2023阜阳临泉一中（高铁分校）高二下学期第三次月考生物含解析

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高铁中学2022-2023学年度月考试卷
高中生物
一、单选题
1. 下列关于实验中颜色的叙述，正确的是（ ）
A. 在新鲜的梨汁中加入斐林试剂，混匀后会生成砖红色沉淀
B. 将酸性重铬酸钾溶液加入密封的酵母菌培养液中，溶液颜色由蓝变绿再变黄
C. 用纸层析法分离绿叶中的色素时，滤纸条最上方的颜色为橙黄色
D. 将二苯胺试剂加入溶解有DNA的溶液后，呈现蓝色
【答案】C
【解析】
【分析】本题考查还原糖的检测、酒精的检测、分离绿叶中的色素、DNA的检测等实验中的颜色相关知识。
【详解】A、斐林试剂检测还原糖，混匀后需要水浴加热才会生成砖红色沉淀，A错误；
B、酸性重铬酸钾溶液用于检测酒精，颜色由橙色变灰绿色，B错误；
C、用纸层析法分离绿叶中的色素时，滤纸条最上方的色素为胡萝卜素，颜色为橙黄色，C正确；
D、将二苯胺试剂加入溶解有DNA的溶液后，需要沸水浴加热才会呈现蓝色，D错误。
故选C。
2. 如图为受精作用及胚胎发育示意图，a、b代表两个发育时期，下列叙述正确是（ ）

A. 受精卵的遗传物质一半来自精子
B. a、b分别表示原肠胚和囊胚
C. 受精卵发育为桑葚胚的过程是在透明带内完成的，孵化后进入a阶段
D. ②过程细胞的数量在不断增加，但细胞的体积在不断减小
【答案】D
【解析】
【分析】①为受精作用，②为卵裂期，③④均为有丝分裂，a是囊胚，b是原肠胚。
【详解】A、受精卵细胞核中的遗传物质一半来自精子，一半来自卵细胞，细胞质遗传物质主要来自卵细胞，A错误；
B、a是囊胚，b是原肠胚，B错误；
C、受精卵发育为桑葚胚的过程是在透明带内完成的，桑葚胚继续分裂变为囊胚，囊胚进一步分裂，导致透明带破裂，这一过程称为孵化，孵化后进入b阶段，C错误；
D、②过程为卵裂期，其特点是细胞的数量在不断增加，但细胞的体积在不断减小，D正确。
故选D。
3. 动物细胞培养是动物细胞工程的基础技术。下列不属于动物细胞培养的必要条件是（ ）
A. 生长素 B. 抗生素 C. 血清 D. 无机盐
【答案】A
【解析】
【分析】动物细胞培养是动物细胞工程技术的基础，需要满足的条件为：无菌、无毒；营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质；适宜的温度和PH；气体环境：95%空气(细胞代谢必需的)和5%的CO2。
【详解】动物细胞培养条件：(1)无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物。(2)营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。(3)适宜的温度和PH。(4)气体环境：95%空气(细胞代谢必需的)和5%的CO2，综上，BCD正确，A错误。
故选A。
4. 下图为平板划线法接种微生物的示意图，下列说法错误的是（ ）

A. 观察或比较各种细菌菌落形态的最佳区域是④
B. 划线时要注意不能将④区域的划线与①区域相连
C. 每次划线后，都应将接种环放在酒精灯火焰上灼烧
D. 划线结束时即可看到划线末端出现不连续单菌落
【答案】D
【解析】
【分析】1、平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。
2、平板划线操作的注意事项：（1）第一次划线及每次划线之前都需要灼烧接种环灭菌。（2）灼烧接种环之后，要冷却后才能伸入菌液，以免温度太高杀死菌种。（3）划线时最后一区域不要与第一区域相连。（4）划线用力大小要适当，防止用力过大将培养基划破。
【详解】A、④区域的划线与①区域没有相连，根据箭头方向，可知④区域是最后划线区域，由于随着在平板上连续划线，菌体数量越来越少，故观察或比较各种细菌菌落形态的最佳区域是④，A正确；
B、划线时要注意不能将④区域的划线与①区域相连，才能达到分离的效果，B正确；
C、图中所示的4次划线后，都应将接种环放在酒精灯上灼烧，其中前三次划线结束后的灼烧是为了杀死上次划线后接种环上残留的菌种，使下次划线的菌种直接来源于上次划线的末端，使每次划线菌种数目减少，最后一次灼烧是为了杀死接种环上残存的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者，C正确；
D、划线结束后，将培养皿倒置放在一定温度的恒温培养箱中培养一定时间后，可看到划线末端出现不连续单菌落，D错误。
故选D。
5. 英国纯血马是世界顶级马术比赛的常用马种，其数量少、生育力低。利用胚胎工程技术能有效提高英国纯血马的生育效率。下列相关说法正确的是（ ）
A. 卵母细胞需培育至MⅠ中期才具备与精子受精的能力
B. 可选择健康、繁殖能力强的普通马作为胚胎移植受体
C. 原肠胚前的每一个细胞都具有发育成完整胚胎的潜能
D. 胚胎早期发育至桑葚胚时期逐渐开始分化
【答案】B
【解析】
【分析】胚胎发育的过程包括卵裂期、桑葚期、囊胚期、原肠胚等时期。
卵裂期：在透明带内进行；特点为有丝分裂，细胞数量不断增加，但胚胎总体积并不增加，或略有缩小。
桑葚期：胚胎细胞数目达到32个左右时，胚胎形成致密的细胞团，形似桑椹。这一阶段前的每一个细胞都具有完整胚胎的潜能,属于全能细胞。
囊胚期：细胞开始出现分化（该时期细胞的全能性仍比较高）。聚集在胚胎一端个体较大的细胞称为内细胞团，沿透明带展开和排列，个体较小的细胞,称为滋养层细胞。将来发育成胎儿的各种组织。中间的空腔称为囊胚腔。
原肠胚：有了三胚层的分化，具有囊胚腔和原肠腔。
【详解】A、卵母细胞需培育至MⅡ中期才成熟，因此只有在MⅡ中期才具备与精子受精的能力，A错误；
B、普通马与纯血马属于同一物种，可选择健康、繁殖能力强的普通马作为受体，B正确；
C、胚胎发育到囊胚前的每个细胞都具有发育成完整胚胎的潜能，C错误；
D、囊胚期细胞开始逐渐分化，并不是在桑椹胚期，D错误。
故选B。
6. “三亲婴儿”的培育过程的技术流程如下图，相关叙述正确的是（ ）

