河南省驻马店市河南省驻马店高二阶段测试2023-2024学年高二下学期3月月考生物试题（原卷版+解析版）

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（试卷总分：100分 考试时间：75分钟）
注意事项：
1．答卷前，考生务必将自己的学校、班级、姓名、准考证号填写在答题卡上。
2．回答选择题时，选出每小题答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。回答非选择题时，将答案写在答题卡上。写在本试卷上无效。
3．考试结束后，将本试卷和答题卡一并交回。
一、单选题：本题共15小题，每小题2分，共30分。在每小题给出的四个选项中只有一项是符合题目要求的。
1. 下列有关米酒、酸奶、泡菜等传统发酵制品叙述，正确的是（ ）
A. 米酒发酵液中冒出的“气泡”都来源于酵母菌的有氧呼吸
B. 制作米酒时添加“酵头”的目的是接种酿酒酵母
C. 酸奶和泡菜制作中均需要及时通氧，保证乳酸菌的有氧呼吸
D. 为避免杂菌污染，发酵前需要对器具、原料等进行灭菌
【答案】B
【解析】
【分析】酵母菌为兼性厌氧型真菌，在有氧无氧条件下均能产生二氧化碳。
【详解】A、酵母菌的有氧呼吸和无氧呼吸都会产生二氧化碳，故米酒发酵液中冒出的“气泡”来源于酵母菌无氧呼吸和有氧呼吸，A错误；
B、制作米酒利用的是酵母菌，添加“酵头”的目的是接种酿酒酵母，B正确；
C、乳酸菌是厌氧菌，制作酸奶和泡菜利用的是乳酸菌，故酸奶和泡菜制作中均需要确保无氧呼吸，以保证乳酸菌的无氧呼吸，C错误；
D、为避免杂菌污染，发酵前需要对器具等进行灭菌，但原料不需灭菌，D错误。
故选B。
2. 唐代苏敬的《新修本草》云：“凡作酒醴须曲，而蒲桃（即葡萄）、蜜等酒独不用曲”。葡萄不仅可以酿造果酒，还可以酿造果醋，制作过程如下图。下列分析正确的是（ ）
A. “蒲桃、蜜等酒独不用曲”说明葡萄酿制果酒不需要微生物
B. 取新鲜葡萄制作果酒，果醋时应先去梗再冲洗
C. 制作果酒、果醋的后期都需要密闭处理
D. 图中①过程比②过程产生的气体多
【答案】D
【解析】
【分析】据图分析，图中①是酒精发酵为果酒的过程，②是醋酸发酵为果醋的过程，据此分析作答。
【详解】A、葡萄酿制果酒需要葡萄果皮上的野生酵母菌，A错误；
B、冲洗时葡萄时，果皮难免会有破损，果肉会被水中的微生物污染，增加发酵失败可能。因此取新鲜葡萄制作果酒、果醋时应先冲洗再去梗、B错误；
C、制作果酒是利用酵母菌发酵，后期密闭处理、利于酵母菌无氧呼吸产生酒精；制作果醋是利用醋酸菌发酵，醋酸菌是好氧菌，不需要密闭处理，C错误；
D、图中①过程表示酒精发酵、酵母菌无氧呼吸产生CO2，图中②过程表示醋酸菌利于乙醇转化为乙醛，再将乙醛转化为醋酸和水，不产生气体，D正确。
故选D。
3. 上饶多地都有酿米酒的风俗，其制作流程大致为：原料处理、糖化发酵、酒精蒸馏、陈酿熟化、装瓶封存。下列叙述错误的是（ ）
A. 制备好的糯米与酒曲充分混合，装满容器后进行密封发酵
B. 蒸煮好的糯米需冷却后再加入酒曲，以防影响酒曲中微生物的活性
C. 发酵时，霉菌先分泌淀粉酶将淀粉糖化，之后酵母菌才能大量繁殖
D. 发酵过程中，酵母菌将糖分转化为酒精和二氧化碳，产生了米酒的特有风味
【答案】A
【解析】
【分析】酵母菌既可以在有氧的条件下生活，也可以在无氧的条件下生活。有氧时它将有机物分解成二氧化碳和水，无氧时将有机物分解成酒精和二氧化碳。制作米酒利用的是酵母菌的无氧呼吸，所以在操作过程中要注意做好密封工作。
【详解】A、酿酒过程中利用酵母菌的无氧呼吸会产生二氧化碳气体，为防止发酵液溢出，不会装满容器后进行密封发酵，会留有一段空间（一方面利于早期酵母菌有氧呼吸繁殖增加数量，一方面防止发酵过程中发酵液溢出），A错误；
B、温度过高，会将酵母菌等微生物杀死（避免高温杀死酵母菌），故蒸煮好的糯米需冷却后再加入酒曲，以防影响酒曲中微生物的活性，B正确；
C、发酵时，霉菌先分泌淀粉酶进行糖化后，产生大量的葡萄糖，供酵母菌分解利用，C正确；
D、发酵过程中，酵母菌无氧发酵将糖分转化为酒精和二氧化碳，产生了米酒的特有风味，D正确。
故选A。
4. 早在《诗经·邶风·谷风》中就有“我有旨蓄，亦以御冬”的记载。“旨蓄”就是储藏的美味食品，也就是腌制的酸菜、泡菜。下列有关叙述错误的是（ ）
A. 制作泡菜时腌制时间过长会引起细菌大量繁殖
B. 制作泡菜时温度过高、食盐用量过低会引起细菌大量繁殖
C. 条件适宜时乳酸菌可将葡萄汁中的糖分解成乳酸
D. 腌制泡菜时可通过向泡菜坛边沿水槽注水保持发酵所需环境
【答案】A
【解析】
【分析】
1、泡菜的制作所使用的微生物是乳酸菌，代谢类型是异养厌氧型，在无氧条件下乳酸菌能够将蔬菜中的葡萄糖氧化为乳酸。
2、泡菜的制作流程是：选择原料、配置盐水、调味装坛、密封发酵。
【详解】A、温度过高、食盐用量过低、腌制时间过短，容易造成细菌大量繁殖，亚硝酸盐含量增加，A错误；
B、泡菜制作过程中，温度过高、食盐用量不足 10％，腌制时间过短，容易造成细菌大量繁殖，B正确；
