长春市第二实验中学2022-2023学年高二下学期4月月考生物试卷（含答案）

这是一份长春市第二实验中学2022-2023学年高二下学期4月月考生物试卷（含答案），共17页。试卷主要包含了单选题，多选题，读图填空题，填空题等内容，欢迎下载使用。

长春市第二实验中学2022-2023学年高二下学期4月月考生物试卷
学校：___________姓名：___________班级：___________考号：___________

一、单选题
1、下列关于传统发酵技术应用的叙述，正确的是( )
A. 利用乳酸菌制作酸奶过程中，先通气培养，后密封发酵
B. 家庭制作果酒、果醋和腐乳通常都不是纯种发酵
C. 果醋制作过程中发酵液pH逐渐降低，果酒制作过程中情况相反
D. 毛霉主要通过产生脂肪酶、蛋白酶和纤维素酶参与腐乳发酵
2、在生活中,人们经常利用酵母菌制作美味的食品，下列关于酵母菌的说法合理的是( )
A.酿造葡萄酒时一定要通入空气才能使葡萄汁变成葡萄酒
B.有氧条件下酵母菌可将酒精氧化成醋酸，利用酵母菌能把果酒加工成果醋
C.馒头中的孔泡是由酵母菌在面团中产生CO2，蒸馒头时CO2受热膨胀形成的
D.腐乳和泡菜的制作过程中都离不开酵母菌的发酵
3、如表所列微生物与其特点、应用等对应完全正确的是( )
选项
微生物种类
细胞类型
发酵条件
应用
A
酵母菌
真核细胞
有氧
酿酒
B
毛霉
真核细胞
无氧
制腐乳
C
醋酸菌
真核细胞
有氧
制醋
D
乳酸菌
原核细胞
无氧
制泡菜
A.A B.B C.C D.D
4、下列关于图示甲、乙、丙、丁装置的叙述，错误的是( )

A.甲装置用于果酒的发酵，发酵瓶应洗干净，可用体积分数为70％的酒精消毒
B.乙是果醋发酵的装置，过滤膜用来去除空气中的CO2、N2等
C.丙中接种的毛霉属于丝状真菌，可以来自空气中的毛霉孢子
D.丁是制作泡菜的坛子，坛沿放水是为了形成坛内的无氧环境
5、下列是一些关于微生物的培养和应用的基本理论和基础知识，其中都正确的一组是( )
①接种环、玻璃器皿（如培养皿等）可以通过灼烧灭菌和干热灭菌
②人工配制的培养基常需要调pH，其应在分装灭菌前进行
③超净工作台、接种室、空气可以通过紫外线消毒
④用涂布稀释平板法统计菌落数的缺点是不能观察到微生物的形态、大小、结构
⑤实验室测定土壤中细菌的数量时，选取的稀释度的要求通常分别是：103、104、105
A.①②③ B.①②④ C.②③④ D.②③⑤
6、某小组的同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验，包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察与计数。下列与此实验相关的叙述中，正确的是( )
A.实验用过的带菌培养基经过加热后才能倒掉
B.利用平板划线法对细菌进行分离纯化并计数
C.观察细菌培养的实验中，最好是在另一平板上接种清水作为对照实验
D.培养基中含有的蛋白胨、淀粉可分别为细菌培养提供氮源和碳源
7、如图为从土壤中分离纯化尿素分解菌的过程。下列有关叙述错误的是( )