A. 该培育过程涉及动物细胞培养、细胞核移植、体外受精等技术
B. 三亲婴儿的染色体全部来自母亲提供的细胞核
C. 卵母细胞捐献者的红绿色盲基因能够传递给“三亲婴儿”
D. 将精子放入一定浓度的肝素溶液中是为了让精子获得能量
【答案】A
【解析】
【分析】由图可知，“三亲婴儿”的培育过程涉及动物细胞培养（图中卵母细胞和重组细胞的培养）、细胞核移植（母亲卵母细胞的核移入捐献者去核卵母细胞中）、体外受精以及胚胎移植等技术。
【详解】A、由图可知，“三亲婴儿”的培育过程涉及动物细胞培养（图中卵母细胞和重组细胞的培养）、细胞核移植（母亲卵母细胞的核移入捐献者去核卵母细胞中）、体外受精以及胚胎移植等技术，A正确；
B、三亲婴儿的染色体来自两个亲本，即父亲和母亲，B错误；
C、捐献者携带的红绿色盲基因位于其细胞核内，而捐献者给三亲婴儿提供的是卵母细胞的细胞质，故卵母细胞捐献者的红绿色盲基因不能够传递给“三亲婴儿”，C错误；
D、将精子放入一定浓度的肝素溶液中是为了让精子“获能”即具备受精的能力，而非获得能量，D错误。
故选A。
7. 茶树有较强的富集氟（F-）的能力，根系细胞富集F-需要细胞膜上ABC转运蛋白的参与。用2，4-DNP阻断ATP的合成或施加Cl-，都会显著降低茶树根系细胞对F-的转运吸收。下列说法错误的是（ ）
A. 给茶树松土，有利于根系从土壤中吸收F-
B. Cl-可能与F-竞争ABC转运蛋白的结合位点
C. 根系细胞内的F-浓度远低于土壤溶液中的
D. 根系细胞ABC转运蛋白合成后需要囊泡运输
【答案】C
【解析】
【分析】转运蛋白可以分为载体蛋白和通道蛋白两种类型，载体蛋白只容许与自身结合部位相适应的分子或离子通过，而且每次转运时都会发生自身构象的改变；通道蛋白只容许与自身通道的直径和形状相适配、大小和电荷相适宜的分子或离子通过，分子或离子通过通道蛋白时，不需要与通道蛋白结合。
【详解】A、植物吸收无机盐的方式是主动运输，该过程需要消耗细胞呼吸提供的能量，给茶树松土，可以提高细胞呼吸，有利于根系从土壤中吸收F-，A正确；
B、分析题意可知，根系细胞富集F-需要细胞膜上ABC转运蛋白参与，用2，4-DNP阻断ATP的合成或施加Cl-，都会显著降低茶树根系细胞对F-的转运吸收，据此推测Cl-可能与F-竞争ABC转运蛋白的结合位点，B正确；
C、分析题意可知，根系细胞能够富集F-，而生物富集是指生物体从周围环境吸收、积蓄某种元素或难以降解的化合物，使其 在机体内浓度超过环境浓度的现象，据此推测根系细胞内的F-浓度高于土壤溶液中的，C错误；
D、ABC转运蛋白属于大分子物质，其合成后需要囊泡运输，D正确
故选C。
8. 藏羚羊是中国特有物种，属于国家一级保护动物，由于栖息地的破坏和盗猎导致其数量急剧减少。为拯救濒临灭绝的藏羚羊，国家建立了可可西里、羌塘自然保护区，近些年来，保护区藏羚羊的数量明显增多。下列相关叙述错误的是（　　）
A. 可可西里保护区内的所有藏羚羊构成一个种群
B. 藏羚羊的低出生率与雌性个体容易被捕猎者捕杀有关
C. 随着保护力度的加大我国藏羚羊种群数量呈“J”形增长
D. 藏羚羊作为食物链上的重要环节对维持生态平衡具有重要作用
【答案】C
【解析】
【分析】1、生物的多样性：生物圈内所有的植物、动物和微生物，它们所拥有的全部基因以及各种各样的生态系统，共同构成了生物多样性。生物多样性包括基因多样性、物种多样性和生态系统多样性。
2、生物多样性的保护措施：（1）就地保护（自然保护区）：就地保护是保护物种多样性最为有效的措施。（2）易地保护：如建立动物园、植物园，易地保护是就地保护的补充，它为行将灭绝的物种提供了最后的生存机会。（3）利用生物技术对生物进行濒危物种的基因进行保护。如建立精子库、种子库等。（4）利用生物技术对生物进行濒危物种进行保护。如人工授精、组织培养和胚胎移植等。
【详解】A、种群指在一定时间内占据一定空间的同种生物的所有个体，故可可西里草原上的藏羚羊属于一个种群，A正确；
B、性别比例影响了出生率，所以藏羚羊的低出生率与雌性个体容易被捕猎者捕杀有关，B正确；
C、随着保护力度的加大我国藏羚羊种群数量呈“S”形增长，C错误；
D、藏羚羊作为食物链的一个重要环节，对维持生态平衡具有重要作用，这体现了生物多样性的间接价值，D正确。
故选C。
9. 下图是利用体细胞核移植技术克隆优质奶牛的简易流程图，有关叙述正确的是（　　）

