2023届高考生物二轮复习生物技术实践学案

这是一份2023届高考生物二轮复习生物技术实践学案，共41页。

第15讲　生物技术实践
[考纲要求]　1.微生物的分离和培养；2.某种微生物数量的测定；3.培养基对微生物的选择作用；4.利用微生物进行发酵来生产特定的产物以及微生物在其他方面的应用；5.酶在洗涤等方面的应用；6.制备和应用固定化酶；7.发酵食品加工的基本方法；8.从生物材料中提取某些特定的成分；9.运用发酵加工食品的基本方法。

建网络 理考点

查易错 清盲点
1．下列关于微生物的培养、分离与利用的说法，正确的划“√”，错误的划“×”。
(1)为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落。(×)
(2)纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法。(√)
(3)在琼脂固体培养基上长出的单个菌落含有多种细菌。(×)
(4)检测土壤中细菌总数实验操作中，确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数。(×)
(5)培养微生物的培养基分装到培养皿后进行灭菌。(×)
2．下列关于传统发酵技术的应用的说法，正确的划“√”，错误的划“×”。
(1)向腐乳坯表面喷水，有利于毛霉菌丝的生长。(×)
(2)醋酸菌在无氧条件下利用乙醇产生醋酸。(×)
(3)某研究性学习小组以樱桃番茄为材料进行果酒、果醋发酵实验。先供氧进行果醋发酵，然后隔绝空气进行果酒发酵。(×)
(4)在制作果醋时，如果条件适宜，醋酸菌可将葡萄汁中的糖分解成醋酸。(√)
(5)在制作腐乳时，将长满毛霉的豆腐装瓶腌制时，底层和近瓶口处需加大用盐量。(×)
3．下列关于植物有效成分的提取与酶的应用的说法，正确的划“√”，错误的划“×”。
(1)利用鸡血进行“DNA的粗提取与鉴定”的实验中，将丝状物溶解在2 mol/L NaCl溶液中，加入二苯胺试剂即呈蓝色。(×)
(2)薄荷油是挥发性物质，提取薄荷油时应选用干薄荷叶作原料，可采用水蒸气蒸馏法提取。(×)
(3)用萃取法提取薄荷油时，采用的溶剂是有机溶剂，原理是薄荷油易溶于有机溶剂。(√)
(4)用萃取法提取胡萝卜素的主要步骤是：干燥、粉碎、萃取、浓缩、过滤。(×)
(5)提取的胡萝卜素可通过纸层析法进行鉴定，在鉴定过程中不需要对照。(×)
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1．教材选修1 P4“旁栏思考”：你认为应该从哪些方面防止发酵液被污染？　

【答案】　需要从发酵制作的过程进行全面的考虑。例如，榨汁机、发酵装置要清洗干净；每次排气时只需拧松瓶盖、不要完全打开瓶盖等。
2．教材选修1 P9“旁栏思考”：为什么含有抗生素的牛奶不能发酵成酸奶？　

【答案】　酸奶的制作依靠的是乳酸杆菌的发酵作用。抗生素能够杀死或抑制乳酸杆菌的生长，因此含有抗生素的牛奶不能发酵成酸奶。
3．教材选修1 P10“旁栏思考”：为什么日常生活中要多吃新鲜蔬菜，不宜多吃腌制蔬菜？

【答案】　在腌制过程中，蔬菜中的硝酸盐会被微生物还原成亚硝酸盐，大量食用会危害人体健康。
4．教材选修1 P10“旁栏思考”：为什么泡菜坛内有时会长一层白膜？你认为这层白膜是怎么形成的？　

【答案】　形成白膜是由于产膜酵母的繁殖。酵母菌是兼性厌氧微生物，泡菜发酵液营养丰富，其表面氧气含量也很丰富，适合酵母菌繁殖。
5．教材选修1 P17“倒平板操作”讨论3：平板冷凝后，为什么要将平板倒置？　

【答案】　平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。
6．教材选修1 P18“旁栏信息”：微生物的接种方法只有平板划线法和稀释涂布平板法吗？微生物接种的核心是什么？　

【答案】　不是。微生物的接种方法还包括斜面接种、穿刺接种等，微生物接种的核心是防止杂菌污染，保证培养物的纯度。
7．教材选修1 P22“文字信息”：得到3个或3个以上菌落数在30～300的平板一定正确吗？

【答案】　不一定正确，如得到3个平板，菌落数分别为230、34、240，虽然菌落数均在“30～300”，但由于34与另外两个平板上的菌落数差异较大，应找出原因并重做实验。
8．教材选修1 P44“旁栏思考”：为什么能够通过测定滤出的苹果汁的体积大小来判断果胶酶活性的高低？　

【答案】　果胶酶将果胶分解为小分子物质，小分子物质可以通过滤纸，因此，苹果汁的体积大小反映了果胶酶的催化分解果胶的能力。在不同的温度和pH下，果胶酶的活性越大，苹果汁的体积就越大。
9．教材选修1 P50“正文内容”：什么是固定化酶和固定化细胞技术？包含哪些内容？　

【答案】　固定化酶和固定化细胞技术是利用物理或化学方法将酶或细胞固定在一定的空间内的技术，包括包埋法、化学结合法和物理吸附法。
10．教材选修1 P72“正文内容”：芳香化合物只能由植物产生吗？植物芳香油的提取方法有哪些？　

【答案】　微生物中的真菌也可以产生芳香化合物。植物芳香油的提取方法有蒸馏、压榨和萃取等。

考点1　微生物的培养、分离与利用

1．记住3种常用的消毒方法和灭菌方法

2．掌握培养基制备与微生物纯化技术

3．掌握微生物的筛选原理和两个实例
(1)原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等)，同时抑制或阻止其他微生物的生长。因此，可以通过配制选择培养基、控制培养条件等选择目的微生物。
(2)实例

4．掌握统计微生物数目的方法
(1)显微镜直接计数法
①原理：利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物的数量。
②缺点：不能区分死菌和活菌。
(2)活菌计数法(间接计数法)
①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。
②计算公式：每克样品中的菌株数＝(C÷V)×M，其中，C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL)，M代表稀释倍数。
③操作：设置重复组，增强实验的说服力与准确性。同时为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数。

1．(2022·全国甲卷)某同学从被石油污染的土壤中分离得到A和B两株可以降解石油的细菌，在此基础上采用平板培养法比较二者降解石油的能力，并分析两个菌株的其他生理功能。

