高中生物沪科版 (2019)选修3一、间接计数法达标测试

【精品】一、间接计数法-3作业练习

一．单项选择

1．为了研究水稻是否感染了某种抗寒能力比较强的细菌，下列叙述正确的是

A．为了筛选出该细菌，需要配制LB 液体培养基

B．利用涂布分离法计数的结果比实际值往往偏大

C．纯化培养该细菌时，培养皿应倒置放在恒温培养箱内的摇床上培养

D．在筛选该细菌的过程中，倒平板．接种和培养都必须在无菌条件下操作

2．关于干热灭菌与高压蒸汽灭菌的操作方法，下列叙述正确的是（    ）

①操作时，均不能将物品摆放太挤

②操作过程中，灭菌物品均不能与筒壁接触

③干热灭菌时，等温度下降到70℃以下后，才能打开箱门

④高压蒸汽灭菌时，打开排气阀使压力表降到零后，才能打开盖

A．①②④ B．②③④ C．①②③ D．①③④

3．科研小组欲检测学校直饮水中大肠杆菌是否超标，下列实验操作中不合理的是（    ）

A．应设置未接种的培养基作为对照

B．待检测水样需要经过灭菌操作后再检测

C．用稀释涂布平板法接种并计数大肠杆菌

D．接种后将培养皿倒置并在适宜温度下培养

4．下列有关无菌技术的叙述错误的是（    ）

A．对实验操作空间．操作者的衣着和手进行清洁和消毒

B．用于微生物培养的器皿．接种用具和培养基要进行灭菌

C．高压蒸汽灭菌锅需将冷空气彻底排除后才能将锅密闭

D．使用后的液体培养基在丢弃前要用煮沸消毒法进行处理

5．培养禽流感病毒时，应该选用（    ）

A．固体培养基 B．液体培养基

C．牛肉汤 D．活鸡胚

6．下列关于平板划线法纯化大肠杆菌过程中各种“目的”的叙述，错误的是（    ）

A．第一次划线前灼烧接种环的目的是杀死接种环上原有的微生物

B．在火焰旁进行接种的目的是防止低温抑制酶活性而影响大肠杆菌的生命活动

C．最后一次划线结束后灼烧接种环的目的是：杀死接种环上残存的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者

D．在第二次及以后划线时，总是从上一次划线的末端开始，这样做的目的是获得单菌落

7．做“微生物的分离与培养“实验时，下列叙述错误的是（    ）

A．高压灭菌加热结束时，等待压力表指针回到零后，才能开启锅盖

B．倒平板过程中不能打开培养皿的皿盖，以防杂菌污染

C．为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落

D．用记号笔标记培养皿中菌落时，应标记在皿底

8．关于微生物的实验室培养，下列叙述正确的是（    ）

A．接种用的无菌操作台要进行灭菌处理

B．琼脂是从红藻中提取的多糖，在配制培养基可用作碳源

C．分离纤维素分解菌时经选择培养后可直接将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上

D．高压蒸汽灭菌锅灭菌后要让温度自然下降，当压力表的压力降至 0 时，才能打开排气阀，防止容器内的培养基冲出瓶口造成污染

9．MRSA一般指耐甲氧西林金黄色葡萄球菌，是一种引起皮肤感染的“超级细菌”，临床滥用抗生素的现象，对MRSA的流行起了一定的扩散作用。某研究小组对其进行了实验室培养和计数等操作。下列叙述错误的是（    ）

A．为防止“超级细菌”散布到环境中应对接种时常用的工具进行灼烧灭菌

B．若采用显微镜直接计数培养液中MRSA的数量则计数结果会比活菌实际值偏低

C．可采用稀释涂布平板法进行接种以对固体培养基中的超级细菌进行计数

D．为了方便后续使用，可将超级细菌菌种在4℃条件下用斜面保藏法临时保藏起来

10．下表表示在不同培养基中细菌的生长繁殖情况（A．B．G．H．I．J．K为培养基的成分，“＋”表示生长，“－”表示不生长），请分析细菌不能合成下列哪种物质（    ）