C、乳酸菌进行厌氧呼吸把葡萄糖分解成乳酸，C正确；
D、泡菜腌制主要是乳酸菌进行厌氧呼吸的活动结果，向泡菜坛沿边水槽注水可以创造无氧的环境，D正确。
故选A。
5. 无菌技术主要包括消毒和灭菌，是微生物学实验成功的关键。下列有关叙述错误的是（ ）
A. 获得纯净的微生物培养物的关键是防止杂菌污染
B. 倒平板和接种操作都需要在酒精灯的火焰附近进行
C. 平板划线时，若划线区域有五个，则接种环至少需要灼烧五次
D. 与紫外线照射相比，高压蒸汽灭菌防止杂菌污染的效果更好
【答案】C
【解析】
【分析】常用灭菌方法：灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌法。培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌和消毒方法依次是高压蒸汽灭菌、干热灭菌、灼烧灭菌、化学消毒、紫外线灭菌、巴氏消毒。
【详解】A、要想获得纯净的微生物培养物必须要保证没有杂菌污染，A正确；
B、为了防止杂菌污染，倒平板和接种操作都需要在酒精灯的火焰附近进行，B正确；
C、第一次划线前灼烧一次，每次划线后灼烧一次，因此若划线区域有五个，则接种环至少需要灼烧六次，C错误；
D、与紫外线照射相比，高压蒸汽灭菌法灭菌更彻底，防止杂菌污染的效果更好，D正确。
故选C。
6. 下表表示某培养基的配方（生长在此培养基上的大肠杆菌菌落呈深紫色，并有金属光泽），下列叙述不正确的是（ ）
A. 从用途分析该培养基属于选择培养基
B. 培养基中提供碳源的物质主要是葡萄糖
C. 该培养基含有水、无机盐、碳源和氮源等营养物质
D. 该培养基pH值应调节至中性或弱碱性
【答案】A
【解析】
【分析】根据物理状态可分为固体培养基、液体培养基、半固体培养基；根据培养功能可分为基础培养基、选择培养基、鉴别培养基等；根据使用范围可分为细菌培养基、放线菌培养基、酵母菌培养基、真菌培养基等。
【详解】A、从用途分析该培养基属于鉴别培养基，可以鉴别大肠杆菌，A错误；
B、葡萄糖中含有碳，培养基中提供碳源的物质主要是葡萄糖，蛋白胨中富含蛋白质，提供氮源的物质是蛋白胨，B正确；
C、微生物的营养物质主要包括氮源、碳源、水和无机盐等，有的还需要特殊营养物质如维生素，蛋白胨还可以提供维生素等，C正确；
D、由于该培养基用于培养细菌，所以pH值应调节至中性或弱碱性，D正确。
故选A。
7. 某四联活菌片药理说明如下：本品中婴儿双歧杆菌、嗜酸乳酸杆菌、粪肠球菌为健康人体肠道正常菌群，直接补充可抑制肠道中某些致病菌，维持正常肠道蠕动，调整肠道菌群平衡。蜡样芽孢杆菌可在肠道中定植以消耗氧气。下列说法错误的是（ ）
A. 本品可用于治疗与肠胃菌群失调相关的腹泻、便秘、功能性消化不良
B. 利用发酵工程生产双歧杆菌需要严格控制温度、pH、通入无菌空气并搅拌
C. 添加蜡样芽孢杆菌的作用是为了促进肠道厌氧菌的生长繁殖
D. 本品不能用高于40℃的热水冲服，也不能与青霉素等抗生素联合使用
【答案】B
【解析】
【分析】发酵工程一般包括菌种的选育，扩大培养，培养基的配制、灭菌，接种，发酵，产品的分离、提纯等方面。在发酵过程中，要随时检测培养液中微生物的数量、产物浓度等，以了解发酵进程。还要及时添加必需的营养成分，要严格控制温度、 pH和溶解氧等发酵条件。
【详解】AC、婴儿双歧杆菌、嗜酸乳酸杆菌、粪肠球菌为健康人体肠道正常菌群，可抑制肠道中某些致病菌，蜡样芽孢杆菌消耗肠道氧气，制造无氧环境，有利于肠道菌群的生长繁殖，所以本品可用于治疗与肠胃菌群失调相关的疾病，AC正确；
B、双歧杆菌肠道正常菌群，肠道为缺氧环境，该菌很可能为厌氧菌（实际是厌氧菌），培养该菌不应通入空气，B错误；
D、本品含4种活菌，过高温度会杀死细菌，青霉素能抑制细菌生长繁殖，D正确。
故选B。
8. 豆粕是大豆提取豆油后的一种副产品。为提高其利用价值，研究人员拟从发酵的豆粕中，筛选出能高效地将豆粕蛋白质转化为有机酸的乳酸菌菌株，乳酸菌产生的乳酸能溶解碳酸钙，过程如下：
步骤1：乳酸菌的富集
将发酵豆粕接种于添加了放线菌酮的液体培养基。
步骤2：纯化与鉴定
取一定量的富集菌液，进行梯度稀释，接种于添加了碳酸钙的培养基，挑选单菌落纯化培养并鉴定菌种。
步骤3：探究不同添加物对菌种发酵效果的影响
下列分析正确的是（ ）
A. 步骤1添加放线菌酮的目的是抑制细菌生长
B. 步骤1适用划线接种，步骤2适用涂布接种
C. 步骤2通过观察溶钙圈的大小挑选目标菌落
D. 步骤3培养基中的碳源和氮源全部来自豆粕
【答案】C
【解析】
【分析】1、培养基的基本成分包括水、无机盐、碳源和氮源，此外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。
2、选择培养基是在培养基中加入相应的特殊营养物质或化学物质，抑制不需要的微生物的生长，有利于所需微生物的生长。
【详解】A、乳酸菌也是细菌，所以添加放线菌酮的目的肯定不是抑制细菌生长，而是促进乳酸菌的生长，A错误；
