人教版 (2019)选择性必修3二 动物细胞融合技术与单克隆抗体第2课时同步达标检测题

第2课时　动物细胞融合技术与单克隆抗体

基础过关练

题组一　动物细胞融合技术

1.有关动物细胞融合的说法不正确的是　(　　)

A.细胞融合首先用酶解法分散成单个细胞　　

B.细胞融合是细胞识别的过程

C.融合细胞体现了细胞膜的流动性

D.在自然条件下常自发融合

2.关于动物细胞融合的说法不正确的是(　易错　)

A.动物细胞融合是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程

B.动物细胞融合后形成的具有原来两个或多个动物细胞遗传信息的单核细胞称为杂交细胞

C.常用于诱导动物细胞融合的手段有:聚乙二醇融合法、灭活病毒诱导法、紫外线照射

D.细胞融合技术突破了有性杂交方法的局限,使远缘杂交成为可能

3.动物细胞融合过程中通常用灭活病毒作为诱导剂,这里的“灭活”是指用物理或化学的手段使病毒(　　)

A.具有感染能力,但破坏其抗原结构

B.失去感染能力,但不破坏其抗原结构

C.失去感染能力,并破坏其抗原结构

D.具有感染能力,也不破坏其抗原结构

4.如图为动物细胞融合技术过程图,相关叙述不正确的是　(　　)

A.图中C为灭活病毒,此外还可用物理或化学法诱导融合

B.图中①过程发生了细胞膜的融合,体现了细胞膜的选择透过性

C.图中②过程表示通过有丝分裂过程产生杂交细胞

D.动物细胞融合技术可用于制备单克隆抗体

5.如图为动物细胞融合示意图,请据图回答:

(1)图中灭活的仙台病毒的作用是　　　　　　。 

(2)若仅考虑两两细胞融合,则A细胞和B细胞融合后共有　　　　　　　　三种类型。 

(3)此项技术最重要的应用是　　　　　　　　　。 

题组二　了解单克隆抗体的制备过程

6.运用动物细胞工程技术获得单克隆抗体时,下列操作不必要的是(　　)

A.对小动物注射抗原

B.融合并筛选杂交瘤细胞

C.培养杂交瘤细胞

D.将胰蛋白酶注入小鼠腹腔

7.(2020山东微山二中高二月考)科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合,得到杂交细胞,经培养可产生大量的单克隆抗体,与骨髓瘤细胞融合的是(　　)

A.经过免疫的B淋巴细胞

B.不经过免疫的T淋巴细胞

C.经过免疫的T淋巴细胞

D.不经过免疫的B淋巴细胞

8.(2020黑龙江哈师大附中高二月考)要想获得大量的单克隆抗体就必须用单个的B淋巴细胞进行无性繁殖,形成细胞群。其原因是(　　)

A.在体外培养条件下,B淋巴细胞可以无限增殖

B.在动物体内B淋巴细胞可产生多达百万种以上的抗体

C.每一个B淋巴细胞都参与特异性免疫反应

D.每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体

9.(2020北京高三适应性测试)下列关于单克隆抗体制备过程的叙述,错误的是(　　)

A.获得B淋巴细胞之前需给动物注射特定的抗原

B.分离出的B淋巴细胞应与骨髓瘤细胞融合

C.需要从融合的细胞中筛选出杂交瘤细胞

D.得到的所有杂交瘤细胞产生的抗体均相同

10.(2020北京西城高二期末)在利用小鼠制备抗人乳头瘤病毒单克隆抗体的过程中,以下操作错误的是(　　)

A.用灭活的人乳头瘤病毒免疫小鼠

B.取小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞进行细胞融合

C.对杂交瘤细胞进行克隆化培养、抗体检测和筛选

D.从脾细胞中分离出单个B细胞体外培养获取单克隆抗体

11.(2020北京海淀高三三模)科学家制备了以蜘蛛丝蛋白为抗原的单克隆抗体,流程如图所示。下列叙述错误的是(　　)

