2022-2023学年四川省内江市六中高二下学期第一次月考生物试题含解析

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 内江六中2022-2023学年(下)高2024届第一次月考
生物学科试题
一、选择题
1. 下列有关利用葡萄酸制果酒过程的叙述，错误的是（ ）
A. 适当增加酵母菌的接种量，可以缩短发酵的时间
B. 酒精积累是导致发酵液中细菌数量降低的原因之一
C. 果酒制成后只需将装置转移至温度较高的环境中即可制作果醋
D. 葡萄的品质、酵母菌菌种的纯度都会影响果酒的品质
【答案】C
【解析】
【分析】制作果酒利用的微生物是酵母菌，它的异化作用类型是兼性厌氧型；制作果醋利用的微生物是醋酸菌，它的异化作用类型是需氧型。
果酒制作的原理：在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。 方程式:C₆H₁₂O₆2C₂H₅OH+2CO₂
醋酸菌在30-35℃有氧条件下糖源充足时，将葡萄糖分解成醋酸；糖源缺乏时，将乙醇变成乙醛再变成醋酸。
【详解】A、若适当增加酵母菌的接种量，则可以缩短发酵的时间，A正确；
B、酵母菌无氧呼吸产生酒精，酒精具杀菌作用，发酵液中酒精积累是细菌数量降低的原因之一，B正确；
C、醋酸菌是需氧菌，且果醋发酵温度高于果酒发酵温度，因此果酒制成后需将装置转移至温度较高并且通入氧气的环境中才可制作果醋，C错误；
D、葡萄的品质、酵母菌菌种的纯度都会影响酵母菌的发酵过程，进而影响果酒品质，D正确。
故选C。
2. 《齐民要术》记载了一种称为“动酒酢（“酢”同“醋”）法”的酿醋工艺：“大率酒一斗，用水三斗，合瓮盛，置日中曝之。七日后当臭，衣（指菌膜）生，勿得怪也，但停置，勿移动，挠搅之。数十日，醋成”。下列有关叙述错误的是（　　）
A. 该方法的原理是醋酸菌在缺少糖源时可将乙醇最终转化为乙酸
B. 加水的目的是对酒进行稀释，避免酒精浓度过高杀死醋酸菌
C. “衣”位于变酸的酒表面，是由原酒中的酵母菌大量繁殖形成的
D. 挠搅有利于酒精与醋酸菌充分接触，还可以增加溶液中的溶解氧
【答案】C
【解析】
【分析】参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型，果醋制作的原理：
（1）当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的葡萄糖分解成醋酸；
（2）当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。
【详解】A、该方法依据的原理是醋酸菌在氧气、糖源不足时将酒精（乙醇）转化为醋酸（乙酸），A正确；
B、加水的目的是对酒进行稀释，避免高浓度酒精导致醋酸菌失水过多死亡，B正确；
C、“衣”位于变酸的酒表面，是由原酒中的醋酸菌大量繁殖形成的，C错误；
D、搅拌有利于酒精与醋酸菌充分接触，还可以增加溶液中的溶解氧，利于醋酸菌进行醋酸发酵，D正确；
故选C。
3. 蓝莓富含花青素，对人体有增强视力、消除眼睛疲劳、消脂减肥、解酒护肝等功效。利用蓝莓可生产蓝莓果汁、蓝莓酒、蓝莓醋、蓝莓果酱等。下列叙述正确的是（ ）
A. 蓝莓酒发酵过程中应严格控制无菌条件，并定时通入无菌空气
B. 在制作蓝莓醋时，干热灭菌后的果酒需冷却后才能接种醋酸杆菌
C. 在制作蓝莓果汁时，果胶酶可破坏蓝莓细胞壁提高果汁产量
D. 制作蓝莓酒和蓝莓醋时所需控制的最适温度相同
【答案】C
【解析】
【分析】果酒制作的原理是利用酵母菌无氧呼吸分解有机物产生酒精和CO2，酒精发酵时需控制无氧环境；果醋制作的菌种是醋酸杆菌，是一种好氧细菌，属于原核生物，新陈代谢类型为异养需氧型，果醋发酵时需通入无菌空气。
【详解】A、蓝莓酒发酵所需的菌种是酵母菌，利用其在无氧条件下产生酒精进行发酵，该过程中应严格控制无菌条件和无氧环境，A错误；
B、在蓝莓酒基础上制作蓝莓醋时，对果酒不需干热灭菌，以避免杀死菌种，B错误；
C、植物细胞壁的成分主要是纤维素和果胶，在制作蓝莓果汁时，果胶酶可破坏蓝莓细胞壁提高果汁产量，C正确；
D、制葡萄酒时将温度控制在18~30 ℃，制葡萄醋时将温度控制在30~35℃，D错误。
故选C。
4. 图是探究果酒果醋发酵的装置示意图。下列叙述错误的是（ ）

