沪科版 (2019)选修3第一章 发酵工程利用微生物进行规模化生产第三节 测定微生物的数量一、间接计数法同步测试题

这是一份沪科版 (2019)选修3第一章 发酵工程利用微生物进行规模化生产第三节 测定微生物的数量一、间接计数法同步测试题，共14页。试卷主要包含了下列有关培养基的叙述正确的是，可作为自养微生物碳源的是，酵母菌的代谢类型是，下图甲等内容，欢迎下载使用。
【优质】一、间接计数法-3优选练习一．单项选择1．下列有关培养基的叙述正确的是（    ）A．培养基的成分一般含有水．无机盐．碳源和氮源等B．配制好的培养基在使用前需放入干热灭菌箱中灭菌C．培养霉菌时需将培养基的PH调节至中性或碱性D．液体培养基可以用于分离单菌落及扩大培养菌种2．可作为自养微生物碳源的是A．糖类 B．石油 C．二氧化碳 D．牛肉膏3．我国《生活饮用水卫生标准》中关于生活饮用水的细菌标准的具体规定如下：细菌总数1mL水中不超过100个，大肠杆菌数1mL水中不超过3个。为了检验某城市自来水是否达标，某生物兴趣小组进行了相关的实验。下列有关叙述错误的是（    ）A．实验过程中应用到涂布器．移液管等操作工具B．取样水龙头应用火焰灼烧，打开水龙头一段时间后再取样C．检验自来水中大肠杆菌数是否达标，可用稀释涂布平板法来分离并计数D．若空白对照组上有6个菌落，则在实验组数据基础上减去6，以获得最准确数据4．下表表示在不同培养基中细菌的生长繁殖情况（A．B．G．H．I．J．K为培养基的成分，“＋”表示生长，“－”表示不生长），请分析细菌不能合成下列哪种物质（    ）培养基成分A．BA．B．HA．B．JA．B．H．GA．B．H．JA．B．IA．B．J．K生长状态－－＋－＋－＋  A．H B．I C．J D．K5．为了判断培养基是否被杂菌污染和选择培养基是否起到了选择作用，需要设置的对照组的培养基分别是（    ）A．未接种的选择培养基，未接种的牛肉膏蛋白胨培养基B．未接种的培养基，接种了的牛肉膏蛋白胨培养基C．接种了的选择培养基，接种了的牛肉膏蛋白胨培养基D．接种了的培养基，未接种的牛肉膏蛋白胨培养基6．下图是实验室使用某种接种方法在培养基上培养某种微生物的结果，相关说法    错误的是(   )A．该图最可能是用稀释涂布平板法进行接种的B．在操作时，为防止杂菌污染，需进行严格的消毒和灭菌C．恒温培养箱中培养时需要将平板倒置D．该接种方法常用于微生物的分离纯化7．酵母菌的代谢类型是A．自养需氧 B．异氧严格厌氧 C．异养需氧 D．异养兼性厌氧8．下图甲．乙是微生物接种常用的两种方法，丙是接种后培养的效果图解。下列相关叙述中，不正确的是（    ）A．图甲是平板划线法，图乙是稀释涂布平板法B．这两种方法所用的接种工具分别是接种针和接种环C．丙图的接种方法是图乙D．两种方法的接种操作都一定要在火焰附近进行，因为火焰附近存在着无菌区域9．某种细菌必须从环境中摄取亮氨酸才能正常生活，此菌株对链霉素敏感（即缺乏抗性）。实验者用诱变剂处理此种菌株，欲从经处理的菌株中筛选出不依赖亮氨酸且对链霉素不敏感（即有抗性）的变异类型，则应选用的培养基是如表中的（　　）选项亮氨酸链霉素A++B+﹣C﹣+D﹣﹣ 注：表格中“+”表示加入，“﹣”表示未加入；4种培养基除添加亮氨酸和链霉素有差异外，其他成分及条件均相同且适宜细菌生长．A．A B．B C．C D．D10．做“微生物的分离与培养“实验时，下列叙述错误的是（    ）A．高压灭菌加热结束时，等待压力表指针回到零后，才能开启锅盖B．倒平板过程中不能打开培养皿的皿盖，以防杂菌污染C．为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落D．用记号笔标记培养皿中菌落时，应标记在皿底11．下列有关细菌培养的叙述，正确的是（    ）A．在琼脂固体培养基上长出的单个菌落含有多种细菌B．在培养基中加入青霉素可抑制真菌而促进细菌生长C．向液体培养基中通入氧气能促进破伤风杆菌的生长D．同一种物质既可作碳源也可作氮源，碳源并不都能提供能量12．关于微生物的实验室培养，下列叙述正确的是（    ）A．接种用的无菌操作台要进行灭菌处理B．琼脂是从红藻中提取的多糖，在配制培养基可用作碳源C．分离纤维素分解菌时经选择培养后可直接将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上D．高压蒸汽灭菌锅灭菌后要让温度自然下降，当压力表的压力降至 0 时，才能打开排气阀，防止容器内的培养基冲出瓶口造成污染13．