A.单克隆抗体的化学本质是蛋白质

B.①细胞的特点是既能在体外增殖,又能产生抗体

C.②步骤后需要在选择培养基上进行筛选

D.该抗体能与蜘蛛丝蛋白抗原特异性结合

12.(2020辽宁大连高二期末)人乳头瘤病毒(HPV)与宫颈癌的发生密切相关,抗HPV的单克隆抗体可以准确检测出HPV,从而及时监控宫颈癌的发生。以下是以HPV衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体的过程,请据图回答:

(1)图中向小鼠注射的A是　　　　　,传统生产抗体的方法是反复向小鼠注射A,然后从血清中分离所需抗体,用这种方法生产抗体的缺点是　　　　　　　　　(答出两点即可)。要想获得大量的单一抗体,也不能通过直接培养B淋巴细胞来实现,原因是　 

　　　　　　　　　　　。 

(2)图中选用B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合成杂交瘤细胞,说明细胞膜具有　　　　　　　。图中筛选①需要用　　　　　　培养基。筛选②的目的是筛选出　　　　　　　　　　　　的细胞。 

(3)从图中可以看出,单克隆抗体的制备过程,运用了动物细胞工程中的　　　　　　　和　　　　　　　　两大技术。 

13.(2020全国百校联考)如图是单克隆抗体制备过程示意图。请回答下列有关问题。

(1)动物细胞融合是依据　　　　　　　　原理将两个或多个动物细胞融合形成一个细胞的过程。 

(2)单克隆抗体制备需要利用动物细胞融合与动物细胞培养技术。在体外培养动物细胞时,培养液中除了要加入促生长因子、无机盐、微量元素、糖类、氨基酸等必需的营养成分外,往往还需要特别加入　　　　等一些天然成分,同时在含　　　　　　　　的混合气体的无菌、恒温的二氧化碳培养箱中进行培养。 

(3)图中①操作的目的是　　　　　　　　　　　。 

②过程常在化学诱导剂　　　　　　　　的诱导下完成。③过程中至少涉及两次筛选:第一次是利用　　　　　　　　进行初步筛选,需要淘汰的细胞有　　　　种,第二次是利用　　　　　　　　的方法,最终筛选出既能大量增殖,又能产生专一性抗体的杂交瘤细胞。　易错　 

题组三　归纳单克隆抗体的应用

14.(2020天津静海一中高二期中)下列关于单克隆抗体的叙述,不正确的是(　　)

A.其化学本质是蛋白质

B.单克隆抗体自身也能用于疾病治疗

C.利用单克隆抗体制成诊断试剂,可用于疾病的诊断

D.单克隆抗体只能在体内生产,不能在体外生产

15.(2020山东枣庄三中高二月考)“生物导弹”是将单克隆抗体与放射性同位素、化学药物或细胞毒素相结合,注入体内,借助单克隆抗体的导向作用,将药物定向带到癌细胞所在位置,在原位杀死癌细胞。“生物导弹”由两部分组成,一是“瞄准装置”,二是杀伤性“弹头”。下列对此描述不正确的是　(　　)

A.“瞄准装置”由识别肿瘤的单克隆抗体构成

B.“弹头”由放射性同位素、细胞毒素等物质构成

C.“弹头”中的药物有选择杀伤肿瘤细胞的功能

D.“生物导弹”是利用细胞工程制作出来的

16.(2020北京十三中高三开学考试)细胞毒素可有效杀伤肿瘤细胞,但细胞毒素没有特异性,在杀伤肿瘤细胞的同时还会对健康细胞造成伤害。图示特异性杀死肿瘤细胞的过程,图中抗体是利用单克隆抗体技术制备的。下列叙述不正确的是(　　)

A.抗体制备需用细胞融合技术

B.细胞毒素识别肿瘤细胞膜上的糖蛋白

C.溶酶体裂解加速肿瘤细胞凋亡

D.抗体可使细胞毒素进行特异性的杀伤

能力提升练

题组　动物细胞融合技术和制备单克隆抗体的综合

1.(2020北京北大附中高三一模改编,)制备单克隆抗体过程中,下列与杂交瘤细胞的获取相关叙述中正确的是　(　　)

