北师大版 (2019)选择性必修3 生物技术与工程第二节 微生物纯培养物的选择当堂检测题

1.2微生物纯培养物的选择

1.利用选择培养基可以从混杂的微生物群体中分离出所需的微生物,通过缺氮培养基、含青霉素的培养基、 含氨的无机培养基,可从土壤中分离出的微生物依次是（  ）

A.硝化细菌、放线菌、根瘤菌 B.根瘤菌、青霉菌、圆褐固氮菌
C.圆褐固氮菌、放线菌、硝化细菌菌 D.圆褐固氮菌、酵母菌、硝化细菌

2.下列关于微生物数量测定的叙述，正确的是(   )

A.通过稀释涂布平板法统计的活菌数一般低于实际的活菌数

B.利用显微镜进行直接计数时，可使用普通的载玻片完成计数

C.平板划线法可以分离微生物，也可以统计细菌数目

D.为了减少误差，应选取所有稀释浓度中菌落为30~300的平板统计，计算平均值

3.下列关于统计菌落数目的方法的叙述，不正确的是(   )

A.采用稀释涂布平板法获得的菌落数往往少于实际的活菌数

B.当样品的稀释度足够高时，一个活菌往往会形成一个菌落

C.为了保证结果准确，一般采用菌落密度较大的平板进行计数

D.在某一浓度下涂布三个平板，若三个平板统计的菌落数差别不大，则应以它们的平均值作为统计结果

4.医院检验科从伤口分泌物的细菌培养结果中随机选取312例，分析其中所含有病原体类型和病原体抗菌药物敏感情况，为临床上抗生素的应用提供参考。如表是金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌对常用抗菌药物敏感性实验结果。有关说法错误的是(   )

A.从伤口的分泌物中分离细菌时要注意无菌操作

B.培养细菌的培养基需要严格消毒

C.可以利用稀释涂布平板法对细菌进行计数

D.由表中数据可知万古霉素的抗菌性最好

5.下列有关血细胞计数板的叙述中，错误的是(   )

A.利用血细胞计数板计数的方法属于显微镜直接计数法

B.血细胞计数板的一个方格网中有九个大方格

C.血细胞计数板上的双线用于区分大方格，单线用于区分中方格

D.用酒精清洗后的血细胞计数板可用绸布轻轻拭干

6.下列关于对分解尿素的细菌进行分离、计数的实验的叙述，错误的是(   )

A.统计菌落数目时，当样品的稀释度足够高时，培养基表面的一个菌落，一定来源于样品稀释液中的一个活菌

B.统计菌落数目时，通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品大约含有多少活菌

C.设置对照的目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的干扰

D.以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，通过检测培养基pH的变化，基本能准确鉴定培养基中的细菌就是能够分解尿素的菌种

7.含下列成分的培养基能选择出分解尿素的细菌的是(   )

A.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、尿素、琼脂、水
B.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、琼脂、水
C.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、尿素、琼脂、水
D.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、水

8.某同学为了分离以尿素为氮源的微生物，配制某培养基的成分如下：Na2HPO4、KH2PO4、葡萄糖、MgSO4·7H2O、酚红、琼脂、水和尿素溶液。下列叙述错误的是(   )

A．该培养基既有选择功能，又有鉴别功能

B．配制该培养基时，要用无菌水，不能用蒸馏水

C．稀释涂布平板法统计的菌落数往往低于实际的菌落数

D．在该培养基中，可以通过检测pH的变化来判断尿素是否分解

9.下图是研究人员从红棕壤中筛选高效分解尿素的细菌的过程示意图，下列有关叙述正确的是(   )