A. 后代丁遗传性状由甲和丙的遗传物质共同决定
B. 过程①需要提供95%空气和5%CO2的混合气体
C. 过程②常使用显微操作去核法对受精卵进行处理
D. 过程③将激活后的重组细胞培养至原肠胚后移植
【答案】B
【解析】
【分析】分析图解：图示过程为体细胞克隆过程，取乙牛体细胞，对处于减数第二次分裂中期的卵母细胞去核，然后进行细胞核移植；融合后的细胞激活后培养到早期胚胎，再进行胚胎移植，最终得到克隆牛。
【详解】A、后代丁的细胞核的遗传物质来自甲，细胞质的遗传物质来自于乙牛，则丁的遗传性状由甲和乙的遗传物质共同决定，A错误；
B、动物细胞培养中需要提供95%空气（保证细胞的有氧呼吸）和5%CO2（维持培养液的pH）的混合气体，B正确；
C、过程②常使用显微操作去核法对卵母细胞进行处理，C错误；
D、过程③将激活后的重组细胞培养至囊胚或桑椹胚后移植，D错误。
故选B。
【点睛】
10. 下表为四种限制酶所识别的核苷酸序列及相应的切割位置(箭头所指)，下列叙述正确的是（ ）
限制酶种类
序列及切点
限制酶种类
序列及切点
①: EcoR I

③: Bgl II

②: BamH I

④: Not I


A. ①②③④可催化磷酸二酯键和氢键断裂，形成黏性末端
B. ①切出的 DNA 片段，只有用 E.coli 连接酶才能连接起来
C. ②、③切出的末端连接后形成的片段，不能再被②或③识别切割
D. 构建基因表达载体时，用②、③进行双酶切，可防止目的基因与载体的反向连接
【答案】C
【解析】
【分析】限制性核酸内切酶是基因工程中切割DNA分子的工具，能识别双链DNA分子的特定序列，并使每一条链中特定部位的磷酸二酯键断开。
【详解】A、①②③④均为限制酶，可催化磷酸二酯键的断裂，不能催化氢键的断裂，且均形成黏性末端，A错误；
B、①切出的 DNA 片段，带有黏性末端，用 E.coli 连接酶和T4DNA连接酶均能连接起来，B错误；
C、②、③切出的黏性末端相同，用DNA连接酶连接后形成的片段的碱基序列为-GGATCT-，因而不能再被②或③识别切割，C正确；
D、构建基因表达载体时，用②、③进行双酶切，不能防止目的基因与载体的反向连接，因为这两种限制酶切出的黏性末端是相同的，D错误。
故选C。
11. 下列关于PCR技术的叙述，正确的是（ ）
A. 利用DNA复制原理，通过变性、复性和延伸三个步骤可扩增DNA或mRNA
B. PCR反应缓冲溶液中一般要含有Mg2+，以激活耐高温的DNA聚合酶的活性
C. 模板DNA和引物能在每一次扩增中重复使用
D. 在分子水平上，可通过PCR技术检测Bt基因是否翻译成Bt抗虫蛋白
【答案】B
【解析】
【分析】PCR原理：在高温作用下，打开DNA双链，每条DNA单链作为母链，以4种游离脱氧核苷酸为原料，合成子链，在引物作用下，DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链，即DNA的合成方向是从子链的5'端自3'端延伸的。实际上就是在体外模拟细胞内DNA的复制过程。DNA的复制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能从3′端延伸DNA链。
【详解】A、PCR是一项体外扩增DNA的技术，该技术可通过变性、复性和延伸三个步骤扩增DNA，但不能扩增mRNA，A错误；
B、PCR过程中需要耐高温的DNA聚合酶，反应缓冲液中一般要添加Mg2+来激活耐高温的DNA聚合酶，B正确；
C、模板DNA能在每次扩增中重复使用，引物不能重复使用，C错误；
D、检测Bt基因是否翻译成Bt抗虫蛋白需要用抗原-抗体杂交实验进行鉴定，D错误。
故选B。
12. 下列关于植物细胞工程的相关叙述，错误的是（　　）
A. 可利用茎尖分生组织培养脱毒苗，使植株抗病毒的能力得到提高
B. 单倍体育种和突变体育种的原理是不一样的
C. 可以通过植物细胞培养获得酚类、萜类等植物生长非必需的次生代谢产物
D. 可利用培养的愈伤组织进行诱变育种，工厂化生产的细胞产物也是来自愈伤组织细胞
【答案】A
【解析】
【分析】1、植物组织培养过程是：离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织，然后再分化生成根、芽，最终形成植物体。植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性，属于无性生殖。
2、由糖类、氨基酸等初生代谢产物通过次生代谢过程产生的有机物称为次生代谢产物，包括帖类、酚类和生物碱等。
【详解】A、茎尖等分裂旺盛部位无病毒感染，所以利用茎尖分生组织培养出无病毒且保持优良性状的脱毒幼苗，但不抗毒，A错误；
B、单倍体育种的原理是染色体数目变异，突变体育种的原理是基因突变，B正确；
C、次生代谢产物是由次生代谢产生的一类细胞生命活动或植物生长发育正常运行的非必需的小分子有机化合物，因此可以通过植物细胞培养获得酚类、萜类等植物生长非必需的次生代谢产物，C正确；
D、愈伤组织细胞分裂旺盛，诱导易产生突变，可利用培养的愈伤组织进行诱变育种，工厂化生产的细胞产物也是来自愈伤组织细胞，D正确。
故选A。
13. 下图为不同限制性核酸内切膀识别的序列及切割位置（箭头所指），下列叙述错误的是（ ）