A.利用了细胞增殖、细胞膜选择透过性等原理

B.可利用电融合法和灭活病毒诱导法诱导细胞融合

C.可利用细胞中染色体的数目和形态筛选杂交瘤细胞

D.利用选择培养基筛选的杂交瘤细胞可直接生产单克隆抗体

2.(2020山东日照高三期末,)草莓皱缩病毒(SCV)感染草莓时,会使其叶片扭曲皱缩,植株矮化,导致减产。为了能快速有效检测出该病毒,研究人员利用草莓皱缩病毒粒子免疫健康小鼠,制备相应的单克隆抗体。下列有关叙述错误的是(　　)

A.从免疫小鼠体内分离获得的B淋巴细胞,原代培养后与骨髓瘤细胞融合

B.在获得能分泌相应抗体的杂交瘤细胞的过程中,需要进行两次筛选

C.用单克隆抗体检测草莓是否感染SCV是利用了抗原—抗体杂交的原理

D.在制备单克隆抗体的过程中,用到了动物细胞融合技术和动物细胞培养技术

3.(2020山东新高考高三模拟,)将特定药物与单克隆抗体相结合制成的“生物导弹”,能够用于杀死人类某些癌细胞,其过程如图所示。下列有关叙述错误的是　(　　)

A.经①形成的杂交瘤细胞都能无限增殖并产生特定抗体

B.①过程的基本原理和植物原生质体融合的基本原理相同

C.②过程需要筛选并克隆单个杂交瘤细胞

D.抗体的靶向作用使③过程具有高度特异性

4.(2019山东菏泽高三期中,)甘草酸是中药甘草中的主要活性成分。为了快速检测甘草酸,科研人员利用细胞工程技术制备了抗甘草酸的单克隆抗体,其基本操作过程如图。相关叙述正确的是(　　)

A.过程①注射相应抗原后应立即从小鼠脾中提取细胞甲

B.过程②诱导细胞融合,利用了细胞膜的选择透过性

C.过程③、④的筛选方法相同,细胞丙、丁遗传物质相同

D.过程⑤无论在体内还是体外进行,细胞丁都可大量增殖

5.(不定项)(2020江苏苏州高三期中改编,)人绒毛膜促性腺激素(HCG)是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白,制备抗HCG单克隆抗体可用于早孕的诊断。如图是抗HCG单克隆抗体制备流程示意图,有关叙述错误的是(　　)

A.①过程常用灭活病毒,不可用聚乙二醇

B.②过程筛选出的杂交瘤细胞都能产生抗HCG抗体

C.③过程利用的原理是抗原和抗体的特异性结合

D.④过程需要添加抗生素等物质,以防止病毒污染

6.(2020江苏南通高三调研,)如图是某同学绘制的单克隆抗体制备过程及原理图,其中抗原决定簇是指抗原表面或内部能决定抗原性的基团,骨髓瘤细胞是一种营养缺陷型细胞。有关叙述错误的是(　　)

A.动物免疫的原理是一种抗原诱导形成一种淋巴细胞

B.选用营养缺陷型骨髓瘤细胞有利于筛选杂交瘤细胞

C.细胞融合也可能发生在不同类型淋巴细胞之间

D.a融合杂交瘤细胞克隆化培养的原理是细胞增殖

7.(2020山东德州高三一模,)抗PD-L1单克隆抗体能与癌细胞膜表面的PD-L1特异性结合,因而具有治疗某些癌症的作用。如图是制备抗PD-L1单克隆抗体的示意图,下列叙述错误的是(　　)

A.在分离B淋巴细胞前,需要对小鼠注射PD-L1进行免疫

B.多孔玻璃板中的细胞为B淋巴细胞和鼠骨髓瘤细胞的融合细胞

C.图中细胞集落a~d既能大量繁殖,又能产生抗体

D.图中细胞集落a可用于扩大化培养生产抗PD-L1单克隆抗体

8.(2020辽宁沈阳高三三模,)靶向药物是指被赋予了靶向能力的药物或制剂,其目的是使药物或其载体能瞄准特定的病变部位,并在目标部位蓄积或释放有效成分。“生物导弹”就是主动靶向药物的一种,其疗效高、毒副作用小,具有广阔的应用前景。

