高中生物沪科版 (2019)选修3一、间接计数法课后测评

【优质】一、间接计数法-1优选练习

一．单项选择

1．医院检验科从伤口分泌物的细菌培养结果中随机选取312例，分析其中所含有病原体类型和病原体抗菌药物敏感情况，为临床上抗生素的应用提供参考。如表是金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌对常用抗菌药物敏感性实验结果。有关说法错误的是（   ）

A.从伤口的分泌物中分离细菌时要注意无菌操作

B.培养细菌的培养基需要严格消毒

C.可以利用稀释涂布平板法对细菌进行计数

D.由表中数据可知万古霉素的抗菌性最好

2．现有两种固体培养基，已知其配制时所加的成分和含量如下表，假设用这两种培养基分别去分离土壤中的两种微生物，你认为它们适于分离（    ）

A．甲培养基适于分离自养型自生固氮菌；乙培养基适于分离异养型自生固氮菌

B．甲培养基适于分离异养型自生固氮菌；乙培养基适于分离自养型自生固氮菌

C．甲培养基适于分离酵母菌；乙培养基适于分离真菌

D．甲培养基适于分离自养型共生固氮菌；乙培养基适于分离异养型共生固氮菌

3．某同学对 101．102．103倍稀释液计数的平均菌落数分别是 2760．295 和 16，则菌落总数为（所用稀释液体积为 0．1 mL）（    ）

A．2．76×104个/mL B．2．95×105 个/mL

C．4．6×104个/mL D．3．775×104个/mL

4．平板划线法和稀释涂布平板法是常用的两种接种方法。下列相关叙述错误的是（    ）

A．平板划线法要求在培养基表面连续划线，且除第一次划线外，每一次划线的起点都是上一次划线的终点

B．除第一次划线前需要将接种环灼烧灭菌外，以后的划线不用灭菌即可划线

C．如果菌液本来浓度不高，则可以适当降低稀释倍数

D．“充分稀释”和“连续划线”的目的都是获得由单一细胞繁殖而成的菌落

5．化细菌是化能自养菌，通过 NH4+→NO2- →NO3- 的氧化过程获取菌体生长繁殖所需的能量，在水产养殖中具有重要作用。图是分离硝化细菌的培养基配方，下列说法错误的是（　　）

