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2022-2023学年江苏省连云港市高级中学高二下学期3月月考生物试题含解析
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这是一份2022-2023学年江苏省连云港市高级中学高二下学期3月月考生物试题含解析，共31页。试卷主要包含了单项选择题，多项选择题，非选择题等内容，欢迎下载使用。
2022—2023 学年度第二学期检测考试
高二生物试题
一、单项选择题
1. 无菌技术包括以下几个方面的叙述，其中错误的是( )
A. 使用95%酒精对操作者的手进行消毒
B. 将培养器皿、接种用具和培养基等进行灭菌
C. 为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行
D. 实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围物品相接触
【答案】A
【解析】
【分析】
【详解】A、使用75%酒精对操作者的手进行消毒处理，A错误；
B、为保证不被杂菌污染，应将培养器皿、接种用具和培养基等进行灭菌，B正确；
C、酒精灯火焰附近可以形成一个无菌区，为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行，C正确；
D、周围物品可能会含有杂菌，为防止污染，实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围物品相接触，D正确。
故选A。
2. 下列关于微生物纯培养的叙述，正确的是 （ ）
A. 在实验室中，不可以在非实验区域进食和喝水
B. 消毒和灭菌的杀菌程度存在差异，消毒可以杀死物体内外所有的微生物
C. 微生物纯培养物就是不含有代谢废物的微生物培养物
D. 培养基中营养物质浓度越高，对微生物的生长越有利
【答案】A
【解析】
【分析】微生物实验中的无菌技术的主要内容：（1）对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒。（2）将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌。（3）为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行。（4）实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。
【详解】A、在实验室中可能有微生物污染，故不能在非实验区域进食和喝水，A正确；
B、消毒和灭菌的杀菌程度存在差异，灭菌可以杀死物体内外所有的微生物，B错误；
C、微生物的纯培养物是不含杂菌的微生物培养物，C错误；
D、培养基中的营养物质浓度过高会导致微生物不能从培养基中吸水，将出现失水过多而死亡的现象，对微生物的生长不利，D错误。
故选A。
3. 下图是连云港地区白萝卜泡菜加工流程图，相关叙述错误的是（ ）
A. 将白萝卜条烘干可以防止泡菜坛中水分过多影响发酵
B. 泡菜母水中白醋、食盐、姜、蒜等既能调味又能抑制杂菌生长
C. 白萝卜泡菜发酵过程中亚硝酸盐的含量逐渐减少
D. 泡菜入坛发酵时用水密封，隔绝空气，为乳酸菌提供无氧环境
【答案】C
【解析】
【分析】1、泡菜的制作原理：泡菜的制作离不开乳酸菌。在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。2、测定亚硝酸盐含量的原理：在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料。将显色反应后的样品与已知浓度的标准液进行目测对比，可以大致估算出亚硝酸盐的含量。
【详解】A、新鲜萝卜在高盐条件下会发生渗透失水，所以将白萝卜条烘干可以防止泡菜坛中水分过多影响发酵，A正确；
B、泡菜母水中白醋、小米椒、姜、蒜等香辛料既能调味又能抑制杂菌生长，B正确；
C、白萝卜泡菜发酵过程中亚硝酸盐的含量先增加后减少，C错误；
D、泡菜制作的原理是利用乳酸菌在无氧的条件下进行无氧呼吸产生乳酸，所以泡菜入坛发酵时用水密封，隔绝空气，为乳酸菌提供无氧环境，D正确。
故选C。
4. 传说李白儿子李伯禽在一次酿酒时发酵过头，直至第 21 天开缸时，发现酒液已变酸，但香气扑鼻，且酸甜可口，于是他便把“廿一日”加一“酉” 字，命名为“醋”。下列叙述错误的是（ ）
A. 酒发酵初期通气的目的是酵母菌有氧呼吸进行增殖
B. 酿酒反成醋可能是由于发酵装置密封不严造成的
C. 变酸甜的果酒表面有一层菌膜，最可能是酵母菌形成的
D. 酿醋过程中醋酸菌的碳源和能源，都是来自于果酒发酵产生的酒精
【答案】C
【解析】
【分析】醋酸菌是好氧细菌，当氧气、糖源都充足时能将糖分解成醋酸；当缺少糖时则将乙醇转化为乙醛，再将乙醛变为醋酸。醋酸菌可用于制作各种风味醋。多数醋酸菌的最适生长温度为30～35℃。制作果酒和果醋许多新鲜水果（如葡萄）的果皮表面附着有大量的不同种类的野生酵母菌。在这些酵母菌的作用下，水果可以发酵成果酒。在有氧的条件下，果酒经醋酸菌的作用还可以进一步发酵成果醋。
【详解】A、酒发酵初期通气的目的是促进酵母菌有氧呼吸，进行大量增殖，A正确；
B、酿酒反成醋可能是由于发酵装置密封不严，氧气进入装置，醋酸菌是好氧细菌，醋酸菌进行有氧呼吸产生醋酸，B正确；
C、变酸甜的果酒表面有一层菌膜，最可能是醋酸菌形成的，C错误；
D、在有氧的条件下，果酒经醋酸菌的作用还可以进一步发酵成果醋，酿醋过程中醋酸菌的碳源和能源，都是来自于果酒发酵产生的酒精，D正确。
故选C。
5. 下列动物细胞培养过程中属于原代培养的是（ ）
A. 把组织分散成单个细胞的过程
B. 从机体取得组织分散后立即进行培养的过程
C. 出现接触抑制现象后取下的细胞的培养过程
D. 哺乳动物细胞在培养基中的悬浮生长过程
【答案】B
【解析】
【分析】动物细胞培养的过程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。
【详解】A、用胰蛋白酶使组织分散成单个细胞的过程，可以是原代培养，也可以是传代培养，A错误；
B、原代培养是指从动物机体取得组织用胰蛋白酶分散成单个细胞后立即培养，直到细胞出现接触抑制为止，因此从机体取得细胞后立即进行培养过程是原代培养，B正确；
C、出现接触抑制现象后，接去下的细胞的培养过程是传代培养，C错误；
D、动物细胞具有贴壁生长的特点，D错误。
故选B。
6. 下图表示用草木樨状黄芪（2n=32）和木本霸王（2n=22）培育抗盐新品种过程，有关叙述正确的是
A. ①过程需在低渗溶液中用相应的酶处理
B. 原生质体A和原生质体B的细胞器种类完全相同
C. 最终培养出的杂种植物应具有双亲所有的性状
D. 经过④过程所得的愈伤组织细胞含有四个染色体组
【答案】D
【解析】
【分析】分析图解：图中①过程是用纤维素酶和果胶酶去除植物细胞壁，②过程是原生质体的融合过程，③过程是融合细胞再生出细胞壁，④过程是植物组织培养的脱分化形成愈伤组织。
【详解】A、①过程去除植物细胞壁后，原生质体失去细胞壁的保护，所以需要在等渗溶液中进行，以防止原生质体吸水涨破或失去活性，A错误；
B、叶肉细胞内有叶绿体，而胚轴细胞没有，原生质体A和原生质体B的细胞器种类不完全相同，B错误；
C、理论上，融合后得到的杂种细胞含两种植物的遗传物质，但因为基因之间的相互作用，导致部分基因并不能表达，所以一般都不能表现出双亲的所有性状，C错误；
D、该题中的两个植物细胞，各有两个染色体组，并且两个植物细胞体内的染色体组不相同，故两细胞融合形成的细胞内含四个染色体组，D正确。
故选D。
【点睛】
7. 花药离体培养是重要的育种手段。下图是某二倍体植物花药育种过程的示意图，下列叙述正确的是
A. 为了防止微生物污染，过程①所用的花药需在70%乙醇中浸泡30 min
B. 过程②的培养基中需添加较高浓度的细胞分裂素以利于根的分化
C. 过程③逐步分化的植株中可筛选获得纯合的二倍体
D. 过程④应将炼苗后的植株移栽到含有蔗糖和多种植物激素的基质上
【答案】C
【解析】
【详解】【分析】植物组织培养指的是在无菌培养的条件下，将离体的植物器官（根、茎、叶、花、果实等），组织（形成层、花药组织等），细胞（体细胞、生殖细胞等）以及原生质体等培养在人工配制的培养基上，并给予适当的培养条件，使其长成完整植株的过程。
【详解】植物组织培养过程应该在无菌的条件下进行，因此过程①所用的花药需在70%乙醇溶液中浸泡30秒，之后用无菌水清洗，次氯酸钠浸泡30分钟，再用无菌水清洗，以防止杂菌污染，A错误；过程②的培养基中需添加比值适中的细胞分裂素和生长素，以利于形成愈伤组织，B错误；过程③得到的植株是经过花药离体培养和秋水仙素处理的，因此可筛选获得纯合的二倍体，C正确；过程④应将炼苗后的植株移栽到消毒后的蛭石或珍珠岩中，而非培养基中，D错误。
【点睛】解答本题的关键是掌握植物组织培养的详细过程，明确脱分化、再分化过程需要满足的条件，尤其是对于不同激素的比例要求。
8. 为探究矮牵牛原生质体的培养条件和植株再生能力，某研究小组的实验过程如下图。下列叙述正确的是
A. 过程①获得的原生质体需悬浮在30%蔗糖溶液中
B. 过程②需提高生长素的比例以促进芽的分化
C. 过程③需用秋水仙素处理诱导细胞壁再生
D. 原生质体虽无细胞壁但仍保持细胞的全能性
【答案】D
【解析】
【分析】由图可知，①表示用纤维素酶和果胶酶处理得到原生质体的过程；②③均表示再分化过程。
【详解】原生质体在30%的蔗糖溶液中会失水皱缩，A错误；②诱导芽分化时，需要提高细胞分裂素的比例，B错误；③可以表示诱导根的分化形成幼苗，此时细胞壁已经形成，C错误；原生质体无细胞壁，但由于含有一整套的遗传物质，故具有全能性，D正确。故选D。
【点睛】植物组织培养时，生长素与细胞分裂素用量的比例影响植物细胞的发育方向：生长素与细胞分裂素比例适中时，有利于愈伤组织的形成；生长素/细胞分裂素比例较高时，利于根的分化；生长素/细胞分裂素比例较低时，利于芽的分化。
9. 下图表示“试管牛”、“克隆牛”和“转基因牛”的培育过程，有关说法合理的是（ ）
A. 三种牛的培育过程都经过了受精作用
B. 三种牛培育过程都体现了细胞核的全能性
C. 三种牛培育过程都用到了胚胎移植技术
D. 三种牛体细胞中的遗传信息完全相同
【答案】C
【解析】
【分析】克隆动物和试管动物的比较：
试管动物
克隆动物
生殖方式
有性生殖
无性生殖
技术手段
体外受精、胚胎移植
核移植技术、胚胎移植
遗传规律
遵循
不遵循
【详解】A、克隆牛的培育过程没有经过受精作用，A错误；B、克隆牛的培育体现了细胞核的全能性，但试管牛和转基因牛的培育体现的是细胞（受精卵）的全能性，B错误；
C、三种牛培育过程都用到了胚胎移植技术，C正确；
D、三种牛体细胞中的遗传信息都存在差异，转基因牛与试管牛相比，导入了外源基因，试管牛与克隆牛的细胞质基因不同，D错误。
故选C。
10. 新型冠状病毒可通过表面的棘突蛋白（S蛋白）与人呼吸道黏膜上皮细胞的ACE2受体结合，侵入人体，引起肺炎。制备抗s蛋白的单克隆抗体可阻断病毒的粘附或入侵，相关叙述正确的是（ ）
A. 优先选择灭活的新冠病毒免疫小鼠以激活小鼠的免疫细胞
B. 用灭活的仙台病毒诱导已激活的B细胞与骨髓瘤细胞融合
C. 经过第一次筛选获得能产生抗S蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞
D. 经体外培养得到的单克隆抗体可以与ACE2受体结合阻断病毒的入侵
【答案】B
【解析】
【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。
【详解】A、实验目的是制备抗S蛋白的单克隆抗体，所以优先选择S蛋白免疫小鼠以激活小鼠的免疫细胞，A错误；