(1)“生物导弹”可以把抗癌细胞的单克隆抗体跟　　　　　　　　、　　　　　　　　或细胞毒素相结合,借助单克隆抗体的导向作用,将药物定向带到癌细胞所在的位置,在原位杀死癌细胞。 

(2)下图是制备单克隆抗体的途径模式图,据图回答问题:

通过过程①　　　　　技术,可以得到多种杂交细胞,再通过③过程用特定的　　　　　筛选出杂交瘤细胞,对上述筛选出的杂交瘤细胞还需要先后多次进行　　　　　和　　　　　,才能获得足够数量的能分泌所需抗体的杂交瘤细胞。 

(3)与传统方法生产的抗体相比,单克隆抗体最主要的优点是　。 

9.(2020四川雅安高三模拟,)新型冠状病毒和SARS病毒都会造成肺炎。下图是SARS-CoV S蛋白特异性单克隆抗体的制备过程。回答下列问题:

(1)若只考虑细胞两两融合,图中甲理论上有　　种。 

(2)已知细胞合成DNA有D和S两条途径,其中D途径能被氨基嘌呤阻断。鼠的淋巴细胞有上述两种途径,但一般不分裂增殖;鼠的骨髓瘤细胞中尽管没有S途径,但能不断分裂增殖。根据该原理,在含甲的混合培养液中添加氨基嘌呤　　　　　(填“能”或“不能”)筛选出A,原因是　 

　。 

(3)在SARS-CoV S蛋白特异性单克隆抗体的制备过程中,需要用到动物细胞培养和动物细胞融合技术。一般来说,动物细胞培养需要的条件有　　　　　　　　　(至少答出两点);诱导动物细胞融合的方法有　　　　　　　　　　　　(至少答出两种)。 

(4)SARS-CoV S蛋白特异性单克隆抗体　　　　　(填“能”或“不能”)对新型冠状病毒发挥作用,理由是                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                        。 

10.(2020天津静海一中高三月考,)Graves病(GD)可导致甲状腺功能亢进。研究发现,GD患者甲状腺细胞表面表达大量细胞间黏附分子1(ICAM-1),导致甲状腺肿大。科研人员通过制备单克隆抗体,对治疗GD进行了尝试。

(1)用ICAM-1作为抗原间隔多次免疫若干只小鼠,几周后取这些免疫小鼠的血清,分别加入多孔培养板的不同孔中,多孔培养板中需加入　　　　　以检测这些小鼠产生的抗体。依据反应结果,选出抗原—抗体反应最　　　　　(强/弱)的培养孔所对应的小鼠M。 

(2)取小鼠M的脾脏细胞制成细胞悬液,与实验用骨髓瘤细胞进行融合,用选择培养基筛选得到具有　　　　　能力的细胞。核苷酸合成有两个途径,物质A可以阻断其中的全合成途径(如图)。正常细胞内含有补救合成途径所必需的转化酶和激酶,制备单克隆抗体时选用的骨髓瘤细胞中缺乏转化酶。可用加入H、A、T三种物质的“HAT培养基”筛选出特定的杂交瘤细胞。 

融合前将部分培养细胞置于含HAT的选择培养基中培养,一段时间后培养基中　　　　　(填“有”或“无”)骨髓瘤细胞生长,说明培养基符合实验要求。杂交瘤细胞可以在HAT培养基上大量增殖的原因是　　　　　　　　　　　　　　。 

(3)将获得的上述细胞在多孔培养板上培养,用ICAM-1检测,从中选择　　　　　　　　　　的杂交瘤细胞,将其植入小鼠腹腔中进行克隆培养,一段时间后从小鼠腹水中提取实验用抗体。 

