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    新教材2023高中生物第3章基因工程质量评估新人教版选择性必修3 试卷

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    新教材2023高中生物第3章基因工程质量评估新人教版选择性必修3 试卷

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    这是一份新教材2023高中生物第3章基因工程质量评估新人教版选择性必修3,共8页。
    第3章质量评估
    (时间:75分钟 满分:100分)
    一、选择题:本题共16小题,共40分。第1~12小题,每小题2分;第13~16小题,每小题4分。在每小题给出的四个选项中,只有一项是符合题目要求的。
    1.下列关于基因工程的叙述,错误的是 (  )
    A.基因工程可以克服不同物种之间的生殖隔离,实现生物的定向变异
    B.在同一DNA分子中,限制酶的识别序列越长,切割位点出现的概率越大
    C.基因表达载体上有一个或多个限制酶的切割位点,供外源DNA片段插入
    D.以大肠杆菌为受体细胞时,要先用Ca2+处理细胞以使其处于能吸收周围环境中DNA的生理状态
    解析:基因工程能打破生殖隔离,并定向地改变生物的遗传特性,A项正确;限制酶的识别序列越长,切割位点出现的概率越小,B项错误;基因表达载体上应有一个或多个限制酶的切割位点,供外源DNA片段插入,C项正确;用Ca2+处理大肠杆菌,可使其处于能吸收周围环境中DNA分子的生理状态,D项正确。
    答案:B
    2.基因工程技术也称重组DNA技术,其实施必须具备的4个必要条件是 (  )
    A.工具酶、目的基因、载体、受体细胞
    B.重组DNA、RNA聚合酶、限制酶、连接酶
    C.模板DNA、信使RNA、质粒、受体细胞
    D.目的基因、限制酶、载体、受体细胞
    解析:基因工程是按照人们的意愿,把一种生物的个别基因(目的基因)切割出来,然后放到另一种生物的细胞(受体细胞)里,定向地改造生物的遗传性状。基因操作的工具酶是限制酶和DNA连接酶,基因进入受体细胞的运输工具是载体。
    答案:A
    3.某研究小组为了研制预防禽流感的疫苗,开展了前期研究工作,其简要的操作流程如下图所示。下列有关叙述错误的是 (  )


    A.步骤①所代表的过程是逆转录
    B.步骤②需使用限制酶和DNA连接酶
    C.步骤③可用Ca2+处理大肠杆菌细胞,使其处于常态
    D.检验Q蛋白的免疫反应特性,可用Q蛋白与患禽流感康复的鸡的血清进行抗原—抗体杂交实验
    解析:由题图可知,步骤①所代表的过程是逆转录,A项正确;步骤②需使用限制酶和DNA连接酶,B项正确;步骤③可用Ca2+处理大肠杆菌细胞,使其处于易从周围环境吸收DNA的生理状态,C项错误;检验Q蛋白的免疫反应特性,可用Q蛋白与患禽流感康复的鸡的血清进行抗原—抗体杂交实验,D项正确。
    答案:C
    4.人的糖蛋白必须经内质网和高尔基体进一步加工。通过转基因技术,可以使人的糖蛋白基因得以表达的受体细胞是 (  )
    A.大肠杆菌      
    B.酵母菌
    C.T4噬菌体
    D.质粒DNA
    解析:人的糖蛋白必须经内质网和高尔基体进一步加工,故受体细胞内应有内质网和高尔基体,即受体细胞属于真核细胞。
    答案:B
    5.下列关于基因工程的叙述,错误的是 (  )
    A.实现了物种间的DNA重组
    B.全过程都在细胞外进行
    C.可定向地改造生物的遗传性状
    D.可能通过对天然基因库的影响给生物圈的稳态带来不利
    解析:基因工程指在体外通过人工“剪切”和“拼接”等方法,对各种生物的核酸(基因)进行改造和重新组合,然后导入微生物或动植物细胞内,使重组基因在细胞内表达,生产出人类需要的基因产物或创造出新的生物类型。
    答案:B
    6.(2021·阳江)PCR是一种体外扩增DNA的技术,模拟了体内的DNA复制过程。下图是PCR技术原理示意图,下列相关叙述错误的是 (  )