实验所用的培养基成分如下。
培养基Ⅰ：K2HPO4，MgSO4，NH4NO3，石油。
培养基Ⅱ：K2HPO4，MgSO4，石油。
操作步骤：
①将A、B菌株分别接种在两瓶液体培养基Ⅰ中培养，得到A、B菌液；
②液体培养基Ⅰ、Ⅱ中添加琼脂，分别制成平板Ⅰ、Ⅱ，并按图中所示在平板上打甲、乙两孔。
回答下列问题。
(1)实验所用培养基中作为碳源的成分是________。培养基中NH4NO3的作用是为菌株的生长提供氮源，氮源在菌体内可以参与合成______________________(答出2种即可)等生物大分子。
(2)步骤①中，在资源和空间不受限制的阶段，若最初接种N0个A细菌，繁殖n代后细菌的数量是________。
(3)为了比较A、B降解石油的能力，某同学利用步骤②所得到的平板Ⅰ、Ⅱ进行实验，结果如表所示(“＋”表示有透明圈，“＋”越多表示透明圈越大，“－”表示无透明圈)，推测该同学的实验思路是
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
菌株
透明圈大小
平板Ⅰ
平板Ⅱ
A
＋＋＋
＋＋
B
＋＋
－
(4)现有一贫氮且被石油污染的土壤，根据上表所示实验结果，治理石油污染应选用的菌株是______，理由是
________________________________________________________________________。
【解析】　(1)培养基的成分有碳源、氮源、无机盐和水等，从组成培养基的物质所含化学元素可知，作为碳源的成分是石油。生物大分子DNA、RNA、蛋白质都含有N元素，故氮源在菌体内可以参与合成这些物质。(2)由题意“资源和空间不受限制”可知，细菌的增殖呈“J”型曲线增长，由于DNA的半保留复制，细菌每繁殖一代就是上一代的2倍，根据公式Nt＝N0·λt，λ＝2，繁殖n代后细菌的数量是N0·2n。(3)分析表格数据可知，实验的结果是：在平板Ⅰ上，A菌株降解石油的能力高于B菌株；在平板Ⅱ上，A菌株仍然能降解石油，而B菌株不能降解，根据实验的单一变量和对照原则，推测该同学的思路是：在无菌条件下，将等量等浓度的A菌液和B菌液分别接种到平板Ⅰ的甲和乙两孔处，平板Ⅱ也进行同样的操作，在相同且适宜条件下培养一段时间，比较两个平板的两孔处的透明圈大小并作记录，根据透明圈大降解能力强，透明圈小降解能力弱，进而比较A、B降解石油的能力。(4)由表格数据可知，在平板Ⅱ(无氮源的培养基)上，A菌株仍然能降解石油，而B菌株不能降解，所以要治理贫氮且被石油污染的土壤，应该选用A菌株，因为A菌株降解石油的能力高于B菌株，并且在没有添加氮源的培养基中也能生长。
【答案】　(1)石油　DNA、RNA、蛋白质
(2)N0·2n
(3)在无菌条件下，将等量等浓度的A菌液和B菌液分别接种到平板Ⅰ的甲和乙两孔处，平板Ⅱ也进行同样的操作，在相同且适宜条件下培养一段时间，比较两个平板的两孔处的透明圈大小并作记录，根据透明圈大降解能力强，透明圈小降解能力弱，进而比较A、B降解石油的能力
(4)A　A菌株降解石油的能力高于B菌株，并且在没有添加氮源的培养基中也能生长
2．(2022·全国乙卷)化合物S被广泛应用于医药、食品和化工工业、用菌株C可生产S，S的产量与菌株C培养所利用的碳源关系密切。为此，某小组通过实验比较不同碳源对菌体生长和S产量的影响，结果见表。
碳源
细胞干重(g/L)
S产量(g/L)
葡萄糖
3.12
0.15
淀粉
0.01
0.00
制糖废液
2.30
0.18
回答下列问题。
(1)通常在实验室培养微生物时，需要对所用的玻璃器皿进行灭菌，灭菌的方法有_________________(答出2点即可)。
(2)由实验结果可知，菌株C生长的最适碳源是__________；用菌株C生产S的最适碳源是____________。菌株C的生长除需要碳源外，还需要____________________(答出2点即可)等营养物质。
(3)由实验结果可知，碳源为淀粉时菌株C不能生长，其原因是______________。
(4)若以制糖废液作为碳源，为进一步确定生产S的最适碳源浓度，某同学进行了相关实验。请简要写出实验思路：________________________________________________________________________。
(5)利用制糖废液生产S可以实现废物利用，其意义是__________________________________(答出1点即可)。
【解析】　(1)通常在实验室培养微生物时，为防止实验用的玻璃器皿等物品中原有的微生物污染培养物，需要使用强烈的理化因素杀死物体内外一切微生物的细胞、芽孢和孢子，即对所需的玻璃器皿进行灭菌，玻璃器皿常用的灭菌的方法有干热灭菌、高压蒸汽灭菌等。(2)由实验结果可知，与以制糖废液为碳源相比，以葡萄糖为碳源时菌株C的细胞干重最大，说明最适于菌株C生长的碳源是葡萄糖；而以制糖废液为碳源时，用菌株C生产S的产量高于以葡萄糖为碳源时的产量，说明最适于生产S的碳源是制糖废液。微生物的生长一般都需要水、碳源、氮源和无机盐，还需要满足微生物生长对pH、氧气以及特殊营养物质的要求，故菌株C的生长除需要碳源外，还需要氮源、无机盐、水等营养物质。(3)分析题图表格可以看出在以淀粉为碳源的培养基中，菌株C不能生长，原因可能是菌株C中缺少分解淀粉的酶，不能利用淀粉。(4)要测定生产S的最适制糖废液为碳源的浓度，实验自变量为制糖废液的浓度，可分别配制一系列不同浓度梯度的以制糖废液为唯一碳源的培养基，培养菌株C，其他条件相同且适宜，一段时间后，测定并比较不同浓度制糖废液中的S的产量，S产量最高时对应的制糖废液浓度，即为生产S的最适碳源浓度。(5)利用制糖废液生产S可以实验废物利用，既有利于减少污染、节省原料，又能降低生产成本。
【答案】　(1)高压蒸汽灭菌、干热灭菌
(2)葡萄糖　制糖废液　氮源、无机盐、水
(3)缺少淀粉酶
(4)分别配制一系列不同浓度梯度的以制糖废液为唯一碳源的培养基，培养菌株C，其他条件相同且适宜，一段时间后，测定并比较不同浓度制糖废液中的S的产量，S产量最高时对应的制糖废液浓度，即为生产S的最适碳源浓度
(5)减少污染、节省原料、降低生产成本

