高中北师大版 (2019)第三节 传统发酵技术巩固练习

【精编】第三节传统发酵技术-3作业练习

一．单项选择

1．下列关于微生物培养的叙述，正确的是（    ）

A．微生物在培养液中培养一段时间后用显微镜观察，可见到形成的菌落

B．硝化细菌能以NH3作为氮源和能源物质

C．任何培养基都必须含有碳源．氮源．无机盐．水和琼脂

D．某些细菌生长过程中需要额外补充营养物质，比如培养酵母菌时，要添加维生素

2．如图是微生物平板划线示意图。划线的顺序为1→2→3→4→5。下列操作方法正确的是（    ）

A．操作前只要将接种环烧红并冷却后，就可离开酒精灯，进行接种试验

B．划线操作须在火焰上进行，以免杂菌污染

C．所需菌落只能在5区域中才可以得到

D．在1．2．3．4．5区域中划线前后都要对接种环灭菌

3．下列关于倒平板．平板划线法和涂布平板法的叙述，正确的是（    ）

A．倒平板时将培养皿打开，培养皿盖倒放在桌子上

B．平板划线法除了第一次划线需要将接种环灼烧灭菌外，以后的划线可以不用灭菌

C．应用稀释涂布平板法对微生物进行计数的估计值比实际值偏大

D．与平板划线法相比，稀释涂布平板法形成单菌落的效果更好

4．下列有关细菌培养的叙述，正确的是（    ）

A．在琼脂固体培养基上长出的单个菌落含有多种细菌

B．在培养基中加入青霉素可抑制真菌而促进细菌生长

C．向液体培养基中通入氧气能促进破伤风杆菌的生长

D．同一种物质既可作碳源也可作氮源，碳源并不都能提供能量

5．下图是实验室使用某种接种方法在培养基上培养某种微生物的结果，相关说法    错误的是(   )

A．该图最可能是用稀释涂布平板法进行接种的

B．在操作时，为防止杂菌污染，需进行严格的消毒和灭菌

C．恒温培养箱中培养时需要将平板倒置

D．该接种方法常用于微生物的分离纯化

6．培养禽流感病毒时，应该选用（    ）

A．固体培养基 B．液体培养基

C．牛肉汤 D．活鸡胚

7．平板冷却凝后要将平板倒置，其目的是

A．利于大肠杆菌的生长

B．防止空气进入

C．利于培养基的冷却

D．防止皿盖冷却水滴入培养基造成污染

8．在生产．生活和科研实践中，经常通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。下列相关叙述不正确的是（    ）

A．玻璃和金属材质的实验器具可放入干热灭菌箱中干热灭菌

B．接种前后的接种环或涂布器都要在酒精灯的火焰上进行灼烧消毒

C．没有将高压蒸汽灭菌锅内的冷空气排尽将影响培养基的灭菌效果

D．喷洒石碳酸同时配合紫外线照射可提高对密闭空间的消毒效果

9．关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基，叙述正确的是（    ）

A．操作顺序为计算．称量．溶化．倒平板．灭菌

B．将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯

C．待培养基冷却至44℃以下时进行倒平板

D．待平板冷却凝固约5～10s后将平板倒过来放置

10．为了判断培养基是否被杂菌污染和选择培养基是否起到了选择作用，需要设置的对照组的培养基分别是（    ）

A．未接种的选择培养基，未接种的牛肉膏蛋白胨培养基

B．未接种的培养基，接种了的牛肉膏蛋白胨培养基

C．接种了的选择培养基，接种了的牛肉膏蛋白胨培养基

D．接种了的培养基，未接种的牛肉膏蛋白胨培养基

11．微生物培养过程中，要十分重视无菌操作，现代生物学实验中的许多方面也要进行无菌操作，防止杂菌污染，请分析下列操作，正确的是（    ）

A．煮沸消毒法中100℃煮沸5-6分钟可以杀死全部微生物细胞和芽孢．孢子

B．将接种环直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌

C．加入培养基中的指示剂和染料不需要灭菌

D．家庭制作葡萄酒时要将容器和葡萄进行灭菌

12．在缺乏氮源的培养基上，大部分微生物无法生长；在培养基中加入青霉素，可以抑制细菌和放线菌；在培养基中加入10%的酚，可以抑制细菌和霉菌．利用上述方法不能从混杂的微生物群体中分别分离出（　　）