A. 用于探究果醋发酵时，打开阀a，转动搅拌器有利于提高产量
B. 打开阀b，经管口3可取样检测酒精和二氧化碳的产生情况
C. 用于探究果酒发酵时，发酵前要对整个装置进行气密性检查
D. 改变通入气体的种类，可以研究呼吸作用类型对发酵的影响
【答案】B
【解析】
【分析】据图分析：阀a是控制充气口充气的，制备果酒，后期应该关闭充气口，醋酸发酵时连接充气泵充入无菌空气；阀b是控制发酵液的取样的，管口2连接的是排气口，酒精发酵时用来排出二氧化碳。
【详解】A、醋酸菌为需氧菌，因此用于探究果醋发酵时，需要打开阀a通入氧气，转动搅拌器可增加溶氧量以及增加醋酸菌与营养物质的接触，有利于提高产量，A正确；
B、发酵过程产生的CO2可通过管口2排出，因此通过管口3不能检测CO2，B错误；
C、用于探究果酒发酵时，发酵前要对整个装置进行气密性检查，防止氧气进入影响酵母菌发酵，C正确；
D、改变通入气体的种类，例如分别通入氮气和氧气，可研究无氧呼吸和有氧呼吸对发酵的影响，D正确。
故选B。
5. 腐乳是我国民间传统发酵食品，营养丰富味道鲜美。下列有关叙述错误的是（ ）
A. 若所选豆腐块的含水量过少，会使发酵后的腐乳口感较硬
B. 腐乳营养丰富的原因是大分子物质经发酵作用分解成小分子物质
C. 腐乳制作过程中，所需的条件是温度为15~18℃并保持一定湿度
D. 不同风味的腐乳制作方法不同，如红方腐乳是因加入红色素而呈红色
【答案】D
【解析】
【分析】1.腐乳的制作原理
（1）腐乳的发酵在多种微生物的协同作用下进行，其中起主要作用的是毛霉，它是一种丝状真菌，新陈代谢类型是异养需氧型。
（2）毛霉等微生物产生的蛋白酶可以将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可以将脂肪水解成甘油和脂肪酸。
2.注意的问题
（1）腐乳发酵中杂菌的控制
①事先用馒头放在温暖潮湿处培养毛霉，当馒头上长出青点（青霉菌落）、黄点（黄曲霉菌落）、红点（红曲霉菌落）时，及时用镊子和解剖针剔除，保留白毛让其生长黑色孢子。
②消毒：将豆腐块加热，杀死表面的微生物，防止其他微生物的干扰。
③接种：将上述馒头上的孢子弹在豆腐块上，并用灭菌后的食品袋罩上，放在适宜的温度下培养。
（2）腐乳制作所需豆腐的含水量及意义：豆腐含水量以70%为宜。毛霉为异养需氧型真菌，若含水量过高，影响毛霉的有氧呼吸，豆腐不宜成块；若含水量过少，则不利于毛霉的生长，毛霉的代谢也离不开水。
（3）配制卤汤时酒量的控制：加酒的目的之一是杀死微生物。如果过少，达不到杀死微生物的目的，导致豆腐腐败；若过多，不但杀死了微生物，而且会因酒精度过高抑制了酶的活性，从而影响腐乳的成熟，同时还会因酒精含量过高而影响腐乳的风味。一般应控制在12%左右。
【详解】A、若所选豆腐块的含水量过少，会使发酵后的腐乳口感较硬，A正确；
B、腐乳营养丰富的原因是大分子物质经发酵作用分解成小分子物质，B正确；
C、腐乳制作过程中，所需的条件是温度为15～18℃并保持一定湿度，C正确；
D、红方腐乳因加入红曲而呈红色，D错误。
故选D。
6. 老坛酸菜古称菹，《周礼》中就有其名。北魏的《齐民要术》中更是详细介绍了祖先用白菜(古称菘)等原料腌渍酸菜的多种方法。2022年3.15消费者权益日曝光的“土坑酸菜” 由于制作过程中操作不规范导致其中含有的杂质较多，给食品安全留下隐患。下列说法正确的是（ ）
A. 腌制酸菜主要是利用植物体表面天然的醋酸菌在无氧环境中进行发酵
B. 腌制的酸菜“咸而不酸”的原因很可能是加入食盐过多，抑制了菌种发酵
C. 酸菜要尽快食用，以免腌制发酵时间过长导致亚硝酸盐含量增加
D. “土坑酸菜”发酵过程中可以添加一定量的抗生素抑制杂菌生长，防止其腐败变质
【答案】B
【解析】
【分析】泡菜（酸菜）的制作原理：在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。发酵过程中，亚硝酸盐先增加，然后下降至相对稳定。
【详解】A、制作酸菜所用微生物是乳酸菌 ，其代谢类型是异养厌氧型，在无氧条件下，分解葡萄糖产生乳酸 ，A错误；
B、“咸而不酸”的原因为加盐过多，使乳酸菌生长的环境溶液浓度过高，使乳酸菌失水，抑制了乳酸菌的发酵，B正确；
C、发酵初期，由于硝酸盐还原菌的作用使亚硝酸盐增加；发酵中期，硝酸盐还原菌受抑制，部分亚硝酸盐被分解含量下降；发酵后期，硝酸盐含量下降至相对稳定，通常在腌制泡菜的第10天食用，亚硝酸盐含量较少，C错误；
D、乳酸菌属于细菌，抗生素能够杀死或抑制乳酸菌的生长，D错误。
故选B。
7. 下列有关泡菜的制作和亚硝酸盐含量的测定的实验叙述中，正确的是（ ）
A. 将新鲜蔬菜与煮沸冷却的盐水(盐和清水的质量比为10:1)混匀装瓶
B. 发酵过程始终要保持密封状态，泡菜坛盖边缘的水槽中要装水
C. 在酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应形成玫瑰红色沉淀
D. 泡菜坛内有时会长一层白膜，是大量乳酸菌聚集在发酵液表面形成一层白膜
【答案】B
【解析】
【分析】泡菜发酵的实验原理：（1）乳酸菌在无氧条件下，将糖分解为乳酸。（2）利用乳酸菌制作泡菜的过程中会引起亚硝酸盐的含量的变化。温度过高，食盐用量不足10%、腌制时间过短，容易造成细菌大量繁殖，亚硝酸盐含量增加。一般在腌制10天后，亚硝酸盐的含量开始下降。（3）测定亚硝酸盐含量的原理：在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料，与已知浓度的标准显色液目测比较，估算泡菜中亚硝酸盐含量。
【详解】A、泡菜制作中应先加蔬菜，再加盐水，A错误；
B、由于乳酸菌的严格厌氧的，因此发酵过程始终要保持密封状态，泡菜坛盖边缘的水槽中要始终装满水，B正确；
C、在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料，C错误；
D、在泡菜制作过程中，泡菜发酵液的营养丰富，其表面往往含有适量的氧气，适合酵母菌生长繁殖，成膜酵母生长繁殖会在泡菜坛液面的形成一层白膜，D错误。
故选B。
8. 测定泡菜中亚硝酸盐的含量的实验中，正确的是（ ）
A. 随发酵进行，亚硝酸盐含量逐渐增加，用比色法可进行亚硝酸盐含量的测定
B. 测定时所用提取剂的作用是增加亚硝酸盐的溶解度
C. 将显色后的样品与已知浓度的标准显色液进行目测比较，可以准确算出泡菜中亚硝酸盐的含量
D. 在制备泡菜样品处理液时，对滤液起到净化作用的是氢氧化铝和氯化镉溶液
【答案】B
【解析】
【分析】测定亚硝酸盐含量的原理：在酸性条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应，再与N—1—萘基乙二胺盐酸盐反应形成玫瑰红色染料。与已知浓度的标准显色液目测比较，估算泡菜中亚硝酸盐含量。
【详解】A、随着发酵进行，亚硝酸盐含量先增加后减少，用比色法可进行亚硝酸盐含量的测定，A错误；
B、测定泡菜中亚硝酸盐的含量实验中氯化镉和氯化钡作为提取剂，其作用是提取样品处理液中的大分子有机杂质，增加亚硝酸盐溶解度，B正确；
C、在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与 N-1- 萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料，将显色反应后的样品与已知浓度的标准显色液进行目测比较，可以大致估算出泡菜中亚硝酸盐的含量，C错误；
D、测定亚硝酸盐的方法是将样品液的颜色与标准显色液进行比色，如果样品液中有其他色素颗粒就会影响对比效果，所以需净化样品液，而净化时需加入的是氢氧化铝溶液，因为氢氧化铝有吸附脱色的效果，不是氯化镉溶液，D错误。
故选B。
9. 下列关于传统发酵技术的叙述，错误的是（ ）
A. 传统发酵技术制葡萄酒必须添加酵母菌菌种
B. 制作果醋时，必须向发酵装置不断地补充空气，以保证醋酸菌的生长
C. 制作腐乳时，加盐腌制可使豆腐块变硬且能抑制杂菌生长
D. 腌制的酸菜不酸且发酵液表面出现了一层菌膜，其原因可能是密封不严
【答案】A
【解析】
【分析】1、传统的发酵技术制葡萄酒的菌种来自葡萄皮表面的野生型酵母菌。
2、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型；泡菜制作的菌种为乳酸菌，代谢类型为异养厌氧型。
【详解】A、用传统的发酵技术制葡萄酒时，菌种是来自葡萄皮表面的野生型酵母菌，不需要添加酵母菌菌种，A错误；
B、由于用作果醋制作的醋酸菌是好氧菌，因此制作果醋时，必须向发酵装置不断地补充无菌空气，以保证醋酸菌的生长，B正确；
C、在腐乳的制作中，加盐腌制的目的是析出豆腐中的水分，使豆腐块变硬，并可以抑制杂菌的生长，C正确；
D、若腌制的酸菜不酸且发酵液表面出现了一层菌膜，菌膜是由产膜酵母产生的，最可能原因是发酵瓶密封不严导致漏气造成的，D正确。
故选A。
10. 有关果酒、果醋、腐乳、泡菜制作的叙述，正确的是（ ）
A. 制作果酒和果醋的菌种细胞结构不同，细胞呼吸类型相同
B. 控制好温度、pH既有利于目的菌的繁殖，也可抑制杂菌的生长
C. 果酒、果醋、腐乳及泡菜中的乳酸都是微生物无氧呼吸的产物
D. 腌制泡菜的早期有一些气体产生，需定期拧松盖子排出
【答案】B
【解析】
【分析】1.参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型，果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸；
2.腐乳制作的原理：毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸。
【详解】A、参与果酒制作的微生物是酵母菌，属于真核生物，其呼吸类型是兼性厌氧型，而参与果醋制作的微生物是醋酸菌，属于原核生物，其呼吸类型是需氧型，A错误；
B、控制好温度、pH既有利于目的菌的繁殖，也可抑制杂菌的生长，B正确；
C、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其代谢类型是异养兼性厌氧性，参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其代谢类型是异养需氧型，参与腐乳制作的微生物主要是毛霉，其代谢类型是异养需氧型，参与泡菜制作的微生物是乳酸菌，其代谢类型是异养厌氧型，C错误；
D、泡菜腌制过程中的主要菌种是乳酸菌，其发酵过程中没有气体生成，且泡菜制作需要无氧环境，不需要拧松盖子，D错误。
故选B。
11. 关于发酵过程产物检验的叙述，正确的是（ ）
A. 果汁发酵是否产生酒精，可用溴麝香草酚蓝水溶液来检验
B. 在用比色法测定亚硝酸盐含量时，可以不必配制标准显色液
C. 检验醋酸产生的简单易行的方法是品尝或用pH试纸鉴定
D. 测定果酒、果醋的产生和亚硝酸盐的含量均可用品尝法
【答案】C
【解析】
【分析】1、酒精遇酸化的重铬酸钾溶液发生反应生成灰绿色。
2、盐酸酸化的条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化反应后，再与N﹣1﹣萘基乙二胺盐酸盐结合，生成玫瑰红色复合物，亚硝酸盐浓度不同，颜色深浅不同。
3、果醋生产的过程会使溶液呈现酸味或pH下降。
【详解】A、酒精遇酸化的重铬酸钾溶液发生反应生成灰绿色，果汁发酵是否产生酒精，可用酸化的重铬酸钾溶液来检验，A错误；
B、泡菜制作过程中亚硝酸盐的含量可以用比色法进行测定，需配制标准显色液，B错误；
C、果醋生产的过程会使溶液呈现酸味或pH下降，检验醋酸产生的简单易行的方法是品尝或用pH试纸鉴定，C正确；
D、亚硝酸盐无味且有毒，不能用品尝法检测其含量，D错误。
故选C。
12. 某兴趣小组用新鲜的泡菜滤液为实验材料，分离纯化乳酸菌。并查阅相关资料得到如图所示的数据。下列有关叙述中，不正确的是（ ）