B、诱导动物细胞融合可以用灭活的仙台病毒，B正确；
C、至少经过两次筛选才能获得产生抗S蛋白的单克隆抗体的杂交瘤细胞，C错误；
D、经体外培养得到的单克隆抗体可以与S蛋白结合阻断病毒的入侵，D错误。
故选B。
【点睛】
11. 下列关于植物细胞工程应用的叙述，错误的是（ ）
A. 植物细胞的全能性是植物组织培养的理论基础
B. 植物组织培养时，培养基中的蔗糖可作为碳源并调节渗透压
C. 选择一定大小的植物茎尖进行组织培养可获得脱毒苗
D. 植物组织培养技术不能用于转基因植物的培育
【答案】D
【解析】
【分析】植物组织培养技术：1、过程：离体的植物组织，器官或细胞（外植体）→愈伤组织→胚状体→植株（新植体）。2、原理：植物细胞的全能性。3、条件：①细胞离体和适宜的外界条件（如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等）；②一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分裂素）。4、植物细胞工程技术的应用：植物繁殖的新途径（包括微型繁殖，作物脱毒、人工种子等）、作物新品种的培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产。
【详解】A、植物组织培养的理论基础是植物细胞的全能性，A正确；
B、植物组织培养时，培养基中的蔗糖可作为碳源并且能调节渗透压，B正确；
C、茎尖几乎无毒，因此可选择一定大小的植物茎尖进行组织培养可获得脱毒苗，C正确；
D、将转基因植物细胞培育成转基因植株需要采用植物组织培养技术，D错误。
故选D。
12. 下列有关哺乳动物早期胚胎发育的叙述中，错误的是（ ）
A. 胚胎干细胞是一类未分化的细胞，可以从早期胚胎中分离获得
B. 桑椹胚的细胞一般都具有全能性，囊胚的细胞逐渐分化
C. 在桑椹胚阶段，胚胎的内部开始出现含有液体的腔
D. 受精卵早期分裂时，胚胎中细胞数目不断增加，但胚胎的总体积并不增加
【答案】C
【解析】
【分析】胚胎发育过程：（1）卵裂期：细胞进行有丝分裂，数量增加，胚胎总体积不增加；
（2）桑椹胚：32个细胞左右的胚胎[之前所有细胞都能发育成完整胚胎的潜能属全能细胞]；
（3）囊胚：细胞开始分化，其中个体较大的细胞叫内细胞团将来发育成胎儿的各种组织；而滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘；胚胎内部逐渐出现囊胚腔；
（4）原肠胚：内细胞团表层形成外胚层，下方细胞形成内胚层，由内胚层包围的囊腔叫原肠腔。
详解】A、胚胎干细胞未分化，可从早期胚胎中获取，A正确；
B、桑葚胚的细胞一般都具有全能性，囊胚的细胞分为为内细胞团和滋养层，所以开始出现分化，B正确；
C、在囊胚阶段，胚胎的内部开始出现含有液体的腔，C错误；
D、早期卵裂时，胚胎细胞数目不断增加，但总体积基本不变，D正确。
故选C。
13. 我国小麦育种专家李振声将长穗偃麦草的抗病、高产等基因转移到普通小麦中，培育成了小麦二体异附加系（流程如下图所示）。普通小麦6n＝42，记为42W；长穗麦草2n＝14，记为14E。下列叙述错误的是（ ）
A. 甲为异源八倍体
B. 丙染色体组成是42W＋14E
C. 丁自交后代中植株戊约占1/4
D. 育种中发生了基因重组和染色体变异
【答案】B
【解析】
【分析】种育种方法的比较如下表：
杂交育种
诱变育种
单倍体育种
多倍体育种
方法
杂交→自交→选优
辐射诱变、激光诱变、化学药剂处理
花药离体培养、秋水仙素诱导加倍
秋水仙素处理萌发的种子或幼苗
原理
基因重组
基因突变
染色体变异
染色体变异
【详解】A、普通小麦与长穗偃麦草杂交，F1为异源四倍体，则甲为异源八倍体，A正确；B、乙中来自燕麦草的染色体组是一个，因此长穗偃麦草的染色体不能联会，产生的配子的染色体组成是21W+0~7E，则丙的染色体组成是42W+0~7E，B错误；
C、丁体细胞中含有一条长穗偃麦草染色体，自交后代中长穗偃麦草染色体的情况是2条：1条：0条=1：2：1，因此含有两条长穗偃麦草染色体的植株戊占1/4，C正确；
D、图中杂交过程均发生了基因重组；图中①过程可用低温诱导的方法导致染色体数目加倍，发生了染色体变异，D正确。
故选B。
14. 下图为利用纯合高秆（D）抗病（E）小麦和纯合矮秆（d）染病（e）小麦快速培育纯合矮秆抗病小麦（ddEE）的示意图，下列有关叙述不正确的是（ ）
A. 图中进行①过程的目的是让控制不同优良性状的基因组合到一起
B. ②过程中发生了非同源染色体的自由组合
C. 实施③过程依据的主要生物学原理是细胞分化
D. ④过程的实施中通常需要用一定浓度的秋水仙素处理
【答案】C
【解析】
【分析】据图可知，①过程为具有相对性状的亲本杂交，其主要目的是让控制不同优良性状的基因组合到一起；②过程为减数分裂产生配子的过程，发生了非同源染色体的自由组合；③过程为花药离体培养过程，依据的主要生物学原理是植物细胞的全能性；实施④过程通常用一定浓度的秋水仙素使染色体数目加倍。
【详解】A、图中①表示杂交过程，主要目的是让控制不同优良性状的基因组合到一起，A正确；
B、②是减数分裂过程，由于非同源染色体的自由组合，形成了四种类型的配子，B正确；
C、③是花药离体培养，利用的原理是植物细胞的全能性，C错误；
D、④过程可用一定浓度的秋水仙素或者低温诱导使染色体数目加倍，D正确。
故选C。
15. 哺乳动物体外受精的过程是（ ）
①卵母细胞的采集 ②精子的采集 ③卵母细胞的成熟培养 ④精子的 获能处理 ⑤精子与成熟的卵子在适当的培养液中共同培养 ⑥体外受精 ⑦受精卵培养
A. B.
C. D.
【答案】B
【解析】
【分析】哺乳动物的体外受精技术主要包括卵母细胞的采集、精子的获取和受精等步骤。采集到的卵母细胞和精子，要分别在体外进行成熟培养和获能处理，然后才能用于体外受精。一般情况下，可以将获能的精子和培养成熟的卵子置于适当的培养液中共同培养一段时间，来促使它们完成受精。
【详解】哺乳动物的体外受精技术主要包括卵母细胞的采集、精子的获取和受精等步骤。采集到的卵母细胞和精子，要分别在体外进行成熟培养和获能处理，然后才能用于体外受精。一般情况下，可以将获能的精子和培养成熟的卵子置于适当的培养液中共同培养一段时间，来促使它们完成受精，接着进行受精卵培养，因此，哺乳动物体外受精的过程是 。
故选B。
16. 下列有关受精作用的叙述错误的是（ ）
A. 受精卵中全部的遗传物质一半来自父方，一半来自母方
B. 受精时，精子和卵细胞的染色体会合在一起
C. 受精卵中的染色体一半来自父方，一半来自母方
D. 受精卵中的染色体数与本物种体细胞的染色体数相同
【答案】A
【解析】
【分析】
受精作用是指精子和卵细胞相互识别、融合成为受精卵的过程。精子的头部进入卵细胞，尾部留在外面，不久精子的细胞核就和卵细胞的细胞核融合，使受精卵中染色体的数目又恢复到体细胞的数目，其中有一半来自精子有一半来自卵细胞。据此答题。
【详解】A、受精卵细胞核中的遗传物质一半来自于父方，一半来自于母方，而细胞质中的遗传物质全部来自于母方，A错误；
B、受精时，精子和卵细胞的细胞核会融合在一起，双方染色体会合在一起，B正确；
C、受精卵中的染色体一半来自精子，一半来自于卵细胞，C正确；
D、精子和卵细胞中染色体数都发生减半，而结合形成受精卵后染色体又恢复为原来亲本的染色体数，即与本物种体细胞的染色体数相同，D正确。
故选A。
17. 下列关于哺乳动物胚胎发育的叙述，错误的是（ ）
A. 胚胎发育过程有细胞分化，细胞分化是基因选择性表达的结果
B. 胚胎发育至原肠胚时期开始细胞分化，分化程度最高
C. 三个胚层细胞与滋养层细胞相比，DNA 相同，mRNA 不完全相同
D. 原肠胚的三胚层可发育为各种器官的原基
【答案】B
【解析】
【分析】胚胎发育过程：（1）卵裂期：细胞进行有丝分裂，数量增加，胚胎总体积不增加；（2）桑葚胚：32个细胞左右的胚胎[之前所有细胞都能发育成完整胚胎的潜能属全能细胞]；（3）囊胚：细胞开始分化，其中个体较大的细胞叫内细胞团将来发育成胎儿的各种组织；而滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘；胚胎内部逐渐出现囊胚腔[注：囊胚的扩大会导致透明带的破裂，胚胎伸展出来，这一过程叫孵化]；（4）原肠胚：内细胞团表层形成外胚层，下方细胞形成内胚层，由内胚层包围的囊腔叫原肠腔。
【详解】A、细胞分化的实质是基因的选择性表达，细胞分化贯穿于生命的始终，所以胚胎发育过程中也存在细胞分化，A正确；
B、细胞分化开始于囊胚时期，B错误；
C、细胞分化是基因的选择性表达，所以三个胚层细胞与滋养层细胞相比，DNA 相同，mRNA 不完全相同 ，C正确；
D、原肠胚的三胚层逐渐分化形成各种器官原基，D正确。
故选B。
18. 下列有关限制性内切核酸酶的叙述，正确的是（ ）
A. 用限制性内切核酸酶切割一个DNA分子中部，获得一个目的基因时，被水解的磷酸二酯键有2个
B. 用限制性内切核酸酶识别序列越短，则该序列在DNA中出现的概率就越大
C. 和序列被限制性内切核酸酶切出的黏性末端可用DNA连接酶连接
D. 只有用相同的限制性内切核酸酶处理含目的基因的片段和质粒，才能形成重组质粒
【答案】B
【解析】
【分析】限制酶的来源、作用及其结果：
（1）来源：主要从原核生物中分离纯化出来。
（2）作用（特异性）：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。
（3）结果：形成黏性末端或平末端；特别注意：用限制酶切割DNA时，每切开一个切口需要水解两个磷酸二酯键。
【详解】A、用限制性内切核酸酶切割一个DNA分子中部，获得一个目的基因时，需要切割目的基因的两侧，又因DNA为双链结构，因此要断裂4个磷酸二酯键，即被水解的磷酸二酯键有4个，A错误；
B、限制性内切核酸酶识别序列越短，则该序列在DNA中出现的概率就越大，B正确；
C、—CATC↓—和—G↓GATCC—序列被限制性内切核酸酶切出的黏性末端不同，分别为—CATG和—GTAG，因此不能用DNA连接酶连接，C错误；
D、用不同的限制性内切核酸酶处理含目的基因的DNA片段和质粒，若产生的黏性末端相同，则也能形成重组质粒，D错误。
故选B。
19. 下列有关 PCR 技术的说法，错误的是（ ）
A. PCR 是一项在生物体外复制特定的 DNA 片段的核酸合成技术
B. PCR 技术的原理是 DNA 分子半保留复制
C. 退火过程中引物与模板链的结合遵循碱基互补配对原则
D. PCR 过程中只需要模板 DNA、两种引物分子、4 种脱氧核苷三磷酸原料
【答案】C
【解析】
【分析】PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术，所利用的原理为DNA分子的复制。PCR技术的过程：①高温变性：DNA解旋过程；②低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链。
【详解】A、根据PCR技术的原理与定义可知PCR是一项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术，A正确；
B、PCR技术的原理是DNA分子半保留复制，B正确；
C、复性过程中引物与模板链的结合遵循碱基互补配对原则，C错误；
D、PCR 过程中只需要模板 DNA、两种引物分子、4 种脱氧核苷三磷酸原料，高温可以使DNA分子解旋，所以不需要使用解旋酶，D正确
故选C。
20. DNA连接酶是重组DNA技术中常用的一种工具酶。下列相关叙述，正确的是（ ）
A. 能连接DNA分子双链碱基对之间的氢键
B. 能将单个脱氧核苷酸加到DNA片段的末端，形成磷酸二酯键
C. 能连接用同种限制酶切开的两条DNA片段，重新形成磷酸二酯键