A．大肠杆菌 B．霉菌

C．放线菌 D．圆褐固氮菌

13．培养基．培养皿．接种环．实验操作者的双手．空气．牛奶所采用的灭菌和消毒方法依次是

①化学消毒②灼烧灭菌③干热灭菌④紫外线灭菌⑤高压蒸汽灭菌⑥巴氏消毒法

A．⑤③②①④⑥ B．①②③④⑤⑥ C．⑥②③④①⑤ D．③④②①⑥⑤

14．如图为纯化大肠杆菌的一个操作环节，下列相关叙述中，正确的是（    ）

A．图示接种方法是平板划线法，也可在液体培养基中进行

B．图中每个划线区域均可形成单个菌落

C．除第一次划线外，以后的每一次划线的起点均是上一次划线的末端

D．该接种方法适用于细菌的计数

15．取9个洁净培养皿，均分为三组(Ⅰ．Ⅱ．Ⅲ)，各组分别加入等量的不同培养基，每个平板均用涂布法接种0.1mL大肠杆菌菌液，37 ℃培养36 h后，统计菌落数(见下表)，以下相关叙述正确的是（　　）

A．三组实验均使用了液体培养基，以方便菌落计数

B．Ⅰ组和Ⅲ组说明大肠杆菌正常生长需要糖类物质

C．Ⅰ组和Ⅱ组说明维生素可以促进大肠杆菌生长

D．Ⅱ组计数结果偏小的主要原因是部分细菌死亡

16．下列关于无菌操作技术的说法，正确的是（    ）

A．高压蒸汽灭菌，当压力表的压力降到一个标准大气压时，就可以打开盖子

B．在100℃煮沸5-6分钟属于灭菌方法，可杀死微生物细胞和一部分芽孢

C．饮用前的鲜牛奶或使用后的液体培养基常用高压蒸汽灭菌法进行处理

D．用紫外线消毒时，适量喷洒石碳酸或煤酚皂等消毒液可以加强消毒效果

17．生长图形法是一种测定微生物营养需求的简便方法。为探究某嗜热菌所需生长因子的种 类，研究小组把该菌的悬浮液与不含任何生长因子但含有其他必需营养物质的培养基混合后倒成平板，然后在平板上划分数区，将甲．乙．丙 三种生长因子分别添加到不同区域，培养结果如图所示，下列说法不正 确的是（    ）

A．倒成平板后直接培养可判断有无污染

B．倒成平板后不需要进行灭菌处理

C．图示结果表明该菌需要生长因子乙或丙

D．生长图形法还可用于某些菌种的筛选

18．下表为某培养基的配方，下列叙述正确的是

A．从物理性质看该培养基属于液体培养基，从用途看该培养基属于选择培养基

B．该培养基中属于碳源的物质主要是葡萄糖，属于氮源的物质是蛋白胨

C．该培养基缺少提供生长因子的物质

D．该培养基调节合适的pH后就可以接种使用

参考答案与试题解析

1．【答案】B

【解析】

解答：

A．微生物在固体培养基表面生长，可以形成肉眼可见的菌落，根据菌落的特征可以判断是哪一种菌，A错误；
B．硝化细菌可以利用氧化氨释放的能量用来合成有机物，因此NH3可以作为硝化细菌的氮源和能源物质，B正确；
C．培养基不一定都含有碳源．氮源，如培养自养型微生物的培养基中不需加入碳源，分离自生固氮菌的培养基中，不需加入氮源，C错误；
D．某些细菌生长过程中需要额外补充营养物质，而酵母菌不属于细菌，D错误。
故选B。
 