B、步骤1中培养基是液体培养基，不能用划线接种，步骤2适用涂布接种，B错误；
C、碳酸钙圈越大，说明产生的乳酸越多，步骤2可以根据碳酸钙圈的大小来选择目标菌落，C正确；
D、步骤3用不同的添加物来发酵，所以碳源和氮源可以来自不同的添加物，当然主要来自于豆粕，但是不能说全部，D错误。
故选C。
9. 为加速我国北方冬春季秸秆原位还田的腐化过程，研究人员以冻牛粪为材料筛选出耐低温（10℃）的纤维素降解菌。已知刚果红染料能与培养基中的纤维素形成红色复合物，下列相关叙述中正确的是（ ）
A. 初筛菌种前，要利用固体培养基在37℃条件下扩大培养目标菌种
B. 应选择菌落直径与周围透明圈直径比值大的菌落进行纯化
C. 用于筛选培养基是加入刚果红染料的牛肉膏蛋白胨培养基
D. 选用冻牛粪为材料与其富含纤维素及含耐低温微生物有关
【答案】D
【解析】
【分析】刚果红是一种染料，它可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物，但并不与水解后的纤维二糖、葡萄糖等发生这种反应。当我们在含有纤维素的培养基中加入刚果红时，刚果红与纤维素形成红色复合物；而当纤维素被纤维素分解菌分解后，复合物就无法形成，培养基中会出现以这些菌为中心的透明圈。
【详解】A、初筛菌种前，要利用液体培养基在10℃条件下扩大培养目标菌种，A错误；
B、由于刚果红染料与纤维素形成红色复合物，因此出现以因纤维素降解菌为中心的透明圈，菌落直径与透明圈直径比值越小，分解纤维素的能力越强，B错误；
C、用于筛选的培养基以纤维素为唯一的碳源的固体培养基，加入刚果红染料是鉴别作用，C错误；
D、筛选耐低温的纤维素降解菌需要到其所生活的环境中寻找，冻牛粪中富含纤维素，有很多微生物，冻牛粪因温度低，故其内的微生物是耐低温微生物，D正确。
故选D。
10. 在某地的农业生产中，研究人员发现了一种广泛使用的除草剂在土壤中不易被降解，且长期使用会导致土壤被污染。为修复被该除草剂污染的土壤，可按下图程序选育能降解该除草剂的细菌（已知该除草剂是一种含氮有机物，在水中溶解度低，含一定量该除草剂的培养基不透明）。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 只有长期使用该除草剂的土壤中才含有能降解该除草剂的细菌
B. 筛选能降解该除草剂的细菌的培养基中该除草剂是唯一的氮源
C. 图中操作Ⅰ接种方法为平板划线法，该方法可用于细菌计数
D. 经过一段时间的培养，培养皿中应该只存在有透明圈的菌落
【答案】B
【解析】
【分析】微生物常用的接种方法：稀释涂布平板法和平板划线法。
【详解】A、土壤中才含有能降解该除草剂的细菌，是基因突变的结果，不是长期使用除草剂的结果，A错误；
B、筛选能降解该除草剂的细菌的培养基中该除草剂是唯一的氮源，B正确；
C、平板划线法不能用于细菌计数，稀释涂布平板法可以，C错误；
D、经过一段时间的培养，培养皿中也会存在无透明圈的菌落，D错误。
故选B。
11. 研究小组利用稀释涂布平板法来探究某河流中大肠杆菌的数量，每一个浓度涂布四个平板，并且设置空白对照组。下列关于操作步骤的叙述正确的是（ ）
A. 涂布前，将浸过酒精的涂布器在火焰上灼烧，酒精燃尽后还要冷却一会儿
B. 涂布完成后，在培养皿的皿盖上做标记，以避免混淆
C. 计算平板上的菌落数时，四个培养皿上的菌落数无论多少，都要全部平均
D. 若空白对照组上有7个菌落，则在实验组数据基础上减去7，以获得最准确数据
【答案】A
【解析】
【分析】1.常用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法，目的是让聚集在一起的微生物分散成单个细胞，然后得到由这个细胞繁殖而来的肉眼可见的单个群落。
2.稀释涂布法是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，在适宜条件下培养，在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落。
【详解】A、使用涂布器在酒精灯下涂布时，要先将涂布器沾有少量酒精进行灼烧灭菌，燃尽后还要冷却8～10s再进行涂布，A正确；
B、涂布完成后，在培养皿的皿底上做标记，以避免混淆，并将培养皿倒置培养，防止冷凝水倒流污染培养基，B错误；
C、计算平板上的菌落数时，应选择菌落数在30-300平板进行计数并平均，C错误；
D、若空白对照组上有7个菌落，说明培养基灭菌不彻底，需要重新进行实验，D错误。
故选A。
12. 如图是3种抗生素影响某种细菌繁殖的实验结果。下列相关叙述错误的是（ ）

A. 各实验组最好设置重复实验
B. 各实验组培养的条件需相同
C. 实验需要设置不加抗生素的对照组
D. 氯霉素对此种细菌没有抑制作用
【答案】D
【解析】
【分析】图示显示3种抗生素对某种细菌繁殖的影响，由图可知，青霉素能在较短时间内高效的抑制细菌的繁殖，其次抑菌效果较好的是链霉素，氯霉素的效果最差。