    A.物质a是游离的4种脱氧核苷酸
    B.过程①中94 ℃高温的作用相当于解旋酶的作用
    C.新合成的子代DNA会恢复双螺旋结构
    D.过程①②体现了DNA边解旋边复制的特点
    解析:分析题图可知,物质a是原料,即游离的4种脱氧核苷酸;根据PCR的反应原理可知,高温使DNA变性,氢键可自动解开,解旋酶作用于氢键,因此,过程①94 ℃高温的作用相当于解旋酶的作用;由题图③72 ℃延伸,合成子链过程可知,新合成的子代DNA恢复双螺旋结构;过程①DNA分子氢键全部打开,过程②以每条DNA链为模板,合成子链,因此无法体现DNA边解旋边复制的特点。
    答案:D
    7. 质粒是基因工程中最常用的载体,它存在于许多细菌体内。质粒上有下图所示的标记基因,通过标记基因可以推知外源基因(目的基因)是否插入成功。外源基因插入的位置不同,细菌在培养基上的生长情况也不同。下表是外源基因插入位置(插入点有a、b、c)及细菌对应的生长情况。下列关于①②③三种细菌外源基因插入点的叙述,正确的是 (  )

    项目
    细菌在含氨苄青霉素的
    培养基上的生长情况
    细菌在含四环素的培
    养基上的生长情况

    能生长
    能生长

    能生长
    不能生长

    不能生长
    能生长
    A.①是c;②是b;③是a
    B.①是a和b;②是a;③是b
    C.①是a和b;②是b;③是a
    D.①是c;②是a;③是b
    解析:细菌①既能在含氨苄青霉素的培养基上生长,也能在含四环素的培养基上生长,说明氨苄青霉素抗性基因和四环素抗性基因都没有被破坏。由此可知,外源基因的插入点是c。细菌②能在含氨苄青霉素的培养基上生长,但不能在含四环素的培养基上生长,说明氨苄青霉素抗性基因没有被破坏,四环素抗性基因被破坏。由此可知,外源基因的插入点是b。细菌③不能在含氨苄青霉素的培养基上生长,但能在含四环素的培养基上生长,说明氨苄青霉素抗性基因被破坏,四环素抗性基因没有被破坏。由此可知,外源基因的插入点是a。
    答案:A
    8.科学家从细菌中分离出耐高温的淀粉酶基因a,通过基因工程的方法,将基因a导入马铃薯细胞中,经检测发现该淀粉酶在成熟块茎细胞中存在。下列有关叙述正确的
    是 (  )
    A.目的基因进入受体细胞后,随着马铃薯DNA分子的复制而复制并传给子代细胞
    B.基因a导入成功后,将抑制细胞原有的新陈代谢,开辟新的代谢途径
    C.目的基因不需要整合到马铃薯的DNA分子上
    D.目的基因来自细菌,可以不需要载体直接导入受体细胞
    解析:目的基因进入受体细胞后,随着马铃薯DNA分子的复制而复制,并传给子代细胞,A项正确;基因a导入成功后,将改变马铃薯原有的代谢,开辟新的代谢途径,但并没有抑制细胞原有的新陈代谢,B项错误;目的基因需要整合到马铃薯的DNA分子上,C项错误;目的基因来自细菌,一般需要通过载体导入受体细胞,D项错误。
    答案:A
    9.基因工程利用某目的基因(图甲)和P1噬菌体载体(图乙)构建重组DNA。限制酶BglⅡ、EcoRⅠ和Sau3AⅠ的切割位点如下图所示。下列分析错误的是 (  )