下表为某培养基的配方，下列叙述正确的是成分蛋白胨葡萄糖K2HPO4伊红美蓝蒸馏水含量10 g10 g2 g0.4 g0.065 g1 000 mL  A．从物理性质看该培养基属于液体培养基，从用途看该培养基属于选择培养基B．该培养基中属于碳源的物质主要是葡萄糖，属于氮源的物质是蛋白胨C．该培养基缺少提供生长因子的物质D．该培养基调节合适的pH后就可以接种使用14．下列关于倒平板．平板划线法和涂布平板法的叙述，正确的是（    ）A．倒平板时将培养皿打开，培养皿盖倒放在桌子上B．平板划线法除了第一次划线需要将接种环灼烧灭菌外，以后的划线可以不用灭菌C．应用稀释涂布平板法对微生物进行计数的估计值比实际值偏大D．与平板划线法相比，稀释涂布平板法形成单菌落的效果更好15．通常用来作为菌种鉴定的重要依据是A．菌落 B．细菌形态 C．细菌体积 D．细菌结构16．穿刺接种是用接种针蘸取少量的菌种，沿半固体培养基中心向管底作直线穿刺，如某细菌具有鞭毛而能运动，则在穿刺线周围能够生长。下列叙述错误的是（    ）A．穿刺接种可用于鉴定微生物的呼吸作用类型B．穿刺接种可用于保藏厌氧菌种或研究微生物的运动C．相对于平板划线法，穿刺接种所需的培养基添加的琼脂较多D．相对于稀释涂布平板法，穿刺接种不可用于样品中活菌数量统计17．最常用的接种微生物的方法是平板划线法和稀释涂布平板法，下列关于二者的比较正确的（    ） 平板划线法稀释涂布平板法①需在无菌条件下操作不需无菌操作②培养基中不加琼脂培养基中加有琼脂③不可计算菌液中的活菌数可计算菌液中的活菌数④需要接种环需要涂布器  A．③④ B．②④ C．①④ D．②③18．下列关于无菌技术应用的叙述，正确的是（    ）A．煮沸消毒可杀死物体内外所有微生物B．使用后的培养基可以直接丢弃C．紫外线只适用于表面灭菌和空气灭菌D．金属器具只能采用灼烧灭菌法
参考答案与试题解析1．【答案】A【解析】试题分析：微生物的营养物质主要包括碳源．氮源．水和无机盐等。配置培养基时一般要考虑微生物的营养物质是否全面．各种营养物质的比例及pH等因素。解答：A．培养基一般都含有水．碳源．氮源和无机盐，有些微生物的培养除了上述几种主要营养物质外，还需要添加生长因子，A正确；
B．配制好的培养基在使用前需放入干热灭菌箱需要用高压蒸汽灭菌法灭菌，B错误；
C．培养霉菌时需将培养基的pH调节到中性或微酸性，C错误；
D．固定培养基可用于分离单菌落，而液体培养基可用于工业生产，D错误。
故选A。2．【答案】C【解析】自养微生物可以利用无机碳源合成自身需要的营养物质，糖类是有机碳，能利用糖类的是异养微生物，A错误。石油中含有有机物，利用石油的微生物也是异样微生物，B错误。二氧化碳是无机碳，能利用无机碳的是自养微生物，C正确。牛肉膏中富含有机物，能利用牛肉膏的是异养微生物，D错误。3．【答案】D【解析】试题分析：间接计数法（活菌计数法）：
①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。
②操作：a．设置重复组，增强实验的说服力与准确性；b．为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数。
③计算公式：每克样品中的菌株数=（c÷V）×M，其中c代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积（mL），M代表稀释倍数。解答：A．实验过程中应用到涂布器．移液管等操作工具，A正确；B．为避免杂菌污染，取样水龙头应用火焰灼烧，打开水龙头一段时间后再取样，是为了防止温度过高杀死目的菌；B正确；C．稀释涂布平板法可以用于活菌计数，故检验自来水中大肠杆菌数是否达标，可用稀释涂布平板法来分离并计数，C正确；D．若空白对照组上有6个菌落，则说明该实验失败，实验数据不能采用，D错误。故选D。4．【答案】C【解析】试题分析：培养基是按照微生物的生长需要，用人工方法配制而成的营养物，其中有些是各种微生物都必需的，大多数情况下微生物特殊营养要求配制的培养基，称选择培养基。解答：比较细菌能够生长的培养基的添加物，凡添加了物质J的培养基，细菌都能生长，反之则不能生长，说明物质J是细菌不能合成的。故选C。5．【答案】B【解析】试题分析：对照实验是指除所控因素外其它条件与被对照实验完全对等的实验。判断选择培养基是否起到了选择作用，则接种了的选择培养基是实验组，而接种了的牛肉膏蛋白胨培养基属于对照组。解答：为了判断培养基是否被杂菌污染，需要设置的对照组是未接种的培养基，即将未接种的培养基与接种的培养基同时培养，若未接种的培养基上出现菌落，说明其被污染，否则没有被污染；用接种了的普通培养基和选择培养基进行对照，在牛肉育蛋白胨培养基上生长的菌落数目应明显多于选择培养基上的数目，说明选择培养基具有选择的功能，B正确。