A.①②③④培养基都应以尿素为唯一氮源
B.图中所用培养基灭菌常用的方法是高压蒸汽灭菌
C.④过程采用稀释涂布平板法进行接种，接种工具是涂布器
D.可用酚红染料鉴定，菌落周围是否出现红色圈
8、下列有关微生物分离、纯化及计数的叙述中，错误的是( )
A.常用富含纤维素的培养基富集培养纤维素分解菌
B.固体培养基可以用于菌种的分离、鉴定和工业生产
C.稀释涂布平板法通过系列梯度稀释可将微生物分散
D.用血细胞计数板计数微生物时，实验结果往往偏大
9、某同学将1 mL土壤样液稀释100倍，在3个平板上用稀释涂布平板法分别接入0.1 mL稀释液，经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为56、57和58。下列叙述错误的是( )
A.可得出土壤样液中活菌数大约为5.7×107个/L
B.此方法统计的菌落数往往比实际的活菌数目低
C.一般选择菌落数在30－300的平板进行计数
D.显微镜直接计数法统计的都是稀释液中活菌数
10、物质W是一种含氮有机物，会污染土壤。W在培养基中达到定量时培养基表现为不透明。某研究小组要从土壤中筛选出能降解W的细菌（目的菌株），实验结果显示培养基上甲、乙两种细菌都能生长并形成菌落（如图所示）。下列叙述正确的是( )

A.要将土壤稀释液严格灭菌后接种到选择培养基上
B.筛选目的菌株的培养基应加入蛋白胨、W作为氮源
C.如果要得到目的菌株，应该选择甲菌落进一步纯化
D.采用稀释涂布平板法和平板划线法都能纯化菌种
11、2022年由于环境的污染导致化合物S被广泛应用于医药、食品和化工工业。用菌株C可生产S，S的产量与菌株C培养所利用的碳源关系密切。为此，某科学家通过实验比较不同碳源对菌体生长和S产量的影响，结果见表。下列说法错误的是( )
碳源
细胞干重/（g/L）
S产量/（g/L）
葡萄糖
3.12
0.15
淀粉
0.01
0.00
制糖废液
2.30
0.18
A.实验室培养微生物时，除碳源外，还需要提供水、氮源和无机盐等
B.由实验结果可知，菌株C生长的最适碳源是制糖废液
C.由实验结果可知，碳源为淀粉时菌株C不能生长，其原因可能是缺少淀粉酶
D.利用制糖废液生产S可以实现废物利用，其意义是减少污染、节省原料、降低生产成本
12、啤酒工业化生产的原料为大麦，其工业化生产流程包括8个环节：发芽→焙烤→碾磨→糖化→蒸煮→发酵→消毒→终止。其中发酵过程分为主发酵和后发酵两个阶段。下列分析错误的是( )
A.大麦种子发芽过程中会释放淀粉酶
B.蒸煮可终止糖化过程，并对糖浆灭菌
C.酵母菌的繁殖为主发酵，糖的分解和代谢物的生成为后发酵
D.焙烤、碾磨及对产品的消毒都能提高啤酒的产量和品质
13、下列关于发酵工程的说法，错误的是( )
A.发酵工程产品主要是指微生物的代谢物、酶和菌体本身
B.可以通过人工诱变选育新菌株
C.培养基，发酵设备和菌种必须经过严格的灭菌
D.环境条件的变化既影响菌种的生长繁殖又影响菌体代谢物的形成
14、下列关于发酵工程基本环节的叙述，错误的是( )
A.发酵工程的环节包括选育菌种、扩大培养、配制培养基和灭菌、接种、发酵罐内发酵、分离提纯
B.扩大培养是发酵工程的中心环节
C.性状优良的菌种可以通过基因工程育种或诱变育种获得
D.对于获得的产品菌种，可以采用过滤、沉淀等方法将菌体分离和干燥
15、下列有关基因工程的叙述，正确的是( )
A.基因工程育种的原理是基因突变，基因工程需要限制酶、DNA连接酶等多种酶参与
B.必须用同一种限制酶切割目的基因和运载体才能得到相同的黏性末端
C.质粒常作为基因工程的运载体，是存在于细菌和酵母菌等生物细胞中的一种细胞器
D.细菌细胞内的基因可在植物细胞内表达是因为所有生物共用一套密码子
16、基因工程利用某目的基因(图甲)和P1噬菌体载体(图乙)构建重组DNA。限制性核酸内切酶的酶切位点分别是BglⅡ、EcoR Ⅰ和Sau3A Ⅰ。下列分析错误的是( )