A．H B．I C．J D．K

11．可作为自养微生物碳源的是

A．糖类 B．石油 C．二氧化碳 D．牛肉膏

12．在三个培养皿中分别加入 10mL 不同的培养基，然后接种相同的大肠杆菌样液。培养后，计算菌落数，结果如下表。下列选项正确的是（    ）

A．该实验采用的是液体培养基

B．该实验中应该选取培养 12 小时时的记录作为实验结果

C．Ⅰ和Ⅲ对照，说明大肠杆菌生长需要特殊营养物质

D．Ⅱ和Ⅲ对照，说明大肠杆菌生长需要糖类

13．下图甲．乙是微生物接种常用的两种方法，丙是接种后培养的效果图解。下列相关叙述中，不正确的是（    ）

A．图甲是平板划线法，图乙是稀释涂布平板法

B．这两种方法所用的接种工具分别是接种针和接种环

C．丙图的接种方法是图乙

D．两种方法的接种操作都一定要在火焰附近进行，因为火焰附近存在着无菌区域

14．下列关于倒平板．平板划线法和涂布平板法的叙述，正确的是（    ）

A．倒平板时将培养皿打开，培养皿盖倒放在桌子上

B．平板划线法除了第一次划线需要将接种环灼烧灭菌外，以后的划线可以不用灭菌

C．应用稀释涂布平板法对微生物进行计数的估计值比实际值偏大

D．与平板划线法相比，稀释涂布平板法形成单菌落的效果更好

15．关于微生物培养中的无菌技术，叙述错误的是（    ）

A．实验前需用 75%的酒精棉球擦拭双手

B．配制好的培养基可通过高压蒸汽进行灭菌

C．接种环可以通过酒精灯火焰灼烧进行灭菌

D．使用后的培养基不需要灭菌可直接丢弃

16．下列实验操作不需要在酒精灯火焰附近进行的是（    ）

A．土壤取样 B．称取土壤 C．稀释土壤溶液 D．涂布平板

17．关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述错误的是（    ）

①牛肉膏和蛋白胨都能提供碳源．氮源．磷酸盐．维生素

②等培养基冷却至室温时进行倒平板

③待平板冷却凝固5？10分钟后将平板倒过来放置

④操作顺序为计算．称量．溶化．倒平板．灭菌

⑤将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯溶解

A．①④⑤ B．②③⑤ C．①②④ D．②④⑤

18．通常用来作为菌种鉴定的重要依据是

A．菌落 B．细菌形态 C．细菌体积 D．细菌结构

参考答案与试题解析

1．【答案】D

【解析】

试题分析：

2．【答案】C

【解析】

试题分析：

3．【答案】B

【解析】

试题分析：

无菌技术的主要内容：①对实验操作的空间．操作者的衣着和手，进行清洁和消毒；②将用于微生物培养的器皿．接种用具和培养基等器具进行灭菌；③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行；④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。

解答：

A．应设置未接种的培养基，作为实验的对照，以检测培养基灭菌是否彻底，A正确；
B．要检测水体中大肠杆菌是否超标，待检测水样不能进行灭菌处理，B错误；
C．可用稀释涂布平板法接种计数大肠杆菌的活菌数，C正确；
D．平板冷凝后皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，若将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染，D正确。
故选B。

4．【答案】D

【解析】

试题分析：

微生物分离的基本步骤为配制培养基．接种．培养筛选等。无菌培养，是指在灭菌条件下进行的培养试验。首先要对培养材料灭菌，其次对所使用的容器．介质．营养液等都要高压灭菌，在试验全过程中严格检测无菌条件。

解答：

A．为避免杂菌污染，对实验操作空间．操作者的衣着和手进行清洁和消毒，A正确；
B．用于微生物培养的器皿．接种用具和培养基要进行灭菌，一般是进行高压蒸汽灭菌，B正确；
C．高压蒸汽灭菌锅需将冷空气彻底排除后才能将锅密闭，否则冷空气的存在会影响灭菌效果，C正确；
D．使用后的液体培养基在丢弃前要用高压蒸汽灭菌法进行处理，D错误。
故选D。

5．【答案】D

【解析】

试题分析：

病毒是一种个体微小，结构简单，只含一种核酸（DNA或RNA），必须在活细胞内寄生并以复制方式增殖的非细胞型生物。因此病毒离开了宿主细胞，就成了没有任何生命活动．也不能独立自我繁殖的化学物质。它的复制．转录．和转译的能力都是在宿主细胞中进行，当它进入宿主细胞后，它就可以利用细胞中的物质和能量完成生命活动，按照它自己的核酸所包含的遗传信息产生和它一样的新一代病毒。