故选B。6．【答案】A【解析】培养基上微生物的分布有疏有密，应为划线培养法接种，该接种方法常用于微生物的分离纯化，A项错误，D项正确；在操作时，为防止杂菌污染，应对培养基和接种针等进行灭菌，对操作空间．衣着和手进行消毒，B项正确；恒温培养箱中培养时需要将平板倒置，防止冷凝水滴在培养基上，C项正确。7．【答案】D【解析】试题分析：
解答：酵母菌利用现成的有机物，所以是异养型，A错误。既可以进行有氧呼吸也可以进行无氧呼吸，所以是兼性厌氧型，B．C错误，D正确。8．【答案】B【解析】试题分析：9．【答案】C【解析】试题分析：从混合样品中获得某种微生物的方法通常有两种：第一种是可利用该分离对象对某一营养物质有一“嗜好”的原理，专门在培养基中加入或不加该营养物质，从而使它成为一种选择培养基（如在含高浓度NaCl的培养基上分离金黄色葡萄糖球菌，在不含N的培养基上分离圆褐固氮菌）；或根据分离对象对pH．温度和氧气浓度的喜好，改变培养环境的理化性质，使环境条件最适宜该微生物的生存，从而达到分离的目的，将培养基放在高温环境中培养只能得到耐高温的微生物．第二种办法可利用该分离对象对某种抑菌物质的抗性，在混合培养物中加入该抑制物，经培养后，原来占优势的微生物生长受抑制，而分离对象却可乘机大大增殖，使之在数量上占优势（如在加入青霉素的培养基上分离真核微生物）。解答：（1）要筛选出不依赖亮氨酸的变异类型，则培养基中不应该加入亮氨酸；
（2）要筛选出对链霉素不敏感（即有抗性）的变异类型，则培养基中应该加入链霉素。
故选C。10．【答案】C【解析】试题分析：高压灭菌加热结束时，需切断热源，让灭菌锅内温度自然下降，当压力表的压力降到零时，再打开排气阀，旋松螺栓，最后再打开盖子。由于培养菌落时需倒置培养，为了方便查看，用记号笔标记培养皿中菌落时，应标记在皿底上。倒平板时，左手将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，倒入培养基后，左手立刻盖上培养皿的皿盖，操作中应避免培养基溅到皿盖上。经火焰灭菌后的接种环应冷却后再接种，因为温度过高，会使菌落死亡。解答：A．高压灭菌加热结束时，应等压力表的压力降到零时，再打开排气阀，旋松螺栓，打开盖子，A正确；B．倒平板过程中不能打开培养皿的皿盖，以防杂菌污染，B正确；C．经火焰灭菌后的接种环温度很高，若此时趁热挑起待纯化菌落会使菌落死亡，C错误；D．用记号笔标记培养皿中菌落时，由于培养菌落时需倒置培养，为了方便查看，应标记在皿底上，D正确。故选C。11．【答案】D【解析】试题分析：（1）菌落是指由单个微生物细胞或多个同种微生物细胞在适宜固体培养基上繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体。（2）微生物培养基的配方中，一般都含有水．碳源．氮源和无机盐。碳源．氮源分别是指能够为微生物生长繁殖提供营养的含有碳元素．含有氮元素的一类物质。（3）青霉素的主要作用是杀灭细菌，对真菌等病原体无作用。（4）破伤风杆菌是一种厌氧菌。解答：A．在琼脂固体培养基上长出的单个菌落，是由单个或少数同种细菌在固体培养基上大量繁殖而形成的一个肉眼可见的子细胞群体，因此单个菌落通常只有一种细菌，A错误；B．在培养基中加入青霉素，可抑制细菌生长，但不会抑制真菌的生长，B错误；C．破伤风杆菌只能进行无氧呼吸，向液体培养基中通入氧气能抑制破伤风杆菌的生长，C错误；D．同一种物质可以同时含有碳元素和氮元素（如牛肉膏），因此既可作碳源也可作氮源，但碳源并不都能提供能量，如CO2是硝化细菌的碳源，但CO2并不能提供能量，D正确。故选D。12．【答案】D【解析】试题分析：13．【答案】B【解析】试题分析：微生物的营养物质主要包括氮源．碳源．水和无机盐等，液体培养基与固体培养基的区别是否添加适量的凝固剂琼脂，伊红美兰指示剂可以专一检测大肠杆菌菌落。
