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2022-2023学年辽宁省葫芦岛市高二（下）期末生物试卷（含解析）
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这是一份2022-2023学年辽宁省葫芦岛市高二（下）期末生物试卷（含解析），共30页。试卷主要包含了单选题，多选题，探究题等内容，欢迎下载使用。
2022-2023学年辽宁省葫芦岛市高二（下）期末生物试卷
一、单选题（本大题共26小题，共33.0分）
1. 光面内质网是指无核糖体附着的内质网，是脂质合成的重要场所。下列细胞中，光面内质网较发达的是（ ）
A. 口腔上皮细胞 B. 睾丸（间质）细胞 C. 肝脏细胞 D. 唾液腺细胞
2. 动物细胞融合的结果是（ ）
A. 获得新个体 B. 获得杂交细胞 C. 获得新物种 D. 获得多倍体种群
3. 下列不宜作为基因工程中标记基因的是（ ）
A. 核糖体蛋白基因 B. 荧光蛋白基因
C. 产物具有颜色反应的基因 D. 抗性基因
4. 下列生物学研究和科学方法对应错误的是（ ）
A. 施莱登、施旺建立细胞学说——不完全归纳法
B. 分离细胞中的细胞器—差速离心法
C. 人鼠细胞融合实验同位素标记法
D. 制作真核细胞的三维结构模型—模型建构法
5. 某同学利用选择培养基成功分离出了土壤中的自生固氮菌，得到了如图所示的实验结果，以下说法正确的是（ ）
A. 该实验使用了划线法接种 B. 该实验使用了液体培养基
C. 该实验使用了无氮培养基 D. 该实验使用了无碳培养基
6. 下列不属于动物细胞工程应用的是（ ）
A. 生产珍贵的医用蛋白 B. 增加濒危物种的存活数量
C. 加速家畜遗传改良进程 D. 大量生产抗癌物质——紫杉醇
7. 诗句“也是人间玉，无非香不同。初闻封鼻孔，细品引馋虫。”描述的正是腐乳——我国古代劳动人民创造出的一种经过微生物发酵制作的大豆食品。下列叙述错误的是（ ）
A. 制作腐乳前需要对各种用具进行清洁和消毒
B. 腐乳中的蛋白质被分解成小分子，易于人体消化吸收
C. 腐乳制作过程中起主要作用的微生物是曲霉
D. 为提高腐乳品质和产量，可利用基因工程改造和选育优良菌种
8. 某科研团队采用农杆菌转化法，将抗草甘膦基因转入到豌豆中，经检测，转化体的子一代获得了目的基因片段（外源基因）并表达。下列有关该技术的原理叙述正确的是（ ）
A. 基因突变 B. 基因重组 C. 单倍体育种 D. 多倍体育种
9. 某化合物由六个单体构成，下列叙述正确的是（ ）
A. 若为多肽，则其彻底水解时一定断裂5个肽键
B. 若为淀粉的部分结构，则最终氧化分解的产物是葡萄糖
C. 若为DNA单链的部分结构，则其初步水解产物一定是4种
D. 若为RNA单链的部分结构，则其彻底水解产物可能有6种
10. 如图所示是在显微镜下观察到的不同视野，若将视野1转为视野2，则正确的操作步骤是（ ）
①转动粗准焦螺旋
②调节光圈
③转动细准焦螺旋
④转动转换器
⑤移动标本
A. ①→②→③→④ B. ⑤→④→②→③ C. ②→①→⑤→④ D. ④→⑤→③→②
11. 植株甲的基因型为Bb,植株乙的基因型为BB，分别取植株甲和植株乙的体细胞获得原生质体后，在溶液中诱导这两个原生质体融合，融合形成的细胞的基因型可能是（ ）
①BBbb②BBBB③BBBb④Bbbb⑤bbbb
A. ①②③ B. ①②④ C. ②③⑤ D. ①③⑤
12. 科学家将含有人溶菌酶基因的表达载体注射到鸡胚细胞中获得转基因鸡，人溶菌酶基因能在鸡的输卵管细胞中特异性表达，最终在鸡蛋中收集人溶菌酶。该过程的核心步骤是（ ）
A. 获取人溶菌酶基因 B. 将人溶菌酶基因导入受体细胞
C. 基因表达载体的构建 D. 人溶菌酶基因的检测和鉴定
13. 为满足食醋产量需求、缩短发酵周期，现代工业制醋一般采用人工选育的纯培养的高产醋酸菌进行醋酸发酵，下列有关描述错误的是（ ）
A. 纯培养物是指由单一个体繁殖所获得的微生物群体
B. 与酒精发酵相比，醋酸发酵需要在较高的温度条件下进行
C. 通过检测发酵液中的醋酸含量，筛选出高产醋酸菌并进行纯化
D. 为防止杂菌污染，醋酸菌的纯化培养需要在密闭无菌条件下进行
14. 干细胞在生命科学的细胞修复、发育生物学、医学、药物学等领域有着极为广阔的应用前景，吸引着众多科学家投入到相关研究中。下列相关叙述错误的是（ ）
A. 造血干细胞可以分化为各种血细胞 B. 干细胞都是从胚胎中分离提取的细胞
C. 不同类型的干细胞的分化潜能有差别 D. 产生的特定细胞，可以用于新药测试
15. 爱德华兹因体外受精技术获得2010年诺贝尔生理学或医学奖，被誉为“试管婴儿之父”。下列相关说法错误的是（ ）
A. 收集的精子需诱导获能后才能用于体外受精
B. 采集来的初级卵母细胞可以直接用于体外受精
C. 早期胚胎植入子宫后需对母体进行妊娠检查
D. 试管婴儿技术解决了某些不孕夫妇的生育问题
16. 为了在大肠杆菌细胞中成功表达人胰岛素基因，首先需要提取细胞的mRNA，经反转录等过程来获取目的基因。下列相关叙述，错误的是（ ）
A. 用于反转录的mRNA只能从胰岛B细胞中获取
B. 反转录过程需要四种游离的核糖核苷酸作为原料
C. 经反转录得到的目的基因不含启动子
D. 反转录获取目的基因时遵循碱基互补配对原则
17. 图甲乙分别表示EcoRⅠ和SmaⅠ限制酶识别序列和切割位点（图中箭头处），可形成不同的末端。据图分析，下列说法正确的是（ ）
A. 限制酶可作用于DNA的磷酸二酯键和氢键
B. 识别黏性末端的DNA连接酶也能识别平末端
C. 限制酶的识别序列都是由6个核苷酸组成的
D. 图甲的末端“缝合”时有氢键的重新连接
18. 下列关于无菌技术的叙述，正确的是（ ）
A. 操作者的双手清洁后，要用无水酒精擦拭消毒
B. 煮沸消毒法中100℃煮沸5～6分钟只能杀死微生物的营养细胞和部分芽孢
C. 培养基、培养皿等均须采用干热灭菌法灭菌，培养基在丢弃前还要进行灭菌处理
D. 接种室、接种箱或超净工作台在使用过程中，要用紫外线照射进行消毒
19. 神舟十二号载人飞船搭载聂海胜、刘伯明、汤洪波三名航天员，飞往太空。在中国空间站的三个月里，天宫二号货运飞船曾为天和核心舱送去一份“鱼香肉丝外卖”。下列叙述正确的是（ ）
A. 鱼香肉丝中含有的糖类均可直接被航天员体内的肌肉细胞吸收合成肌糖原
B. 鱼香肉丝中的肉类和蔬菜类食物可为航天员提供糖类等各种营养物质
C. 航天员从鱼香肉丝中摄入的糖类、脂肪、蛋白质等生物大分子均可作为细胞的能源物质
D. 因“鱼香肉丝外卖”已经煮熟，所以不能用双缩脲试剂检测其中是否含有蛋白质
20. 发酵工程的内容包括菌种的选育、培养基的配制、灭菌、扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离提纯等方面。下列关于发酵工程的认识错误的是( )
A. 发酵工程具有条件温和、产物单一、污染小的特点
B. 发酵工程的产品包括微生物的代谢产物和菌体本身
C. 通常所指的发酵条件包括温度、溶解氧和pH等
D. 发酵工程与传统发酵技术最大的区别是前者可以用微生物进行发酵
21. 下列关于DNA粗提取与鉴定实验的叙述，不正确的是（ ）
A. 可选择香蕉、菜花、猪血等新鲜材料提取DNA
B. 加入预冷的酒精溶液后析出的丝状物是DNA
C. 提取的DNA可溶解在2mol/L的NaCl溶液中
D. 使用二苯胺试剂鉴定DNA时需要沸水浴加热
22. 某兴趣小组研究M、N、P3种细胞的结构和功能，发现M细胞没有核膜包被的细胞核，但含有核糖体，N细胞含有叶绿体，P细胞能合成糖原。下列叙述正确的是（ ）
A. M、N、P细胞的遗传物质一定是为DNA
B. M细胞无线粒体，只能进行无氧呼吸
C. M、P细胞一定取材于异养型生物
D. M、N、P细胞均有发生染色体变异的可能
23. 葡萄糖转运蛋白（GLUT）是转运葡萄糖进入细胞的载体蛋白。我国科学家成功解析了人的GLUT处于不同构象的晶体结构。下列相关叙述不正确的是（ ）
A. 亲水的葡萄糖难以自由扩散进入细胞 B. 葡萄糖转运依赖于GLUT的构象改变
C. 线粒体外膜上应分布着大量的GLUT D. GLUT的结构异常可能会引发糖尿病
24. 如图是利用体细胞核移植技术克隆优质奶牛的简易流程图，下列有关叙述正确的是（ ）
A. 过程①需要提供95%O2和5%CO2的混合气体
B. 过程②常使用显微操作法对卵母细胞进行处理
C. 过程③将激活后的重组细胞培养至原肠胚后移植
D. 后代丁的遗传性状由甲和丙的遗传物质共同决定
25. 某兴趣小组同学研究夏季开空调对室内微生物群落的影响，结果如图。下列相关叙述错误的是（ ）
A. 需采集相同地点不同空调状态下的空气样本测定微生物数量
B. 需配制不同成分和pH的培养基分别对细菌和真菌进行培养及计数
C. 本研究结果表明，夏季空调开启后室内环境的变化抑制了微生物繁殖
D. 室内微生物含量高时可用紫外灯或消毒液消毒
26. 下列关于转基因产品安全性问题的叙述正确的是（ ）
A. 抗虫棉、耐储藏番茄、八倍体小黑麦都是常见的转基因作物
B. 将目的基因导入受体细胞的叶绿体中，可防止花粉传播造成的基因污染
C. 食用含抗生素抗性基因的转基因食物可显著增强人体抵抗病菌的能力
D. 转基因生物不会对生物多样性和生态平衡造成威胁
二、多选题（本大题共4小题，共12.0分）
27. 在流动镶嵌模型提出后，研究人员又提出了“脂筏模型”：脂筏是生物膜上富含胆固醇和鞘磷脂的微结构域，其中的胆固醇就像胶水一样，对鞘磷脂亲和力很高，并特意吸收或排除某些蛋白质，形成一些特异蛋白聚集的区域，结构模型如图所示，下列叙述正确的是（ ）
A. 图中C代表膜蛋白 B. 脂筏的存在不会影响膜的流动性
C. 生物膜的基本支架是磷脂双分子层 D. 破坏胆固醇可能会导致脂筏结构解体
28. 某研究性学习小组拟培育一种名贵花卉的脱毒苗，其技术路线为“取材→消毒→愈伤组织培养→生芽、生根→移栽”。相关叙述错误的是（ ）
A. 取材部位一般选择植物顶端分生区附近，因其含病毒少、甚至不含病毒
B. 外植体接种前需进行流水冲洗、酒精消毒、次氯酸钠处理等消毒措施
C. 为充分利用培养条件，可以将外植体的13-12倒插入培养基中
D. 将组培苗移栽后，需进行病毒接种实验来筛选出脱毒苗
29. 如图为“土壤中分解尿素的细菌的分离和计数”实验中样品稀释示意图。据图分析正确的是（ ）
A. 上述方法称为稀释涂布平板法
B. 3号试管中的样品溶液稀释倍数为104倍
C. 5号试管的结果表明每克土壤中的菌株数为1.7×108个
D. 该实验需设置牛肉膏蛋白胨培养基，用以判断选择培养基是否有选择作用
30. 为提高大豆对磷元素的吸收能力，研究人员利用农杆菌转化法将水稻的耐低磷基因OsPTF转移到大豆植株中，如图为重组Ti质粒上T-DNA的序列结构示意图。下列相关叙述不正确的是（ ）
A. 以任意一个水稻细胞的DNA为模板进行PCR扩增就可以获得大量OsPTF基因
B. RNA聚合酶与启动子2识别并结合后，启动抗除草剂基因的转录
C. 可通过含除草剂的选择培养基筛选含有目的基因大豆愈伤组织
D. 用EcoRⅠ、BamHⅠ双酶切重组Ti质粒后，经电泳分离至少得到三条带
三、探究题（本大题共5小题，共55.0分）
31. 香蕉成熟过程中，果实中的贮藏物不断代谢转化，香蕉逐渐变甜。图A中Ⅰ、Ⅱ两条曲线分别表示香蕉果实成熟过程中两种物质含量的变化趋势。请回答下列问题：
取成熟到第x天和第y天的等量香蕉果肉，分别加等量的蒸馏水制成提取液。然后在a、b试管中各加5mL第x天的提取液，在c、d试管中各加5mL第y天的提取液，如图B。
（1）在b、d试管中各加入等量斐林试剂， ______ 后，b试管呈砖红色，与b相比d的颜色更 ______ ，两管中被检测的物质是 ______ ，图A中表示这种物质含量变化趋势的曲线是 ______ 。
（2）在a、c试管中各加入等量碘液后，a试管呈蓝色，与a相比c的颜色更 ______ ，图A中表示这种物质含量变化趋势的曲线是 ______ 。
（3）如果实验材料由香蕉果实改为西瓜果实，进行上述操作， ______ （选填“能”或“不能”）得到理想的实验结果，理由是： ______ 。
32. H+-K+-ATP酶位于胃壁细胞的细胞膜上，是一种质子泵。它通过自身的磷酸化与去磷酸化完成H+/K+跨膜转运，不断将胃壁细胞内的H+运输到膜外胃腔中，从而促进胃酸的分泌。其作用机理如图所示，“+”表示促进磷酸化。请据图回答下列问题。
（1）胃壁细胞内的H+运输到膜外的方式属于 ______ ，图中的M1-R、H2-R、G-R属于膜上的 ______ ，其与信号分子结合后，引起细胞内的一系列变化，这体现了细胞膜的 ______ 功能。
（2）胃蛋白酶的合成与分泌过程，需要具膜细胞器 ______ 的参与，其合成之后到分泌之前是 ______ （填“耗能”或“不耗能”）的。
（3）一些化合物如SCH32651与H+-K+-ATP酶上的钾离子高亲和性部位作用，抑制酶的活性，从而起到治疗因胃酸分泌过多引起的胃溃疡，其原理是 ______ 。
33. 奶啤被称为“奶香槟”，是一种新型含酒精的乳饮料。它具有馥郁的麦芽清香，略带碳酸气，又具有乳饮料酸甜适口的特征，广受人们喜爱。奶啤是通过细菌发酵将麦汁中的麦芽糖和其他糖类转化为醋酸和乳酸，配以一定比例的原料乳，再结合酒精发酵制作而成。工艺流程如图，回答下列问题：
（1）参与前期酸味形成的菌有醋酸菌和乳酸菌。培养乳酸菌时，所用培养基除了含有碳源、氮源、水和无机盐外，还需要添加 ______ 。醋酸菌和乳酸菌在同一容器中进行发酵时， ______ （填“能”或“不能”）同时产生醋酸和乳酸，原因是 ______ 。
（2）工业上酿制奶啤时，大麦发芽过程中细胞内有机物种类 ______ （填“增多”或“减少”），麦汁煮沸的目的是 ______ 。后期获得酒精时的发酵条件主要为 ______ 。从食品安全的角度考虑，上述工艺流程图中①的操作应该是 ______ 。
34. 现如今单克隆抗体治疗逐渐成为癌症治疗中的有效方法，恶性肿瘤细胞表面表达着一些异于普通健康细胞的抗原，这些抗原可以作为单克隆抗体的良好靶点。据此回答下列问题：
（1）检测发现细胞的CLDN6蛋白能够促进肿瘤发生，选定其作为单克隆抗体的作用靶点。CLDN6蛋白是一个跨膜蛋白，包括胞外区、跨膜区和胞内区，制备免疫小鼠所用的抗原时，应提取 ______ 区基因序列用于设计抗原。