【详解】A、本实验是研究三种抗生素对某种细菌繁殖的影响，自变量是抗生素的种类，因变量是某细菌的数量，为了减小误差，各组均需设置重复实验，A正确；
B、各实验组培养的条件是无关变量，均应设置成相同，B正确；
C、为了说明抗生素的抑菌效果，实验中需要设置不加抗生素的对照组，C正确；
D、由于没有不加抗生素的对照组的实验数据，所以不能说明氯霉素对此种细菌没有抑制作用，D错误。
故选D。
13. 发酵工程广泛应用于多个行业，下列有关叙述错误的是（ ）
A. 黑曲霉可作为酿制酱油、生产柠檬酸的菌种
B. 啤酒酿制终止后，可得到啤酒、单细胞蛋白等产品
C. 用纤维废料发酵得到酒精，可减少环境污染、减缓能源短缺问题
D. 用液体培养基培养某病毒可大规模生产某病毒减毒疫苗
【答案】D
【解析】
【分析】发酵工程是指采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品，或直接把微生物应用于工业生产过程的一种技术。发酵工程的内容包括菌种选育、培养基的配制、灭菌、种子扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离提纯（生物分离工程）等方面。
【详解】A．黑曲霉产生的蛋白酶可将大豆中的蛋白质分解为小分子的肽和氨基酸，进一步加工为酱油，柠檬酸可通过黑曲霉发酵获得，A正确：
B．啤酒酿制终止后，可通过过滤、沉淀等手段获得酵母细胞（即可提取得到单细胞蛋白），将滤液加工后得到啤酒，B正确；
C．纤维废料分解得到葡萄糖，其经过发酵得到酒精，既减少了环境污染，又减缓了能源短缺问题，C正确；
D．某病毒减毒疫苗是该病毒经过减毒处理得到的，需用特定的动物细胞进行培养，病毒不能独立地在液体培养基中生长繁殖，D错误。
故选D。
14. 下列对发酵工程应用的描述，错误的是（ ）
A. 发酵工程所用的菌种来源有自然界直接分离、诱变育种或基因工程育种
B. 微生物农药是利用微生物或其代谢物来防治病虫害，是生物防治的重要手段
C. 青贮饲料中添加乳酸菌可提高饲料的品质使饲料保鲜，动物食用后能提高免疫力
D. 谷氨酸棒状杆菌在酸性条件下发酵可以得到谷氨酸，再经一系列处理可得味精
【答案】D
【解析】
【分析】发酵工程，是指采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品，或直接把微生物应用于工业生产过程的一种新技术。发酵工程的内容包括菌种的选育、培养基的配制、灭菌、扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离提纯等方面。
【详解】A、发酵工程所用的性状优良的菌种可以从自然界中筛选出来，也可以通过诱变育种或基因工程育种获得，A正确；
B、微生物农药是利用微生物或其代谢物来防治病虫害的，是生物防治的重要手段，B正确；
C、青贮饲料中添加乳酸菌可提高饲料的品质使饲料保鲜，动物食用后能提高免疫力，C正确；
D、谷氨酸棒状杆菌是细菌，在培养细菌时，一般需要将培养基调至中性或弱碱性，谷氨酸棒状杆菌发酵可以得到谷氨酸，经过一系列处理就能制成味精，D错误。
故选D。
15. 某工厂利用制糖生产废水和沼气池废料为原料，酵母菌为菌种在连续搅拌反应器中培养酵母菌生产单细胞蛋白。下列说法错误的是（ ）
A. 单细胞蛋白含有蛋白质、糖类、脂质和维生素等物质
B. 发酵过程中，通过放料口取样以便随时监测产物浓度等
C. 可采用深层通气液体发酵技术提高单细胞蛋白的产量
D. 发酵结束后，应采用提取、分离和纯化措施以获得产品
【答案】D
【解析】
【分析】发酵工程生产的产品有两类：一类是代谢产物，另一类是菌体本身。产品不同，分离提纯的方法一般不同。①如果产品是菌体，可采用过滤，沉淀等方法将菌体从培养液中分离出来；②如果产品是代谢产物，可用萃取、蒸馏、离子交换等方法进行提取。
【详解】A、单细胞蛋白（微生物菌体）不仅含有丰富的蛋白质，还含有糖类、脂质和维生素等物质，A正确；
B、在发酵过程中，通过放料口取样以便随时监测产物浓度等以了解发酵进程，B正确；
C、单细胞蛋白是在连续搅拌反应器中培养酵母菌生产的，连续搅拌的目的一是增加溶氧量，促进菌体的有氧呼吸，二是使菌种与培养液充分接触，提高原料的利用率，所以可采用深层通气液体发酵技术提高单细胞蛋白的产量，C正确；
D、单细胞蛋白是在连续搅拌反应器中培养酵母菌生产的，是微生物菌体，所以可采用过滤，沉淀等方法将菌体从培养液中分离出来，D错误。
故选D。
二、多选题：（本题共5小题，每小题3分，共15分。每小题有两个或多个选项符合题目要求，全部选对得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分。）
16. 酿酒的原理主要是酵母菌进行无氧呼吸产生酒精和CO2，如图所示。下列分析错误的是（ ）

A. 糖酵解阶段和发酵阶段的反应场所不相同
B. 糖酵解阶段和发酵阶段均生成少量ATP
C. NAD+可循环再生持续参与无氧呼吸
D. 用酸性重铬酸钾溶液检测酒精后会出现灰绿色
【答案】AB
【解析】
