高中生物北师大版 (2019)选择性必修3 生物技术与工程第三节 传统发酵技术课时训练

【基础】第三节传统发酵技术-2练习

一．单项选择

1．如图为实验室培养和纯化大肠杆菌的部分操作步骤，下列说法正确的是（    ）

A．步骤②中打开含菌种的试管后需将试管口通过酒精灯火焰灭菌

B．步骤④中接种环共需 5 次灼烧处理

C．将接种后的图④平板放入培养箱中培养时无需倒置

D．①②③步骤操作时都不需要在酒精灯火焰旁进行

2．某同学运用划线法分离纯化大肠杆菌。下列叙述正确的是（    ）

A. 培养基灭菌时，高压蒸汽灭菌锅压力达到1kg/cm2后，需持续15min

B. 制作平板时，需将培养基均匀地倒在培养皿的整个底部

C. 接种时，每次划线前，接种环均需蘸一次菌液

D. 培养时，需将培养皿倒置于4℃的冰箱中

3．下图中甲和乙是两种微生物接种方法的部分操作过程或结果，下列有关叙述错误的是（    ）

A．甲中涂布前要将涂布器灼烧，冷却后才能取菌液

B．乙中接种环需要灼烧6次

C．乙中的连续划线的起点是上一次划线的末端

D．甲．乙操作中只有甲可以用于微生物的计数，结果往往比活菌的实际数目大

4．下列关于无菌操作技术的说法，正确的是（    ）

A．液态的牛奶可用巴氏消毒法消毒

B．培养基．接种环可用干热灭菌法灭菌

C．消毒仅能杀死物体表面的芽孢和孢子

D．高压蒸汽灭菌时间达到后立即打开排气阀排气降温

5．硝化细菌广泛存在子通气性较好的土壤中，其部分代谢反应如图所示，下列关于硝化细菌的培养条件的描述正确的是（　　）

A．碳源为葡萄糖 B．培养时需隔绝空气

C．氮源是氨气 D．培养时需冷藏

6．下面是微生物平板划线示意图。划线的顺序为1．2．3．4．5。下列叙述正确的是（    ）

A．在五个区城中划线前后都要对接种环和培养基进行灭菌

B．划线操作接种环不应划破培养基表面，否则不能分离得到单菌落

C．划线操作时完全打开皿盖，将接种环伸入平板内，划三至五条平行线，盖上皿盖

D．第1区和第5区的划线最终要连接起来，以便比较前后的菌落数

7．取9个洁净的培养皿，均分为三组(Ⅰ．Ⅱ．Ⅲ)，每组分别加入等量的不同培养基，每个平板均用涂布法接种0.1 mL大肠杆菌菌液，37 ℃培养36 h后，统计菌落数如表统计，以下相关叙述正确的是(　　)

A.Ⅰ组和Ⅱ组说明维生素可以促进大肠杆菌生长

B．Ⅰ组和Ⅲ组说明大肠杆菌正常生长需要糖类物质

C．三组实验均使用了液体培养基，以方便菌落计数

D．三组实验所使用的培养基均需62 ℃．30 min消毒

8．总状毛霉和米根霉是常见的霉菌。研究人员将总状毛霉和米根霉的孢子悬液分别接种到两组豆腐切块上，完成前期发酵后，分别测定两组霉菌产生的蛋白酶的活力，结果如下图。据图分析，下列有关叙述正确的是

A．总状毛霉与米根霉都能利用蛋白酶将分解产生的肽和氨基酸分泌到细胞外

B．总状毛霉与米根霉接种量与蛋白酶活力呈正相关

C．相同适宜条件下接种等量的两种菌，总状毛霉使豆腐块中的蛋白质减少更多

D．接种量为5CFU/mL时发酵制作的腐乳品质最好

9．如图是微生物平板划线示意图，下列叙述正确的是（    ）

A．用酒精对接种环进行消毒即可

B．只有在5区才可能得到单菌落

C．每次划线前后都要对接种环灭菌

D．划线力度要大，保证划线清晰

10．科研人员制备了一种富集沙门菌的培养基，其成分是在营养肉汤培养基的基础上添加了一定浓度的牛胆盐．甘露醇．亚碲酸钠．葡萄糖．琼脂等物质。下表为在营养肉汤培养基中添加有关物质并接种培养后相关菌落的相对数量。下列有关说法错误的是（    ）