（2）将CLDN6蛋白抗原注射到小鼠体内，从该小鼠脾脏中获取 ______ 细胞，利用 ______ 诱导此细胞与骨髓瘤细胞融合，经筛选得到杂交瘤细胞，通过克隆化培养和抗体阳性检测，多次筛选得到产生单克隆抗体的杂交瘤细胞，最终可通过 ______ 培养获得大量单克隆抗体。
（3）将该单克隆抗体与抗癌药物DM1结合形成 ______ ，DM1是一种小分子物质，能够抑制纺锤体微管的形成，由此分析DM1能够进入细胞中通过抑制细胞的 ______ 过程起到抗癌的作用。
（4）已知核酸合成有两条途径，如图所示，其中物质A可以阻断全合成途径。正常细胞内含有补救合成途径所必需的转化酶和激酶，制备单克隆抗体时选用的骨髓瘤细胞中缺乏转化酶。可将加入H、A、T三种物质的HAT培养基作为制备单克隆抗体时的选择培养基。
融合前将小鼠的脾脏中的B细胞和骨髓瘤细胞分别置于含HAT的选择培养基中培养，一段时间后培养基中 ______ （填“有”或“无”）细胞增殖，原因是 ______ 。
35. 拟南芥（2N=10）属于十字花科植物，自花传粉，被誉为“植物界的果蝇”，广泛应用于植物遗传学研究。拟南芥细胞中存在某种转录因子能够明显提高其他基因的表达水平。研究人员将从拟南芥细胞中获取的转录因子转移到大豆细胞内，并使其过量表达，发现大豆中油酸和亚油酸的含量显著提高。图中限制酶EcoRV的酶切位点为-GAT↓ATC-。
（1）质粒Po具有氨苄青霉素抗性基因（amp'）和四环素抗性基因（tetr），对其进行切割时应该注意 ______ ，以便筛选重组质粒。
（2）P3质粒导入受体细胞通常使用农杆菌转化法，若受体细胞能够表现氨苄青霉素抗性， ______ （填“能”或“不能”）说明目的基因已成功导入受体细胞，并说出理由： ______ 。
（3）受体细胞能够培育出转基因大豆植株的原因是 ______ 。
（4）为了获得大量的目的基因，可以采用PCR技术进行扩增，PCR技术依据的原理是 ______ 。PCR过程每次循环分为3步，其中温度最低的一步是 ______ PCR扩增完成后，常采用琼脂糖凝胶电泳来鉴定PCR的产物。在凝胶中DNA分子的迁移速率与 ______ 等有关。
（5）利用PCR技术，在引物的某个特定位点引入一个或多个不能与目的基因配对的碱基，就可以在目的基因中带来定点突变，据此获得的目的基因再经表达、纯化获得蛋白质，该过程属于 ______ （填工程技术）的范畴。
答案和解析
1.【答案】B
【解析】
【分析】
1、核糖体是蛋白质合成车间，包括游离核糖体和附着型核糖体两种类型。游离核糖体合成的是胞内蛋白，附着型核糖体合成的是分泌蛋白。
2、内质网是蛋白质等大分子物质合成、加工的场所，是脂质合成车间。
本题主要考查内质网的相关知识，意在考识记能力和综合运用能力。
【解答】
A、光面内质网可合成脂质，口腔上皮细胞主要起保护作用，内质网不发达，A错误；
B、睾丸（间质）细胞可合成雄性激素（脂质），光面内质网发达，B正确；
CD、肝脏细胞和液腺细胞可合成、分泌某些蛋白质，粗面内质网比较发达，CD错误。
故选：B。
2.【答案】B
【解析】解：动物细胞融合又叫细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程，融合的结果是获得杂交细胞。
故选：B。
1、动物细胞融合又叫细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程，融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞。
2、体细胞杂交技术的优点是克服远缘杂交不亲和的障碍。
本题考查动物细胞融合相关知识，旨在考查学生对动物细胞融合过程等细胞工程相关知识的识记、理解与灵活运用能力。
3.【答案】A
【解析】解：A、核糖体蛋白基因所有细胞中都含有，不宜作为基因工程中标记基因，符合题意，A正确；
B、荧光蛋白基因可以用作基因工程的标记基因，不符合题意，B错误；
C、产物具有颜色反应的基因可根据颜色反应是否发生筛选重组质粒，可以用作基因工程的标记基因，不符合题意，C错误；
D、抗性基因（如氨苄青霉素抗性基因）可作为基因工程的标记基因，筛选重组质粒，不符合题意，D错误。
故选：A。
作为基因工程的载体，其上要有标记基因用于筛选重组DNA分子，可以是四环素、氨苄青霉素等抗性基因，也可以是荧光蛋白基因或产物能显色的基因。
本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的操作工具，尤其是载体，掌握作为基因工程的载体需要具备的条件，能根据题干要求做出准确的判断。
4.【答案】C
【解析】解：A、施莱登和施旺运用不完全归纳法，建立了细胞学说，A正确；
B、不同细胞器的大小不同，可以用差速离心法分离各种细胞器，B正确；
C、人鼠细胞融合实验采用的荧光标记法，C错误；
D、制作真核细胞的三维结构模型采用的是建构物理模型法，D正确。
故选：C。
1、不同细胞器个体的重量不同，可以用差速离心法分离各种细胞器。
2、模型构建法：模型是人们为了某种特定的目的而对认识对象所做的一种简化的概括性的描述，这种描述可以是定性的，也可以是定量的；有的借助具体的实物或其它形象化的手段，有的则抽象的形式来表达。模型的形式很多，包括物理模型、概念模型、数学模型等。以实物或图画形式直观的表达认识对象的特征，这种模型就是物理模型，如真核细胞的三维结构模型。
本题考查教材经典实验的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力，运用所学知识综合分析问题的能力是解答本题的关键。
5.【答案】C
【解析】解：A、该实验使用了稀释涂布平板法，A错误；
B、该实验使用了固体培养基，B错误；
C、要从土壤中分离出自生固氮菌，需要采用无氮培养基，C正确；
D、自生固氮菌属于异养生物，该实验需要使用含有碳源的培养基，D错误。
故选：C。
1、自生固氮微生物是指在土壤中能够独立进行固氮的微生物，其中，多数是一类叫做自生固氮菌的细菌。
2、选择培养基是指通过培养混合的微生物，仅得到或筛选出所需要的微生物，其他不需要的种类在这种培养基上是不能生存的。
本题结合图解，考查培养基的相关知识，要求考生识记培养基的种类及功能，能结合图中信息做出准确的判断。
6.【答案】D
【解析】解：A、生产许多有价值的蛋白质生物制品，如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等都可以借助于动物细胞的大规模培养来生产，是动物细胞工程的应用，A正确；
B、采用动物细胞核移植技术等可增加濒危物种的存活数量，这属于动物细胞工程的应用，B正确；
C、利用动物细胞核移植技术可以加速家畜遗传改良进程，这属于动物细胞工程的应用，C正确；
D、大量生产抗癌物质——紫杉醇属于植物细胞工程的应用，D错误。
故选：D。
动物细胞工程常用的技术手段有：动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合、生产单克隆抗体等.其中动物细胞培养技术是其他动物工程技术的基础。
本题考查动物细胞工程的应用，意在考查学生的识记能力和判断能力，难度不大。
7.【答案】C
【解析】解：A、制作腐乳的各种用具需要使用洗洁精、开水等进行清洁和消毒，A正确；
B、豆腐中的蛋白质在蛋白酶的作用下，被分解成小分子的肽和氨基酸，易于消化吸收，B正确；
C、人工接种毛霉可提高发酵效率，但豆腐发酵不是依靠单种微生物，其中起主要作用的是毛霉，C错误；
D、为提高腐乳品质和产量，可利用基因工程等改造和选有优良菌种，能够减少腐乳制作中的杂菌，D正确。
故选：C。
腐乳的制作的原理：
（1）腐乳的发酵在多种微生物的协同作用下进行，其中起主要作用的是毛霉，它是一种丝状真菌，新陈代谢类型是异养需氧型。
（2）毛霉等微生物产生的蛋白酶可以将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可以将脂肪水解成甘油和脂肪酸。
本题主要考查的是腐乳制作的相关知识，意在考查学生对基础知识的理解掌握，难度适中。
8.【答案】B
【解析】解：采用农杆菌转化法，将抗草甘膦基因转入到豌豆中，转化体的子一代获得了目的基因片段（外源基因）并表达，这一技术是基因工程技术。基因工程的技术原理是基因重组。
故选：B。
农杆菌通过侵染植物伤口进入细胞后，可将T-DNA插入到植物基因组中，并且可以通过减数分裂稳定的遗传给后代，这一特性成为农杆菌介导法植物转基因的理论基础。
本题考查基因工程技术的基本原理，掌握相关基础知识即可，难度较低。
9.【答案】D
【解析】解：A、若为多肽，由六个单体构成的为六肽，直链六肽中含有5个肽键，环状六肽中含有6个肽键，则其彻底水解时需要断裂5个肽键或6个肽键，A错误；
B、若为淀粉的部分结构，淀粉的单体为葡萄糖，则最终水解的产物是葡萄糖，最终氧化分解的产物是二氧化碳和水，B错误；
C、若为DNA单链的部分结构，DNA的单体为脱氧核苷酸，则其初步水解产物最多为4种，不一定就有4种，C错误；
D、若为RNA单链的部分结构，RNA的单体为核糖核苷酸，则其彻底水解产物可能有磷酸基团、核糖和四种含氮碱基（A、U、G、C），共6种，D正确。
故选：D。
生物大分子如多糖、蛋白质和核酸都是由单体聚合形成的多聚体，而葡萄糖、氨基酸、核苷酸等单体的核心元素是C元素，因此细胞内的生物大分子以碳链为骨架。
知道组成细胞的大分子物质的种类以及与之相关的单体的种类是解答本题的关键。
10.【答案】B
【解析】分析题图，从视野1转为视野2细胞变大，故是由低倍镜换到高倍镜进行观察。由分析可知由低倍镜换到高倍镜的步骤，即将视野1转为视野2，正确的操作步骤是⑤移动标本→④转动转换器→②调节光圈→③转动细准焦螺旋。
故选：B。
由低倍镜换用高倍镜进行观察的步骤是：移动玻片标本使要观察的某一物像到达视野中央→转动转换器选择高倍镜对准通光孔→调节光圈，换用较大光圈使视野较为明亮→再转动细准焦螺旋使物像更加清晰。
本题主要考查显微镜的装片的移动方向问题的内容，要求考生识记相关知识，并结合所学知识准确答题。
11.【答案】A
【解析】解：①植物细胞壁的重要成分是纤维素和果胶，经过纤维素酶和果胶酶的处理可以获得原生质体，该过程没有改变原生质体的基因型，因此甲的原生质体的基因型为Bb,乙的原生质体的基因型为BB，当基因型为Bb与Bb的原生质体融合后得到的细胞的基因型为BBbb,①正确；
②当基因型为BB与BB的原生质体融合后得到的细胞的基因型为BBBB，②正确；
③当基因型为Bb与BB的原生质体融合后得到的细胞的基因型为BBBb,③正确；
④已知溶液存在基因型为Bb和BB的两种原生质体，但是不存在基因型bb的原生质体，因此融合后形成的细胞中不可能出现3个b基因，即不可能出现基因型为Bbbb的细胞，④错误；
⑤已知溶液存在基因型为Bb和BB的两种原生质体，但是不存在基因型bb的原生质体，因此融合后形成的细胞中不可能出现4个b基因，即不可能出现基因型为bbbb的细胞，⑤错误；
综上所述①②③正确。
故选：A。
植物细胞壁的重要成分是纤维素和果胶，经过纤维素酶和果胶酶的处理可以获得原生质体，该过程没有改变原生质体的基因型，因此甲的原生质体的基因型为Bb,乙的原生质体的基因型为BB。
本题考查植物体细胞杂交的相关知识，要求考生理解识记有关技术的原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能将教材中的知识结合题中信息进行迁移应用。
12.【答案】C
【解析】解：基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取；②基因表达载体的构建；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与鉴定。科学家将含有人溶菌酶基因的表达载体注射到鸡胚细胞中获得转基因鸡，人溶菌酶基因能在鸡的输卵管细胞中特异性表达，最终在鸡蛋中收集人溶菌酶。该过程属于基因工程技术的基本步骤，其核心步骤是基因表达载体的构建。
故选：C。
基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因——DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA——分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质——抗原—抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。
本题考查基因工程的相关知识，重点考查基因工程的操作步骤，要求考生识记基因工程的操作步骤和需要注意的细节，能准确判断各选项，属于考纲识记层次的考查。
13.【答案】D
【解析】解：A、在微生物的培养过程中，由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物，A正确；
B、酵母菌最适宜生长繁殖的温度范围是18～30℃，而醋酸菌的最适生长温度为30～35℃，故与酒精发酵相比，醋酸发酵需要在较高的温度条件下进行，B正确；
C、醋酸发酵的产物是醋酸，通过检测发酵液中的醋酸含量，能够筛选出高产醋酸菌并进行纯化，C正确；
D、醋酸菌是好氧菌，纯化培养需要在有氧无菌条件下进行，D错误。
故选：D。
1、果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。故果酒的制作原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精，酵母菌最适宜生长繁殖的温度范围是18～30℃；反应中是否有酒精的产生，可用酸性重铬酸钾来检验，该物质与酒精反应呈现灰绿色。
2、果醋制作中起到主要作用的微生物是醋酸菌，醋酸菌是一种好氧细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动，其代谢类型属于异养需氧型。当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解为醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。醋酸菌的最适生长温度为30～35℃。