【分析】1、有氧呼吸是在氧气充足的条件下，细胞彻底氧化分解有机物产生二氧化碳和水同时释放能量的过程，有氧呼吸的第一阶段是葡萄糖酵解产生丙酮酸和还原氢的过程，发生在细胞质基质中，第二阶段是丙酮酸和水反应形成二氧化碳和还原氢的过程，发生在线粒体基质中，第三阶段是还原氢与氧气结合形成水的过程，发生在线粒体内膜上。
2、无氧呼吸是在无氧条件下，有机物不彻底氧化分解，产生二氧化碳和酒精或者乳酸，同时释放少量能量的过程，第一阶段是葡萄糖酵解形成丙酮酸和还原氢，第二阶段是丙酮酸和还原氢在不同酶的作用下形成二氧化碳和酒精或者乳酸，两个阶段都发生在细胞质基质中。
【详解】A、糖酵解阶段发生在细胞质基质，发酵阶段发生在细胞质基质，二者反应场所相同，A错误；
B、无氧呼吸只在第一阶段释放少量能量，即只在糖酵解阶段产生少量ATP，B错误；
C、由图可知糖酵解阶段NAD+结合H+生成NADH，在发酵阶段NADH重新生成NAD+，NAD+可循环再生持续参与无氧呼吸，C正确；
D、酸性重铬酸钾溶液遇酒精由橙色变为灰绿色，用酸性重铬酸钾溶液检测酒精后会出现灰绿色，D正确。
故选AB。
17. 小米醋是以小米为原料，通过煮米、大曲酒酵、汾醋、抄缸、拨缸、存醅、淋醋等工序制成。下列说法正确的是（ ）
A. 将煮好的小米摊开放凉之后再加入大曲，可以防止高温杀死大曲中的微生物
B. 加入大曲后要拌匀再放入缸内，搅拌可以使原料与大曲中的微生物充分混合
C. 大曲酒窖阶段需要每隔一段时间将缸打开，可以排气，也可促进酵母菌繁殖
D. 抄缸阶段需对醋醅进行翻动，其目的是增加氧气含量，促进醋酸杆菌的繁殖
【答案】ABD
【解析】
【分析】酒精发酵起主要作用的是酵母菌，通常前期通气使酵母菌进行有氧呼吸，以便大量繁殖，后期密封使酵母菌进行无氧呼吸产生酒精，醋酸发酵起主要作用的菌种是醋酸菌，在有氧的条件下发酵形成醋酸。
【详解】A、将煮好的小米摊开放凉之后再加入大曲，可以防止高温杀死大曲中的酵母菌等微生物，A正确：
B、加入大曲后要拌匀再放入缸内，搅拌可以使原料与大曲中的微生物充分混合，利于酵母菌发酵充分，B正确；
C、酵母菌无氧呼吸会产生二氧化碳，大曲酒窖阶段需要每隔一段时间将缸打开排气，防止发酵液溢出，C错误；
D、抄缸阶段需对醋醅进行翻动，其目的是增加氧气含量，使醋酸杆菌充分接触氧气，促进醋酸杆菌的繁殖，D正确。
故选ABD。
18. 为了解大肠杆菌对四种抗生素的敏感程度，某研究小组进行了相关药敏实验，将含有相同浓度的抗生素I～IV四个大小相同的纸片分别贴在长满测试菌的平板上，实验结果如下图所示。下列相关叙述错误的是（ ）

A. 在培养基平板上涂满菌液后应立即将其倒置培养
B. 图Ⅱ形成的抑菌圈较小，可能是大肠杆菌对此抗生素敏感性最大
C. 图IV抑菌圈中出现了部分菌落，可能是大肠杆菌发生了基因突变或染色体变异
D. 挑取图I抑菌圈边缘的菌落进行扩大培养后重复该实验，得到的抑菌圈直径会逐渐变小
【答案】ABC
【解析】
【分析】图中出现的抑菌圈内几乎没有菌落，距离抗生素纸片越远，抗生素浓度越低，因此抑菌圈越大表明大肠杆菌的敏感性越高。
【详解】A、在培养基平板上涂满菌液后应待晾干后将其倒置培养，A错误；
B、图Ⅱ形成的抑菌圈较小，可能是大肠杆菌对此抗生素敏感性最小，B错误；
C、大肠杆菌为原核生物，不会发生染色体变异，C错误；
D、挑取图I抑菌圈边缘的菌落进行扩大培养后重复该实验，可以使耐药性增强，得到的抑菌圈直径会逐渐变小，D正确。
故选ABC。
19. 科学家利用营养缺陷型菌株A、B，在缺乏A、B所需营养物质的培养基上培养，结果如下图所示。下列叙述错误的有（ ）
A. 该培养基是固态的完全培养基，具有鉴别功能
B. 菌株A、B混合后能在上述培养基上生长
C. U型管实验证明菌株A、B释放的代谢产物形成了互补
D. 推测菌株A、B通过接触发生了遗传物质重新组合
【答案】AC
【解析】
【分析】题意分析，菌株A、B单独培养都不能生长，用U形管也不能生长，说明菌株A、B释放的代谢产物没有形成互补；但混合培养长成了菌落，可能是菌株A、B通过接触发生了遗传物质重新组合。
【详解】A、该培养基是固态的基本培养基，具有鉴别功能，A错误；
B、结合图示可以看出，菌株A、B混合后能在上述培养基上长成菌落，B正确：
C、在U形管不能生长，但代谢产物可以通过滤板，说明菌株A、B释放的代谢产物没有形成互补，C错误；
D、混合培养长成了菌落，但在U形管不能生长，说明可能是菌株A、B通过接触发生了遗传物质重新组合，D正确。
故选AC。
20. 科学家以糖蜜（含较多蔗糖）为原料，运用合成生物学方法构建了一株嗜盐单胞菌H，在实验室发酵生产PHA（聚羟基脂肪酸酯）等新型高附加值可降解材料，工艺流程如图。下列相关说法正确的是（ ）
A. 发酵工程一般包括菌种选育等多个步骤，其中心环节是菌种扩大培养
B. 为在一定程度上避免杂菌污染，可适当降低发酵液中盐的浓度
C. 菌株H还能分泌蛋白酶、脂肪酶等分解餐厨垃圾来生成PHA
D. 可在发酵结束之后，采用过滤和沉淀等方法将菌株H从发酵液中分离出来
【答案】CD
【解析】
