2023届高考生物二轮复习细胞工程作业含答案

这是一份2023届高考生物二轮复习细胞工程作业含答案，共21页。试卷主要包含了花药离体培养是重要的育种手段等内容，欢迎下载使用。
专题26　细胞工程
高频考点
考点1　植物细胞工程
该考点中基础部分训练内容为植物组织培养和植物体细胞杂交的相关知识。重难部分为结合具体实例考查考生对该部分知识的理解与应用及实验探究的能力。
基础
1.(2021江苏,5,2分)植物组织培养技术常用于商业化生产,其过程一般为:无菌培养物建立→培养物增殖→生根培养→试管苗移栽及鉴定。下列相关叙述错误的是(　　)
A.为获得无菌培养物,外植体要消毒处理后才可接种培养
B.组织培养过程中也可无明显愈伤组织形成,直接形成胚状体等结构
C.提高培养基中生长素和细胞分裂素的比值,有利于诱导生根
D.用同一植株体细胞离体培养获得的再生苗不会出现变异
答案　　D　
2.(2018江苏,8,2分)花药离体培养是重要的育种手段。如图是某二倍体植物花药育种过程的示意图,下列叙述正确的是　(　　)

A.为了防止微生物污染,过程①所用的花药需在70%乙醇中浸泡30 min
B.过程②的培养基中需添加较高浓度的细胞分裂素以利于根的分化
C.过程③逐步分化的植株中可筛选获得纯合的二倍体
D.过程④应将炼苗后的植株移栽到含有蔗糖和多种植物激素的基质上
答案　　C　
3.(2022江苏百校大联考二,13)通过植物组织培养技术,将植物组织细胞培养成胚状体,再用人工种皮包装得到人工种子(如图),这种人工种子在适宜条件下可萌发生长。相关叙述错误的是(　　)

A.培育胚状体时,所用的外植体、培养基都需要经过灭菌处理
B.制作人工种皮的材料必须能透气,便于胚状体进行有氧呼吸
C.人工胚乳中除含有糖类物质和矿质营养外,还应有植物激素等
D.与天然种子相比,人工种子具有能保持优良品种遗传特性的优点
答案　　A　
4.(2022南通一联,19)科研人员利用甲、乙两种植物的各自优势,通过植物细胞工程技术培育高产、 耐盐杂种植物的过程中,相关操作不合理的是(多选)(　　)
A.利用胰蛋白酶分别处理甲、乙植物以获得原生质体
B.利用电激或灭活的病毒诱导甲、乙原生质体的融合
C.利用秋水仙素诱导组织培养中愈伤组织细胞壁再生
D.将组培苗种在高盐环境中以便筛选出所需杂种植株
答案　　ABC　
重难
5.(2022南京、盐城一模,10)如图表示用两种不同技术手段将草莓①培育得到草莓②和③,比较这三种草莓,若不考虑突变等,遗传信息一定相同的是(　　)

A.仅①②　　　B.仅②③　　　C.仅①③　　　D.①②③
答案　　A　
6.(2021北京,7,2分)研究者拟通过有性杂交的方法将簇毛麦(2n=14)的优良性状导入普通小麦(2n=42)中。用簇毛麦花粉给数以千计的小麦小花授粉,10天后只发现两个杂种幼胚,将其离体培养,产生愈伤组织,进而获得含28条染色体的大量杂种植株。以下表述错误的是(　　)
A.簇毛麦与小麦之间存在生殖隔离
B.培养过程中幼胚细胞经过脱分化和再分化
C.杂种植株减数分裂时染色体能正常联会
D.杂种植株的染色体加倍后能产生可育植株
答案　　C　
7.(2020山东,13,2分)两种远缘植物的细胞融合后会导致一方的染色体被排出。若其中一个细胞的染色体在融合前由于某种原因断裂,形成的染色体片段在细胞融合后可能不会被全部排出,未排出的染色体片段可以整合到另一个细胞的染色体上而留存在杂种细胞中。依据该原理,将普通小麦与耐盐性强的中间偃麦草进行体细胞杂交获得了耐盐小麦新品种,过程如图所示。下列说法错误的是(　　)