2．【答案】D

【解析】

试题分析：

平板划线的操作的基本步骤是：
1．右手持接种环，经火焰灭菌，待凉后，在火焰旁打开盛有菌液的试管棉塞，并将试管口过火焰，将以冷却的接种环伸入菌液，沾取一环菌液，将试管口过火焰丙塞上棉塞。
2．左手斜持琼脂平板，皿盖打开一条缝，右手于火焰近处將接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线，盖上皿盖，接种环不应划破培养基表面。
3．烧灼接种环，杀灭环上残留菌液，待冷却（是否冷却，可先在培养基边缘处试触，若琼脂溶化，表示未凉，稍等再试），从第一区域划线的末端开始往第二区内划线，重复以上操作，在第三四五区内划线，注意不要将最后一区的划线与第一区相连。
4．将平板倒置，放入培养箱中培养。

解答：

A．在每次划线前后都要对接种环进行灼烧灭菌，冷却后，在酒精灯火焰旁边，进行接种试验，A错误；
B．接种时划线操作是在火焰周围进行，B错误；
C．在5个区域中，只要有单个活细菌，通过培养即可获得所需菌落，C错误；
D．在1．2．3．4区域中划线前都要对接种环进行灼烧灭菌，保证每次划线的菌种来自上一区域的末端，5区域划线前都要对接种环进行灼烧灭菌目的是防止杂菌污染，1区域划线后进行灼烧灭菌是防止污染环境及操作者，D正确。
故选D。

3．【答案】D

【解析】

试题分析：

微生物接种的方法中最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法，前者是指通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种，逐步稀释分散到培养基的表面，后者是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。

解答：

A．倒平板时不能把培养皿盖完全打开并放到桌面上，这样会污染培养皿中的培养基，A错误；

B．除了第一次划线需要将接种环灼烧灭菌外，以后的每一次划线前也要将接种环进行灼烧，将上次划线结束后残留的细菌杀死，使细菌尽快分散成单个，B错误；

C．应用稀释涂布平板法对微生物进行计数的估计值比实际值偏小，因为可能多个微生物在一起长成一个菌落，C错误；

D．与平板划线法相比，稀释涂布平板法分离得到单菌落的效果更好，D正确。

故选D。

4．【答案】D

【解析】

试题分析：

（1）菌落是指由单个微生物细胞或多个同种微生物细胞在适宜固体培养基上繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体。（2）微生物培养基的配方中，一般都含有水．碳源．氮源和无机盐。碳源．氮源分别是指能够为微生物生长繁殖提供营养的含有碳元素．含有氮元素的一类物质。（3）青霉素的主要作用是杀灭细菌，对真菌等病原体无作用。（4）破伤风杆菌是一种厌氧菌。

解答：

A．在琼脂固体培养基上长出的单个菌落，是由单个或少数同种细菌在固体培养基上大量繁殖而形成的一个肉眼可见的子细胞群体，因此单个菌落通常只有一种细菌，A错误；

B．在培养基中加入青霉素，可抑制细菌生长，但不会抑制真菌的生长，B错误；

C．破伤风杆菌只能进行无氧呼吸，向液体培养基中通入氧气能抑制破伤风杆菌的生长，C错误；

D．同一种物质可以同时含有碳元素和氮元素（如牛肉膏），因此既可作碳源也可作氮源，但碳源并不都能提供能量，如CO2是硝化细菌的碳源，但CO2并不能提供能量，D正确。

故选D。

5．【答案】A

【解析】

培养基上微生物的分布有疏有密，应为划线培养法接种，该接种方法常用于微生物的分离纯化，A项错误，D项正确；在操作时，为防止杂菌污染，应对培养基和接种针等进行灭菌，对操作空间．衣着和手进行消毒，B项正确；恒温培养箱中培养时需要将平板倒置，防止冷凝水滴在培养基上，C项正确。

6．【答案】D

【解析】

试题分析：

病毒是一种个体微小，结构简单，只含一种核酸（DNA或RNA），必须在活细胞内寄生并以复制方式增殖的非细胞型生物。因此病毒离开了宿主细胞，就成了没有任何生命活动．也不能独立自我繁殖的化学物质。它的复制．转录．和转译的能力都是在宿主细胞中进行，当它进入宿主细胞后，它就可以利用细胞中的物质和能量完成生命活动，按照它自己的核酸所包含的遗传信息产生和它一样的新一代病毒。

解答：

AB两种培养基种不含活细胞，病毒不能存活，牛肉汤是给培养基提供氮源的物质，也不含活细胞不能让病毒存活，活鸡胚中具有活细胞，能够给病毒的存活提供条件，ABC错误；D正确。
故选D。