         乙
    A.构建重组DNA时,可用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因所在的片段和P1噬菌体载体
    B.构建重组DNA时,可用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因所在的片段和P1噬菌体载体
    C.图乙中的P1噬菌体载体只用EcoRⅠ切割后,含有2个游离的磷酸基团
    D.用EcoRⅠ切割目的基因所在的片段和P1噬菌体载体,再用DNA连接酶连接,只能产生一种重组DNA
    解析:由题图可知,BglⅡ、Sau3AⅠ及EcoRⅠ3种限制酶在目的基因和P1噬菌体载体上都有切割位点,故可用BglⅡ和Sau3AⅠ或EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因所在的片段和P1噬菌体载体,A、B两项正确;从图乙可知,P1噬菌体载体为环状DNA,只用EcoRⅠ切割后产生1个链状DNA,其2条链反向平行,有2个游离的磷酸基团,C项正确;用EcoRⅠ切割目的基因所在的片段和P1噬菌体载体,再用DNA连接酶连接,能产生不止一种重组DNA,D项错误。
    答案:D
    10.科学家在某种植物中找到了抗枯萎病的基因,并以质粒为载体,采用转基因的方法培育出了抗枯萎病的金花茶新品种。下列有关说法正确的是 (  )
    A.质粒是最常用的载体之一,它仅存在于原核细胞中
    B.将抗枯萎病基因连接到质粒上,用到的工具酶仅是DNA连接酶
    C.用叶肉细胞作为受体细胞培育出的植株不能表现出抗枯萎病性状
    D.通过该方法获得的抗枯萎病金花茶,产生的配子不一定含抗枯萎病基因
    解析:质粒也存在于某些真核细胞中,如酵母菌,A项错误;将目的基因连接到质粒上,不但要用到DNA连接酶,在连接之前还要用限制酶处理目的基因和质粒以得到相同的末端,B项错误;用叶肉细胞作为受体细胞培育出的植株能表现出抗枯萎病性状,C项错误;由于重组质粒只结合在某条染色体上,转基因植株相当于一个杂合子,因此有的配子就没有目的基因,D项正确。
    答案:D
    11.(2020·大埔)人们发现,蛛丝蛋白比蚕丝蛋白更细,但强度却更大,于是有人试图通过破解蛛丝蛋白的结构从而推出其基因结构,以指导对蚕丝蛋白基因的修改,从而让蚕也吐出像蛛丝一样坚韧的丝,此过程的名称和依据的原理分别是 (  )
    A.基因突变,DNA→RNA→蛋白质
    B.基因工程,RNA→RNA→蛋白质
    C.基因工程,DNA→RNA→蛋白质
    D.蛋白质工程,蛋白质→DNA→RNA→蛋白质
    解析:根据题干信息“通过破解蛛丝蛋白的结构从而推出其基因结构,以指导对蚕丝蛋白基因的修改,从而让蚕也吐出像蛛丝一样坚韧的丝”可知,通过改造基因来实现对蛋白质(蛛丝蛋白)的改造,属于蛋白质工程;该工程依据的原理是蛋白质→DNA→RNA→蛋白质。
    答案:D
    12.质粒是基因工程最常用的载体,下列有关质粒的说法错误的是 (  )
    A.质粒不仅存在于细菌中,也存在于某些病毒中
    B.质粒作为载体时,应具有标记基因和一个至多个限制酶切割位点
    C.质粒可将目的基因整合到染色体DNA上
    D.质粒能够在宿主细胞中稳定保存,并在宿主细胞内复制
    解析:质粒是一种具有自我复制能力的环状双链DNA分子,不仅存在于细菌中,也存在于某些真核生物中,但病毒中没有质粒,A项错误;质粒作为载体时,应具有标记基因和一个至多个限制酶切割位点,B项正确;质粒携带目的基因进入细胞后,进行自主复制,或将目的基因整合到受体细胞的染色体DNA上,C项正确;质粒能够在宿主细胞中稳定保存,并在宿主细胞内复制,D项正确。
    答案:A
    13.下列关于下图所示DNA分子片段的说法,正确的是 (  )