A. 图示4种限制性核酸内切酶均不能够识别和切割RNA分子内的核苷酸序列
B. 若DNA上的碱基随机排列，Not I限制性核酸内切酶切割位点出现频率较其他三种限制性核酸内切酶高
C. 酶切时使用两种限制酶同时处理是为了防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化
D. 用酶Bgl II切出的目的基因与酶BamH I切割的质粒重组后，则不能再被这两种酶切开
【答案】B
【解析】
【分析】1、常用的运载体：质粒（质粒是一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外并具有自我复制能力的双链环状DNA分子）、噬菌体的衍生物、动植物病毒。
2、作为运载体必须具备的条件：①要具有限制酶的切割位点； ②要有标记基因（如抗性基因），以便于重组后重组子的筛选；③能在宿主细胞中稳定存在并复制；④是安全的，对受体细胞无害，而且要易从供体细胞分离出来。
3、天然的质粒不能直接作为载体，基因工程中用到的质粒都是在天然质粒的基础上进行过人工改造的。
【详解】A、酶具有专一性，限制酶是专门切割DNA序列中一定部位的酶，所以图示4种限制性核酸内切酶均不能够识别和切割RNA分子内的核苷酸序列，A正确；
B、由于Not I限制性核酸内切酶识别的序列比其他三种酶的序列长，若DNA上的碱基随机排列，Not I限制性核酸内切酶切割位点出现频率较其他三种限制性核酸内切酶低，B错误；
C、两种不同的限制酶可产生不同的黏性末端，所以使用两种限制酶同时处理是为了防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化，C正确；
D、用酶BglⅡ切出的目的基因与酶BamHⅠ切割的质粒重组后，重组DNA分子序列为，6个脱氧核苷酸对序列既不能被限制酶BglⅡ识别，也不能被BamHⅠ识别，所以不可能被这两种酶切开 ，D正确。
故选B。
14. 抗体—药物偶联物(ADC)通过采用特定技术将具有生物活性的小分子药物连接到能特异性识别肿瘤细胞的单克隆抗体上，实现对肿瘤细胞的选择性杀伤。ADC的结构及其发挥作用的机理如图所示，下列有关说法错误的是（ ）

A. 单克隆抗体制备过程中通常将免疫后得到的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合
B. 用96孔板培养和多次筛选杂交瘤细胞后，在体外大规模培养可获得单克隆抗体
C. ADC通过抗体与细胞膜上的受体特异性结合，以主动运输的方式进入肿瘤细胞
D. ADC在肿瘤细胞里被溶酶体裂解，释放药物，使肿瘤细胞死亡
【答案】C
【解析】
【分析】分析题图，抗体药物偶联物(ADC) 通过将具有生物活性的小分子药物与单克隆抗体结合，被肿瘤细胞特异性识别，通过胞吞的方式进入肿瘤细胞，导致溶酶体裂解，释放药物，实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤。
【详解】A、效应B细胞能够分泌抗体，但是不具有增殖能力，而骨髓瘤细胞具有无线增殖的能力，因此利用动物细胞融合技术将效应B细胞和骨髓瘤细胞融合成杂交瘤细胞，杂交瘤细胞既能无限增殖，又能产生特异性抗体，利用该细胞制备单克隆抗体，A正确；
B、单克隆抗体制备过程中至少经过两次筛选，一次是用特定的选择培养基进行筛选，获得杂交瘤细胞，杂交瘤细胞还需进行克隆化培养和抗体检测，即用96孔板培养和多次筛选杂交瘤细胞后，就可获得既能无限增殖，又能分泌特异性抗体的杂交瘤细胞，B正确；
C、由题图可知，ADC进入肿瘤细胞是胞吞的方式，C错误；
D、ADC通过胞吞的方式进入肿瘤细胞，溶酶体使其裂解，释放药物，实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤，D正确。
故选C。
15. 酵母菌的品质影响葡萄酒的产量和质量，研究人员为分离出产酒精能力强的酵母菌菌株，进行了如图Ⅰ所示实验，甲、乙、丙、丁锥形瓶内分别加入100mL完全培养基，下列说法正确的是（ ）