D. 只能连接双链DNA片段互补的黏性末端，不能连接双链DNA片段的平末端
【答案】C
【解析】
【分析】DNA连接酶：（1）根据酶的来源不同分为两类：E．coliDNA连接酶、T4DNA连接酶。这二者都能连接黏性末端，此外T4DNA连接酶还可以连接平末端，但连接平末端时的效率比较低。（2）DNA连接酶连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键。（3）DNA连接酶和DNA聚合酶的区别：①DNA连接酶是在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键，而DNA聚合酶只能将单个脱氧核苷酸加到已有的核苷酸片段上，形成磷酸二酯键；②DNA连接酶是同时连接双链的切口，而DNA聚合酶只是在单链上将一个个脱氧核苷酸连接起来；③DNA连接酶不需要模板，而DNA聚合酶需要模板。
【详解】A、DNA连接酶连接的磷酸二酯键，A错误；
B、DNA聚合酶能将单个脱氧核苷酸加到DNA片段的末端，形成磷酸二酯键，B错误；
C、能连接用同种限制酶切开的两条DNA片段，重新形成磷酸二酯键，C正确；
D、有些DNA连接酶既能连接双链DNA片段互补的黏性末端，又能连接双链DNA片段的平末端，D错误。
故选C。
21. 某线性DNA分子含有5000个碱基对（bp），先用限制酶a切割，再把得到的产物用限制酶b切割，得到的DNA片段大小如表所示。限制酶a、b的识别序列和切割位点如图所示。下列有关说法正确的是（ ）
酶a切割产物长度（bp）
酶b再次切割产物长度（bp）
2100；1400；1000；500
1900；200；800；600；1000；500
A. 酶a与酶b切断的化学键不相同
B. 酶a与酶b切出的黏性末端不能相互连接
C. 该DNA分子中酶a与酶b的识别序列分别有3个和2个
D. 若酶a完全切割与该DNA序列相同的质粒，得到的切割产物有4种
【答案】C
【解析】
【分析】由图可知，酶a、b的识别序列不同，但产生的黏性末端相同，均为GATC，由酶切产物可知，酶a单独切割后会形成4个片段，说明含有3个酶a的酶切位点；酶b再次酶切后，又新形成4种片段，说明有2个酶b的酶切位点。
【详解】A、酶a与酶b切断的化学键均为磷酸二酯键，A错误；
B、a酶与b酶切出的黏性末端相同，用DNA连接酶可以将它们连接起来，B错误；
C、由酶切产物可知，该DNA分子中，酶a与酶b的识别序列分别有3个和2个，C正确；
D、用酶a切割与该DNA序列相同的质粒（环状的），也可得到3种大小不同的切割产物，D错误。
故选C。
二、多项选择题
22. 为纯化菌种，在培养基上划线接种分解尿素的细菌，培养结果如图所示。下列叙述错误的是（ ）
A. 为保证无菌操作，接种针、接种环使用前都必须灭菌
B. 倒平板后需要间歇晃动培养皿，以保证培养基表面平整
C. 图中Ⅰ、Ⅱ区的细菌数量均太多，应从Ⅲ区挑选单菌落
D. 该实验结果因单菌落太多，不能达到菌种纯化的目的
【答案】BD
【解析】
【分析】微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在划线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
【详解】A、为保证无菌操作，接种针、接种环使用前都必须经过灼烧灭菌，A正确；
B、倒平板时需左三圈，右三圈的轻轻晃动，以保证表面平整，B错误；
C、图中Ⅰ、Ⅱ区的细菌数量均太多，且菌落连成一片，应从Ⅲ区挑取单菌落，C正确；
D、该实验的Ⅲ区已经出现由单个细菌繁殖而形成的菌落，因此已经达到菌种纯化的目的，D错误。
故选BD。
23. 下列关于植物组织培养过程的叙述，正确的是（ ）
A. 愈伤组织是外植体再分化形成的
B. 愈伤组织是一种不定形的薄壁组织团块
C. 诱导生芽或生根时，需要生长素与细胞分裂素的比例合适
D. 再生植株移栽前，需要打开瓶盖在培养箱中“锻炼”数日
【答案】BCD
【解析】
【分析】1、植物组织培养的条件：①细胞离体和适宜的外界条件（如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等）。②一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分裂素）。2、在植物的生长发育和适应环境变化的过程中，各种植物激素并不是孤立地起作用，而是多种激素相互作用共同调节．在植物组织培养时，通过调节生长素和细胞分裂素的比值能影响愈伤组织分化出根或芽．生长素用量比细胞分裂素用量，比值高时，有利于根的分化、抑制芽的形成；比值低时，有利于芽的分化、抑制根的形成．比值适中时，促进愈伤组织的生长。
【详解】A、外植体经过脱分化可以形成愈伤组织，经过再分化形成胚状体，A错误；
B、愈伤组织是一团排列疏松而无规则、高度液泡化、呈无定形状态的、具有分生能力的薄壁细胞，B正确；
C、生长素和细胞分裂素的比值大时有利于根的形成，比值小时，则促进芽的形成，C正确；
D、再生植株移栽前，需要打开瓶盖在培养箱中“锻炼”数日，以适应环境，D正确。
故选BCD。
24. 2017年批准了首例使用细胞核移植技术培育“三亲婴儿”的申请，其培育过程的技术流程如下图，相关叙述错误的是（ ）
A. 该培育过程涉及动物细胞培养、细胞核移植、体外受精等技术
B. 三亲婴儿的染色体全部来自母亲提供的细胞核
C. 卵母细胞捐献者的红绿色盲基因能够传递给“三亲婴儿”
D. 将受精卵直接植入母体的子宫可提高胚胎成活率
【答案】BCD
【解析】
【分析】分析题图：图示表示三亲婴儿的培育过程，由图可知，三亲婴儿的培育采用了核移植技术、早期胚胎培养技术和胚胎移植技术等。
【详解】A、由图可知，该培育过程涉及动物细胞培养、细胞核移植、体外受精等技术，A正确；
B、三亲婴儿的染色体来自两个亲本，即父亲提供了精子和母亲提供卵细胞，B错误；
C、捐献者携带的红绿色盲基因位于其细胞核内，而捐献者给三亲婴儿提供的是卵细胞的细胞质，则捐献者携带的红绿色盲基因不能遗传给三亲婴儿，C错误；
D、受精卵需要在体外培养形成早期胚胎后才可移植入母体的子宫，D错误。
故选BCD。
25. 下列有关基因工程中载体的说法，不正确的是（ ）
A. 在进行基因工程操作中，被用作载体的质粒都是天然质粒
B. 所有的质粒都可以作为基因工程中的载体
C. 质粒是一种独立于细菌染色体外的链状DNA分子
D. 作为载体的质粒DNA分子上应有对重组DNA进行鉴定和选择的标记基因
【答案】ABC
【解析】
【分析】1、常用的运载体：质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒；
2、质粒是一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外并具有自我复制能力的双链环状DNA分子；
3、作为运载体必须具备的条件：①要具有限制酶的切割位点； ②要有标记基因（如抗性基因），以便于重组后重组子的筛选③能在宿主细胞中稳定存在并复制；④是安全的，对受体细胞无害，而且要易从供体细胞分离出来；
4、天然的质粒不能直接作为载体，基因工程中用到的质粒都是在天然质粒的基础上进行过人工改造的。
【详解】A、天然的质粒不能直接作为载体，基因工程中用到的质粒都是在天然质粒的基础上进行过人工改造的，A错误；
B、作为基因工程的运载体，必须具备一定的条件，而自然界中的质粒不一定具备相应的条件，因此不一定都可以作为基因工程中的运载体，B错误；
C、质粒是一种独立于细菌拟核外的环状DNA分子，C错误；
D、作为载体的质粒DNA分子上应有标记基因，便于对重组DNA进行鉴定和选择，D正确。
故选ABC。
26. 下列关于限制酶和 DNA 连接酶的理解，错误的是（ ）
A. 限制酶能在特定部位的两个核苷酸之间切断磷酸二酯键
B. DNA 连接酶可以恢复 DNA 分子中的氢键，将两条 DNA 片段的黏性末端之间 的缝隙连接起来
C. 在基因工程操作中，可以用 DNA 聚合酶代替 DNA 连接酶
D. 限制酶广泛存在于动植物体内，微生物内很少分布
【答案】BCD
【解析】
【分析】限制酶能够识别双链DNA分子的特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的磷酸二酯键断开。
DNA连接酶是链接两个DNA的片段，形成磷酸二酯键。
【详解】A、限制酶能够识别双链DNA分子的特定核苷酸序列，能在特定部位的两个核苷酸之间切断磷酸二酯键，A正确；
B、DNA 连接酶可以恢复 DNA 分子中的磷酸二酯键，将两条 DNA 片段的黏性末端之间的缝隙连接起来，B错误；
C、DNA聚合酶将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键，DNA连接酶是链接两个DNA的片段，形成磷酸二酯键。在基因工程操作中，不可以用 DNA 聚合酶代替 DNA 连接酶，C错误；
D、限制酶主要来源于微生物，D错误。
故选BCD。
三、非选择题
27. 牛奶中富含蛋白质，长期饮用有助于增强体质，但牛奶同时也是多种疾病的传播载体。国家标准是每毫升牛奶中细菌数小于30000个。下图是牛奶消毒及细菌检测实验的简要操作流程。回答下列问题：
（1）牛奶的消毒有巴氏消毒法、高温瞬时消毒法及煮沸消毒法等，图中步骤①采用的消毒方法是______，该消毒方法的优点是既达到消毒目的又减少__________。
（2）进行步骤③操作的培养基中，牛肉膏、蛋白胨可以为微生物提供________________，该步骤应选用的接种工具是__________，如果接种后经培养的多个平板培养基上有一个培养基未出现菌落，从操作层面分析，最可能的原因是__________。
（3）将接种后的培养基和作为对照的_______同时放入37 ℃恒温培养箱中，培养36小时。为避免培养基污染，需将培养皿呈________状态放置。
（4）培养36小时后可观察到菌落，单菌落的含义是________________。取出后统计各平板的菌落数，结果如下表所示。
牛奶稀释倍数
102
103
104
平板1菌落数
87
10
1
平板2菌落数
83
12
1
平板3菌落数
85
10
0
由实验结果可推知，应该选择其中稀释倍数为________________的平板进行计数；经过此种方法消毒后的，每毫升牛奶中细菌数大约________________个，故此次消毒后的牛奶________（填“适合”或“不适合”）饮用。
【答案】（1） ①. 巴氏消毒法 ②. 营养物质的损失
（2） ①. 碳源、氮源、维生素等 ②. 涂布器 ③. 涂布器没有冷却， 温度过高，杀死了细菌
（3） ①. 未接种的培养基（等量无菌水的培养基） ②. 倒置
（4） ①. 由一个菌体细胞繁殖而成的肉眼可见的子细胞群体 ②. 102 ③. 85000 ④. 不适合
【解析】
【分析】分析图解：图中①表示用巴士消毒法对牛奶进行消毒，步骤②表示对牛奶进行系列稀释，步骤③表示利用稀释涂布平板法对牛奶中细菌进行培养计数。
【小问1详解】
图中步骤①利用80℃、15min对牛奶进行巴氏消毒；巴氏消毒优点是在达到消毒目的的同时，营养物质损失较少，保存了牛奶的营养与天然风味。
【小问2详解】
进行步骤③操作的培养基中的蛋白胨可以为微生物提供碳源、氮源、维生素。步骤③应选用的接种工具是涂布器；如果接种后经培养的多个平板培养基上有一个培养基未出现菌落，从操作技术分析，最可能的原因是涂布器没有冷却，温度过高，杀死了细菌（或微生物）。
【小问3详解】
将接种后的培养基和作为对照的未接种的培养基（等量无菌水的培养基）同时放入37℃恒温培养箱中，培养36小时。在培养箱内平板要倒置，目的是：防止水分过快蒸发，导致培养基干裂；防止皿盖上的冷凝水滴落，造成培养基污染。
【小问4详解】
