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高中生物高考解密23 微生物的培养与利用（分层训练）（原卷版）
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这是一份高中生物高考解密23 微生物的培养与利用（分层训练）（原卷版），共10页。试卷主要包含了培养基及微生物的纯化培养技术，微生物的计数方法，微生物的筛选与鉴别，微生物的利用等内容，欢迎下载使用。
考向一 培养基及微生物的纯化培养技术
1．（2019·福建厦门市·厦门外国语学校高二月考）如表是微生物培养基的成分。下列有关说法错误的是（ ）
A．此培养基可用来培养自养型微生物
B．此表中的营养成分共有三类，即水、无机盐、氮源
C．若除去①，此培养基可培养圆褐固氮菌
D．培养基中若加入氨基酸，则它可充当碳源、氮源
2．（2019·河北冀州中学（衡水市冀州区第一中学）高二月考）四环素、链霉素、红霉素等抗生素能抑制细菌的生长，它们有的能阻碍细菌细胞壁的形成，导致细菌在低渗环境下膨胀破裂死亡；有的能干扰细菌核糖体的形成；有的能阻止tRNA和mRNA的结合。请根据以上事实判断下列说法正确是
A．干扰细菌细胞壁形成过程是通过影响高尔基体的作用实现的
B．阻止tRNA和mRNA的结合会影响细菌蛋白质的合成，抑制细菌的生长
C．细菌培养中为保证细菌的渗透压稳定应在培养液中加入HCO3-等无机盐
D．干扰细菌核糖体的形成可以阻止遗传信息的转录
3．（2020·大通回族土族自治县第一完全中学高二期中）如表为某培养基的配方，下列有关叙述正确的是
A．此培养基是天然鉴别培养基
B．能在此培养基上生长的大肠杆菌，拟核上有抗青霉素的基因
C．此培养基可以用于选育转基因大肠杆菌菌种的基因工程的操作过程中
D．此培养基可以用来检测自来水中细菌含量是否符合饮用水标准
4．（2019·静宁县第一中学高二期末）用稀释涂布平板法来统计样品中尿素分解菌的数目时，为了提高实验结果的可信度，往往要设置对照，对于对照组的要求不包括
A．对照组培养基也严格灭菌
B．对照组和实验组放在相同的条件下培养
C．所用培养基成分及pH值大小完全与实验组一致
D．培养基的量的大小，与实验组必须绝对相同
5．（2020·上海市泾南中学高二期中）下表是培养某种细菌的培养基。以下叙述错误的是（ ）
A．该培养基属于选择培养基
B．表中为该细菌提供碳源的只有乳糖
C．表中为该细菌提供氮源的只有蛋白胨
D．该培养基可以用来鉴定该细菌是否是大肠杆菌
考向二 微生物的计数方法
6．（2020·贵州省思南中学高二期中）下列关于微生物的培养和分离的叙述，正确的是（ ）
A．倒平板操作时，培养基倒好后应立即将其倒过来放置
B．菌落的形状、大小、颜色等不能作为鉴别不同微生物的依据
C．分离分解尿素的细菌时，应从周围出现透明圈的菌落中挑取菌株
D．分离纤维素分解菌时，可在倒平板时加入刚果红染色，然后接种分解菌
7．（2020·北京密云区·高三一模）自然界中所有的微生物（ ）
A．都是原核生物B．都必须在显微镜下才能看到
C．都可快速繁殖D．在生态系统中都属于分解者
8．（2019·山西祁县中学高二月考）下列有关培养基和菌种鉴定的叙述正确的是（ ）
A．制作固体培养基必须加入的物质是琼脂
B．可利用液体培养基上菌落的特征来判断和鉴别细菌的类型
C．菌落的表面光滑与否、有无荚膜是R型和S型菌种鉴定的依据
D．在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂鉴定尿素分解菌
9．（2020·山西省平遥中学校高二月考）关于微生物的叙述，完全正确的是（ ）
①古细菌的细胞壁与大肠杆菌的细胞壁成分不同
②青霉素不能杀灭肝炎病毒
③酵母菌通过芽孢进行繁殖
④自生固氮菌为自养微生物
A．①②B．③④C．①②④D．②③④
10．（2014·上海黄浦区·）下列关于微生物的有关叙述正确的是（ ）
A．荚膜是细菌的休眠体，能抗不良环境B．酵母菌通过芽孢体进行繁殖
C．黏菌与乳酸菌都属于真核生物D．古细菌通常对利福平不敏感
考向三 微生物的筛选与鉴别
11．（2020·辽宁沈阳市·高二期末）以下有关生物技术实践的叙述中，正确的是
A．用稀释涂布平板法测定某土壤浸出液中活菌数目时，测定值可能比实际值大
B．以尿素为唯一氮源并加入酚红指示剂的培养基可分离并鉴定土壤中分解尿素的细菌
C．制作牛肉膏蛋白胨固体培养基时操作顺序为计算、称量、溶化、灭菌、调pH
D．制备果酒过程中，每隔一段时间拧松瓶盖，目的是向瓶中通气保证发酵顺利
12．（2020·禄劝彝族苗族自治县第一中学高二期中）关于土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验的叙述正确的是