A. （NH4）2SO4可作为硝化细菌的氮源和能源

B. 培养基中的 Na2CO3是硝化细菌的主要碳源

C. K2HPO4和 NaH2PO4能维持培养基的 pH

D. 硝化细菌能清除水体中的铵态氮及亚硝态氮

6．下图是研究人员从红棕壤中筛选高效分解尿素细菌的过程示意图，有关叙述错误的是（    ）

①制备红棕    ②在选择培    ③筛选．纯化分  ④细菌分解尿素能

壤浸出液      养基中培养    解尿素的细菌     力的鉴定和比较

A．在配制步骤②③的培养基时，应先调pH再进行高压蒸汽灭菌

B．步骤③纯化分解尿素的细菌的原理是将聚集的细菌分散，可以获得单细胞菌落

C．步骤③采用涂布平板法接种，并需向牛肉膏蛋白胨培养基中加入尿素

D．步骤④挑取③中不同种的菌落分别接种，比较细菌分解尿素的能力

7．土壤中有些细菌可以降解焦化厂淤泥中的污染物S，下图是分离．纯化和筛选高效降解S的优质菌株的过程，下列叙述正确的是（　　）

A．甲是土样经高温灭菌后用无菌水配置的土壤稀释液

B．丙是添加了琼脂的选择性培养基

C．在涂布平板上长出的菌落，可通过划线法进行计数

D．经多次稀释和筛选，形成的单菌落中所有细胞的遗传物质都相同

8．幽门螺杆菌是急慢性胃炎和胃溃疡的主要致病菌，它能将尿素分解成氨气等物质。若从携带者胃黏膜样本中分离幽门螺杆菌，相关实验步骤和方法合理的是（　　）

A．配置培养基时应以尿素为唯一碳源

B．可利用酚红指示剂鉴定幽门螺杆菌的菌落

C．培养微生物的试剂和器具都要进行高压蒸汽灭菌

D．样本可用蒸馏水稀释后涂布平板，统计样本中活菌数量

9．下列关于菌种的选育的叙述，不正确的是（    ）

A．自然选育菌种费时且盲目性大

B．诱变育种原理的基础是基因突变

C．采用基因工程的方法可构建工程菌

D．传统发酵技术和现代工业发酵都需要选育菌种

10．植物组织培养的培养基和微生物培养所配制的培养基的主要区别为（    ）

A．植物组织培养的培养基一般含植物激素，微生物培养基不含植物激素

B．植物组织培养的培养基不需要氨基酸，微生物培养基含各种氨基酸

C．植物组织培养的培养基不需碳源，微生物培养基含碳源

D．植物组织培养的培养基含维生素，微生物培养基不含维生素

11．在农田土壤的表层自生固氮菌较多。将用表层土制成的稀泥浆接种到特制的培养基上培养，可将自生固氮菌与其他细菌分开，对培养基的要求是（　　）

①加抗生素    ②不加抗生素    ③加氮素           ④不加氮素

⑤加葡萄糖   ⑥不加葡萄糖   ⑦37℃恒温箱中培养  ⑧28～30℃温度下培养

A．①③⑤⑦ B．②④⑥⑧ C．②④⑤⑧ D．①④⑥⑦

12．某科研小组欲从土壤中筛选能分解除草剂A（组成元素为C．H．O．N，在水中溶解度低，含除草剂A 的固体培养基不透明）的细菌用于生产，实验流程如下图所示。下列相关叙述错误的是（    ）

A．从经常使用除草剂A的土壤取样比从其他土壤取样更容易筛选到除草剂A分解菌

B．实验中培养基1为液体培养基，此操作的主要目的是增加除草剂A分解菌的数量

C．培养基2为选择培养基，其中以除草剂A作为唯一氮源便于分离除草剂A分解菌

D．挑选菌落时，透明圈直径与菌落直径比值越大，表明目标细菌分解除草剂A的能力越弱

13．平板涂布是分离菌种常用的方法，下列相关叙述不恰当的是（    ）

A．固体培养基灭菌后，应冷却至50℃左右时倒平板

B．倒好的平板需立即使用，以免表面干燥，影响菌的生长

C．平板涂布分离到的单菌落需进一步划线纯化

D．平板涂布法既可用于微生物的分离，也可用于微生物的计数

14．下列实验中，能达成实验目的的是（    ）

A．利用斐林试剂检测甘蔗组织中的蔗糖

B．低温处理大蒜根尖诱导染色体数目加倍

C．利用醋酸菌在无氧条件下发酵产生醋酸

D．通过平板划线法对大肠杆菌进行计数

15．如图是某实验室从葡萄果实上获取酵母菌菌种的简要操作步骤。下列相关叙述中不正确的是（    ）

葡萄果实收集冲洗液选择培养基培养扩大培养

A．图中接种的方法有平板划线法和稀释涂布平板法

B．图中①②③步骤都必须确保是无菌操作

C．图中选择培养基培养时，应在培养皿的皿盖上做好标记避免混淆

D．图中选择培养基为固体培养基，而扩大培养的培养基为液体培养基

16．某同学检测土壤中细菌总数时，在10．100．1000倍稀释液的平均菌落数为2760．330．46，如果用于平板涂布的稀释液的量都是，则每克样品中的菌落总数为（    ）