A.过程①需使用纤维素酶和果胶酶处理细胞
B.过程②的目的是使中间偃麦草的染色体断裂
C.过程③中常用灭活的病毒诱导原生质体融合
D.耐盐小麦的染色体上整合了中间偃麦草的染色体片段
答案　　C　
8.(2022盐城伍佑中学调研一,18)马铃薯四倍体栽培种没有青枯病的抗性基因,少数马铃薯野生种存在青枯病的抗性基因。由于核型等差异,野生种难以与四倍体马铃薯栽培种直接杂交繁育,为获得具有抗青枯病的马铃薯栽培种,研究人员进行了植物体细胞杂交的实验研究,过程如图所示。下列有关叙述正确的是(　　)

A.在低渗溶液中,用纤维素酶和果胶酶处理A和B以获得两种原生质体
B.培育成的马铃薯新品种与野生型或四倍体栽培种之间存在核型差异
C.过程②的培养基中需添加等量的生长素类和赤霉素类植物生长调节剂
D.③为再分化过程,可用DNA分子杂交技术鉴定植株的抗病性状
答案　　B　
9.(2022南通如皋期末,13)甲品种青花菜具有由核基因控制的多种优良性状,但属于细胞质雄性不育品种。通过体细胞杂交,成功地将乙品种细胞质中的可育基因引入甲中。下列叙述错误的是(　　)
A.将甲、乙种子萌发后获取所需细胞,有利于筛选杂交细胞
B.获取原生质体时,使用纤维素酶和果胶酶,主要利用的是酶的高效性
C.将甲、乙原生质体融合时,可采取电融合法、离心法、PEG融合法等方法
D.融合前需将乙原生质体处理,使细胞核失活,防止产生多倍体植株
答案　　B　
考点2　动物细胞工程
该考点中基础部分训练内容为动物细胞培养、动物细胞融合与单克隆抗体的制备、动物体细胞核移植等知识;重难、综合部分为结合真实情境,分析相关过程、原理及所得的结果等,考查考生运用所学知识解答问题的能力。
基础
1.(2022湖北,7,2分)某兴趣小组开展小鼠原代神经元培养的研究,结果发现其培养的原代神经元生长缓慢,其原因不可能的是(　　)
A.实验材料取自小鼠胚胎的脑组织
B.为了防止污染将培养瓶瓶口密封
C.血清经过高温处理后加入培养基
D.所使用的培养基呈弱酸性
答案　　A　
2.(2021江苏,11,2分)下列关于哺乳动物胚胎工程和细胞工程的叙述,错误的是(　　)
A.细胞培养和早期胚胎培养的培养液中通常需添加血清等物质
B.早期胚胎需移植到经同期发情处理的同种雌性动物体内发育成个体
C.猴的核移植细胞通过胚胎工程已成功地培育出了克隆猴
D.将骨髓瘤细胞和B淋巴细胞混合,经诱导后融合的细胞即为杂交瘤细胞
答案　　D　
3.(2020天津,1,4分)在克隆哺乳动物过程中,通常作为核移植受体细胞的是去核的(　　)
A.卵原细胞　　　　　B.初级卵母细胞
C.次级卵母细胞　　　　　D.卵细胞
答案　　C　
4.(2020浙江7月选考,15,2分)下列关于病毒的叙述,错误的是　(　　)
A.有的病毒经灭活处理后,可用于细胞工程中介导动物细胞的融合
B.适当增加机体内参与免疫的细胞数量与活性,可提高对新型冠状病毒的抵御能力
C.在某人的分泌物中检测到新型冠状病毒,推测该病毒的增殖不依赖于宿主细胞
D.用高温高压处理病毒使其失去感染能力,原因之一是病毒的蛋白质发生了热变性
答案　　C　
重难
5.(2022南通如皋期末,17)如图是一种单克隆抗体应用于肿瘤治疗的作用原理图。阿霉素是一种抗肿瘤药,只有被碱性磷酸酶活化后才能抑制DNA和RNA的合成。下列说法正确的是(多选)(　　)