A.构建重组DNA时，可用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体
B.构建重组DNA时，可用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体
C.图乙中的P1噬菌体载体只用EcoRⅠ切割后，含有2个游离的磷酸基团
D.用EcoRⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体，再用DNA连接酶连接，只能产生一种重组DNA
17、对图中a、b、c、d代表的结构和物质描述正确的是( )

A.a为质粒RNA B.b为限制性外切酶
C.c为RNA聚合酶 D.d为外源基因
18、PCR 是多聚酶链式反应技术的缩写，下列有关PCR过程叙述中不正确的是( )
A. 目的基因 DNA 变性过程中破坏的是 DNA 分子内碱基对之间的氢键
B. 引物与 DNA 模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成
C. 延伸过程中需要 Taq 酶、四种核糖核苷酸
D. PCR 与细胞内 DNA 复制相比所需要酶的最适温度较高
19、限制性内切酶EcoRI识别并切割双链DNA，用EcoRI完全酶切果蝇基因组DNA，理论上得到DNA片段的平均长度（碱基对）约为( )

A.6 B.25 C.4000 D.24000
20、用XhoⅠ和SalⅠ两种限制性核酸内切酶分别处理同一DNA片段，酶切位点及酶切产物分离结果如图。以下叙述不正确的是( )

A.图1中两种酶识别的核苷酸序列不同
B.图2中酶切产物可用于构建重组DNA
C.泳道①中是用SalⅠ处理得到的酶切产物
D.图中被酶切的DNA片段是单链DNA
21、有关基因工程的成果及应用的说法不正确的是( )
①用基因工程方法培育的抗虫植物和能抗病毒的植物
②基因工程在畜牧业上应用的主要目的是培育体型巨大、品质优良的动物
③任何一种假单孢杆菌都能分解四种石油成分，所以假单孢杆菌是“超级菌”
④基因工程在农业上的应用主要是培育高产、稳产、品质优良和具有抗逆性的农作物
A.①② B.③④ C.②③ D.②④
22、下列有关蛋白质工程和基因工程的比较，不合理的是( )
A.基因工程原则上只能生产自然界已存在的蛋白质，而蛋白质工程可以对现有的蛋白质进行改造，从而制造一种新的蛋白质
B.蛋白质工程是在基因工程的基础上发展起来的，蛋白质工程最终还是要通过基因修饰或基因合成来完成
C.当得到可以在-70℃下保存半年的干扰素后，在相关酶、氨基酸和适宜的温度、pH条件下，干扰素可以大量自我合成
D.基因工程和蛋白质工程产生的变异都是可遗传的
23、猪的胰岛素用于人体时降血糖效果不明显，原因是猪胰岛素分子中有一个氨基酸与人的不同。为了使猪胰岛素适用于治疗人类糖尿病，用蛋白质工程对蛋白质分子进行设计的最佳方案是( )
A.对猪胰岛素进行一个氨基酸的替换
B.将猪胰岛素和人胰岛素进行拼接组成新的胰岛素
C.将猪胰岛素和人胰岛素混合在一起治疗糖尿病
D.根据人胰岛素设计制造一种新的胰岛素
24、下列关于DNA粗提取与鉴定及DNA片段的扩增与电泳鉴定的叙述,正确的是( )
A.用同样方法从等体积猪血和鸡血中提取的DNA量相近
B.将丝状物加入二苯胺试剂,沸水浴冷却后呈蓝色
C.PCR扩增的DNA片段在琼脂糖凝胶中迁移的速率与凝胶浓度、DNA分子大小等有关
D.PCR扩增4次循环后,得到的含有两种引物的DNA片段所占比例为1/8

25、下面关于多聚酶链式反应（PCR）的叙述错误的是( )
A.常采用琼脂糖凝胶电泳来鉴定PCR的产物
B.PCR的循环过程分为变性、复性和延伸三步
C.PCR技术利用DNA半保留复制的原理，可在短时间内大量扩增目的基因
D.一个目的基因用PCR扩增生成2n个目的基因的过程中需要2n+1个引物
26、下列关于发酵工程应用的叙述不正确的是( )
A.可以利用毛霉，将大豆中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸，然后经淋洗、调制成酱油产品
B.由谷氨酸棒状杆菌发酵可以得到谷氨酸，谷氨酸经过一系列处理就能制成味精，成为食品添加剂
C.乳酸菌可以用于泡菜的腌制，深受人们的喜爱
D.以大麦为主要原料经酵母菌发酵制成啤酒，我国是世界上啤酒的生产和消费大国
二、多选题
27、如图分别表示泡菜制作中乳酸菌、乳酸和亚硝酸盐含量的变化。下列叙述错误的是( )