A. 在传统葡萄酒发酵过程中，为避免污染发酵装置需严格灭菌
B. 用稀释涂布平板法计算出葡萄酒过滤液的活菌数为6.8×106个/L，此数值可能低于实际的活菌数
C. 对培养基进行灭菌的方法是高压蒸汽灭菌法，菌种接种过程中的试管口、瓶口等无需再灼烧灭菌
D. 由图Ⅱ可知，丙瓶出现的原因可能是培养瓶密封不严，丁组酵母菌产酒精能力比乙强
【答案】D
【解析】
【分析】果酒制作过程中的相关实验操作：材料的选择和处理→灭菌→榨汁→发酵。利用葡萄皮表面野生型酵母菌在缺氧的环境下发酵产酒精。若对菌液计数，需选取菌落数处于30~300的培养皿计数。平均菌落数除以涂布体积乘上稀释倍数求的是每百毫升发酵液的微生物数量，还应该再乘10算每升发酵液的微生物数。
【详解】A、在传统葡萄酒发酵过程中，利用的是葡萄皮表面的天然酵母菌，不需要严格灭菌，A错误；
B、若对菌液计数，需选取菌落数处于30~300的培养皿计数。平均菌落数除以涂布体积乘上稀释倍数求的是每毫升发酵液的微生物数量，还应该再乘1000算每升发酵液的微生物数，故先求平均菌落数为（62+68+74）÷3=68，除以涂布体积0.1mL后等于680个/mL，稀释倍数为1×104，再乘1000，最后为6.8×109个/L，计数过程中两个或两个以上细胞连在一起，平板上生长出一个菌落，所以数目偏小，B错误；
C、培养基灭菌采用高压蒸汽灭菌，玻璃器皿、接种用具可采用干热灭菌，接种时的玻璃瓶口等都需在酒精灯火焰处进行灼烧灭菌，C错误；
D、乙、丙、丁挑取不同的菌落培养，丙瓶与乙、丁瓶相同条件培养，但培养液没有酒精产生，且瓶内活菌数量不低，丙瓶出现的原因可能是培养瓶密封不严，进行有氧呼吸；丁组的活菌数比乙组少，但是产生的酒精和乙组一样多，所以丁组产生酒精能力比乙强，D正确。
故选D。
二、多选题
16. 下图表示pBR322质粒和人生长激素基因所在片段的结构信息，将二者构建的重组质粒导入受体菌并进行筛选。下列叙述正确的是（ ）

注：AmpR：氨苄青霉素抗性基因，TetR：四环素抗性基因
A. 应选择的限制酶组合是酶F和酶G
B. 所选用的受体菌不能含有Amp8和TetR基因
C. 用含氨苄青霉素的培养基就能筛选出含重组质粒的受体菌
D. 同时用三种限制酶处理图中质粒，电泳后可得到3个条带
【答案】AB
【解析】
【分析】题图分析，切割目的基因和质粒最好用酶F和酶G，这样可以获得不同的黏性末端，而且目的基因的两端也具有这两种限制酶的切割位点，既避免切割后DNA片段的自身环化，又保留质粒上的标记基因，由图可知构建基因表达载体破坏了四环素抗性基因，保留了氨苄青霉素抗性基因。
【详解】A、酶E会破坏两种标记基因，为避免切割后DNA片段的自身环化，又保留质粒上的标记基因，切割时应选择的限制酶组合是酶F和酶G，A正确；
B、所选用的受体菌不能含有AmpR和TetR基因，以便于对含有目的基因的受体菌的选择，B正确；
C、重组质粒上的四环素抗性基因被破坏，而重组质粒上的氨苄青霉素抗性基因能表达，能合成对氨苄青霉素抗性的物质，故用含氨苄青霉素的培养基筛选出的有导入重组质粒的受体菌和导入原质粒的受体菌，C错误；
D、据图可知，同时用三种限制酶处理图中质粒，因酶E有两个作用位点，能将质粒切割成4个DNA片段，故电泳后可得到4个条带，D错误。
故选AB。
17. 丙肝病毒引起的丙型肝炎可导致肝脏慢性炎症坏死和纤维化，部分患者可发展为肝硬化甚至肝癌。下图为利用小鼠甲为实验材料研制丙肝病毒的单克隆抗体的实验流程。下列叙述正确的是（ ）

注：B淋巴细胞的基因型为HH，骨髓瘤细胞的基因型为SS
A. 在动物细胞培养时，培养液中除营养物质外还要添加一定量的血清、血浆
B. 图中筛选1的目的是获得杂交瘤细胞
C. 每个脾B淋巴细胞可产生多种抗体，所以需要进行细胞筛选
D. 在两两融合后基因型可能有HHSS、HHHH、SSSS
【答案】ABD
【解析】
【分析】单克隆抗体制备的过程需经过两次筛选，第一次筛选利用选择培养基，将杂交瘤细胞筛选出来，第二次经过克隆化培养和抗体检测，将能分泌特异性抗体的杂交瘤细胞筛选出来。
【详解】A、为了更好地促进动物细胞的培养，尽可能模拟细胞在体内的生活环境，培养液中除营养物质外还要添加一定量的血清、血浆，A正确；
B、融合后的体系中含有多种细胞，未融合的同种细胞，融合的具有同种核的细胞，还有杂交瘤细胞，筛选1的目的是获得杂交瘤细胞，B正确；
C、脾B淋巴细胞只能产生针对相应抗原的抗体，每个B淋巴细胞只能产生一种抗体，C错误；
D、二者的融合细胞的种类可能有B淋巴细胞+B淋巴细胞、骨髓瘤细胞+骨髓瘤细胞、骨髓瘤细胞+B淋巴细胞，基因型可能是HHHH、SSSS、HHSS，D正确。
故选ABD。
18. 如图表示培养和纯化X细菌的部分操作步骤，下列相关叙述不正确的是（ ）