A. 第3天至第5天乳酸菌种群数量保持稳定，从种群的数量特征分析，其原因是出生率等于死亡率
B. 图中第3天pH开始下降，原因是乳酸菌发酵过程中产乳酸
C. 若取第4天的新鲜泡菜滤液，用于分离纯化乳酸菌，首先需要用蒸馏水对泡菜滤液进行梯度稀释，进行梯度稀释的理由是泡菜滤液中的乳酸菌的浓度高，直接培养很难分离得到单菌落
D. 咸菜中亚硝酸盐的平均含量在7mg/kg以上，所以尽量少吃咸菜，亚硝酸盐在特定条件下会转变成亚硝胺
【答案】C
【解析】
【分析】泡菜制作过程的发酵主要是乳酸菌进行的无氧发酵。在发酵过程中产生大量乳酸，使发酵液呈酸性，可以抑制一些杂菌的生长。
泡菜在腌制的过程中，会产生亚硝酸盐。腌制时间过短、食盐用量过低、腌制温度过高都会导致泡菜中亚硝酸盐含量升高。
【详解】A、从乳酸菌数量曲线来看，第3天至第5天种群数量保持稳定，说明种群增长率约为0，因此可推知出生率约等于死亡率，A正确；
B、乳酸菌是厌氧菌，无氧呼吸过程中产乳酸，导致pH下降，B正确；
C、为避免杂菌污染，梯度稀释操作需要用无菌水，不能用蒸馏水，C错误；
D、咸菜中亚硝酸盐在人体内特定条件下，可以转变为亚硝胺，亚硝胺是致癌物质，所以建议少吃咸菜，D正确。
故选C。
13. 下列有关细菌培养的叙述，正确的是（ ）
A. 在培养基中加入青霉素可抑制真菌而促进细菌生长
B. 向液体培养基中通入氧气能促进破伤风杆菌的生长
C. 在固体培养基上长出的单个标准菌落内含多种细菌
D. 在固体培养基中接种适宜稀释度的菌液后可获得单菌落
【答案】D
【解析】
【分析】培养基的基本成分包括水、无机盐、碳源和氮源，此外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。
【详解】A、青霉素能够破坏细菌的细胞壁而抑制细菌的生长繁殖，但对真菌无明显影响，A错误；
B、向液体培养基中通入氧气能抑制破伤风杆菌的生长，因为破伤风杆菌为厌氧菌，B错误；
C、在琼脂固体培养基上长出的单个菌落是由一个细菌增殖而成的，其中只含有一种细菌，C错误；
D、当菌液稀释度足够高时，在固体培养基中接种细菌，培养后可以获得由一个细菌增殖而成的单菌落，D正确；
故选D。
14. 下列关于微生物的营养叙述，正确的是（ ）
A. CO2既是硝化细菌的碳源也是其能源
B. 将酵母菌培养在由硝酸铵、硫酸镁、氯化钙、磷酸二氢钾、必需的微量元素和水配成的营养液中，一段时间内酵母菌数量先增后减
C. 糖类和N2是乳酸菌的碳源和氮源，该生物所需的能源来自乳酸的氧化分解
D. 葡萄糖既是酵母菌的碳源也是其能源物质，但CO2一定不是酵母菌的碳源
【答案】D
【解析】
【分析】微生物培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。
【详解】A、硝化细菌属于化能合成细菌，可利用氧化氨时释放的化学能合成糖类等有机物，因此CO2只是硝化细菌的碳源，能源物质是合成的糖类等有机物，A错误；
B、将酵母菌培养在由硝酸铵、硫酸镁、氯化钙、磷酸二氢钾、必需的微量元素和水配成的养分液中，适合酵母菌繁殖，一段时间内酵母菌数量先增加后稳定，B错误；
C、乳酸菌是异养厌氧型微生物，糖类和有机酸是乳酸菌的碳源和氮源，该生物所需的能源来自糖类的氧化分解，C错误；
D、酵母菌是异养生物，葡萄糖既是酵母菌的碳源也是其能源，酵母菌不能直接利用二氧化碳，D正确。
故选D
15. 培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌、消毒方法依次是（ ）
①化学消毒  ②灼烧灭菌  ③干热灭菌  ④紫外线灭菌  ⑤高压蒸汽灭菌  ⑥巴氏消毒法
A. ⑤③②①④⑥ B. ①②③④⑤⑥
C. ⑥②③④①⑤ D. ③④②①⑥⑤
【答案】A
【解析】
【分析】1.使用强烈的理化因素杀死物体内外一切微生物的细胞、芽孢和孢子的过程称为灭菌，常用的方法有灼烧灭菌（主要适用于金属接种工具）、干热灭菌（主要适用于需要保持干燥的玻璃器具）和高压蒸汽灭菌（主要适用于培养基的灭菌）。
2.消毒是指用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体体表或内部的一部分微生物的过程。常用的方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外线或化学药物消毒法等。
【详解】培养基需用湿热灭菌（高压蒸汽灭菌）；培养皿能耐高温，需用干热灭菌；接种环可用灼烧灭菌达到迅速彻底的灭菌效果；实验操作者的双手可用化学药剂进行消毒，如用酒精擦拭双手；空气可用紫外线消毒；为不破坏其营养成分，对牛奶可采用巴氏消毒法，即A正确。
故选A。
16. 某同学在做“微生物的分离与培养”实验时，下列灭菌方法中，操作正确的是（ ）
A. 在高压蒸汽灭菌锅外层锅内加适量水，放入装有待灭菌物品的内桶，关闭排气阀，打开电源加热
B. 在干热灭菌箱灭菌结束后，立即关掉电源，打开箱门，取出物品
C. 采用紫外线照射消毒时，可在物体表面喷洒适量石炭酸等化学抑菌剂，以加强消毒效果
D. 在用灼烧法对接种环灭菌时，适当向灼烧后的接种环吹气，以加速其冷却
【答案】C
【解析】
【分析】实验室常用的灭菌方法：1、灼烧灭菌：将微生物的接种工具，如接种环、接种针或其他金属工具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌，此外，在接种过程中，试管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通过火焰燃烧来灭菌。2、干热灭菌：能耐高温的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培养皿）和金属用具等，可以采用这种方法灭菌。3、高压蒸汽灭菌：将灭菌物品放置在盛有适量水的高压蒸汽灭菌锅内，为达到良好的灭菌效果，一般在压力为100 kPa，温度为121℃的条件下，维持15～30 min。
【详解】A、在高压蒸汽灭菌锅外层锅内加适量水，放入装有待灭菌物品的内桶，打开电源加热，把锅内水加热煮沸并将其中原有冷空气彻底排出后，关闭排气阀，将锅密闭，A错误；
B、在干热灭菌箱灭菌结束后，立即关掉电源，等温度下降至室温后再打开箱门，取出物品，B错误；
C、采用紫外线照射灭菌时，可在物体表面喷洒适量石炭酸等化学抑菌剂，可以加强消毒效果，C正确；
D、在用灼烧法对接种环灭菌时，可将灼烧后的接种环接触菌种瓶内壁，以加速其冷却，D错误。
故选C。
17. 制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的过程中，关于倒平板的描述正确的是(　　)
①等培养基冷却至40℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板
②将灭过菌的培养皿放在桌面上，左手拔出棉塞
③右手拿锥形瓶，使瓶口迅速通过火焰
④用左手的拇指和食指打开皿盖
⑤右手将锥形瓶中培养基倒入培养皿，左手立即盖上皿盖
⑥等待平板冷却 5～10s，将平板倒过来放置，使皿盖在下，皿底在上
A. ①②③④ B. ④⑤⑥ C. ③⑤ D. ①②④⑥
【答案】C
【解析】
【分析】
【详解】①培养基冷却至50℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板，防止杂菌污染，①错误；
②灭过菌的培养皿放在酒精灯火焰旁的桌面上，②错误；
③右手拿锥形瓶，使瓶口迅速通过火焰，高温防止杂菌污染，③正确；
④用左手的拇指和食指打开一条稍大于瓶口和缝隙，④错误；
⑤右手将锥形瓶中培养基倒入培养皿，左手立即盖上皿盖，并通过酒精灯火焰，⑤正确；
⑥等待平板冷却5～10分钟，将平板倒过来放置，使皿盖在下，皿底在上，⑥错误。
故选C
18. 以下关于菌种保藏的叙述错误的是
A. 菌种保藏的目的是保持菌种的纯净
B. 固体斜面培养基可用于菌种的临时保藏
C. 菌种的长期保存一般采用甘油管藏
D. 由于甘油管藏菌种在-20℃条件下进行，因此对甘油可不灭菌
【答案】D
【解析】
【分析】
【详解】A、为了保持菌种的纯净，需进行菌种的保藏，A正确；
B、临时保藏的菌种一般是接种到试管的斜面培养基上，等到菌落长成后，放入冰箱低温保藏，B正确；
C、对于需要长期保存的菌种，可以采用甘油管藏的方法，C正确；
D、甘油管藏菌种是指：在3ml的甘油瓶中,装入1ml甘油后灭菌，将1ml培养的菌液转移到甘油瓶中,与甘油充分混合后,放在-20℃的冷冻箱中保存，D错误。
故选D。
【点睛】菌种保藏是一切微生物工作的基础，其目的：是使菌种被保藏后不死亡、不变异、不被杂菌污染，并保持其优良性状，以利于生产和科研应用。菌种保藏的原理：是为了达到长期保持菌种的优良特性，核心问题是必须降低菌种变异率，而菌种的变异主要发生于微生物旺盛生长、繁殖过程，因此必须创造一种环境，无杂菌污染，使微生物处于新陈代谢最低水平，生长繁殖不活跃状态。
19. 农田土壤的表层中自生固氮菌的含量比较高，将用表层土制成的稀泥浆接种到特制的培养基上培养，可将自生固氮菌与其他细菌分开。对培养基的要求是（ ）
①加抗素 ②不加抗生素 ③加氮源 ④不加氮源 ⑤加葡萄糖 ⑥不加葡萄糖
A. ①③⑤ B. ②④⑥ C. ②④⑤ D. ①④⑥
【答案】C
【解析】
【分析】自生固氮微生物属于细菌，其细胞壁的主要成分是肽聚糖，对抗生素敏感，自生固氮微生物的代谢类型是异养需氧型，是一类能够独立进行固氮的微生物，但是需单独添加碳源。
【详解】①自生固氮微生物属于细菌，其细胞壁的主要成分是肽聚糖，对抗生素敏感，①错误；
②自生固氮微生物属于细菌，对抗生素敏感，培养基不能添加抗生素，②正确；
③自生固氮微生物是一类能够独立进行固氮的微生物，培养基中可以不添加氮源，③错误；
④自生固氮微生物是一类能够独立进行固氮的微生物，培养基中可以不添加氮源，④正确；
⑤自生固氮微生物的代谢类型是异养需氧型，培养基必须添加葡萄糖作为碳源和能源，⑤正确；
⑥自生固氮微生物的代谢类型是异养需氧型，培养基必须添加葡萄糖作为碳源和能源，⑥错误。
所以，②④⑤正确，C正确。
故选C。
20. 幽门螺杆菌（含有脲酶）感染是急慢性胃炎和消化性溃疡的主要致病因素。在患者体内采集样本并制成菌液后，进行分离培养。下列有关叙述不正确的是（ ）
A. 分离纯化幽门螺杆菌时应使用以尿素为唯一氮源的培养基
B. 鉴别幽门螺杆菌时应在培养基中加入酚红指示剂和缓冲物质
C. 可用牛肉膏蛋白胨培养基做对照证明选择培养基的选择作用
D. 可采用稀释涂布平板法对幽门螺杆菌进行分离和计数
【答案】B
【解析】
【分析】1、脲酶可以将尿素分解成二氧化碳和氨气。
2、分离纯化细菌的方法：平板划线法和稀释涂布平板法。
【详解】A、幽门螺杆菌可以合成脲酶，可以利用尿素，所以分离纯化幽门螺杆菌时应使用以尿素为唯一氮源的培养基，A正确；
B、由于幽门螺杆菌在分解尿素的过程中会合成脲酶，脲酶将尿素分解成氨，使培养基碱性增强，pH升高，所以可以用检测pH的变化的方法来判断尿素是否被分解，即在培养基中加入酚红指示剂，尿素被分解后产生氨，pH升高，则该菌落周围会出现红色环带，故鉴别幽门螺杆菌时应在培养基中加入酚红指示剂，但不能加缓冲物质，B错误；
C、为了证明选择培养基的选择作用，可用牛肉膏蛋白胨培养基做对照，牛肉膏蛋白胨培养基为普通培养基，不具有选择性，如果牛肉膏蛋白胨培养基的菌落数大于选择培养基，说明选择培养基有选择作用，C正确；
D、稀释涂布平板法可以用于微生物的分离和计数，因此对幽门螺杆菌进行分离和计数可才用稀释涂布平板法，D正确。
故选B。
【点睛】
21. 2023年春节过后，新冠病毒感染的第一波高峰期已过，但正确佩戴口罩仍是预防二次感染的有效手段。某研究小组对非灭菌的一次性口罩中的微生物进行检测，通过分析微生物的种类和数量来确定口罩的合格性。部分操作如下：从口罩上剪取总量9cm2样品（体积近似1ml），剪碎后加入已灭菌的生理盐水中，定容至10mL，充分混匀，得到样液。下列说法正确的是（ ）
A. 取4个经灭菌处理的培养皿，将冷却到40℃的培养基倒入培养皿，待培养基凝固后，将平板倒置
B. 向前3个平板中分别加入1mL样液，用涂布器将样液涂布均匀
C. 第4个平板不接种样液并与前3个平板共同培养，可用于检测是否有杂菌污染
D. 若一段时间后，4个平板上长出的菌落数依次为31、42、35和0个，可计算出1cm2口罩样品中菌体数量为36个
【答案】C
【解析】
【分析】培养基要冷却到50 ℃左右时开始倒平板。温度过高会烫手，过低培养基又会凝固。
培养未接种的固体培养基是为了作为对照组，排除培养基被杂菌污染的可能。
【详解】A、40℃时琼脂已经凝固，应在培养基冷却至50℃左右时倒平板，A错误；
B、用稀释涂布平板法统计细菌数量时，为避免培养基表面的菌液出现积液，导致菌体堆积，影响分离效果，滴加到培养基表面的菌悬液的量一般不超过0．1 mL，B错误；
C、不接种样液的空白平板可用于检验试验前的灭菌是否彻底，也可检测是否有杂菌污染，C正确；
D、第4个平板没有菌落形成，说明没有杂菌污染，且前三个平板长出的菌落数均在30~300之间，说明操作中的稀释倍数（10倍）是合适的。若接种的样液是0．1 ml，则9 cm2口罩样品中菌体数量为（31+42+35）÷3÷0．1×10=3600个，则l cm2口罩样品中菌体数量为400个，D错误。
故选C。
22. 某制药厂利用地衣芽孢杆菌(一种好氧细菌)发酵生产抗生素杆菌肽，用于治疗耐青霉素的葡萄球菌感染等。近期，在杆菌肽生产过程中，出现了酵母菌污染，严重影响了杆菌肽的产量。技术人员进行了污染原因的分析，并通过系列的分离纯化，解决了酵母菌污染的问题，稳定了生产。下列有关说法错误的是（ ）
A. 地衣芽孢杆菌的培养液污染可能与通入的空气灭菌不彻底有关
B. 分离纯化地衣芽孢杆菌可使用稀释涂布平板法或平板划线法
C. 向培养基中加入青霉素(抑制细菌细胞壁形成)的方法可防止酵母菌再次污染
D. 杆菌肽是在地衣芽孢杆菌核糖体上合成的
【答案】C
【解析】
【分析】在培养过程中出现杂菌污染，有可能培养基灭菌不彻底，菌种被污染，接种培养过程中被杂菌污染。
【详解】A、地衣芽孢杆菌的培养液污染的原因很多，原料、生产环境污染、加工设备污染或清洗消毒杀菌不彻底、包装材料污染、人员卫生清洗消毒不彻底、菌种本身受到污染，都有可能是染菌原因，A正确；
B、分离微生物的方法常用稀释涂布平板法或平板划线法，因此分离纯化地衣芽孢杆菌可使用稀释涂布平板法或平板划线法，B正确；
C、根据题干信息可知，青霉素可抑制细菌细胞壁的形成，酵母菌细胞壁的成分与细菌细胞壁的成分不同，因此无法抑制酵母菌生长繁殖，C错误；
D、地衣芽孢杆菌是原核生物，具有唯一的细胞器是核糖体，杆菌肽是在地衣芽孢杆菌核糖体上合成的，D正确。
故选C。
23. 如下图所示,自来水经滤膜过滤后,转移到牛肉膏蛋白胨培养基上,适宜条件下培养48 h,染色后统计变色菌落数目为165个。下列说法正确的是 ( )