A．27600个 B．30600个 C．46000个 D．37750个

17． 关于腐乳制作的叙述正确的是

A. 豆腐中蛋白质在多种微生物的协同作用下被分解成多肽和氨基酸

B. 影响腐乳风味和质量的因素有豆腐灭菌．发酵温度．发酵时间等

C. 加卤汤装瓶后加盐腌制，要随着豆腐层的加高而增加食盐的用量

D. 腐乳装瓶腌制时，一定需要将瓶口通过酒精灯的火焰灼烧灭菌

18．丙草胺（C15H22ClNO2）是一种广泛应用的除草剂，能抑制土壤细菌．放线菌和真菌的生长。某研究小组从某地土壤中分离获得能有效降解丙草胺的细菌菌株，并对其计数(如下图所示），以期为修复污染土壤提供微生物资源。下列有关叙述错误的是（　　）

A. 提供适宜的温度，将培养基的 pH 调至酸性，有利于降解菌的生长繁殖

B. 利用该方法计数结果往往比显微镜直接计数法偏小

C. 配制以丙草胺为唯一氮源的选择培养基进行培养，可以提高降解菌的浓度

D. 5 号试管的结果表明每克土壤中的菌株数为 1.7×109个

参考答案与试题解析

1．【答案】B

【解析】分离细菌时为了防止污染应该进行无菌操作；培养细菌的培养基应该进行高压蒸汽灭菌而不是消毒；可以利用稀释涂布平板法或血细胞计数板法对细菌进行计数；由表中的数据可知，万古霉素无论是在敏感株数还是在敏感率上都是最高的，所以万古霉素的抗菌性最好。

2．【答案】B

【解析】

据表分析：甲培养基中含有的葡萄糖和淀粉是有机物，可以作为碳源和能源，适用于异养微生物生长；乙培养基中不含有机碳源，适用于自养微生物的生长。两种培养基之间的共同点是都不含氮源，说明这两种培养基只能培养具有固氮能力的细菌。

解答：

AD．固氮菌中能独立生存的是自生固氮菌，甲培养基中含有的葡萄糖和淀粉是有机物，由此推出该培养基适于分离异养型的自生固氮菌，AD错误；

BC．乙培养基中不含有机碳源，不能用来分离异养型真菌，但可用来分离培养自养型的自生固氮菌，B正确，C错误。

故选B。

3．【答案】B

【解析】

4．【答案】B

【解析】

5．【答案】B

【解析】A．题中显示，硝化细菌能够通过NH4+→NO2-→NO3-的氧化过程获取菌体生长繁殖所需的能量，故（NH4）2SO4可作为硝化细菌的氮源和能源，A正确；

B．由分析可知，硝化细菌是化能自养菌，以培养基中的NH4+为氮源和能源，能够将二氧化碳和水合成为糖类，故硝化细菌的碳源是二氧化碳，B错误；

C．K2HPO4和NaH2PO4属于无机盐，能够调节和维持微生物细胞的渗透压和pH，C正确；

D．由题干信息可知，硝化细菌能进行NH4+→NO2-→NO3-的氧化过程，故可用硝化细菌清除水体中的铵态氮及亚硝态氮，D正确。

故选B。

6．【答案】C

【解析】

7．【答案】B

【解析】

平板划线法和稀释涂布平板法是两种常用的接种方法，其中稀释涂布平板法还可用来计数。据图可知，实验采用稀释涂布平板法对菌种进行分离纯化。

解答：

A．土样不能用高温灭菌，这样会杀死土样中的目的菌，A错误；

B．固体培养基中才能形成菌落，故丙是固体培养基，制备时加入了琼脂，B正确；

C．平板划线法是常用的接种方法，但不能用来计数，C错误；

D．菌落往往是由一个细菌繁殖而成的子细胞群体，该实验中筛选出的菌落中的菌种降解能力可能不同，故细胞的遗传物质不一定相同，D错误。

故选B。

8．【答案】B

【解析】

9．【答案】D

【解析】

菌种的选育方式有：

①自然选育：自然选育的菌种来源于自然界．菌种保藏机构或生产过程，从自然界中选育菌种的过程较为复杂，而从生产过程或菌种保藏机构得到菌种的自然选育过程较为简单；

②杂交育种：杂交育种杂交育种法杂交育种指不同种群．不同基因型个体间进行杂交，并在其杂种后代中通过选择而育成纯合品种的方法。杂交可以使双亲的基因重新组合，形成各种不同的类型，为选择提供丰富的材料；