1．(2022·广东华南师大附中三模)大肠杆菌是国际上公认的卫生监测指示菌，用于指示食品、饮用水等是否直接或间接受到了粪便的污染。少数微生物能分解乳糖，有些只产酸(酸性物质)，有些只产气，而大肠杆菌既能产酸又能产气，且产生的酸性物质能与伊红美蓝反应而呈现黑色。某小组为检测某水体中大肠杆菌的污染状况，选用了如下两种培养基。
培养基
名称
配方(L－1)
pH
乳糖蛋白
胨培养基
蛋白胨10 g，乳糖5 g，牛肉膏5 g，NaCl 5 g，溴甲酚紫0.16 g(溴甲酚紫在酸性时呈黄色，碱性时呈紫色)
7.4
伊红美蓝
培养基
蛋白胨10 g，乳糖10 g，KH2PO4 5 g，伊红0.4 g，美蓝0.065 g，琼脂15 g
7.4
请回答下列问题：
(1)从物理性质上看，两种培养基的类型________(填“相同”或“不同”)。在乳糖蛋白胨培养基中，为微生物的生长提供氮源的物质有________________；NaCl除了提供无机盐外，还具有________________作用。
(2)乳糖蛋白胨培养基进行灭菌时，不选用121 ℃高压灭菌15 min的方法，而是选用115 ℃灭菌20 min，推测可能的原因是________________________________________________________________________。
(3)某小组取两支含乳糖蛋白胨培养基的试管A和B，A管中加入1 mL待测水样，B管不作处理，然后都放入培养箱中培养24 h。已知溴甲酚紫在酸性时呈黄色，碱性时(pH高于6.8)呈紫色。若出现____________________________时，则提示水样可能被大肠杆菌污染。
(4)该小组为计数大肠杆菌的数目，同时还各取0.1 mL水样直接涂布到三个伊红美蓝平板培养基上进行培养，分别统计平板上的菌落数为34、36、38，估算出每毫升水样中含360个大肠杆菌。有同学指出，估算的大肠杆菌数目不可信，其原因有________________________________________(答两点)。
【解析】　(1)从物理性质上看，两种培养基的类型不同，乳糖蛋白胨培养基为液体培养基，而伊红美蓝培养基中加入了凝固剂—琼脂，为固体培养基；在乳糖蛋白胨培养基中，为微生物的生长提供氮源的物质有蛋白胨、牛肉膏；NaCl除了提供无机盐外，还具有维持细胞渗透压作用。(2)乳糖蛋白胨培养基进行灭菌时，不选用121 ℃高压灭菌15 min的方法，而是选用115 ℃灭菌20 min，原因可能是培养基中有不耐高温(121 ℃)的物质。(3)某小组取两支含乳糖蛋白胨培养基的试管A和B，A管中加入1 mL待测水样，B管不作处理，然后都放入培养箱中培养24 h。已知溴甲酚紫在酸性时呈黄色，碱性时(pH高于6.8)呈紫色。若水样被大肠杆菌污染，由于大肠杆菌既能产酸又能产气，则A管呈黄色并产气，B管呈紫色不产气。(4)大肠杆菌产生的酸性物质能与伊红美蓝反应而呈现黑色，因此统计时应该统计平板上呈现黑色的菌落，同时还缺少不接种的空白对照。
【答案】　(1)不同　蛋白胨、牛肉膏　维持细胞渗透压
(2)培养基中有不耐高温(121 ℃)的物质
(3)A管呈黄色并产气，B管呈紫色不产气
(4)应统计平板上呈现黑色的菌落；缺少不接种的空白对照
2．(2022·山西吕梁二模)尿素[CO(NH2)2]含氮量高，化学性质相对稳定，是现代农业生产中一种重要的氨肥，但只有当其被细菌分解成铵态氮后，才能更好地被植物吸收。回答下列问题：
(1)某研究小组认为根据下表成分配置的培养基不能用于筛选分离尿素分解菌，理由是______________________，若要筛选并鉴定该种细菌，需要对下表培养基的成分进行修改，具体修改措施为__________________，并根据菌落周围出现________鉴定该菌。
KH2PO4
Na2HPO4
MgSO4·
7H2O
蛋白胨
葡萄糖
尿素
蒸馏水
1.4 g
2.1 g
0.2 g
1.0 g
10.0 g
1.0 g
定容至
1000 mL
(2)下图表示该研究小组对尿素分解菌进行分离、计数的实验流程，经适当培养后，5个平板上的菌落数分别为155、175、150、41、160个，分析第四个平板菌落数较低的原因可能是__________________________________，1 g土壤中的活菌数约为________个(保留小数点后两位)，用这种方法统计得到的数值往往________(填“偏大”或“偏小”)。

(3)该研究小组将分离到的尿素分解菌在最适培养温度条件下进行振荡培养，并测定其生长曲线如下图所示。(注：OD600为样品中蛋白质、核酸的浓度，用此指标来代表细菌浓度；A点为培养10 h时的细菌浓度)。

振荡培养的目的是__________________________________________________，通常在培养末期细菌的数量会显著减少，但图中研究人员实际测得的细菌浓度下降较慢，最可能的原因是
________________________________________________________________________。
【解析】　(1)筛选尿素分解菌的培养基应以尿素作为唯一氮源，题中培养基配方中含有蛋白胨，其能为多种微生物提供氮源。对尿素分解菌进行筛选应使用固体培养基，尿素分解菌能将尿素分解为NH3，使培养基pH变大，故向培养基中加入酚红，可使尿素分解菌的菌落呈现红色。(2)第四个平板菌落数较低的原因可能是涂布器灼烧灭菌后未冷却，导致涂布时部分菌体死亡。据图分析，涂布时菌液的稀释度为10－5倍，利用菌落数分别为155、175、150、160个的四个平板求取菌落数的平均值为160个，故可计算出1 g土壤中的活菌数约为160÷0.1×105＝1.60×108个，用这种方法统计的菌落数往往比活菌的数目少，因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。(3)震荡培养的目的是增加培养液中溶解氧的含量，利于菌体与营养物质的充分接触，通常在培养末期细菌的数量会显著减少，但图中研究人员实际测得的细菌浓度下降较慢，最可能的原因是死亡菌体中的蛋白质、核酸没有分解(或测得的是蛋白质、核酸浓度而不是细胞浓度；或死亡菌体没有自溶，不能与活菌区分)。
【答案】　(1)培养基含蛋白胨，尿素不是唯一氮源(培养基中含蛋白胨，蛋白胨中含氮元素)　去掉蛋白胨、添加琼脂和酚红　红色
(2)涂布器灼烧灭菌后未冷却，导致涂布时部分菌体死亡　
1．60×108　偏小
(3)增加培养液中溶解氧的含量，利于菌体与营养液的接触　死亡菌体中的蛋白质、核酸没有分解(或测得的是蛋白质、核酸浓度而不是细胞浓度；或死亡菌体没有自溶，不能与活菌区分)
考点2　传统发酵技术的应用