A. 若培养基含伊红—美蓝,大肠杆菌菌落呈蓝绿色
B. 自来水中大肠杆菌浓度是33个·L-1,比真实值偏大
C. 为了提高准确度,需设重复实验,但不用空白对照
D. 若培养基菌落数目大于300,可适当减少自来水量
【答案】D
【解析】
【详解】若培养基含伊红-美蓝，大肠杆菌菌落呈黑色或紫黑色有金属光泽，A错误；自来水中大肠杆菌浓度是165÷5=33个/L，由于两个或多个大肠杆菌可能长成一个菌落，因此比真实值偏小，B错误；为了提高准确度，需设重复实验，同时需要设置空白对照，C错误；若培养基菌落数目大于300，说明细菌数目较多，可适当减少自来水量，D正确。
24. 生物学是一门实验性很强的科学。下列关于生物学实验的叙述不正确的有（ ）
①为确定选择培养基的筛选功能，应设置一个接种无菌水的选择培养基作对照组
②若探究纤维素酶活性的最适温度，可设置不同的温度梯度进行空白对照
③为确定培养基是否遭受污染，应设置一个接种无菌水的培养基作对照组
④检测亚硝酸盐时，配制标准显色液不需要空白对照
A. 一项 B. 两项 C. 三项 D. 四项
【答案】C
【解析】
【分析】1、选择培养基通过改变培养基的成分、理化性质等条件，适宜目的菌生长繁殖，而此条件不适合杂菌的生长繁殖，从而达到选择目的菌种的目的。
2、探究酶活性的最适温度，实验的自变量应该为一系列温度梯度，找到酶活性最高的温度区间，再进一步缩小温度梯度，从而找到一个酶活性最高的比较小的温度范围。
3、培养基遭到污染，是指在没有人为接种任何菌种的前提下，培养基长出了菌落。
4、检测泡菜中亚硝酸盐的原理为：在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰色染料。将显色反应后的样品与已知浓度的标准液进行目测比较，可以大致估算出泡菜中亚硝酸盐的含量。
【详解】①、为确定选择培养基筛选功能，应设置完全培养基接种混杂菌种作为对照，如果选择培养基菌落数目和种类少于完全培养基，则说明其具有选择功能，①错误；
②、探究纤维素酶活性的最适温度，不同的温度梯度作为自变量，都为实验组，而不是空白对照组，②错误；
③、如果接种无菌水的培养基长出了菌落，说明培养基本身已被杂菌污染，所以设置一个接种无菌水的培养基作对照组是合理的，③正确；
④、配置标准显色液的方法为：用微量可调移液器吸取0μL，20μL，40μL，60μL，80μL，100μL，150μL的亚硝酸钠标准溶液，分别置于7支试管中，在各管中分别加入200μL对氨基苯磺酸，混匀，静置3～5min后，再分别各加入100μL N-1-萘基乙二胺盐酸盐溶液，用微量可调移液器添加蒸馏水，使各试管内总体积为5mL，混匀；其中包括空白对照组。又因为泡菜中亚硝酸盐的含量可能在0-20μL之间，所以标准显色液也需要空白对照组，④错误。
故选C。
25. 为加速我国北方冬春季秸秆原位还田的腐化过程，研究人员以冻牛粪为材料筛选出耐低温（10℃）的纤维素降解菌。相关叙述正确的是（　　）
A. 选用冻牛粪为材料与其富含纤维素及含耐低温微生物有关
B. 初筛菌种前，要利用固体培养基在37℃条件下扩大培养目标菌种
C. 用于筛选的培养基是加入刚果红染料的牛肉膏蛋白胨培养基
D. 应选择菌落直径与周围透明圈直径比值大的菌落进行纯化
【答案】A
【解析】
【分析】刚果红是一种染料，它可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物，但并不与水解后的纤维二糖、葡萄糖等发生这种反应。当我们在含有纤维素的培养基中加入刚果红时，刚果红与纤维素形成红色复合物；而当纤维素被纤维素分解菌分解后，复合物就无法形成，培养基中会出现以这些菌为中心的透明圈。
【详解】A、筛选耐低温的纤维素降解菌需要到其所生活的环境中寻找，冻牛粪中富含纤维素，有很多微生物，冻牛粪因温度低，故其内的微生物是耐低温微生物，A正确；
B、初筛菌种前，要利用液体培养基在37℃条件下扩大培养目标菌种，B错误；
C、用于筛选的培养基以纤维素为唯一的碳源的固体培养基，加入刚果红染料是鉴别作用，C错误；
D、由于刚果红染料与纤维素形成红色复合物，因此出现以因纤维素降解菌为中心的透明圈，菌落直径与透明圈直径比值越小，分解纤维素的能力越强，D错误。
故选A。
26. 淀粉酶可通过微生物发酵生产获得，生产菌株在含有淀粉的固体培养基上可释放淀粉酶分解淀粉，在菌落周围形成透明圈。为了提高酶的产量，研究人员欲利用诱变育种的方法获得能产生较多淀粉酶的菌株。下列实验步骤中不正确的是（ ）
A. 将生产菌株分为两组，实验组用一定剂量的诱变剂处理，对照组不做处理
B. 制备含水、淀粉、氮源和无机盐等成分的固体培养基，并进行灭菌处理
C. 把实验组的菌株接种于多个配制好的培养基中，同时接种对照组，相同条件下培养
D. 观察两组菌株的菌落周围是否出现透明圈，选出有透明圈的菌株即为所需菌株
【答案】D
【解析】
【分析】
【详解】A、利用诱变育种的方法获得能产生较多淀粉酶的菌株的实验中，需要设置对照组，不做任何处理，而实验组用一定剂量的诱变剂处理，A正确；
B、根据生产菌株能分解淀粉的特点，培养基需要加入水、淀粉、氮源和无机盐等成分。欲观察菌落周围形成透明圈，则培养基应该是固体培养基。为了防止杂菌污染，需要进行灭菌处理，B正确；
C、实验应该遵循单一变量原则和对照性原则，把实验组的菌株接种于多个配制好的培养基中，同时接种对照组，相同条件下培养，C正确；
D、观察两组菌株的菌落周围是否出现透明圈，选出有透明圈范围最大、最明显的菌株即为所需菌株，D错误。
故选D。
27. 纸片扩散法药物敏感实验是在涂有细菌的培养基上按照规定要求铺设浸有不同药物的纸片，培养一段时间后测量抑菌圈的大小，从而测试受试菌株对各种药物的敏感程度。下图为某一纸片扩散法药物敏感实验的结果，下列分析正确的是（ ）