单菌落含义是由一个菌体细胞繁殖而成的肉眼可见的子细胞群体；平板培养后取出统计各平板的菌落数，选择菌落数在30～300的进行记数，求其平均值，取出后统计各平板的菌落数，因此根据表格数据，应该选择其中稀释倍数为102的平板进行计数，经过消毒后的牛奶中，细菌数大约是=（87+83+85）÷3×102÷0.1=85000个/mL，不符合国家标准，国家标准是每毫升牛奶中细菌数小于30000个，所以不适合饮用。
【点睛】本题考查了微生物培养过程中的无菌技术、分离微生物的方法，主要考查学生设计和完善实验步骤，分析实验结果获取结论的能力和提出问题进行进一步探究的能力，利用所学的微生物知识解决生活问题的能力。
28. 工业上所说的发酵是指微生物在有氧或无氧条件下，通过分解与合成代谢将某些原料物质转化为特定产品的过程。利用微生物发酵制作酱油在我国具有悠久的历史。某企业通过发酵制作酱油的流程示意图如下。
回答下列问题：
（1）米曲霉发酵过程的主要目的是使米曲霉充分生长繁殖，大量分泌制作酱油过程所需的酶类，这些酶中的____________、____________能分别将发酵池中的蛋白质和脂肪分解成易于吸收、风味独特的成分，如将蛋白质分解为小分子的肽和____________。
（2）在发酵池发酵阶段添加的乳酸菌属于____________（填“自养厌氧” “异养厌氧”或“异养好氧”），酵母菌是一种单细胞真菌，能以___________作为主要营养物质和能量来源。
（3）为了在发酵池中添加性状优良的菌种，科技人员进行了下列PCR部分实验操作。请完成表格相关内容：
参与成分
相关操作
缓冲液
PCR反应缓冲液中一般要添加①____
模板、引物、原料和酶
需提供DNA模板、2种引物、4种脱氧核苷酸和②____
PCR仪
能够自动调节③_____的仪器
反应过程
每次循环一般分为④_____三步
循环次数
一次PCR一般要经历⑤________循环
产物鉴定
常采用⑥___来鉴定PCR的产物
【答案】（1） ①. 蛋白酶 ②. 脂肪酶 ③. 氨基酸
（2） ①. 异养厌氧 ②. （多种）糖类
（3） ①. Mg2+ ②. 耐高温的DNA 聚合酶 ③. 温度 ④. 变性、复性和延伸 ⑤. 30 次 ⑥. 琼脂糖凝胶电泳
【解析】
【分析】1、由题图信息分析可知，酿造酱油主要利用的是米曲霉，能够产生蛋白酶和脂肪酶，将蛋白质和脂肪分别水解成小分子的肽和氨基酸、甘油和脂肪酸。
2、培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质；根据物理性质分为固体培养基和液体培养基，培养基中一般含有水、碳源、氮源和无机盐，其中碳源和氮源常采用蛋白胨和牛肉膏，因为它们来源于动物原料，含有糖、维生素和有机氮等营养物质。在提供上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质和氧气的要求。
3、PCR原理：在高温作用下，打开DNA双链，每条DNA单链作为母链，以4种游离脱氧核苷酸为原料，合成子链，在引物作用下，DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链，即DNA的合成方向是从子链的5'端自3'端延伸的。实际上就是在体外模拟细胞内DNA的复制过程。DNA的复制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能从3′端延伸DNA链。
【小问1详解】
米曲霉发酵过程产生的蛋白酶和脂肪酶能分别将发酵池中的蛋白质和脂肪分解成易于吸收、风味独特的成分，如将蛋白质分解为小分子肽和氨基酸。
【小问2详解】
乳酸菌属于异养厌氧型微生物，酵母菌是一种异养型真菌，以多种糖类为主要营养物质和能量来源。
【小问3详解】
Mg2+可以促进Taq DNA聚合酶活性，故利用PCR技术扩增产物时在PCR反应缓冲液中一般会添加Mg2+。PCR扩增过程中所需要的酶为耐高温的DNA 聚合酶。现在使用的PCR仪实质上也是一台能自动调控温度的仪器。PCR 一般要经历三十多次循环，每次循环可以分为变性、复性和延伸三步。琼脂糖凝胶电泳是以琼脂糖为介质，对不同大小的DNA或RNA实现分离的一种电泳方法，常用来鉴定PCR的产物。
【点睛】本题考查传统发酵技术和PCR的相关知识，意在考查考生把握知识的要点，加强知识间内在联系的能力。
29. 细胞工程在药物生产和育种等领域应用十分广泛。阅读下列材料，回答下列问题。
材料一：人绒毛膜促性腺激素（HCG）是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白。如图是制备抗HCG单克隆抗体流程示意图。
材料二：西湖龙井含有的茶碱是植物细胞的代谢产物，具有提神、抗衰老功效，可利用植物组织培养技术来实现茶碱的工业化生产。
（1）免疫处理的小鼠产生相应的B淋巴细胞群能合成并分泌___________（填“一种”或“多种”）抗体。步骤③需对选择培养的杂交瘤细胞进行___________及抗体检测，该过程一般在多孔细胞培养板上进行：先将细胞悬浮液稀释到7～10个细胞/mL，再在每个培养孔中滴入0．1 mL细胞稀释液，其目的是___________。
（2）单克隆抗体最广泛的用途是用作体外诊断试剂，如科学家利用人绒毛膜促性腺激素的单克隆抗体，制作出了早孕试纸，该试纸可以利用尿液诊断早孕的理由是_______________。鼠源性单克隆抗体可应用于肿瘤的临床免疫治疗，在注射前需要进行人源化改造，除抗原结合区域外，其他部分都替换为人抗体区段，目的是降低___________。
（3）若利用植物组织培养技术，可将龙井茶叶细胞培养到___________阶段，然后从___________（填细胞器）中提取茶碱；若要获得神奇的人工种子，可将龙井茶叶细胞培养到___________，再和具有养分的人工胚乳一起包埋在具有保护功能的人工种皮中；由其培育成的植株生殖方式为___________。
（4）与常规育种相比，植物组织培养技术产生的植株特点有___________。
【答案】（1） ①. 多种 ②. 克隆化培养 ③. 使每个孔内不多于一个细胞，达到单克隆培养的目的
（2） ①. 怀孕后尿液中含有 HCG，单克隆抗体可以与它特异性结合，从而诊断早孕 ②. 免疫排斥反应
（3） ①. 愈伤组织 ②. 液泡 ③. 胚状体 ④. 无性生殖
（4）能保持植物原有的遗传特性、繁殖速度快
【解析】
【分析】1、单克隆抗体的制备过程：首先用特定抗原注射小鼠体内，使其发生免疫，小鼠体内产生具有免疫能力的B淋巴细胞。利用动物细胞融合技术将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合。
2、植物细胞工程技术的应用：植物繁殖的新途径（微型繁殖、作物脱毒、人工种子）、作物新品种的培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产。
【小问1详解】
免疫处理的小鼠产生相应的B淋巴细胞群，能合成并分泌多种抗体，而1个浆细胞只能合成一种抗体；步骤③需对选择培养的杂交瘤细胞进行克隆化培养及抗体检测，该过程一般在多孔细胞培养板上进行；用多孔培养板培养时，需要稀释，其目的是使每个孔内不多于一个细胞，达到单克隆培养的目的。
【小问2详解】
人绒毛膜促性腺激素的单克隆抗体本质为蛋白质，所用检测早孕的方法为抗原-抗体杂交，生产的单克隆抗体可以与人绒毛膜促性腺激素（或HCG）特异性结合，怀孕后尿液中含有 HCG，单克隆抗体可以与它特异性结合，从而诊断早孕。为避免鼠源性单克隆抗体进入人体后被人体免疫系统识别并清除，降低免疫排斥反应，在注射前需要进行人源化改造，除抗原结合区域外，其他部分都替换为人抗体区段。
【小问3详解】
液泡中含有无机盐、糖类等有机物，故若利用植物组织培养技术，可将龙井茶叶细胞培养到愈伤组织阶段，愈伤组织细胞呈高度液泡化，然后从其液泡中提取茶碱；若要获得神奇的人工种子，可将龙井茶叶细胞培养到胚状体阶段，经过人工薄膜包裹得到人工种子；由于该过程中没有经过精卵结合，故生殖方式为无性生殖。
【小问4详解】
植物组织培养为无性生殖，与常规育种相比，植物组织培养技术产生的植株特点是：能保持植物原有的遗传特性、繁殖速度快等。
【点睛】本题考查了制备单克隆抗体和植物组织培养的的相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系；理论联系实际，综合运用所学知识解决自然界和社会生活中的一些生物学问题的能力。
30. 哺乳动物单倍体胚胎干细胞技术是遗传学研究的新手段,该项 技术为研究隐性基因功能提供了理想的细胞模型。下图表示研究人员利用小 鼠获取单倍体胚胎干细胞的简要流程，回答下列问题：
（1）方法一中，研究人员需对实验小鼠注射外源促性腺激素，使其_____， 从而获得更多的卵母细胞，在体外选用特制的培养液培养至囊胚期，从_____中分离出胚胎干细胞。采用这种方法获得的单倍体胚胎干细胞称为孤 雌单倍体胚胎干细胞（PG-haESCs）。
（2）方法二中，研究人员用_____方法去除细胞 M 中的雌原核，再对处理后的细胞进行进一步的培养、分离和筛选，即可得____单倍体胚胎干细胞（AG- haESCs）。
（3）研究发现，小鼠单倍体胚胎干细胞存在自发二倍体现象，对此可以通 过测定分析细胞内____分子的含量，或利用____观察处于____期细胞 的染色体数目进行确定。
（4）2016 年，中国科学院动物研究所周琪实验室通过细胞融合技术，将小 鼠孤雄（雌）单倍体干细胞和大鼠孤雌（雄）单倍体干细胞融合，创造出一 种新型的干细胞——异种杂合胚胎干细胞。此小鼠-大鼠杂交细胞中通常含 有_____个染色体组，该技术突破了有性杂交的局限，使_____成为可能。
（5）研究发现，单倍体胚胎干细胞也能分化，形成不同功能的细胞、组织 和器官，该技术培育的单倍体动物可成为研究______（填“显性”或“隐 性”）基因功能的理想细胞模型，图示过程涉及的基础技术有______。
【答案】（1） ①. 超数排卵 ②. 内细胞团
（2） ①. 显微操作 ②. 孤雄
（3） ①. DNA ②. 显微镜 ③. 有丝分裂中期
（4） ①. 2 ②. 远缘杂交
（5） ①. 隐性 ②. 动物细胞培养（早期胚胎培养）
【解析】
【分析】据图分析，方法一和二为采用两种策略来获得小鼠的单倍体胚胎干细胞，方法一是激活卵母细胞，进一步筛选得到孤雌单倍体胚胎干细胞；方法二是将受精后获得的合子胚胎的雌原核去除，进一步筛选得到孤雄单倍体胚胎干细胞。
【小问1详解】
为了获得更多的卵母细胞，可以用促性腺激素处理雌性小鼠，使其超数排卵。由图一可以看出，胚胎干细胞取自囊胚期，囊胚期内细胞团将来发育成胎儿的各项组织，具有较高全能性，因此可以从内细胞团中分离筛选胚胎干细胞。
【小问2详解】
由图二可以看出，精卵融合后形成M细胞，去除细胞M中的雌原核利用到了显微操作，得到的细胞中只含有雄原核，将来经进一步的培养、分离和筛选，得到的是孤雄单倍体胚胎干细胞。
【小问3详解】
若小鼠单倍体胚胎干细胞发生自发二倍体现象，则细胞中DNA含量会加倍，因此通过测定分析细胞中的DNA分子含量，可以检测小鼠单倍体胚胎干细胞是否发生自发二倍体现象；
有丝分裂中期染色体的着丝粒排列在赤道板上，数目清晰，形态稳定，因此也可以利用显微镜观察处于有丝分裂中期的细胞的染色体数目来检测小鼠单倍体胚胎干细胞是否发生自发二倍体现象。
【小问4详解】
由题干可知，该异种杂合胚胎干细胞是由小 鼠孤雄（雌）单倍体干细胞和大鼠孤雌（雄）单倍体干细胞融合而成，小 鼠孤雄（雌）单倍体干细胞和大鼠孤雌（雄）单倍体干细胞都只含有一个染色体组，因此融合后的异种杂合胚胎干细胞含有2个染色体组。自然条件下，小鼠与大鼠存在生殖隔离无法进行有性杂交，该技术突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能。
【小问5详解】
