与菌落②周围产生了透明圈，说明菌落①与菌落②能产生淀粉酶。
(2)该培养基中含有显色剂(伊红美蓝)，可用于鉴别大肠杆菌，应该属于鉴别培养基。分离能分解尿素的细菌时应该以尿素为唯一氮源，因此需要将蛋白胨换成尿素；鉴定分解尿素的细菌，需要使用酚红指示剂，所以应该将伊红美蓝换成酚红。
13．尿素是一种重要的农业氮肥，但若不经细菌的分解，就不能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物种类和数量繁多，同学们试图筛选出能高效降解尿素的细菌，设计了“土壤中分解尿素细菌的筛选与计数实验”，过程如下所示：
(1)在接种前，进行①～⑤系列操作的意图是________________________________。据题意，每次为使菌液稀释10倍，应加入的无菌水量是________mL。
(2)为达到实验目的，本实验所配制的培养基成分不应包括____________(填入下列序号)，原因是________________________________________________________________________。
①水 ②无机盐(不含氮) ③NH4NO3 ④尿素 ⑤葡萄糖 ⑥牛肉膏 ⑦蛋白胨 ⑧琼脂
(3)本实验采用的接种工具是________。微生物的不同接种技术的操作方法各不相同，但其操作过程中都必须________________。
(4)某同学接种了3个培养皿，一段时间后3个培养皿中分别长出了54、46、50个菌落，根据实验结果，该1 g土壤样本中约有分解尿素的细菌________个。
答案 (1)使菌液按一定的梯度稀释 9 (2)③⑥⑦ 培养基中只有以尿素为唯一的氮源，才能起到选择作用 (3)涂布器 防止杂菌污染 (4)5×108
解析 1 g土样被稀释了106倍，则1 g土壤中细菌数为(54＋46＋50)÷3÷0.1×(1×106)＝5×108(个)。成分
蛋白胨
乳糖
磷酸二
氢钾
琼脂
蒸馏水
2%的伊红水溶液
0.5%的美蓝水溶液
含量
10 g
10 g
2 g
20～30 g
1 000 mL
20 mL
13 mL
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