1．理清“4”种传统发酵食品的制作技术

2．把握控制杂菌的“四大措施”
(1)通过发酵条件控制杂菌。
①无氧发酵时的无氧环境可以抑制好氧菌。
②乳酸菌发酵、酒精发酵形成的酸性环境抑制杂菌繁殖。
(2)利用盐控制杂菌：如腐乳的制作。
(3)利用酒精控制杂菌：如果酒、腐乳的制作。
(4)利用香辛料控制杂菌：如腐乳、泡菜的制作。
3．理解泡菜腌制过程中的相关曲线

(1)在泡菜制作过程中，亚硝酸盐的含量也是变化的，一般是先增加后降低，测定亚硝酸盐含量的目的是掌握取食泡菜的最佳时间。
(2)在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N－1－萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料，通过目测比较，可大致估算亚硝酸盐的含量。
(3)检测步骤：配制溶液→制备标准显色液→制备样品处理液→比色。

(2021·全国乙卷)工业上所说的发酵是指微生物在有氧或无氧条件下通过分解与合成代谢将某些原料物质转化为特定产品的过程。利用微生物发酵制作酱油在我国具有悠久的历史。某企业通过发酵制作酱油的流程示意图如下。

回答下列问题：
(1)米曲霉发酵过程中，加入大豆、小麦和麦麸可以为米曲霉的生长提供营养物质，大豆中的______________可为米曲霉的生长提供氮源，小麦中的淀粉可为米曲霉的生长提供__________。
(2)米曲霉发酵过程的主要目的是使米曲霉充分生长繁殖，大量分泌制作酱油过程所需的酶类，这些酶中的__________、__________能分别将发酵池中的蛋白质和脂肪分解成易于吸收、风味独特的成分，如将蛋白质分解为小分子的肽和__________。米曲霉发酵过程需要提供营养物质、通入空气并搅拌，由此可以判断米曲霉属于__________(填“自养厌氧”“异养厌氧”或“异养好氧”)微生物。
(3)在发酵池发酵阶段添加的乳酸菌属于__________(填“真核生物”或“原核生物”)；添加的酵母菌在无氧条件下分解葡萄糖的产物是__________。在该阶段抑制杂菌污染和繁殖是保证酱油质量的重要因素，据图分析该阶段中可以抑制杂菌生长的物质是________________________(答出1点即可)。
【解析】　本题考查工业生产中涉及的发酵工程的相关知识。(1)微生物培养过程中一般需要碳源、氮源、无机盐和水。大豆中富含蛋白质，其组成元素为C、H、O、N等，故大豆中的蛋白质可为米曲霉的生长提供氮源。小麦中的淀粉是植物的储能物质，其组成元素为C、H、O，可以作为碳源和能源供米曲霉生长利用。(2)分解蛋白质的酶叫蛋白酶，分解脂肪的酶叫脂肪酶。蛋白质初步水解的产物是多肽，彻底水解的产物是氨基酸。由题述“加入大豆、小麦和麦麸可以为米曲霉的生长提供营养物质”“通入空气并搅拌”可知，米曲霉需要外界提供有机物和氧气，因此米曲霉的代谢类型是异养好氧型。(3)乳酸菌属于原核生物，无氧呼吸产生乳酸；酵母菌属于真核生物，无氧呼吸产生酒精和CO2。由题图可知，发酵池中有米曲霉发酵阶段的产物，还有发酵池发酵阶段添加的食盐、乳酸菌无氧呼吸的产物——乳酸和酵母菌无氧呼吸的产物之一——酒精。其中食盐可以通过提高发酵液的渗透压来抑制杂菌生长；发酵过程中，随着乳酸菌无氧呼吸产生的乳酸含量的升高，发酵池内液体的pH降低，抑制杂菌生长；同时酵母菌无氧呼吸产生的酒精会破坏杂菌的细胞膜，也能抑制杂菌生长。
【答案】　(1)蛋白质　碳源和能源
(2)蛋白酶　脂肪酶　氨基酸　异养好氧
(3)原核生物　酒精和CO2　乳酸、酒精、食盐(答出1点即可)