A．培养基应以尿素为唯一氮源，该细菌与硝化细菌所利用的碳源物质是相同的
B．选择菌落数在30～300间的所有平板进行计数，以平均数为实验结果
C．对10mL土样稀释106倍后，取0.1 mL该溶液进行重复的涂布实验，测得的菌落数分别为18、234、276，则该10 mL土样中分解尿素的细菌数为2.55×108个
D．应该设置对照以排除非测试因素对实验结果的干扰，提高可信度
13．（2019·全国高三专题练习）下列关于刚果红染色法的说法中，正确的是
A．先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应，不需用氯化钠溶液洗去浮色
B．倒平板时就加入刚果红，可在培养皿中先加入lmlCR溶液后加入100ml培养基
C．培养基中出现透明圈的原因是因为纤维素被分解为葡萄糖导致的
D．倒平板时就加入刚果红，长期培养刚果红有可能被其他微生物分解形成透明圈
14．（2020·甘肃武威市·武威十八中高三月考）测定土壤中细菌数量一般选用104、105和106倍的稀释液进行平板培养，而测定真菌的数量一般选用102、103和104倍稀释，其原因是
A．细菌个体小，真菌个体大
B．细菌易稀释，真菌不易稀释
C．细菌在土壤中数量比真菌多
D．随机的，没有原因
15．（2020·邢台市第二中学高二期末）下列有关“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验”的叙述，不正确的是
A．用尿素为唯一氮源、加有酚红指示剂的培养基培养尿素分解菌，指示剂不变红
B．分解尿素的细菌能产生脲酶，将尿素分解产生氨和二氧化碳
C．统计尿素分解菌的数目时，以菌落数在30—300的平板进行计数
D．将实验组和对照组平板倒置，30— 35℃恒温培养24〜48小时
考向四 微生物的利用
16．（2020·山西省平遥中学校高二月考）关于生物技术实践中的有关检验，不正确的是
A．在果酒制作实验中，检验是否有酒精产生，正确的操作步骤是先在试管中加入适量的发酵液，然后再加入硫酸和重铬酸钾的混合液
B．在微生物培养中，检验培养基是否被污染的方法是用一组不接种或接种无菌水的培养基与接种培养物的培养基一起培养
C．检验以尿素为唯一氮源的培养基是否分离出了分解尿素的细菌，方法是在培养基中加入酚红指示剂，若指示剂变红，则可初步鉴定该细菌能分解尿素
D．鉴定胡萝卜素粗品的可用纸层析法，原理是不同的色素分子在层析液中的溶解度不同，随层析液在滤纸上扩散速度不同；若样品中有杂质，则会出现不同的色素点
17．（2019·四川南充市·阆中中学高二期中）某生物兴趣小组以带有落叶的表层土壤(深5cm左右)为实验材料，研究土壤微生物在适宜温度下的分解作用，对土壤处理情况见下表，与此有关的叙述不正确的是
A．探究的问题可以是不同土壤湿度条件下，土壤微生物对落叶的分解作用
B．预期结果是 1、3 组的落叶不被分解，2、4 组中的落叶被不同程度的分解
C．为了控制实验中的无关变量，作为实验材料的落叶也应进行灭菌处理
D．该实验的自变量为土壤是否灭菌处理
18．（2019·河北冀州中学（衡水市冀州区第一中学）高二月考）下列有关现代生物技术的叙述中，不正确的是
A．运用固定化酶和固定化细胞进行生产时，都需要为其提供营养物质
B．果酒和果醋制作中利用的微生物，结构上主要差别在于有无核膜
C．采用稀释涂布平板法和平板划线法都能分离纯化菌种，得到单细胞菌落
D．探究加酶洗衣粉的最适温度时，洗衣粉量、污渍的种类属于无关变量
19．（2020·长春市第一中学高二期中）取9个洁净培养皿，均分为三组（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ），各组分别加入等量的不同培养基，每个平板均接种0.1mL大肠杆菌菌液，37℃培养36小时后，统计菌落数（见表），以下相关叙述错误的是（ ）
A．Ⅰ组和Ⅱ组说明维生素可以促进大肠杆菌生长繁殖
B．Ⅱ组和Ⅲ组说明大肠杆菌正常生长需要葡萄糖
C．三组实验均采用了稀释涂布平板法，以便菌落计数
D．三组实验所使用的培养基均需62℃、30min灭菌
20．（2020·辽宁沈阳市·沈阳铁路实验中学高二期中）幽门螺杆菌(Hp)感染是急慢性胃炎和消化性溃疡的主要致病因素。在患者体内采集样本并制成菌液后，进行分离培养。实验基本步骤如下：请选择下列叙述错误的一项：（ ）
A．在培养时，需将培养皿倒置，若不倒置培养，将导致无法形成单菌落
B．在配制培养基时，要加入尿素和酚红指示剂，这是因为Hp含有脲酶，它能以尿素作为氮源；若有Hp，则菌落变黑