A.单克隆抗体的制备需要用到动物细胞融合技术
B.制备单克隆抗体时,需将碱性磷酸酶注射到小鼠体内
C.该技术能减轻阿霉素对正常细胞的伤害
D.活化阿霉素能抑制细胞中的DNA复制和转录过程
答案　　ACD　
6.(2022南京六校联合体期初,12)科学家通过转入四种基因,可使体细胞形成诱导多能干细胞(iPS细胞),并将其注射到无法发育到成体阶段的四倍体囊胚中,最终获得克隆鼠,经鉴定证实克隆鼠由iPS细胞发育而来并可繁殖后代,实验流程如图所示。下列叙述错误的是(　　)

A.可用显微注射法或用经过修饰的病毒导入四种基因
B.克隆鼠的体色为黑色且染色体组数与黑鼠相同
C.灰鼠受精卵第一次卵裂生成的子细胞经电激诱导两两融合后可发育成四倍体囊胚
D.该实验过程中使用到的技术有体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植等
答案　　D　
综合
7.(2022海南,20,13分)以我国科学家为主的科研团队将OSNL(即4个基因Oct4/Sox2/Nanog/Lin28A的缩写)导入黑羽鸡胚成纤维细胞(CEFs),诱导其重编程为诱导多能干细胞(iPS),再诱导iPS分化为诱导原始生殖细胞(iPGCs),然后将iPGCs注射到孵化2.5天的白羽鸡胚血管中,最终获得具有黑羽鸡遗传特性的后代,实验流程如图。回答下列问题。

(1)CEFs是从孵化9天的黑羽鸡胚中分离获得的,为了获得单细胞悬液,鸡胚组织剪碎后需用　　　　　　处理。动物细胞培养通常需要在合成培养基中添加　　　　等天然成分,以满足细胞对某些细胞因子的需求。 
(2)体外获取OSNL的方法有　　　　　　　(答出1种即可)。若要在CEFs中表达外源基因的蛋白,需构建基因表达载体,载体中除含有目的基因和标记基因外,还须有启动子和　　　　等。启动子是　　　　　　识别和结合的部位,有了它才能驱动　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。 
(3)iPS细胞和iPGCs细胞的形态、结构和功能不同的根本原因是　　　　　　　　　。 
(4)诱导iPS细胞的技术与体细胞核移植技术的主要区别是  　。 
(5)该实验流程中用到的生物技术有　　　　　　　　　　(答出2点即可)。 
答案　　(1)胰蛋白酶、胶原蛋白酶等　血清　(2)基因文库法、PCR技术、人工合成法(任答1种)　终止子　RNA聚合酶　目的基因转录出mRNA,最终表达出所需要的蛋白质　(3)基因的选择性表达　(4)诱导iPS细胞的技术是将已分化的细胞诱导为类似胚胎干细胞的一种细胞(iPS),再诱导iPS分化为诱导原始生殖细胞(iPGCs)的技术;体细胞核移植技术是将动物一个细胞的细胞核移入去核的卵母细胞中,使这个重新组合的细胞发育成新胚胎,继而发育成动物个体的技术　(5)基因工程、动物细胞培养
考点3　胚胎工程
该考点中基础部分训练内容为胚胎工程的理论基础、胚胎工程技术及其应用;重难、综合部分结合具体情境考查相关培育过程、原理及其涉及的基因工程、细胞工程的分析与探究。
基础
1.(2022盐城伍佑中学调研一,19)下列关于胚胎干细胞核移植技术和胚胎移植技术的叙述,错误的是(多选)(　　)
A.从供体的内细胞团分离胚胎干细胞,培养时需接种在滋养层上
B.采集体内成熟的卵细胞经过去核处理,作为核移植的受体细胞
C.胚胎干细胞具有发育全能性和二倍体核型,理论上能被诱导分化为机体内所有细胞
D.胚胎移植中,需向受体注射免疫抑制剂,以避免受体对植入胚胎产生排斥反应
答案　　ABD　
2.(2018江苏,10,2分)下列关于采用胚胎工程技术实现某良种肉用牛快速繁殖的叙述,正确的是(　　)
A.采取激素注射等方法对良种母牛作超数排卵处理
B.体外培养发育到原肠胚期的胚胎即可进行移植
C.使用免疫抑制剂以避免代孕牛对植入胚胎的排斥反应
D.利用胚胎分割技术,同卵多胎较同卵双胎成功率更高
答案　　A　
3.(2017江苏,14,2分)下列关于小鼠体外受精及胚胎发育的叙述,错误的是(　　)
A.精子在获能液中于37 ℃、5%CO2条件下培养的目的是使精子获能
B.小鼠在特定光控周期条件下饲养,注射相关激素有促进超数排卵的作用
C.分割的胚胎细胞有相同的遗传物质,因此发育成的个体没有形态学差异
D.注射到囊胚腔中的胚胎干细胞可以参与个体器官的发育
答案　　C　
重难
4.(2022南通如皋一模,9)牛胚胎移植实验的主要流程如图,下列相关叙述正确的是(　　)