(4)若进一步比较实验用抗体和131I对GD模型小鼠的治疗作用,可将若干GD模型小鼠等分为三组,请补充下表中的实验设计。

第2课时　动物细胞融合技术与单克隆抗体

基础过关练

1.D　在自然条件下,动物细胞一般不会发生融合现象,只有用一些诱导方法才能促使其融合。

2.C　动物细胞融合是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程,一般为两个细胞的融合,A正确;动物细胞融合后,形成的杂交细胞具有原来两个或多个动物细胞的遗传信息,如骨髓瘤细胞和B淋巴细胞融合形成杂交瘤细胞,B正确;紫外线照射常用作人工诱变的物理诱变因子,可诱发突变,而不是诱导细胞融合的因素,C错误;细胞融合技术突破了有性杂交的局限,使远缘杂交成为可能,D正确。

易错警示

不清楚诱导动物细胞融合常用的方法

诱导动物细胞融合特有的方法是灭活病毒诱导法,其他物理、化学诱导融合的方法与植物体细胞杂交过程中诱导原生质体融合的方法相同。

3.B　动物细胞融合过程中通常用灭活病毒作为诱导剂,这里的“灭活”是指用物理或化学的手段使病毒或细菌失去感染能力,但并不破坏其抗原结构。

4.B　图中C为灭活病毒,此外还可用物理或化学法诱导融合,A正确;图中①过程发生了细胞膜的融合,体现了细胞膜的流动性,B错误;图中②过程表示通过有丝分裂过程产生杂交细胞,C正确;动物细胞融合技术最重要的用途是制备单克隆抗体,D正确。

5.答案　(1)诱导细胞融合　(2)A-A、A-B、B-B　(3)制备单克隆抗体

解析　(1)诱导动物细胞融合的常用方法有PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等,因此灭活的仙台病毒的作用是诱导细胞融合。(2)若仅考虑两两细胞融合,则A细胞和B细胞融合后共有A-A、A-B、B-B三种类型。(3)动物细胞融合技术最重要的应用是制备单克隆抗体。

6.D　用动物细胞工程技术获得单克隆抗体时,杂交瘤细胞在体外条件大规模培养时需用胰蛋白酶,其作用是分离细胞。在动物体内培养时不需要注入胰蛋白酶。

7.A　利用经免疫的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合的杂交细胞可产生单克隆抗体。

8.D　能产生抗体的B淋巴细胞属于高度分化的细胞,不能无限增殖,A不符合题意;动物体内产生的特异性抗体的种类可多达百万种以上,但不是为获得单克隆抗体必须将单个细胞进行无性繁殖形成细胞群的原因,B不符合题意;当有特定的抗原刺激机体时,B淋巴细胞才能参与特异性免疫反应,C不符合题意;每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体,D符合题意。

9.D　要获得能够产生特定抗体的B淋巴细胞,需要给动物注射特定的抗原,A正确;由于分离出的B淋巴细胞不能无限增殖,所以B淋巴细胞应与骨髓瘤细胞融合形成能无限增殖的杂交瘤细胞,B正确;只考虑两两细胞融合,由于融合的细胞中有三种,即B淋巴细胞与B淋巴细胞融合的细胞、骨髓瘤细胞与骨髓瘤细胞融合的细胞、杂交瘤细胞,所以需要从融合的细胞中筛选出杂交瘤细胞,C正确;不同的抗原刺激,杂交瘤细胞产生的抗体不同,但是同种抗原刺激,杂交瘤细胞产生的抗体是相同的,D错误。

10.D　用灭活的人乳头瘤病毒免疫小鼠,会刺激小鼠产生能分泌相应抗体的细胞,A正确;在小鼠的脾细胞中存在能分泌抗人乳头瘤病毒抗体的B淋巴细胞,设法将骨髓瘤细胞与脾细胞中的B淋巴细胞融合,获得杂交瘤细胞,B正确;对杂交瘤细胞进行克隆化培养、抗体检测和筛选,可获得单克隆抗体,C正确;从脾细胞中分离的单个B细胞已高度分化,无法进行体外培养获得单克隆抗体,D错误。

11.B　单克隆抗体的化学本质是蛋白质,A正确;①细胞是B淋巴细胞,能产生特异性抗体,但在体外不能无限增殖,B错误;融合后需要在选择培养基上进行筛选,筛选出既能无限增殖又能产生相应抗体的杂交瘤细胞,C正确;该抗体是以蜘蛛丝蛋白为抗原生产的,所以其能与蜘蛛丝蛋白抗原特异性结合,D正确。