A. 在图示培养基上的接种方法为平板划线法
B. 若两纸片位置相距较近，可将其中的一个纸片重新放置
C. 形成的抑菌圈较大的原因可能是受试菌株对药物较敏感
D. 不同抗生素在平板上的扩散速度不同不会对实验结果造成影响
【答案】C
【解析】
【分析】
纸片中的药物在琼脂中扩散，随着扩散距离的增加，抗菌药物的浓度呈对数减少，从而在纸片的周围形成浓度梯度。同时，纸片周围抑菌浓度范围内的菌株不能生长，而抑菌范围外的菌株则可以生长，从而在纸片的周围形成透明的抑菌圈。不同的抑菌药物的抑菌圈直径，因受药物在琼脂中扩散速度的影响而可能不同，抑菌圈的大小可以反映测试菌对药物的敏感程度。抑菌圈越大，说明该菌对此药敏感性越大，反之越小，若无抑菌圈，则说明该菌对此药具有耐药性。透明圈直径大小与药物浓度、细菌浓度有直接关系。
【详解】A、在图示培养基上菌落分布均匀，是用的稀释涂布法接种的病原菌，A错误；
B、若两纸片位置相距较近，将其中的一个纸片重新放置，曾经放置过的位置可能存留药物，对实验结果产生影响，B错误；
C、形成的抑菌圈较大说明低浓度下也能抑制受试菌的生长，可能是受试菌株对药物较敏感，C正确；
D、在平板上扩散速度慢的抗生素，形成的透明圈可能会比实际结果偏小，因此，不同抗生素在平板上的扩散速度不同会对实验结果造成影响，D错误。
故选C。
28. 突变型面包霉常需要在基本培养基上添加适当的氨基酸才能生长。现用两个氨基酸依赖型红色面包霉突变株a和b，分别接种到下面的6种培养基上，2种突变株都不能在1、3、5号培养基上生长，a、b可以分别在2、4和2、6号培养基上生长。培养基成分如下表。关于突变株a和b分别对A~I中氨基酸需求的说法正确的是（ ）
培养基
1
2
3
4
5
6
添加氨基酸
BCDF
BEFG
CFHI
DEFI
GHLJ
EHGJ

A. 两种突变株对氨基酸的需求是相同的
B. 两种突变株都需要有G氨基酸才能生长
C. 两种突变株必须同时供应3种氨基酸才能生长
D. 两种突变株都能在由4、5号两种培养基组成的混合培养基中生长
【答案】D
【解析】
【分析】突变型面包霉常需要在基本培养基上添加适当的氨基酸才能生长，据题意可知，a生长需要E、F两种氨基酸，b生长需要E、G两种氨基酸。
【详解】根据题意可知：a突变体不能在1、3、5培养基上生长，但可以在2、4培养基上生长，说明a生长需要E、F两种氨基酸，b突变体不能在在1、3、5培养基上生长，但可以在2、6培养基上生长，说明b生长需要E、G两种氨基酸，所以两种突变株都能在由4、5号的混合培养基中生长，D正确，ABC错误。
故选D。
29. 脲酶可将尿素分解为氨和二氧化碳，是常用的工具酶，一般从刀豆中提取。实验室从土壤中分离得到了能够合成脲酶、分解尿素的细菌S，并分别研究了培养液中的、和尿素浓度对细菌S脲酶产量的影响（说明：研究某一项时其他条件相同且适宜）。结果如下表。下列相关说法中正确的是（ ）
离子浓度（％）
0
0.0005
0.001
0.005
0.01
0.05
脲酶产量（u/mL）

0.02
0.056
0.067
0.28
0.36
0.08

0.031
0.21
0.28
0.31
0.37
0.085
尿素浓度（％）
0
0.2
0.4
0.6
0.8
1.0
脲酶产量（u/mL）
0
1.15
1.60
1.73
1.05
0.28

A. 脲酶在核糖体上合成，在内质网上加工使其具有活性
B. 实验结果表明培养液没有、的情况下细菌也可产生脲酶
C. 培养液不含尿素时细菌不产生脲酶，细菌产生脲酶的最适尿素浓度在0.4％—0.6％之间
D. 实验表明培养液中和对脲酶产量的影响为低浓度促进，高浓度抑制
【答案】B
【解析】
【分析】根据表格分析：影响脲酶产量的因素有两种离子的浓度、尿素浓度，且对脲酶的生成都有促进作用。与对照组相比，在一定范围内，随着培养液中Ni2+和Mn2+以及尿素浓度的增加，脲酶的产量都表现为先增加后减少，但是始终高于对照组。
【详解】A、根据题意可知，细菌也能分泌脲酶，但细菌细胞内除核糖体外没有内质网等其他细胞器，故细菌分泌的脲酶的过程与内质网无关，A错误；
B、由表格数据可知，当Ni2+ 、 Mn2+ 离子浓度为0时，细菌也可以产生脲酶，B正确；
C、表中数据表明，培养液中尿素的浓度在0.4%-0.8%之间时，脲酶的产量相对较高，说明细菌合成脲酶需要尿素诱导，尿素的最适诱导浓度在0.4%-0.8%之间，C错误；
D、实验表明：与对照组相比（离子浓度为0的一组），在实验的范围内，培养液中Ni2+和Mn2+对脲酶的影响都是促进生成，只是低浓度促进作用显著，高浓度促进作用减弱，D错误。
故选B。
30. 棉花是一种重要的经济作物，但是棉花全株含有对动物生长繁殖存在潜在危害的有毒物质——棉酚，限制了以棉花秸秆为原料来生产青贮饲料的应用。研究人员试图以棉花田的土壤为分离基质，利用以棉酚为唯一碳源的培养基，分离出高效分解棉酚的菌株。下列叙述不正确的是（　　）
A. 稀释涂布平板法或平板划线法均可用来分离纯化棉酚分解菌
B. 分离过程中所用的以棉酚为唯一碳源的培养基属于选择培养基
C. 分离过程中所用的接种工具、培养工具以及培养基都需要高压蒸汽灭菌
D. 对分离纯化得到的菌株进行计数时可采用稀释涂布平板法或显微计数法
【答案】C
【解析】
【分析】微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在线的开始部分，微生物往往连在一起生长， 随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
【详解】A、稀释涂布平板法或平板划线法均可用于接种纯化，故稀释涂布平板法或平板划线法均可用来分离纯化棉酚分解菌，A正确；
B、分离过程中所用的以棉酚为唯一碳源的培养基， 只有能分解棉酚的微生物能生长，故该培养基属于选择培养基，B正确；
C、分离过程中所用的接种工具、培养工具可以用灼烧灭菌等方法，C错误；
D、对分离纯化得到的菌株进行计数时可采用稀释涂布平板法(用于计数活菌)或显微计数法(计数时活菌和死菌一起被计数)，D正确。
故选C。
31. 下列关于微生物的培养和分离的叙述中，不正确的是（ ）
A. 细菌能在液体培养基中以二分裂方式迅速扩增中增殖
B. 灭菌的目的是消灭与培养菌竞争的杂菌
C. 噬菌体或大肠杆菌可在蛋白胨培养基上生长
D. 稀释涂布平板法分散细菌得到单菌落的效果更好
【答案】C
【解析】
【分析】1.病毒为非细胞生物，必须寄生在活细胞中，不能单独在培养基上生长繁殖。细菌为原核生物，通过二分裂的方式增殖。
2.灭菌是指用强烈的理化因素杀死物体内外的所有微生物，包括芽孢和孢子。
3.稀释涂布平板法：将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面。在稀释度足够高的菌液里，将聚集在一起的微生物分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个菌落。
【详解】A、细菌是原核生物，增殖方式通常是二分裂增殖，故能在液体培养基中以二分裂方式迅速扩增，A正确；
B、灭菌是用强烈的理化因素杀死物体内外的所有微生物，进而消灭与培养菌相竞争的杂菌，防止污染培养物，B正确；
C、噬菌体是病毒，必须寄生在活细胞中才能增殖，不能在蛋白胨培养基上生长，C错误；
D、稀释涂布法在稀释度足够高的菌液里，能将聚集在一起的微生物分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个菌落，常用来统计样品中活菌的数目，D正确。
故选C。
32. 下表为某培养基的配方，下列叙述不正确的有（ ）项
成分
蛋白胨
葡萄糖
K2HPO4
伊红
美蓝
蒸馏水
琼脂
含量
10g
10g
2g
0.4g
0.065g
1000mL
20g