7．【答案】D

【解析】

平板冷凝后将平板倒置是为了防止皿盖冷却后水滴入培养基后造成污染，D正确。不是因为利于大肠杆菌的生长，A错误。空气仍然可以进入到平板中，B错误。倒置对于培养基冷却没有太大影响，C错误。

8．【答案】B

【解析】

试题分析：

使用强烈的理化因素杀死物体内外一切微生物的细胞．芽孢和孢子的过程称为灭菌，常用的方法有灼烧灭菌．干热灭菌和高压蒸汽灭菌。消毒是指用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体体表或内部的一部分微生物的过程，常用的方法有煮沸消毒法．巴氏消毒法．紫外线或化学药物消毒法等。

解答：

A．能耐高温的．需要保持干燥的物品，如玻璃和金属材质的实验器具可放入干热灭菌箱中干热灭菌，A正确；
B．接种前后的接种环或涂布器都要在酒精灯的火焰上进行灼烧灭菌，B错误；
C．加热初期，必须将灭菌锅内的冷空气排尽，否则将因达不到规定温度而影响灭菌的效果，C正确；
D．采用紫外线照射灭菌时，可在物体表面喷洒适量石碳酸等化学抑菌剂，以加强消毒效果，D正确。
故选B。

9．【答案】B

【解析】

试题分析：

培养基的配制流程：计算．称量．溶化．灭菌（高压蒸汽灭菌）．倒平板（无菌操作）。

解答：

A．操作顺序为计算．称量．溶化．灭菌．倒平板，A错误；

B．将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯，因为牛肉膏会黏在称量纸上，B正确；

C．待培养基冷却至50℃以下时进行倒平板，C错误；

D．待平板冷却凝固约5～10min后将平板倒过来放置，D错误。

故选B。

10．【答案】B

【解析】

试题分析：

对照实验是指除所控因素外其它条件与被对照实验完全对等的实验。判断选择培养基是否起到了选择作用，则接种了的选择培养基是实验组，而接种了的牛肉膏蛋白胨培养基属于对照组。

解答：

为了判断培养基是否被杂菌污染，需要设置的对照组是未接种的培养基，即将未接种的培养基与接种的培养基同时培养，若未接种的培养基上出现菌落，说明其被污染，否则没有被污染；用接种了的普通培养基和选择培养基进行对照，在牛肉育蛋白胨培养基上生长的菌落数目应明显多于选择培养基上的数目，说明选择培养基具有选择的功能，B正确。
故选B。

11．【答案】B

【解析】

试题分析：

消毒是指使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包括芽孢和孢子）。灭菌则是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。

解答：

A．煮沸消毒可以杀死微生物的营养细胞和部分芽孢，而灭菌能杀灭环境中一切微生物，包括孢子和芽孢，A错误；

B．将接种环直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌，B正确；

C．指示剂和染料可能混有微生物，因此加入培养基中的指示剂和染料也需要灭菌，C错误；

D．家庭制作葡萄酒时，要将容器进行灭菌或消毒，但是葡萄不能灭菌，因为发酵用的酵母菌来自于葡萄，D错误。

12．【答案】A

【解析】

试题分析：

解答：

A．大肠杆菌需要氮源．青霉素抑制大肠杆菌生长．酚也抑制细菌的生长，A错误；

B．霉菌是真菌，在培养基中加入青霉素后，青霉素可以抑制细菌和放线菌，但是不抑制真菌，所以加入青霉素的培养基可以选择出霉菌，B正确；

C．培养基中加入10%酚可以抑制细菌和霉菌，所以可以筛选放线菌，C正确；

D．固氮菌的氮源氮气，在培养基中不需要氮源，所以缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长，但是固氮细菌可以生长，D正确。

故选A。

13．【答案】A

【解析】

试题分析：

无菌操作技术有消毒和灭菌；消毒有煮沸消毒法．巴氏消毒法和化学药剂消毒法；灭菌有灼烧灭菌法（适用于接种工具）．干热灭菌法（适用于玻璃器皿和金属工具）．高压蒸汽灭菌法（适用于培养基及容器的灭菌）。