由于单倍体中隐性基因出现后即会表达，故该技术培育的单倍体动物可成为研究隐性基因功能的理想细胞模型。
图中过程涉及到的基础技术有动物细胞培养技术（或早期胚胎培养技术）。
2022—2023 学年度第二学期检测考试
高二生物试题
一、单项选择题
1. 无菌技术包括以下几个方面的叙述，其中错误的是( )
A. 使用95%酒精对操作者的手进行消毒
B. 将培养器皿、接种用具和培养基等进行灭菌
C. 为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行
D. 实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围物品相接触
【答案】A
【解析】
【分析】
【详解】A、使用75%酒精对操作者的手进行消毒处理，A错误；
B、为保证不被杂菌污染，应将培养器皿、接种用具和培养基等进行灭菌，B正确；
C、酒精灯火焰附近可以形成一个无菌区，为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行，C正确；
D、周围物品可能会含有杂菌，为防止污染，实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围物品相接触，D正确。
故选A。
2. 下列关于微生物纯培养的叙述，正确的是 （ ）
A. 在实验室中，不可以在非实验区域进食和喝水
B. 消毒和灭菌的杀菌程度存在差异，消毒可以杀死物体内外所有的微生物
C. 微生物纯培养物就是不含有代谢废物的微生物培养物
D. 培养基中营养物质浓度越高，对微生物的生长越有利
【答案】A
【解析】
【分析】微生物实验中的无菌技术的主要内容：（1）对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒。（2）将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌。（3）为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行。（4）实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。
【详解】A、在实验室中可能有微生物污染，故不能在非实验区域进食和喝水，A正确；
B、消毒和灭菌的杀菌程度存在差异，灭菌可以杀死物体内外所有的微生物，B错误；
C、微生物的纯培养物是不含杂菌的微生物培养物，C错误；
D、培养基中的营养物质浓度过高会导致微生物不能从培养基中吸水，将出现失水过多而死亡的现象，对微生物的生长不利，D错误。
故选A。
3. 下图是连云港地区白萝卜泡菜加工流程图，相关叙述错误的是（ ）
A. 将白萝卜条烘干可以防止泡菜坛中水分过多影响发酵
B. 泡菜母水中白醋、食盐、姜、蒜等既能调味又能抑制杂菌生长
C. 白萝卜泡菜发酵过程中亚硝酸盐的含量逐渐减少
D. 泡菜入坛发酵时用水密封，隔绝空气，为乳酸菌提供无氧环境
【答案】C
【解析】
【分析】1、泡菜的制作原理：泡菜的制作离不开乳酸菌。在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。2、测定亚硝酸盐含量的原理：在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料。将显色反应后的样品与已知浓度的标准液进行目测对比，可以大致估算出亚硝酸盐的含量。
【详解】A、新鲜萝卜在高盐条件下会发生渗透失水，所以将白萝卜条烘干可以防止泡菜坛中水分过多影响发酵，A正确；
B、泡菜母水中白醋、小米椒、姜、蒜等香辛料既能调味又能抑制杂菌生长，B正确；
C、白萝卜泡菜发酵过程中亚硝酸盐的含量先增加后减少，C错误；
D、泡菜制作的原理是利用乳酸菌在无氧的条件下进行无氧呼吸产生乳酸，所以泡菜入坛发酵时用水密封，隔绝空气，为乳酸菌提供无氧环境，D正确。
故选C。
4. 传说李白儿子李伯禽在一次酿酒时发酵过头，直至第 21 天开缸时，发现酒液已变酸，但香气扑鼻，且酸甜可口，于是他便把“廿一日”加一“酉” 字，命名为“醋”。下列叙述错误的是（ ）
A. 酒发酵初期通气的目的是酵母菌有氧呼吸进行增殖
B. 酿酒反成醋可能是由于发酵装置密封不严造成的
C. 变酸甜的果酒表面有一层菌膜，最可能是酵母菌形成的
D. 酿醋过程中醋酸菌的碳源和能源，都是来自于果酒发酵产生的酒精
【答案】C
【解析】
【分析】醋酸菌是好氧细菌，当氧气、糖源都充足时能将糖分解成醋酸；当缺少糖时则将乙醇转化为乙醛，再将乙醛变为醋酸。醋酸菌可用于制作各种风味醋。多数醋酸菌的最适生长温度为30～35℃。制作果酒和果醋许多新鲜水果（如葡萄）的果皮表面附着有大量的不同种类的野生酵母菌。在这些酵母菌的作用下，水果可以发酵成果酒。在有氧的条件下，果酒经醋酸菌的作用还可以进一步发酵成果醋。
【详解】A、酒发酵初期通气的目的是促进酵母菌有氧呼吸，进行大量增殖，A正确；
B、酿酒反成醋可能是由于发酵装置密封不严，氧气进入装置，醋酸菌是好氧细菌，醋酸菌进行有氧呼吸产生醋酸，B正确；
C、变酸甜的果酒表面有一层菌膜，最可能是醋酸菌形成的，C错误；
D、在有氧的条件下，果酒经醋酸菌的作用还可以进一步发酵成果醋，酿醋过程中醋酸菌的碳源和能源，都是来自于果酒发酵产生的酒精，D正确。
故选C。
5. 下列动物细胞培养过程中属于原代培养的是（ ）
A. 把组织分散成单个细胞的过程
B. 从机体取得组织分散后立即进行培养的过程
C. 出现接触抑制现象后取下的细胞的培养过程
D. 哺乳动物细胞在培养基中的悬浮生长过程
【答案】B
【解析】
【分析】动物细胞培养的过程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。
【详解】A、用胰蛋白酶使组织分散成单个细胞的过程，可以是原代培养，也可以是传代培养，A错误；
B、原代培养是指从动物机体取得组织用胰蛋白酶分散成单个细胞后立即培养，直到细胞出现接触抑制为止，因此从机体取得细胞后立即进行培养过程是原代培养，B正确；
C、出现接触抑制现象后，接去下的细胞的培养过程是传代培养，C错误；
D、动物细胞具有贴壁生长的特点，D错误。
故选B。
6. 下图表示用草木樨状黄芪（2n=32）和木本霸王（2n=22）培育抗盐新品种过程，有关叙述正确的是
A. ①过程需在低渗溶液中用相应的酶处理
B. 原生质体A和原生质体B的细胞器种类完全相同
C. 最终培养出的杂种植物应具有双亲所有的性状
D. 经过④过程所得的愈伤组织细胞含有四个染色体组
【答案】D
【解析】
【分析】分析图解：图中①过程是用纤维素酶和果胶酶去除植物细胞壁，②过程是原生质体的融合过程，③过程是融合细胞再生出细胞壁，④过程是植物组织培养的脱分化形成愈伤组织。
【详解】A、①过程去除植物细胞壁后，原生质体失去细胞壁的保护，所以需要在等渗溶液中进行，以防止原生质体吸水涨破或失去活性，A错误；
B、叶肉细胞内有叶绿体，而胚轴细胞没有，原生质体A和原生质体B的细胞器种类不完全相同，B错误；
C、理论上，融合后得到的杂种细胞含两种植物的遗传物质，但因为基因之间的相互作用，导致部分基因并不能表达，所以一般都不能表现出双亲的所有性状，C错误；
D、该题中的两个植物细胞，各有两个染色体组，并且两个植物细胞体内的染色体组不相同，故两细胞融合形成的细胞内含四个染色体组，D正确。
故选D。
【点睛】
7. 花药离体培养是重要的育种手段。下图是某二倍体植物花药育种过程的示意图，下列叙述正确的是
A. 为了防止微生物污染，过程①所用的花药需在70%乙醇中浸泡30 min
B. 过程②的培养基中需添加较高浓度的细胞分裂素以利于根的分化
C. 过程③逐步分化的植株中可筛选获得纯合的二倍体
D. 过程④应将炼苗后的植株移栽到含有蔗糖和多种植物激素的基质上
【答案】C
【解析】
【详解】【分析】植物组织培养指的是在无菌培养的条件下，将离体的植物器官（根、茎、叶、花、果实等），组织（形成层、花药组织等），细胞（体细胞、生殖细胞等）以及原生质体等培养在人工配制的培养基上，并给予适当的培养条件，使其长成完整植株的过程。
【详解】植物组织培养过程应该在无菌的条件下进行，因此过程①所用的花药需在70%乙醇溶液中浸泡30秒，之后用无菌水清洗，次氯酸钠浸泡30分钟，再用无菌水清洗，以防止杂菌污染，A错误；过程②的培养基中需添加比值适中的细胞分裂素和生长素，以利于形成愈伤组织，B错误；过程③得到的植株是经过花药离体培养和秋水仙素处理的，因此可筛选获得纯合的二倍体，C正确；过程④应将炼苗后的植株移栽到消毒后的蛭石或珍珠岩中，而非培养基中，D错误。
【点睛】解答本题的关键是掌握植物组织培养的详细过程，明确脱分化、再分化过程需要满足的条件，尤其是对于不同激素的比例要求。
8. 为探究矮牵牛原生质体的培养条件和植株再生能力，某研究小组的实验过程如下图。下列叙述正确的是
A. 过程①获得的原生质体需悬浮在30%蔗糖溶液中
B. 过程②需提高生长素的比例以促进芽的分化
C. 过程③需用秋水仙素处理诱导细胞壁再生
D. 原生质体虽无细胞壁但仍保持细胞的全能性
【答案】D
【解析】
【分析】由图可知，①表示用纤维素酶和果胶酶处理得到原生质体的过程；②③均表示再分化过程。
【详解】原生质体在30%的蔗糖溶液中会失水皱缩，A错误；②诱导芽分化时，需要提高细胞分裂素的比例，B错误；③可以表示诱导根的分化形成幼苗，此时细胞壁已经形成，C错误；原生质体无细胞壁，但由于含有一整套的遗传物质，故具有全能性，D正确。故选D。
【点睛】植物组织培养时，生长素与细胞分裂素用量的比例影响植物细胞的发育方向：生长素与细胞分裂素比例适中时，有利于愈伤组织的形成；生长素/细胞分裂素比例较高时，利于根的分化；生长素/细胞分裂素比例较低时，利于芽的分化。
9. 下图表示“试管牛”、“克隆牛”和“转基因牛”的培育过程，有关说法合理的是（ ）
A. 三种牛的培育过程都经过了受精作用
B. 三种牛培育过程都体现了细胞核的全能性
C. 三种牛培育过程都用到了胚胎移植技术
D. 三种牛体细胞中的遗传信息完全相同
【答案】C
【解析】
【分析】克隆动物和试管动物的比较：
试管动物
克隆动物
生殖方式
有性生殖
无性生殖
技术手段
体外受精、胚胎移植
核移植技术、胚胎移植
遗传规律
遵循
不遵循
【详解】A、克隆牛的培育过程没有经过受精作用，A错误；B、克隆牛的培育体现了细胞核的全能性，但试管牛和转基因牛的培育体现的是细胞（受精卵）的全能性，B错误；
C、三种牛培育过程都用到了胚胎移植技术，C正确；
D、三种牛体细胞中的遗传信息都存在差异，转基因牛与试管牛相比，导入了外源基因，试管牛与克隆牛的细胞质基因不同，D错误。
故选C。
10. 新型冠状病毒可通过表面的棘突蛋白（S蛋白）与人呼吸道黏膜上皮细胞的ACE2受体结合，侵入人体，引起肺炎。制备抗s蛋白的单克隆抗体可阻断病毒的粘附或入侵，相关叙述正确的是（ ）
A. 优先选择灭活的新冠病毒免疫小鼠以激活小鼠的免疫细胞
B. 用灭活的仙台病毒诱导已激活的B细胞与骨髓瘤细胞融合
C. 经过第一次筛选获得能产生抗S蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞
D. 经体外培养得到的单克隆抗体可以与ACE2受体结合阻断病毒的入侵
【答案】B
【解析】
【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。
【详解】A、实验目的是制备抗S蛋白的单克隆抗体，所以优先选择S蛋白免疫小鼠以激活小鼠的免疫细胞，A错误；
B、诱导动物细胞融合可以用灭活的仙台病毒，B正确；
C、至少经过两次筛选才能获得产生抗S蛋白的单克隆抗体的杂交瘤细胞，C错误；
D、经体外培养得到的单克隆抗体可以与S蛋白结合阻断病毒的入侵，D错误。
故选B。
【点睛】