C．临床上用14C呼气试验检测人体是否感染Hp，其基本原理是Hp能将14C标记的尿素分解为NH3和14CO2
D．步骤X表示接种，在无菌条件下操作时，先将菌液稀释，然后将菌液涂布到培养基平面上，菌液稀释的目的是为了获得单菌落
B组 专题综合练
1．（2020·广西桂林市·桂林十八中高二期中）以下实验中，观测指标不正确的是 （ ）
A．当有果酒产生后，会在酸性条件下与重铬酸钾反应呈灰绿色。
B．纤维素分解菌分解纤维素后，加有刚果红的培养基由无色变成红色
C．用伊红-美蓝培养基培养大肠杆菌，菌落会呈现黑色
D．分解尿素的细菌会使培养基中PH升高，使酚红指示剂变红
2．（2020·湖北孝感市·高二月考）漆酶属于木质降解酶类，在环境修复、农业生产等领域有着广泛用途。下图是分离、纯化和保存漆酶菌株的过程，相关叙述正确的是
A．饮用水中含有大量微生物，是分离产漆酶菌株的首选样品
B．选择培养基中需要加入漆酶的底物作为唯一碳源
C．在已涂布的平板上直接划线可以进一步纯化获得单菌落
D．斜面培养基中含有大量营养物，可在常温下长期保存菌株
3．（2020·全国高三课时练习）下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述，其中错误的是（ ）
A．用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板
B．取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各1mL，分别涂布于各组平板上
C．统计的菌落数目往往比活菌的实际数目低
D．确定对照组无菌后，选择菌落数在30-300之间的实验组平板进行计数
4．（2020·全国高三课时练习）如图为分离和纯化分解甲醛细菌的实验过程，其中LB培养基能使菌种成倍扩增，以下说法正确的是
A．需要对活性污泥作灭菌处理
B．②中LB培养基应以甲醛为唯一碳源
C．目的菌种异化作用类型为厌氧型
D．经⑤处理后，应选择瓶中甲醛浓度最低的一组进一步纯化培养
5．（2020·云南大理白族自治州·高二期末）下图是研究人员从红棕壤中筛选高效分解尿素细菌的过程示意图，有关叙述错误的是
A．在配制步骤②、③的培养基时，应先调pH值后高压蒸汽灭菌
B．步骤③纯化分解尿素的原理是将聚集的细菌分散，可以获得单细胞菌落
C．步骤③采用涂布平板法接种，并需向牛肉膏蛋白胨培养基中加入尿素
D．步骤④挑取③中不同种的菌落分别接种，比较细菌分解尿素的能力
二、综合题
6．（2020·全国高三课时练习）将马铃薯去皮切块，加水煮沸一定时间，过滤得到马铃薯浸出液。在马铃薯浸出液中加入一定量蔗糖和琼脂，用水定容后灭菌，得到M培养基。
回答下列问题：
（1）M培养基若用于真菌的筛选，则培养基中应加入链霉素以抑制___________的生长，加入了链霉素的培养基属于___________培养基。
（2）M培养基中的马铃薯浸出液为微生物生长提供了多种营养物质，营养物质类型除氮源外还有___________（答出两点即可）。氮源进入细菌后，可参与合成的生物大分子有___________（答出两点即可）。
（3）若在M培养基中用淀粉取代蔗糖，接种土壤滤液并培养，平板上长出菌落后可通过加入显色剂筛选出能产生淀粉酶的微生物，加入的显色剂是___________，该方法能筛选出产生淀粉酶微生物的原理___________。
（4）甲、乙两位同学用稀释涂布平板法测定某一土壤样品中微生物的数量，在同一稀释倍数下得到以下结果：
甲同学涂布了3个平板，统计的菌落数分别是110、140和149，取平均值133。
乙同学涂布了3个平板，统计的菌落数分别是27、169和176，取平均值124。
有人认为这两位同学的结果中，乙同学的结果可信度低，其原因是：_____________________。
7．（2020·全国高三课时练习）已知一种有机物X（仅含有C、H两种元素）不易降解，会造成环境污染。某小组用三种培养基筛选土壤中能高效降解X的细菌（目标菌）。
Ⅰ号培养基：在牛肉膏蛋白胨培养基中加入X（5g/L）。
Ⅱ号培养基：氯化钠（5g/L），硝酸铵（3g/L），其他无机盐（适量），X（15g/L）。
Ⅲ号培养基：氯化钠（5g/L），硝酸铵（3g/L），其他无机盐（适量）。X（45g/L）。
回答下列问题。
（1）在Ⅰ号培养基中，为微生物提供氮源的是___________。Ⅱ、Ⅲ号培养基为微生物提供碳源的有机物是_________。
（2）若将土壤悬浮液种在Ⅱ号液体培养基中，培养一段时间后，不能降解X的细菌比例会_________，其原因是_________。
（3）Ⅱ号培养基加入琼脂后可以制成固体培养基，若要以该固体培养基培养目标菌并对菌落进行计数，接种时，应采用的方法是______________。