1．(2022·重庆八中阶段练习)自从法国科学家巴斯德证明食品发酵是由于微生物的作用以来，人们认识到微生物在发酵食品的加工中起着极其重要的作用。请回答下列有关微生物的问题：
(1)糯米可在__________(填微生物)的作用下发酵获得米酒，若进一步在__________(填微生物)的作用下深层发酵可形成米醋。这两种微生物在代谢方式上的主要区别是______________________________________。
(2)传统做米酒的操作中没有进行严格的灭菌处理，但米酒并没有被杂菌污染而腐败，原因是____________________________________________________________________。若想检测米酒制作是否成功，可使用酸性____________与酒精反应呈现灰绿色。
(3)利用酵母菌做出的米酒是做腐乳时卤汤配制所需原料。卤汤中酒的含量应控制在12%左右，因为酒含量过高会导致__________________，酒含量过低会导致________________。
(4)某同学做出的腐乳很软、不成形，试推测原因是________________________。成功的腐乳不但成形好，而且口感细腻、味道鲜美，这主要依赖于毛霉产生的__________________________。
【解析】　(1)酵母菌进行无氧呼吸可以得到酒精，进行酒精发酵；醋酸菌可以利用酒精产生醋酸，进行醋酸发酵；酵母菌是真核生物，兼性厌氧型，醋酸菌是原核生物，好氧型，因此这两种微生物在代谢方式上的主要区别是酵母菌为兼性厌氧型，醋酸菌为好氧型。(2)米酒发酵过程会创造缺氧和酸性环境，该环境条件下酵母菌可以生长繁殖，而绝大多数其他微生物因无法适应而受抑制，因此没有进行严格的灭菌处理，米酒并没有被杂菌污染而腐败；酸性重铬酸钾与酒精反应，由橙色变成灰绿色。(3)腐乳的成熟是需要靠微生物来完成的，酒精有杀菌的效果，酒精浓度过高，会抑制微生物的繁殖，腐乳成熟时间延长；酒精含量过低会导致杂菌污染，豆腐腐败。(4)原料豆腐中的含水量过高会使腐乳软、不成形；毛霉等微生物产生的蛋白酶可以将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可以将脂肪水解成甘油和脂肪，会使腐乳口感细腻、味道鲜美。
【答案】　(1)酵母菌　醋酸菌　酵母菌为兼性厌氧型，醋酸菌为好氧型
(2)缺氧和酸性环境条件下酵母菌可以生长繁殖，而绝大多数其他微生物因无法适应而受抑制　重铬酸钾
(3)腐乳成熟时间延长　杂菌污染，豆腐腐败
(4)原料豆腐中的含水量过高　蛋白酶与脂肪酶
2．(2022·江西铜鼓中学阶段练习)人们的日常生活与传统发酵技术密切相关。请回答下列相关问题。
(1)在制作果醋、腐乳、泡菜的过程中，需要提供氧气的是__________________。
(2)利用酵母菌酿酒时，一开始持续通入空气，使酵母菌数量__________(填“增多”“不变”或“减少”)，然后再封闭，短时间内使酒精________(填“增产”“减产”或“不产生”)。
(3)制作腐乳过程中在腐乳表面往往有一层致密的皮，这层皮实际上是微生物的
________________________________________________________________________，
对人体无害。在制作腐乳过程中加盐的作用是__________________________________________________。
(4)在制作泡菜的过程中，要检测亚硝酸盐的含量。先将泡菜样品及一系列已知浓度的亚硝酸盐溶液分别与化学物质发生显色反应，再通过不同颜色的________，可以估算出泡菜样品中亚硝酸盐的含量。
【解析】　(1)果醋制作中起到主要作用的微生物是醋酸菌，为需氧型生物，腐乳制作过程中起主要作用的微生物是毛霉，为需氧型生物，而泡菜制作过程中需要的微生物为乳酸菌，为厌氧菌，因此在制作果醋、腐乳、泡菜的过程中，需要提供氧气的是制作果醋和腐乳。(2)酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，因此利用酵母菌酿酒时，一开始持续通入空气，使酵母菌数量增加，然后再封闭，酵母菌进行无氧呼吸产生酒精，因此短时间内使酒精增产。(3)制作腐乳过程中在腐乳表面往往有一层致密的皮，这层皮实际上是微生物的匍匐菌丝，对人体无害。在制作腐乳过程中加盐的作用是析出豆腐中的水分使其变硬，抑制微生物生长，避免豆腐块变质。(4)亚硝酸盐在特定条件下会转变为致癌物亚硝胺。在制作泡菜的过程中，要检测亚硝酸盐的含量，一般使用的方法是比色法，先将泡菜样品及一系列已知浓度的亚硝酸盐溶液分别与酸化对氨基苯磺酸发生重氮化反应，反应物再与N－1－萘基乙二胺盐酸盐发生显色反应，颜色为玫瑰红，再通过不同颜色的比较，可以估算出泡菜样品中亚硝酸盐的含量。
【答案】　(1)制作果醋和腐乳
(2)增多　增产
(3)菌丝　析出豆腐中的水分使其变硬，抑制微生物生长，避免豆腐块变质
(4)比较




考点3　酶的应用

1．酶活力测定的一般原理和方法
(1)酶的活性：指酶催化一定化学反应的能力。
(2)酶活性的高低：一定条件下，酶催化的某一化学反应的反应速度。
(3)影响酶活性的因素：温度、pH、酶的抑制剂。
2．酶在食品制造和洗涤方面的应用
(1)果胶酶在果汁生产中的作用的相关实验分析
实验名称(目的)
自变量
因变量
注意事项
探究温度对果胶酶活性的影响
温度
果汁量(澄清度)
①底物和酶在混合时的温度是相同的；②苹果泥和果胶酶用量在各个试管中应相同；③pH应为最适pH
探究pH对果胶酶活性的影响
pH
①温度应为最适温度；②pH梯度可用NaOH溶液和盐酸调节；③用玻璃棒搅拌使反应充分进行
探究果胶酶的用量
果胶酶的用量
①制备苹果泥后迅速加热，使苹果泥中的果胶酶变性；②温度、pH应为最适且保持不变
(2)加酶洗衣粉的洗涤效果的探究实验分析
实验名称
(目的)
自变量
因变量
无关变量
探究普通洗衣粉和加酶洗衣粉的洗涤效果
洗衣粉的种类(普通和加酶)
洗涤效果
水的用量，污物的量，实验用布的质地与大小，不同洗衣粉的用量，搅拌、洗涤时间等
探究不同种类加酶洗衣粉的洗涤效果
加酶洗衣粉中酶的种类
探究不同温度对加酶洗衣粉洗涤效果的影响
温度
3.直接使用酶、固定化酶和固定化细胞的比较
项目
直接使用酶
固定化酶
固定化细胞
酶的种类
一种或几种
一种
一系列
常用固定方法
/
化学结合法、物理吸附法
包埋法
是否需要营养物质
否
否
是
催化反应
单一或多种
单一
一系列
反应底物
各种物质(大、小分子)
各种物质(大、小分子)
小分子物质
缺点
①对环境条件非常敏感，易失活；②难回收，成本高；③酶混在产物中，影响产品质量
不利于催化一系列的酶促反应
反应物不易与酶接近，尤其是大分子物质，使反应效率下降
优点
催化效率高、耗能低、污染低
①既能与反应物接触，又能与产物分离；②可以重复利用
成本低、操作容易