 解答：A．从物理性质看该培养基属于液体培养基，从用途看该培养基属于鉴别培养基，A错误；B．微生物的营养物质主要包括氮源．碳源．水和无机盐等，培养基中属于碳源的物质主要是葡萄糖，属于氮源的物质是蛋白胨，B正确；C．生长因子主要包括维生素．氨基酸和碱基等，它们一般是酶和核酸组成成分，蛋白胨可以提供生长因子，C错误；D．该培养基调节合适的pH后经灭菌后才可以接种使用，D错误。故选B。14．【答案】D【解析】试题分析：微生物接种的方法中最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法，前者是指通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种，逐步稀释分散到培养基的表面，后者是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。解答：A．倒平板时不能把培养皿盖完全打开并放到桌面上，这样会污染培养皿中的培养基，A错误；B．除了第一次划线需要将接种环灼烧灭菌外，以后的每一次划线前也要将接种环进行灼烧，将上次划线结束后残留的细菌杀死，使细菌尽快分散成单个，B错误；C．应用稀释涂布平板法对微生物进行计数的估计值比实际值偏小，因为可能多个微生物在一起长成一个菌落，C错误；D．与平板划线法相比，稀释涂布平板法分离得到单菌落的效果更好，D正确。故选D。15．【答案】A【解析】试题分析：菌落是指由一个微生物细胞在适宜的培养基上形成一个肉眼可见的，具有一定形态结构的子细胞群体．不同种类的细菌所形成的菌落，在大小．形状．光泽度．颜色．硬度．透明度等方面具有一定的特征，每种细菌在一定条件下所形成的菌落，可以作为菌种鉴定的重要依据。解答：A．同种类的细菌所形成的菌落，在大小．形状．光泽度．颜色．硬度．透明度等方面具有一定的特征，可以作为菌种鉴定的重要依据，A正确；B．单个细菌个体微小，用肉眼是看不见的，细菌形态不适合作为菌种鉴定的依据，B错误；C．单个细菌个体微小，细菌体积不适合作为菌种鉴定的依据，C错误；D．细菌都属于原核生物，形体微小，结构大同小异，不适合作为菌种鉴定的依据，D错误。故选A。16．【答案】C【解析】试题分析：穿刺接种在保藏厌氧菌种或研究微生物的运动时常采用此法。做穿刺接种时，用的接种工具是接种针。用的培养基一般是半固体培养基。它的做法是：用接种针蘸取少量的菌种，沿半固体培养基中心向管底作直线穿刺，如某细菌具有鞭毛而能运动，则在穿刺线周围能够生长。解答：A．由分析可知，穿刺接种可用于鉴定微生物的呼吸作用类型，A正确；
B．穿刺接种常用于保藏厌氧菌种或研究微生物的运动，因此需要接种在半固体培养基中，B正确；
C．由分析可知，相对于平板划线法，穿刺接种所需的培养基添加的琼脂较少，C错误；
D．稀释涂布平板法可用于活菌计数，而穿刺接种不可用于样品中活菌数量统计，D正确。
故选C。17．【答案】A【解析】试题分析：微生物接种到固体培养基常用的方法有稀释涂布平板法和平板划线法，其中稀释涂布平板法接种可以形成单菌落，所以常用来进行微生物的计数。解答：①两种方法都需要在无菌条件下操作，①错误；②两种方法都需要配制固体培养基，均需要添加琼脂，②错误；③平板划线法不能对菌落进行计数，稀释涂布平板法能进行活菌计数，③正确；④平板划线法的接种工具是接种环，稀释涂布平板法的接种工具是涂布器，④正确。综上正确的选项是③④，故选A。18．【答案】C【解析】试题分析：在微生物的实验室培养中获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵。无菌技术围绕着如何避免杂菌的污染展开，主要包括以下几个方面：①对实验操作的空间．操作者的衣着和手进行清洁和消毒；②将用于微生物培养的培养器皿．接种用具和培养基等进行灭菌；③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行；④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围物品相接触。解答：A．煮沸消毒只能杀死物体表面或内部的部分微生物（不包芽孢和孢子），A错误；B．使用后的培养基丢弃前一定要进行灭菌处理，不能直接丢弃，以免污染环境，B错误；C．紫外线灭菌是利用适当波长的紫外线能够破坏微生物机体细胞中的DNA或RNA的分子结构，造成生长性细胞死亡和（或）再生性细胞死亡，达到灭菌的效果，此法只能杀死物体表面或内部的部分微生物（不包芽孢和孢子），只适用于表面灭菌和空气灭菌，C正确；D．金属器具可以采用灼烧灭菌法或干热灭菌，D错误。故选C。