11. 下列关于植物细胞工程应用的叙述，错误的是（ ）
A. 植物细胞的全能性是植物组织培养的理论基础
B. 植物组织培养时，培养基中的蔗糖可作为碳源并调节渗透压
C. 选择一定大小的植物茎尖进行组织培养可获得脱毒苗
D. 植物组织培养技术不能用于转基因植物的培育
【答案】D
【解析】
【分析】植物组织培养技术：1、过程：离体的植物组织，器官或细胞（外植体）→愈伤组织→胚状体→植株（新植体）。2、原理：植物细胞的全能性。3、条件：①细胞离体和适宜的外界条件（如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等）；②一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分裂素）。4、植物细胞工程技术的应用：植物繁殖的新途径（包括微型繁殖，作物脱毒、人工种子等）、作物新品种的培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产。
【详解】A、植物组织培养的理论基础是植物细胞的全能性，A正确；
B、植物组织培养时，培养基中的蔗糖可作为碳源并且能调节渗透压，B正确；
C、茎尖几乎无毒，因此可选择一定大小的植物茎尖进行组织培养可获得脱毒苗，C正确；
D、将转基因植物细胞培育成转基因植株需要采用植物组织培养技术，D错误。
故选D。
12. 下列有关哺乳动物早期胚胎发育的叙述中，错误的是（ ）
A. 胚胎干细胞是一类未分化的细胞，可以从早期胚胎中分离获得
B. 桑椹胚的细胞一般都具有全能性，囊胚的细胞逐渐分化
C. 在桑椹胚阶段，胚胎的内部开始出现含有液体的腔
D. 受精卵早期分裂时，胚胎中细胞数目不断增加，但胚胎的总体积并不增加
【答案】C
【解析】
【分析】胚胎发育过程：（1）卵裂期：细胞进行有丝分裂，数量增加，胚胎总体积不增加；
（2）桑椹胚：32个细胞左右的胚胎[之前所有细胞都能发育成完整胚胎的潜能属全能细胞]；
（3）囊胚：细胞开始分化，其中个体较大的细胞叫内细胞团将来发育成胎儿的各种组织；而滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘；胚胎内部逐渐出现囊胚腔；
（4）原肠胚：内细胞团表层形成外胚层，下方细胞形成内胚层，由内胚层包围的囊腔叫原肠腔。
详解】A、胚胎干细胞未分化，可从早期胚胎中获取，A正确；
B、桑葚胚的细胞一般都具有全能性，囊胚的细胞分为为内细胞团和滋养层，所以开始出现分化，B正确；
C、在囊胚阶段，胚胎的内部开始出现含有液体的腔，C错误；
D、早期卵裂时，胚胎细胞数目不断增加，但总体积基本不变，D正确。
故选C。
13. 我国小麦育种专家李振声将长穗偃麦草的抗病、高产等基因转移到普通小麦中，培育成了小麦二体异附加系（流程如下图所示）。普通小麦6n＝42，记为42W；长穗麦草2n＝14，记为14E。下列叙述错误的是（ ）
A. 甲为异源八倍体
B. 丙染色体组成是42W＋14E
C. 丁自交后代中植株戊约占1/4
D. 育种中发生了基因重组和染色体变异
【答案】B
【解析】
【分析】种育种方法的比较如下表：
杂交育种
诱变育种
单倍体育种
多倍体育种
方法
杂交→自交→选优
辐射诱变、激光诱变、化学药剂处理
花药离体培养、秋水仙素诱导加倍
秋水仙素处理萌发的种子或幼苗
原理
基因重组
基因突变
染色体变异
染色体变异
【详解】A、普通小麦与长穗偃麦草杂交，F1为异源四倍体，则甲为异源八倍体，A正确；B、乙中来自燕麦草的染色体组是一个，因此长穗偃麦草的染色体不能联会，产生的配子的染色体组成是21W+0~7E，则丙的染色体组成是42W+0~7E，B错误；
C、丁体细胞中含有一条长穗偃麦草染色体，自交后代中长穗偃麦草染色体的情况是2条：1条：0条=1：2：1，因此含有两条长穗偃麦草染色体的植株戊占1/4，C正确；
D、图中杂交过程均发生了基因重组；图中①过程可用低温诱导的方法导致染色体数目加倍，发生了染色体变异，D正确。
故选B。
14. 下图为利用纯合高秆（D）抗病（E）小麦和纯合矮秆（d）染病（e）小麦快速培育纯合矮秆抗病小麦（ddEE）的示意图，下列有关叙述不正确的是（ ）
A. 图中进行①过程的目的是让控制不同优良性状的基因组合到一起
B. ②过程中发生了非同源染色体的自由组合
C. 实施③过程依据的主要生物学原理是细胞分化
D. ④过程的实施中通常需要用一定浓度的秋水仙素处理
【答案】C
【解析】
【分析】据图可知，①过程为具有相对性状的亲本杂交，其主要目的是让控制不同优良性状的基因组合到一起；②过程为减数分裂产生配子的过程，发生了非同源染色体的自由组合；③过程为花药离体培养过程，依据的主要生物学原理是植物细胞的全能性；实施④过程通常用一定浓度的秋水仙素使染色体数目加倍。
【详解】A、图中①表示杂交过程，主要目的是让控制不同优良性状的基因组合到一起，A正确；
B、②是减数分裂过程，由于非同源染色体的自由组合，形成了四种类型的配子，B正确；
C、③是花药离体培养，利用的原理是植物细胞的全能性，C错误；
D、④过程可用一定浓度的秋水仙素或者低温诱导使染色体数目加倍，D正确。
故选C。
15. 哺乳动物体外受精的过程是（ ）
①卵母细胞的采集 ②精子的采集 ③卵母细胞的成熟培养 ④精子的 获能处理 ⑤精子与成熟的卵子在适当的培养液中共同培养 ⑥体外受精 ⑦受精卵培养
A. B.
C. D.
【答案】B
【解析】
【分析】哺乳动物的体外受精技术主要包括卵母细胞的采集、精子的获取和受精等步骤。采集到的卵母细胞和精子，要分别在体外进行成熟培养和获能处理，然后才能用于体外受精。一般情况下，可以将获能的精子和培养成熟的卵子置于适当的培养液中共同培养一段时间，来促使它们完成受精。
【详解】哺乳动物的体外受精技术主要包括卵母细胞的采集、精子的获取和受精等步骤。采集到的卵母细胞和精子，要分别在体外进行成熟培养和获能处理，然后才能用于体外受精。一般情况下，可以将获能的精子和培养成熟的卵子置于适当的培养液中共同培养一段时间，来促使它们完成受精，接着进行受精卵培养，因此，哺乳动物体外受精的过程是 。
故选B。
16. 下列有关受精作用的叙述错误的是（ ）
A. 受精卵中全部的遗传物质一半来自父方，一半来自母方
B. 受精时，精子和卵细胞的染色体会合在一起
C. 受精卵中的染色体一半来自父方，一半来自母方
D. 受精卵中的染色体数与本物种体细胞的染色体数相同
【答案】A
【解析】
【分析】
受精作用是指精子和卵细胞相互识别、融合成为受精卵的过程。精子的头部进入卵细胞，尾部留在外面，不久精子的细胞核就和卵细胞的细胞核融合，使受精卵中染色体的数目又恢复到体细胞的数目，其中有一半来自精子有一半来自卵细胞。据此答题。
【详解】A、受精卵细胞核中的遗传物质一半来自于父方，一半来自于母方，而细胞质中的遗传物质全部来自于母方，A错误；
B、受精时，精子和卵细胞的细胞核会融合在一起，双方染色体会合在一起，B正确；
C、受精卵中的染色体一半来自精子，一半来自于卵细胞，C正确；
D、精子和卵细胞中染色体数都发生减半，而结合形成受精卵后染色体又恢复为原来亲本的染色体数，即与本物种体细胞的染色体数相同，D正确。
故选A。
17. 下列关于哺乳动物胚胎发育的叙述，错误的是（ ）
A. 胚胎发育过程有细胞分化，细胞分化是基因选择性表达的结果
B. 胚胎发育至原肠胚时期开始细胞分化，分化程度最高
C. 三个胚层细胞与滋养层细胞相比，DNA 相同，mRNA 不完全相同
D. 原肠胚的三胚层可发育为各种器官的原基
【答案】B
【解析】
【分析】胚胎发育过程：（1）卵裂期：细胞进行有丝分裂，数量增加，胚胎总体积不增加；（2）桑葚胚：32个细胞左右的胚胎[之前所有细胞都能发育成完整胚胎的潜能属全能细胞]；（3）囊胚：细胞开始分化，其中个体较大的细胞叫内细胞团将来发育成胎儿的各种组织；而滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘；胚胎内部逐渐出现囊胚腔[注：囊胚的扩大会导致透明带的破裂，胚胎伸展出来，这一过程叫孵化]；（4）原肠胚：内细胞团表层形成外胚层，下方细胞形成内胚层，由内胚层包围的囊腔叫原肠腔。
【详解】A、细胞分化的实质是基因的选择性表达，细胞分化贯穿于生命的始终，所以胚胎发育过程中也存在细胞分化，A正确；
B、细胞分化开始于囊胚时期，B错误；
C、细胞分化是基因的选择性表达，所以三个胚层细胞与滋养层细胞相比，DNA 相同，mRNA 不完全相同 ，C正确；
D、原肠胚的三胚层逐渐分化形成各种器官原基，D正确。
故选B。
18. 下列有关限制性内切核酸酶的叙述，正确的是（ ）
A. 用限制性内切核酸酶切割一个DNA分子中部，获得一个目的基因时，被水解的磷酸二酯键有2个
B. 用限制性内切核酸酶识别序列越短，则该序列在DNA中出现的概率就越大
C. 和序列被限制性内切核酸酶切出的黏性末端可用DNA连接酶连接
D. 只有用相同的限制性内切核酸酶处理含目的基因的片段和质粒，才能形成重组质粒
【答案】B
【解析】
【分析】限制酶的来源、作用及其结果：
（1）来源：主要从原核生物中分离纯化出来。
（2）作用（特异性）：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。
（3）结果：形成黏性末端或平末端；特别注意：用限制酶切割DNA时，每切开一个切口需要水解两个磷酸二酯键。
【详解】A、用限制性内切核酸酶切割一个DNA分子中部，获得一个目的基因时，需要切割目的基因的两侧，又因DNA为双链结构，因此要断裂4个磷酸二酯键，即被水解的磷酸二酯键有4个，A错误；
B、限制性内切核酸酶识别序列越短，则该序列在DNA中出现的概率就越大，B正确；
C、—CATC↓—和—G↓GATCC—序列被限制性内切核酸酶切出的黏性末端不同，分别为—CATG和—GTAG，因此不能用DNA连接酶连接，C错误；
D、用不同的限制性内切核酸酶处理含目的基因的DNA片段和质粒，若产生的黏性末端相同，则也能形成重组质粒，D错误。
故选B。
19. 下列有关 PCR 技术的说法，错误的是（ ）
A. PCR 是一项在生物体外复制特定的 DNA 片段的核酸合成技术
B. PCR 技术的原理是 DNA 分子半保留复制
C. 退火过程中引物与模板链的结合遵循碱基互补配对原则
D. PCR 过程中只需要模板 DNA、两种引物分子、4 种脱氧核苷三磷酸原料
【答案】C
【解析】
【分析】PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术，所利用的原理为DNA分子的复制。PCR技术的过程：①高温变性：DNA解旋过程；②低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链。
【详解】A、根据PCR技术的原理与定义可知PCR是一项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术，A正确；
B、PCR技术的原理是DNA分子半保留复制，B正确；
C、复性过程中引物与模板链的结合遵循碱基互补配对原则，C错误；
D、PCR 过程中只需要模板 DNA、两种引物分子、4 种脱氧核苷三磷酸原料，高温可以使DNA分子解旋，所以不需要使用解旋酶，D正确
故选C。
20. DNA连接酶是重组DNA技术中常用的一种工具酶。下列相关叙述，正确的是（ ）
A. 能连接DNA分子双链碱基对之间的氢键
B. 能将单个脱氧核苷酸加到DNA片段的末端，形成磷酸二酯键
C. 能连接用同种限制酶切开的两条DNA片段，重新形成磷酸二酯键
D. 只能连接双链DNA片段互补的黏性末端，不能连接双链DNA片段的平末端
【答案】C
【解析】