(2021·全国甲卷)加酶洗衣粉是指含有酶制剂的洗衣粉。某同学通过实验比较了几种洗衣粉的去渍效果(“＋”越多表示去渍效果越好)，实验结果见下表。

加酶洗
衣粉A
加酶洗
衣粉B
加酶洗
衣粉C
无酶洗衣
粉(对照)
血渍
＋＋＋
＋
＋＋＋
＋
油渍
＋
＋＋＋
＋＋＋
＋
根据实验结果回答下列问题：
(1)加酶洗衣粉A中添加的酶是______________；加酶洗衣粉B中添加的酶是____________；加酶洗衣粉C中添加的酶是__________________________。
(2)表中不宜用于洗涤蚕丝织物的洗衣粉有____________________________，原因是
________________________________________________________________________。
(3)相对于无酶洗衣粉，加酶洗衣粉去渍效果好的原因是
________________________________________________________________________。
(4)关于酶的应用，除上面提到的加酶洗衣粉外，固定化酶也在生产实践中得到应用，如固定化葡萄糖异构酶已经用于高果糖浆生产。固定化酶技术是指___________________________________________________________。
固定化酶在生产实践中应用的优点是______________________________________________(答出1点即可)。
【解析】　本题结合加酶洗衣粉的使用考查酶的特性、固定化酶技术的定义及优点。(1)血渍的主要成分是蛋白质，油渍的主要成分是脂肪，结合对照组，加酶洗衣粉A去血渍效果好，说明添加了蛋白酶；加酶洗衣粉B去油渍效果好，说明添加了脂肪酶；加酶洗衣粉C去血渍和油渍效果都好，说明同时添加了蛋白酶和脂肪酶。(2)蚕丝织物中蛋白质的含量较高，所以不宜用添加蛋白酶的洗衣粉，否则会将其蛋白质水解，损伤衣物，即不宜用加酶洗衣粉A和C。(3)加酶洗衣粉的去渍效果比较好，是因为酶能够催化大分子物质分解为小分子物质，如蛋白酶能催化血渍、奶渍等水解为可溶性的氨基酸或小分子的肽，脂肪酶、淀粉酶等能分别催化脂肪、淀粉等分解为小分子物质，使污渍容易从衣物上脱落，从而使洗衣粉具有更好的去污能力。(4)固定化酶技术是指将水溶性的酶用物理或化学方法固定在一定空间内的技术，使之成为不溶于水而又有酶活性的制剂，这样既提高了酶的稳定性又可以实现酶的重复利用，从而能降低生产成本。
【答案】　(1)蛋白酶　脂肪酶　蛋白酶和脂肪酶
(2)加酶洗衣粉A和C　洗衣粉中的蛋白酶可能会分解蚕丝织物中的蛋白质而损伤衣物
(3)酶可以将污渍中的大分子物质分解为小分子物质，使污渍易从衣物上脱落
(4)利用物理或化学方法将酶固定在一定空间内的技术　固定化酶能够反复利用，从而能降低生产成本


图解酶的应用与固定化




1．(2022·湖南长沙一中一模)蒲江丑柑味道清甜，果肉清脆化渣，产量高，除了将其直接投放市场外，还对其进行了一系列产品的配套开发，如果汁、果酒、果醋等。回答下列相关问题：
(1)利用丑柑果肉可以生产果汁，为提高出汁率和澄清度，可向果汁中加入果胶酶。果胶酶是分解果胶的一类酶的总称，包括__________________________________________________________。
(2)在利用果汁制作果酒的过程中，为了提高酵母菌的发酵效率，工作人员对酵母菌进行了固定化，过程如下：
―→―→―→―→
上述流程中，①为配制________溶液，该溶液的作用是____________________________。
(3)上述固定化酵母细胞的方法称为______法，选择此方法的原因是
________________________________________________________________________。
(4)在利用果酒制作果醋的过程中，工作人员又向发酵装置中添加一定量的果汁(不影响菌种的活性)后，检测发现乙醇的利用速率迅速下降，原因是______________________________________________________________。
(5)研究人员需要对提取出的果胶酶进行纯度的鉴定，可以采用_________________________________法。
【解析】　(1)果胶酶是果胶分解酶、果胶酯酶、多聚半乳糖醛酸酶的总称。(2)固定化酵母细胞的实验过程：酵母细胞活化→配制CaCl2溶液→配制海藻酸钠溶液→海藻酸钠溶液与酵母细胞混合→固定化酵母细胞，因此①为配制CaCl2溶液；CaCl2溶液的作用是与海藻酸钠反应生成海藻酸钙，形成凝胶珠。(3)因为细胞体积较大，难以被吸附或结合，因此固定化酵母细胞常采用包埋法。(4)由于果汁中富含糖类物质，当糖源充足时，醋酸菌主要利用果汁中的糖类生产醋酸，而糖源不足时，醋酸菌可利用酒精生产醋酸，因此在利用果酒制作果醋的过程中，工作人员向发酵装置中添加一定量的果汁(不影响菌种的活性)后，检测发现乙醇的利用速率迅速下降。(5)进行蛋白质纯度鉴定时，使用最多的是SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳。
【答案】　(1)果胶分解酶、果胶酯酶、多聚半乳糖醛酸酶
(2)CaCl2　与海藻酸钠反应生成海藻酸钙，形成凝胶珠
(3)包埋　细胞体积较大，难以被吸附或结合
(4)果汁中富含糖类物质，当糖源充足时，醋酸菌主要利用果汁中的糖类
(5)SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳
2．(2022·吉林长春模拟)果胶酶广泛应用于果汁饮料、茶叶发酵等领域。有人从腐烂水果及其土壤中筛选到用于果汁生产的果胶酶产生菌株，用刚果红染色法对其进行鉴别，其现象是菌落周围出现绛红色水解圈。回答下列问题：
(1)要从腐烂水果及其土壤中筛选到果胶酶产生菌株，应将菌液适当稀释后均匀涂布在________________的琼脂平板上，长出菌落后__________________________________________________________，观察菌落周围出现的水解圈，并测量水解圈直径(Dp)和菌落直径(Dc)。
(2)将初筛得到的Dp/Dc的值较大的菌株接种于液态发酵培养基发酵后测定粗酶液的酶活性进行复筛。表中的研究结果表明，可用菌株________产生的果胶酶做进一步的实验，理由是__________________________。
菌株编号
Dp/Dc
酶活力(U/mL)
U3
2.05
6.87
W2
2.83
13.66
V25
2.81
15.13
V22
2.67
13.52
(3)为了探索菌株产果胶酶的发酵工艺条件，还需要遵循单一变量原则设计实验，研究
______________________________________________(答出2点即可)等发酵条件对菌株产果胶酶的影响。
(4)据图可知，纯化后的果胶酶有澄清桔子、橙子、葡萄柚和苹果这四种水果果汁的作用，其中__________的澄清效果是最明显的，造成果汁澄清的原因是_________________________________________________________。