解答：

①实验操作者的双手用化学药剂进行消毒，用酒精擦拭双手；

②接种环可用灼烧灭菌达到迅速彻底的灭菌效果；

③培养皿能耐高温，需用干热灭菌；

④空气可用紫外线消毒；

⑤培养基用高压蒸汽灭菌；

⑥巴氏消毒法用于牛奶及其制品的消毒，不会破坏其营养成分；综合以上分析，正确的顺序为⑤③②①④⑥，A正确。

14．【答案】C

【解析】

试题分析：

图示对微生物进行接种采用的是平板划线法。平板划线法通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。在数次划线后，就可以得到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体，这就是菌落。

解答：

A．图示接种方法是平板划线法，该接种方法不能在液体培养基中进行，A错误；

B．图中每次划线的菌种都来自上一次划线的末端，最后一次划线结束时（图中5区域）可形成单个菌落，B错误；

C．在采用平板划线法对微生物进行接种时，除第一次划线外，以后的每一次划线的起点均是上一次划线的末端，C正确；

D．该接种方法（平板划线法）可以分离出单个菌落，但不需要确定接种量和培养液浓度，因此不适用于细菌的计数，D错误。

故选C。

15．【答案】C

【解析】

试题分析：

实验设计的原则：对照原则和单一变量原则；对比Ⅰ．Ⅱ两组，可以发现含有维生素的培养基，大肠杆菌生长好，缺少C6H12O6大肠杆菌几乎不生长。微生物培养基的成分有碳源．氮源．水．无机盐。

解答：

A．根据培养基的成可知：每个平板都含有琼脂，属于固体培养基，A错误；
B．Ⅱ组和Ⅲ组的单一变量是葡萄糖的有无，两组实验结果说明大肠杆菌正常生长需要糖类物质，B错误；
C．由分析可知：Ⅰ组和Ⅱ组说明维生素可以促进大肠杆菌生长，C正确；
D．Ⅱ组计数结果偏小的主要原因是涂布平板是可能出现了两个或两个以上的菌体聚集在一起的情况，D错误。
故选C。

16．【答案】D

【解析】

试题分析：

消毒和灭菌：

解答：

A．高压蒸汽灭菌，只有当压力表的压力降到0时，才能打开盖子，A错误；

B．在100℃煮沸5-6分钟属于消毒法，B错误；

C．饮用前的鲜牛奶常用巴氏消毒法，C错误；

D．用紫外线消毒时，适量喷洒石碳酸或煤酚皂等消毒液可以加强消毒效果，D正确。

故选D。

17．【答案】C

【解析】

试题分析：

据图分析，菌落主要分布于添加了乙和丙的区域的交界处，说明该嗜热菌必需营养物质为丙和乙。

解答：

A．倒平板后不接种任何菌种直接进行培养观察有无菌落的出现，可以判断培养基有无污染，A正确；

B．在制作培养基的过程中，需要先进行灭菌再倒平板，故倒成平板后不需要进行灭菌处理，B正确；

C．分析题图可知，嗜热菌在添加了乙．丙的区域生长，只有乙或只有丙时无菌落生长，故该菌同时需要乙和丙，C错误；

D．不同的菌种所需的营养物质不同，利用生长图形法可用于某些菌种的筛选，某菌种只会在提供其需要的营养物质区域生长，D正确。

故选C。

18．【答案】B

【解析】

试题分析：

微生物的营养物质主要包括氮源．碳源．水和无机盐等，液体培养基与固体培养基的区别是否添加适量的凝固剂琼脂，伊红美兰指示剂可以专一检测大肠杆菌菌落。
 

解答：

A．从物理性质看该培养基属于液体培养基，从用途看该培养基属于鉴别培养基，A错误；

B．微生物的营养物质主要包括氮源．碳源．水和无机盐等，培养基中属于碳源的物质主要是葡萄糖，属于氮源的物质是蛋白胨，B正确；

C．生长因子主要包括维生素．氨基酸和碱基等，它们一般是酶和核酸组成成分，蛋白胨可以提供生长因子，C错误；

D．该培养基调节合适的pH后经灭菌后才可以接种使用，D错误。

故选B。