解答：

AB两种培养基种不含活细胞，病毒不能存活，牛肉汤是给培养基提供氮源的物质，也不含活细胞不能让病毒存活，活鸡胚中具有活细胞，能够给病毒的存活提供条件，ABC错误；D正确。
故选D。

6．【答案】B

【解析】

试题分析：

平板划线法是指通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种，逐步稀释分散到培养基的表面，最后得到由单个细菌繁殖而来的菌落。

解答：

A．接种前先要用火焰灼烧接种环，目的是避免接种环上可能存在的微生物污染培养物，A正确；

B．火焰旁存在无菌带，故在火焰旁进行接种的目的是防止杂菌污染，B错误；

C．最后一次划线结束后灼烧接种环的目的是：杀死接种环上残存的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者，C正确；

D．在第二次及以后划线时，总是从上一次划线的末端开始，这样做的目的是使聚集的菌种，逐步稀释分散到培养基的表面，最后得到由单个细菌繁殖而来的菌落，D正确。

故选B。

7．【答案】C

【解析】

试题分析：

高压灭菌加热结束时，需切断热源，让灭菌锅内温度自然下降，当压力表的压力降到零时，再打开排气阀，旋松螺栓，最后再打开盖子。由于培养菌落时需倒置培养，为了方便查看，用记号笔标记培养皿中菌落时，应标记在皿底上。倒平板时，左手将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，倒入培养基后，左手立刻盖上培养皿的皿盖，操作中应避免培养基溅到皿盖上。经火焰灭菌后的接种环应冷却后再接种，因为温度过高，会使菌落死亡。

解答：

A．高压灭菌加热结束时，应等压力表的压力降到零时，再打开排气阀，旋松螺栓，打开盖子，A正确；

B．倒平板过程中不能打开培养皿的皿盖，以防杂菌污染，B正确；

C．经火焰灭菌后的接种环温度很高，若此时趁热挑起待纯化菌落会使菌落死亡，C错误；

D．用记号笔标记培养皿中菌落时，由于培养菌落时需倒置培养，为了方便查看，应标记在皿底上，D正确。

故选C。

8．【答案】D

【解析】

试题分析：

9．【答案】B

【解析】

试题分析：

微生物培养剂分离的关键是无菌操作。常用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法。无菌操作常用的方法主要有消毒和灭菌。据此分析作答。

解答：

A．为防止“超级细菌”散布到环境中，应对接种时常用的工具进行灼烧灭菌，A正确；

B．若采用显微镜直接计数培养液中MRSA的数量，由于无法区分死菌和活菌，故计数结果会比活菌实际值偏高，B错误；

C．可采用稀释涂布平板法进行接种以对固体培养基中的超级细菌进行计数，C正确；

D．为了方便后续使用，可将超级细菌菌种在4℃条件下用斜面保藏法临时保藏起来，D正确。

故选B。
 

10．【答案】C

【解析】

试题分析：

培养基是按照微生物的生长需要，用人工方法配制而成的营养物，其中有些是各种微生物都必需的，大多数情况下微生物特殊营养要求配制的培养基，称选择培养基。

解答：

比较细菌能够生长的培养基的添加物，凡添加了物质J的培养基，细菌都能生长，反之则不能生长，说明物质J是细菌不能合成的。故选C。

11．【答案】C

【解析】

自养微生物可以利用无机碳源合成自身需要的营养物质，糖类是有机碳，能利用糖类的是异养微生物，A错误。石油中含有有机物，利用石油的微生物也是异样微生物，B错误。二氧化碳是无机碳，能利用无机碳的是自养微生物，C正确。牛肉膏中富含有机物，能利用牛肉膏的是异养微生物，D错误。

12．【答案】B

【解析】

试题分析：

据题表分析：该培养基加入了琼脂，故为固体培养基；稀释涂布平板法是根据微生物在固体培养基上所形成的单个菌落，即是由一个单细胞繁殖而成这一培养特征设计的计数方法，一个菌落代表一个单细胞；Ⅱ和Ⅲ对照，说明大肠杆菌的生长需要碳源；Ⅰ与Ⅱ对照说明大肠杆菌的生长需要生长因子。