③基因工程育种：它是用人为的方法将所需要的某一供体生物的遗传物质——DNA大分子提取出来，在离体条件下用适当的工具酶进行切割后，把它与作为载体的DNA分子连接起来，然后与载体一起导入某一更易生长．繁殖的受体细胞中进行正常的复制和表达，从而获得新物种。

解答：

A．自然选育菌种要到相应的环境从众多的微生物中进行筛选所以费时且盲目性大，A正确；

B．菌种的选育可以采用诱变育种的方法，其原理是基因突变，B正确；

C．可以采用基因工程定向构建工程菌的方法获得，C正确；

D．现代工业发酵需要选育菌种，传统发酵技术一般利用自然界中的菌种，不需要选育菌种，D错误。

故选D。

10．【答案】A

【解析】

植物组织培养一般用MS培养基，MS培养基含大量元素．微量元素．有机物，有机物包括甘氨酸．维生素B1．维生素B2．烟酸．肌醇．蔗糖．琼脂等，特别包括植物生长素．细胞分裂素等植物生长调节物质，微生物培养基不含植物激素；

MS培养基含氨基酸如甘氨酸，有碳源如蔗糖，含维生素B1和维生素B6，微生物培养基中并不是所有氨基酸都加，有些微生物在生长发育过程中可自行合成，可以不加；有些微生物合成能力有限，氨基酸可多加。

解答：

A．植物组织培养所用的MS培养基和微生物培养所用的培养基的主要区别是植物组织培养基一般含植物激素，微生物培养基不含植物激素，A正确；

B．植物组织培养基需要氨基酸，微生物培养基也需要氨基酸，微生物培养基中并不是所有氨基酸都含有，有些微生物在生长发育过程中可自行合成所需的某些氨基酸，可以少加；有些微生物合成能力有限，氨基酸可多加，不是主要区别，B错误；

C．植物组织培养基需要蔗糖做碳源，微生物培养基有些（异养型微生物培养基）也含碳源，C错误；

D．植物组织培养基需要维生素，某些微生物培养基也需要维生素，D错误。

故选A。

11．【答案】C

【解析】

自生固氮微生物属于细菌，其细胞壁的主要成分是肽聚糖，对抗生素敏感；自生固氮微生物的代谢类型是异养需氧型，是一类能够独立进行固氮的微生物。

解答：

①自生固氮微生物属于细菌，其细胞壁的主要成分是肽聚糖，对抗生素敏感，①错误；

②自生固氮微生物属于细菌，对抗生素敏感，培养基不能添加抗生素，②正确；

③自生固氮微生物是一类能够独立进行固氮的微生物，培养基中可以不添加氮源，③错误；

④自生固氮微生物是一类能够独立进行固氮的微生物，培养基中可以不添加氮源，④正确；

⑤自生固氮微生物的代谢类型是异养需氧型，培养基必须添加葡萄糖作为碳源和能源，⑤正确；

⑥自生固氮微生物的代谢类型是异养需氧型，培养基必须添加葡萄糖作为碳源和能源，⑥错误；

⑦自生固氮微生物的最适温度在28℃～30℃之间，⑦错误；

⑧自生固氮微生物的最适温度在28℃～30℃之间，⑧正确。

故选C。

12．【答案】D

【解析】

要想获得目的菌，应在富含该菌的环境中寻找；获得目的菌应在选择培养基上培养。

解答：

A．要想获得目的菌，应在富含该菌种的自然环境中筛选，故从经常使用除草剂A的土壤取样比从其他土壤取样更容易筛选到除草剂A分解菌，A正确；

B．为扩大培养，实验中培养基1为液体培养基，增目的是加目的菌（除草剂A分解菌）的数量，起到筛选作用，B正确；

C．根据题干信息“某科研小组从土壤中筛选出能够将这种化合物（除草剂A）分解的菌株”，则应以除草剂A作为唯一氮源，在该培养基上只有目的菌能够生存，其它杂菌因为缺少氮源不能存活，C正确；

