备课素材知识点：直接获取目的基因的“散弹法”—— 高中生物人教版选择性必修三

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霰弹枪，俗称“散弹枪”，其基本原理和滑膛枪类似，枪管没有膛线，是用火药爆燃推动发射大量小型颗粒状弹丸的一种枪支。
由于霰弹枪发射的球状弹丸，而且数量巨大，也被网友们俗称“喷子”（不是网络上的那个意思，不要误解了），由于没有膛线，所以霰弹枪的枪弹散布比较大，而且射程较近，但在特定环境，比如室内、战壕、地道、工事等狭小环境中，霰弹枪往往具备极大的杀伤力，因为霰弹枪开一枪，相当于普通的冲锋枪开十几枪，因此特别适合在短兵相接的情况下打击敌人。
2.直接分离目的基因法－鸟枪法
从供体细胞的DNA中直接分离基因，最常用的方法是“散弹打鸟的方法”，又称为“鸟枪法”，即用DNA重组技术将某种生物的总DNA用特定的限制性内切酶切割成一个个片段。这种方法往往目标不明确，工作量大，还要结合其它技术如DNA探针技术获取目的基因。
直接分离法
然后将这些片段随机地连接在某些质粒或其他载体上，再将它们转移到适当的宿主细胞中，通过细胞的增殖而构成各个片段的无性繁殖系（克隆），当这些克隆多到可以包括某种生物的全部基因时，这一批克隆的总体就称为该种生物的基因文库。
这一定义也适用于线粒体DNA和叶绿体DNA，分别称为某种生物的线粒体基因文库或叶绿体基因文库。为了有效地保存基因文库，可通过细菌在固体培养基上繁殖而使包含各个特定DNA片段的细菌增多。
通过分子杂交的方法，可以筛选出包含有所需基因的DNA片段的细菌（或噬菌体）。经过扩增得到大量这样的细菌（或噬菌体），从中便可分离出所需基因的DNA片段。建立和使用基因文库是分离高等真核生物基因的有效手段，对于基因定位和基因工程的研究都很有用。
当然，获取目的基因的方法还有多种，cDNA法、化学合成法等。不同的方法关键是看基因的序列是不是已知的。
例、甲、乙两图表示从细菌细胞中获取目的基因的两种方法，以下说法中错误的是（ ）
A．甲方法可建立该细菌的基因文库
B．乙方法可建立该细菌的cDNA文库
C．甲方法要以脱氧核苷酸为原料
D．乙方法需要逆转录酶参与
解析：甲图获取的是该细菌的全部DNA分子，因此用限制性核酸内切酶切割后可用于构建基因文库，A正确；乙图表示用反转录法获得的DNA分子，只包含该生物的部分基因，因此可建立该细菌的cDNA文库，B正确；甲方法中，只要利用DNA限制性核酸内切酶将其原有的DNA切断即可，不需要以脱氧核苷酸为原料，C错误；乙方法中d为逆转录过程，需要逆转录酶参与，D正确。故答案为C。