北师大版 (2019)选择性必修3 生物技术与工程第三节 传统发酵技术综合训练题

【精编】第三节传统发酵技术-1同步练习

一．单项选择

1．以下哪种方式可以用来分离培养由实验人员设计的特定环境中生长的微生物，尽管我们并不知道哪种微生物可以在这种特定的环境下生长？（    ）

A．平板培养 B．富集培养

C．稀释涂布 D．单细胞显微分离

2．某同学配制某种培养基对淀粉分解菌进行筛选，实验设计如图，下列说法正确的是

A. 该固体培养基对淀粉分解菌具有选择作用

B. 该培养基中的淀粉为微生物生长提供碳源和氮源

C. 菌落①分解淀粉的能力大于菌落②

D. 该实验不可用刚果红染液替代碘液染色

3．微生物培养过程中，要十分重视无菌操作，现代生物学实验中的许多方面也要进行无菌操作，防止杂菌污染。请分析下列操作，其中错误的是（　　）

①煮沸消毒可以杀死微生物细胞和一部分芽孢　②接种操作要在酒精灯火焰附近进行　③家庭制作葡萄酒时要将容器和葡萄进行灭菌　④培养基要进行高压蒸汽灭菌　⑤加入培养基中的指示剂或染色剂不需要灭菌

A. ①② B. ②④ C. ②⑤ D. ③⑤

4．下列关于菌种的选育的叙述，不正确的是（    ）

A．自然选育菌种费时且盲目性大

B．诱变育种原理的基础是基因突变

C．采用基因工程的方法可构建工程菌

D．传统发酵技术和现代工业发酵都需要选育菌种

5．如图所示为实验室使用某种接种方法在培养基上培养某种微生物的结果。下列相关说法正确的是（    ）

A．该图最可能是用稀释涂布平板法进行接种的

B．在操作时，为防止杂菌污染，需进行严格的消毒和灭菌

C．该种微生物有可能是新冠病毒COVID-19

D．该培养基上的菌落分布不均匀，代表纯化失败

6．耐辐射球菌对射线具有超强耐受力，其P基因突变株受射线照射后生存率显著降低。研究者利用P基因成功转化不耐辐射的酵母菌，经射线照射后检测发现，与非转基因酵母菌相比，转基因酵母菌三种抗氧化酶含量显著增加。相关叙述不合理的是（    ）

A．采用划线法将酵母菌接种到液体培养基中培养

B．酵母菌的接种．培养等操作需保证无杂菌污染

C．耐辐射球菌对射线的耐受力与P基因密切相关

D．P基因通过增强细胞抗氧化能力使细胞具有耐受力

7．如果发酵工程生产的产品是菌体，菌体分离采用的方法是（    ）

A．蒸馏 B．过滤 C．萃取 D．离子交换

8．某同学对 101．102．103倍稀释液计数的平均菌落数分别是 2760．295 和 16，则菌落总数为（所用稀释液体积为 0．1 mL）（    ）

A．2．76×104个/mL B．2．95×105 个/mL

C．4．6×104个/mL D．3．775×104个/mL

9．现有两种固体培养基，已知其配制时所加的成分和含量如下表，假设用这两种培养基分别去分离土壤中的两种微生物，你认为它们适于分离（    ）

A．甲培养基适于分离自养型自生固氮菌；乙培养基适于分离异养型自生固氮菌

B．甲培养基适于分离异养型自生固氮菌；乙培养基适于分离自养型自生固氮菌

C．甲培养基适于分离酵母菌；乙培养基适于分离真菌

D．甲培养基适于分离自养型共生固氮菌；乙培养基适于分离异养型共生固氮菌

10．下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述，其中错误的是（　　）

A．用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高压蒸汽灭菌后倒平板

B．一般取10３．104．105倍的土壤稀释液和无菌水各0．1mL，分别涂布于各组平板上

C．将实验组和对照组平板倒置，37℃恒温培养24～48小时

D．确定对照组无菌后，选择菌落数在30～300的实验组平板进行计数

11．下列有关微生物的培养和分离的叙述，正确的是（    ）

A．灼烧接种环后，为避免其他杂菌的干扰，应立即伸入菌液取菌种

B．若要检测培养基是否被污染，可将未接种的培养基在相同条件下进行培养

C．在第一次划线前灼烧接种环和每次划线前灼烧接种环的目的相同

D．若对大肠杆菌进行计数，稀释涂布平板法统计的数目会比实际值略大

12．我国《生活饮用水卫生标准》中关于生活饮用水的细菌标准具体规定如下：细菌总数不超过100个/mL，大肠杆菌数不超过3个/mL。为了检验城市自来水是否达标，某生物兴趣小组进行了相关实验。下列有关叙述正确的是（　　）