①从物理性质看该培养基属于固体培养基，从用途看该培养基属于鉴别培养基
②培养基中属于碳源的物质主要是葡萄糖，属于氮源的物质是蛋白胨
③该培养基中的蛋白胨可提供特殊营养物质
④该培养基调节合适的pH和消毒后就可以接种使用
⑤该培养基可以用于培养HIV病毒
⑥该培养基可以用于大肠杆菌的鉴定，其菌落出现黑色
A. 1项 B. 2项 C. 3项 D. 4项
【答案】B
【解析】
【分析】此培养基中有琼脂，是固体培养基，伊红-美蓝可以鉴别大肠杆菌。
【详解】①从物理性质看该培养基属于固体培养基，从用途看该培养基属于鉴别培养基，①正确；
②培养基中属于碳源的物质主要是葡萄糖，属于氮源的物质是蛋白胨，②正确；
③该培养基中的蛋白胨可提供特殊营养物质，③正确；
④培养基调节合适的pH和灭菌后就可以接种使用，④错误；
⑤HIV病毒需寄生在细胞内才能存活，该培养基不可以用于培养HIV病毒，⑤错误；
⑥伊红美蓝培养基一般用来鉴定大肠杆菌，其菌落出现黑色，⑥正确。
故选B。
33. 下列关于果胶酶的叙述中，全部正确的一组是（ ）
①果胶酶是一类催化剂，可以改变反应速度
②果胶酶是果胶分解酶的简称
③果胶酶可使果胶分解成可溶性的半乳糖醛酸，使浑浊的果汁变澄清
④果胶酶能瓦解植物的细胞壁和胞间层，使榨取果汁变得容易
⑤植物、霉菌、酵母菌和细菌均能生产果胶酶，动物也能产生果胶酶
⑥组成果胶酶的基本单位是氨基酸或核苷酸
A. ①③④ B. ①②③④⑥ C. ①②③④ D. ①③④⑥
【答案】A
【解析】
【分析】果胶酶是能够分解果胶的一类酶的总称，包括多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶和果胶酯酶等，果胶酶能够分解果胶，瓦解植物的细胞壁及胞间层，使果汁变得澄清。
【详解】①酶能降低化学反应的活化能，因此果胶酶可以改变反应速度，①正确；
②果胶酶特指分解果胶的一类酶的总称，包括多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶和果胶酯酶等，果胶酶是一类酶的总称，不是特指某一种酶，②错误；
③果汁中含有大量的果胶，并且该物质不溶于水，果胶酶能够分解果胶，使果胶分解成半乳糖醛酸，使浑浊的果汁变的澄清，③正确；
④果胶是植物细胞壁以及胞间层的主要组成成分之一，因此果胶酶可以将其瓦解，④正确；
⑤产生果胶酶的生物有植物、霉菌、酵母菌和细菌等，动物不能产生果胶酶，⑤错误；
⑥果胶酶的成分是蛋白质，其组成单位只能是氨基酸，⑥错误。
故选A。
34. 关于果胶酶的探究实验，下列叙述错误的是（ ）
A. 探究果胶酶的最适温度时，需将底物和酶分别在同等温度下处理后再混合
B. 高温下酶活性降低的原理与pH低于最适导致酶活性降低的原理相同，而与pH高于最适导致酶的活性下降的原理不同
C. 探究果胶酶最适温度和最适pH实验中应严格控制果泥用量、果胶酶的用量等无关变量
D. 探究果胶酶的最适用量时果泥用量应保证一致
【答案】B
【解析】
【分析】在最适宜的温度或pH值条件下，酶的活性最高，温度和PH偏高或偏低，酶的活性都会明显降低，过酸或过碱、温度过高都会使酶的空间结构遭到破坏，使酶失活。而低温只是使酶的活性降低，酶分子结构未遭到破坏，温度升高可恢复酶活性。
【详解】A、探究果胶酶的最适温度时，需将底物和酶分别在同等温度下处理后再混合，目的是控制单一变量，其它无关变量要相同且适宜，A正确；
B、高温、过酸、过碱都会破坏酶的空间结构使酶失活，酶的活性不能恢复；因此，高温下酶活性降低的原理与pH低于最适和pH高于最适导致酶的活性下降的原理相同，B错误；
C、探究果胶酶的最适温度和最适pH实验中果泥用量、果胶酶的用量及作用时间等无关变量应该相同且适宜，C正确；
D、探究果胶酶的最适用量时，果泥用量是无关变量，应保证一致，D正确。
故选B。
35. 果胶酶能提高果汁出汁率和澄清度。为了节约成本，某工程人员在适宜的温度和pH下，利用苹果汁和一定浓度的果胶酶溶液探究果胶酶的最适用量，实验结果如下图。对实验失误可能的原因分析及改进方法都合理的是（ ）

A. 酶促反应时间不合理；延长反应时间
B. 苹果汁的用量不合理；减少用量
C. 果胶酶体积梯度不合理；增大体积梯度
D. 果胶酶用量不合理；减少用量
【答案】D
【解析】
【分析】题图分析：随着时间的推移，实验组果汁体积不发生改变，说明实验失误的原因不是酶促反应时间；提高果胶酶溶液体积，果汁体积并没有增加，说明果胶酶用量不合理，应该减少用量；从图中无法看出苹果汁的用量、果胶酶体积梯度对实验结果的影响。
【详解】A、随着时间的推移，实验组果汁体积不发生改变，说明实验失误的原因不是酶促反应时间，A错误；
B、从图中无法看出苹果汁的用量对实验结果的影响，B错误；
C、提高果胶酶溶液体积，果汁体积并没有增加，说明果胶酶用量不合理，应该减少用量，C正确；
D、从图中无法看出果胶酶体积梯度对实验结果的影响，D错误。
故选D。
36. 如图表示某研究小组在探究果胶酶的用量的实验结果。下列有关说法不正确的是（　　）

A. 在AB段限制反应速率的主要因素是酶的用量
B. 在BC段限制反应速率的因素是温度、pH、反应物浓度
C. 在AC段增加反应物浓度，可以明显加快反应速率
D. 在该实验给定条件下，果胶酶的最佳用量是B点对应的值
【答案】C
【解析】
【分析】分析曲线图可知，自变量是酶的用量，因变量是酶促反应速率。OB段表示随着酶用量的增加，反应速率加快；BC段表示随着酶用量的增加，反应速率不再加快。
【详解】在AB段，限制反应速率的主要因素是酶的用量，故A正确；在BC段，限制反应速率的因素有温度、pH、反应物浓度等，故B正确；在AB段，限制反应速率的主要因素是酶的用量，增加反应物浓度，反应速率不会明显加快，在BC段，随着酶用量的增加，反应速率不再加快，此时反应物浓度为限制因素之一，故增加反应物浓度，反应速率会加快，故C错误；在BC段，超过B点后，酶的用量增加也不会影响反应速率，所以果胶酶的最佳用量是B点对应的值，故D正确；故选C。
37. 下列关于各种酶作用的叙述，不正确的是（ ）
A. 纤维素酶是一种复合酶，能特异性水解纤维素形成葡萄糖
B. 加酶洗衣粉中酶不是直接来自生物体的，是经过酶工程改造的产品，酶稳定性强
C. 脲酶是一类能将尿素分解成铵盐的酶的统称
D. 酶的活性可以用单位时间、单位体积反应物的减少或者底物的增加量表示
【答案】C
【解析】
【分析】
1.纤维素的单体是葡萄糖，纤维素酶能够将纤维素分解为葡萄糖。纤维素酶是一种复合酶，包括C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶。纤维素分解菌可以用刚果红染液进行鉴别，能够产生透明圈的菌落就是纤维素分解菌。
2.酶活性是指酶催化一定化学反应的能力。酶活性的高低可以用在一定条件下，酶所催化的某一化学反应的反应速度来表示，酶反应速度用单位时间内、单位体积中反应物的减少量和产物的增加量来表示。
【详解】A、纤维素酶是一种复合酶，包括C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶，能将纤维素水解形成葡萄糖，A正确；
B、加酶洗衣粉中酶不是直接来自生物体的，是经过酶工程改造的产品，酶稳定性强，因而可以保存较长时间，可随时使用，B正确；
C、尿素分解菌合成的脲酶能将尿素分解成氨和二氧化碳，C错误；
D、酶的活性是指酶催化一定化学反应的能力，可以用单位时间、单位体积反应物的减少或者底物的增加量表示，D正确。
故选C。
【点睛】
38. 为了探究 W 酶的去污效能，研究性学习小组利用都加了 W 酶，但 含量略有差异的 X、Y、Z 三种不同的洗衣粉进行了相关实验，结果如图。下列叙述不科学的是（　　）


A. W 酶对污布类型 2 的去污力最强
B. 同类型的加酶洗衣粉对不同的污布去污力有差异
C. X、Y 分别对污布 1、2 的去污效果不同，原因不止是 W 酶的含量
D. 该实验各组都应在适宜温度下进行
【答案】A
【解析】
【分析】1、探究实验需要遵循对照原则和单一变量原则。
2、分析题图：若不考虑是否加酶，图中自变量有三种，即洗衣粉的种类、污布的种类及酶用量。
【详解】A、虽然污布类型2中加酶的去污力最高，原因有两个，一是W酶的作用，二是洗衣粉的作用，不能说明W酶对污布类型2的去污力最强，A错误；
B、根据2、3组分析可知同类型的加酶洗衣粉对不同的污布去污力有差异，B正确；
C、X、Y分别对污布1、2的去污效果不同，原因不止是W酶的含量，还有污布的种类，C正确；
D、酶的活性受温度的影响，实验实验各组都应在适宜温度下进行，D正确。
故选A。
39. 下图是针对某加酶洗衣粉的相关实验，其中说法错误的是