A.①过程需要注射性激素,目的是获得更多的卵母细胞
B.③过程是以哺乳动物早期胚胎未与子宫建立组织上的联系为前提
C.④过程是“对胚胎进行质量检查”,可移植的胚胎应发育到囊胚或原肠胚
D.⑤过程成功率的高低主要取决于受体的排斥程度
答案　　B　
5.(2022盐城伍佑中学调研一,14)我国科研人员利用大鼠、小鼠两个远亲物种创造出世界首例异种杂合二倍体胚胎干细胞(AdESCs),过程如图所示。该细胞可分化成各种杂种体细胞,为研究不同物种性状差异的分子机制提供了模型。相关叙述不正确的是(　　)

A.单倍体囊胚1最可能由小鼠的卵子经体外诱导培养获得
B.体外培养AdESCs需向培养液中添加动物血清等天然成分
C.该项技术突破生殖隔离获得了哺乳动物远亲物种的杂种细胞
D.AdESCs的染色体组数与大鼠和小鼠体细胞融合的杂种细胞相同
答案　　D　
6.(2020山东,14,2分)经遗传改造的小鼠胚胎干细胞注入囊胚,通过胚胎工程的相关技术可以获得具有不同遗传特性的实验小鼠。下列说法错误的是(　　)
A.用促性腺激素处理雌鼠可以获得更多的卵子
B.体外受精前要对小鼠的精子进行获能处理
C.胚胎移植前要检查胚胎质量并在囊胚或原肠胚阶段移植
D.遗传改造的小鼠胚胎干细胞可以通过转基因等技术获得
答案　　C　
7.(2022南通海门中学期末,17)亨廷顿舞蹈病是一种由亨廷顿蛋白(HTT)基因突变所导致的疾病。我国科学家利用基因编辑技术(CRISPR/Cas9),成功培育出世界首例亨廷顿舞蹈病的基因“敲入”猪模型,操作过程如图所示。下列说法正确的是(多选)(　　)

