- 3.1 《重组DNA技术的工具 》课件 课件 0 次下载
- 3.2 《实验DNA片段的扩增及电泳鉴定》 课件 课件 0 次下载
- 第一章《发酵工程》(章末复习课件) 课件 0 次下载
- 2.1 《植物细胞工程的应用》(第2课时) 课件 课件 0 次下载
- 2.2 《动物细胞培养(第1课时) 》课件 课件 0 次下载
高中人教版 (2019)第1节 传统发酵技术的应用精品ppt课件
展开1.提取DNA的原理利用DNA与 、 和脂质等在物理和化学性质方面的差异,提取DNA,去除其他成分。如:(1)DNA在酒精溶液中的溶解性: 不溶于酒精,但某些_______溶于酒精。(2)DNA在NaCl溶液中的溶解性:DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同,它能溶于 的NaCl溶液。2.鉴定DNA的原理在一定温度下,DNA遇 会呈现 。
称取约30g洋葱切碎,放入研钵中,倒入10mL研磨液,充分研磨
在上清液中加入体积相等的、预冷的酒精溶液,静置2-3min,溶液中出现的白色丝状物就是粗提取的DNA
将丝状物或沉淀物溶于试管中的NaCl溶液中。然后,向试管中各加入4mL的二苯胺试剂鉴定(注意做对照实验)
研磨液过滤到烧杯中,置于4℃冰箱中,几分钟后,再取上清液(也可以通过离心处理后再取上清液)
称取 ,切碎,放入研钵,倒入 ,充分研磨。
在漏斗中垫上纱布过滤研磨液,4℃冰箱中静置后取 ;或将研磨液倒入塑料离心管中离心,取 。
在上清液中加入体积相等的、 溶液, 静置2~3min,溶液中出现的 就是粗提取的DNA 。
——看与二苯胺反应颜色的深浅
用玻璃棒沿一个方向搅拌,卷起丝状物;或将溶液倒入塑料离心管中离心,取沉淀物晾干。
将丝状物或沉淀物溶于 溶液中,加入 试剂,混合均匀后,将试管置于沸水中加热5min
在等体积的NaCl溶液中加入二苯胺试剂,将试管置于同等沸水浴中加热5min。
(1)选什么样的材料实验更易成功?用洋葱做材料,为什么要充分研磨?(2)猪血和鸡血,哪个适合用作提取DNA的材料?操作时如何防止血液凝固?(3)如果用鸡血动物细胞做材料,也需要研磨裂解释放细胞中的DNA吗?
猪血(哺乳动物的成熟红细胞)无细胞核,不适合;鸡血中红细胞有核DNA,且核DNA的量较多,适合。
含DNA的生物材料都可以,选取DNA含量相对较高的生物组织,成功率更大。
充分研磨,可以破坏细胞壁,裂解细胞,释放DNA。
加入清水,让细胞吸水胀破,释放DNA。
鸡血中加入柠檬酸钠,可防止血液凝固。
1、操作提示(1)以血液为实验材料时,每100 mL血液中需要加入3 g柠檬酸钠,防止__ 。(2)加入酒精和用玻璃棒搅拌时,动作要轻缓,以免加剧 ,导致DNA分子不能形成絮状沉淀。
2、关键点拨1.利用动物细胞提取DNA时,破碎细胞的方法:动物细胞无细胞壁,可 使其吸水涨破。2.不能选用哺乳动物成熟的红细胞作为实验材料,原因是哺乳动物成熟的红细胞 细胞核。3.提纯DNA时,选用体积分数为95%的冷酒精的原因:体积分数为95%的冷酒精 更佳。
(2022·天津耀华中学高二期中)下表关于DNA粗提取与鉴定实验的表述,不正确的是
(2022·北京东城高二期末)利用新鲜洋葱作为实验材料提取DNA时A.可将洋葱置于清水中,细胞吸水破裂后将DNA释放出来B.离心后上清液中加入75%冷酒精,出现的白色丝状物就是纯净的DNAC.将晾干的白色丝状物置于2 ml/L的NaCl溶液中,会发生溶解现象D.可利用DNA在低温下遇到二苯胺试剂呈现蓝色反应的特性对其进行鉴定
1.DNA粗提取与鉴定实验中所依据的原理是①DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同②DNA易被甲紫溶液染成紫色③溶解有DNA的NaCl溶液加入二苯胺试剂沸水浴后会呈现蓝色④加入体积分数为95%的冷酒精,DNA会从溶液中析出⑤加入体积分数为70%的冷酒精,DNA会从溶液中析出A.①②③ B.①③④C.②③④ D.①③⑤
2.(2022·广东珠海高二期中)下列有关“DNA粗提取与鉴定”实验的叙述,正确的是A.用蒸馏水使家兔的红细胞涨破,可获取富含DNA的滤液B.DNA不溶于95%的冷酒精,但可溶于2 ml/L的NaCl溶液C.新鲜的洋葱和猪肝可作为实验材料提取DNA,而菠菜不能用于提取 DNAD.鉴定DNA时,应将丝状物直接加入到二苯胺试剂中并进行沸水浴
3.(2022·四川成都高二期末)下列与“DNA的粗提取与鉴定”实验相关的说法,错误的是A.研磨液中应加入DNA酶的抑制剂,以防细胞破碎后DNA酶降解DNAB.研磨时需要控制好时间,以防影响DNA的提取量C.鉴定时加入二苯胺试剂后沸水浴即可观察到较为明显的显色反应D.鉴定时溶液蓝色的深浅与DNA含量的多少有关
4.在“DNA的粗提取与鉴定”实验中,甲、乙、丙、丁四个小组除表中所列处理方法不同外,其他操作步骤均正确,但实验结果却不同。下列有关叙述不正确的是
A.实验材料选择错误的组别是丙B.沸水浴后试管中溶液颜色变蓝的组别是甲、丁C.甲组实验现象不明显的原因是25 ℃的酒精对DNA的凝集效果差D.乙组实验不成功仅因为在鉴定时加入了双缩脲试剂
5.如图为鸡血细胞中DNA的粗提取和鉴定实验过程中的部分操作示意图,请据图分析,回答下列问题:
(1)右述图示中,该实验的正确操作顺序是__________________ (用序号与箭头表示)。(2)步骤④中使用2 ml/L NaCl溶液的目的是 。
(3)步骤①的目的是 ,其依据的原理是 。
(4)步骤①中所得到的丝状物为 色,若要鉴定其主要成分为DNA,可滴加 试剂, 后,如果出现 则证明该丝状物的主要成分为DNA。
(5)由于鸡血较难找到,某学生试图用猪血代替,结果没有成功,其原因最可能是_____________________________________________________。
猪是哺乳动物,哺乳动物血液中成熟的红细胞没有细胞核
猪是哺乳动物,哺乳动物血液中的成熟红细胞没有细胞核和众多的细胞器,因此用猪血代替鸡血来进行该实验难以取得成功。
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