D．挑选菌落时，透明圈直径与菌落直径比值越大，表明目标细菌分解除草剂A的能力越强，D错误。

故选D。

13．【答案】B

【解析】

稀释平板计数是根据微生物在固体培养基上所形成的单个菌落，即是由一个单细胞繁殖而成这一培养特征设计的计数方法，即一个菌落代表一个单细胞。计数时，首先将待测样品制成均匀的系列稀释液，尽量使样品中的微生物细胞分散开，使成单个细胞存在（否则一个菌落就不只是代表一个细胞），再取一定稀释度．一定量的稀释液接种到平板中，使其均匀分布于平板中的培养基内。经培养后，由单个细胞生长繁殖形成菌落，统计菌落数目，即可计算出样品中的含菌数。此法所计算的菌数是培养基上长出来的菌落数，故又称活菌计数。

解答：

A．固体培养基灭菌后，应冷却至50℃左右时倒平板，固体培养基中含有琼脂，40℃左右会凝固，因此温度过低会导致培养基凝固无法倒平板，A正确；

B．倒好的平板需要冷却后使用，且不宜久存，以免表面干燥，影响接种后微生物的生长，B错误；

C．平板涂布分离到的单菌落仍需进一步划线纯化，以利于菌种保藏，C正确；

D．结合分析可知，平板涂布法既可用于微生物的分离，也可用于微生物的计数，D正确。

故选B。

14．【答案】B

【解析】

15．【答案】C

【解析】

果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧型生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，在无氧条件下，酵母菌进行酒精发酵。温度是酵母菌生长和发酵的重要条件，20℃左右，酒精发酵时，一般将温度控制在18~25℃，在葡萄酒自然发酵过程当中，其主要作用的是附着在葡萄皮上的野生酵母菌。

解答：

A．微生物培养中常用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法，A正确；

B．微生物培养的核心是防止杂菌污染，保证培养物的纯净，因此培养过程必须保证无菌操作，以防止杂菌污染，B正确；

C．题图中选择培养基培养时，因为使用的平板较多，且平板是倒置的，为避免混淆，应在培养皿的皿底做好标记，C错误；

D．在进行酵母菌筛选时用的是固体培养基，而进行扩大培养时为了使培养的菌种充分获取营养，因此需要用液体培养基，D正确。

故选C。

16．【答案】C

【解析】

微生物接种常用的两种方法：

①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。

②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过足够稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后，可形成单菌落。

解答：

计数时应选取菌落数在30~300之间的平板，故只能选取46，根据计算公式：每克样品中的菌落数46÷0.1×1000= 46000个，即C正确。

故选C。

17．【答案】 A

【解析】豆腐中蛋白质在多种微生物（青霉．酵母．曲霉．毛霉等，主要是毛霉）的协同作用下被分解成多肽和氨基酸，A正确；豆腐不需要灭菌，B错误；加盐腌制后再加卤汤装瓶，C错误； 腐乳装瓶腌制时，最好将瓶口通过酒精灯的火焰灼烧灭菌，防治瓶口被污染，D错误。

18．【答案】A

【解析】A．培养细菌时，应该将培养基的pH调至中性或弱碱性，A错误；

B．该技术方法为稀释涂布平板法，由于当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，故技术结果比显微镜直接计数法偏小，B正确；

C．若乙丙草胺作为唯一氮源，则只有具有降解能力的降解菌能够存活，故可以提高降解菌的浓度，C正确；

D．根据5号试管的数据可知，每克土壤中菌株数为（168+175+167）÷3×105×100=1.7×109个，D正确。

故选A。