3、接种微生物常用的两种方法：（1）平板划线法通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。
（2）稀释涂布平板法则是菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。
本题考查微生物培养与分离及其在发酵中的应用的相关知识，要求考生理解识记有关技术的原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能将教材中的知识结合题中信息进行迁移应用。
14.【答案】B
【解析】解：A、造血干细胞可以分化为各种血细胞（红细胞、白细胞、血小板），A正确；
B、干细胞是指动物和人体内仍保留着少数具有分裂和分化能力的细胞，主要存在于早期胚胎、骨髓和脐带血等多种组织和器官中，包括胚胎干细胞和成体干细胞等，B错误；
C、不同类型的干细胞，它们的分化潜能是有差别的，如胚胎干细胞的分化潜能大于多能干细胞，C正确；
D、干细胞可以分化产生的特定细胞，可以用于新药测试，D正确。
故选：B。
干细胞是指动物和人体内保留着少量具有分裂和分化能力的细胞，主要存在于早期胚胎、骨髓和脐带血等多种组织和器官中，包括胚胎干细胞和成体干细胞。
本题主要考查干细胞工程的内容，要求考生识记相关知识，并结合所学知识准确答题。
15.【答案】B
【解析】解：A、收集的精子需诱导获能后才能与成熟的卵细胞体外受精，A正确；
B、采集来的初级卵母细胞需要进一步成熟后（培养到减数第二次分裂中期），才能用于体外受精，B错误；
C、早期胚胎植入子宫后需对母体进行妊娠检查，以便确认胚胎成功着床，C正确；
D、试管婴儿技术通过体外受精，解决了某些不孕夫妇的生育问题，D正确。
故选：B。
体外受精主要包括：卵母细胞的采集和培养、精子的采集和获能、受精。
本题考查体外受精技术的相关知识，要求考生识记体外受精的具体过程及该技术的应用，能结合所学的知识准确答题。
16.【答案】B
【解析】解：A、胰岛素基因只在胰岛B细胞中表达，因此用于反转录的mRNA只能从胰岛B细胞中获取，A正确；
B、反转录过程是以RNA为模板合成DNA的过程，以四种游离的脱氧核糖核苷酸为原料，B错误；
C、启动子不转录，因此经反转录得到的目的基因不含启动子，C正确；
D、反转录是以RNA为模板合成DNA的过程，该过程遵循碱基互补配对原则，D正确。
故选：B。
1、反转录是利用RNA链为模板，通过碱基互补配对原则，以四种游离的脱氧核糖核苷酸为原料合成DNA的过程。
2、细胞分化的本质是基因的选择性表达。胰岛素基因只在胰岛B细胞中表达，因此只有在胰岛B细胞中才能获取相关mRNA。
本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的概念、原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能结合所学的知识准确答题。
17.【答案】D
【解析】解：A、限制酶能识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，可作用于DNA的磷酸二酯键而不是氢键，A错误；
B、识别黏性末端的DNA连接酶有的不能识别平末端，如E．coliDNA连接酶，B错误；
C、限制酶的识别序列一般由4、5、6或8个核苷酸序列组成，C错误；
D、图甲的末端为黏性末端，“缝合”时会形成碱基对，因而有氢键的重新连接，D正确。
故选：D。
1、限制酶：主要从原核生物中分离纯化出来。特异性：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，形成黏性末端或平末端。
2、DNA连接酶：根据酶的来源不同分为两类：E．coliDNA连接酶、T4DNA连接酶。这二者都能连接黏性末端，此外T4DNA连接酶还可以连接平末端，但连接平末端时的效率比较低。
本题考查限制酶的特点、功能的相关知识，意在考查学生提取信息、分析推理能力，平时应该加强训练。
18.【答案】B
【解析】解：A、操作者的双手清洁后，用体积分数为75%的酒精擦拭消毒，不能用无水乙醇进行消毒，这是因为过高浓度的酒精会在细菌表面形成一层保护膜，阻止其进入细菌体内，难以将细菌彻底杀死，达不到消毒的目的，A错误；
B、煮沸消毒法中100℃煮沸5～6分钟只能杀死微生物的营养细胞和部分芽孢，B正确；
C、培养皿等玻璃器皿可采用干热灭菌法灭菌，培养基需要用高压蒸汽灭菌法灭菌，C错误；
D、接种室、接种箱或超净工作台在使用前，可用紫外线照射进行消毒，使用过程中不能用紫外线照射，D错误。
故选：B。
实验室常用的灭菌方法
（1）灼烧灭菌：将微生物的接种工具，如接种环、接种针或其他金属工具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌，此外，在接种过程中，试管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通过火焰燃烧来灭菌；
②干热灭菌：能耐高温的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培养皿）和金属用具等，可以采用这种方法灭菌；
③高压蒸汽灭菌：将灭菌物品放置在盛有适量水的高压蒸汽灭菌锅内，为达到良好的灭菌效果，一般在压力为100kPa，温度为121℃的条件下，维持15～30min。
本题考查微生物的分离和培养，要求考生识记无菌技术，掌握消毒和灭菌的方法及实例，能结合所学的知识准确判断各选项。
19.【答案】B
【解析】解：A、鱼香肉丝中含有的糖类要通过消化道的消化吸收才能到达航天员的肌肉细胞中，A错误；
B、鱼香肉丝中的肉类和蔬菜可为航天员提供蛋白质、糖类等各种营养物质，B正确；
C、脂肪不是生物大分子，C错误；
D、煮熟鱼香肉丝中蛋白质的空间结构被破坏，但含有肽键，可以用双缩脲试剂检测，D错误。
故选：B。
1、生物组织中有机物的检测方法：蛋白质与双缩脲试剂产生紫色反应。
2、食物中的糖类、蛋白质、脂肪等物质要经过消化后才能被人体吸收。
本题考查糖类、蛋白质等相关知识，要求考生识记糖类、蛋白质的代谢，能结合所学的知识准确判断各选项。
20.【答案】D
【解析】解：A、发酵工程具有条件温和、产物单一、污染小的特点，A正确；
B、发酵工程的产品包括微生物的代谢产物、酶和菌体本身，B正确；
C、通常所指的发酵条件包括温度控制、溶氧控制、pH控制，C正确；
D、传统发酵技术和现代发酵工程最大的相同之处是利用各种微生物的代谢来实现相关产品的生产，D错误。
故选：D。
1、发酵工程生产的产品有两类：一类是代谢产物，另一类是菌体本身。
2、产品不同，分离提纯的方法一般不同。①如果产品是菌体，可采用过滤，沉淀等方法将菌体从培养液中分离出来；②如果产品是代谢产物，可用萃取、蒸馏、离子交换等方法进行提取。
3、发酵过程中要严格控制温度、pH、溶氧、通气量与转速等发酵条件。
4、发酵过程一般来说都是在常温常压下进行，条件温和、反应安全，原料简单、污染小，反应专一性强，因而可以得到较为专一的产物。
本题主要考查发酵工程的内容，要求考生识记相关知识，并结合所学知识准确答题。
21.【答案】A
【解析】解：A、哺乳动物成熟的红细胞没有细胞核，没有DNA，因此不能作为提取DNA的材料，A错误；
B、DNA不溶于95%的冷酒精，加入预冷的酒精溶液后析出的丝状物是DNA，B正确；
C、当NaCl溶液浓度低于0.14mol/L时，随着NaCl溶液浓度增加，DNA的溶解度降低；当NaCl溶液浓度高于0.14mol/L时，随着NaCl溶液浓度增加，DNA的溶解度升高，因此提取的DNA可溶解在2 mol/L的NaCl溶液中，C正确；
D、在沸水浴的条件下DNA遇二苯胺会呈现蓝色，D正确。
故选：A。
DNA的粗提取与鉴定的实验原理是：
①DNA的溶解性，DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的氯化钠溶液中的溶解度不同，利用这一特点可以选择适当浓度的盐溶液可以将DNA溶解或析出，从而达到分离的目的；
②DNA不溶于酒精溶液，细胞中的某些蛋白质可以溶解于酒精，利用这一原理可以将蛋白质和DNA进一步分离；
③DNA对于酶、高温和洗涤剂的耐受性，蛋白酶能水解蛋白质，但是不能水解DNA，蛋白质不能耐受较高温度，DNA能耐受较高温度洗涤剂能瓦解细胞膜，但是对DNA没有影响；
④在沸水浴的条件下DNA遇二苯胺会呈现蓝色。
本题主要考查DNA的粗提取及鉴定的方法的内容，要求考生识记相关知识，并结合所学知识准确答题。
22.【答案】A
【解析】A、细胞类生物的遗传物质都是DNA，A正确；
B、M细胞没有核膜包被的细胞核，属于原核生物，其无线粒体，但部分原核细胞含有与有氧呼吸有关的酶，仍能进行有氧呼吸，B错误；
C、M细胞为原核细胞，可能是自养型生物，如蓝细菌，C错误；
D、M细胞为原核细胞，不含染色体，不可能发生染色体变异，D错误。
故选：A。
分析题干信息：M细胞没有核膜包被的细胞核，但含有核糖体，属于原核细胞；N细胞含有叶绿体，为绿色植物细胞；P细胞能合成糖原，为动物细胞。
本题考查原核细胞和真核细胞的异同，要求考生识记原核细胞和真核细胞的形态和结构的异同，能正确分析题干信息，再结合所需的知识准确答题。
23.【答案】C
【解析】解：A、细胞膜的主要成分是磷脂和蛋白质分子，脂溶性物质优先通过细胞膜，亲水的葡萄糖难以自由扩散进入细胞，需要借助于载体蛋白，A正确；
B、葡萄糖转运蛋白（GLUT）是转运葡萄糖进入细胞的载体蛋白，在和被运输物质—葡萄糖结合时，构象发生改变，从而易于和葡萄糖结合在一起，B正确；
C、葡萄糖在细胞质基质中被分解为丙酮酸，在氧气存在条件下，丙酮酸才可进入线粒体，进行进一步的分解，线粒体不能直接分解葡萄糖，故线粒体外膜上不存在葡萄糖转运蛋白（GLUT），C错误；
D、GLUT的结构异常，则细胞不能吸收葡萄糖，从而造成血糖偏高，部分糖随尿排除，可能会引发糖尿病，D正确。
故选：C。
物质出
入细胞
的方式
被动运输
主动运输
自由扩散
协助扩散
运输方向
高浓度→低浓度
高浓度→低浓度
低浓度→高浓度
是否需要载体
不需要
需要
需要
是否消耗能量
不消耗
不消耗
消耗
图例
举例
O2、CO2、H2O、甘
油、乙醇、苯等出入细胞
红细胞吸收葡萄糖
小肠吸收葡萄糖、氨基酸、无机盐等
本题考查了物质的跨膜运输，意在考查考生的理解能力，列表比较几种跨膜运输的不同是解题的关键。
24.【答案】B
【解析】解：A、动物细胞培养中需要提供95%空气（保证细胞的有氧呼吸）和5%CO2（维持培养液的pH）的混合气体，A错误；
B、过程②常使用显微操作法对处于MII中期的卵母细胞进行处理，B正确；
C、过程③将激活后的重组细胞培养至囊胚或桑椹胚后移植，C错误；
D、后代丁的细胞核的遗传物质来自甲，细胞质的遗传物质来自于乙牛，则丁的遗传性状由甲和乙的遗传物质共同决定，D错误；
故选：B。
分析图解：图示过程为体细胞克隆过程，取甲牛体细胞，对处于减数第二次分裂中期的乙牛的卵母细胞去核，然后进行细胞核移植；融合后的细胞激活后培养到早期胚胎，再进行胚胎移植，最终得到克隆牛。
本题主要考查体细胞核移植技术的内容，要求考生识记相关知识，并结合所学知识准确答题。
25.【答案】C
【解析】解：A、该实验的目的是研究夏季开空调对室内微生物群落的影响，故需采集相同地点不同空调状态下的空气样本测定微生物数量，A正确；
B、培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供适合其生长繁殖的营养基质，为了满足不同细菌、真菌的生长需求，需配制不同成分和pH的培养基分别对细菌和真菌进行培养及计数，B正确；
C、由柱形图分析可知，当开启空调后，细菌和真菌微生物含量明显高于空调关闭时细菌和真菌的数量，这说明夏季空调开启后室内环境的变化促进了微生物繁殖，C错误；
D、室内微生物含量高时可用紫外灯或消毒液消毒，但消毒时人员需要离开，消毒完毕后需要通风，D正确。
故选：C。
培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质；根据物理性质分为固体培养基和液体培养基，培养基中一般含有水、碳源、氮源和无机盐。在提供上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质和氧气的要求。例如，培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素，培养霉菌时需将培养基的pH调至酸性，培养细菌时需将pH调至中性或微碱性，培养厌氧微生物时则需要提供无氧的条件。
本题考查微生物的分离与培养，要求考生识记培养基的概念、作用和微生物实验中的消毒方法，具备验证简单生物学事实的能力，并能对实验现象和结果进行解释、分析、处理。
26.【答案】B
【解析】解：A、八倍体小黑麦属于染色体变异，所以不属于转基因作物，A错误；
B、将目的基因导入受体细胞的叶绿体中，因为叶绿体的遗传是细胞质遗传，卵子中可能存在该叶绿体，所以可防止花粉传播造成的基因污染，B正确；
C、食用含抗生素抗性基因的食物不会增强人体抵抗病毒的能力，因为在食用时需要将该食物进行消化，不会将该基因整合到人体基因中，C错误；
D、转基因生物可能会对生物多样性构成威胁，进而影响生态系统的稳定性，D错误。
故选：B。
转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应、过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）．对待转基因技术的利弊，正确的做法应该是趋利避害，不能因噎废食。
本题考查转基因生物的安全性问题，要求考生识记转基因生物安全性问题，了解人们在食物安全、生物安全和环境安全三个方面进行的争论，明确面对转基因技术的利弊，再结合所学的知识准确判断各选项。
27.【答案】ACD
【解析】解：A、图中C贯穿于整个磷脂双分子层，且具有螺旋等空间结构，代表跨膜蛋白，其跨膜区段的氨基酸具有较强的疏水性，A正确；
B、题意显示，脂筏是质膜上富含胆固醇和鞘磷脂的微结构域，其中的胆固醇就像胶水一样，对鞘磷脂亲和力很高，并特意吸收或排除某些蛋白质，形成一些特异蛋白聚集的区域，会影响膜的流动性质，B错误；
C、结合图示可知，生物膜的基本支架是磷脂双分子层，C正确；