    A.限制酶可作用于①部位,解旋酶作用于③部位
    B.限制酶可作用于③部位,解旋酶作用于①部位
    C.作用于①部位的限制酶同时也可以作用于④部位
    D.作用于①部位的限制酶与作用于⑤部位的限制酶的碱基识别顺序相反
    解析:限制酶可作用于①部位的磷酸二酯键,解旋酶作用于③部位的氢键,A项正确,B项错误;作用于①部位的限制酶同时也可以作用于⑤部位,C项错误;作用于①部位的限制酶与作用于⑤部位的限制酶的碱基识别顺序相同,它们识别的序列都为—GAATTC—,D项错误。
    答案:A
    14.(2021·广东)基因工程中,需使用特定的限制性内切核酸酶切割目的基因和质粒,便于重组和筛选。已知限制性内切核酸酶 Ⅰ 的识别序列和切点是-G↓GATCC-,限制性内切核酸酶 Ⅱ 的识别序列和切点是-↓GATC-,根据图示判断,下列叙述错误的是(  )

    A.用限制性内切核酸酶切割获得目的基因时,有4个磷酸二酯键被水解
    B.质粒用限制性内切核酸酶Ⅱ切割,目的基因用限制性内切核酸酶Ⅰ切割
    C.用限制性内切核酸酶Ⅱ切割目的基因时,会有20个氢键发生断裂
    D.若要将该基因表达载体导入双子叶植物细胞中,常采用农杆菌转化法
    解析:用限制性内切核酸酶切割获得目的基因时,会切开两个切口,断裂四个磷酸二酯键;用限制酶Ⅱ切割质粒会破坏其中的两种标记基因,因此质粒只用限制酶Ⅰ切割;要获得目的基因,则目的基因两侧都要被切,因此目的基因应该用限制酶Ⅱ切割;用限制酶Ⅱ切割后获得的黏性末端是GATC-,由于C-G之间有3个氢键,A-T之间有2个氢键,因此用限制性内切核酸酶Ⅱ切割目的基因时,会有(3×2+2×2)×2=20(个)氢键发生断裂;若要将该基因表达载体导入双子叶植物细胞中,常采用农杆菌转化法,也可采用花粉管通道法。
    答案:B
    15.将粗提取的DNA丝状物分别加入浓度为0.14 mol/L的NaCl溶液、浓度为2 mol/L的NaCl溶液、预冷的体积分数为95%的酒精溶液中,然后用放有纱布的漏斗过滤,分别得到滤液P、Q、R以及存留在纱布上的黏稠物p、q、r,其中DNA含量少可以丢弃的是 (  )
    A.P、Q、R B.p、q、r
    C.P、q、R D.p、Q、r
    解析:将粗提取的DNA丝状物加入浓度为 0.14 mol/L的NaCl溶液中,DNA大部分析出,过滤后大部分DNA存在于黏稠物(p)中,杂质存在于滤液(P)中;DNA丝状物加入浓度为2 mol/L的NaCl溶液中,DNA溶解,过滤后DNA存在于滤液(Q)中,杂质存在于黏稠物(q)中;在预冷的体积分数为95%的酒精溶液中,DNA析出,过滤后DNA存在于黏稠物(r)中,杂质存在于滤液(R)中。
    答案:C
    16.下图表示利用农杆菌转化法获得某种转基因植物的部分操作步骤,下列说法错误的是 (  )