注：T表示透光率。
【解析】　(1)依题意知，选择能产生果胶酶的菌株时应将菌液适当稀释后接种到以果胶为唯一碳源的选择培养基上；长出菌落后加入刚果红染液，反应一段时间后倒去表面的刚果红染液，观察菌落周围出现的水解圈，并测量水解圈直径(Dp)和菌落直径(Dc)，求得比值，以便进一步筛选。(2)只凭水解圈直径(Dp)或菌落直径(Dc)大小无法判断哪个菌株产果胶酶的能力强或产生的酶活性高，应将Dp/Dc的值较大的菌株接种于液态发酵培养基发酵后测定粗酶液的酶活性(酶活力)进行复筛。根据实验结果，菌株V25产生的果胶酶活力最高，可用其产生的果胶酶做进一步的实验。(3)为了探索菌株产果胶酶的发酵工艺条件，研究发酵条件对菌株产果胶酶的影响，需要从培养液pH、接种量、发酵时间(周期)、发酵温度等几个方面设计实验，以确定果胶酶最佳的反应条件和效果。(4)实验结果表明，实验组与对照组透光率差值最大的是苹果汁，因此菌株产生的果胶酶对苹果汁的澄清效果是最明显的；这是因为在果胶酶的催化下，能将不溶性的果胶分解成可溶性的半乳糖醛酸，因而可提高果汁的澄清度。
【答案】　(1)以果胶为唯一碳源　加入刚果红染液，反应一段时间后倒去表面的刚果红染液
(2)V25　菌株V25的果胶酶活力最高
(3)培养液pH、接种量、发酵时间(周期)、发酵温度
(4)苹果汁　在该酶的作用下，果汁中的果胶大分子被降解成可溶性的半乳糖醛酸
考点4　生物有效成分的提取

1．血红蛋白的提取与分离
(1)样品处理与粗分离

(2)纯化与纯度鉴定

(3)血红蛋白提取与分离中历次“除杂质”或“分离”的原理

2．植物有效成分的提取与鉴定
(1)植物芳香油三种提取方法的比较
提取方法
实验原理
适用范围
水蒸气
蒸馏法
利用水蒸气将挥发性较强的植物芳香油携带出来，形成油水混合物，冷却后，混合物又会重新分出油层和水层
适用于提取玫瑰油、薄荷油等挥发性较强的芳香油
压榨法
通过机械加压，压榨出果皮中的芳香油
适用于柑橘、柠檬等易焦糊原料中芳香油的提取
有机溶
剂萃取
使芳香油溶解在有机溶剂中，蒸发溶剂后就可获得芳香油
适用范围广，要求原料的颗粒要尽可能细小，能充分溶解在有机溶剂中
(2)提取植物有效成分的实例
①玫瑰精油的提取

②橘皮精油的提取

③胡萝卜素的提取


(2017·全国卷Ⅲ)绿色植物甲含有物质W，该物质为无色针状晶体，易溶于极性有机溶剂，难溶于水，且受热、受潮易分解。其提取流程为：植物甲→粉碎→加溶剂→振荡→收集提取液→活性炭处理→过滤去除活性炭→蒸馏(含回收溶剂)→重结晶→成品。回答下列问题：
(1)在提取物质W时，最好选用的一种原料是____________(填“高温烘干”“晾干”或“新鲜”)的植物甲，不宜选用其他两种的原因是
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
(2)提取物质W时，振荡的作用是_______________________________________________________________。
(3)活性炭具有很强的吸附能力，在提取过程中，用活性炭处理提取液的目的是__________________________________________________________。
(4)现有丙酮(沸点56 ℃)、乙醇(沸点约78 ℃)两种溶剂，在提取物质W时，应选用丙酮作为提取剂，理由是
________________________________________________________________________。
(5)该实验操作过程中应注意的事项是___________________________________________(答出两点即可)。
【解析】　(1)因高温烘干过程中，植物甲中的物质W易被破坏；新鲜的植物甲含水量高，用于提取的极性有机溶剂会被水稀释，进而降低对物质W的提取效果。所以在提取物质W时，最好应选用的原料是晾干的植物甲。(4)丙酮(沸点56 ℃)、乙醇(沸点约78 ℃)两种溶剂，由于丙酮沸点相对较低，而温度过高会导致物质W分解，所以在提取物质W时，应选用丙酮作提取剂。(5)该实验操作过程中应注意的事项包括在温度较低的情况下操作，防火，控制处理的时间等。
【答案】　(1)晾干　高温烘干过程中，植物甲中的物质W易被破坏；新鲜的植物甲含水量高，用于提取的极性有机溶剂会被水稀释，进而降低对物质W的提取效果
(2)使原料和溶剂充分混匀
(3)去除提取液中的色素
(4)丙酮沸点低于乙醇，蒸馏时物质W分解较少
(5)在温度较低的情况下操作；防火

1．(2022·云南昆明一中模拟)回答下列与生物有效成分提取相关的问题：
(1)提取植物有效成分常用的方法为蒸馏法、__________、__________等。提取玫瑰精油时，先利用水蒸气将玫瑰精油携带出来，形成________________，冷却后又重新分出油层和水层。用石油醚萃取胡萝卜素的过程中，________(填步骤名称)时也可使用蒸馏装置。
(2)大多数植物的有效成分为细胞内的物质，提取时可使用____________瓦解植物的细胞壁和胞间层，从而加快植物细胞的破碎，利于提取。
(3)单细胞生物A能够合成某种有效成分W。为探究添加适量的物质F(实验组)后对A的影响，研究小组进行了相关实验，结果如下图所示。