A．上述富集沙门菌的培养基是选择性培养基

B．为便于对活菌进行计数，接种时应采用稀释涂布平板法

C．培养基中的葡萄糖．氨基酸可作为碳源被沙门菌等细菌利用

D．在培养基中加入牛胆盐．亚碲酸钠的目的是维持培养基的pH

11．图是高压蒸汽灭菌锅及其局部剖面示意图，其中甲．乙．丙依次指（    ）

A．安全阀．排气阀．温度表 B．排气阀．安全阀．压力表

C．安全阀．排气阀．压力表 D．排气阀．安全阀．温度表

12．人们利用微生物完成一定的反应，必须要求某种微生物是没有被其他微生物污染的，因此，在培养微生物时必须进行无菌操作，以下操作错误的是（    ）

A．灼烧灭菌法可杀死微生物的营养体和芽孢

B．对无菌室．操净台和实验服可采用紫外线光灭菌法

C．培养基中需要加入尿素时，要配成溶液单独用G6玻璃砂漏斗过滤灭菌

D．当培养基内要加入碳酸氢钠时，需单独用500g/cm2压力（90℃以上）灭菌30min

13．制培养基时下列各项可不必考虑的是（    ）

A．大量元素要充足 B．微量元素不可少 C．不能被杂菌污染 D．要有一定光照

14．有关纯化大肠杆菌实验操作的叙述，错误的是

A．在第二区域内划线时，接种环上的菌种直接来源于菌液

B．第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物

C．每次划线前，灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种

D．划线结束后，灼烧接种环能及时杀死接种环上的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者

15．消毒和灭菌是两个不同的概念，下列适用于消毒处理的是（    ）

①皮肤②接种环③牛奶④培养基⑤培养皿

A．①③ B．④⑤ C．①②⑤ D．①②④

16．选择培养基是根据某一种或某一类微生物的特殊营养要求或对一些物理．化学抗性而设计的培养基，用于分离所需要的微生物。为选择酵母菌和硝化细菌，应选用的培养基分别为（    ）

A．含青霉素的培养基．含氨的无机培养基

B．伊红美蓝培养基．含青霉素的培养基

C．含青霉素的培养基．伊红美蓝培养基

D．含氨的无机培养基．含青霉素的培养基

17．在微生物的培养和研究中，获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵。实验室常采用高压蒸汽灭菌．灼烧．干热灭菌．紫外线照射等几种灭菌方法，可分别杀灭哪些部位的杂菌（    ）

A．培养基．接种环．接种室．吸管 B．吸管．接种环．培养皿．接种箱

C．吸管．接种环．培养基．双手 D．培养基．接种环．吸管．接种箱

18．下列有关利用含琼脂的培养基进行倒平板操作的叙述，正确的是（    ）

A．对培养皿进行灭菌一般使用高压蒸汽灭菌锅

B．培养基灭菌后要冷却到30℃时再倒入培养皿

C．倒平板操作需要在酒精灯火焰附近进行

D．倒平板操作时需要使用灭菌了的接种环

参考答案与试题解析

1．【答案】A

【解析】

试题分析：

根据题意和图示分析可知：①是倒平板，②是用接种环沾取菌液，③是进行平板划线，④是培养。制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的基本过程为计算．称量．溶化．调pH．灭菌．倒平板。

解答：

A．打开含菌种的试管需通过火焰灭菌，取出菌种后需再次通过火焰，塞上棉塞才可，A正确；

B．接种环在每次接种前和接种结束后都要通过灼烧来灭菌，所以完成步骤④中5次划线操作前都要灼烧灭菌，接种结束后还需灼烧灭菌1次，防止造成污染，由此可见，完成步骤④共需灼烧接种环6次，B错误；

C．划线接种结束后，将平板倒置后放入培养箱中培养，有利于表面的水分更好的挥发和防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染，C错误；

D．①②③步骤操作时需要在酒精灯火焰旁进行，防止被杂菌污染，D错误。

故选A。

2．【答案】A

【解析】A．培养基灭菌时，高压蒸汽灭菌锅压力达到1kg/cm2后，持续15-20min，可达到灭菌目的，A正确；

B．制作平板时，将熔化的培养基倒进培养皿里，让其自然冷却，就会凝固形成固体培养平板，不需将培养基均匀地倒在培养皿的整个底部，B错误；

C．接种环在第一次划线时需蘸一次菌液，其余则从上次划线末端开始划线，C错误；

D．大肠杆菌的培养在37℃最适合，不能将其倒置于4℃的冰箱中，D错误。

故选A。

3．【答案】D

【解析】

试题分析：

4．【答案】A

【解析】

试题分析：

消毒和灭菌：

解答：

A．液态的牛奶可用巴氏消毒法消毒，A正确；

B．培养基用高压蒸汽灭菌法灭菌，而接种环用灼烧灭菌，B错误；

C．消毒能杀死物体表面或内部的部分微生物，不包芽孢和孢子，C错误；

D．高压蒸汽灭菌时间达到后应等待冷却．降温，然后排气，D错误。

故选A。

5．【答案】C

【解析】

试题分析：

培养基中需要具备碳源．氮源．无机盐．水等，另外在考虑温度．PH等条件。土壤中的硝化细菌能进行化能合成作用，硝化细菌能利用氨气氧化释放的能量把二氧化碳和水合成有机物，属于自养生物，因此选择提供无机碳源．无机氮源。