A.上述操作过程的原理有基因重组、动物细胞核全能性等
B.过程②为动物细胞融合技术,通常采用灭活病毒诱导
C.过程④为胚胎分割,该技术的关键是将内细胞团均等分割
D.基因“敲入”猪模型所携带的人突变HTT基因可遗传给后代
答案　　ACD　
8.(2022扬州中学3月月考,14)下列关于细胞工程和胚胎工程的叙述,不正确的是(　　)
A.给动物注射一定量的促性腺激素能促使其超数排卵
B.PEG能促进动物细胞融合,形成的杂种细胞经动物细胞培养后能得到新品种个体
C.产生单克隆抗体的细胞在培养过程中不会出现接触抑制现象
D.胚胎发育至囊胚时,细胞开始发生分化
答案　　B　
综合
9.(2022全国甲,38,15分)某牧场引进一只产肉性能优异的良种公羊,为了在短时间内获得具有该公羊优良性状的大量后代,该牧场利用胚胎工程技术进行了相关操作。回答下列问题。
(1)为了实现体外受精需要采集良种公羊的精液,精液保存的方法是　　　　　　　。在体外受精前要对精子进行获能处理,其原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　;精子体外获能可采用化学诱导法,诱导精子获能的药物是　　　(答出1点即可)。利用该公羊的精子进行体外受精需要发育到一定时期的卵母细胞,因为卵母细胞达到　　　　时才具备与精子受精的能力。 
(2)体外受精获得的受精卵发育成囊胚需要在特定的培养液中进行,该培养液的成分除无机盐、激素、血清外,还含的营养成分有　　　　　　　　　　　(答出3点即可)等。将培养好的良种囊胚保存备用。 
(3)请以保存的囊胚和相应数量的非繁殖期受体母羊为材料进行操作,以获得具有该公羊优良性状的后代。主要的操作步骤是 
　。 
答案　　(1)低温冷冻保存(-196 ℃液氮中保存)　精子不能直接与卵子受精,必须经获能处理后才能获得受精能力　肝素、Ca2+载体　MⅡ期　(2)有机盐、维生素、氨基酸、核苷酸　(3)对非繁殖期受体母羊注射雌激素使其发情;取保存的囊胚,用分割针处理获得滋养层细胞,对其进行DNA分析和性别鉴定,获得状态良好的雄性囊胚;将筛选得到的胚胎移植入受体母羊子宫内
10.(2020全国Ⅲ,38,15分)W是一种具有特定功能的人体蛋白质。某研究小组拟仿照制备乳腺生物反应器的研究思路,制备一种膀胱生物反应器来获得W,基本过程如图所示。

回答下列问题:
(1)步骤①中需要使用的工具酶有　　　　　　　　　　　　　　。步骤②和③所代表的操作分别是　　　　　和　　　　　。步骤④称为　　　　　　。 
(2)与乳腺生物反应器相比,用膀胱生物反应器生产W的优势在于不受转基因动物的　　　　　　　　(答出2点即可)的限制。 
(3)一般来说,在同一动物个体中,乳腺上皮细胞与膀胱上皮细胞的细胞核中染色体DNA所含的遗传信息　　　　(填“相同”或“不同”),原因是　。 
(4)从上述流程可知,制备生物反应器涉及胚胎工程,胚胎工程中所用到的主要技术有　　　　　　　　　　　　(答出2点即可)。 
答案　　(1)限制性核酸内切酶(限制性内切核酸酶)、DNA连接酶　显微注射　体外培养　胚胎移植　(2)性别、年龄　(3)相同　两种上皮细胞都是体细胞,且来源于同一个受精卵　(4)体外受精、胚胎移植
易混易错
疑难　脱分化与再分化时所使用的培养基的特点
1.(2022盐城时杨中学学情检测一,14)以四倍体(基因型为AAaa)植株的花药为外植体经植物组织培养获得植株的过程如图所示,下列相关叙述不正确的是(　　)

A.①②③过程均要进行严格的灭菌处理
B.秋水仙素作用于细胞分裂前期抑制纺锤体形成
C.②③过程培养基中的激素比例不同
D.经④过程形成的植株中纯合子占1/3
答案　　A　
疑难　体细胞核移植所得到的个体的性状表现
2.(2022常州八校联考,13)如图是利用体细胞核移植技术获得克隆奶牛的流程图。下列叙述错误的是(　　)

A.过程①通过显微操作去除细胞核
B.过程②和过程④所使用的培养基成分不完全相同
C.过程③可用电刺激使供体细胞和去核卵母细胞融合
D.过程⑤操作前需要用促性腺激素对代孕母牛进行发情处理
答案　　D　
题型模板
模型　单克隆抗体的制备及应用
典型模型
模型1　单克隆抗体的制备过程
模型特征:单克隆抗体的制备过程常作为必备知识进行考查,包括单克隆抗体制备过程中所涉及的方法、原理、操作的目的等。
1.(2020全国Ⅰ,38,15分)为研制抗病毒A的单克隆抗体,某同学以小鼠甲为实验材料设计了以下实验流程。