A.据图1可知，泡菜制作过程中乳酸菌数量增长曲线为“S”形
B.图2中发酵初期乳酸产生量较少，可能与氧含量较高有关
C.据图3可知，发酵中期是取食泡菜的最佳时间
D.泡菜发酵过程中检测亚硝酸盐含量的目的是了解乳酸菌的生长状况
28、下列能达到微生物菌种分离目的的是( )
A.利用稀释涂布法接种土壤提取液，分离尿素分解菌
B.利用平板划线法接种土壤提取液，分离纤维素分解菌
C.利用刚果红培养基鉴定大肠杆菌
D.利用以尿素为唯一氮源的培养基筛选尿素分解菌
29、实时荧光RT-PCR可用于RNA病毒的核酸检测，其原理是：在PCR复性过程中探针和引物一起与模板结合，探针两侧分别带有荧光基因和抑制荧光发出的淬灭基团，新链延伸过程中，DNA聚合酶会破坏探针，导致荧光基团与淬灭基团分离而发出荧光。利用RT-PCR进行核酸检测的相关过程如图所示。下列说法正确的是( )

A.做RT-PCR之前，需要先根据cDNA的核苷酸序列合成引物和探针
B.RNA不能作为PCR扩增的模板，故需要将样本中的RNA逆转录为DNA后再进行扩增
C.若检测结果有强烈荧光信号发出，说明被检测者没有感染病毒
D.病毒的检测还可以检测病毒表面的物质或病毒引发产生的抗体，其原理都是抗原—抗体杂交
30、大肠杆菌经溶菌酶和洗涤剂处理后，拟核DNA就会缠绕在细胞壁碎片上，静置一段时间，质粒分布在上清液中，利用上述原理可初步获得质粒DNA。用三种限制酶处理提取的产物，电泳结果如图所示。下列关于质粒的粗提取和鉴定的叙述正确的是 ( )

A.提取DNA时可加入酒精，使溶于酒精的蛋白质等物质溶解
B.将提取的DNA溶于2mol/LNaCl溶液后；可用二苯胺试剂进行鉴定
C.电泳鉴定DNA利用了DNA在电场中会向着它所带电荷相反的电极移动的原理
D.根据电泳结果，质粒上一定没有限制酶Ⅰ和Ⅱ的切割位点，而有限制酶Ⅲ的切割位点
三、读图填空题
31、科学家发现，在微生物M（单细胞）产生的脂肪酶的作用下，从地沟油中提取的植物油与甲醇反应能够合成生物柴油。请分析并回答下列问题。
（1）在筛选产脂肪酶的微生物M时，应用_____培养基。
（2）培养基灭菌采用的最适方法是_____法。
（3）下图是采用纯化微生物M培养的两种接种方法接种后培养的效果图。过程一的接种方法是_____法，此方法_____（填“能”或“不能”）用来计数；过程二的接种方法是_____法，此方法计数的微生物M的数目_____（填“大于”“等于”或“小于”）实际活菌数。接种后应将培养皿_____。

32、下图是以成熟的紫色葡萄为原料生产果酒、果醋的流程图。请据图回答下列有关问题：

（1）酒精发酵所用酵母菌菌种一般不需要人为添加，其来源是__________________________。酒精发酵时酿酒酵母的最适生长温度约为________°C。
（2）酒精发酵装置都有充气口和排气口，其中排气口的作用是____________________。果汁发酵后是否有酒精产生，可以用______________溶液来检验。
（3）醋酸发酵中的醋酸菌的代谢类型是____________________，图中发酵产生醋酸的过程需要温度维持在_________℃。
（4）生产过程中所用酵母菌和乳酸菌在结构上的主要不同是________________________________。
33、基因工程重要环节是构建基因表达载体。图1为限制酶EcoRⅠ的识别序列和切割位点，图2表示DNA片段，图3表示目的基因及限制酶切点，图4表示质粒。请回答下列问题：