（4）假设从Ⅲ号培养基中得到了能高效降解X的细菌，且该菌能将X代谢为丙酮酸，则在有氧条件下，丙酮酸可为该菌的生长提供_________和_________。
8．（2020·全国高三课时练习）为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌的分离等工作。回答下列问题：
（1）该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空平板先行培养了一段时间，这样做的目的是____________________________；然后，将1mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每升水样中的活菌数为__________________。
（2）该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。操作时，接种环通过__________灭菌，在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线。这样做的目的是_______________________。
（3）示意图A和B中，__________表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。
（4）该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养。结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是：振荡培养能提高培养液中__________的含量，同时可以使菌体与培养液充分接触，提高__________的利用率。
三、实验题
9．（2020·全国高三课时练习）在生产、生活和科研实践中，经常通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。回答下列问题：
（1）在实验室中，玻璃和金属材质的实验器具________（填“可以”或“不可以”）放入干热灭菌箱中进行干热灭菌。
（2）牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高温瞬时消毒法，与煮沸消毒法相比，这两种方法的优点是________。
（3）密闭空间内的空气可采用紫外线照射消毒，其原因是紫外线能________，在照射前，适量喷洒_________，可强化消毒效果。
（4）水厂供应的自来水通常是经过________（填“氯气”“乙醇”或“高锰酸钾”）消毒的。
（5）某同学在使用高压蒸汽灭菌锅时，若压力达到设定要求，而锅内并没有达到相应温度，最可能的原因是__________________________。
10．（2020·全国高三课时练习）物质W是一种含氮有机物，会污染土壤。W在培养基中达到一定量时培养基表现为不透明。某研究小组欲从土壤中筛选出能降解W的细菌（目标菌）。回答下列问题。
（1）要从土壤中分离目标菌，所用选择培养基中的氮源应该是_________。
（2）在从土壤中分离目标菌的过程中，发现培养基上甲、乙两种细菌都能生长并形成菌落（如图所示）。如果要得到目标菌，应该选择________菌落进一步纯化，选择的依据是________。
（3）土壤中的某些微生物可以利用空气中的氮气作为氮源。若要设计实验进一步确定甲、乙菌能否利用空气中的氮气作为氮源，请简要写出实验思路、预期结果和结论，即_______。
（4）该小组将人工合成的一段DNA转入大肠杆菌，使大肠杆菌产生能降解W的酶（酶E）。为了比较酶E与天然酶降解W能力的差异，该小组拟进行如下实验，请完善相关内容。
①在含有一定浓度W的固体培养基上，A处滴加含有酶E的缓冲液，B处滴加含有相同浓度天然酶的缓冲液，C处滴加_________，三处滴加量相同。
②一段时间后，测量透明圈的直径。若C处没有出现透明圈，说明___________；若A、B处形成的透明圈直径大小相近，说明___________。编号
①
②
③
④
⑤
成分
（NH4）2SO4
KH2PO4
FeSO4
CaCl2
H2O
含量/g
0.4
4.0
0.5
0.5
100mL
成分
牛肉膏
葡萄糖
K2HPO4
伊红
美蓝
青霉素
琼脂
蒸馏
含量
10 g
10 g
2 g
0.4g
0.065 g
1万单位
适量
1000 mL
蛋白胨
乳糖
蔗糖
K2HPO4
伊红
美蓝
蒸馏水
10g
5g
5g
2g
0.4g
0.065g
1000mL
组别
培养基
各平板的菌落数
