生物选择性必修3一 微生物的基本培养技术多媒体教学课件ppt

这是一份生物选择性必修3一 微生物的基本培养技术多媒体教学课件ppt，共32页。PPT课件主要包含了酵母菌的纯培养，稀释倍数等内容，欢迎下载使用。
向经过杀菌处理的牛奶中添加某些对人体有益的细菌，再经过发酵就可以制成酸奶。由于制作工艺并不复杂，一些人会在家里自制酸奶。自制酸奶虽然方便，但是食用自制酸奶导致肠胃不适的事例屡见不鲜，主要原因是在制作过程中有杂菌混入。那么，怎样才能保证无处不在的杂菌不混入发酵物中呢？

微生物的基本培养技术WEISHENGWUDEJIBENPEIYANGJISHU
1．培养基的概念 培养基是为人工培养微生物而制备的，适合微生物生长、繁殖或积累代谢产物的营养基质。
（1）物理状态分类：液体培养基和固体培养基
（2）成分类：天然培养基、合成培养基、半合成培养基
（3）用途分类：加富培养基、选择性培养基和鉴别培养基
（1）合成培养基。合成培养基的各种成分完全是已知的各种化学物质。这种培养基的化学成分清楚，组成成分精确，重复性强，但价格较贵，而且微生物在这类培养基中生长较慢。如高氏一号合成培养基、察氏（Czapek）培养基等。
（2）天然培养基。由天然物质制成，如蒸熟的马铃薯和普通牛肉汤，前者用于培养霉菌，后者用于培养细菌。这类培养基的化学成分很不恒定，也难以确定，但配制方便，营养丰富，所以常被采用。
（3）半合成培养基。在天然有机物的基础上适当加入已知成分的无机盐类，或在合成培养基的基础上添加某些天然成分，如培养霉菌用的马铃薯葡萄糖琼脂培养基。这类培养基能更有效地满足微生物对营养物质的需要。
（4）加富培养基 是在培养基中加入血、血清、动植物组织提取液，用以培养要求比较苛刻的某些微生物。
（5）选择性培养基 是根据某一种或某一类微生物的特殊营养要求或对一些物理、化学抗性而设计的培养基。利用这种培养基可以将所需要的微生物从混杂的微生物中分离出来。
（6）鉴别培养基 是在培养基中加入某种试剂或化学药品，使培养后会发生某种变化，从而区别不同类型的微生物。
3．培养基的成分 各种培养基的配方不同，但一般都含有水、碳源、氮源和无机盐等最基本的物质。
* 培养基还需满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及O2的需求。
1．微生物 是一切肉眼看不见或者看不清的微小生物的总称，包括病毒、细菌、放线菌、真菌等。2. 无菌技术：在微生物研究、医疗操作、食品生产中采取的防止其他微生物污染的技术。
3．消毒 （1）消毒是指用较为温和的物理方法、化学或生物方法杀灭物体表面或内部一部分微生物。 （2）方法：煮沸消毒法（如100 ℃下5～6 min可以杀死微生物的营养细胞和一部分芽孢）、巴氏消毒法、化学药剂消毒法
巴氏消毒法是由法国微生物学家巴斯德发明的低温杀菌法，是一种利用较低的温度既可杀死病菌又能保持物品中营养物质风味不变的消毒法
4．灭菌 （1）灭菌是指用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。 （2）常用的方法：湿热灭菌、干热灭菌和灼烧灭菌等。
1．纯培养物——由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物。
2．纯培养——获得纯培养物的过程。
（1）培养基灭菌：高压蒸汽灭菌——121℃，气压100kPa，15-30min；培养皿灭菌：干热灭菌——160~170 ℃灭菌2h。
通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。经数次划线后培养，可以分离得到单菌落。
（1）接种：指在无菌条件下将微生物或含菌材料转移到合适其生长繁殖的培养基中的过程。（2）不同接种工具的使用 接种针——用于穿刺接种 接种环——用于斜面接种或平板划线接种 玻璃涂布器——用于涂布平板接种 （3）接种的方法：涂布平板法、穿刺接种法、斜面接种法、平板划线法
（3）接种的方法：涂布平板法、穿刺接种法、斜面接种法、平板划线法