D、脂筏是生物膜上富含胆固醇和鞘磷脂的微结构域，据此可知，破坏胆固醇可能会导致脂筏结构解体，D正确。
故选：ACD。
流动镶嵌模型：
（1）磷脂双分子层构成膜的基本支架，这个支架是可以流动的。
（2）蛋白质分子以不同方式镶嵌在磷脂双分子层中，膜中的蛋白质大多也能运动。
（3）在细胞膜的外表，少数糖类与蛋白质结合形成糖蛋白。除糖蛋白外，细胞膜表面还有糖类与脂质结合形成糖脂。
本题考查细胞膜的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力，运用所学知识综合分析问题的能力是解答本题的关键。
28.【答案】CD
【解析】解：A、植物顶端分生区细胞代谢旺盛，含病毒少、甚至不含病毒，因此取材部位一般选择植物顶端分生区附近，A正确；
B、消毒的原则是既要杀死材料表面的微生物，又要减少消毒剂对细胞的伤害，通常外植体接种前常进行流水冲洗、酒精处理、消毒液处理等消毒措施，最后为了避免消毒液的危害，需要用无菌水清洗三次，B正确；
C、为充分利用培养条件，可以将外植体的13-12倒插入诱导愈伤组织的培养基中，C错误；
D、脱毒苗是不含病毒的植株，不具有抗病毒的能力，进行病毒接种实验是筛选出抗毒苗，D错误。
故选：CD。
植物组织培养的过程为：离体的植物组织、器官或细胞经过脱分化形成愈伤组织，愈伤组织经过再分化过程形成胚状体，进一步发育形成植株。
本题考查植物组织培养的相关知识，要求考生识记植物组织培养的原理、过程和条件等知识，运用所学的知识对选项作出准确的判断，属于考纲识记和理解层次的考查。
29.【答案】ABD
【解析】解：A、图中的接种方法为稀释涂布平板法，A正确；
B、将10g土样加入到90mL无菌水中定容至100mL后，此时土样稀释倍数为10倍，再经3次10倍稀释得到3号试管中的样品，故3号试管中样品的稀释倍数是104倍，B正确；
C、5号试管进行稀释涂布平板法计数的结果表明每克土壤中的菌株数为（168+175+167）÷3×106÷0.1=1.7×109个，C错误；
D、由于牛肉膏蛋白胨培养基能提供氮源，所以该实验需设置牛肉膏蛋白胨培养基作对照，用以判断选择培养基是否有选择作用，D正确。
故选：ABD。
分析题图：图中5支试管为梯度稀释，最后经稀释涂布平板法接种培养后进行计数。统计菌落数在30-300的平板，取其平均值，进行计数。计数公式为（C÷V）×M（C为平均菌落数，V为涂布液体积，M为稀释倍数）。
本题结合图示考查微生物分离和培养的相关知识，意在考查学生对所学知识的理解与掌握程度，培养了学生分析问题、获取信息、解决问题的综合应用的能力。
30.【答案】AD
【解析】解：A、并不是水稻所有DNA都含有OsPTF基因，所以不能以任意一个水稻细胞的DNA为模板，以水稻RNA为模板通过逆转录可以合成cDNA，然后再以cDNA为模板利用PCR扩增可获得大量OsPTF基因，A错误；
B、识图分析可知，抗除草剂基因位于启动子2的后面，因此RNA聚合酶与启动子2识别并结合后，启动抗除草剂基因的转录，B正确；
C、由于图中T-DNA的序列中含有目的基因和抗除草剂基因，故可通过含除草剂的选择培养基筛选含有目的的基因大豆愈伤组织，C正确；
D、用EcoRⅠ、BamHⅠ双酶切重组Ti质粒后，由于Ti质粒是环状的DNA，会得到2种片段，因此经电泳分离至少得到两条带，D错误。
故选：AD。
基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取，获取方法包括：从基因文库中获取、PCR扩增技术和人工合成法。②基因表达载体的构建，是基因工程的核心步骤，基因表达载体的组成包括：启动子、目的基因、终止子和标记基因。③将目的基因导入受体细胞，根据不同的对象采用不同的导入方法，对植物细胞可以采用农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；对于动物采用显微注射技术；对于微生物一般采用Ca2+转化法。④目的基因的检测与鉴定，分子水平上的检测方法包括：DNA分子杂交法、分子杂交法和抗原-抗体杂交法；也可以进行个体水平上的鉴定，如抗性实验等。
本题主要考查的是基因工程的操作的相关知识，意在考查学生对基础知识的理解掌握，难度适中。
31.【答案】水浴加热 深 还原糖 Ⅱ 浅 Ⅰ 不能 西瓜果实的颜色干扰实验结果的观察
【解析】解：（1）在b、d试管中各加入等量斐林试剂，水浴加热后，b试管呈砖红色，由于d试管提取天数更晚，还原糖的含量更高，因此与b相比d的颜色更深；斐林试剂是用来检验还原糖的，图A中表示这种物质含量变化趋势的曲线是Ⅱ。
（2）据图分析可知：图A中Ⅰ为淀粉，Ⅱ为还原糖，x天时淀粉含量较多，还原糖含量较少，y天时淀粉含量较少，还原糖含量较多，所以用碘液检验时，a试管颜色比c试管更深，图A中表示这种物质含量变化趋势的曲线是Ⅰ。
（3）如果实验材料由香蕉果实改为西瓜果实，由于西瓜果实的颜色干扰实验结果的观察，因此进行上述操作，不能得到理想的实验结果。
故答案为：
（1）水浴加热 深 还原糖Ⅱ
（2）浅Ⅰ
（3）不能 西瓜果实的颜色干扰实验结果的观察
据题图信息：“香蕉成熟过程中，果实中的贮藏物不断代谢转化，香蕉逐渐变甜”可知此过程中淀粉转化成还原糖，因此图A中Ⅰ为淀粉，Ⅱ为还原糖，碘液用来检验淀粉，斐林试剂用来检验还原糖。
本题考查生物组织中化合物的鉴定，对于此类试题，需要考生注意的细节较多，如实验的原理、实验采用的试剂及试剂的使用方法、实验现象等，需要考生在平时的学习过程中注意积累。
32.【答案】主动运输 特异性受体 信息交流 内质网、高尔基体、线粒体 耗能 抑制H+-K+-ATP酶的活性，抑制胃壁细胞内H+运输到膜外胃腔中，减少胃酸的分泌量
【解析】解：（1）由分析可知：胃壁细胞内的H+运输到膜外的方式属于主动运输，图中的M1-R、H2-R、G-R可以接受信号分子，说明图中的M1-R、H2-R、G-R属于膜上的特异性受体，其与信号分子结合后，引起细胞内的一系列变化，这体现了细胞膜的信息交流功能。
（2）胃蛋白酶属于分泌蛋白，在合成与分泌过程涉及到的细胞结构有：核糖体、内质网、高尔基体、囊泡、线粒体、细胞膜，其中需要具膜细胞器有内质网、高尔基体、线粒体，其合成之后到分泌之前是耗能的。
（3）根据图示H+-K+-ATP酶可以逆浓度转运H+和K+，需要ATP水解提供能量，所以H+-K+-ATP酶是一种ATP水解酶，起催化作用，还具有物质运输作用。H+-K+-ATP酶位于胃壁细胞的细胞膜上，是一种质子泵。它通过自身的磷酸化与去磷酸化完成H+/K+跨膜转运，不断将胃壁细胞内的H+运输到膜外胃腔中，从而促进胃酸的分泌。一些化合物如SCH32651与H+-K+-ATP酶上的钾离子高亲和性部位作用，抑制酶的活性，抑制胃壁细胞内H+运输到膜外胃腔中，减少胃酸的分泌量。
故答案为：
（1）主动运输 特异性受体 信息交流
（2）内质网、高尔基体、线粒体 耗能
（3）抑制H+-K+-ATP酶的活性，抑制胃壁细胞内H+运输到膜外胃腔中，减少胃酸的分泌量
分析题图：“H+-K+-ATP酶位于胃壁细胞，是质子泵的一种，它通过自身的磷酸化与去磷酸化完成H+/K+跨膜转运，不断将胃壁细胞内的H+运输到膜外胃腔中，”胃腔中H+的浓度高于胃壁细胞，细胞膜内K+的浓度高于细胞膜外，由此可见H+运出细胞、K+运进细胞都消耗能量，都为主动运输。
本题考查了物质跨膜运输的相关知识，意在考查考生审题能力，获取信息能力，难度适中。
33.【答案】维生素 不能 醋酸菌是好氧菌，在无氧条件下不能存活，而乳酸菌是厌氧菌，在有氧条件下不能存活 增多 杀灭其他杂菌 无氧条件 温度控制在18-30℃灭菌处理
【解析】解：（1）参与前期酸味形成的菌有醋酸菌和乳酸菌。培养乳酸菌时，所用培养基除了含有碳源、氮源、水和无机盐外，还需要添加维生素，因为乳酸菌不能合成维生素，且需要无氧环境。醋酸菌和乳酸菌在同一容器中进行发酵时，“不能”同时产生醋酸和乳酸，这是因为醋酸菌是好氧菌，在无氧条件下不能存活，而乳酸菌是厌氧菌，在有氧条件下不能存活，因而不能同时培养。
（2）工业上酿制奶啤时，由于细胞代谢的进行，大麦发芽过程中细胞内有机物种类“增多，麦汁煮沸的目的是通过高温可杀灭其他杂菌，保证啤酒发酵过程中杂菌的污染。无氧条件，后期获得酒精需要通过酵母菌的无氧呼吸过程，酵母菌无氧呼吸过程需要的条件为温度控制在18-30℃。从食品安全的角度考虑，上述工艺流程图中①的操作应该是灭菌处理，消除发酵液中的微生物，为上市做准备。
故答案为：
（1）维生素 不能 醋酸菌是好氧菌，在无氧条件下不能存活，而乳酸菌是厌氧菌，在有氧条件下不能存活
（2）增多 杀灭其他杂菌 无氧条件 温度控制在18-30℃灭菌处理
1、果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。故果酒的制作原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精，酵母菌最适宜生长繁殖的温度范围是18～25℃；生产中是否有酒精的产生，可用酸性重铬酸钾来检验，该物质与酒精反应呈现灰绿色。
2、果醋制作中起到主要作用的微生物是醋酸菌，醋酸菌是一种好氧细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动，其代谢类型属于异养需氧型。当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解为醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。醋酸菌的最适生长温度为30～35℃。
本题考查微生物的分离与培养、啤酒发酵等知识，意在考查考生的理解能力，落实生命观念、科学思维等核心素养。
34.【答案】胞外 （免疫的）B淋巴 PEG（聚乙二醇）或灭活病毒 体内或体外 抗体—药物偶联物（ADC） 有丝分裂 无 B细胞不能增殖，骨髓瘤细胞既不能进行全合成途径也不能进行补救合成途径从而不能增殖
【解析】解：（1）检测发现细胞的CLDN6蛋白能够促进肿瘤发生，为了减少肿瘤的发生，因而需要破坏该蛋白质的活性，因此选定其作为单克隆抗体的作用靶点。而CLDN6蛋白是一个跨膜蛋白，包括胞外区、跨膜区和胞内区，制备免疫小鼠所用的抗原时，应提取胞外区（暴露在细胞表面，能产生免疫应答）对应的基因序列用于设计抗原，诱导抗体的产生。
（2）将CLDN6蛋白抗原注射到小鼠体内，从该小鼠脾脏中获取（免疫的）B淋巴细胞，利用PEG（聚乙二醇）或灭活病毒诱导此细胞与骨髓瘤细胞融合，经筛选得到杂交瘤细胞，再通过克隆化培养和抗体阳性检测，筛选得到产生单克隆抗体的杂交瘤细胞，由于此时经过两次筛选得到的杂交瘤细胞既能产生所需抗体，还能大量增殖，因而可通过注射到小鼠体内或体外培养获得大量单克隆抗体。
（3）利用抗原和抗体特异性结合的特点，将该单克隆抗体与抗癌药物DM1结合形成抗体—药物偶联物（ADC），DM1是一种小分子物质，能够抑制纺锤体微管的形成，由此分析DM1能够进入细胞中通过抑制细胞有丝分裂过程中的纺锤体的形成过程起到抗癌的作用。
（4）融合前将小鼠的脾脏中的B细胞和骨髓瘤细胞分别置于含HAT的选择培养基中培养，一段时间后培养基中无细胞增殖，这是因为B细胞不能增殖，而培养基中因为加入了HAT，因而骨髓瘤细胞中不能进行全合成途径，同时由于缺乏转化酶因而也没有合成DNA的补救途径，因此骨髓瘤细胞也不能进行增殖。
故答案为：
（1）胞外
（2）（免疫的）B淋巴 PEG（聚乙二醇）或灭活病毒 体内或体外
（3）抗体—药物偶联物（ADC） 有丝分裂
（4）无 B细胞不能增殖，骨髓瘤细胞既不能进行全合成途径也不能进行补救合成途径从而不能增殖
单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原的抗体。通常采用杂交瘤技术来制备，杂交瘤抗体技术是在细胞融合技术的基础上，将具有分泌特异性抗体能力的B淋巴细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合为杂交瘤细胞，杂交瘤细胞既能产生抗体，又能无限增殖。用具备这种特性的单个杂交瘤细胞培养成细胞群，可制备针对一种抗原的特异性抗体即单克隆抗体。
本题考查了动物细胞工程，掌握单克隆抗体的制备过程是解题的关键。
35.【答案】所选的限制酶所识别的序列不能同时存在于氨青霉素抗性基因和四环素抗性基因之中 不能 有可能是导入了不含目的基因的质粒PO 植物细胞具有全能性 DNA半保留复制 复性 凝胶的浓度 蛋白质工程
【解析】解：（1）选用限制酶对载体进行切割时，应注意所选的限制酶所识别的序列不能同时存在于氨苄青霉素抗性基因四环素抗性基因之中（不能同时酶切氨苄青霉素抗性基因和四环素抗性基因），以防止影响后续目的基因的检测。
（2）转化指的是目的基因进入受体细胞，并在受体细胞内维持稳定和表达的过程，若受体细胞能够体现氨苄青霉素抗性，不能说明目的基因已成功导入受体细胞，因为有可能是导入了不含目的基因的P0质粒。
（3）受体细胞最终发育成完整的转基因大豆植株，是因为植物细胞具有全能性，在组织培养时该全能性能表达出来。
（4）PCR技术是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术，其原理是DNA半保留复制，PCR过程每次循环分为3步，分别为变性（超过90℃）、复性（50℃左右）、延伸（72℃左右），故其中温度最低的一步是复性；在凝胶中DNA分子的迁移速率与凝胶的浓度、DNA分子的大小和构象等有关，通过与标准DNA的对比可确定电泳获得的DNA分子的大小。
（5）通过PCR技术对目的基因进行定点突变，属于基因的修饰，属于蛋白质工程的范畴。
故答案为：
（1）所选的限制酶所识别的序列不能同时存在于氨青霉素抗性基因和四环素抗性基因之中（不能同时酶切氨苄青霉素抗性基因和四环素抗性基因）
（2）不能 有可能是导入了不含目的基因的质粒PO
（3）植物细胞具有全能性
（4）DNA半保留复制（DNA的热变性） 复性 凝胶的浓度
（5）蛋白质工程
基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成；（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等；（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样；（4）目的基因的检测与鉴定。