（1）若图2就是图1中的最左边显示的三个碱基对，则④⑤⑥⑦⑧⑨对应的碱基依次是________。限制酶EcoRⅠ切割外源DNA，切开的位置是图2中编号为______位置的________键。
（2）已知DNA复制子链的延伸方向是5′→3′，图3中的A、B、C、D在不同情况下可以作为引物，在PCR技术中，扩增此目的基因，应该选用________________两个作为引物。
（3）用图中质粒和目的基因构建重组质粒，应选用____________________两种限制酶切割，酶切后的载体和目的基因片段，通过______________酶作用后获得重组质粒。为了扩增重组质粒，需将其转入经____________处理过的_____________态的大肠杆菌中。
四、填空题
34、人的T细胞可以产生某种具有临床价值的蛋白质（Y），该蛋白质由一条多肽链组成。目前可以利用现代生物技术生产Y。回答下列问题。
（1）若要获得Y的基因，可从人的T细胞中提取___________作为模板，在____________催化下合成cDNA，再利用_______________技术在体外扩增获得大量Y的基因。
（2）将目的基因导入植物细胞常用的方法是农杆菌转化法。若将上述所得Y的基因插入农杆菌Ti质粒上的__________________中，得到含目的基因的重组Ti质粒，则可用农杆菌转化法将该基因导入某种植物的叶肉细胞中。若该叶肉细胞经培养、筛选等得到了能稳定表达Y的愈伤组织，则说明Y的基因已经________________________________________。
（3）天然的Y通常需要在低温条件下保存。假设将Y的第6位氨基酸甲改变为氨基酸乙可提高其热稳定性，若要根据蛋白质工程的原理对Y进行改造以提高其热稳定性，具体思路是__________________。
参考答案
1、答案：B
解析：A.乳酸菌是一种严格的厌氧菌，有氧气存在时，其发酵会受到抑制，因此利用乳酸菌制作酸奶的过程中，应一直处于密闭状态，否则会导致发酵失败，A错误；
B.家庭制作果酒、果醋与腐乳过程中所用的菌种均来源于自然环境，有多种微生物参与发酵过程，因此均不是纯种发酵，B正确；
C.果醋制作过程中，醋酸菌可将葡萄糖氧化分解为醋酸，随着醋酸的积累溶液的pH逐渐降低；果酒制作过程中，酵母菌无氧呼吸产生二氧化碳与酒精，二氧化碳溶于水形成碳酸，随着二氧化碳浓度的增加，溶液的pH逐渐降低，因此果酒、果醋制作过程中溶液的pH都是逐渐降低，C错误；
D.毛霉主要通过产生脂肪酶、蛋白酶参与腐乳发酵，D错误。故选B。
2、答案：C
解析：酵母菌进行无氧呼吸产生酒精，酿造葡萄酒时需要密闭环境，A错误；在有氧条件下可将乙醇氧化成醋酸的微生物是醋酸菌，B错误；发面时加入酵母菌，酵母菌在面团中进行呼吸作用产生二氧化碳，在蒸馒头时，二氧化碳受热膨胀，形成孔泡，C正确；泡菜的制作过程中进行发酵的是乳酸菌，腐乳的制作主要利用的是毛霉，D错误。
3、答案：D
解析：
4、答案：B
解析：
5、答案：C
解析：
6、答案：D
解析：实验用过的带菌培养基，需要用高压蒸汽灭菌法灭菌后才能倒掉，以免污染环境，A错误；利用平板划线法可以对细菌进行分离纯化，但是不能计数，应利用稀释涂布平板法对细菌进行分离纯化并计数，B错误；要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种无菌水作为对照实验，C错误；培养基中含有的蛋白胨、淀粉可分别为细菌培养提供氮源和碳源，蛋白胨也可以提供碳源，D正确。
7、答案：C
解析：
8、答案：B
解析：
9、答案：D