（1）平板划线法①平板划线法的含义：用带有微生物的接种环在平板培养基表面通过 分区划线 而达到纯化分离微生物的方法。②注意事项：接种和划线操作时需要在酒精灯火焰附近进行。③培养结果：可以得到由单个细菌增殖而形成的 菌落。
（2）几种常用的划线方法及注意事项 划线方法
完成平板划线后，待菌液被培养基吸收，将接种后的平板和一个未接种的平板倒置，放入28℃左右（培养温度因酵母菌种类的不同而稍有差异）的恒温培养箱中培养24~48h。
在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他微生物通过他人培养基，称为选择培养基。
2.选择培养基的选择作用（1）原理：根据不同微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性不同而制备培养基。（2）方法：①在培养基中加入某种化学物质。例如，加入青霉素可以分离出酵母菌和霉菌；加入高浓度的食盐可以得到金黄色葡萄球菌。
②改变培养基中的营养成分。例如，缺乏氮源时可以分离固氮微生物；石油作为唯一碳源时，可以分离出能消除石油污染的微生物；用含无机碳源的培养基分离自养型微生物。③改变微生物的培养条件。例如，将培养基放在高温环境中培养可以得到耐高温的微生物；用普通培养基在无氧条件下分离厌氧型和兼性厌氧型微生物。
2.选择培养基的选择作用（2）方法：①在培养基中加入某种化学物质。例如，加入青霉素可以分离出酵母菌和霉菌；加入高浓度的食盐可以得到金黄色葡萄球菌。
1.从微生物群体中分离出目标微生物
（2）分离原理 选择培养的原理和稀释的原理
（3）分离方法 平板分离法 选择培养分离
（1）将特定的微生物个体从同种微生物群体中或者从混杂的微生物群体中分离出来的技术，叫作微生物的分离（ micrrganlsm separatin）
（3）分离方法 平板分离法：包括涂布平板法和 法。能将单个微生物分离和固定在 培养基表面或里面，每个孤立的活微生物体经过生长、繁殖均可形成单个 。 选择培养分离：科学家针对某种微生物的特性，设计一个特定的环境，使之特别适合这种微生物的生长，而 其他微生物的生长。这种通过 进行微生物纯培养分离的技术，称为选择培养分离。
2.土壤微生物的分离和稀释涂布平板法操作步骤
（1）铲取土样，将样品装入纸袋。
（2）将10g土样加入盛有90mL无菌水的锥形瓶，充分摇匀。取1mL上清液加入盛有9mL无菌水的试管中，依次等比稀释。
（3）从稀释倍数为1×107试管中取0.1mL菌液，滴加到培养基表面。
（4）用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面。涂布时可转动培养皿，使涂布均匀。
取0.1mL菌液，滴加到培养基表面。
用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面。涂布时可转动培养皿，使涂布均匀。
1．涂布平板法培养和计数土壤微生物（1）过程：
（2）计数：每克土壤样品的细菌数＝某一稀释度几次重复培养后的菌落平均数× （涂布所用稀释液为1 mL）。
2．显微镜直接计数法（1）原理：利用 ，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物的数量。
（2）血球计数板：血球计数板是一块特制的 。其上有特定面积为1 mm2、高为0.1 mm的计数室，一个计数室又被分成 个（或16个）中方格，每个中方格再被划分成16个（或25个）小方格，每个计数室都由 个小方格组成。（3）操作过程：①将清洁干燥的血球计数板盖上 ，用无菌的 吸取摇匀的土壤微生物培养液，在盖玻片的边缘滴一小滴，让培养液沿着缝隙靠毛细渗透作用自动进入计数室。
②加样后静止 min，然后在显微镜下计数4～5个中格中的细菌数，并求出每个小格所含细菌的平均数，再按计算公式求出每毫升样品中所含的菌体总数。（4）计算公式：1 mL悬液所含菌体总数＝每小格平均菌体数×400×104× 。
3．分离土壤中能分解尿素的微生物（1）实验目的：分离以尿素为唯一氮源的微生物。（2）培养基配方特点： 是唯一的氮源。（3）基本步骤：制备培养基→制备 → →观察。