本题考查基因工程的相关知识，意在考查考生运用所学基础知识，结合所学知识解决相关的生物学问题的能力。
2022-2023学年辽宁省葫芦岛市高二（下）期末生物试卷
一、单选题（本大题共26小题，共33.0分）
1. 光面内质网是指无核糖体附着的内质网，是脂质合成的重要场所。下列细胞中，光面内质网较发达的是（ ）
A. 口腔上皮细胞 B. 睾丸（间质）细胞 C. 肝脏细胞 D. 唾液腺细胞
2. 动物细胞融合的结果是（ ）
A. 获得新个体 B. 获得杂交细胞 C. 获得新物种 D. 获得多倍体种群
3. 下列不宜作为基因工程中标记基因的是（ ）
A. 核糖体蛋白基因 B. 荧光蛋白基因
C. 产物具有颜色反应的基因 D. 抗性基因
4. 下列生物学研究和科学方法对应错误的是（ ）
A. 施莱登、施旺建立细胞学说——不完全归纳法
B. 分离细胞中的细胞器—差速离心法
C. 人鼠细胞融合实验同位素标记法
D. 制作真核细胞的三维结构模型—模型建构法
5. 某同学利用选择培养基成功分离出了土壤中的自生固氮菌，得到了如图所示的实验结果，以下说法正确的是（ ）
A. 该实验使用了划线法接种 B. 该实验使用了液体培养基
C. 该实验使用了无氮培养基 D. 该实验使用了无碳培养基
6. 下列不属于动物细胞工程应用的是（ ）
A. 生产珍贵的医用蛋白 B. 增加濒危物种的存活数量
C. 加速家畜遗传改良进程 D. 大量生产抗癌物质——紫杉醇
7. 诗句“也是人间玉，无非香不同。初闻封鼻孔，细品引馋虫。”描述的正是腐乳——我国古代劳动人民创造出的一种经过微生物发酵制作的大豆食品。下列叙述错误的是（ ）
A. 制作腐乳前需要对各种用具进行清洁和消毒
B. 腐乳中的蛋白质被分解成小分子，易于人体消化吸收
C. 腐乳制作过程中起主要作用的微生物是曲霉
D. 为提高腐乳品质和产量，可利用基因工程改造和选育优良菌种
8. 某科研团队采用农杆菌转化法，将抗草甘膦基因转入到豌豆中，经检测，转化体的子一代获得了目的基因片段（外源基因）并表达。下列有关该技术的原理叙述正确的是（ ）
A. 基因突变 B. 基因重组 C. 单倍体育种 D. 多倍体育种
9. 某化合物由六个单体构成，下列叙述正确的是（ ）
A. 若为多肽，则其彻底水解时一定断裂5个肽键
B. 若为淀粉的部分结构，则最终氧化分解的产物是葡萄糖
C. 若为DNA单链的部分结构，则其初步水解产物一定是4种
D. 若为RNA单链的部分结构，则其彻底水解产物可能有6种
10. 如图所示是在显微镜下观察到的不同视野，若将视野1转为视野2，则正确的操作步骤是（ ）
①转动粗准焦螺旋
②调节光圈
③转动细准焦螺旋
④转动转换器
⑤移动标本
A. ①→②→③→④ B. ⑤→④→②→③ C. ②→①→⑤→④ D. ④→⑤→③→②
11. 植株甲的基因型为Bb,植株乙的基因型为BB，分别取植株甲和植株乙的体细胞获得原生质体后，在溶液中诱导这两个原生质体融合，融合形成的细胞的基因型可能是（ ）
①BBbb②BBBB③BBBb④Bbbb⑤bbbb
A. ①②③ B. ①②④ C. ②③⑤ D. ①③⑤
12. 科学家将含有人溶菌酶基因的表达载体注射到鸡胚细胞中获得转基因鸡，人溶菌酶基因能在鸡的输卵管细胞中特异性表达，最终在鸡蛋中收集人溶菌酶。该过程的核心步骤是（ ）
A. 获取人溶菌酶基因 B. 将人溶菌酶基因导入受体细胞
C. 基因表达载体的构建 D. 人溶菌酶基因的检测和鉴定
13. 为满足食醋产量需求、缩短发酵周期，现代工业制醋一般采用人工选育的纯培养的高产醋酸菌进行醋酸发酵，下列有关描述错误的是（ ）
A. 纯培养物是指由单一个体繁殖所获得的微生物群体
B. 与酒精发酵相比，醋酸发酵需要在较高的温度条件下进行
C. 通过检测发酵液中的醋酸含量，筛选出高产醋酸菌并进行纯化
D. 为防止杂菌污染，醋酸菌的纯化培养需要在密闭无菌条件下进行
14. 干细胞在生命科学的细胞修复、发育生物学、医学、药物学等领域有着极为广阔的应用前景，吸引着众多科学家投入到相关研究中。下列相关叙述错误的是（ ）
A. 造血干细胞可以分化为各种血细胞 B. 干细胞都是从胚胎中分离提取的细胞
C. 不同类型的干细胞的分化潜能有差别 D. 产生的特定细胞，可以用于新药测试
15. 爱德华兹因体外受精技术获得2010年诺贝尔生理学或医学奖，被誉为“试管婴儿之父”。下列相关说法错误的是（ ）
A. 收集的精子需诱导获能后才能用于体外受精
B. 采集来的初级卵母细胞可以直接用于体外受精
C. 早期胚胎植入子宫后需对母体进行妊娠检查
D. 试管婴儿技术解决了某些不孕夫妇的生育问题
16. 为了在大肠杆菌细胞中成功表达人胰岛素基因，首先需要提取细胞的mRNA，经反转录等过程来获取目的基因。下列相关叙述，错误的是（ ）
A. 用于反转录的mRNA只能从胰岛B细胞中获取
B. 反转录过程需要四种游离的核糖核苷酸作为原料
C. 经反转录得到的目的基因不含启动子
D. 反转录获取目的基因时遵循碱基互补配对原则
17. 图甲乙分别表示EcoRⅠ和SmaⅠ限制酶识别序列和切割位点（图中箭头处），可形成不同的末端。据图分析，下列说法正确的是（ ）
A. 限制酶可作用于DNA的磷酸二酯键和氢键
B. 识别黏性末端的DNA连接酶也能识别平末端
C. 限制酶的识别序列都是由6个核苷酸组成的
D. 图甲的末端“缝合”时有氢键的重新连接
18. 下列关于无菌技术的叙述，正确的是（ ）
A. 操作者的双手清洁后，要用无水酒精擦拭消毒
B. 煮沸消毒法中100℃煮沸5～6分钟只能杀死微生物的营养细胞和部分芽孢
C. 培养基、培养皿等均须采用干热灭菌法灭菌，培养基在丢弃前还要进行灭菌处理
D. 接种室、接种箱或超净工作台在使用过程中，要用紫外线照射进行消毒
19. 神舟十二号载人飞船搭载聂海胜、刘伯明、汤洪波三名航天员，飞往太空。在中国空间站的三个月里，天宫二号货运飞船曾为天和核心舱送去一份“鱼香肉丝外卖”。下列叙述正确的是（ ）
A. 鱼香肉丝中含有的糖类均可直接被航天员体内的肌肉细胞吸收合成肌糖原
B. 鱼香肉丝中的肉类和蔬菜类食物可为航天员提供糖类等各种营养物质
C. 航天员从鱼香肉丝中摄入的糖类、脂肪、蛋白质等生物大分子均可作为细胞的能源物质
D. 因“鱼香肉丝外卖”已经煮熟，所以不能用双缩脲试剂检测其中是否含有蛋白质
20. 发酵工程的内容包括菌种的选育、培养基的配制、灭菌、扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离提纯等方面。下列关于发酵工程的认识错误的是( )
A. 发酵工程具有条件温和、产物单一、污染小的特点
B. 发酵工程的产品包括微生物的代谢产物和菌体本身
C. 通常所指的发酵条件包括温度、溶解氧和pH等
D. 发酵工程与传统发酵技术最大的区别是前者可以用微生物进行发酵
21. 下列关于DNA粗提取与鉴定实验的叙述，不正确的是（ ）
A. 可选择香蕉、菜花、猪血等新鲜材料提取DNA
B. 加入预冷的酒精溶液后析出的丝状物是DNA
C. 提取的DNA可溶解在2mol/L的NaCl溶液中
D. 使用二苯胺试剂鉴定DNA时需要沸水浴加热
22. 某兴趣小组研究M、N、P3种细胞的结构和功能，发现M细胞没有核膜包被的细胞核，但含有核糖体，N细胞含有叶绿体，P细胞能合成糖原。下列叙述正确的是（ ）
A. M、N、P细胞的遗传物质一定是为DNA
B. M细胞无线粒体，只能进行无氧呼吸
C. M、P细胞一定取材于异养型生物
D. M、N、P细胞均有发生染色体变异的可能
23. 葡萄糖转运蛋白（GLUT）是转运葡萄糖进入细胞的载体蛋白。我国科学家成功解析了人的GLUT处于不同构象的晶体结构。下列相关叙述不正确的是（ ）
A. 亲水的葡萄糖难以自由扩散进入细胞 B. 葡萄糖转运依赖于GLUT的构象改变
C. 线粒体外膜上应分布着大量的GLUT D. GLUT的结构异常可能会引发糖尿病
24. 如图是利用体细胞核移植技术克隆优质奶牛的简易流程图，下列有关叙述正确的是（ ）
A. 过程①需要提供95%O2和5%CO2的混合气体
B. 过程②常使用显微操作法对卵母细胞进行处理
C. 过程③将激活后的重组细胞培养至原肠胚后移植
D. 后代丁的遗传性状由甲和丙的遗传物质共同决定
25. 某兴趣小组同学研究夏季开空调对室内微生物群落的影响，结果如图。下列相关叙述错误的是（ ）
A. 需采集相同地点不同空调状态下的空气样本测定微生物数量
B. 需配制不同成分和pH的培养基分别对细菌和真菌进行培养及计数
C. 本研究结果表明，夏季空调开启后室内环境的变化抑制了微生物繁殖
D. 室内微生物含量高时可用紫外灯或消毒液消毒
26. 下列关于转基因产品安全性问题的叙述正确的是（ ）
A. 抗虫棉、耐储藏番茄、八倍体小黑麦都是常见的转基因作物
B. 将目的基因导入受体细胞的叶绿体中，可防止花粉传播造成的基因污染
C. 食用含抗生素抗性基因的转基因食物可显著增强人体抵抗病菌的能力
D. 转基因生物不会对生物多样性和生态平衡造成威胁
二、多选题（本大题共4小题，共12.0分）
27. 在流动镶嵌模型提出后，研究人员又提出了“脂筏模型”：脂筏是生物膜上富含胆固醇和鞘磷脂的微结构域，其中的胆固醇就像胶水一样，对鞘磷脂亲和力很高，并特意吸收或排除某些蛋白质，形成一些特异蛋白聚集的区域，结构模型如图所示，下列叙述正确的是（ ）
A. 图中C代表膜蛋白 B. 脂筏的存在不会影响膜的流动性
C. 生物膜的基本支架是磷脂双分子层 D. 破坏胆固醇可能会导致脂筏结构解体
28. 某研究性学习小组拟培育一种名贵花卉的脱毒苗，其技术路线为“取材→消毒→愈伤组织培养→生芽、生根→移栽”。相关叙述错误的是（ ）
A. 取材部位一般选择植物顶端分生区附近，因其含病毒少、甚至不含病毒
B. 外植体接种前需进行流水冲洗、酒精消毒、次氯酸钠处理等消毒措施
C. 为充分利用培养条件，可以将外植体的13-12倒插入培养基中
D. 将组培苗移栽后，需进行病毒接种实验来筛选出脱毒苗
29. 如图为“土壤中分解尿素的细菌的分离和计数”实验中样品稀释示意图。据图分析正确的是（ ）
A. 上述方法称为稀释涂布平板法
B. 3号试管中的样品溶液稀释倍数为104倍
C. 5号试管的结果表明每克土壤中的菌株数为1.7×108个
D. 该实验需设置牛肉膏蛋白胨培养基，用以判断选择培养基是否有选择作用
30. 为提高大豆对磷元素的吸收能力，研究人员利用农杆菌转化法将水稻的耐低磷基因OsPTF转移到大豆植株中，如图为重组Ti质粒上T-DNA的序列结构示意图。下列相关叙述不正确的是（ ）
A. 以任意一个水稻细胞的DNA为模板进行PCR扩增就可以获得大量OsPTF基因
B. RNA聚合酶与启动子2识别并结合后，启动抗除草剂基因的转录
C. 可通过含除草剂的选择培养基筛选含有目的基因大豆愈伤组织
D. 用EcoRⅠ、BamHⅠ双酶切重组Ti质粒后，经电泳分离至少得到三条带
三、探究题（本大题共5小题，共55.0分）
31. 香蕉成熟过程中，果实中的贮藏物不断代谢转化，香蕉逐渐变甜。图A中Ⅰ、Ⅱ两条曲线分别表示香蕉果实成熟过程中两种物质含量的变化趋势。请回答下列问题：
取成熟到第x天和第y天的等量香蕉果肉，分别加等量的蒸馏水制成提取液。然后在a、b试管中各加5mL第x天的提取液，在c、d试管中各加5mL第y天的提取液，如图B。
（1）在b、d试管中各加入等量斐林试剂， ______ 后，b试管呈砖红色，与b相比d的颜色更 ______ ，两管中被检测的物质是 ______ ，图A中表示这种物质含量变化趋势的曲线是 ______ 。
（2）在a、c试管中各加入等量碘液后，a试管呈蓝色，与a相比c的颜色更 ______ ，图A中表示这种物质含量变化趋势的曲线是 ______ 。
（3）如果实验材料由香蕉果实改为西瓜果实，进行上述操作， ______ （选填“能”或“不能”）得到理想的实验结果，理由是： ______ 。
32. H+-K+-ATP酶位于胃壁细胞的细胞膜上，是一种质子泵。它通过自身的磷酸化与去磷酸化完成H+/K+跨膜转运，不断将胃壁细胞内的H+运输到膜外胃腔中，从而促进胃酸的分泌。其作用机理如图所示，“+”表示促进磷酸化。请据图回答下列问题。
（1）胃壁细胞内的H+运输到膜外的方式属于 ______ ，图中的M1-R、H2-R、G-R属于膜上的 ______ ，其与信号分子结合后，引起细胞内的一系列变化，这体现了细胞膜的 ______ 功能。
（2）胃蛋白酶的合成与分泌过程，需要具膜细胞器 ______ 的参与，其合成之后到分泌之前是 ______ （填“耗能”或“不耗能”）的。
（3）一些化合物如SCH32651与H+-K+-ATP酶上的钾离子高亲和性部位作用，抑制酶的活性，从而起到治疗因胃酸分泌过多引起的胃溃疡，其原理是 ______ 。
33. 奶啤被称为“奶香槟”，是一种新型含酒精的乳饮料。它具有馥郁的麦芽清香，略带碳酸气，又具有乳饮料酸甜适口的特征，广受人们喜爱。奶啤是通过细菌发酵将麦汁中的麦芽糖和其他糖类转化为醋酸和乳酸，配以一定比例的原料乳，再结合酒精发酵制作而成。工艺流程如图，回答下列问题：
（1）参与前期酸味形成的菌有醋酸菌和乳酸菌。培养乳酸菌时，所用培养基除了含有碳源、氮源、水和无机盐外，还需要添加 ______ 。醋酸菌和乳酸菌在同一容器中进行发酵时， ______ （填“能”或“不能”）同时产生醋酸和乳酸，原因是 ______ 。
（2）工业上酿制奶啤时，大麦发芽过程中细胞内有机物种类 ______ （填“增多”或“减少”），麦汁煮沸的目的是 ______ 。后期获得酒精时的发酵条件主要为 ______ 。从食品安全的角度考虑，上述工艺流程图中①的操作应该是 ______ 。
34. 现如今单克隆抗体治疗逐渐成为癌症治疗中的有效方法，恶性肿瘤细胞表面表达着一些异于普通健康细胞的抗原，这些抗原可以作为单克隆抗体的良好靶点。据此回答下列问题：
（1）检测发现细胞的CLDN6蛋白能够促进肿瘤发生，选定其作为单克隆抗体的作用靶点。CLDN6蛋白是一个跨膜蛋白，包括胞外区、跨膜区和胞内区，制备免疫小鼠所用的抗原时，应提取 ______ 区基因序列用于设计抗原。
（2）将CLDN6蛋白抗原注射到小鼠体内，从该小鼠脾脏中获取 ______ 细胞，利用 ______ 诱导此细胞与骨髓瘤细胞融合，经筛选得到杂交瘤细胞，通过克隆化培养和抗体阳性检测，多次筛选得到产生单克隆抗体的杂交瘤细胞，最终可通过 ______ 培养获得大量单克隆抗体。