A. 步骤①倒平板操作时，倒好后应立即将其倒过来放置
B. 步骤②将接种环在火焰上灼烧后迅速蘸取菌液后进行平板划线
C. 步骤③应多个方向划线，使接种物逐渐稀释，培养后出现单个菌落
D. 步骤④培养箱培养后可用来对X细菌进行计数
【答案】ABCD
【解析】
【分析】据图示可知，图示是用平板划线法进行纯化培养X细菌，①是倒平板，②是用接种环沾取菌液，③是进行平板划线，④是培养。
【详解】A、步骤①倒平板操作时，倒好后应待平板冷却凝固后再将平板倒过来放置，防止冷凝水倒流污染培养基，A错误；
B、灼烧后的接种环需在火焰旁冷却后再沾取菌液进行平板划线，B错误；
C、步骤③应按一定的方向顺序划线，使接种物逐渐稀释，培养后出现单个菌落，C错误；
D、平板划线法不能用来对X细菌进行计数，如需计数活菌数目，可用稀释涂布平板法，D错误。
故选ABCD。
19. 某课题组为得到青蒿素产量高的新品系，将青蒿素合成过程中的某一关键酶基因fps在野生青蒿中过量表达，其过程如下图所示。有关叙述正确的是（ ）

A. 也可用PCR技术直接扩增RNA来获取目的基因
B. 酶1、酶2和酶3作用的化学键都是磷酸二酯键
C 本过程中，可以采用一种、两种甚至四种酶2
D. 通过PCR技术可检测fps基因是否表达出蛋白质
【答案】BC
【解析】
【分析】分析题可知，酶1表示逆转录酶，酶2表示限制酶，酶3表示DNA连接酶，据此答题即可。
【详解】A、PCR技术不能直接扩增RNA来获取目的基因，A错误；
B、分析图可知，酶1表示逆转录酶，可以催化合成cDNA，即催化磷酸二酯键的合成；酶2表示限制酶，可以切割DNA分子中的磷酸二酯键；酶3表示DNA连接酶，可以催化DNA分子中磷酸二酯键的合成，所以酶1、酶2和酶3作用的化学键都是磷酸二酯键，B正确；
C、相同的限制酶切割产生相同的黏性末端，不同的限制酶切割可以产生相同的黏性末端，因此为了成功构建表达载体，可以采用一种、两种甚至四种酶2切割含fps基因的DNA片段和质粒a，可防止质粒和目的基因的自身环化，C正确；
D、用相应的抗体进行抗原—抗体杂交，可检测fps基因是否表达出蛋白质，D错误。
故选BC。
20. 利用基因编辑技术将病毒外壳蛋白基因导入猪细胞中，然后通过核移植技术培育基因编辑猪，可用于生产基因工程疫苗。如图为基因编辑猪培育流程，下列有关叙述错误的是（ ）

A. 采集2号猪成纤维细胞分散成单细胞，置于37℃的CO2培养箱中培养时，培养液中通常添加动物血清、蔗糖等营养成分
B. 使用梯度离心、紫外光照射和化学物质处理等方法去核时都未机械穿透卵母细胞透明带
C. 为获得更多基因编辑猪，可在胚胎移植前对胚胎进行分割，产出的基因编辑猪的性染色体来自于2号猪
D. 为检测病毒外壳蛋白基因是否被导入4号猪并正常表达，可采用PCR技术或DNA分子杂交方法检测
【答案】AD
【解析】
【分析】体细胞核移植技术是将动物一个细胞的细胞核移人去核的卵母细胞中，使这个重新组合的细胞发育成新胚胎，继而发育成动物个体的技术。
【详解】A、将2号猪的组织块分散成单个的成纤维细胞需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，该细胞的培养应在37℃含5％的CO2的恒温培养箱中进行，其中CO2的作用是维持培养液的pH，培养液中通常加入动物血清、葡萄糖等成分，早期胚胎培养的培养液一般不用蔗糖，A错误;
B、去核时使用的梯度离心、紫外光照射和化学物质处理等方法都没有穿透卵母细胞透明带或细胞膜，以保证卵母细胞的完整性，B正确;
C、利用胚胎分割技术对早期胚胎进行分割，可以获得更多的基因编辑猪；据题图分析可知，核移植的细胞核来自2号猪，因此产出的基因编辑猪的性染色体来自2号猪，C正确；
D、检测病毒外壳蛋白基因(目的基因)是否导入4号猪，可以采用DNA分子杂交法检测目的基因的序列，是否表达可用抗原-抗体杂交技术检测，D错误。
故选AD。
三、非选择题
21. 科研小组研究了某草原群落的气温和降雨量的季节性变化。发现随季节变化，该草原群落的气温变化剧烈，但与2022年相比，2021年雨季雨量充沛、年均降雨量更多，特别是7~9月份。该科研小组选取四个地块研究绵羊的放牧强度对该草地植物的影响（结果见下表）。回答下列问题：
绵羊的放牧强度
2021年
2022年
草本植物种类/种
草本植物生物量/（g·m-2）
草本植物种类/种
草本植物生物量/（g·m-2）
对照
24
110
23
61
轻度
39
180
38
115
中度
26
116
25
65
重度
13
79
13
46