【分析】发酵工程，是指采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品，或直接把微生物应用于工业生产过程的一种新技术。发酵工程的内容包括菌种的选育、培养基的配制、灭菌、扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离提纯等方面。
【详解】A、发酵工程一般包括菌种选育等多个步骤，发酵工程的中心环节是发酵罐内发酵，A错误；
B、嗜盐单胞菌需要一定的盐浓度，其他微生物则不能在较高的盐浓度下生长，提高发酵液中盐的浓度，一定程度上可以避免杂菌污染，B错误；
C、酶具有专一性，发酵罐中有糖蜜或餐厨垃圾，含有蛋白质和脂肪等物质，故菌株H还能分泌蛋白酶、脂肪酶等分解餐厨垃圾来生成PHA，C正确；
D、发酵结束之后，对于菌体可采取适当的过滤、沉淀措施来分离；而对于菌体的代谢物，可根据产物的性质采取适当的提取、分离和纯化措施来获得产品，D正确。
故选CD。
三、非选择题：（本题共5小题，共55分。除标注外，每空1分）
21. 同学甲以新鲜的葡萄为材料，用如图1所示的发酵装置来制作果酒、果醋；同学乙为了探究培养时间与酵母菌种群密度的关系，将从葡萄皮上成功分离出的野生酵母菌分别接种于3个盛有等量同种液体培养基的锥形瓶中，并放置在转速分别为210r/min、230r/min和250r/min的摇床上培养，结果如图2所示。回答下列问题：

（1）图1中排气口要连接一根长而弯曲的胶管，其目的是_______________，葡萄汁装入发酵瓶时，通常要留出大约1/3的空间，原因是利于发酵初期__________________，并防止发酵旺盛时发酵液溢出；制作葡萄酒时需将温度控制在____________℃，原因是_______________。
（2）用图1的装置酿酒结束后，若要直接转入果醋发酵，具体的操作方案为____________。在制作果酒和果醋的过程中，发酵液pH的变化分别是_______________________。
（3）由图2的数据可以得出的结论是：在一定转速范围内，____________。
（4）图2中培养8h后，3个锥形瓶中酵母菌的种群密度不再增加的限制因素是______________（写出一点）。
【答案】（1） ①. 防止空气中微生物的污染 ②. 酵母菌进行有氧呼吸大量繁殖 ③. 18～30 ④. 酿酒酵母的最适生长温度约为28℃
（2） ①. 打开充气口通入无菌空气，接种醋酸菌，同时升高温度 ②. 下降、下降
（3）摇床转速越高，酵母菌繁殖的速度和总量越高（或培养液中氧气含量越高，酵母菌种群密度越大）
（4）培养液中营养物质有限（大量减少）、代谢产物（大量）积累、pH下降等
【解析】
【分析】果酒的制作是利用酵母菌进行无氧呼吸产生酒精，酿酒酵母的最适生长的温度是28℃；果醋的制作是利用醋酸菌，醋酸菌的代谢类型为异养需氧型，生长的温度为30-35℃。
【小问1详解】
为防止空气中微生物的污染，排气口要连接一根长而弯曲的胶管；因为发酵前期酵母菌要进行有氧呼吸大量繁殖，并且后期发酵酵母菌会产生CO2，葡萄汁装入发酵瓶时，通常要留出大约1/3的空间原因是利于发酵初期酵母菌进行有氧呼吸大量繁殖，并防止发酵旺盛时发酵液溢出。酿酒酵母的最适生长的温度是28℃，制作果酒利用的是酵母菌的无氧呼吸，故制作葡萄酒时需将温度控制在18～30℃。
【小问2详解】
果醋发酵是利用醋酸菌，醋酸菌的代谢类型为异养需氧型，生长的温度为30-35℃，若要直接转入果醋发酵，打开充气口，通入无菌空气，接种醋酸菌，同时升高温度。在制作果酒的过程中，酵母菌会产生酸性CO2气体，故发酵液pH下降，在制作果醋的过程中，醋酸菌会产生醋酸，发酵液pH下降。
【小问3详解】
由图2可知，转速为250r/min的条件下，酵母菌的种群数量比其他两组的大，说明在一定转速范围内，摇床转速越高，酵母菌繁殖的速度和总量越高（或培养液中氧气含量越高，酵母菌种群密度越大）。
【小问4详解】
培养8h后，由于培养液中营养物质有限（大量减少）、代谢产物（大量）积累、pH下降，3个锥形瓶中酵母菌的种群密度不再增加。
22. 乳酸菌在工业、农业和医药领域都具有很高的应用价值。乳酸菌代谢产生的乳酸能保持食品的风味，其产生的细菌素具有较广的抑菌谱。实验小组从陈年泡菜水中筛选出高产细菌素的乳酸菌株，并进行抑菌培养。流程如图所示，回答下列问题：
（1）根据乳酸菌的代谢特点，在培养乳酸菌时，除主要营养物质外，还需要在培养基中添加____________，接种前培养基需要通过____________法进行灭菌。
（2）研究人员通常根据菌落的形状__________、和颜色等；特征来初步区分不同种的微生物，统计菌落种类和数量时要每隔24h观察统计一次，直到各类菌落________________时。
（3）过程I用的接种方法是___________。通过过程I可以获得由一个细胞繁殖而来的菌落，达到纯化乳酸菌的目的，其原理是通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作，_____________。经数次划线后培养，可以分离得到单菌落。