（3）将该单克隆抗体与抗癌药物DM1结合形成 ______ ，DM1是一种小分子物质，能够抑制纺锤体微管的形成，由此分析DM1能够进入细胞中通过抑制细胞的 ______ 过程起到抗癌的作用。
（4）已知核酸合成有两条途径，如图所示，其中物质A可以阻断全合成途径。正常细胞内含有补救合成途径所必需的转化酶和激酶，制备单克隆抗体时选用的骨髓瘤细胞中缺乏转化酶。可将加入H、A、T三种物质的HAT培养基作为制备单克隆抗体时的选择培养基。
融合前将小鼠的脾脏中的B细胞和骨髓瘤细胞分别置于含HAT的选择培养基中培养，一段时间后培养基中 ______ （填“有”或“无”）细胞增殖，原因是 ______ 。
35. 拟南芥（2N=10）属于十字花科植物，自花传粉，被誉为“植物界的果蝇”，广泛应用于植物遗传学研究。拟南芥细胞中存在某种转录因子能够明显提高其他基因的表达水平。研究人员将从拟南芥细胞中获取的转录因子转移到大豆细胞内，并使其过量表达，发现大豆中油酸和亚油酸的含量显著提高。图中限制酶EcoRV的酶切位点为-GAT↓ATC-。
（1）质粒Po具有氨苄青霉素抗性基因（amp'）和四环素抗性基因（tetr），对其进行切割时应该注意 ______ ，以便筛选重组质粒。
（2）P3质粒导入受体细胞通常使用农杆菌转化法，若受体细胞能够表现氨苄青霉素抗性， ______ （填“能”或“不能”）说明目的基因已成功导入受体细胞，并说出理由： ______ 。
（3）受体细胞能够培育出转基因大豆植株的原因是 ______ 。
（4）为了获得大量的目的基因，可以采用PCR技术进行扩增，PCR技术依据的原理是 ______ 。PCR过程每次循环分为3步，其中温度最低的一步是 ______ PCR扩增完成后，常采用琼脂糖凝胶电泳来鉴定PCR的产物。在凝胶中DNA分子的迁移速率与 ______ 等有关。
（5）利用PCR技术，在引物的某个特定位点引入一个或多个不能与目的基因配对的碱基，就可以在目的基因中带来定点突变，据此获得的目的基因再经表达、纯化获得蛋白质，该过程属于 ______ （填工程技术）的范畴。
答案和解析
1.【答案】B
【解析】
【分析】
1、核糖体是蛋白质合成车间，包括游离核糖体和附着型核糖体两种类型。游离核糖体合成的是胞内蛋白，附着型核糖体合成的是分泌蛋白。
2、内质网是蛋白质等大分子物质合成、加工的场所，是脂质合成车间。
本题主要考查内质网的相关知识，意在考识记能力和综合运用能力。
【解答】
A、光面内质网可合成脂质，口腔上皮细胞主要起保护作用，内质网不发达，A错误；
B、睾丸（间质）细胞可合成雄性激素（脂质），光面内质网发达，B正确；
CD、肝脏细胞和液腺细胞可合成、分泌某些蛋白质，粗面内质网比较发达，CD错误。
故选：B。
2.【答案】B
【解析】解：动物细胞融合又叫细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程，融合的结果是获得杂交细胞。
故选：B。
1、动物细胞融合又叫细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程，融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞。
2、体细胞杂交技术的优点是克服远缘杂交不亲和的障碍。
本题考查动物细胞融合相关知识，旨在考查学生对动物细胞融合过程等细胞工程相关知识的识记、理解与灵活运用能力。
3.【答案】A
【解析】解：A、核糖体蛋白基因所有细胞中都含有，不宜作为基因工程中标记基因，符合题意，A正确；
B、荧光蛋白基因可以用作基因工程的标记基因，不符合题意，B错误；
C、产物具有颜色反应的基因可根据颜色反应是否发生筛选重组质粒，可以用作基因工程的标记基因，不符合题意，C错误；
D、抗性基因（如氨苄青霉素抗性基因）可作为基因工程的标记基因，筛选重组质粒，不符合题意，D错误。
故选：A。
作为基因工程的载体，其上要有标记基因用于筛选重组DNA分子，可以是四环素、氨苄青霉素等抗性基因，也可以是荧光蛋白基因或产物能显色的基因。
本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的操作工具，尤其是载体，掌握作为基因工程的载体需要具备的条件，能根据题干要求做出准确的判断。
4.【答案】C
【解析】解：A、施莱登和施旺运用不完全归纳法，建立了细胞学说，A正确；
B、不同细胞器的大小不同，可以用差速离心法分离各种细胞器，B正确；
C、人鼠细胞融合实验采用的荧光标记法，C错误；
D、制作真核细胞的三维结构模型采用的是建构物理模型法，D正确。
故选：C。
1、不同细胞器个体的重量不同，可以用差速离心法分离各种细胞器。
2、模型构建法：模型是人们为了某种特定的目的而对认识对象所做的一种简化的概括性的描述，这种描述可以是定性的，也可以是定量的；有的借助具体的实物或其它形象化的手段，有的则抽象的形式来表达。模型的形式很多，包括物理模型、概念模型、数学模型等。以实物或图画形式直观的表达认识对象的特征，这种模型就是物理模型，如真核细胞的三维结构模型。
本题考查教材经典实验的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力，运用所学知识综合分析问题的能力是解答本题的关键。
5.【答案】C
【解析】解：A、该实验使用了稀释涂布平板法，A错误；
B、该实验使用了固体培养基，B错误；
C、要从土壤中分离出自生固氮菌，需要采用无氮培养基，C正确；
D、自生固氮菌属于异养生物，该实验需要使用含有碳源的培养基，D错误。
故选：C。
1、自生固氮微生物是指在土壤中能够独立进行固氮的微生物，其中，多数是一类叫做自生固氮菌的细菌。
2、选择培养基是指通过培养混合的微生物，仅得到或筛选出所需要的微生物，其他不需要的种类在这种培养基上是不能生存的。
本题结合图解，考查培养基的相关知识，要求考生识记培养基的种类及功能，能结合图中信息做出准确的判断。
6.【答案】D
【解析】解：A、生产许多有价值的蛋白质生物制品，如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等都可以借助于动物细胞的大规模培养来生产，是动物细胞工程的应用，A正确；
B、采用动物细胞核移植技术等可增加濒危物种的存活数量，这属于动物细胞工程的应用，B正确；
C、利用动物细胞核移植技术可以加速家畜遗传改良进程，这属于动物细胞工程的应用，C正确；
D、大量生产抗癌物质——紫杉醇属于植物细胞工程的应用，D错误。
故选：D。
动物细胞工程常用的技术手段有：动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合、生产单克隆抗体等.其中动物细胞培养技术是其他动物工程技术的基础。
本题考查动物细胞工程的应用，意在考查学生的识记能力和判断能力，难度不大。
7.【答案】C
【解析】解：A、制作腐乳的各种用具需要使用洗洁精、开水等进行清洁和消毒，A正确；
B、豆腐中的蛋白质在蛋白酶的作用下，被分解成小分子的肽和氨基酸，易于消化吸收，B正确；
C、人工接种毛霉可提高发酵效率，但豆腐发酵不是依靠单种微生物，其中起主要作用的是毛霉，C错误；
D、为提高腐乳品质和产量，可利用基因工程等改造和选有优良菌种，能够减少腐乳制作中的杂菌，D正确。
故选：C。
腐乳的制作的原理：
（1）腐乳的发酵在多种微生物的协同作用下进行，其中起主要作用的是毛霉，它是一种丝状真菌，新陈代谢类型是异养需氧型。
（2）毛霉等微生物产生的蛋白酶可以将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可以将脂肪水解成甘油和脂肪酸。
本题主要考查的是腐乳制作的相关知识，意在考查学生对基础知识的理解掌握，难度适中。
8.【答案】B
【解析】解：采用农杆菌转化法，将抗草甘膦基因转入到豌豆中，转化体的子一代获得了目的基因片段（外源基因）并表达，这一技术是基因工程技术。基因工程的技术原理是基因重组。
故选：B。
农杆菌通过侵染植物伤口进入细胞后，可将T-DNA插入到植物基因组中，并且可以通过减数分裂稳定的遗传给后代，这一特性成为农杆菌介导法植物转基因的理论基础。
本题考查基因工程技术的基本原理，掌握相关基础知识即可，难度较低。
9.【答案】D
【解析】解：A、若为多肽，由六个单体构成的为六肽，直链六肽中含有5个肽键，环状六肽中含有6个肽键，则其彻底水解时需要断裂5个肽键或6个肽键，A错误；
B、若为淀粉的部分结构，淀粉的单体为葡萄糖，则最终水解的产物是葡萄糖，最终氧化分解的产物是二氧化碳和水，B错误；
C、若为DNA单链的部分结构，DNA的单体为脱氧核苷酸，则其初步水解产物最多为4种，不一定就有4种，C错误；
D、若为RNA单链的部分结构，RNA的单体为核糖核苷酸，则其彻底水解产物可能有磷酸基团、核糖和四种含氮碱基（A、U、G、C），共6种，D正确。
故选：D。
生物大分子如多糖、蛋白质和核酸都是由单体聚合形成的多聚体，而葡萄糖、氨基酸、核苷酸等单体的核心元素是C元素，因此细胞内的生物大分子以碳链为骨架。
知道组成细胞的大分子物质的种类以及与之相关的单体的种类是解答本题的关键。
10.【答案】B
【解析】分析题图，从视野1转为视野2细胞变大，故是由低倍镜换到高倍镜进行观察。由分析可知由低倍镜换到高倍镜的步骤，即将视野1转为视野2，正确的操作步骤是⑤移动标本→④转动转换器→②调节光圈→③转动细准焦螺旋。
故选：B。
由低倍镜换用高倍镜进行观察的步骤是：移动玻片标本使要观察的某一物像到达视野中央→转动转换器选择高倍镜对准通光孔→调节光圈，换用较大光圈使视野较为明亮→再转动细准焦螺旋使物像更加清晰。
本题主要考查显微镜的装片的移动方向问题的内容，要求考生识记相关知识，并结合所学知识准确答题。
11.【答案】A
【解析】解：①植物细胞壁的重要成分是纤维素和果胶，经过纤维素酶和果胶酶的处理可以获得原生质体，该过程没有改变原生质体的基因型，因此甲的原生质体的基因型为Bb,乙的原生质体的基因型为BB，当基因型为Bb与Bb的原生质体融合后得到的细胞的基因型为BBbb,①正确；
②当基因型为BB与BB的原生质体融合后得到的细胞的基因型为BBBB，②正确；
③当基因型为Bb与BB的原生质体融合后得到的细胞的基因型为BBBb,③正确；
④已知溶液存在基因型为Bb和BB的两种原生质体，但是不存在基因型bb的原生质体，因此融合后形成的细胞中不可能出现3个b基因，即不可能出现基因型为Bbbb的细胞，④错误；
⑤已知溶液存在基因型为Bb和BB的两种原生质体，但是不存在基因型bb的原生质体，因此融合后形成的细胞中不可能出现4个b基因，即不可能出现基因型为bbbb的细胞，⑤错误；
综上所述①②③正确。
故选：A。
植物细胞壁的重要成分是纤维素和果胶，经过纤维素酶和果胶酶的处理可以获得原生质体，该过程没有改变原生质体的基因型，因此甲的原生质体的基因型为Bb,乙的原生质体的基因型为BB。
本题考查植物体细胞杂交的相关知识，要求考生理解识记有关技术的原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能将教材中的知识结合题中信息进行迁移应用。
12.【答案】C
【解析】解：基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取；②基因表达载体的构建；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与鉴定。科学家将含有人溶菌酶基因的表达载体注射到鸡胚细胞中获得转基因鸡，人溶菌酶基因能在鸡的输卵管细胞中特异性表达，最终在鸡蛋中收集人溶菌酶。该过程属于基因工程技术的基本步骤，其核心步骤是基因表达载体的构建。
故选：C。
基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因——DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA——分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质——抗原—抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。
本题考查基因工程的相关知识，重点考查基因工程的操作步骤，要求考生识记基因工程的操作步骤和需要注意的细节，能准确判断各选项，属于考纲识记层次的考查。
13.【答案】D
【解析】解：A、在微生物的培养过程中，由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物，A正确；
B、酵母菌最适宜生长繁殖的温度范围是18～30℃，而醋酸菌的最适生长温度为30～35℃，故与酒精发酵相比，醋酸发酵需要在较高的温度条件下进行，B正确；
C、醋酸发酵的产物是醋酸，通过检测发酵液中的醋酸含量，能够筛选出高产醋酸菌并进行纯化，C正确；
D、醋酸菌是好氧菌，纯化培养需要在有氧无菌条件下进行，D错误。
故选：D。
1、果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。故果酒的制作原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精，酵母菌最适宜生长繁殖的温度范围是18～30℃；反应中是否有酒精的产生，可用酸性重铬酸钾来检验，该物质与酒精反应呈现灰绿色。
2、果醋制作中起到主要作用的微生物是醋酸菌，醋酸菌是一种好氧细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动，其代谢类型属于异养需氧型。当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解为醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。醋酸菌的最适生长温度为30～35℃。
3、接种微生物常用的两种方法：（1）平板划线法通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。
（2）稀释涂布平板法则是菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。