综合图甲和图乙的信息可知，F的作用效果是__________________________________________。为了能获得大量的W，在A的培养基中添加适量的物质F，那么，获取有效成分W的最佳时间是培养A的________(填“第1天”或“第2天”)。
【解析】　(1)提取植物有效成分常用的方法为蒸馏法、压榨法和萃取法，具体采用哪种方法要根据植物原料的特点来决定。提取玫瑰精油时，先利用水蒸气将玫瑰精油携带出来，形成油水混合物，冷却后又重新分出油层和水层，最后过滤得到玫瑰油。用石油醚萃取胡萝卜素的过程中，浓缩时也可使用蒸馏装置。(2)植物的细胞壁和胞间层含有果胶和纤维素，因此可以用果胶酶和纤维素酶瓦解植物的细胞壁和胞间层，从而加快植物细胞的破碎，利于提取。(3)由图甲可知，实验组添加F后，A细胞数量减少；由图乙可知，实验组添加F后，单细胞中物质W的含量增加，因此综合图甲和图乙的信息可知，F的作用效果是抑制A(单细胞生物)的繁殖，促进A(单细胞生物)合成有效成分W。为了能获得大量的W，在A的培养基中添加适量的物质F，由图可知，获取有效成分W的最佳时间是培养A的第2天。
【答案】　(1)压榨法　萃取法　油水混合物　浓缩
(2)果胶酶和纤维素酶
(3)抑制A(单细胞生物)的繁殖，促进A(单细胞生物)合成有效成分W　第2天
2．(2022·广东珠海二中阶段练习)辣椒是麻辣火锅底料的主要原料，辣椒素类物质是使辣椒具有辛辣感的主要天然化合物，其含量多少决定火锅底料的辣度。提取辣椒素可以利用乙醇和石油醚等有机溶剂进行萃取。回答下列问题：
(1)提取辣椒素可利用乙醇和石油醚等有机溶剂进行萃取，原因是________________。研究表明，使用石油醚做萃取剂，比用乙醇萃取得到的辣椒素纯度要高得多，可能的原因是
________________________________________________________________________。
(2)萃取辣椒素时，除了萃取剂的种类和使用量外，还有______________________________________(答出两点)等因素会明显影响萃取效率。为了促进辣椒细胞释放辣椒素，研究人员建议可以使用果胶酶处理粉碎后的辣椒，原理是________________________________________________________________________。
(3)辣椒素类物质主要有辣椒素(C18H27NO3)和二氢辣椒素(C18H29NO3)两种，根据两种物质的化学式进行推测，分离辣椒素与二氢辣椒素时，__________(填“适合”或“不适合”)采用凝胶色谱法，理由是
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
(4)科研人员利用“薄层层析法”(如图)将提取样液中的辣椒素类物质(含多种有色物质)进行分离，具体流程是：制备硅胶薄层板→薄层板上点样→层析缸中层析→观察有色斑点分布。该方法分离辣椒素类物质的主要原理是
________________________________________________________________________。

【解析】　(1)提取辣椒素可利用乙醇和石油醚等有机溶剂进行萃取，这是因为辣椒素易溶于有机溶剂中。研究表明，使用石油醚做萃取剂，比用乙醇萃取得到的辣椒素纯度要高得多，这是因为辣椒素与其他物质在石油醚中的溶解度差异较大，而在乙醇中溶解度差异较小，因此用石油醚作为萃取剂提取的辣椒素纯度更高。(2)萃取辣椒素时，除了萃取剂的种类和使用量外，还有原料颗粒的大小、紧密程度、含水量、萃取的温度和时间等因素都会明显影响萃取效率。为了促进辣椒细胞释放辣椒素，研究人员建议可以使用果胶酶处理粉碎后的辣椒，这是因为果胶酶能分解果胶，破坏辣椒细胞的细胞壁及胞间层，从而促进辣椒素类物质的释放，从而提高萃取效率。(3)辣椒素类物质主要有辣椒素(C18H27NO3)和二氢辣椒素(C18H29NO3)两种，根据两种物质的化学式进行推测，分离辣椒素与二氢辣椒素时，不适合采用凝胶色谱法，因为这两种物质的分子量很接近，几乎无差别，因而在凝胶色谱柱中的移动无差别，因而利用凝胶色谱法无法实现分离。(4)科研人员利用“薄层层析法”(如图)将提取样液中的辣椒素类物质(含多种有色物质)进行分离，具体流程是：制备硅胶薄层板→薄层板上点样→层析缸中层析→观察有色斑点分布。根据色斑样点的分布从而确定辣椒素中各种物质的种类。该方法是根据辣椒素中不同种类的有色物质在层析液中的溶解度不同进而表现出扩散速率不同而实现的分离。
【答案】　(1)辣椒素易溶于有机溶剂中　辣椒素与其他物质在石油醚中的溶解度差异较大，而在乙醇中溶解度差异较小
(2)原料颗粒的大小、紧密程度、含水量、萃取的温度和时间　果胶酶能分解果胶，破坏辣椒细胞的细胞壁及胞间层，从而促进辣椒素类物质的释放
(3)不适合　这两种物质的分子量很接近，几乎无差别，因而在凝胶色谱柱中的移动无差别，因而利用凝胶色谱法无法实现分离
(4)根据辣椒素中不同种类的有色物质在层析液中的溶解度不同进而表现出扩散速率不同而实现的分离。

1．(2018·全国卷Ⅲ节选)分离培养酵母菌通常使用____________(填“牛肉膏蛋白胨”“MS”或“麦芽汁琼脂”)培养基，该培养基应采用____________灭菌法灭菌。若将酵母菌划线接种在平板上，培养一段时间后可观察到菌落，菌落的含义是______________________________________________________。
【答案】　麦芽汁琼脂　高压蒸汽　由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体
2．与煮沸消毒相比，巴氏消毒的牛奶在常温(约28 ℃)下保存时间较短，原因是
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
【答案】　巴氏消毒的温度为70～75 ℃之间，有些微生物在此温度下没有被杀死，在常温下，(巴氏消毒的)牛奶中没有被杀死的微生物(或细菌)会大量繁殖
3．某生物兴趣小组欲分离土壤中分解尿素的细菌，在涂布培养前需要先进行梯度稀释，其目的是
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
【答案】　将聚在一起的微生物分散成单个细胞，从而在培养基上形成单菌落(或使培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌)
4．制作泡菜时，所用盐水需煮沸，其目的是____________。为了缩短制作时间，有人还会在冷却后的盐水中加入少量陈泡菜液，加入陈泡菜液的目的是____________________。
【答案】　杀灭杂菌　增加乳酸菌数量
5．水蒸气蒸馏法__________(填“适合”或“不适合”)胡萝卜素的提取，原因是
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
【答案】　不适合　水蒸气蒸馏法适合于分离挥发性物质，而胡萝卜素为非挥发性物质，不能随水蒸气蒸馏出去