1
2
3
Ⅰ
琼脂、C6H12O6、NH4NO3
30
31
27
Ⅱ
琼脂、C6H12O6、NH4NO3、维生素
169
178
193
Ⅲ
琼脂、NH4NO3、维生素
0
0
1
考向一 培养基及微生物的纯化培养技术
1．（2019·福建厦门市·厦门外国语学校高二月考）如表是微生物培养基的成分。下列有关说法错误的是（ ）
A．此培养基可用来培养自养型微生物
B．此表中的营养成分共有三类，即水、无机盐、氮源
C．若除去①，此培养基可培养圆褐固氮菌
D．培养基中若加入氨基酸，则它可充当碳源、氮源
2．（2019·河北冀州中学（衡水市冀州区第一中学）高二月考）四环素、链霉素、红霉素等抗生素能抑制细菌的生长，它们有的能阻碍细菌细胞壁的形成，导致细菌在低渗环境下膨胀破裂死亡；有的能干扰细菌核糖体的形成；有的能阻止tRNA和mRNA的结合。请根据以上事实判断下列说法正确是
A．干扰细菌细胞壁形成过程是通过影响高尔基体的作用实现的
B．阻止tRNA和mRNA的结合会影响细菌蛋白质的合成，抑制细菌的生长
C．细菌培养中为保证细菌的渗透压稳定应在培养液中加入HCO3-等无机盐
D．干扰细菌核糖体的形成可以阻止遗传信息的转录
3．（2020·大通回族土族自治县第一完全中学高二期中）如表为某培养基的配方，下列有关叙述正确的是
A．此培养基是天然鉴别培养基
B．能在此培养基上生长的大肠杆菌，拟核上有抗青霉素的基因
C．此培养基可以用于选育转基因大肠杆菌菌种的基因工程的操作过程中
D．此培养基可以用来检测自来水中细菌含量是否符合饮用水标准
4．（2019·静宁县第一中学高二期末）用稀释涂布平板法来统计样品中尿素分解菌的数目时，为了提高实验结果的可信度，往往要设置对照，对于对照组的要求不包括
A．对照组培养基也严格灭菌
B．对照组和实验组放在相同的条件下培养
C．所用培养基成分及pH值大小完全与实验组一致
D．培养基的量的大小，与实验组必须绝对相同
5．（2020·上海市泾南中学高二期中）下表是培养某种细菌的培养基。以下叙述错误的是（ ）
A．该培养基属于选择培养基
B．表中为该细菌提供碳源的只有乳糖
C．表中为该细菌提供氮源的只有蛋白胨
D．该培养基可以用来鉴定该细菌是否是大肠杆菌
考向二 微生物的计数方法
6．（2020·贵州省思南中学高二期中）下列关于微生物的培养和分离的叙述，正确的是（ ）
A．倒平板操作时，培养基倒好后应立即将其倒过来放置
B．菌落的形状、大小、颜色等不能作为鉴别不同微生物的依据
C．分离分解尿素的细菌时，应从周围出现透明圈的菌落中挑取菌株
D．分离纤维素分解菌时，可在倒平板时加入刚果红染色，然后接种分解菌
7．（2020·北京密云区·高三一模）自然界中所有的微生物（ ）
A．都是原核生物B．都必须在显微镜下才能看到
C．都可快速繁殖D．在生态系统中都属于分解者
8．（2019·山西祁县中学高二月考）下列有关培养基和菌种鉴定的叙述正确的是（ ）
A．制作固体培养基必须加入的物质是琼脂
B．可利用液体培养基上菌落的特征来判断和鉴别细菌的类型
C．菌落的表面光滑与否、有无荚膜是R型和S型菌种鉴定的依据
D．在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂鉴定尿素分解菌
9．（2020·山西省平遥中学校高二月考）关于微生物的叙述，完全正确的是（ ）
①古细菌的细胞壁与大肠杆菌的细胞壁成分不同
②青霉素不能杀灭肝炎病毒
③酵母菌通过芽孢进行繁殖
④自生固氮菌为自养微生物
A．①②B．③④C．①②④D．②③④
10．（2014·上海黄浦区·）下列关于微生物的有关叙述正确的是（ ）
A．荚膜是细菌的休眠体，能抗不良环境B．酵母菌通过芽孢体进行繁殖
C．黏菌与乳酸菌都属于真核生物D．古细菌通常对利福平不敏感
考向三 微生物的筛选与鉴别
11．（2020·辽宁沈阳市·高二期末）以下有关生物技术实践的叙述中，正确的是
A．用稀释涂布平板法测定某土壤浸出液中活菌数目时，测定值可能比实际值大
B．以尿素为唯一氮源并加入酚红指示剂的培养基可分离并鉴定土壤中分解尿素的细菌
C．制作牛肉膏蛋白胨固体培养基时操作顺序为计算、称量、溶化、灭菌、调pH
D．制备果酒过程中，每隔一段时间拧松瓶盖，目的是向瓶中通气保证发酵顺利
12．（2020·禄劝彝族苗族自治县第一中学高二期中）关于土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验的叙述正确的是
A．培养基应以尿素为唯一氮源，该细菌与硝化细菌所利用的碳源物质是相同的
B．选择菌落数在30～300间的所有平板进行计数，以平均数为实验结果