（4）富集培养的目的是_________，进而增加上清液中细菌素的浓度。选用多种细菌作为检测的指示菌，得到细菌素的抑菌图谱如下，细菌素对____________的抑制作用最强。
注：+表示抑菌圈直径，“+”表示≤10mm，“+”表示10~20mm，“++”表示≥20mm。
【答案】22. ①. 维生素 ②. 高压蒸汽灭菌
23. ①. 大小 ②. 数目稳定
24. ①. 平板划线法 ②. 将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面
25. ①. 增加乳酸菌的浓度 ②. 蜡状芽孢杆菌
【解析】
【分析】1、无菌技术的主要内容：①对实验操作的空间操作者的衣着和手，进行清洁和消毒；②将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌；③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行；④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。
2、微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法： 将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养基表面，经培养后可形成单个菌落。
【小问1详解】
根据乳酸菌的代谢特点，在培养乳酸菌时，除主要营养物质外，还需要在培养基中添加维生素，接种前培养基需要通过高压蒸汽灭菌法进行灭菌。
【小问2详解】
研究人员通常根据菌落的形状大小、和颜色等；特征来初步区分不同种的微生物，统计菌落种类和数量时要每隔24h观察统计一次，直到各类菌落数目稳定时。
【小问3详解】
过程I用的接种方法是平板划线法。通过过程I可以获得由一个细胞繁殖而来的菌落，达到纯化乳酸菌的目的，其原理是通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。经数次划线后培养，可以分离得到单菌落。
【小问4详解】
富集培养的目的是增加乳酸菌的浓度，进而增加上清液中抑菌素的浓度。选用多种细菌作为检测的指示菌，由表格分析可知，细菌素对蜡状芽抱杆菌的抑菌圈直径最大，对植物乳杆菌的抑菌圈直径最小，抑菌圈直径越大，说明对细菌的抑制作用越强，故细菌素对蜡状芽抱杆菌的抑制作用最强。
23. 四环素是放线菌产生的一种广谱抗生素，既可以用来进行动物疾病的治疗，还可以作为饲料的添加剂促进动物生长。然而四环素的化学结构稳定，在动物体内并不能被完全吸收转化，大部分以尿液形式排出体外，易在环境中积累造成污染。某研究人员欲从养鸡场粪便堆肥中筛选对四环素具有一定降解能力的菌株。回答下列问题：
（1）筛选四环素降解菌时，培养基除了加入碳源、氮源、水和无机盐外，还需加入____________。从用途上分析该培养基属于____________培养基。
（2）若对四环素降解菌进行分离计数，需要将含有四环素降解菌的菌液采用_____________法接种于固体培养基表面，该法的原理是当样品的稀释度足够高时，培养基表面的生长的一个单菌落，____________。
（3）在培养四环素降解菌时，往往同时将一未接种的平板置于恒温箱中一起培养，目的是_____________。该科研人员利用显微镜直接计数四环素降解菌，结果往往偏大，原因可能是_____________。
【答案】（1） ①. 四环素 ②. 选择
（2） ①. 稀释涂布平板 ②. 来源于样品稀释液中的一个活菌
（3） ①. 检测培养基灭菌是否彻底 ②. 该法统计的结果一般是活菌数和死菌数的总和（或显微镜直接计数会将活菌和死菌一起统计）
【解析】
【分析】微生物常见的接种的方法（1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。（2）稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
【小问1详解】
该科研人员欲筛选对四环素具有一定降解能力的菌株，则该培养基中需加入四环素，从用途上分析，属于选择培养基。
【小问2详解】
若对四环素降解菌进行分离计数，需要将含有四环素降解菌的菌液采用稀释涂布平板法接种于固体培养基表面，该法的原理是当样品的稀释度足够高时，培养基表面的生长的一个单菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。
【小问3详解】
将未接种的空白平板置于恒温箱中一起培养，可检测培养基灭菌是否彻底。利用显微镜直接计数四环素降解菌，往往将活菌和死菌一起统计，统计值往往偏大。
24. 水中细菌总数可以作为判定被检水样被有机物污染程度的标志。在水质卫生学检验中，细菌总数是指1mL水样在牛肉膏蛋白胨琼脂培养基中，经37℃、24h培养后，所生长出的细菌菌落数。为初步测定某处池水中的细菌数目，实验大致流程为：水样采集→梯度稀释→接种培养→菌落计数。请回答：