解析：
10、答案：D
解析：
11、答案：B
解析：
12、答案：C
解析：
13、答案：C
解析：A、根据以上分析可知，发酵工程产品可以是微生物本身，也可以是其代谢物，A正确；B、可以从自然界中筛选优良菌种，也可以通过人工诱变或基因工程选育新菌株，B正确；C、培养基、发酵设备必须经过严格的灭菌，菌种是经选育而获得的，灭菌会杀死菌种，C错误；D、环境条件如培养温度、pH改变，不仅会影响菌种的生长繁殖，而且会影响菌体代谢产物的形成，D正确。故选C。
14、答案：B
解析：
15、答案：D
解析：A、基因工程育种的原理是基因重组，A错误；B、有些不同的限制酶切割后，也可能会产生相同的黏性末端，B错误；C、质粒是存在于细菌和酵母菌等生物细胞中的一种环状DNA分子，不是细胞器，C错误；D、所有生物共用一套密码子是细菌细胞内的基因可在植物细胞内表达的原因，D正确。故选D。
16、答案：D
解析：A、如果用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因，目的基因两端将形成不同的黏性末端，同样用BglⅡ和Sau3AⅠ切割P1噬菌体载体也形成这两种相同的黏性末端，因此它们可构成重组DNA，故A正确；B、由于Sau3AⅠ的切割位点在EcoRⅠ的左侧，因此用EcoRⅠ和Sau3A​Ⅰ切割目的基因，目的基因两端将形成不同的黏性末端，同样用BglⅡ和Sau3AⅠ切割Pl噬菌体载体也形成这两种相同的黏性末端，因此它们可构成重组DNA，故B正确；C、P1噬菌体载体为环状DNA，其上只含有一个SmaⅠ的切点，因此用EcoRⅠ切割后，该环状DNA分子变为线性双链DNA分子，因每条链上含有一个游离的磷酸基团，因此切割后含有两个游离的磷酸基团，故C正确；D、从图甲看出，用EcoRⅠ切割目的基因后两端各有一切口，与图乙中EcoRⅠ切口对接时，可有两种可能，即可产生两种重组DNA，故D错误。
17、答案：D
解析：
18、答案：C
解析：A.目的基因DNA变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键，使双链DNA得以打开，A正确；
B.引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成的，B正确；
C.PCR技术是在较高温度条件下进行的，该过程需要热稳定DNA聚合酶，且PCR反应的产物是DNA，因此原料是四种游离的脱氧核苷酸，不是核糖核苷酸，C错误；
D.PCR技术是在较高温度条件下进行的，因此PCR与细胞内DNA复制相比所需要酶的最适温度较高PCR，D正确。
故选：C。
19、答案：C
解析：
20、答案：D
解析：本题结合电泳图谱考查基因工程中限制酶的相关知识，包括限制酶的作用特点、功能、作用对象等。不同的限制酶识别序列不同，A项正确；限制酶切割的产物可用于构建重组DNA，B项正确；泳道①显示四个条带，是SalⅠ处理后的酶切产物的电泳结果，泳道②显示三个条带，是XhoⅠ处理后的酶切产物的电泳结果，C项正确；限制酶的作用特点是识别特定DNA序列，并在DNA两条链特定部位切割产生黏性末端或平末端，D项错误。
21、答案：C
解析：
22、答案：C
解析：A、基因工程原则上只能生产自然界已存在的蛋白质，而蛋白质工程可以通过对基因改造实现对现有蛋白质改造，从而制造一种新的蛋白质，A正确；B、蛋白质工程是在基因工程基础上延伸出来的第二代基因工程，蛋白质工程不是对蛋白质分子的直接改造，而是通过修改基因或创造合成新基因来改变生物的遗传和表达形状，合成新的蛋白质，B正确；C、干扰素的成分是糖蛋白，不能自我复制，C错误；D、蛋白质工程的实质是改造基因，基因工程和蛋白质工程产生的变异都是可遗传的，D正确。故选：C。
