人教版 (2019)选择性必修3一 微生物的基本培养技术获奖ppt课件
展开向经过杀菌处理的牛奶中添加某些对人体有益的细菌,再经过发酵就可以制成酸奶。自制酸奶虽然方便,但是食用自制酸奶导致肠胃不适的事例屡见不鲜,主要原因是在制作过程中有杂菌混入。
那么?怎样才能保证无处不在的杂菌不混入发酵物中呢? 一、微生物的基本培养技术相关信息============================ 微生物是难以用肉眼观察的微小生物的统称,包括细菌、真菌、病毒及一些原生生物等。发酵工程提及的微生物主要指用于发酵的细菌和真菌。================================ 研究和应用微生物的前提是防止杂菌污染,获得纯净的微生物培养物,也是发酵工程的重要基础。
在实验室培养微生物,一方面要为人们需要的微生物提供合适的营养和环境条件;另一方面确保其他微生物无法混入,并将需要的微生物分离出来。 一、微生物的基本培养技术 (一)培养基的配制 1.概念人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长 繁殖的营养基质。 2.用途:用以培养、分离、鉴定、保存微生物或积累其代谢物。 3.种类:
不含凝固剂(如琼脂)、呈液体状态的培养基为液体培养基,呈固体状态的培养基为固体培养基。
(一)培养基的配制 4.成分 结合右图分析 ①碳源:提供碳元素的物质; ②氮源:提供氮元素的物质; ③水; ④无机盐:磷酸盐、NaCl; ⑤生长因子:维生素 不同微生物培养基的配方各不相同,在提供上述几种主要营养物质的基础上,培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及O2的需求。当然合适的培养温度也是必不可少的。 特殊营养物质:又称作生长因子,是一类微生物正常生长代谢所必需的,而且微生物不能用碳源、氮源自行合成的有机物。广义的生长因子除了维生素外,还包括碱基、生物素和烟酸等,有时还包括氨基酸营养缺陷突变株所需要的氨基酸。
在实验室培养微生物,一方面要为人们需要的微生物提供合适的营养和环境条件;另一方面确保其他微生物无法混入,并将需要的微生物分离出来。 (二)无菌技术 获得纯净的微生物培养物的关键是防止杂菌污染。 /////////无菌技术除用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外,还有什么作用?///////// 1.无菌技术的措施 ①消毒 指使用较为温和的_____、_____或_____等方法杀死物体_____或_____一部分微生物。 ②灭菌 指使用强烈的______方法杀死物体_________的微生物,包括_____和_____。
能有效避免操作者被微生物感染。
(二)无菌技术 2.无菌技术的操作内容 对操作的_____、操作者的_____和___进行清洁和消毒;将用于微生物培养的_____、_________和_______等进行灭菌。 3.无菌技术的操作方法 常用的消毒方法有_____消毒、_____消毒等;灭菌方法有_____灭菌、_____灭菌和_____灭菌等。
(三)微生物的纯培养 1.几个基本概念 ①培养物 接种于培养基内,在合适条件下形成的含特定种类微生物的群体。 ②纯培养物 由单一个体繁殖所获得的微生物群体。 ③纯培养 获得纯培养物的过程。包括配制培养基、灭菌、接种、分离和培养等步骤。
酵母菌的纯培养 目的要求 1.学会配制培养酵母菌的培养基并倒平板 2.学会进行无菌操作 3.尝试通过平板划线操作来获得纯化的酵母菌菌落 材料用具(略) 方法步骤 1.制备培养基 ⑴配制培养基 去皮马铃薯200g,切成小块,加水1000mL,加热煮沸至马铃薯软烂,用纱布过滤。向滤液中加入20g葡萄糖(也可用蔗糖代替)、15~20g琼脂,用蒸馏水定容至1000mL。
酵母菌的纯培养 方法步骤 1.制备培养基 ⑵灭菌 将配制好的培养基转移到锥形瓶中,加棉塞,包上牛皮纸,并用皮筋勒紧,再放入高压蒸汽灭菌锅中,在压力为100kPa、温度为121℃的条件下,灭菌15~30min。将5~8套培养皿包成一包,用几层牛皮纸包紧,放入高压蒸汽灭菌锅内,本实验所用器具也一并放入灭菌。 思考1.牛皮纸有何作用? 在灭菌时能避免因水蒸汽凝结而浸湿棉塞;在取出盛有培养基的锥形瓶时也能起到隔绝空气中杂菌的作用。