C．对10mL土样稀释106倍后，取0.1 mL该溶液进行重复的涂布实验，测得的菌落数分别为18、234、276，则该10 mL土样中分解尿素的细菌数为2.55×108个
D．应该设置对照以排除非测试因素对实验结果的干扰，提高可信度
13．（2019·全国高三专题练习）下列关于刚果红染色法的说法中，正确的是
A．先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应，不需用氯化钠溶液洗去浮色
B．倒平板时就加入刚果红，可在培养皿中先加入lmlCR溶液后加入100ml培养基
C．培养基中出现透明圈的原因是因为纤维素被分解为葡萄糖导致的
D．倒平板时就加入刚果红，长期培养刚果红有可能被其他微生物分解形成透明圈
14．（2020·甘肃武威市·武威十八中高三月考）测定土壤中细菌数量一般选用104、105和106倍的稀释液进行平板培养，而测定真菌的数量一般选用102、103和104倍稀释，其原因是
A．细菌个体小，真菌个体大
B．细菌易稀释，真菌不易稀释
C．细菌在土壤中数量比真菌多
D．随机的，没有原因
15．（2020·邢台市第二中学高二期末）下列有关“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验”的叙述，不正确的是
A．用尿素为唯一氮源、加有酚红指示剂的培养基培养尿素分解菌，指示剂不变红
B．分解尿素的细菌能产生脲酶，将尿素分解产生氨和二氧化碳
C．统计尿素分解菌的数目时，以菌落数在30—300的平板进行计数
D．将实验组和对照组平板倒置，30— 35℃恒温培养24〜48小时
考向四 微生物的利用
16．（2020·山西省平遥中学校高二月考）关于生物技术实践中的有关检验，不正确的是
A．在果酒制作实验中，检验是否有酒精产生，正确的操作步骤是先在试管中加入适量的发酵液，然后再加入硫酸和重铬酸钾的混合液
B．在微生物培养中，检验培养基是否被污染的方法是用一组不接种或接种无菌水的培养基与接种培养物的培养基一起培养
C．检验以尿素为唯一氮源的培养基是否分离出了分解尿素的细菌，方法是在培养基中加入酚红指示剂，若指示剂变红，则可初步鉴定该细菌能分解尿素
D．鉴定胡萝卜素粗品的可用纸层析法，原理是不同的色素分子在层析液中的溶解度不同，随层析液在滤纸上扩散速度不同；若样品中有杂质，则会出现不同的色素点
17．（2019·四川南充市·阆中中学高二期中）某生物兴趣小组以带有落叶的表层土壤(深5cm左右)为实验材料，研究土壤微生物在适宜温度下的分解作用，对土壤处理情况见下表，与此有关的叙述不正确的是
A．探究的问题可以是不同土壤湿度条件下，土壤微生物对落叶的分解作用
B．预期结果是 1、3 组的落叶不被分解，2、4 组中的落叶被不同程度的分解
C．为了控制实验中的无关变量，作为实验材料的落叶也应进行灭菌处理
D．该实验的自变量为土壤是否灭菌处理
18．（2019·河北冀州中学（衡水市冀州区第一中学）高二月考）下列有关现代生物技术的叙述中，不正确的是
A．运用固定化酶和固定化细胞进行生产时，都需要为其提供营养物质
B．果酒和果醋制作中利用的微生物，结构上主要差别在于有无核膜
C．采用稀释涂布平板法和平板划线法都能分离纯化菌种，得到单细胞菌落
D．探究加酶洗衣粉的最适温度时，洗衣粉量、污渍的种类属于无关变量
19．（2020·长春市第一中学高二期中）取9个洁净培养皿，均分为三组（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ），各组分别加入等量的不同培养基，每个平板均接种0.1mL大肠杆菌菌液，37℃培养36小时后，统计菌落数（见表），以下相关叙述错误的是（ ）
A．Ⅰ组和Ⅱ组说明维生素可以促进大肠杆菌生长繁殖
B．Ⅱ组和Ⅲ组说明大肠杆菌正常生长需要葡萄糖
C．三组实验均采用了稀释涂布平板法，以便菌落计数
D．三组实验所使用的培养基均需62℃、30min灭菌
20．（2020·辽宁沈阳市·沈阳铁路实验中学高二期中）幽门螺杆菌(Hp)感染是急慢性胃炎和消化性溃疡的主要致病因素。在患者体内采集样本并制成菌液后，进行分离培养。实验基本步骤如下：请选择下列叙述错误的一项：（ ）
A．在培养时，需将培养皿倒置，若不倒置培养，将导致无法形成单菌落
B．在配制培养基时，要加入尿素和酚红指示剂，这是因为Hp含有脲酶，它能以尿素作为氮源；若有Hp，则菌落变黑
C．临床上用14C呼气试验检测人体是否感染Hp，其基本原理是Hp能将14C标记的尿素分解为NH3和14CO2
D．步骤X表示接种，在无菌条件下操作时，先将菌液稀释，然后将菌液涂布到培养基平面上，菌液稀释的目的是为了获得单菌落
B组 专题综合练
1．（2020·广西桂林市·桂林十八中高二期中）以下实验中，观测指标不正确的是 （ ）