解答：

A．该培养基加入了琼脂，故为固体培养基，A错误；

B．该实验中应该选取培养 12 小时时的记录作为实验结果，B正确；

C．Ⅰ与Ⅲ对照，说明大肠杆菌生长需要葡萄糖，但不能证明是否需要特殊营养物质，C错误；

D．Ⅱ和Ⅲ对照，自变量是有无葡萄糖，说明大肠杆菌的生长需要碳源如葡萄糖，但不能确定葡萄糖是唯一碳源，D错误。

故选B。

13．【答案】B

【解析】

试题分析：

14．【答案】D

【解析】

试题分析：

微生物接种的方法中最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法，前者是指通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种，逐步稀释分散到培养基的表面，后者是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。

解答：

A．倒平板时不能把培养皿盖完全打开并放到桌面上，这样会污染培养皿中的培养基，A错误；

B．除了第一次划线需要将接种环灼烧灭菌外，以后的每一次划线前也要将接种环进行灼烧，将上次划线结束后残留的细菌杀死，使细菌尽快分散成单个，B错误；

C．应用稀释涂布平板法对微生物进行计数的估计值比实际值偏小，因为可能多个微生物在一起长成一个菌落，C错误；

D．与平板划线法相比，稀释涂布平板法分离得到单菌落的效果更好，D正确。

故选D。

15．【答案】D

【解析】

试题分析：

无菌技术的主要内容：
①对实验操作的空间．操作者的衣着和手，进行清洁和消毒；
②将用于微生物培养的器皿．接种用具和培养基等器具进行灭菌；
③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行；
④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。

解答：

A．实验前需用75%的酒精棉球擦拭双手，进行消毒，A正确；
B．配制好的培养基可通过高压蒸汽进行灭菌，B正确；
C．接种环可以通过酒精灯火焰灼烧进行灭菌，C正确；
D．为防止污染环境，使用后的培养基需要灭菌，才能丢弃到指定的地方，D错误。
故选D。

16．【答案】A

【解析】

试题分析：

无菌技术的主要内容：①对实验操作的空间．操作者的衣着和手，进行清洁和消毒；②将用于微生物培养的器皿．接种用具和培养基等器具进行灭菌③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行；④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。

解答：

酒精灯火焰附近存在一个无菌区，无菌操作时，称取土壤．稀释土壤溶液．涂布平板等操作要在酒精灯火焰附近进行，但土壤取样不需要进行无菌操作，所以不需要在酒精灯火焰附近进行，A正确。

故选A。

17．【答案】C

【解析】

试题分析：

用牛肉膏蛋白胨固体培养基进行大肠杆菌的纯化培养，可分为制备培养基和纯化大肠杆菌两个阶段进行，其中制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是计算．称量．溶化．灭菌．倒平板。微生物接种的核心是防止杂菌的污染，保证培养物的纯度。

解答：

①蛋白胨只能提供碳源．氮源．维生素，①错误；

②待培养基冷却至50℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板，②错误；

③待平板冷却凝固约5～10min后，将平板倒过来放置，使皿盖在下，皿低在上，③正确；

④制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作顺序为计算．称量．溶化．灭菌．倒平板，④错误；

⑤将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯，加入少量的水，加热，⑤正确。

故选C。

18．【答案】A

【解析】

试题分析：

菌落是指由一个微生物细胞在适宜的培养基上形成一个肉眼可见的，具有一定形态结构的子细胞群体．不同种类的细菌所形成的菌落，在大小．形状．光泽度．颜色．硬度．透明度等方面具有一定的特征，每种细菌在一定条件下所形成的菌落，可以作为菌种鉴定的重要依据。

解答：

A．同种类的细菌所形成的菌落，在大小．形状．光泽度．颜色．硬度．透明度等方面具有一定的特征，可以作为菌种鉴定的重要依据，A正确；

B．单个细菌个体微小，用肉眼是看不见的，细菌形态不适合作为菌种鉴定的依据，B错误；

C．单个细菌个体微小，细菌体积不适合作为菌种鉴定的依据，C错误；

D．细菌都属于原核生物，形体微小，结构大同小异，不适合作为菌种鉴定的依据，D错误。

故选A。