高考生物一轮对点训练：29-1 基因工程的工具与操作程序 a Word版含解析

这是一份高考生物一轮对点训练：29-1 基因工程的工具与操作程序 a Word版含解析，共5页。
　[考法综述]　该考点主要考查工具酶和载体的作用特点、目的基因的获取方法、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞和目的基因的检测与鉴定，高考对该考点常以图像、材料形式考查基因表达载体的构建和目的基因的检测与鉴定，注重图示信息的获取能力和理解应用能力。命题法1　限制性核酸内切酶、DNA连接酶等酶的作用1.chlL基因是蓝藻DNA上控制叶绿素合成的基因，为研究该基因对叶绿素合成的控制，需要构建该种生物缺失chlL基因的变异株细胞。技术路线如图甲所示，请据图分析回答：(1)与真菌相比较，蓝藻在结构上最主要的特点是________________，在功能上最主要的特点是_______________。(2)①②过程中均使用的工具酶有______________________。(3)构建重组质粒B在整个操作过程中的目的是______________和________________。(4)若含有chlL基因的DNA片段和选用的质粒上的限制酶切割位点如图乙所示。请回答：①构建含chlL基因的重组质粒A时，应选用的限制酶是________，对________________进行切割。②同时用酶1和酶4切割图乙中的质粒，则产生含有1800对碱基和8200对碱基的两种片段；用图中四种酶同时切割此质粒，则产生含有600对碱基和8200对碱基的两种片段；若换用酶1和酶3同时切割此质粒，则产生的片段是___________________________。答案　(1)没有以核膜为界限的细胞核　能够进行光合作用(2)限制性核酸内切酶和DNA连接酶(3)破坏chlL基因　操作成功后筛选出该变异株细胞(4)①酶1和酶3　质粒和含chlL基因的DNA②含有1200对碱基和8800对碱基的两种片段解析　(1)蓝藻为原核生物，没有以核膜为界限的细胞核，其体内含有光合色素，能进行光合作用。(2)表达载体构建时需限制酶和DNA连接酶等工具酶。(3)由题干信息“构建该种生物缺失chlL基因的变异株细胞”知构建重组质粒B的目的在于破坏chlL基因并筛选出变异株细胞。(4)①由图乙知，获得chlL基因需酶1和酶3对此基因所在的DNA进行切割，同时对质粒也要用同种酶切割处理，以便构建重组质粒A。②由题意知四种酶同时切割时含600对碱基的片段共有3个。若用酶1和酶3同时切割时，产生的片段有8200＋600＝8800对碱基；另一为600×2＝1200对碱基。【解题法】　确定限制酶的种类(1)根据目的基因两端的限制酶切点确定限制酶的种类①应选择切点位于目的基因两端的限制酶，如图甲可选择PstⅠ。②不能选择切点位于目的基因内部的限制酶，如图甲不能选择SmaⅠ。③为避免目的基因和质粒的自身环化和随意连接，也可使用不同的限制酶切割目的基因和质粒，如图甲也可选择用PstⅠ和EcoRⅠ两种限制酶(但要确保质粒上也有这两种酶的切点)。(2)根据质粒的特点确定限制酶的种类①所选限制酶要与切割目的基因的限制酶相一致，以确保具有相同的黏性末端。②质粒作为载体必须具备标记基因等，所以所选择的限制酶尽量不要破坏这些结构，如图乙中限制酶SmaⅠ会破坏标记基因；如果所选酶的切点不止一个，则切割重组后可能丢失某些片段，若丢失的片段含复制起点区，则切割重组后的片段进入受体细胞后不能自主复制。命题法2　基因工程的操作过程2.绞股蓝细胞中含有抗烟草花叶病毒(TMV)基因，可以合成一种抗TMV蛋白，叶片对TMV具有抗感染性。烟草是重要的经济作物，由于TMV的感染会导致其大幅度减产，研究人员利用转基因技术培育出了抗TMV的烟草，主要流程如下图所示：(1)科学家首先从绞股蓝细胞中提取抗TMV基因转录的RNA，然后合成目的基因。图中①过程表示________，获得的DNA必须在两侧添加________和________。(2)过程③构建重组Ti质粒时，必须使用____________和____________两种工具酶。(3)由图分析，在过程③构建的重组Ti质粒上应该含有卡那霉素抗性基因作为________，重组Ti质粒导入烟草体细胞的方法是_________________________________________________________。(4)在过程⑤培养基中除含有卡那霉素及植物必需的各种营养成分外，还必须添加________，以保证受体细胞能培养成再生植株。(5)过程⑥可采取______________________的方法，检测植株是否合成了抗TMV蛋白。在个体水平的鉴定过程中，可通过____________________的方法来确定植株是否具有抗性。答案　(1)逆(反)转录　启动子　终止子　(2)限制性核酸内切酶(限制酶)　DNA连接酶　(3)标记基因　农杆菌转化法　(4)植物激素(生长素和细胞分裂素)　(5)抗原—抗体杂交　接种烟草花叶病毒解析　(1)利用RNA获得目的基因的方法是反转录法，目的基因的两端分别为启动子和终止子。(3)质粒上的抗性基因常用作标记基因。(5)常用抗原—抗体杂交的方法检测是否合成了特定的蛋白质；常用接种实验从个体水平上检测是否具有抗病性。【解题法】　基因工程中的几种检测方法