    A.利用含有四环素的培养基可将含Ⅱ的细菌筛选出来
    B.Ⅲ是农杆菌,通过步骤③将目的基因导入植株
    C.⑥可与多个核糖体结合,并可以同时翻译出多种蛋白质
    D.①过程的完成需要限制酶和DNA连接酶的参与
    解析:⑥是mRNA分子,可与多个核糖体结合,由于翻译的模板是同一个mRNA分子,故翻译出的是同一种蛋白质。
    答案:C
    二、非选择题:本题共5小题,共60分。
    17.(10分)小鼠癌症模型是目前最为常用、先进和公认的临床前抗肿瘤药物效应评价体系,该模型随着肿瘤治疗策略的革新而不断发展,并为癌症的治疗手段提供重要的理论及实践指导。下图表示利用小鼠胚胎干细胞(ES细胞)做的小鼠癌症模型,据图分析回答下列问题。

    (1)a过程表示基因工程,则其核心步骤是       ,该过程的目的是 。 
    (2)b过程可增加ES细胞的数量,若想从早期胚胎中获得更多的ES细胞,可将早期胚胎培育至    (时)期。d过程移入的胚胎能够存活,从免疫学上来说,是因为代孕子宫不会对其发生    反应。d过程进行前,要对代孕小鼠进行    处理。用肝癌细胞作抗原刺激B淋巴细胞,再将此淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合后获得细胞代谢产物    ,该产物与抗癌药物结合制成“生物导弹”,从而定向杀死小鼠体内的肝癌细胞。 
    (3)早期胚胎发育过程中,细胞逐渐开始分化,形成将来发育成各种组织
    的    和滋养层细胞。进一步扩大,会导致透明带破裂,胚胎从其中伸展出来,这一过程称为    。 
    (4)图示研究过程中使用的技术有  (至少答出2个)。 
    答案:(1)基因表达载体的构建 使目的基因在受体细胞中稳定存在,并且可以遗传给下一代,同时,使目的基因能够表达和发挥作用
    (2)囊胚 免疫排斥 同期发情 抗肝癌细胞抗体
    (3)内细胞团 孵化
    (4)转基因技术、胚胎移植技术、早期胚胎培养技术
    18.(8分)新型冠状病毒可通过表面的刺突蛋白(S蛋白)与人呼吸道黏膜上皮细胞的ACE2受体结合侵入人体,引起肺炎。我国科学家研发的腺病毒(DNA病毒)为载体的重组新型冠状病毒疫苗,据此回答下列问题。
    (1)2020年1月11日,中国共享了新型冠状病毒基因组的全部序列,据此科学家可以用化学合成法获得S基因,并用    扩增S基因,随后在  酶的作用下构建出重组腺病毒穿梭质粒,与腺病毒DNA共同导入相应的受体细胞,经筛选、检测等步骤完成重组新型冠状病毒的制备。
    (2)为检测重组腺病毒携带的目的基因是否在人体细胞内表达,可检测细胞内是否含有相应的     或蛋白分子,若检测S蛋白分子可用        技术。 
    (3)为研制抗S蛋白单克隆抗体,需提取经    免疫过的小鼠B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合,用HAT培养基筛选获得     细胞后,还需进行    培养,并用抗原筛选才能获得分泌抗S蛋白的单克隆抗体细胞株。 
    (4)单克隆抗体最主要的优点是 。 
    答案:(1)PCR技术 限制酶和DNA连接
    (2)mRNA 抗原—抗体杂交
    (3)S蛋白 杂交瘤 克隆化
    (4)特异性强、灵敏度高,可大量制备
    19.(12分)生长激素在治疗激素分泌过少导致的矮小症方面有积极的作用。为了批量生产生长激素,可以采用转基因技术将控制生长激素合成的基因转移到微生物细胞内。下表所示是涉及此转基因技术的几种限制酶识别序列及其切割位点,图甲、乙中的箭头表示相关限制酶对质粒和供体DNA的切割位点,请回答下列问题。