解答：

A．土壤中的硝化细菌能进行化能合成作用，培养基中不需要有机碳源，其碳源为二氧化碳，A错误；

B．硝化细菌能利用NH3氧化释放的能量把二氧化碳和水合成有机物，所以培养时不能隔绝空气，B错误；

C．硝化细菌的培养过程中氮源是氨气，C正确；

D．硝化细菌能利用NH3氧化释放的能量把二氧化碳和水合成有机物，需要酶的催化作用，所以培养时需要适宜的温度，D错误。

故选C。

6．【答案】B

【解析】

试题分析：

平板划线的操作的基本步骤是：
（一）．右手持接种环，经火焰灭菌，待凉后，在火焰旁打开盛有菌液的试管棉塞，并将试管口过火焰，将以冷却的接种环伸入菌液，沾取一环菌液，将试管口过火焰丙塞上棉塞。
（二）．左手斜持琼脂平板，皿盖打开一条缝，右手于火焰近处將接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线，盖上皿盖，接种环不应划破培养基表面。
（三）．烧灼接种环，杀灭环上残留菌液，待冷却（是否冷却，可先在培养基边缘处试触，若琼脂溶化，表示未凉，稍等再试），从第一区域划线的末端开始往第二区内划线，重复以上操作，在第三四五区内划线，注意不要将最后一区的划线与第一区相连。
（四）．将平板倒置，放入培养箱中培养。

解答：

A．在每次划线前后都要对接种环进行灭菌，接种环的灭菌方法应是在火焰上灼烧，但培养基只是在接种前进行灭菌即可，A错误；
B．划线操作接种环不应划破培养基表面，否则不能分离得到单菌落，B正确；

C．划线时皿盖打开一条缝，右手于火焰近处將接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线，盖上皿盖，接种环不应划破培养基表面，C错误；
D．划线时注意不要将最后一区5的划线与第一区1相连，D错误。
故选B。

7．【答案】A

【解析】：选A　由表格分析可知，Ⅰ组和Ⅱ组说明维生素可以促进大肠杆菌生长；Ⅱ组和Ⅲ组作对照，自变量是葡萄糖的有无，说明大肠杆菌正常生长需要葡萄糖；由题意知，每个平板都含有琼脂，属于固体培养基；三组实验所使用的培养基均需高压蒸汽灭菌。

8．【答案】C

【解析】

试题分析：

解答：

总状毛霉与米根霉都能将蛋白酶分泌到细胞外，进而将豆腐块中的蛋白质分解产生肽和氨基酸，A错误；据图分析，随着接种量的增加，总状毛霉与米根霉产生的蛋白酶的活性都是先增加后减弱，并不是一直呈现正相关，B错误；相同适宜条件下接种等量的两种菌，总状毛霉的蛋白酶活性更高，因此使豆腐块中的蛋白质减少更多，C正确；图示只能证明接种量为5CFU/mL时，蛋白酶的活性最好，但是不能说明发酵制作的腐乳品质最好，D错误。

9．【答案】C

【解析】

试题分析：

平板划线的操作的基本步骤是：

（一）．右手持接种环，经火焰灭菌，待凉后，在火焰旁打开盛有菌液的试管棉塞，并将试管口过火焰，将以冷却的接种环伸入菌液，沾取一环菌液，将试管口过火焰丙塞上棉塞；

（二）．左手斜持琼脂平板，皿盖打开一条缝，右手于火焰近处將接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线，盖上皿盖，接种环不应划破培养基表面；

（三）．烧灼接种环，杀灭环上残留菌液，待冷却（是否冷却，可先在培养基边缘处试触，若琼脂溶化，表示未凉，稍等再试），从第一区域划线的末端开始往第二区内划线，重复以上操作，在第三四五区内划线，注意不要将最后一区的划线与第一区相连；

（四）．将平板倒置，放入培养箱中培养。

解答：

A．接种环采用灼烧灭菌的方法进行灭菌，A错误；

B．由题图可知，5区域是最后一个区域，有可能在5区域获得所需要的菌落，在4区域也有可能得到所需要的菌落；B错误；

C．每次划线前后都要对接种环灭菌，C正确；

D．划线力度不能过大，避免将培养基划破，D错误。

故选C。

10．【答案】D

【解析】

试题分析：

分析题干：富集沙门菌的培养基是在营养肉汤培养基的基础上添加了一定浓度的牛胆盐．甘露醇．亚碲酸钠．葡萄糖．琼脂等物质，其能抑制金黄色葡萄球菌．大肠杆菌等微生物的生长，而沙门菌能正常生长，属于选择培养基。