回答下列问题:
(1)上述实验前必须给小鼠甲注射病毒A,该处理的目的是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。 
(2)写出以小鼠甲的脾脏为材料制备单细胞悬液的主要实验步骤: 
　。 
(3)为了得到能产生抗病毒A的单克隆抗体的杂交瘤细胞,需要进行筛选。图中筛选1所采用的培养基属于　　　　　　,使用该培养基进行细胞培养的结果是　　　　　　　　　　　　。图中筛选2含多次筛选,筛选所依据的基本原理是　　　　　　　　　　　　　。 
(4)若要使能产生抗病毒A的单克隆抗体的杂交瘤细胞大量增殖,可采用的方法有　　　　　　　　　　　　　　(答出2点即可)。 
答案　　(1)诱导小鼠甲产生能够分泌抗病毒A抗体的B淋巴细胞　(2)取小鼠甲脾脏剪碎,用胰蛋白酶处理使其分散成单个细胞,加入培养液制成单细胞悬液(3)选择培养基　只有杂交瘤细胞能够生存　抗原与抗体的反应具有特异性　(4)将杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔内增殖;将杂交瘤细胞在体外培养
模型2　单克隆抗体的应用
模型特征:单克隆抗体的应用主要包括“生物导弹”、嵌合抗体、生物检测试剂等。
2.(2021北京西城一模,13)将细胞毒素类药物与单克隆抗体结合形成抗体—药物偶联物(ADC),可实现对肿瘤细胞的选择性杀伤,过程如图。下列相关叙述错误的是(　　)

A.体外培养单个浆细胞可持续大量获得单克隆抗体
B.ADC通过胞吞作用进入肿瘤细胞
C.ADC在溶酶体中被裂解后释放出药物
D.选择性杀伤肿瘤细胞利用了单克隆抗体特异性强的特点
答案　　A　
实践应用
3.(2020北京海淀期末,21)科研人员在杂交瘤细胞的基础上,获得了双杂交瘤细胞,能够产生双特异性抗体,该抗体可以同时结合两种抗原。
(1)科研人员将抗原α、β分别注射到小鼠体内,引起机体的　　　　免疫,　　　　　　　　　　分泌相应抗体。 
(2)科研人员获得上述小鼠的脾脏细胞,制备两种杂交瘤细胞。每种杂交瘤细胞产生的抗体结构,与抗原结合的情况如图1所示。

①制备杂交瘤细胞时,需将上述小鼠的脾脏组织,用　　　　处理获得单细胞后,再与小鼠的骨髓瘤细胞融合,筛选得到两种杂交瘤细胞。将两种杂交瘤细胞用　　　　试剂处理促进其融合,在培养基中加入　　　　　(天然成分)培养。若两种细胞成功融合,则会同时表达出抗体的重链A、B和轻链a、b,这种细胞称为双杂交瘤细胞。 
②抗体可由两条重链和两条轻链组成,重链和轻链均分为恒定区和可变区,两条重链依赖于A1或B1进行组装(A1与B1相同),重链与轻链的组装依赖于恒定区A2、a或B2、b(a与b相同)。因此,双杂交瘤细胞产生的抗体种类较多,其中有一种抗体能同时与抗原α、β结合称为双特异性抗体,如图2。请将A1、A2、B1、B2、a、b、α、β等字符填入下面的表格中。
1
2
3
4
5
6
A2