① 制备红棕壤浸出液

② 在选择培养基中培养

③ 筛选，纯化分解尿素的细菌

④ 细菌分解尿素能力的鉴定和比较

A. 在配制步骤② ③ 的培养基时，采用干热灭菌的方法进行灭菌

B. 步骤③ 所选用的培养基要以尿素为唯一氮源

C. 步骤③ 用平板划线法接种，将聚集的细菌分散，以获得单菌落

D. 步骤④ 挑取步骤③ 培养基中的同一菌落分别进行接种，比较细菌分解尿素的能力

10.某生物兴趣小组尝试对土壤中分解尿素的细菌进行分离并计数，相关叙述正确的是(   )

A.制备选择培养基时，需加入尿素、琼脂、葡萄糖、硝酸盐等物质

B.用活菌计数法统计结果，活菌的实际数目往往比统计的菌落数低

C.脲酶将尿素分解成氨使培养基的pH降低，加入酚红指示剂后变红

D.每克样品中的菌株数=（C/V）×M，C为某一稀释度下平板上的平均菌落数

11.检测土壤中细菌总数实验中，操作错误的是(   )

A.本实验可以选用牛肉膏蛋白胨培养基，不可以采用平板划线法

B.取104、105、106倍的土壤稀释液和蒸馏水各0.1mL，分别涂布于各组平板上

C.将实验组和对照组平板倒置培养，防止水分过快蒸发

D.37℃恒温培养24~48小时，确定对照组无菌后，选择菌落数在30~300之间的实验组平板进行计数

12.下列关于分离并检测土壤中尿素分解菌的实验操作，错误的是(   )

A.用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，并用高压蒸汽灭菌法进行灭菌

B.用稀释涂布平板法接种，接种操作要在酒精灯火焰附近进行

C.将实验组和对照组的平板倒置，以免污染

D.选择菌落数在30~300之间的实验组平板进行计数

13.研究小组为了探究覆盖保鲜膜对西瓜表面微生物的种类和数量的影响，他们将覆盖保鲜膜保存了三天的西瓜的瓜瓤制备成浸出液，再将浸出液接种到培养基平板上进行观察。下列说法正确的是(   )

A.应用液体培养基接种浸出液进行培养

B.该实验的自变量是培养一段时间后的平板上的菌落的种类和数量

C.每组至少设置三个平板，确保实验结果的准确性

D.只需要设置未接种瓜瓤浸出液的空白平板作对照

14.营养缺陷型菌株是野生型菌株经过人工诱变或自发突变失去了合成某种生长因子的能力，只能在补充了相应的生长因子的基本培养基中才能正常生长的变异菌株。某研究小组对酵母菌用紫外线照射后将其接种到甲培养皿中的培养基上，一段时间后将甲培养皿中的菌落影印接种（不改变菌落位置）到乙、丙两培养皿中的培养基上，进一步培养得到如图所示结果。

下列分析正确的是(   )

A.接种到甲培养皿中的培养基上采用的是稀释涂布平板法

B.甲、丙培养皿中的培养基是基本培养基

C.甲培养皿中菌落数有可能比接种的酵母菌数少

D.甲、乙、丙三个培养皿都可能存在营养缺陷型菌株

15.日前微博传言手机细菌比马桶多，如图是央视和北京卫视通过实验展示的调查结果。回答下列相关问题：

（1）图中两电视台均采用_____法接种，接种前需要采用_____法对培养基进行灭菌。

（2）通过观察菌落的_____等特征（写2个即可），以初步鉴定手机屏幕和马桶按钮上的微生物类群。两电视台实验操作均正确且完全一致，但报道结果截然不同，最可能的原因是_____。

（3）在手机上发现的有害细菌中，最为常见的当属金黄色葡萄球菌。这种细菌可导致一系列感染，例如食物中毒和脓疱病，严重时可导致败血症。该菌有高度耐盐性，可在10%~15%的NaCl肉汤中生长，这种肉汤属于_____培养基（从物理性质和功能两方面回答）。

（4）按图操作取样面积，实验员测定某手机屏幕的细菌量，将10mL菌悬液进行梯度稀释，分别取0.1mL稀释倍数为103的样品液接种到三个培养基上，培养一段时间后，统计菌落数分别为48、50、52，则该手机屏幕的细菌数为_____个/cm2。