（1）草地中不同种类的植物高度参差不齐，体现了群落的_____结构。推测该群落的外貌和结构随季节而变化，理由是该群落不同季节的_____差异很大。2021年的草本植物生物量明显高于2022年，主要原因是_____。
（2）据表可知，______放牧强度时，草本植物的丰富度最高。“收割理论”认为，捕食者的存在有利于增加物种多样性。请结合“收割理论”及种间关系，解释这种放牧强度下草本植物的丰富度最高的原因是______。
（3）适宜强度的放牧不会造成生态失衡，是因为生态系统具有一定的_____能力。长期重度放牧，植被破坏严重，若停止放牧并减少人类干扰，一段时间后该生态系统得以修复，这是利用了生态工程的______原理。
（4）牧草流入绵羊的能量一部分通过呼吸作用以热能的形式散失，另一部分用于_______。从能量流动的角度分析，放牧时合理确定载畜量的目的是______。
【答案】（1） ①. 垂直 ②. 温度和降雨量 ③. 2021年的水分充足，更利于草本植物生长
（2） ①. 轻度 ②. 绵羊能摄食生物量大的草本植物类型，从而避免了少数或几种草本植物占优势的现象
（3） ①. 自我调节 ②. 自生（恢复力稳定性）
（4） ①. 绵羊自身的生长、发育、繁殖 ②. 避免造成草场的退化，使畜产品的产量下降
【解析】
【分析】每一营养级（最高营养级除外）能量的去向包括：①自身呼吸消耗；②流向下一个营养级；③被分解者分解利用；④未被利用。
【小问1详解】
群落的垂直结构是指群落内部不同物种在垂直方向上的分层现象，草地中不同种类的植物高度参差不齐，体现了群落的垂直结构；群落的季节性变化表现在外貌和结构随季节变化而发生规律性变化，结合题意可知，该群落的外貌和结构随季节而变化，可能是由于该群落不同季节的温度和降雨量等差异很大；据题干信息“与2022年相比，2021年雨季雨量充沛、年均降雨量更多”，故据此推测2021年的草本植物生物量明显高于2022年，主要原因是2021年的水分充足，更利于草本植物生长。
【小问2详解】
丰富度是指群落中的物种数目，据表可知，调查年份期间，在轻度放牧时，草本植物的丰富度最高；“收割理论”认为，捕食者的存在有利于增加物种多样性，据此理论推测，在轻度放牧条件下，绵羊能摄食生物量大的草本植物类型，从而避免了少数或几种草本植物占优势的现象，从而提高了草本植物的丰富度。
【小问3详解】
由于生态系统具有一定的自我调节能力，故适宜强度的放牧不会造成生态失衡；长期重度放牧，植被破坏严重，若停止放牧并减少人类干扰，一段时间后该生态系统得以修复，这是利用了生态工程的自生原理。
【小问4详解】
牧草流入绵羊的能量属于绵羊的同化量，该部分能量一部分通过呼吸作用以热能的形式散失，另一部分用于绵羊自身的生长、发育、繁殖；生态系统的能量流动具有逐级递减的特点，若放养的牲畜如果过多，就会造成草场的退化，使畜产品的产量下降，故为避免造成上述现象，需要合理确定草场的载畜量。
22. 下图为“乙肝基因工程疫苗”生产过程图解，质粒上箭头所指部位为相应的限制酶的切割位点。质粒中lacZ基因编码产生的酶可以分解培养基中的X-gal，产生蓝色物质，使菌落呈现蓝色，否则菌落为白色。请回答下列问题：

回答下列问题。
（1）过程①选用限制酶的最佳方案是________。
A. 只有BamHI B. BamHI和EcoRI
C. EcoRV和BamHI D. EcoRV和EcoRI
（2）构建基因表达载体时，一般将目的基因插在启动子和终止子之间。启动子的作用是_____________。
（3）过程②需要先将大肠杆菌用___________处理，目的是____________________。
（4）为了筛选含目的基因表达载体的大肠杆菌，可在培养大肠杆菌的通用培养基中额外加入__________，培养一段时间后挑选出____________（填“蓝色”或“白色”）的菌落进一步培养，从而获得大量目的菌。
（5）目的基因导入受体细胞后，常用___________技术检测目的基因是否翻译出乙肝病毒外壳。
【答案】（1）B （2）RNA聚合酶识别和结合位点，驱动转录的进行
（3） ①. Ca2+ ②. 将大肠杆菌变成感受态细胞，处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态，促进感受态细胞吸收DNA分子，完成转化
（4） ①. X-gal ②. 白色 （5）抗原-抗体杂交
【解析】
【分析】基因工程基本操作程序：
1.目的基因的获取：方法有PCR、化学方法人工合成、DNA合成仪合成；
2.基因表达载体的构建：基因表达载体的组成有目的基因、启动子、终止子、标记基因、复制原点；
3.将目的基因导入受体细胞：导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、花粉管通道法、基因枪法；导入动物细胞的方法是显微注射法；导入微生物的方法：感受态细胞法；
4.目的基因的检测与鉴定：分子水平检测：DNA分子杂交检测目的基因是否插入到转基因生物的DNA上；分子杂交检测目的基因是否转录出mRNA；抗原-抗体杂交检测目的基因是否翻译出蛋白质；个体生物学水平检测：抗虫抗病接种实验等。
【小问1详解】
构建基因表达载体最佳方法是使用双酶切法处理目的基因和载体，使其产生相同的黏性末端，进而通过DNA连接酶构建基因表达载体，选择限制酶的要求是不能破坏目的基因，故不选择EcoRV，可以选择BamHI和EcoRI处理目的基因和质粒，B正确，
故选B。
【小问2详解】
启动子的作用是RNA聚合酶识别和结合位点，驱动转录的开始。
【小问3详解】
将重组质粒导入大肠杆菌中，使用钙离子（Ca2+）处理，目的是将大肠杆菌变成感受态细胞，处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态，促进感受态细胞吸收DNA分子，完成转化。
【小问4详解】
LacZ基因编码的酶可使X-gal分解，产生蓝色物质，使菌落呈现蓝色。构建基因表达载体时，目的基因的插入使LacZ基因破坏，不能表达出相应的酶，进而不能使培养基中X-gal分解，因此菌落呈现白色。
【小问5详解】
目的基因导入受体细胞后，常用抗原-抗体杂交技术检测目的基因是否翻译出乙肝病毒外壳。如果目的基因表达，是可以检测到相应的蛋白质。
23. 如图表示畜牧业生产上培育某种优良种牛的两种方法，请分析回答下列有关问题。