解答：

AD．在营养肉汤培养基的基础上添加牛胆盐．甘露醇．亚碲酸钠．葡萄糖．琼脂等物质，这是一种富集沙门菌的培养基。实验结果表明含有牛胆盐．甘露醇．亚碲酸钠的培养基能抑制金黄色葡萄球菌，含有甘露醇．亚碲酸钠的培养基能抑制大肠杆菌。因此，上述富集沙门菌的培养基是选择性培养基，A正确．D错误；

B．为便于对活菌进行计数，接种时应采用稀释涂布平板法，B正确；

C．培养基的成分通常包括碳源．氮源．水．无机盐等，上述培养基中的葡萄糖．氨基酸等有机物可作为碳源被细菌利用，C正确。

故选D。

11．【答案】C

【解析】

试题分析：

据图分析，图示为高压蒸汽灭菌锅，其中甲是安全阀，乙是排气阀，丙是压力表。

解答：

微生物培养基灭菌常用高压蒸汽灭菌法进行灭菌；根据以上分析已知，图中甲是安全阀，乙是排气阀，丙是压力表，故选C。

12．【答案】D

【解析】

试题分析：

灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物（包括芽孢和孢子），微生物的培养过程中常用的灭菌方法有灼烧灭菌．干热灭菌．高压蒸汽灭菌等。

解答：

A．灼烧灭菌法不仅能杀死微生物的营养体，也能杀死芽孢等休眠体，A正确；
B．对无菌室．操净台和实验服可采用紫外线光灭菌法，B正确；
C．有些不能加热灭菌的化合物，如尿素（加热会分解）只能用G6玻璃砂漏斗过滤，然后将尿素溶液加入到已经灭菌的含有酚红的培养基中备用，C正确；
D．碳酸氢钠固体存在时加热会分解，应该先在培养基中加入碳酸氢钠，然后随同培养基一起灭菌，D错误。
故选D。

13．【答案】D

【解析】

试题分析：

培养基的基本组成：水．无机盐．碳源和氮源。

解答：

水．无机盐．碳源和氮源中含有足量的大量元素和微量元素，另外防止杂菌污染是制备培养基必须的，光照不是必须的，故选D。

14．【答案】A

【解析】在第二区域内划线时,接种环上的菌种直接来源于第一区域的划线末端，A错误；为避免杂菌的污染,第一步操作时需要灼烧接种环，B正确；每次划线前,灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种，C正确；为避免细菌污染环境和感染操作者,划线结束后,灼烧接种环能及时杀死接种环上的菌种，D正确。

15．【答案】A

【解析】

试题分析：

消毒就是用物理或化学方法杀灭或消除致病微生物，但不一定能杀死细菌芽孢和物体内部的微生物。灭菌就是用物理或化学方法杀灭所有的微生物，使其达到无菌，包括致病和非致病微生物以及芽孢。

解答：

①皮肤采用酒精消毒的方法进行处理，①正确；

②接种环用灼烧灭菌的方法进行处理，②错误；

③牛奶可采用巴氏消毒进行处理，③正确；

④培养基采用高压蒸汽灭菌进行处理，④错误；

⑤培养皿采用干热灭菌进行处理，⑤错误。

故选A。

16．【答案】A

【解析】

试题分析：

选择培养基是根据某一种或某一类微生物的特殊营养要求或对一些物理．化学抗性而设计的培养基．利用这种培养基可以将所需要的微生物从混杂的微生物中分离出来．酵母菌属于异养兼性厌氧型真核生物，硝化细菌属于自养需氧型原核生物。

解答：

A．细菌对含青霉素培养基敏感，酵母菌则不敏感，可以筛选酵母菌，硝化细菌可以将环境中的氨氧化为硝酸根而利用其释放的能量合成有机物，故含氨的无机培养基可以筛选硝化细菌，A正确；

B．伊红美蓝培养基是专一鉴别大肠杆菌的培养基，硝化细菌对青霉素敏感，含青霉素培养基不能筛选硝化细菌，B错误；

C．细菌对含青霉素培养基敏感，酵母菌则不敏感，可以筛选酵母菌，伊红美蓝培养基是专一鉴别大肠杆菌的培养基，C错误；

C．酵母菌是异养生物，不能用含氨的无机培养基筛选，硝化细菌对青霉素敏感，含青霉素培养基不能筛选硝化细菌，D错误。

故选A。

17．【答案】D

【解析】

试题分析：

18．【答案】C

【解析】

试题分析：

获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵，包括消毒和灭菌。消毒是指使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包括芽孢和孢子）。灭菌则是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。

解答：

A．对培养皿进行灭菌一般使用干热灭菌法，A错误；

B．培养基灭菌后要冷却到50℃时左右，再倒入培养皿制得平板，B错误；

C．为避免杂菌污染，倒平板操作需要在酒精灯火焰附近进行，C正确；

D．倒平板操作时不需要使用接种环，D错误。

故选C。