A．实验过程中应使用涂布器．移液管等操作工具，使用前用酒精消毒

B．取样水龙头应用火焰灼烧，且打开水龙头一段时间后再取样

C．检验自来水中大肠杆菌数是否达标，可用平板划线法来分离并计数

D．空白对照组培养基长有6个菌落，则将实验组菌落数减去6填入记录表

13．微生物培养过程中，要十分重视无菌操作，现代生物学实验中的许多方面也要进行无菌操作，防止杂菌污染，请分析下列操作中错误的有几项（　　）

①煮沸消毒可以杀死微生物营养细胞和一部分芽孢②配制培养基时可以加入未灭菌的清水  ③使用过的培养基要经过消毒后丢弃④培养基只能进行湿热灭菌，培养皿只能进行干热灭菌  ⑤加入培养基中的指示剂或染色剂不需要灭菌

A. 1 项 B. 2 项 C. 3 项 D. 4 项

14．微生物培养过程中，要十分重视无菌操作，现代生物学实验中的许多方面也要进行无菌操作，防止杂菌污染。下列无菌操作错误的是（    ）

A．接种时培养皿盖只打开一条缝隙

B．菌种和培养基使用前均需灭菌处理

C．接种前．后都要过火灼烧斜面菌种试管口

D．高压蒸汽灭菌既能杀死微生物的营养体，也能杀死芽孢等休眠体

15．下列有关微生物分离，培养和计数的叙述，正确的是（    ）

A．分离土壤中微生物时，需要先对土壤灭菌，再进行培养

B．测定土壤中细菌数量时，一般选用103-107倍的稀释液

C．测定土壤样品中的细菌数目，常用稀释涂布平板法或平板划线法进行计数

D．统计菌落数目时，当样品的稀释度足够高时，一个活菌会形成一个菌落

16． 下列关于发酵工程及其应用的说法，正确的是（　　）

A. 黑曲霉可以用于酱油．柠檬酸．凝乳酶的工业生产

B. 接种是发酵工程的中心环节

C. 用于发酵工程的菌种，可以从自然界中筛选，也可以通过基因工程育种或单倍体育种获得

D. 可以通过蒸馏．萃取等方法对单细胞蛋白进行分离．提纯

17．不同的微生物对营养物质的需要各不相同。下列有关一种以CO2为唯一碳源的自养微生物营养的描述中，不正确的是（　　）

A．氮源物质为该微生物提供必要的氮素                 

B．碳源物质也为该微生物提供能量

C．无机盐是该微生物不可缺少的营养物质

D．水是该微生物的营养要素之一

18．配制培养自身固氮菌的培养基用的水，配制通用培养基用的水，“抗生素抑菌现象观察实验”中用作对照的滤纸片上应滴加的水，分别是（　　）

A．自来水．蒸馏水．无菌水 B．蒸馏水．自来水．无菌水

C．无菌水．蒸馏水．自来水 D．自来水．无菌水．蒸馏水

参考答案与试题解析

1．【答案】B

【解析】

富集培养是指利用不同微生物间生命活动特点的不同，人为地提供一些特定的环境条件，使特定种（类）微生物旺盛生长，使其在数量上占优势，更利于分离出该特定微生物，并引向纯培养。

解答：

A．平板培养要知道该微生物生长特定的环境，配制的培养基要满足该微生物对营养物质的需求，A错误；

B．由分析可知，在不知道哪种微生物可以在某种特定的环境下生长的情况下，用富集培养可以分离培养这种特定环境中生长的微生物，B正确；

C．稀释涂布要知道该微生物生长特定的环境，配制的培养基要满足该微生物对营养物质的需求，C错误；

D．采取显微分离法从混杂群体中直接分离单个细胞进行培养以获得纯培养，需要提前知道该微生物生长特定的环境，配制满足其生长繁殖的培养基，D错误。

故选B。

2．【答案】 A

【解析】该培养基以淀粉为唯一碳源，对淀粉分解菌具有选择作用，A正确；淀粉只含C．H．O元素，不能为微生物生长提供氮源，B错误；菌落②透明圈比菌落①大，菌落②分解淀粉的能力大于菌落①，C错误；刚过红能够与多糖物质形成红色复合物，淀粉被淀粉分解菌分解，会在淀粉分解菌周围形成透明圈，D错误。