（1）方法Ⅰ和方法Ⅱ培育优良种牛的本质区别是方法Ⅰ涉及的生殖方式为___________生殖，方法Ⅱ涉及的生殖方式为___________生殖。
（2）过程①应用的技术是___________。克隆牛F的核基因来源于___________（填“奶牛B”“奶牛C”或“奶牛D”）。
（3）过程②常用___________处理，目的是使奶牛B___________，从奶牛B体内获得的卵母细胞需要培养到___________（时期）才能与获能的精子结合。
（4）公牛A的精子在体外完成获能，通常采用的获能液中常见的有效成分有___________（写出两种）等。在卵细胞膜和透明带的间隙能够观察到___________，可以作为卵子受精的标志。
【答案】（1） ①. 有性 ②. 无性
（2） ①. 核移植技术 ②. 奶牛C
（3） ①. 促性腺激素 ②. 超数排卵 ③. 减数第二次分裂中期（MⅡ中期）
（4） ①. 肝素、钙离子载体 ②. 两个极体
【解析】
【分析】分析题图：图示是畜牧业生产上培育某种优良种牛的两种方法。方法Ⅰ是采用体外受精技术获得试管牛E的过程，因此试管牛E属于有性生殖产物；方法Ⅱ是采用核移植技术获得克隆牛F的过程，因此克隆牛F属于无性生殖产物。
【小问1详解】
采用方法I培育试管牛时采用了体外受精技术，因此属于有性生殖；采用方法Ⅱ培育克隆动物时采用了核移植技术，因此属于无性生殖。
【小问2详解】
图中①过程采用了核移植技术；据图可知，克隆牛F的细胞核来自奶牛C的乳腺细胞，故克隆牛F的核基因来源于奶牛C。
【小问3详解】
过程②用促性腺激素处理可使B牛超数排卵，以获得更多卵子；从B牛体内获得的卵母细胞不能直接与精子结合，需要培养到减数第二次分裂中期才能与获能的精子结合。
【小问4详解】
体外受精前要对精子在人工配制的获能液中进行获能处理，将精子放在一定浓度的肝素或钙离子载体A23187获能液中处理，使得精子获能，故获能液中常见的有效成分有肝素或钙离子载体。精子和卵子受精的标志是在卵细胞膜和透明带的间隙能够观察到两个极体。
24. 日前微博传言手机细菌比马桶多，如图是央视和北京卫视通过实验展示的调查结果。回答下列相关问题：

（1）图中两电视台均采用_____法接种，接种前需要采用_____法对培养基进行灭菌。
（2）通过观察菌落的_____等特征（写2个即可），以初步鉴定手机屏幕和马桶按钮上的微生物类群。两电视台实验操作均正确且完全一致，但报道结果截然不同，最可能的原因是_____。
（3）在手机上发现的有害细菌中，最为常见的当属金黄色葡萄球菌。这种细菌可导致一系列感染，例如食物中毒和脓疱病，严重时可导致败血症。该菌有高度耐盐性，可在10%~15%的NaCl肉汤中生长，这种肉汤属于_____培养基（从物理性质和功能两方面回答）。
（4）按图操作取样面积，实验员测定某手机屏幕的细菌量，将10mL菌悬液进行梯度稀释，分别取0.1mL稀释倍数为103的样品液接种到三个培养基上，培养一段时间后，统计菌落数分别为48、50、52，则该手机屏幕的细菌数为_____个/cm2。
（5）为了有效地杀死手机上的大部分细菌，可每周用75%的酒精擦拭_____（填“灭菌”或“消毒”）。
【答案】（1） ①. 稀释涂布平板 ②. 高压蒸汽灭菌
（2） ①. 形状、大小、隆起程度和颜色等 ②. 手机的取样和马桶的取样都不相同
（3）液体选择 （4）2×105
（5）消毒
【解析】
【分析】1、消毒是指使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物。消毒方法有煮沸消毒、化学药物消毒、紫外线消毒等。
2、灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。实验室常用的灭菌方法有①灼烧灭菌、②干热灭菌、③高压蒸汽灭菌。
【小问1详解】
分析题图可知，图中两者的菌落都有均匀分布在培养基上的，故两电视台均采用了稀释涂布平板法的接种方法，接种前需要采用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌。
【小问2详解】
通过观察菌落的特征如形状、大小、隆起程度和颜色等以初步鉴定手机屏幕和马桶按钮上的微生物类群；两电视台实验操作均正确且完全一致，但报道结果截然不同，最可能的原因是手机的取样和马桶的取样都不相同。
【小问3详解】
金黄色葡萄球菌有高度耐盐性，可在10%~15%的NaCl肉汤中生长，这种肉汤是液体培养基，且其中高浓度的NaCl能起到选择作用，因此这种肉汤属于液体选择培养基。
【小问4详解】
按图操作取样面积，实验员测定某手机屏幕的细菌量，将10mL菌悬液进行梯度稀释，分别取0.1mL稀释倍数为103的样品液接种到三个培养基上，培养一段时间后，统计菌落数分别为48、50、52，菌落数的平均值是50，则该手机屏幕的细菌数为：（50÷0.1×103×10）÷（×55）=2×105（个/cm2）。
【小问5详解】
为了有效地杀死手机上的大部分细菌，可每周用75%的酒精擦拭消毒。