A. 加酶洗衣粉中，应用最广泛、效果最明显的是碱性蛋白酶和碱性脂肪酶
B. 该实验的目的是为了检验洗衣粉中是否加入了蛋白酶
C. 图示实验存在二处明显的错误，实验结果不能令人信服
D. 若 A 组中蛋白膜消失，则此加酶洗衣粉不能用于洗涤丝绸及棉纤维类衣物
【答案】D
【解析】
【分析】加酶洗衣粉指含有酶制剂的洗衣粉，常用的酶制剂是蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶。
【详解】目前，应用最广泛、效果最明显的酶制剂是碱性蛋白酶和碱性脂肪酶，A正确；该实验可以鉴定洗衣粉中是否加入了蛋白酶，B正确；图中涂上蛋白膜的胶片大小不同，洗衣粉的量不同，会影响实验结果，C正确；若 A 组中蛋白膜消失，则此加酶洗衣粉含蛋白酶，不能用来洗涤丝绸衣服，棉纤维衣物主要成分是纤维素，可以用该洗衣粉洗涤，D错误。故选D。
40. 下列关于探究不同加酶洗衣粉对某种污渍洗涤效果的实验，叙述错误的是（　　）
A. 探讨含有蛋白酶洗衣粉的洗涤效果不能选择丝绸作为洗涤材料
B. 洗涤材料应该选择固定大小的新布料以保证科学实验的严谨
C. 实验的观察指标可以是相同洗涤时间内不同污渍的残留程度
D. 污渍的污染程度可以通过滴加在洗涤材料上污染物的量来控制
【答案】C
【解析】
【分析】酶的特性：（1）酶具有高效率的催化能力；其效率是一般无机催化剂的107-1013倍。（2）酶具有专一性。（每一种酶只能催化一种或一类化学反应。）（3）酶的作用条件较温和：需要适宜的温度、pH。（在最适宜的温度和pH条件下，酶的活性最高。低温抑制酶的活性，酶的空间结构没有遭到破坏，温度升高活性可恢复。过酸、过碱或温度过高，会使酶的空间结构遭到破坏，使酶永久失活。）
【详解】A、丝绸作为洗涤材料主要成分是蛋白质，故探讨含有蛋白酶洗衣粉洗涤效果不能选择丝绸作为洗涤材料，A正确；
B、做实验，无关变量保持相同且适宜，故洗涤材料应该选择固定大小的新布料以保证科学实验的严谨性，B正确；
C、本实验的自变量是洗衣粉的种类，污渍属于无关变量，应该是相同的，实验的观察指标可以是相同洗涤时间内相同污渍的残留程度，C错误；
D、污渍的污染程度要保持一致，这可以通过滴加在布料上的污染物的量来控制，D正确。
故选C。
二、非选择题
41. 回答下列有关微生物应用的问题。
（1）利用酵母菌发酵生产果酒时，为尽快得到更多果酒，首先要将淀粉类原料糖化为葡萄糖，在这个过程中，除需要添加相应酶制剂外，还需要控制温度，原因是酶___。
（2）利用酵母菌发酵产生的果酒进一步发酵得到果醋时，除需要加入醋酸菌外，还需要调整的两个环境条件是___，给予适宜的条件，即使没有经过严格的灭菌过程，也能够获得果酒、果醋，这是因为___。
（3）利用毛霉腌制腐乳时，要随着豆腐层的加高而增加盐的用量，原因是___；卤汤中酒的含量应控制在12%左右，原因是___.在泡菜的腌制过程中，要注意控制腌制的条件，如___等(答出3点即可)，若条件不适，容易造成细菌的大量繁殖，亚硝酸盐含量增加。
【答案】（1）在最适温度条件下催化能力最强
（2） ①. 通入氧气、温度为30-35℃ ②. 酵母菌、醋酸菌的发酵产物会抑制其他微生物的生长
（3） ①. 盐可抑制微生物生长，越接近瓶口，杂菌污染的可能性越大 ②. 酒精含量过高，腐乳成熟时间延长；酒精含量过低，不足以抑制微生物生长，豆腐腐败 ③. 腌制的时间、温度和食盐用量
【解析】
【分析】1、酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，无氧条件下，进行酒精发酵，培养温度一般为18~30°C。
2、醋酸菌是一种好氧细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动，其最适生长温度为30~35°C。
【小问1详解】
由酶的特性可知，酶催化化学反应需要适宜的温度，且在最适温度时酶的催化能力最强，因此利用酵母菌发酵生产果酒时，除需要添加相应酶制剂外，还需要控制温度。
【小问2详解】
酵母菌属于异养兼性厌氧菌，最适温度为18~30°C，果酒发酵时利用的是酵母菌的无氧呼吸，醋酸是异养需氧菌，最适温度为30~35°C，因此除需要加入醋酸菌外，还需要调整的两个环境条件是通入氧气，温度为30~35°C。酵母菌无氧发酵产生的酒精和醋酸菌的发酵产生的醋酸均能抑制其他微生物的生长，因此给予适宜的条件，即使没有经过严格的灭菌过程，也能够获得果酒、果醋。
【小问3详解】
盐可抑制微生物生长，越接近瓶口杂菌污染的可能性越大，因此要随着豆腐层的加高增加盐的用量，在接近瓶口的表面盐要铺厚一些，以有效防止杂菌污染。酒精含量的高低与腐乳后期发酵时间的长短有很大关系，一般控制在12%左右，酒精含量越高，对蛋白酶的抑制作用也越大，使腐乳成熟期延长；酒精含量过低，蛋白酶的活性高，加快蛋白质的水解，杂菌繁殖快，豆腐易腐败，难以成块。在泡菜的腌制过程中，要注意控制腌制的时间、温度和食盐的用量，温度过高、食盐用量不足10%、腌制时间过短，容易造成细菌大量繁殖，亚硝酸盐含量增加。
42. 桂圆也称龙眼，是一种药食两用的水果。科研团队比较了5种酵母菌（3种酿酒酵母，2种非酿酒酵母）对桂圆果浆的发酵效果，并从中选择适宜的菌种进行发酵，以期得到品质更好的桂圆果酒。生产桂圆果酒的工艺流程如图所示。回答下列问题：
新鲜桂圆去皮去核→桂圆果肉→打浆→调酸 →酶解→调糖→接种→发酵→过滤
（1）在发酵流程中没有对材料的清洗环节，清洗时正确的操作应该是____________，该操作的目的是____________。
（2）酶解的过程是在调酸物料中加入质量分数为0.2%的果胶酶，该酶是分解果胶的一类酶的总称，包括多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶、果胶酯酶等，加入该酶的作用是____________。
（3）下表中表示5种酵母（Y1-SY果酒活性干酵母；Y2-RW果酒活性干酵母；Y3-葡萄酒高活性干酵母；Y4-耐高温高活性干酵母；Y5-生香活性干酵母）发酵的桂圆果酒品质（总酯与果酒的香味有关），根据表可得出的结论是酿酒酵母主要完成____________，非酿酒酵母可将原料中的物质转化为____________从而提高了果酒的甜度。从中选择____________两种酵母菌作为桂圆果酒发酵优良菌种。
酵母
酒精度/%vol
总糖/（g/L）
总酸/（g/L）
总酯/（g/L）
感官评分/分
Y1
13.4
1.3
6.8
0.19
72
Y2
13.1
2.4
6.4
0.18
67
Y3
13.3
1.6
6.2
0.15
64
Y4
12.6
3.4
8.1
0.11
62
Y5
11.0
8.5
7.6
0.38
74