3．【答案】D

【解析】①100℃煮沸5~6min可以杀死微生物细胞和一部分芽孢，①正确；

②酒精灯火焰附近存在一个无菌区，为了无菌操作，接种操作要在酒精灯火焰附近进行，②正确；

③家庭制作葡萄酒时所利用的微生物是葡萄皮表面的酵母菌，故不能对葡萄进行灭菌，③错误；

④培养基灭菌常用高压蒸汽灭菌法，④正确；

⑤指示剂和染料混有微生物，故加入培养基前需灭菌，⑤错误。

故选D。

4．【答案】D

【解析】

菌种的选育方式有：

①自然选育：自然选育的菌种来源于自然界．菌种保藏机构或生产过程，从自然界中选育菌种的过程较为复杂，而从生产过程或菌种保藏机构得到菌种的自然选育过程较为简单；

②杂交育种：杂交育种杂交育种法杂交育种指不同种群．不同基因型个体间进行杂交，并在其杂种后代中通过选择而育成纯合品种的方法。杂交可以使双亲的基因重新组合，形成各种不同的类型，为选择提供丰富的材料；

③基因工程育种：它是用人为的方法将所需要的某一供体生物的遗传物质——DNA大分子提取出来，在离体条件下用适当的工具酶进行切割后，把它与作为载体的DNA分子连接起来，然后与载体一起导入某一更易生长．繁殖的受体细胞中进行正常的复制和表达，从而获得新物种。

解答：

A．自然选育菌种要到相应的环境从众多的微生物中进行筛选所以费时且盲目性大，A正确；

B．菌种的选育可以采用诱变育种的方法，其原理是基因突变，B正确；

C．可以采用基因工程定向构建工程菌的方法获得，C正确；

D．现代工业发酵需要选育菌种，传统发酵技术一般利用自然界中的菌种，不需要选育菌种，D错误。

故选D。

5．【答案】B

【解析】

图示表示的是用平板划线法接种后微生物的生长情况，其中需要用到的工具有培养皿．接种环．酒精灯等，整个过程需要严格进行无菌操作。

解答：

A．题图中菌落分布不均匀，部分菌落过于密集，最可能是用平板划线法进行接种的，A错误；

B．在操作时，为防止杂菌污染，需进行严格的消毒和灭菌，B正确；

C．病毒不能在培养基上生存繁殖，故该种微生物不可能是新冠病毒COVID-19，C错误；

D．平板划线法，随划线次数的增加，菌落密度逐渐减小，因此菌落分布不均匀，不属于纯化失败，D错误。

故选B。

6．【答案】A

【解析】

微生物接种常用的两种方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过足够稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后，可形成单菌落。

题意分析，耐辐射球菌对射线具有超强耐受力，其P基因突变株受射线照射后生存率显著降低，显然P基因的表达产物能增强球菌对射线的耐受力，然后研究者用P基因成功转化不耐辐射的酵母菌，经射线照射后检测发现，与非转基因酵母菌相比，转基因酵母菌三种抗氧化酶含量显著增加，从而更进一步证明P基因与球菌对射线的超强耐受力有关，且对射线的耐受力是通过抗氧化酶来实现的。

解答：

A．采用划线法只能将酵母菌接种到固体体培养基中培养，A错误；

B．获得纯净培养物的关键是无菌技术，酵母菌的接种．培养等操作过程也不例外，需保证无杂菌污染，B正确；

C．题意显示，耐辐射球菌对射线具有超强耐受力，其P基因突变株受射线照射后生存率显著降低据此可推测，耐辐射球菌对射线的耐受力与P基因密切相关，C正确；

D．成功导入P基因的酵母菌三种抗氧化酶含量显著增加，显然P基因通过增强细胞抗氧化能力使细胞具有耐受力，D正确。

故选A。

7．【答案】B

【解析】

发酵工程生产的产品有两类：一类是代谢产物，另一类是菌体本身，产品不同，分离提纯的方法一般不同。如果产品是菌体，可采用过滤,沉淀等方法将菌体从培养液中分离出来；如果产品是代谢产物，可用萃取．蒸馏．离子交换等方法进行提取。

解答：

根据分析可知，如果产品是菌体，可采用过滤，沉淀等方法，故选B。

8．【答案】B

【解析】

9．【答案】B

【解析】

据表分析：甲培养基中含有的葡萄糖和淀粉是有机物，可以作为碳源和能源，适用于异养微生物生长；乙培养基中不含有机碳源，适用于自养微生物的生长。两种培养基之间的共同点是都不含氮源，说明这两种培养基只能培养具有固氮能力的细菌。