（5）为了有效地杀死手机上的大部分细菌，可每周用75%的酒精擦拭_____（填“灭菌”或“消毒”）。

答案以及解析

1.答案：D

解析：本题考查选择培养基的相关知识。缺氮培养基、含青霉素的培养基、含氨的无机培养基上能生长的生物依次是自生固氮微生物、真菌、硝化细菌。根瘤菌属于共生固氮微生物,放线菌不属于真菌,因此只有D选项符合题意。

2.答案：A

解析：利用稀释涂布平板法统计活菌时，当两个或多个细胞连在一起时，会形成一个菌落，导致统计的活菌数低于实际的活菌数，A正确；利用显微镜进行直接计数时，需要使用血细胞计数板或细菌计数板，B错误；平板划线法可以分离微生物，不能统计细菌数目，C错误；利用稀释涂布平板法计数时，需要选择同一稀释浓度的菌落数为30~300的平板进行计数，D错误。

3.答案：C

解析：稀释涂布平板法常用来统计样品中活菌的数目，当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，值得注意的是，该方法统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，这是因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，A、B正确。为了保证结果准确，一般选择菌落数在30~300的平板进行计数，设计实验时，一定要至少用三个平板做重复实验，才能增强实验的说服力和准确性，分析结果时，一定要考虑所设置的重复实验的结果是否一致，差别不大时，取平均值作为统计结果，C错误，D正确。

4.答案：B

解析：分离细菌时为了防止污染应该进行无菌操作；培养细菌的培养基应该进行高压蒸汽灭菌而不是消毒；可以利用稀释涂布平板法或血细胞计数板法对细菌进行计数；由表中的数据可知，万古霉素无论是在敏感株数还是在敏感率上都是最高的，所以万古霉素的抗菌性最好。

5.答案：C

解析：显微镜直接计数是测定细菌数量的常用方法，利用血细胞计数板计数的方法属于显微镜直接计数法；血细胞计数板的一个方格网中有九个大方格，其中只有中间的一个大方格为计数室，供计数微生物用；血细胞计数板上的双线用于区分中方格，单线用于区分小方格；用酒精清洗后的血细胞计数板可用绸布轻轻拭干。

6.答案：A

解析：用稀释涂布平板法进行微生物计数时，当样品的稀释度足够高时，培养基表面的一个菌落，往往来源于样品稀释液中的一个活菌，但当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的也只是一个菌落，因此统计的菌落数往往比活菌的实际数目少，只能推测出样品大约含有多少活菌，A错误，B正确；实验时，需要设置不接种的培养基与实验组一起培养作空白对照，设置对照的目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的干扰，C正确；尿素分解菌产生的脲酶能够将尿素分解为氨，使pH升高，培养基中加入的酚红指示剂呈红色，D正确。

7.答案：A

解析：所用选择培养基的基本要求是满足分解尿素的细菌的生长条件，抑制或阻止其他微生物的生长，且尿素是唯一的氮源，葡萄糖可以作为碳源，因此A正确；B选项缺少尿素，错误；C选项缺少葡萄糖作为碳源，错误；D选项中缺少尿素，且牛肉膏、蛋白胨也可提供氮源，错误。综上，A正确，B、C、D均错。

8.答案：B

解析：

9.答案：B

解析：A、培养基应该用高压蒸汽灭菌，A错误；

B、要筛选尿素分解菌，应该以尿素为唯一氮源，B正确；

C、根据图示可知，步骤③用稀释涂布平板法将聚集的细菌分散，以获得单菌落，C错误；

D、步骤④挑取步骤③培养基中的不同菌落分别进行接种，比较细菌分解尿素的能力，D错误。

故选B。

10.答案：D

解析：本题主要考查对微生物计数的方法。对分解尿素的细菌进行分离时，需要以尿素作为唯一氮源，因此在制备选择培养基时不能加入硝酸盐，A错误；用活菌计数法统计结果时，往往会出现菌落重叠的现象，故活菌的实际数目往往比统计的菌落数高，B错误；脲酶将尿素分解成氨使培养基的pH升高，加入酚红指示剂后变红，C错误；每克样品中的菌株数=（C/V）×M，C为某一稀释度下平板上的平均菌落数，D正确。