12.答案　(1)HPV衣壳蛋白　产量低、纯度低、特异性差　在体外培养条件下,B淋巴细胞不能无限增殖　(2)(一定的)流动性　选择　(足够数量的)能分泌所需抗体(或:分泌抗HPV抗体)　(3)动物细胞培养　动物细胞融合

解析　(1)为获得抗HPV的单克隆抗体,图中向小鼠注射的A是HPV衣壳蛋白,传统生产抗体的方法是反复向小鼠注射A,然后从血清中分离所需抗体,但这种方法生产的抗体产量低、纯度低、特异性差。要想获得大量的单一抗体,也不能通过直接培养B淋巴细胞来实现,因为在体外培养条件下,B淋巴细胞不能无限增殖。(2)图中选用B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合成杂交瘤细胞,说明细胞膜具有一定的流动性。图中筛选①需要用特定的选择培养基,在该培养基上,只有融合的杂交细胞能生长。筛选②需要进行克隆化培养和抗体检测,从而筛选出足够数量的能分泌抗HPV抗体的杂交瘤细胞。(3)单克隆抗体的制备过程运用了动物细胞培养和动物细胞融合两大技术。

13.答案　(1)细胞膜的流动性　(2)(动物)血清　95%空气和5%CO2　(3)刺激机体产生特异性B淋巴细胞　聚乙二醇(或PEG)　选择培养基　4　专一抗体检测

解析　(1)动物细胞融合依据的原理是细胞膜的流动性。(2)动物细胞体外培养的培养液中除包含无机盐、促生长因子、糖类、氨基酸等必需的营养成分外,还需要加入动物血清等一些天然成分,并置于含95%空气和5%CO2的无菌、恒温的CO2培养箱中进行培养。(3)图中①操作是注射特定的抗原,目的是刺激小鼠产生特异性B淋巴细胞。促进动物细胞融合过程常用的化学诱导剂是聚乙二醇。③过程中至少需要进行两次筛选,第一次筛选利用的是选择培养基,筛选出杂交瘤细胞,需要淘汰的细胞有未融合的B淋巴细胞、未融合的骨髓瘤细胞、B淋巴细胞自身融合的细胞(B—B型细胞)及骨髓瘤细胞自身融合的细胞(瘤—瘤型细胞),共4种;第二次筛选是利用专一抗体检测的方法,最终筛选出既能无限增殖,又能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。

易错警示

不清楚单克隆抗体制备中两次筛选的作用

第一次筛选时,在特定选择培养基上被选出的是“杂交瘤细胞”,被淘汰的有4种细胞——未融合的B淋巴细胞、未融合的骨髓瘤细胞、B淋巴细胞自身融合细胞(B—B型细胞)及骨髓瘤细胞自身融合细胞(瘤—瘤型细胞)。第二次筛选时,需用抗体检测,筛选出的是能产生特异性抗体的杂交瘤细胞,淘汰的是所产生的抗体不符合目标的杂交瘤细胞。

14.D　单克隆抗体的化学本质是蛋白质,A正确;单克隆抗体自身也能用于疾病治疗,B正确;单克隆抗体制成诊断试剂,可用于多种疾病的诊断和病原体的鉴定,C正确;单克隆抗体既能在体内生产,也能在体外生产,D错误。

15.C　“生物导弹”中的“瞄准装置”是单克隆抗体,A正确;“弹头”由放射性同位素、细胞毒素等物质构成,B正确;“弹头”中的药物没有选择杀伤肿瘤细胞的功能,C错误;“生物导弹”的制备应用了细胞工程中的制备单克隆抗体的技术,D正确。

16.B　单克隆抗体制备主要涉及动物细胞工程中的动物细胞培养、动物细胞融合技术,A正确;分析图示,细胞毒素没有特异性,抗体可识别肿瘤细胞膜上的糖蛋白,B错误;溶酶体裂解,溶酶体内含有的蛋白酶及其他水解酶释放至细胞中,加速了肿瘤细胞凋亡,C正确;抗体与细胞毒素结合,结合物中的抗体能特异性识别肿瘤细胞,使细胞毒素对其产生特异性的杀伤,不会对健康细胞造成伤害,D正确。