【分析】DNA连接酶：（1）根据酶的来源不同分为两类：E．coliDNA连接酶、T4DNA连接酶。这二者都能连接黏性末端，此外T4DNA连接酶还可以连接平末端，但连接平末端时的效率比较低。（2）DNA连接酶连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键。（3）DNA连接酶和DNA聚合酶的区别：①DNA连接酶是在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键，而DNA聚合酶只能将单个脱氧核苷酸加到已有的核苷酸片段上，形成磷酸二酯键；②DNA连接酶是同时连接双链的切口，而DNA聚合酶只是在单链上将一个个脱氧核苷酸连接起来；③DNA连接酶不需要模板，而DNA聚合酶需要模板。
【详解】A、DNA连接酶连接的磷酸二酯键，A错误；
B、DNA聚合酶能将单个脱氧核苷酸加到DNA片段的末端，形成磷酸二酯键，B错误；
C、能连接用同种限制酶切开的两条DNA片段，重新形成磷酸二酯键，C正确；
D、有些DNA连接酶既能连接双链DNA片段互补的黏性末端，又能连接双链DNA片段的平末端，D错误。
故选C。
21. 某线性DNA分子含有5000个碱基对（bp），先用限制酶a切割，再把得到的产物用限制酶b切割，得到的DNA片段大小如表所示。限制酶a、b的识别序列和切割位点如图所示。下列有关说法正确的是（ ）
酶a切割产物长度（bp）
酶b再次切割产物长度（bp）
2100；1400；1000；500
1900；200；800；600；1000；500
A. 酶a与酶b切断的化学键不相同
B. 酶a与酶b切出的黏性末端不能相互连接
C. 该DNA分子中酶a与酶b的识别序列分别有3个和2个
D. 若酶a完全切割与该DNA序列相同的质粒，得到的切割产物有4种
【答案】C
【解析】
【分析】由图可知，酶a、b的识别序列不同，但产生的黏性末端相同，均为GATC，由酶切产物可知，酶a单独切割后会形成4个片段，说明含有3个酶a的酶切位点；酶b再次酶切后，又新形成4种片段，说明有2个酶b的酶切位点。
【详解】A、酶a与酶b切断的化学键均为磷酸二酯键，A错误；
B、a酶与b酶切出的黏性末端相同，用DNA连接酶可以将它们连接起来，B错误；
C、由酶切产物可知，该DNA分子中，酶a与酶b的识别序列分别有3个和2个，C正确；
D、用酶a切割与该DNA序列相同的质粒（环状的），也可得到3种大小不同的切割产物，D错误。
故选C。
二、多项选择题
22. 为纯化菌种，在培养基上划线接种分解尿素的细菌，培养结果如图所示。下列叙述错误的是（ ）
A. 为保证无菌操作，接种针、接种环使用前都必须灭菌
B. 倒平板后需要间歇晃动培养皿，以保证培养基表面平整
C. 图中Ⅰ、Ⅱ区的细菌数量均太多，应从Ⅲ区挑选单菌落
D. 该实验结果因单菌落太多，不能达到菌种纯化的目的
【答案】BD
【解析】
【分析】微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在划线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
【详解】A、为保证无菌操作，接种针、接种环使用前都必须经过灼烧灭菌，A正确；
B、倒平板时需左三圈，右三圈的轻轻晃动，以保证表面平整，B错误；
C、图中Ⅰ、Ⅱ区的细菌数量均太多，且菌落连成一片，应从Ⅲ区挑取单菌落，C正确；
D、该实验的Ⅲ区已经出现由单个细菌繁殖而形成的菌落，因此已经达到菌种纯化的目的，D错误。
故选BD。
23. 下列关于植物组织培养过程的叙述，正确的是（ ）
A. 愈伤组织是外植体再分化形成的
B. 愈伤组织是一种不定形的薄壁组织团块
C. 诱导生芽或生根时，需要生长素与细胞分裂素的比例合适
D. 再生植株移栽前，需要打开瓶盖在培养箱中“锻炼”数日
【答案】BCD
【解析】
【分析】1、植物组织培养的条件：①细胞离体和适宜的外界条件（如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等）。②一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分裂素）。2、在植物的生长发育和适应环境变化的过程中，各种植物激素并不是孤立地起作用，而是多种激素相互作用共同调节．在植物组织培养时，通过调节生长素和细胞分裂素的比值能影响愈伤组织分化出根或芽．生长素用量比细胞分裂素用量，比值高时，有利于根的分化、抑制芽的形成；比值低时，有利于芽的分化、抑制根的形成．比值适中时，促进愈伤组织的生长。
【详解】A、外植体经过脱分化可以形成愈伤组织，经过再分化形成胚状体，A错误；
B、愈伤组织是一团排列疏松而无规则、高度液泡化、呈无定形状态的、具有分生能力的薄壁细胞，B正确；
C、生长素和细胞分裂素的比值大时有利于根的形成，比值小时，则促进芽的形成，C正确；
D、再生植株移栽前，需要打开瓶盖在培养箱中“锻炼”数日，以适应环境，D正确。
故选BCD。
24. 2017年批准了首例使用细胞核移植技术培育“三亲婴儿”的申请，其培育过程的技术流程如下图，相关叙述错误的是（ ）
A. 该培育过程涉及动物细胞培养、细胞核移植、体外受精等技术
B. 三亲婴儿的染色体全部来自母亲提供的细胞核
C. 卵母细胞捐献者的红绿色盲基因能够传递给“三亲婴儿”
D. 将受精卵直接植入母体的子宫可提高胚胎成活率
【答案】BCD
【解析】
【分析】分析题图：图示表示三亲婴儿的培育过程，由图可知，三亲婴儿的培育采用了核移植技术、早期胚胎培养技术和胚胎移植技术等。
【详解】A、由图可知，该培育过程涉及动物细胞培养、细胞核移植、体外受精等技术，A正确；
B、三亲婴儿的染色体来自两个亲本，即父亲提供了精子和母亲提供卵细胞，B错误；
C、捐献者携带的红绿色盲基因位于其细胞核内，而捐献者给三亲婴儿提供的是卵细胞的细胞质，则捐献者携带的红绿色盲基因不能遗传给三亲婴儿，C错误；
D、受精卵需要在体外培养形成早期胚胎后才可移植入母体的子宫，D错误。
故选BCD。
25. 下列有关基因工程中载体的说法，不正确的是（ ）
A. 在进行基因工程操作中，被用作载体的质粒都是天然质粒
B. 所有的质粒都可以作为基因工程中的载体
C. 质粒是一种独立于细菌染色体外的链状DNA分子
D. 作为载体的质粒DNA分子上应有对重组DNA进行鉴定和选择的标记基因
【答案】ABC
【解析】
【分析】1、常用的运载体：质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒；
2、质粒是一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外并具有自我复制能力的双链环状DNA分子；
3、作为运载体必须具备的条件：①要具有限制酶的切割位点； ②要有标记基因（如抗性基因），以便于重组后重组子的筛选③能在宿主细胞中稳定存在并复制；④是安全的，对受体细胞无害，而且要易从供体细胞分离出来；
4、天然的质粒不能直接作为载体，基因工程中用到的质粒都是在天然质粒的基础上进行过人工改造的。
【详解】A、天然的质粒不能直接作为载体，基因工程中用到的质粒都是在天然质粒的基础上进行过人工改造的，A错误；
B、作为基因工程的运载体，必须具备一定的条件，而自然界中的质粒不一定具备相应的条件，因此不一定都可以作为基因工程中的运载体，B错误；
C、质粒是一种独立于细菌拟核外的环状DNA分子，C错误；
D、作为载体的质粒DNA分子上应有标记基因，便于对重组DNA进行鉴定和选择，D正确。
故选ABC。
26. 下列关于限制酶和 DNA 连接酶的理解，错误的是（ ）
A. 限制酶能在特定部位的两个核苷酸之间切断磷酸二酯键
B. DNA 连接酶可以恢复 DNA 分子中的氢键，将两条 DNA 片段的黏性末端之间 的缝隙连接起来
C. 在基因工程操作中，可以用 DNA 聚合酶代替 DNA 连接酶
D. 限制酶广泛存在于动植物体内，微生物内很少分布
【答案】BCD
【解析】
【分析】限制酶能够识别双链DNA分子的特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的磷酸二酯键断开。
DNA连接酶是链接两个DNA的片段，形成磷酸二酯键。
【详解】A、限制酶能够识别双链DNA分子的特定核苷酸序列，能在特定部位的两个核苷酸之间切断磷酸二酯键，A正确；
B、DNA 连接酶可以恢复 DNA 分子中的磷酸二酯键，将两条 DNA 片段的黏性末端之间的缝隙连接起来，B错误；
C、DNA聚合酶将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键，DNA连接酶是链接两个DNA的片段，形成磷酸二酯键。在基因工程操作中，不可以用 DNA 聚合酶代替 DNA 连接酶，C错误；
D、限制酶主要来源于微生物，D错误。
故选BCD。
三、非选择题
27. 牛奶中富含蛋白质，长期饮用有助于增强体质，但牛奶同时也是多种疾病的传播载体。国家标准是每毫升牛奶中细菌数小于30000个。下图是牛奶消毒及细菌检测实验的简要操作流程。回答下列问题：
（1）牛奶的消毒有巴氏消毒法、高温瞬时消毒法及煮沸消毒法等，图中步骤①采用的消毒方法是______，该消毒方法的优点是既达到消毒目的又减少__________。
（2）进行步骤③操作的培养基中，牛肉膏、蛋白胨可以为微生物提供________________，该步骤应选用的接种工具是__________，如果接种后经培养的多个平板培养基上有一个培养基未出现菌落，从操作层面分析，最可能的原因是__________。
（3）将接种后的培养基和作为对照的_______同时放入37 ℃恒温培养箱中，培养36小时。为避免培养基污染，需将培养皿呈________状态放置。
（4）培养36小时后可观察到菌落，单菌落的含义是________________。取出后统计各平板的菌落数，结果如下表所示。
牛奶稀释倍数
102
103
104
平板1菌落数
87
10
1
平板2菌落数
83
12
1
平板3菌落数
85
10
0
由实验结果可推知，应该选择其中稀释倍数为________________的平板进行计数；经过此种方法消毒后的，每毫升牛奶中细菌数大约________________个，故此次消毒后的牛奶________（填“适合”或“不适合”）饮用。
【答案】（1） ①. 巴氏消毒法 ②. 营养物质的损失
（2） ①. 碳源、氮源、维生素等 ②. 涂布器 ③. 涂布器没有冷却， 温度过高，杀死了细菌
（3） ①. 未接种的培养基（等量无菌水的培养基） ②. 倒置
（4） ①. 由一个菌体细胞繁殖而成的肉眼可见的子细胞群体 ②. 102 ③. 85000 ④. 不适合
【解析】
【分析】分析图解：图中①表示用巴士消毒法对牛奶进行消毒，步骤②表示对牛奶进行系列稀释，步骤③表示利用稀释涂布平板法对牛奶中细菌进行培养计数。
【小问1详解】
图中步骤①利用80℃、15min对牛奶进行巴氏消毒；巴氏消毒优点是在达到消毒目的的同时，营养物质损失较少，保存了牛奶的营养与天然风味。
【小问2详解】
进行步骤③操作的培养基中的蛋白胨可以为微生物提供碳源、氮源、维生素。步骤③应选用的接种工具是涂布器；如果接种后经培养的多个平板培养基上有一个培养基未出现菌落，从操作技术分析，最可能的原因是涂布器没有冷却，温度过高，杀死了细菌（或微生物）。
【小问3详解】
将接种后的培养基和作为对照的未接种的培养基（等量无菌水的培养基）同时放入37℃恒温培养箱中，培养36小时。在培养箱内平板要倒置，目的是：防止水分过快蒸发，导致培养基干裂；防止皿盖上的冷凝水滴落，造成培养基污染。
【小问4详解】
单菌落含义是由一个菌体细胞繁殖而成的肉眼可见的子细胞群体；平板培养后取出统计各平板的菌落数，选择菌落数在30～300的进行记数，求其平均值，取出后统计各平板的菌落数，因此根据表格数据，应该选择其中稀释倍数为102的平板进行计数，经过消毒后的牛奶中，细菌数大约是=（87+83+85）÷3×102÷0.1=85000个/mL，不符合国家标准，国家标准是每毫升牛奶中细菌数小于30000个，所以不适合饮用。