本题考查微生物培养与分离及其在发酵中的应用的相关知识，要求考生理解识记有关技术的原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能将教材中的知识结合题中信息进行迁移应用。
14.【答案】B
【解析】解：A、造血干细胞可以分化为各种血细胞（红细胞、白细胞、血小板），A正确；
B、干细胞是指动物和人体内仍保留着少数具有分裂和分化能力的细胞，主要存在于早期胚胎、骨髓和脐带血等多种组织和器官中，包括胚胎干细胞和成体干细胞等，B错误；
C、不同类型的干细胞，它们的分化潜能是有差别的，如胚胎干细胞的分化潜能大于多能干细胞，C正确；
D、干细胞可以分化产生的特定细胞，可以用于新药测试，D正确。
故选：B。
干细胞是指动物和人体内保留着少量具有分裂和分化能力的细胞，主要存在于早期胚胎、骨髓和脐带血等多种组织和器官中，包括胚胎干细胞和成体干细胞。
本题主要考查干细胞工程的内容，要求考生识记相关知识，并结合所学知识准确答题。
15.【答案】B
【解析】解：A、收集的精子需诱导获能后才能与成熟的卵细胞体外受精，A正确；
B、采集来的初级卵母细胞需要进一步成熟后（培养到减数第二次分裂中期），才能用于体外受精，B错误；
C、早期胚胎植入子宫后需对母体进行妊娠检查，以便确认胚胎成功着床，C正确；
D、试管婴儿技术通过体外受精，解决了某些不孕夫妇的生育问题，D正确。
故选：B。
体外受精主要包括：卵母细胞的采集和培养、精子的采集和获能、受精。
本题考查体外受精技术的相关知识，要求考生识记体外受精的具体过程及该技术的应用，能结合所学的知识准确答题。
16.【答案】B
【解析】解：A、胰岛素基因只在胰岛B细胞中表达，因此用于反转录的mRNA只能从胰岛B细胞中获取，A正确；
B、反转录过程是以RNA为模板合成DNA的过程，以四种游离的脱氧核糖核苷酸为原料，B错误；
C、启动子不转录，因此经反转录得到的目的基因不含启动子，C正确；
D、反转录是以RNA为模板合成DNA的过程，该过程遵循碱基互补配对原则，D正确。
故选：B。
1、反转录是利用RNA链为模板，通过碱基互补配对原则，以四种游离的脱氧核糖核苷酸为原料合成DNA的过程。
2、细胞分化的本质是基因的选择性表达。胰岛素基因只在胰岛B细胞中表达，因此只有在胰岛B细胞中才能获取相关mRNA。
本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的概念、原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能结合所学的知识准确答题。
17.【答案】D
【解析】解：A、限制酶能识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，可作用于DNA的磷酸二酯键而不是氢键，A错误；
B、识别黏性末端的DNA连接酶有的不能识别平末端，如E．coliDNA连接酶，B错误；
C、限制酶的识别序列一般由4、5、6或8个核苷酸序列组成，C错误；
D、图甲的末端为黏性末端，“缝合”时会形成碱基对，因而有氢键的重新连接，D正确。
故选：D。
1、限制酶：主要从原核生物中分离纯化出来。特异性：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，形成黏性末端或平末端。
2、DNA连接酶：根据酶的来源不同分为两类：E．coliDNA连接酶、T4DNA连接酶。这二者都能连接黏性末端，此外T4DNA连接酶还可以连接平末端，但连接平末端时的效率比较低。
本题考查限制酶的特点、功能的相关知识，意在考查学生提取信息、分析推理能力，平时应该加强训练。
18.【答案】B
【解析】解：A、操作者的双手清洁后，用体积分数为75%的酒精擦拭消毒，不能用无水乙醇进行消毒，这是因为过高浓度的酒精会在细菌表面形成一层保护膜，阻止其进入细菌体内，难以将细菌彻底杀死，达不到消毒的目的，A错误；
B、煮沸消毒法中100℃煮沸5～6分钟只能杀死微生物的营养细胞和部分芽孢，B正确；
C、培养皿等玻璃器皿可采用干热灭菌法灭菌，培养基需要用高压蒸汽灭菌法灭菌，C错误；
D、接种室、接种箱或超净工作台在使用前，可用紫外线照射进行消毒，使用过程中不能用紫外线照射，D错误。
故选：B。
实验室常用的灭菌方法
（1）灼烧灭菌：将微生物的接种工具，如接种环、接种针或其他金属工具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌，此外，在接种过程中，试管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通过火焰燃烧来灭菌；
②干热灭菌：能耐高温的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培养皿）和金属用具等，可以采用这种方法灭菌；
③高压蒸汽灭菌：将灭菌物品放置在盛有适量水的高压蒸汽灭菌锅内，为达到良好的灭菌效果，一般在压力为100kPa，温度为121℃的条件下，维持15～30min。
本题考查微生物的分离和培养，要求考生识记无菌技术，掌握消毒和灭菌的方法及实例，能结合所学的知识准确判断各选项。
19.【答案】B
【解析】解：A、鱼香肉丝中含有的糖类要通过消化道的消化吸收才能到达航天员的肌肉细胞中，A错误；
B、鱼香肉丝中的肉类和蔬菜可为航天员提供蛋白质、糖类等各种营养物质，B正确；
C、脂肪不是生物大分子，C错误；
D、煮熟鱼香肉丝中蛋白质的空间结构被破坏，但含有肽键，可以用双缩脲试剂检测，D错误。
故选：B。
1、生物组织中有机物的检测方法：蛋白质与双缩脲试剂产生紫色反应。
2、食物中的糖类、蛋白质、脂肪等物质要经过消化后才能被人体吸收。
本题考查糖类、蛋白质等相关知识，要求考生识记糖类、蛋白质的代谢，能结合所学的知识准确判断各选项。
20.【答案】D
【解析】解：A、发酵工程具有条件温和、产物单一、污染小的特点，A正确；
B、发酵工程的产品包括微生物的代谢产物、酶和菌体本身，B正确；
C、通常所指的发酵条件包括温度控制、溶氧控制、pH控制，C正确；
D、传统发酵技术和现代发酵工程最大的相同之处是利用各种微生物的代谢来实现相关产品的生产，D错误。
故选：D。
1、发酵工程生产的产品有两类：一类是代谢产物，另一类是菌体本身。
2、产品不同，分离提纯的方法一般不同。①如果产品是菌体，可采用过滤，沉淀等方法将菌体从培养液中分离出来；②如果产品是代谢产物，可用萃取、蒸馏、离子交换等方法进行提取。
3、发酵过程中要严格控制温度、pH、溶氧、通气量与转速等发酵条件。
4、发酵过程一般来说都是在常温常压下进行，条件温和、反应安全，原料简单、污染小，反应专一性强，因而可以得到较为专一的产物。
本题主要考查发酵工程的内容，要求考生识记相关知识，并结合所学知识准确答题。
21.【答案】A
【解析】解：A、哺乳动物成熟的红细胞没有细胞核，没有DNA，因此不能作为提取DNA的材料，A错误；
B、DNA不溶于95%的冷酒精，加入预冷的酒精溶液后析出的丝状物是DNA，B正确；
C、当NaCl溶液浓度低于0.14mol/L时，随着NaCl溶液浓度增加，DNA的溶解度降低；当NaCl溶液浓度高于0.14mol/L时，随着NaCl溶液浓度增加，DNA的溶解度升高，因此提取的DNA可溶解在2 mol/L的NaCl溶液中，C正确；
D、在沸水浴的条件下DNA遇二苯胺会呈现蓝色，D正确。
故选：A。
DNA的粗提取与鉴定的实验原理是：
①DNA的溶解性，DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的氯化钠溶液中的溶解度不同，利用这一特点可以选择适当浓度的盐溶液可以将DNA溶解或析出，从而达到分离的目的；
②DNA不溶于酒精溶液，细胞中的某些蛋白质可以溶解于酒精，利用这一原理可以将蛋白质和DNA进一步分离；
③DNA对于酶、高温和洗涤剂的耐受性，蛋白酶能水解蛋白质，但是不能水解DNA，蛋白质不能耐受较高温度，DNA能耐受较高温度洗涤剂能瓦解细胞膜，但是对DNA没有影响；
④在沸水浴的条件下DNA遇二苯胺会呈现蓝色。
本题主要考查DNA的粗提取及鉴定的方法的内容，要求考生识记相关知识，并结合所学知识准确答题。
22.【答案】A
【解析】A、细胞类生物的遗传物质都是DNA，A正确；
B、M细胞没有核膜包被的细胞核，属于原核生物，其无线粒体，但部分原核细胞含有与有氧呼吸有关的酶，仍能进行有氧呼吸，B错误；
C、M细胞为原核细胞，可能是自养型生物，如蓝细菌，C错误；
D、M细胞为原核细胞，不含染色体，不可能发生染色体变异，D错误。
故选：A。
分析题干信息：M细胞没有核膜包被的细胞核，但含有核糖体，属于原核细胞；N细胞含有叶绿体，为绿色植物细胞；P细胞能合成糖原，为动物细胞。
本题考查原核细胞和真核细胞的异同，要求考生识记原核细胞和真核细胞的形态和结构的异同，能正确分析题干信息，再结合所需的知识准确答题。
23.【答案】C
【解析】解：A、细胞膜的主要成分是磷脂和蛋白质分子，脂溶性物质优先通过细胞膜，亲水的葡萄糖难以自由扩散进入细胞，需要借助于载体蛋白，A正确；
B、葡萄糖转运蛋白（GLUT）是转运葡萄糖进入细胞的载体蛋白，在和被运输物质—葡萄糖结合时，构象发生改变，从而易于和葡萄糖结合在一起，B正确；
C、葡萄糖在细胞质基质中被分解为丙酮酸，在氧气存在条件下，丙酮酸才可进入线粒体，进行进一步的分解，线粒体不能直接分解葡萄糖，故线粒体外膜上不存在葡萄糖转运蛋白（GLUT），C错误；
D、GLUT的结构异常，则细胞不能吸收葡萄糖，从而造成血糖偏高，部分糖随尿排除，可能会引发糖尿病，D正确。
故选：C。
物质出
入细胞
的方式
被动运输
主动运输
自由扩散
协助扩散
运输方向
高浓度→低浓度
高浓度→低浓度
低浓度→高浓度
是否需要载体
不需要
需要
需要
是否消耗能量
不消耗
不消耗
消耗
图例
举例
O2、CO2、H2O、甘
油、乙醇、苯等出入细胞
红细胞吸收葡萄糖
小肠吸收葡萄糖、氨基酸、无机盐等
本题考查了物质的跨膜运输，意在考查考生的理解能力，列表比较几种跨膜运输的不同是解题的关键。
24.【答案】B
【解析】解：A、动物细胞培养中需要提供95%空气（保证细胞的有氧呼吸）和5%CO2（维持培养液的pH）的混合气体，A错误；
B、过程②常使用显微操作法对处于MII中期的卵母细胞进行处理，B正确；
C、过程③将激活后的重组细胞培养至囊胚或桑椹胚后移植，C错误；
D、后代丁的细胞核的遗传物质来自甲，细胞质的遗传物质来自于乙牛，则丁的遗传性状由甲和乙的遗传物质共同决定，D错误；
故选：B。
分析图解：图示过程为体细胞克隆过程，取甲牛体细胞，对处于减数第二次分裂中期的乙牛的卵母细胞去核，然后进行细胞核移植；融合后的细胞激活后培养到早期胚胎，再进行胚胎移植，最终得到克隆牛。
本题主要考查体细胞核移植技术的内容，要求考生识记相关知识，并结合所学知识准确答题。
25.【答案】C
【解析】解：A、该实验的目的是研究夏季开空调对室内微生物群落的影响，故需采集相同地点不同空调状态下的空气样本测定微生物数量，A正确；
B、培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供适合其生长繁殖的营养基质，为了满足不同细菌、真菌的生长需求，需配制不同成分和pH的培养基分别对细菌和真菌进行培养及计数，B正确；
C、由柱形图分析可知，当开启空调后，细菌和真菌微生物含量明显高于空调关闭时细菌和真菌的数量，这说明夏季空调开启后室内环境的变化促进了微生物繁殖，C错误；
D、室内微生物含量高时可用紫外灯或消毒液消毒，但消毒时人员需要离开，消毒完毕后需要通风，D正确。
故选：C。
培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质；根据物理性质分为固体培养基和液体培养基，培养基中一般含有水、碳源、氮源和无机盐。在提供上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质和氧气的要求。例如，培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素，培养霉菌时需将培养基的pH调至酸性，培养细菌时需将pH调至中性或微碱性，培养厌氧微生物时则需要提供无氧的条件。
本题考查微生物的分离与培养，要求考生识记培养基的概念、作用和微生物实验中的消毒方法，具备验证简单生物学事实的能力，并能对实验现象和结果进行解释、分析、处理。
26.【答案】B
【解析】解：A、八倍体小黑麦属于染色体变异，所以不属于转基因作物，A错误；
B、将目的基因导入受体细胞的叶绿体中，因为叶绿体的遗传是细胞质遗传，卵子中可能存在该叶绿体，所以可防止花粉传播造成的基因污染，B正确；
C、食用含抗生素抗性基因的食物不会增强人体抵抗病毒的能力，因为在食用时需要将该食物进行消化，不会将该基因整合到人体基因中，C错误；
D、转基因生物可能会对生物多样性构成威胁，进而影响生态系统的稳定性，D错误。
故选：B。
转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应、过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）．对待转基因技术的利弊，正确的做法应该是趋利避害，不能因噎废食。
本题考查转基因生物的安全性问题，要求考生识记转基因生物安全性问题，了解人们在食物安全、生物安全和环境安全三个方面进行的争论，明确面对转基因技术的利弊，再结合所学的知识准确判断各选项。
27.【答案】ACD
【解析】解：A、图中C贯穿于整个磷脂双分子层，且具有螺旋等空间结构，代表跨膜蛋白，其跨膜区段的氨基酸具有较强的疏水性，A正确；
B、题意显示，脂筏是质膜上富含胆固醇和鞘磷脂的微结构域，其中的胆固醇就像胶水一样，对鞘磷脂亲和力很高，并特意吸收或排除某些蛋白质，形成一些特异蛋白聚集的区域，会影响膜的流动性质，B错误；
C、结合图示可知，生物膜的基本支架是磷脂双分子层，C正确；
D、脂筏是生物膜上富含胆固醇和鞘磷脂的微结构域，据此可知，破坏胆固醇可能会导致脂筏结构解体，D正确。
故选：ACD。
流动镶嵌模型：
（1）磷脂双分子层构成膜的基本支架，这个支架是可以流动的。
（2）蛋白质分子以不同方式镶嵌在磷脂双分子层中，膜中的蛋白质大多也能运动。