23、答案：A
解析：猪胰岛素同人胰岛素只有一个氨基酸不同，只要替换掉这个氨基酸就可以了，制造一种全新的胰岛素非常困难，而且一种新的蛋白质会带来什么危害也是人们所担心的。C项没有用到蛋白质工程技术，本题选A。
24、答案：C
解析：A、猪是哺乳动物，哺乳动物的成熟红细胞中没有细胞核，不含DNA，因此用同样方法从等体积猪血和鸡血中提取的DNA量不是相近的，A错误；
B、丝状物为粗提取的DNA，将其加入2mol/L的NaCl溶液中溶解，再加入二苯胺，于沸水中加热5min会被染成蓝色，B错误；
C、PCR扩增的DNA片段在琼脂糖凝胶中迁移的速率与凝胶浓度、DNA分子大小等有关，C正确;
D、PCR扩增4次即DNA复制4次，共形成16个DNA，根据半保留复制，有2个子代DNA含有其中一种引物，14个子代DNA同时含有两种引物，因此同时含有两种引物的DNA占14/16=7/8，D错误。
故选C。
25、答案：D
解析：
26、答案：A
解析：
27、答案：ACD
解析：据图1可知泡菜制作中乳酸菌数量先上升后下降，不是“S”形增长，A错误；图2中发酵初期乳酸产生量较少，与氧气含量有关，初期氧气浓度较高，抑制乳酸菌发酵产生乳酸，B正确；据图3可知，发酵后期亚硝酸盐含量较少，是食用泡菜的最佳时间，C错误；泡菜发酵过程中检测亚硝酸盐含量的目的是了解取食泡菜的最佳时间，D错误。
28、答案：ABD
解析：
29、答案：ABD
解析：
30、答案：ABC
解析：A、DNA在冷酒精中溶解度很低，提取DNA时可加入酒精，是为了让DNA析出，蛋白质等物质溶解，A正确； B、将提取的DNA溶于2mol/LNaCl溶液后，可用二苯胺试剂在沸水条件进行鉴定，DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色，B正确； C、DNA带负电，电泳鉴定DNA利用了DNA在电场中会向着它所带电荷相反的电极移动的原理，C正确； D、因为质粒的本质是环状的DNA，限制酶I和Ⅱ处理后电泳只有一条条带，可能是该质粒上有一个切割位点，也可能没有切割位点，D错误。
故选：ABC。
31、答案：（1）选择
（2）高压蒸汽灭菌
（3）平板划线；不能；稀释涂布平板；小于；倒置
解析：（1）由分析可知，在筛选产脂肪酶的微生物M时，应用选择培养基。
（2）培养基灭菌采用的最适方法是高压蒸汽灭菌法。
（3）通过过程一获得的平板上的菌落图可知，选择的是平板划线法。该方法得到的菌落连在一起，无法区分菌落个数，因此不能用于进行计数。
根据过程二得到的平板上的菌落图可知，选择的是稀释涂布平板法。可能两个或多个细胞连在一起发育为一个菌落。因此该方法计数的微生物M的数目要小于实际活菌数。接种后应注意培养皿要倒置放置，防止水珠落下，污染培养基。
32、答案：（1）附着在葡萄皮上的野生型酵母菌；28
（2）便于排出酵母菌无氧发酵时产生的CO2；酸性重铬酸钾
（3）异养需氧型；30～35
（4）有无核膜包被的细胞核（或酵母菌有成形的细胞核，乳酸菌没有成形的细胞核）
解析：
33、答案：（1）AAGTTC；③；磷酸二酯键
（2）B和C
（3）PstⅠ、EcoRⅠ；DNA连接；Ca2+；感受
解析：
34、答案：（1）mRNA逆转录酶；PCR
（2）T-DNA整合到叶肉细胞染色体DNA上
（3）找到第6位氨基酸中的碱基所在的基因位置，参照密码子表，将第6位氨基酸甲的碱基替换为氨基酸乙的碱基
解析：