【点睛】本题考查了微生物培养过程中的无菌技术、分离微生物的方法，主要考查学生设计和完善实验步骤，分析实验结果获取结论的能力和提出问题进行进一步探究的能力，利用所学的微生物知识解决生活问题的能力。
28. 工业上所说的发酵是指微生物在有氧或无氧条件下，通过分解与合成代谢将某些原料物质转化为特定产品的过程。利用微生物发酵制作酱油在我国具有悠久的历史。某企业通过发酵制作酱油的流程示意图如下。
回答下列问题：
（1）米曲霉发酵过程的主要目的是使米曲霉充分生长繁殖，大量分泌制作酱油过程所需的酶类，这些酶中的____________、____________能分别将发酵池中的蛋白质和脂肪分解成易于吸收、风味独特的成分，如将蛋白质分解为小分子的肽和____________。
（2）在发酵池发酵阶段添加的乳酸菌属于____________（填“自养厌氧” “异养厌氧”或“异养好氧”），酵母菌是一种单细胞真菌，能以___________作为主要营养物质和能量来源。
（3）为了在发酵池中添加性状优良的菌种，科技人员进行了下列PCR部分实验操作。请完成表格相关内容：
参与成分
相关操作
缓冲液
PCR反应缓冲液中一般要添加①____
模板、引物、原料和酶
需提供DNA模板、2种引物、4种脱氧核苷酸和②____
PCR仪
能够自动调节③_____的仪器
反应过程
每次循环一般分为④_____三步
循环次数
一次PCR一般要经历⑤________循环
产物鉴定
常采用⑥___来鉴定PCR的产物
【答案】（1） ①. 蛋白酶 ②. 脂肪酶 ③. 氨基酸
（2） ①. 异养厌氧 ②. （多种）糖类
（3） ①. Mg2+ ②. 耐高温的DNA 聚合酶 ③. 温度 ④. 变性、复性和延伸 ⑤. 30 次 ⑥. 琼脂糖凝胶电泳
【解析】
【分析】1、由题图信息分析可知，酿造酱油主要利用的是米曲霉，能够产生蛋白酶和脂肪酶，将蛋白质和脂肪分别水解成小分子的肽和氨基酸、甘油和脂肪酸。
2、培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质；根据物理性质分为固体培养基和液体培养基，培养基中一般含有水、碳源、氮源和无机盐，其中碳源和氮源常采用蛋白胨和牛肉膏，因为它们来源于动物原料，含有糖、维生素和有机氮等营养物质。在提供上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质和氧气的要求。
3、PCR原理：在高温作用下，打开DNA双链，每条DNA单链作为母链，以4种游离脱氧核苷酸为原料，合成子链，在引物作用下，DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链，即DNA的合成方向是从子链的5'端自3'端延伸的。实际上就是在体外模拟细胞内DNA的复制过程。DNA的复制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能从3′端延伸DNA链。
【小问1详解】
米曲霉发酵过程产生的蛋白酶和脂肪酶能分别将发酵池中的蛋白质和脂肪分解成易于吸收、风味独特的成分，如将蛋白质分解为小分子肽和氨基酸。
【小问2详解】
乳酸菌属于异养厌氧型微生物，酵母菌是一种异养型真菌，以多种糖类为主要营养物质和能量来源。
【小问3详解】
Mg2+可以促进Taq DNA聚合酶活性，故利用PCR技术扩增产物时在PCR反应缓冲液中一般会添加Mg2+。PCR扩增过程中所需要的酶为耐高温的DNA 聚合酶。现在使用的PCR仪实质上也是一台能自动调控温度的仪器。PCR 一般要经历三十多次循环，每次循环可以分为变性、复性和延伸三步。琼脂糖凝胶电泳是以琼脂糖为介质，对不同大小的DNA或RNA实现分离的一种电泳方法，常用来鉴定PCR的产物。
【点睛】本题考查传统发酵技术和PCR的相关知识，意在考查考生把握知识的要点，加强知识间内在联系的能力。
29. 细胞工程在药物生产和育种等领域应用十分广泛。阅读下列材料，回答下列问题。
材料一：人绒毛膜促性腺激素（HCG）是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白。如图是制备抗HCG单克隆抗体流程示意图。
材料二：西湖龙井含有的茶碱是植物细胞的代谢产物，具有提神、抗衰老功效，可利用植物组织培养技术来实现茶碱的工业化生产。
（1）免疫处理的小鼠产生相应的B淋巴细胞群能合成并分泌___________（填“一种”或“多种”）抗体。步骤③需对选择培养的杂交瘤细胞进行___________及抗体检测，该过程一般在多孔细胞培养板上进行：先将细胞悬浮液稀释到7～10个细胞/mL，再在每个培养孔中滴入0．1 mL细胞稀释液，其目的是___________。
（2）单克隆抗体最广泛的用途是用作体外诊断试剂，如科学家利用人绒毛膜促性腺激素的单克隆抗体，制作出了早孕试纸，该试纸可以利用尿液诊断早孕的理由是_______________。鼠源性单克隆抗体可应用于肿瘤的临床免疫治疗，在注射前需要进行人源化改造，除抗原结合区域外，其他部分都替换为人抗体区段，目的是降低___________。
（3）若利用植物组织培养技术，可将龙井茶叶细胞培养到___________阶段，然后从___________（填细胞器）中提取茶碱；若要获得神奇的人工种子，可将龙井茶叶细胞培养到___________，再和具有养分的人工胚乳一起包埋在具有保护功能的人工种皮中；由其培育成的植株生殖方式为___________。
（4）与常规育种相比，植物组织培养技术产生的植株特点有___________。
【答案】（1） ①. 多种 ②. 克隆化培养 ③. 使每个孔内不多于一个细胞，达到单克隆培养的目的
（2） ①. 怀孕后尿液中含有 HCG，单克隆抗体可以与它特异性结合，从而诊断早孕 ②. 免疫排斥反应
（3） ①. 愈伤组织 ②. 液泡 ③. 胚状体 ④. 无性生殖
（4）能保持植物原有的遗传特性、繁殖速度快
【解析】
【分析】1、单克隆抗体的制备过程：首先用特定抗原注射小鼠体内，使其发生免疫，小鼠体内产生具有免疫能力的B淋巴细胞。利用动物细胞融合技术将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合。
2、植物细胞工程技术的应用：植物繁殖的新途径（微型繁殖、作物脱毒、人工种子）、作物新品种的培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产。
【小问1详解】
免疫处理的小鼠产生相应的B淋巴细胞群，能合成并分泌多种抗体，而1个浆细胞只能合成一种抗体；步骤③需对选择培养的杂交瘤细胞进行克隆化培养及抗体检测，该过程一般在多孔细胞培养板上进行；用多孔培养板培养时，需要稀释，其目的是使每个孔内不多于一个细胞，达到单克隆培养的目的。
【小问2详解】
人绒毛膜促性腺激素的单克隆抗体本质为蛋白质，所用检测早孕的方法为抗原-抗体杂交，生产的单克隆抗体可以与人绒毛膜促性腺激素（或HCG）特异性结合，怀孕后尿液中含有 HCG，单克隆抗体可以与它特异性结合，从而诊断早孕。为避免鼠源性单克隆抗体进入人体后被人体免疫系统识别并清除，降低免疫排斥反应，在注射前需要进行人源化改造，除抗原结合区域外，其他部分都替换为人抗体区段。
【小问3详解】
液泡中含有无机盐、糖类等有机物，故若利用植物组织培养技术，可将龙井茶叶细胞培养到愈伤组织阶段，愈伤组织细胞呈高度液泡化，然后从其液泡中提取茶碱；若要获得神奇的人工种子，可将龙井茶叶细胞培养到胚状体阶段，经过人工薄膜包裹得到人工种子；由于该过程中没有经过精卵结合，故生殖方式为无性生殖。
【小问4详解】
植物组织培养为无性生殖，与常规育种相比，植物组织培养技术产生的植株特点是：能保持植物原有的遗传特性、繁殖速度快等。
【点睛】本题考查了制备单克隆抗体和植物组织培养的的相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系；理论联系实际，综合运用所学知识解决自然界和社会生活中的一些生物学问题的能力。
30. 哺乳动物单倍体胚胎干细胞技术是遗传学研究的新手段,该项 技术为研究隐性基因功能提供了理想的细胞模型。下图表示研究人员利用小 鼠获取单倍体胚胎干细胞的简要流程，回答下列问题：
（1）方法一中，研究人员需对实验小鼠注射外源促性腺激素，使其_____， 从而获得更多的卵母细胞，在体外选用特制的培养液培养至囊胚期，从_____中分离出胚胎干细胞。采用这种方法获得的单倍体胚胎干细胞称为孤 雌单倍体胚胎干细胞（PG-haESCs）。
（2）方法二中，研究人员用_____方法去除细胞 M 中的雌原核，再对处理后的细胞进行进一步的培养、分离和筛选，即可得____单倍体胚胎干细胞（AG- haESCs）。
（3）研究发现，小鼠单倍体胚胎干细胞存在自发二倍体现象，对此可以通 过测定分析细胞内____分子的含量，或利用____观察处于____期细胞 的染色体数目进行确定。
（4）2016 年，中国科学院动物研究所周琪实验室通过细胞融合技术，将小 鼠孤雄（雌）单倍体干细胞和大鼠孤雌（雄）单倍体干细胞融合，创造出一 种新型的干细胞——异种杂合胚胎干细胞。此小鼠-大鼠杂交细胞中通常含 有_____个染色体组，该技术突破了有性杂交的局限，使_____成为可能。
（5）研究发现，单倍体胚胎干细胞也能分化，形成不同功能的细胞、组织 和器官，该技术培育的单倍体动物可成为研究______（填“显性”或“隐 性”）基因功能的理想细胞模型，图示过程涉及的基础技术有______。
【答案】（1） ①. 超数排卵 ②. 内细胞团
（2） ①. 显微操作 ②. 孤雄
（3） ①. DNA ②. 显微镜 ③. 有丝分裂中期
（4） ①. 2 ②. 远缘杂交
（5） ①. 隐性 ②. 动物细胞培养（早期胚胎培养）
【解析】
【分析】据图分析，方法一和二为采用两种策略来获得小鼠的单倍体胚胎干细胞，方法一是激活卵母细胞，进一步筛选得到孤雌单倍体胚胎干细胞；方法二是将受精后获得的合子胚胎的雌原核去除，进一步筛选得到孤雄单倍体胚胎干细胞。
【小问1详解】
为了获得更多的卵母细胞，可以用促性腺激素处理雌性小鼠，使其超数排卵。由图一可以看出，胚胎干细胞取自囊胚期，囊胚期内细胞团将来发育成胎儿的各项组织，具有较高全能性，因此可以从内细胞团中分离筛选胚胎干细胞。
【小问2详解】
由图二可以看出，精卵融合后形成M细胞，去除细胞M中的雌原核利用到了显微操作，得到的细胞中只含有雄原核，将来经进一步的培养、分离和筛选，得到的是孤雄单倍体胚胎干细胞。
【小问3详解】
若小鼠单倍体胚胎干细胞发生自发二倍体现象，则细胞中DNA含量会加倍，因此通过测定分析细胞中的DNA分子含量，可以检测小鼠单倍体胚胎干细胞是否发生自发二倍体现象；
有丝分裂中期染色体的着丝粒排列在赤道板上，数目清晰，形态稳定，因此也可以利用显微镜观察处于有丝分裂中期的细胞的染色体数目来检测小鼠单倍体胚胎干细胞是否发生自发二倍体现象。
【小问4详解】
由题干可知，该异种杂合胚胎干细胞是由小 鼠孤雄（雌）单倍体干细胞和大鼠孤雌（雄）单倍体干细胞融合而成，小 鼠孤雄（雌）单倍体干细胞和大鼠孤雌（雄）单倍体干细胞都只含有一个染色体组，因此融合后的异种杂合胚胎干细胞含有2个染色体组。自然条件下，小鼠与大鼠存在生殖隔离无法进行有性杂交，该技术突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能。
【小问5详解】
由于单倍体中隐性基因出现后即会表达，故该技术培育的单倍体动物可成为研究隐性基因功能的理想细胞模型。
图中过程涉及到的基础技术有动物细胞培养技术（或早期胚胎培养技术）。
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