（3）在细胞膜的外表，少数糖类与蛋白质结合形成糖蛋白。除糖蛋白外，细胞膜表面还有糖类与脂质结合形成糖脂。
本题考查细胞膜的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力，运用所学知识综合分析问题的能力是解答本题的关键。
28.【答案】CD
【解析】解：A、植物顶端分生区细胞代谢旺盛，含病毒少、甚至不含病毒，因此取材部位一般选择植物顶端分生区附近，A正确；
B、消毒的原则是既要杀死材料表面的微生物，又要减少消毒剂对细胞的伤害，通常外植体接种前常进行流水冲洗、酒精处理、消毒液处理等消毒措施，最后为了避免消毒液的危害，需要用无菌水清洗三次，B正确；
C、为充分利用培养条件，可以将外植体的13-12倒插入诱导愈伤组织的培养基中，C错误；
D、脱毒苗是不含病毒的植株，不具有抗病毒的能力，进行病毒接种实验是筛选出抗毒苗，D错误。
故选：CD。
植物组织培养的过程为：离体的植物组织、器官或细胞经过脱分化形成愈伤组织，愈伤组织经过再分化过程形成胚状体，进一步发育形成植株。
本题考查植物组织培养的相关知识，要求考生识记植物组织培养的原理、过程和条件等知识，运用所学的知识对选项作出准确的判断，属于考纲识记和理解层次的考查。
29.【答案】ABD
【解析】解：A、图中的接种方法为稀释涂布平板法，A正确；
B、将10g土样加入到90mL无菌水中定容至100mL后，此时土样稀释倍数为10倍，再经3次10倍稀释得到3号试管中的样品，故3号试管中样品的稀释倍数是104倍，B正确；
C、5号试管进行稀释涂布平板法计数的结果表明每克土壤中的菌株数为（168+175+167）÷3×106÷0.1=1.7×109个，C错误；
D、由于牛肉膏蛋白胨培养基能提供氮源，所以该实验需设置牛肉膏蛋白胨培养基作对照，用以判断选择培养基是否有选择作用，D正确。
故选：ABD。
分析题图：图中5支试管为梯度稀释，最后经稀释涂布平板法接种培养后进行计数。统计菌落数在30-300的平板，取其平均值，进行计数。计数公式为（C÷V）×M（C为平均菌落数，V为涂布液体积，M为稀释倍数）。
本题结合图示考查微生物分离和培养的相关知识，意在考查学生对所学知识的理解与掌握程度，培养了学生分析问题、获取信息、解决问题的综合应用的能力。
30.【答案】AD
【解析】解：A、并不是水稻所有DNA都含有OsPTF基因，所以不能以任意一个水稻细胞的DNA为模板，以水稻RNA为模板通过逆转录可以合成cDNA，然后再以cDNA为模板利用PCR扩增可获得大量OsPTF基因，A错误；
B、识图分析可知，抗除草剂基因位于启动子2的后面，因此RNA聚合酶与启动子2识别并结合后，启动抗除草剂基因的转录，B正确；
C、由于图中T-DNA的序列中含有目的基因和抗除草剂基因，故可通过含除草剂的选择培养基筛选含有目的的基因大豆愈伤组织，C正确；
D、用EcoRⅠ、BamHⅠ双酶切重组Ti质粒后，由于Ti质粒是环状的DNA，会得到2种片段，因此经电泳分离至少得到两条带，D错误。
故选：AD。
基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取，获取方法包括：从基因文库中获取、PCR扩增技术和人工合成法。②基因表达载体的构建，是基因工程的核心步骤，基因表达载体的组成包括：启动子、目的基因、终止子和标记基因。③将目的基因导入受体细胞，根据不同的对象采用不同的导入方法，对植物细胞可以采用农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；对于动物采用显微注射技术；对于微生物一般采用Ca2+转化法。④目的基因的检测与鉴定，分子水平上的检测方法包括：DNA分子杂交法、分子杂交法和抗原-抗体杂交法；也可以进行个体水平上的鉴定，如抗性实验等。
本题主要考查的是基因工程的操作的相关知识，意在考查学生对基础知识的理解掌握，难度适中。
31.【答案】水浴加热 深 还原糖 Ⅱ 浅 Ⅰ 不能 西瓜果实的颜色干扰实验结果的观察
【解析】解：（1）在b、d试管中各加入等量斐林试剂，水浴加热后，b试管呈砖红色，由于d试管提取天数更晚，还原糖的含量更高，因此与b相比d的颜色更深；斐林试剂是用来检验还原糖的，图A中表示这种物质含量变化趋势的曲线是Ⅱ。
（2）据图分析可知：图A中Ⅰ为淀粉，Ⅱ为还原糖，x天时淀粉含量较多，还原糖含量较少，y天时淀粉含量较少，还原糖含量较多，所以用碘液检验时，a试管颜色比c试管更深，图A中表示这种物质含量变化趋势的曲线是Ⅰ。
（3）如果实验材料由香蕉果实改为西瓜果实，由于西瓜果实的颜色干扰实验结果的观察，因此进行上述操作，不能得到理想的实验结果。
故答案为：
（1）水浴加热 深 还原糖Ⅱ
（2）浅Ⅰ
（3）不能 西瓜果实的颜色干扰实验结果的观察
据题图信息：“香蕉成熟过程中，果实中的贮藏物不断代谢转化，香蕉逐渐变甜”可知此过程中淀粉转化成还原糖，因此图A中Ⅰ为淀粉，Ⅱ为还原糖，碘液用来检验淀粉，斐林试剂用来检验还原糖。
本题考查生物组织中化合物的鉴定，对于此类试题，需要考生注意的细节较多，如实验的原理、实验采用的试剂及试剂的使用方法、实验现象等，需要考生在平时的学习过程中注意积累。
32.【答案】主动运输 特异性受体 信息交流 内质网、高尔基体、线粒体 耗能 抑制H+-K+-ATP酶的活性，抑制胃壁细胞内H+运输到膜外胃腔中，减少胃酸的分泌量
【解析】解：（1）由分析可知：胃壁细胞内的H+运输到膜外的方式属于主动运输，图中的M1-R、H2-R、G-R可以接受信号分子，说明图中的M1-R、H2-R、G-R属于膜上的特异性受体，其与信号分子结合后，引起细胞内的一系列变化，这体现了细胞膜的信息交流功能。
（2）胃蛋白酶属于分泌蛋白，在合成与分泌过程涉及到的细胞结构有：核糖体、内质网、高尔基体、囊泡、线粒体、细胞膜，其中需要具膜细胞器有内质网、高尔基体、线粒体，其合成之后到分泌之前是耗能的。
（3）根据图示H+-K+-ATP酶可以逆浓度转运H+和K+，需要ATP水解提供能量，所以H+-K+-ATP酶是一种ATP水解酶，起催化作用，还具有物质运输作用。H+-K+-ATP酶位于胃壁细胞的细胞膜上，是一种质子泵。它通过自身的磷酸化与去磷酸化完成H+/K+跨膜转运，不断将胃壁细胞内的H+运输到膜外胃腔中，从而促进胃酸的分泌。一些化合物如SCH32651与H+-K+-ATP酶上的钾离子高亲和性部位作用，抑制酶的活性，抑制胃壁细胞内H+运输到膜外胃腔中，减少胃酸的分泌量。
故答案为：
（1）主动运输 特异性受体 信息交流
（2）内质网、高尔基体、线粒体 耗能
（3）抑制H+-K+-ATP酶的活性，抑制胃壁细胞内H+运输到膜外胃腔中，减少胃酸的分泌量
分析题图：“H+-K+-ATP酶位于胃壁细胞，是质子泵的一种，它通过自身的磷酸化与去磷酸化完成H+/K+跨膜转运，不断将胃壁细胞内的H+运输到膜外胃腔中，”胃腔中H+的浓度高于胃壁细胞，细胞膜内K+的浓度高于细胞膜外，由此可见H+运出细胞、K+运进细胞都消耗能量，都为主动运输。
本题考查了物质跨膜运输的相关知识，意在考查考生审题能力，获取信息能力，难度适中。
33.【答案】维生素 不能 醋酸菌是好氧菌，在无氧条件下不能存活，而乳酸菌是厌氧菌，在有氧条件下不能存活 增多 杀灭其他杂菌 无氧条件 温度控制在18-30℃灭菌处理
【解析】解：（1）参与前期酸味形成的菌有醋酸菌和乳酸菌。培养乳酸菌时，所用培养基除了含有碳源、氮源、水和无机盐外，还需要添加维生素，因为乳酸菌不能合成维生素，且需要无氧环境。醋酸菌和乳酸菌在同一容器中进行发酵时，“不能”同时产生醋酸和乳酸，这是因为醋酸菌是好氧菌，在无氧条件下不能存活，而乳酸菌是厌氧菌，在有氧条件下不能存活，因而不能同时培养。
（2）工业上酿制奶啤时，由于细胞代谢的进行，大麦发芽过程中细胞内有机物种类“增多，麦汁煮沸的目的是通过高温可杀灭其他杂菌，保证啤酒发酵过程中杂菌的污染。无氧条件，后期获得酒精需要通过酵母菌的无氧呼吸过程，酵母菌无氧呼吸过程需要的条件为温度控制在18-30℃。从食品安全的角度考虑，上述工艺流程图中①的操作应该是灭菌处理，消除发酵液中的微生物，为上市做准备。
故答案为：
（1）维生素 不能 醋酸菌是好氧菌，在无氧条件下不能存活，而乳酸菌是厌氧菌，在有氧条件下不能存活
（2）增多 杀灭其他杂菌 无氧条件 温度控制在18-30℃灭菌处理
1、果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。故果酒的制作原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精，酵母菌最适宜生长繁殖的温度范围是18～25℃；生产中是否有酒精的产生，可用酸性重铬酸钾来检验，该物质与酒精反应呈现灰绿色。
2、果醋制作中起到主要作用的微生物是醋酸菌，醋酸菌是一种好氧细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动，其代谢类型属于异养需氧型。当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解为醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。醋酸菌的最适生长温度为30～35℃。
本题考查微生物的分离与培养、啤酒发酵等知识，意在考查考生的理解能力，落实生命观念、科学思维等核心素养。
34.【答案】胞外 （免疫的）B淋巴 PEG（聚乙二醇）或灭活病毒 体内或体外 抗体—药物偶联物（ADC） 有丝分裂 无 B细胞不能增殖，骨髓瘤细胞既不能进行全合成途径也不能进行补救合成途径从而不能增殖
【解析】解：（1）检测发现细胞的CLDN6蛋白能够促进肿瘤发生，为了减少肿瘤的发生，因而需要破坏该蛋白质的活性，因此选定其作为单克隆抗体的作用靶点。而CLDN6蛋白是一个跨膜蛋白，包括胞外区、跨膜区和胞内区，制备免疫小鼠所用的抗原时，应提取胞外区（暴露在细胞表面，能产生免疫应答）对应的基因序列用于设计抗原，诱导抗体的产生。
（2）将CLDN6蛋白抗原注射到小鼠体内，从该小鼠脾脏中获取（免疫的）B淋巴细胞，利用PEG（聚乙二醇）或灭活病毒诱导此细胞与骨髓瘤细胞融合，经筛选得到杂交瘤细胞，再通过克隆化培养和抗体阳性检测，筛选得到产生单克隆抗体的杂交瘤细胞，由于此时经过两次筛选得到的杂交瘤细胞既能产生所需抗体，还能大量增殖，因而可通过注射到小鼠体内或体外培养获得大量单克隆抗体。
（3）利用抗原和抗体特异性结合的特点，将该单克隆抗体与抗癌药物DM1结合形成抗体—药物偶联物（ADC），DM1是一种小分子物质，能够抑制纺锤体微管的形成，由此分析DM1能够进入细胞中通过抑制细胞有丝分裂过程中的纺锤体的形成过程起到抗癌的作用。
（4）融合前将小鼠的脾脏中的B细胞和骨髓瘤细胞分别置于含HAT的选择培养基中培养，一段时间后培养基中无细胞增殖，这是因为B细胞不能增殖，而培养基中因为加入了HAT，因而骨髓瘤细胞中不能进行全合成途径，同时由于缺乏转化酶因而也没有合成DNA的补救途径，因此骨髓瘤细胞也不能进行增殖。
故答案为：
（1）胞外
（2）（免疫的）B淋巴 PEG（聚乙二醇）或灭活病毒 体内或体外
（3）抗体—药物偶联物（ADC） 有丝分裂
（4）无 B细胞不能增殖，骨髓瘤细胞既不能进行全合成途径也不能进行补救合成途径从而不能增殖
单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原的抗体。通常采用杂交瘤技术来制备，杂交瘤抗体技术是在细胞融合技术的基础上，将具有分泌特异性抗体能力的B淋巴细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合为杂交瘤细胞，杂交瘤细胞既能产生抗体，又能无限增殖。用具备这种特性的单个杂交瘤细胞培养成细胞群，可制备针对一种抗原的特异性抗体即单克隆抗体。
本题考查了动物细胞工程，掌握单克隆抗体的制备过程是解题的关键。
35.【答案】所选的限制酶所识别的序列不能同时存在于氨青霉素抗性基因和四环素抗性基因之中 不能 有可能是导入了不含目的基因的质粒PO 植物细胞具有全能性 DNA半保留复制 复性 凝胶的浓度 蛋白质工程
【解析】解：（1）选用限制酶对载体进行切割时，应注意所选的限制酶所识别的序列不能同时存在于氨苄青霉素抗性基因四环素抗性基因之中（不能同时酶切氨苄青霉素抗性基因和四环素抗性基因），以防止影响后续目的基因的检测。
（2）转化指的是目的基因进入受体细胞，并在受体细胞内维持稳定和表达的过程，若受体细胞能够体现氨苄青霉素抗性，不能说明目的基因已成功导入受体细胞，因为有可能是导入了不含目的基因的P0质粒。
（3）受体细胞最终发育成完整的转基因大豆植株，是因为植物细胞具有全能性，在组织培养时该全能性能表达出来。
（4）PCR技术是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术，其原理是DNA半保留复制，PCR过程每次循环分为3步，分别为变性（超过90℃）、复性（50℃左右）、延伸（72℃左右），故其中温度最低的一步是复性；在凝胶中DNA分子的迁移速率与凝胶的浓度、DNA分子的大小和构象等有关，通过与标准DNA的对比可确定电泳获得的DNA分子的大小。
（5）通过PCR技术对目的基因进行定点突变，属于基因的修饰，属于蛋白质工程的范畴。
故答案为：
（1）所选的限制酶所识别的序列不能同时存在于氨青霉素抗性基因和四环素抗性基因之中（不能同时酶切氨苄青霉素抗性基因和四环素抗性基因）
（2）不能 有可能是导入了不含目的基因的质粒PO
（3）植物细胞具有全能性
（4）DNA半保留复制（DNA的热变性） 复性 凝胶的浓度
（5）蛋白质工程
基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成；（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等；（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样；（4）目的基因的检测与鉴定。
本题考查基因工程的相关知识，意在考查考生运用所学基础知识，结合所学知识解决相关的生物学问题的能力。
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