高中生物二 微生物的选择培养和计数教案配套ppt课件
展开微生物的选择培养和计数(一)
科学实例:寻找耐高温的DNA聚合酶
聚合酶链式反应(PCR)是一种在体外扩增DNA片段的技术,此项技术要求使用耐高温的DNA聚合酶。1973年,布鲁克在美国黄石国家公园的一个热泉中发现了耐热的水生栖热菌,并从这种菌种提取出耐高温的DNA聚合酶。筛选原因:水生栖热菌能在70-80℃高温条件下生存,而绝大多数微生物在此条件下不能生存。
那么,如何从众多的微生物中筛选出单一菌种?
自然界中微生物数量繁多,种类庞杂,要想从中分离出需要的特定微生物并不容易,尤其当要分离的微生物在混合菌群中不是优势种群时,更难实现。
那么我们又如何达成这一目标呢?
科学家们应用选择性培养基解决了这一难题。
分离酵母菌、霉菌等真菌
能消除石油污染的微生物
③不加含碳有机物的无碳培养基
②不加氮源的无氮培养基
允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基,称为选择培养基。
尿素含氮量高,化学性质稳定,是一种重要的农业氮肥,尿素施入土壤后,被某些细菌分解成NH3,NH3再转化成NO3-、NH4+等才能被植物吸收。
土壤中尿素分解菌之所以能将尿素分解,是因为它们能合成脲酶:
怎样才能将分解尿素的细菌从土壤中分离出来?
培养基添加尿素作唯一氮源,只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素、缺乏氮源而不能生长发育繁殖,所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物。
配方二:培养可以分解尿素的细菌
普通培养基与选择培养基的比较
1、从物理性质看此培养基属于哪类?从用途上属于哪类培养基?
配方二是以尿素作唯一氮源的选择培养基
2、此培养基中共有哪些成分?在此培养基中哪些作为碳源、氮源?
碳源: 配方二氮源:
碳源、氮源、水、无机盐
稀释涂布平板法;是将菌液进行一系列梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面,进行培养。
1g土壤中有多少能分解尿素的细菌?
①铲取土样,将样品装入纸袋中
②将10g土样加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中,充分摇匀,制成菌液。
②取1mL上清液加入盛有9mL无菌水的试管中,依次等比稀释。
稀释涂布平板法的操作过程
取土样用的小铁铲和盛土样的的信封在使用前都要灭菌
③取0.1mL菌液,滴加到培养基表面。
④将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中。
⑤将涂布器放在火焰上灼烧,待酒精燃尽、涂布器冷却后,再进行涂布。
⑥用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面。涂布时可转动培养皿,使涂布均匀。
待涂布的菌液被培养基吸收后,将平板倒置,培养
放入37℃恒温箱中培养1~2d
1.为培养和分离出酵母菌并淘汰杂菌,常在培养基中加入( )A. 较多的氮源物质 B. 较多的碳源物质C. 青霉素类药物 D. 高浓度食盐
2.能合成脲酶的微生物所需要的碳源和氮源分别是( ) A. CO2和N2 B. 葡萄糖和N2 C. CO2和尿素 D. 葡萄糖和尿素
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