（4）酵母菌添加量过少时，发酵时间将会____________（“变长”或“变短”）；酵母菌添加量过多时，酒精度、总酯含量都较低的原因是___________（答两点）。
【答案】（1） ①. 在桂圆去皮去核之前进行清洗 ②. 防止去皮去核后清洗造成的杂菌污染
（2）分解果胶、瓦解细胞壁和胞间层，增加果汁的出汁率和澄清度
（3） ①. 酒精发酵 ②. 总糖 ③. Y1、Y5
（4） ①. 变长 ②. 酵母菌的大量繁殖消耗反应体系中的营养物质、酵母菌产生的代谢产物对酵母菌的生长和果酒风味的形成有抑制作用
【解析】
【分析】果酒的制作需要利用酵母菌发酵，20℃左右最适合酵母菌繁殖，酒精发酵时一般将温度控制在18-25℃。在缺氧、呈酸性的发酵液中，酵母菌可以生长繁殖，而绝大多数其他微生物都因无法适应这一环境而受到抑制。
果胶是植物细胞壁以及胞间层的主要组成成分之一，它是由半乳糖醛酸聚合而成的一种高分子化合物，不溶于水。在果汁加工中，果胶不仅会影响出汁率，还会使果汁浑浊。果胶酶能够分解果胶，瓦解植物的细胞壁及胞间层，使榨取果汁变得容易，而果胶分解成可溶性的半乳糖醛酸，也使得浑浊的果汁变得澄清。果胶酶并不特指某一种酶，而是分解果胶的一类酶的总称，包括多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶和果胶酯酶。
【小问1详解】
为防止去皮去核后清洗造成的杂菌污染，所以应该在在桂圆去皮去核之前进行清洗。
【小问2详解】
细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，果胶酶可以分解果胶、瓦解细胞壁和胞间层，增加果汁的出汁率和澄清度，所以需要加入果胶酶。
【小问3详解】
酿酒酵母主要完成酒精发酵；非酿酒酵母（Y4和Y5）中总糖含量较高，可将原料中的物质转化总糖，从而提高了果酒的甜度，从表格中可以看出，Y5将原料中的物质转变为糖类能量较强，Y1中酒精度数较高，说明产酒能力强，说明选择Y1和Y5两种酵母菌作为桂圆果酒发酵优良菌种。
【小问4详解】
酵母菌添加量过少时，发酵时间将会变短；酵母菌添加量过多时，由于酵母菌的大量繁殖消耗反应体系中的营养物质、酵母菌产生的代谢产物对酵母菌的生长和果酒风味的形成有抑制作用，所以酒精度、总酯含量都较低。
【点睛】本题主要考查果酒的制作的知识，需要分析表格中的数据，找到酿酒酵母和非酿酒酵母的关系进行综合分析解答。
43. 某课题组拟从牛瘤胃中分离出纤维素分解菌，实验流程如下:
①从屠宰场获取新鲜瘤胃液，短暂离心后过滤。
②将滤液接种到含有羧甲基纤维素钠和染色剂A的培养基上进行培养。
③将从步骤②获取的目标菌落接种到以滤纸条为唯一碳源的培养基中，摇床悬浮培养5天，观察滤纸的崩解效果。
④取崩解效果最好的几片滤纸，将上面的菌种接种到固体培养基上，观察菌落生长情况。回答下列问题:
（1）染色剂A为___。纤维素酶一种复合酶，一般认为它至少包括_______三种组分。
（2）步骤③中，应选择步骤②中___的菌落进行接种，适宜的培养温度应该接近于___。从基质状态上划分，步骤③所使用的培养基是___。
（3）根据步骤④的实验结果，课题组得出牛瘤胃中有多种纤维素分解菌的结论，支持他们结论的实验结果应该是___。
（4）步骤④得到多种纤维素分解菌后，如何进一步分离纯化？请写出简要的实验思路。_______________。
【答案】（1） ①. 刚果红 ②. C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酸
（2） ①. 透明圈直径与菌落直径比值最大 ②. 37℃（或牛的体温） ③. 液体培养基
（3）出现了多种不同特征(形状、大小、颜色等)的菌落
（4）分别挑取步骤④中不同特征的菌落，用平板划线法(稀释涂布平板法)分别接种到固体培养基上培养，得到单菌落。
【解析】
【分析】牛本身不能分解植物茎叶中的纤维素，牛的瘤胃中含有与牛共生的纤维素分解菌可以分解纤维素。实验流程①获得瘤胃液，其中含有纤维素分解菌及其他杂菌，②在以羧甲基纤维素钠为唯一碳源的培养基上，其他微生物缺少碳源受抑制，纤维素分解菌可正常生长，用刚果红染色法将其鉴别出来，③滤纸条的主要成分为纤维素，即进一步在以纤维素为唯一碳源的选择培养基上选择培养，增加目的菌浓度，④观察菌落情况。
【小问1详解】
流程②使用了羧甲基纤维素钠作为唯一碳源，只有能够分解纤维素的微生物才能在该选择培养基上生存，所以流程②的目的是筛选鉴别纤维素分解菌，鉴别方法为刚果红染色法，故染色剂A是刚果红；纤维素酶一般包括C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶三种。
【小问2详解】
步骤③为扩大培养，增加目的菌浓度，应该选择步骤②中透明圈直径与菌落直径比值最大的菌落进行接种，并在接近牛胃中的温度约37℃条件下进行培养。从基质状态上划分，步骤③用到摇床悬浮培养，摇动可使液体培养基中营养物质分布均匀，因此所使用的培养基是液体培养基。
【小问3详解】
不同种的纤维素分解菌在培养基上形成的菌落，特征不同（如形状、大小、颜色等不同）；因此，如果步骤④的实验结果是培养基中出现了多种不同特征的菌落，可以得出牛瘤胃中有多种纤维素分解菌的结论。
【小问4详解】
分离纯化微生物，是将混合的菌种分散开，得到由单个细胞繁殖而来的单菌落。本题应分别挑取步骤④中不同特征的菌落，用平板划线法（稀释涂布平板法）将混合菌种分散开，分别接种到固体培养基上培养，得到单菌落，即得到了纯化。
44. β-苯乙醇是具有令人愉悦的玫瑰香味的高级芳香醇，广泛用于食品和日化用品等生产领域。化学合成β-苯乙醇会产生多种杂质，而植物萃取则周期长、成本高，因此采用微生物合成天然β-苯乙醇是工业化新趋势。研究小组从玉米胚芽粕和玉米皮等淀粉加工下脚料及其肥料堆放的土壤中筛选可耐受高浓度β-苯乙醇的酵母菌株(YDF-1)，实验过程如图所示。回答下列问题:

（1）该实验需制作多种培养基，这些培养基的配方不同，但一般都含有水、无机盐、___等物质，灭菌后的培养基再添加相应浓度的β-苯乙醇。由实验目的可知，初筛、复筛及再次复筛的培养基中，添加的β-苯乙醇的浓度应___(填“保持不变”或“逐渐增大”或“逐渐降低”)，理由是___。
（2）若取稀释倍数为104的0.1mL的稀释液涂布到培养基后培养至菌落稳定，计算得出每毫升菌液中含4.5×106个菌体，则在该稀释倍数下的平均菌落数是___个。将初筛获得的菌株进行液体培养，其目的是___。
（3）若选用葡萄糖作为碳源，为确定YDF-1增殖的最佳浓度，请设计一个较为简便的实验进行探究，实验设计思路是___。
【答案】（1） ①. 碳源、氮源 ②. 逐渐增大 ③. 只有将培养基中β-苯乙醇的浓度逐渐增大，才能筛选得到可耐受高浓度β-苯乙醇的酵母菌株
（2） ①. 45 ②. 增加目的菌株浓度
（3）设置一系列浓度梯度的葡萄糖溶液，再向其中分别接种等量的YDF-1，每天定时用血细胞计数板统计溶液中的菌体数量，增殖效果最佳的葡萄糖溶液即为YDF-1增殖的最佳浓度
【解析】
【分析】培养基是指供给微生物、植物或动物（或组织）生长繁殖的，由不同营养物质组合配制而成的营养基质。一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐（包括微量元素）、维生素和水等几大类物质。
【小问1详解】
培养基一般都含有水、无机盐、碳源和氮源等物质，以满足生物生长的需求；由于本实验的目的是获得可耐受高浓度β-苯乙醇的酵母菌株，只有将培养基中β-苯乙醇的浓度逐渐增大，才能筛选得到可耐受高浓度β-苯乙醇的酵母菌株，因此实验初筛、复筛和再次复筛时培养基中添加的β-苯乙醇浓度要逐渐增大。
【小问2详解】
根据计算公式：（平均菌落数）÷涂布体积×稀释倍数=每毫升菌液中的菌体数，可知：（平均菌落数）÷0．1mL×104=4．5×106个，所以平板上的平均菌落数是45个；液体培养是指将微生物直接接种于液体培养基中，并不断振荡或搅拌，可以增加目的菌株浓度，迅速得到大量繁殖体。
【小问3详解】
由实验目的可知，该实验的自变量是葡萄糖溶液的浓度，因变量是YDF-1的增殖情况，可通过显微镜直接计数这一简便的方法来确定其增殖情况，因此实验的设计思路是设置一系列浓度梯度的葡萄糖溶液，再向其中分别接种等量的YDF-1，每天定时用血细胞计数板统计溶液中的菌体数量，增殖效果最佳的葡萄糖溶液即为YDF-1增殖的最佳浓度。
45. 果胶酶是分解果胶一类酶的总称，包括多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶和果胶酯酶等，常用于果汁的生产。
（1）果胶酶用于果汁生产，是因为它能分解果胶——植物______________(结构)的主要组成成分之一，可解决________________问题。
（2）为探究温度对果胶酶活性的影响，某同学设计实验方案如下：
操作流程：制备苹果泥和果胶酶溶液→果胶酶与苹果泥混合水浴一段时间→过滤果汁→测量果汁体积(在不同的温度下同时进行以上实验)

温度梯度：－30℃、0℃、20℃、40℃、60℃、80℃、100℃
问：该实验方案有无不当之处，如有请补充说明?？_____________。该实验是否需要另外再增设对照组，为什么？______________。
（3）在最适温度和最适pH条件下，测得烧杯内葡萄糖的产生量与反应时间的关系如图，请在图中分别画出温度提高5℃和酶量提高1倍时的葡萄糖产生量曲线。
【答案】（1） ①. 细胞壁和胞间层　 ②. 果肉出汁率低和果汁浑浊等
（2） ①. ①在果胶酶与苹果泥混合前应使两者在同一温度条件下水浴保温；②温度梯度过大，可设置温度为10℃、20℃、30℃、40℃、50℃和60℃等，也可以以5℃作为温度梯度 ②. 不需要。实验的不同温度梯度之间可以相互对照
（3）
【解析】
【分析】果胶酶能够分解果胶，瓦解植物的细胞壁及胞间层，使榨取果汁变得容易，而果胶分解成可溶性的半乳糖醛酸，也使得浑浊的果汁变得澄清。果胶酶并不特指某一种酶，而是分解果胶的一类酶的总称，包括多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶和果胶酯酶。
【小问1详解】
果胶是细胞壁和胞间层的组成成分，果胶酶能瓦解果胶，使得果胶分解，瓦解细胞壁以及产物溶于水，因此可以解决果肉出汁率低和果汁浑浊等问题。
【小问2详解】
由于本实验是探究温度对果胶酶活性的影响，自变量为温度，因此在果胶酶与苹果泥混合前应使两者在同一温度条件下水浴保温，这样才能保证反应的时候是设置的那个温度。温度梯度为-30℃、0℃、20℃、40℃、60℃、100℃，梯度过大，可缩小温度梯度；该实验的不同温度梯度之间可形成相互对照，无需对照实验。
【小问3详解】
应温度提高5℃，超过最适温度，酶的活性下降，反应速度减慢，所用时间延长，但不改变反应平衡点。酶量调高1倍，反应速度加快，所需时间减少，但不改变平衡点，故图为：