11.答案：B

解析：本题考查微生物的培养与计数实验。检测土壤中细菌总数，需要用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，且应采用稀释涂布平板法来计数，平板划线法不能用来计数，A正确；取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1mL，分别涂布于各组平板上，B错误；将实验组和对照组平板倒置培养，可以防止水分过快蒸发，C正确；在确定对照组无菌后，选择菌落数在30~300的实验组平板进行计数，D正确。

12.答案：A

解析：本题考查分离土壤中尿素分解菌的实验。分离土壤中的尿素分解菌，所用培养基要以尿素为唯一氮源，不能用牛肉膏蛋白胨培养基，A错误；稀释涂布平板法接种时，要在酒精灯火焰附近操作，因为酒精灯火焰附近无菌，B正确；将实验组和对照组的平板倒置，可以避免水滴入培养基中造成污染，C正确；计数时要选择菌落数在30~300之间的实验组平板，D正确。

13.答案：C

解析：要探究微生物种类和数量的变化，应采用固体培养基，用稀释涂布平板法进行接种，液体培养基无法观察到菌落，不能区分微生物种类，A错误；该实验是探究覆盖保鲜膜保存的西瓜中微生物种类和数量是否比没有覆盖保鲜膜的多，自变量为保鲜膜覆盖与否，因变量是培养一段时间后的平板上的菌落的种类和数量，B错误；每组至少设置三个平板，避免偶然性，确保实验结果的准确性，C正确；需要设置接种没有覆盖保鲜膜的瓜瓤浸出液作对照，D错误。

14.答案：AC

解析：甲培养皿中的菌落均匀分布，接种方法应为稀释涂布平板法，A正确；甲、丙培养基中菌落数多，包括野生型酵母菌菌株和某种营养缺陷型酵母菌菌株，乙培养皿中菌株是野生型酵母菌菌株，乙培养皿的培养基是基本培养基，甲和丙是加入了生长因子的培养基，B错误；由于基因突变具有不定向性，接种到甲培养皿的酵母菌可能还有其他营养缺陷型，且当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，因此甲培养皿中菌落数有可能比接种的酵母菌数少，C正确；乙培养皿的培养基是基本培养基，形成的菌落只可能是由野生型菌株形成的，D错误。

15.答案：（1）稀释涂布平板；高压蒸汽灭菌

（2）形状、大小、隆起程度和颜色等；手机的取样和马桶的取样都不相同

（3）液体选择

（4）2×105

（5）消毒

解析：（1）分析题图可知，图中菌落均匀分布在培养基上，故两电视台均采用稀释涂布平板法接种，接种前需要采用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌。

（2）通过观察菌落的特征如形状、大小、隆起程度和颜色等以初步鉴定手机屏幕和马桶按钮上的微生物类群。两电视台实验操作均正确且完全一致，但报道结果截然不同，最可能的原因是手机的取样和马桶的取样都不相同。

（3）金黄色葡萄球菌有高度耐盐性，可在10%~15%的NaCl肉汤中生长，这种肉汤是液体培养基，且其中高浓度的NaCl能起到选择作用，因此这种肉汤属于液体选择培养基。

（4）按图操作取样面积，实验员测定某手机屏幕的细菌量，将10mL菌悬液进行梯度稀释，分别取0.1mL稀释倍数为103的样品液接种到三个培养基上，培养一段时间后，统计菌落数分别为48、50、52，菌落数的平均值是50，则该手机屏幕的细菌数为：（50÷0.1×103×10）÷25=2×105（个/cm2）。

（5）为了有效地杀死手机上的大部分细菌，可每周用75%的酒精擦拭消毒。