    限制酶
    BamHⅠ
    HindⅢ
    识别序
    列及切
    割位点



    限制酶
    EocRⅠ
    SmaⅠ
    识别序
    列及切
    割位点







    (1)比较表中4种限制酶的识别序列可知,     酶的识别序列的结构相对稳定,原因是                       (从碱基种类含量角度分析)。 
    (2)为了提高构建重组质粒的成功率,最好先用        (填表中酶的名称)处理质粒和目的基因,然后用    酶连接。本题构建重组质粒时不能使用SmaⅠ切割的原因是 。 
    (3)为了检测目的基因是否成功翻译,可以用       技术,若没有出现相应的杂交带,则可能需要用        作探针来检测是否转录出mRNA。 
    (4)受体细胞最好选择        ,以保证能够从基因工程菌中直接得到具有生物学活性的人的生长激素。受体细胞的另外一种选择是制备乳房生物反应器,即以    为受体细胞,进而从奶牛的乳汁中提取人的生长激素。基因工程菌相对于乳房生物反应器的优点是 。 
    (5)胰岛素是人体内唯一有降血糖功能的激素,采用蛋白质工程可以对胰岛素进行改造,使之起效时间缩短,保证餐后血糖高峰和血液中胰岛素高峰一致。如果你是科研工作者,请完善研制速效胰岛素类似物的思路:确定蛋白质的       →蛋白质应有的高级结构→蛋白质应具备的折叠状态→        →相对应的碱基序列。 
    解析:(1)DNA分子中G—C碱基对间有3个氢键,故G—C碱基对越多,结构越稳定。(2)虽然同一种限制酶切割出的黏性末端相同,但是利用同一种限制酶切割目的基因与质粒,会出现自身环化或目的基因与质粒的反向连接现象,故切割目的基因和质粒时采用2种限制酶,可保证目的基因与质粒的准确连接,因此最好先用BamHⅠ和HindⅢ2种限制酶处理质粒和目的基因,然后用DNA连接酶连接。SmaⅠ会破坏质粒的抗生素抗性基因和外源DNA中的目的基因,因此不能使用SmaⅠ切割。(3)目的基因是否成功翻译可用抗原—抗体杂交技术对蛋白质进行检测。检测目的基因是否转录出了mRNA,可采用带标记的目的基因与mRNA杂交,若出现杂交带,说明目的基因转录出mRNA,若没有杂交带,说明没有转录成功。(4)原核生物细胞中只有核糖体,可以形成蛋白质,但是没有内质网和高尔基体对蛋白质进行加工,生产出来的蛋白质可能没有活性,所以受体细胞最好选择酵母菌等真核生物的细胞。制备乳房生物反应器时,应选用哺乳动物的受精卵作为受体细胞,因为受精卵全能性高,外源基因在受精卵中易于表达。基因工程菌具有繁殖速度快、外源基因表达效率高的优点。(5)根据蛋白质工程,对胰岛素进行改造的过程为确定蛋白质的功能→蛋白质应有的高级结构→蛋白质应具备的折叠状态→蛋白质应有的氨基酸序列→相对应的碱基序列。
    答案:(1)SmaⅠ 具有3个氢键的G—C碱基对含量高
    (2)BamHⅠ和HindⅢ DNA连接 会破坏质粒的抗生素抗性基因和外源DNA中的目的基因
    (3)抗原—抗体杂交 带有标记的目的基因
    (4)真核微生物 奶牛的受精卵 繁殖速度快和外源基因表达效率高
    (5)功能 蛋白质应有的氨基酸序列
    20.(16分)实验中对DNA进行鉴定时,操作如下,请分析回答下列问题。
    试管
    A
    B
    1
    加浓度为2 mol/L的NaCl溶液5 mL
    加浓度为2 mol/L的NaCl溶液5 mL
    2
    不加
    加入提取的DNA丝状物并搅拌
    3
    加4 mL二苯胺试剂,混匀
    加4 mL二苯胺试剂,混匀
    4
    沸水浴5 min
    沸水浴5 min
    实验现象
    ①  
    ②  
    实验结论
    ③  