能力提升练

1.B　单克隆抗体的制备过程利用了细胞增殖、细胞膜流动性等原理,A错误;诱导动物细胞融合的常用方法有PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法,B正确;杂交瘤细胞的筛选需要使用特定的选择培养基,观察细胞染色体数目和形态只能判断细胞是否融合,故不能通过观察染色体的数目和形态筛选杂交瘤细胞,C错误;利用选择培养基筛选出的杂交瘤细胞,还需要进行专一抗体检测和克隆化培养后才能用于生产单克隆抗体,D错误。

2.A　从免疫小鼠体内分离获得的B淋巴细胞,不需要原代培养就可以与骨髓瘤细胞融合,A错误;在获得能分泌相应抗体的杂交瘤细胞的过程中,需要进行两次筛选,第一次筛选出杂交瘤细胞,第二次筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞,B正确;用单克隆抗体检测草莓是否感染SCV是利用了抗原—抗体杂交的原理,C正确;在制备单克隆抗体的过程中,用到了动物细胞融合技术和动物细胞培养技术,D正确。

3.A　经①形成的杂交瘤细胞不一定都能产生特定抗体,需要经过专一抗体检测和克隆化培养,从而筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞,即②过程,A错误,C正确;①过程和植物原生质体融合的基本原理相同,都是细胞膜的流动性,B正确;抗体的靶向作用使③过程具有高度特异性,D正确。

4.D　过程①注射相应抗原后应经过一段时间,使小鼠产生能产生特定抗体的B淋巴细胞,再从小鼠脾中提取细胞甲,A错误;过程②诱导细胞融合,利用了细胞膜的流动性,B错误;过程③筛选杂交瘤细胞,过程④筛选能产生单一抗体的杂交瘤细胞,二者方法不同,C错误;过程⑤无论在体内还是体外进行,细胞丁都可大量增殖,D正确。

5.ABD　动物细胞融合可以用灭活病毒诱导处理,也可以用聚乙二醇诱导,A错误;②过程筛选出的杂交瘤细胞不一定都能产生抗HCG抗体,还需要进行专一抗体检测,B错误;③过程以抗HCG单克隆抗体为抗原,利用抗原—抗体杂交的原理进行检测,C正确;④过程需要添加抗生素等物质,目的是防止杂菌污染,而不是防止病毒污染,D错误。

6.A　据题图可知,一种抗原上可有多种抗原决定簇,不同的抗原决定簇可诱导不同的淋巴细胞产生,A错误;骨髓瘤细胞可以无限增殖,选用营养缺陷型骨髓瘤细胞可利用其特点筛选杂交瘤细胞,B正确;细胞融合技术突破了有性杂交的局限,使远缘杂交成为可能,因此细胞融合也可能发生在不同类型淋巴细胞之间,C正确;a融合杂交瘤细胞克隆化培养的原理是细胞增殖,可得到大量的同种杂交瘤细胞,D正确。

7.B　本实验的目的是获得抗PD-L1单克隆抗体,所以在分离B淋巴细胞前,需要对小鼠注射PD-L1进行免疫,A正确;如果只考虑两两细胞融合,多孔玻璃板中的细胞有三种融合细胞,即B淋巴细胞和鼠骨髓瘤细胞的融合细胞、B淋巴细胞和B淋巴细胞的融合细胞、鼠骨髓瘤细胞和鼠骨髓瘤细胞的融合细胞,B错误;图中细胞集落a~d是经过筛选后的杂交瘤细胞,所以既能大量增殖,又能产生抗体,C正确;图中细胞集落a与PD-L1抗原反应呈阳性,说明能够产生抗PD-L1抗原的抗体,因此细胞集落a可以用于扩大化培养生产抗PD-L1单克隆抗体,D正确。