α


③为使双杂交瘤细胞只产生图2所示双特异性抗体,降低纯化分离成本,科研人员对重链、轻链的结构进行改造。改造思路是在A、B、a、b的恒定区通过改变　　　　　　,进而改变蛋白质的空间结构,实现“榫卯”式互补组装的唯一性。 
(3)结合双特异性抗体特点,请分析其在肿瘤治疗方面的应用前景: 
　。 
答案　　(1)体液　浆细胞　(2)①胰蛋白酶(或胶原蛋白酶)　PEG(或聚乙二醇)　血清　②
1
2
3
4
5
6
A2
B2
a
b
α
β
③氨基酸种类(或序列)　(3)研制与肿瘤细胞和抗肿瘤药物结合的双特异性抗体,特异性杀死肿瘤细胞
情境应用
简单情境
1.胚胎工程基础知识综合(2022南京三模,16)下列关于胚胎工程的叙述,错误的是(多选)(　　)
A.进行胚胎移植前需要对供体和受体进行免疫检查
B.胚胎干细胞具有细胞核大、核仁小和蛋白质合成旺盛等特点
C.早期胚胎需要移植到经同期发情处理的同种雌性动物体内发育
D.胚胎分割时可以分离内细胞团细胞进行DNA分析,鉴定性别
答案　　ABD　
2.H-Y单克隆抗体与胚胎筛选(2022泰州一模,13)H-Y抗原存在于雄性个体细胞的表面,决定性腺向雄性方向发育。向牛的早期胚胎培养液中添加H-Y单克隆抗体可用来筛选胚胎。下列相关叙述正确的是(　　)
A.制备单克隆抗体所用的杂交瘤细胞既能产生抗体又能无限增殖
B.培养液中添加H-Y单克隆抗体促进牛早期胚胎发育成雄性
C.选择雄性胚胎移植构建乳腺生物反应器可以进行生物制药
D.做性别鉴定时选择原肠胚的外胚层细胞对胚胎几乎无伤害
答案　　A　
复杂情境
3.单抗制备与应用(2022泰州中学4月考,14)CD47是一种跨膜糖蛋白,它可与巨噬细胞表面的信号调节蛋白结合,从而抑制巨噬细胞的吞噬作用。肺癌、结肠癌等多种肿瘤细胞表面的CD47含量比正常细胞高1.6~5倍,导致巨噬细胞对肿瘤细胞的清除效果减弱。科学家推测,抗CD47的单克隆抗体可以解除CD47对巨噬细胞的抑制作用,为此他们按照如图所示流程进行了实验。下列叙述错误的是(　　)

A.多次进行步骤①的目的是获得更多已免疫的B淋巴细胞
B.经两次筛选可得到既能大量增殖又能产生抗CD47抗体的细胞
C.实验组中巨噬细胞和肿瘤细胞的共培养体系需放入CO2培养箱
D.对照组中巨噬细胞的吞噬指数显著高于实验组可验证上述推测
答案　　D　
4.培育能够产生SOD的农作物(2022南通通州一模,16)SOD是一种广泛分布于各种细胞中的抗氧化酶,它能催化超氧阴离子自由基形成H2O2,增强植物的抗逆性。如图为培育能够产生SOD的农作物新品种的一种方式,有关叙述错误的是(多选)(　　)
植物细胞(二倍体)新细胞愈伤组织胚状体→新品种
A.①过程中最常用的方法是采用感受态细胞法将SOD基因导入植物细胞
B.②需要进行照光培养,以诱导叶绿素的形成
C.③表示再分化过程,无需严格的无菌操作
D.该育种方式利用了细胞工程和基因工程,能体现植物细胞的全能性
答案　　ABC　
审题解题
1.(2021辽宁,13,2分)如图是利用体细胞核移植技术克隆优质奶牛的简易流程图。有关叙述正确的是(　　)

A.后代丁的遗传性状由甲和丙的遗传物质共同决定
B.过程①需要提供95%空气和5%CO2的混合气体
C.过程②常使用显微操作去核法对受精卵进行处理
D.过程③将激活后的重组细胞培养至原肠胚后移植
补充设问
设问① 据图分析,甲、乙和丙是否都为后代丁牛提供了遗传物质?
设问② 应对何种细胞进行显微操作去核?为什么?
设问③ 动物细胞培养需要提供适宜的气体环境,那么提供纯氧行吗?
设问④ 胚胎移植为何不选原肠胚?
答案　　B　
补充设问答案 设问① 在该克隆过程中,甲牛提供了细胞核(含核遗传物质),乙牛提供了细胞质(含质遗传物质),丙牛提供了胚胎发育的场所,所以为后代丁牛提供遗传物质的只有甲牛和乙牛。
设问② 应对处于MⅡ期的卵母细胞去核,因为促成熟因子(MPF)水平的高低可影响供体核染色质的状态和复制。MPF的活性在MⅠ期和MⅡ期达到最高,受精后,MPF迅速灭活;此外,MⅡ期卵母细胞细胞核、细胞质已成熟,因此该时期卵母细胞最适合显微去核后作受体细胞。
设问③ 不行,动物细胞培养所需的气体主要有O2和CO2。O2是细胞代谢所必需的,CO2的主要作用是维持培养液的pH。
设问④ 因为原肠胚已和供体子宫形成了紧密的生理组织联系,不易转移,移植的成功率低。
2.(2021湖南,22,15分)M基因编码的M蛋白在动物A的肝细胞中特异性表达。现设计实验,将外源DNA片段F插入M基因的特定位置,再通过核移植、胚胎培养和胚胎移植等技术获得M基因失活的转基因克隆动物A,流程如图所示。回答下列问题:

(1)在构建含有片段F的重组质粒过程中,切割质粒DNA的工具酶是　　　　　　　,这类酶能将特定部位的两个核苷酸之间的　　　　　　　断开。 
(2)在无菌、无毒等适宜环境中进行动物A成纤维细胞的原代和传代培养时,需要定期更换培养液,目的是　。 
(3)与胚胎细胞核移植技术相比,体细胞核移植技术的成功率更低,原因是　　　　　　　　　　　。从早期胚胎中分离获得的胚胎干细胞,在形态上表现为　　　　　　　　(答出两点即可),功能上具有　　　　　　。 
(4)鉴定转基因动物:以免疫小鼠的　　　淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行融合,筛选融合杂种细胞,制备M蛋白的单克隆抗体。简要写出利用此抗体确定克隆动物A中M基因是否失活的实验思路　。 
补充设问
设问① 比较克隆动物A与克隆羊多莉诞生过程,它们在技术应用及DNA组成方面有何差异?
设问② 动物细胞在原代培养之后为何还要进行传代培养?传代培养和原代培养的培养液成分相同吗?

答题技巧　设问③ 利用此抗体确定克隆动物A中M基因是否失活的实验思路该从何处着手书写?
答案　　(1)限制酶(限制性内切核酸酶)　磷酸二酯键　(2)清除代谢物,防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害　(3)体细胞分化程度高,表现全能性十分困难　细胞体积小,细胞核大,核仁明显　发育的全能性
(4)B　提取此克隆动物的肝脏蛋白,作为抗原,与M蛋白的单克隆抗体进行抗原—抗体杂交,若未出现杂交带,证明M基因已失活;若出现杂交带,证明M基因未失活
补充设问答案 设问① 克隆羊多莉诞生过程用到了核移植技术、动物细胞培养技术和胚胎移植技术等多项现代生物技术,而克隆动物A的诞生过程除了以上技术外,还多了一项重组DNA技术。克隆羊多莉的DNA由两部分组成,供核母羊的核DNA与供(卵母细胞)质母羊的质DNA;克隆动物A的DNA则由三部分组成,成纤维细胞的核DNA、去核卵母细胞的质DNA以及外源DNA片段F。
设问② 原代培养到一定时间后,会因为细胞密度过大、有害代谢物积累和培养液中营养物质缺乏等因素而分裂受阻;除上述因素的影响外,还会发生接触抑制的现象,这时需要对细胞进行分瓶培养,即传代培养,让细胞继续增殖。传代培养和原代培养的培养液成分相同,均包括糖类、氨基酸、无机盐、微量元素、血清等。
设问③ 转基因动物的检测按目的可分为三个层级:①检测目的基因是否成功插入;②检测目的基因是否成功转录;③检测目的基因是否成功翻译。该题要求“利用此抗体确定克隆动物A中M基因是否失活”,属于层级③的检测,即要求鉴定该转基因动物A的肝细胞能否合成M蛋白(理论上不能合成,因为将外源DNA片段F插入了M基因的特定位置,可阻止M基因的正常表达)。转基因动物的检测可分为分子水平鉴定和个体生物学水平鉴定,该题要求“利用此抗体确定”,属于分子水平鉴定,可采用抗原—抗体杂交法。所以应将制备的M蛋白的单克隆抗体与转基因动物肝脏中提取的蛋白质混合,观察是否产生杂交带,若未出现杂交带,证明M基因已失活;若出现杂交带,证明M基因未失活。综上所述,要写出符合题目要求的转基因动物鉴定的实验思路,一定要明确两点,检测目的和检测水平。