酵母菌的纯培养 方法步骤 1.制备培养基 ⑶倒平板 待培养基冷却至50℃左右时,在酒精灯火焰附近倒平板。 思考2.为什么培养基灭菌后要冷却到50℃左右时开始倒平板? 琼脂是一种多糖,在98℃以上熔化,在44℃以下凝固,倒平板时高于50℃会烫手,低于50℃时,若不及时操作,琼脂会凝固。 思考3.倒平板的过程中,若不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位,这个平板还能用来培养微生物吗?为什么? 不能,因为空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生。 思考4.平板冷凝后,为什么要将平板倒置? 防止皿盖上的水珠落入培养基,造成污染,又可以使培养基中的水分较快地蒸发。
酵母菌的纯培养 方法步骤 2.接种和分离酵母菌 通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。经数次划线后培养,可以分离得到单菌落。 思考5.接种前灼烧接种环的目的是什么?以后为什么每次划线前都要灼烧接种环? 接种前灼烧接种环的目的是避免接种环上可能存在的微生物污染培养物。以后每次划线前都要灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种,使下一次划线时接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端。 思考6.为什么每次划线操作总是从上一次划线的末端开始? 划线后末端含有的微生物数目较少,每次从上一次划线的末端开始划线能够使微生物的数目随划线次数的增加而减少,最终分散成单个细胞。
酵母菌的纯培养 方法步骤 2.接种和分离酵母菌 思考7.为什么最后一次划线与第一次划线不能相连? 最后一次划线通常已经将微生物稀释成单个的细胞,如果与第一次划线相连则增加了微生物的数目,得不到纯化的效果。 3.培养酵母菌 完成平板划线后,待菌液被培养基吸收,将接种后的平板和一个未接种的平板倒置,放入28℃左右的恒温培养箱中培养24~48h。 思考8.为什么要将一个未接种的平板倒置? 未接种的平板作为对照组,若其上有菌落生长,则说明培养基被污染或灭菌不彻底。
警示:在实验室中,切记不可吃东西、喝水,离开实验室时一定要洗手,以防止被微生物感染。使用后的培养基在丢弃前一定要进行灭菌处理,以免污染环境。
1.下列关于微生物培养基的说法,正确的是( )A.同一种物质不可能既作碳源又作氮源B.除水以外的无机物仅提供无机盐C.凡是碳源都能提供能量D.无机氮源也能提供能量【解析】 对异养型微生物来说,含C、H、O、N的化合物既是碳源,又是氮源,如蛋白胨既是碳源又是氮源和能源,A错误;除水以外的无机物种类繁多,如CO2和N2是无机物,分别可以作为某些微生物的碳源和氮源,B错误;CO2是自养型微生物的碳源,但不能提供能量,C错误;硝化细菌所利用的氮源是氨,同时氨也为硝化细菌提供用于化能合成作用的能量,D正确。
2.防止外来杂菌的入侵,获得纯净的培养物,是研究和应用微生物的前提。下列叙述错误的是( )A.实验室里可以用紫外线或化学药剂进行消毒B.接种环、接种针等金属用具,直接在酒精灯火焰的内焰部位灼烧灭菌C.在实验室中,切不可吃东西、喝水,离开实验室时一定要洗手,防止被微生物感染D.使用后的培养基丢弃前一定要进行灭菌处理,以免污染环境【解析】 灼烧灭菌应该在酒精灯火焰的外焰部位灼烧,B项错误。
3.下图为实验室中酵母菌纯培养过程的部分操作步骤,下列叙述错误的是( )A.①步骤使用的是已经调节过pH并灭菌的培养基B.①②③步骤操作时需要在酒精灯火焰旁时行C.③到④的过程中,接种环共灼烧了5次D.④步骤操作时,不能将第1区和第5区的划线相连
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