8.答案　(1)放射性同位素　化学药物　(2)细胞融合(或答:“动物细胞融合”)　选择培养基　克隆化培养　抗体检测(说明:后两个空的答案不可以颠倒)　(3)特异性强、灵敏度高、并可以大量制备

解析　(1)“生物导弹”可以把抗癌细胞的单克隆抗体跟放射性同位素、化学药物或细胞毒素相结合,借助单克隆抗体的导向作用,将药物定向带到癌细胞所在的位置,在原位杀死癌细胞。(2)通过过程①细胞融合技术,可以得到多种杂交细胞,再用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞,对筛选出的杂交瘤细胞还需要先后多次进行克隆化培养和抗体检测,才能获得足够数量的能分泌所需抗体的杂交瘤细胞。(3)与传统方法生产的抗体相比,单克隆抗体最主要的优点是特异性强、灵敏度高、并可以大量制备。

9.答案　(1)3　(2)能　杂交瘤细胞D途径被氨基嘌呤阻断后不能合成DNA,但可通过S途径合成DNA,并不断分裂增殖　(3)无菌、无毒的环境,营养,温度、pH和渗透压,气体环境　PEG融合法、灭活病毒诱导法、电融合法　(4)不能　新型冠状病毒与SARS病毒的抗原不同,SARS-CoV S蛋白特异性单克隆抗体只能与SARS-CoV S蛋白发生特异性结合

解析　(1)若只考虑细胞两两融合,甲理论上有3种融合细胞,包括两个骨髓瘤细胞的融合细胞、两个已免疫的B细胞的融合细胞、一个骨髓瘤细胞与一个已免疫B细胞的融合细胞。(2)在含甲的混合培养液中添加氨基嘌呤后,已免疫的B细胞及其彼此融合的细胞能利用S途径进行DNA合成,但是一般无法进行分裂增殖;骨髓瘤细胞的D途径被阻断,所以骨髓瘤细胞及其彼此融合的细胞就不能增殖;只有骨髓瘤细胞与已免疫的B细胞融合形成杂交细胞后,才能利用S途径合成DNA并不断进行分裂增殖,所以在含甲的混合培养液中添加氨基嘌呤能筛选出A。(3)动物细胞培养的条件包括以下几点:①无毒、无菌的环境;②营养物质;③适宜的温度、pH和渗透压等;④气体环境。诱导动物细胞融合的常用方法有电融合法、聚乙二醇融合法和灭活病毒诱导法等。(4)抗体具有特异性,SARS-CoV S蛋白特异性单克隆抗体只会对SARS病毒起作用,不能对新型冠状病毒发挥作用。

10.答案　(1)ICAM-1　强　(2)无限增殖　无　杂交瘤细胞可以进行补救合成途径　(3)大量产生抗ICAM-1抗体　(4)给GD模型小鼠腹腔注射溶于0.1 mL无菌生理盐水的抗ICAM-1单克隆抗体

解析　(1)抗原和抗体结合具有特异性,多孔培养板中需加入ICAM-1以检测小鼠是否产生抗ICAM-1的抗体。依据反应结果,选出阳性(或“抗原—抗体”)反应最强的培养孔所对应的小鼠M。(2)B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合形成的杂交瘤细胞具有骨髓瘤细胞无限增殖的特点。制备单克隆抗体时选用的骨髓瘤细胞中缺乏转化酶,无法进行补救合成途径,且物质A阻断了全合成途径,故在HAT培养基中无骨髓瘤细胞生长。杂交瘤细胞含有补救合成途径所必需的转化酶和激酶,可以进行补救合成途径,故可以在HAT培养基上大量增殖。(3)根据抗原和抗体结合的特异性,用ICAM-1检测,从中选择大量产生抗ICAM-1抗体的杂交瘤细胞,将其植入小鼠腹腔中进行克隆培养,一段时间后从小鼠腹水中提取实验用抗体。(4)根据题干中实验目的“比较实验用抗体和131I对GD模型小鼠的治疗作用”,依据实验的单一变量原则,单克隆抗体治疗组(C)中应给GD模型小鼠腹腔注射溶于0.1 mL无菌生理盐水的抗ICAM-1单克隆抗体。