解答：

AD．固氮菌中能独立生存的是自生固氮菌，甲培养基中含有的葡萄糖和淀粉是有机物，由此推出该培养基适于分离异养型的自生固氮菌，AD错误；

BC．乙培养基中不含有机碳源，不能用来分离异养型真菌，但可用来分离培养自养型的自生固氮菌，B正确，C错误。

故选B。

10．【答案】B

【解析】

检测细菌总数，用蒸馏水配置培养基，常用高压蒸汽灭菌法灭菌后，取104．105．106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1 mL，分别涂布于各组平板上，将实验组和对照组放置适宜条件培养，在确定对照组无菌后，选择菌落在30-300的一组平板为代表进行计数。

解答：

A．用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温．高压灭菌后倒平板，A正确；

B．测定土壤中细菌总数利用稀释涂布平板法，即取104．105．106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1mL，分别涂布于各组平板上，B错误；

C．平板倒置后，将实验组和对照组在37℃恒温培养24～48小时，C正确；

D．确定对照组无菌后，为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数，D正确。

故选B。

11．【答案】B

【解析】

12．【答案】B

【解析】

间接计数法（活菌计数法）：

①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。

②操作：a．设置重复组，增强实验的说服力与准确性；b．为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数。

③计算公式：每克样品中的菌株数=（c÷V）×M，其中c代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积（mL），M代表稀释倍数。

解答：

A．实验过程中应用到涂布器．移液管等操作工具，涂布器应用酒精灯火焰灼烧灭菌，冷却后再使用，A错误；

B．为避免杂菌污染，取样水龙头应用火焰灼烧，打开水龙头一段时间后再取样，是为了防止温度过高杀死目的菌，B正确；

C．检验自来水中大肠杆菌数是否达标，可用稀释涂布平板法来分离并计数，C错误；

D．若空白对照组上有6个菌落，则说明该实验失败，实验数据不能采用，D错误。

故选B。

13．【答案】C

【解析】1．消毒是指使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物。消毒方法有煮沸消毒．化学药物消毒．紫外线消毒。

14．【答案】B

【解析】

无菌技术的主要内容：①对实验操作的空间．操作者的衣着和手，进行清洁和消毒；②将用于微生物培养的器皿．接种用具和培养基等器具进行灭菌；③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行；④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。

解答：

A．接种时用左手的拇指和食指将培养皿打开一条稍大于锥形瓶瓶口的缝隙即可，A正确；

B．培养基在使用前需灭菌处理，但是菌种不能灭菌处理，否则菌种也会死亡，B错误；

C．接种前后，均要将斜面菌种试管口通过火焰，防止杂菌污染，C正确；

D．高压蒸汽灭菌法不仅能杀死微生物的营养体，也能杀死芽孢等休眠体，D正确。

故选B。

15．【答案】D

【解析】

微生物接种的方法中最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法，前者是指通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种，逐步稀释分散到培养基的表面，后者是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。

解答：

A．分离土壤中微生物时，不能先对土壤灭菌，再进行培养，因为灭菌后就不能分离出微生物了，A错误；

B．测定土壤中细菌数量时，一般选用104～106倍的稀释液，B错误；

C．测定土壤样品中的细菌数目，常用稀释涂布平板法进行计数，平板划线法不适宜进行计数，C错误；

D．统计菌落数目时，当样品的稀释度足够高时，一个活菌会形成一个菌落，D正确。

故选D。

16．【答案】A

【解析】A．黑曲霉广泛分布于世界各地的粮食．植物性产品和土壤中，是重要的发酵工业菌种，黑曲霉可以用于酱油．柠檬酸．凝乳酶的工业生产，A正确；

B．发酵罐内发酵是发酵工程的中心环节，B错误；

C．发酵工程的优良性状的菌种可以从自然界中筛选出来，也可以通过诱变育种和基因工程育种获得，C错误；

D．单细胞蛋白是微生物菌体，可采用沉淀．过滤等方法分离，而代谢产物则采用蒸馏．萃取．离子交换等方法，D错误。

故选A。

17．【答案】B

【解析】

培养基的组成成分包括碳源．氮源，水．无机盐，有的还有生长因子，以CO2为唯一碳源的培养基培养自养微生物，培养基中还必须提供氮源．水．无机盐。

解答：

A．由分析可知，培养基中还必须提供氮源，氮源物质为微生物提供必要的氮素，A正确；

B．该碳源是二氧化碳，属于无机物，不能作为微生物的能源物质，B错误；

C．由分析可知，培养基中还必须提供无机盐，无机盐是微生物不可缺少的营养物质，C正确；

D．一切生物离不开水，水是微生物的营养要素之一，D正确。

故选B。

18．【答案】B

【解析】