    (1)根据图示,完成表格空白处的实验内容。
    (2)对于B试管,完成1、2、3的操作后溶液颜色如何变化? 。 
    (3)在沸水浴中加热的目的是        ,同时说明DNA对高温有较强的    。 
    (4)A试管在实验中的作用是    。 
    (5)B试管中溶液颜色的变化程度主要与            有关。 
    解析:(1)A试管中未加提取的DNA丝状物,加入4 mL二苯胺试剂,混匀,沸水浴5 min后,溶液不变蓝色;B试管中加入提取的DNA丝状物,加入4 mL二苯胺试剂,混匀,沸水浴5 min后,溶液变蓝色;结论是DNA在沸水浴的条件下遇二苯胺试剂会呈现蓝色。(2)对于B试管,完成1、2、3的操作后,没有沸水浴,溶液颜色基本不变(不呈蓝色)。(3)本实验强调反应条件是沸水浴加热5 min,这样可加快颜色反应的速度,同时说明DNA对高温有较强的耐受性。(4)B试管中含DNA丝状物,A试管中不含,其他条件均完全相同,因此A试管在实验中的作用是对照。(5)B试管中溶液颜色的变化程度主要与DNA(丝状物)的多少有关。
    答案:(1)①溶液不变蓝色 ②溶液逐渐变蓝色
    ③DNA在沸水浴的情况下遇二苯胺试剂会呈现蓝色 (2)溶液颜色基本不变 (3)加快颜色反应速度 耐受性 (4)对照 (5)加入试管中的DNA(丝状物)的多少
    21.(14分)马铃薯块茎含有大量的淀粉,富含多种维生素和无机盐,我国已将马铃薯作为主粮产品进行产业化开发。下图是转基因抗盐马铃薯的培育过程,请分析回答下列问题。

    (1)为获取抗盐基因,可以从碱蓬细胞研磨液中提取抗盐基因的    来合成cDNA。 
    (2)图中构建基因表达载体时,最好选用     酶切割含目的基因的外源DNA和质粒,不能使用SmaⅠ切割的原因是                。构建好的重组质粒在抗盐基因上游要加上特殊的启动子,启动子是一段有特殊序列结构的    片段。 
    (3)将基因表达载体导入农杆菌Ti质粒上的T-DNA的原因是 。 
    通过农杆菌的转化作用,使抗盐基因插入马铃薯细胞中的染色体DNA上,从而使抗盐基因的遗传特性得以         。 
    (4)从个体水平上检验转基因抗盐马铃薯是否培育成功的方法是 。 
    解析:(1)基因工程中,获取目的基因时可以mRNA为模板,逆转录形成cDNA。(2)图中质粒的标记基因为M抗生素抗性基因,而SmaⅠ的切割位点就在该基因和目的基因上,因此不能使用SmaⅠ切割,应该用EcoRⅠ和Hind Ⅲ酶切割含目的基因的外源DNA和质粒。基因表达载体中的启动子是一段有特殊序列结构的DNA片段。(3)农杆菌Ti质粒上的T-DNA是可以转移的DNA,可以将目的基因带入马铃薯细胞,并将目的基因插入马铃薯细胞中的染色体DNA上,从而使抗盐基因的遗传特性得以稳定维持和表达。(4)检验转基因抗盐马铃薯是否培育成功,从个体水平上来讲,可以将转基因抗盐马铃薯幼苗栽种在盐碱地或较高浓度盐溶液中,观察是否能正常生长。
    答案:(1)mRNA (2)EcoRⅠ和HindⅢ SmaⅠ会破坏质粒的M抗生素抗性基因和外源DNA中的目的基因 DNA (3)T-DNA是可以转移的DNA(T-DNA可转移至受体细胞并整合到受体细胞的染色体DNA上) 稳定维持和表达 (4)将转基因抗盐马铃薯幼苗栽种在盐碱地或较高浓度盐溶液中,观察是否能正常生长

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