A．当有果酒产生后，会在酸性条件下与重铬酸钾反应呈灰绿色。
B．纤维素分解菌分解纤维素后，加有刚果红的培养基由无色变成红色
C．用伊红-美蓝培养基培养大肠杆菌，菌落会呈现黑色
D．分解尿素的细菌会使培养基中PH升高，使酚红指示剂变红
2．（2020·湖北孝感市·高二月考）漆酶属于木质降解酶类，在环境修复、农业生产等领域有着广泛用途。下图是分离、纯化和保存漆酶菌株的过程，相关叙述正确的是
A．饮用水中含有大量微生物，是分离产漆酶菌株的首选样品
B．选择培养基中需要加入漆酶的底物作为唯一碳源
C．在已涂布的平板上直接划线可以进一步纯化获得单菌落
D．斜面培养基中含有大量营养物，可在常温下长期保存菌株
3．（2020·全国高三课时练习）下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述，其中错误的是（ ）
A．用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板
B．取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各1mL，分别涂布于各组平板上
C．统计的菌落数目往往比活菌的实际数目低
D．确定对照组无菌后，选择菌落数在30-300之间的实验组平板进行计数
4．（2020·全国高三课时练习）如图为分离和纯化分解甲醛细菌的实验过程，其中LB培养基能使菌种成倍扩增，以下说法正确的是
A．需要对活性污泥作灭菌处理
B．②中LB培养基应以甲醛为唯一碳源
C．目的菌种异化作用类型为厌氧型
D．经⑤处理后，应选择瓶中甲醛浓度最低的一组进一步纯化培养
5．（2020·云南大理白族自治州·高二期末）下图是研究人员从红棕壤中筛选高效分解尿素细菌的过程示意图，有关叙述错误的是
A．在配制步骤②、③的培养基时，应先调pH值后高压蒸汽灭菌
B．步骤③纯化分解尿素的原理是将聚集的细菌分散，可以获得单细胞菌落
C．步骤③采用涂布平板法接种，并需向牛肉膏蛋白胨培养基中加入尿素
D．步骤④挑取③中不同种的菌落分别接种，比较细菌分解尿素的能力
二、综合题
6．（2020·全国高三课时练习）将马铃薯去皮切块，加水煮沸一定时间，过滤得到马铃薯浸出液。在马铃薯浸出液中加入一定量蔗糖和琼脂，用水定容后灭菌，得到M培养基。
回答下列问题：
（1）M培养基若用于真菌的筛选，则培养基中应加入链霉素以抑制___________的生长，加入了链霉素的培养基属于___________培养基。
（2）M培养基中的马铃薯浸出液为微生物生长提供了多种营养物质，营养物质类型除氮源外还有___________（答出两点即可）。氮源进入细菌后，可参与合成的生物大分子有___________（答出两点即可）。
（3）若在M培养基中用淀粉取代蔗糖，接种土壤滤液并培养，平板上长出菌落后可通过加入显色剂筛选出能产生淀粉酶的微生物，加入的显色剂是___________，该方法能筛选出产生淀粉酶微生物的原理___________。
（4）甲、乙两位同学用稀释涂布平板法测定某一土壤样品中微生物的数量，在同一稀释倍数下得到以下结果：
甲同学涂布了3个平板，统计的菌落数分别是110、140和149，取平均值133。
乙同学涂布了3个平板，统计的菌落数分别是27、169和176，取平均值124。
有人认为这两位同学的结果中，乙同学的结果可信度低，其原因是：_____________________。
7．（2020·全国高三课时练习）已知一种有机物X（仅含有C、H两种元素）不易降解，会造成环境污染。某小组用三种培养基筛选土壤中能高效降解X的细菌（目标菌）。
Ⅰ号培养基：在牛肉膏蛋白胨培养基中加入X（5g/L）。
Ⅱ号培养基：氯化钠（5g/L），硝酸铵（3g/L），其他无机盐（适量），X（15g/L）。
Ⅲ号培养基：氯化钠（5g/L），硝酸铵（3g/L），其他无机盐（适量）。X（45g/L）。
回答下列问题。
（1）在Ⅰ号培养基中，为微生物提供氮源的是___________。Ⅱ、Ⅲ号培养基为微生物提供碳源的有机物是_________。
（2）若将土壤悬浮液种在Ⅱ号液体培养基中，培养一段时间后，不能降解X的细菌比例会_________，其原因是_________。
（3）Ⅱ号培养基加入琼脂后可以制成固体培养基，若要以该固体培养基培养目标菌并对菌落进行计数，接种时，应采用的方法是______________。
（4）假设从Ⅲ号培养基中得到了能高效降解X的细菌，且该菌能将X代谢为丙酮酸，则在有氧条件下，丙酮酸可为该菌的生长提供_________和_________。
8．（2020·全国高三课时练习）为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌的分离等工作。回答下列问题：
（1）该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空平板先行培养了一段时间，这样做的目的是____________________________；然后，将1mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每升水样中的活菌数为__________________。
（2）该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。操作时，接种环通过__________灭菌，在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线。这样做的目的是_______________________。
（3）示意图A和B中，__________表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。
（4）该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养。结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是：振荡培养能提高培养液中__________的含量，同时可以使菌体与培养液充分接触，提高__________的利用率。
三、实验题
9．（2020·全国高三课时练习）在生产、生活和科研实践中，经常通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。回答下列问题：
（1）在实验室中，玻璃和金属材质的实验器具________（填“可以”或“不可以”）放入干热灭菌箱中进行干热灭菌。
（2）牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高温瞬时消毒法，与煮沸消毒法相比，这两种方法的优点是________。
（3）密闭空间内的空气可采用紫外线照射消毒，其原因是紫外线能________，在照射前，适量喷洒_________，可强化消毒效果。
（4）水厂供应的自来水通常是经过________（填“氯气”“乙醇”或“高锰酸钾”）消毒的。
（5）某同学在使用高压蒸汽灭菌锅时，若压力达到设定要求，而锅内并没有达到相应温度，最可能的原因是__________________________。
10．（2020·全国高三课时练习）物质W是一种含氮有机物，会污染土壤。W在培养基中达到一定量时培养基表现为不透明。某研究小组欲从土壤中筛选出能降解W的细菌（目标菌）。回答下列问题。
（1）要从土壤中分离目标菌，所用选择培养基中的氮源应该是_________。
（2）在从土壤中分离目标菌的过程中，发现培养基上甲、乙两种细菌都能生长并形成菌落（如图所示）。如果要得到目标菌，应该选择________菌落进一步纯化，选择的依据是________。
（3）土壤中的某些微生物可以利用空气中的氮气作为氮源。若要设计实验进一步确定甲、乙菌能否利用空气中的氮气作为氮源，请简要写出实验思路、预期结果和结论，即_______。
（4）该小组将人工合成的一段DNA转入大肠杆菌，使大肠杆菌产生能降解W的酶（酶E）。为了比较酶E与天然酶降解W能力的差异，该小组拟进行如下实验，请完善相关内容。
①在含有一定浓度W的固体培养基上，A处滴加含有酶E的缓冲液，B处滴加含有相同浓度天然酶的缓冲液，C处滴加_________，三处滴加量相同。
②一段时间后，测量透明圈的直径。若C处没有出现透明圈，说明___________；若A、B处形成的透明圈直径大小相近，说明___________。编号
①
②
③
④
⑤
成分
（NH4）2SO4
KH2PO4
FeSO4
CaCl2
H2O
含量/g
0.4
4.0
0.5
0.5
100mL
成分
牛肉膏
葡萄糖
K2HPO4
伊红
美蓝
青霉素
琼脂
蒸馏
含量
10 g
10 g
2 g
0.4g
0.065 g
1万单位
适量
1000 mL
蛋白胨
乳糖
蔗糖
K2HPO4
伊红
美蓝
蒸馏水
10g
5g
5g
2g
0.4g
0.065g
1000mL
组别
培养基
各平板的菌落数
1
2
3
Ⅰ
琼脂、C6H12O6、NH4NO3
30
31
27
Ⅱ
琼脂、C6H12O6、NH4NO3、维生素
169
178
193
Ⅲ
琼脂、NH4NO3、维生素
0
0
1
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