（1）对采集的池水进行梯度稀释时，应先将1mL水样加入___________________中以获得稀释10倍的稀释液。实验中对采集的池水要进行稀释的原因是________________。
（2）接种培养所用到培养基中，能为细菌同时提供碳源和氮源的物质是_________________，氮源的主要作用是______________（答出1点即可）。
（3）为保证菌落计数结果准确，一般选择菌落数在______________的平板进行计数。用这种方法统计的菌落数目往往比活菌的实际数目低，原因是_____________。
（4）实验过程中为确保培养基上菌落来自所采集水样，避免杂菌污染。实验中需要注意的具体操作有：采集水样的容器要_______________。稀释和接种要在______________进行等等。
【答案】24. ①. 9ml无菌水 ②. 避免因池水中细菌数目过多（密度过大），得不到单（独立的）菌落
25. ①. 牛肉膏、蛋白胨 ②. 为微生物的代谢提供氮元素（可合成微生物细胞中的核酸、蛋白质、磷脂等含氮物质，合理即可给分）
26. ①. 30-300 ②. 当两个或多个细胞连在一起时平板上观察到的只是一个菌落
27. ①. 灭菌 ②. 酒精灯火焰附近（旁）
【解析】
【分析】题中只需要检测水中的细菌数目，不需要进行鉴定，微生物培养中，对活菌计数常用稀释涂布平板法，除此之外计数方法还有显微镜直接计数法。
【小问1详解】
对池水进行稀释时，为了减少误差，必须用无菌水，1ml水样稀释10倍，则应加9ml无菌水；池水中细菌数目过多，在进行涂布培养时不容易获得单个菌落，使计数误差较大，因此实验中对采集的池水要进行稀释。
【小问2详解】
稀释后的水样接种在牛肉膏、蛋白胨琼脂培养基中培养，牛肉膏、蛋白胨均含有蛋白质、糖类等有机物，故其能为细菌同时提供碳源和氮源的物质是牛肉膏、蛋白胨。氮源的主要作用是为微生物的代谢提供氮元素，可合成微生物细胞中的核酸、蛋白质、磷脂等含氮物质，
【小问3详解】
为保证菌落计数结果准确，一般选择菌落数在30—300的平板进行计数。由于当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，故稀释涂布平板法统计的菌落数目往往比活菌的实际数目低。
【小问4详解】
为避免杂菌污染，必须严格按照无菌技术，对实验者、操作台消毒处理；所用容器均需灭菌；整个实验过程需要在酒精灯火焰旁进行等。
25. 我国是世界上啤酒的生产和消费大国。啤酒是以大麦为主要原料经酵母菌发酵制成的，其工业化生产流程如下图所示。

发酵条件随啤酒品种和口味要求的不同而有所差异。
（1）发酵工程一般包括菌种的选育、________________、培养基的配制、灭菌、_______________、发酵罐内发酵、分离提纯产物等方面。啤酒酵母的新陈代谢类型是________________。
（2）在酿酒过程中常加入_______________（填某种植物激素）以缩短大麦发芽的时间，从而减少有机物的消耗。焙烤阶段应注意控制温度，不能使__________失活。
（3）发酵过程可分为_____________、后发酵两个阶段，其中酵母菌繁殖、大部分糖的分解和代谢物的生成都在前一阶段完成。后一阶段要在低温_________的环境下储存一段时间才能形成澄清、成熟的啤酒。
（4）从发酵罐中取样装入甲瓶，初步估测甲瓶中酵母菌数量为3×106个/mL，若要在每个平板上涂布0.1mL用_______________稀释后的菌液，且保证每个平板上长出的菌落数不超过300个，则至少应将甲瓶的菌液稀释________________倍。
【答案】（1） ①. 扩大培养 ②. 接种 ③. 异养兼性厌氧型
（2） ①. 赤霉素 ②. 淀粉酶
（3） ①. 主发酵 ②. 密闭
（4） ①. 无菌水 ②. 1000
【解析】
【分析】啤酒发酵过程是啤酒酵母在一定的条件下，利用麦汁中的可发酵性物质而进行的正常生命活动，其代谢的产物就是所要的产品——啤酒。由于酵母类型的不同，发酵的条件和产品要求、风味不同，发酵的方式也不相同。根据酵母发酵类型不同可把啤酒分成上面发酵啤酒和下面发酵啤酒。一般可以把啤酒发酵技术分为传统发酵技术和现代发酵技术。
【小问1详解】
发酵工程一般包括菌种的选育、扩大培养、培养基的配制、灭菌、接种、发酵罐内发酵、分离提纯产物等方面。啤酒酵母的新陈代谢类型是异养兼性厌氧型。
【小问2详解】
发芽大麦合成大量淀粉酶，催化淀粉分解为小分子单糖。酵母菌不能直接利用淀粉做碳源，因此淀粉糖化后啤酒酵母才能利用分解形成的葡萄糖充分发酵。赤霉素作为一种重要的植物激素，对种子萌发具有促进作用，在酿酒过程中常加入适宜浓度的赤霉素缩短大麦发芽的时间，从而减少有机物的消耗，因此，在焙烤阶段应注意控制温度，不能使淀粉酶失活。
【小问3详解】
发酵过程可分为主发酵、后发酵两个阶段，其中酵母菌繁殖、大部分糖的分解和代谢物的生成都在前一阶段完成。后一阶段要在低温密闭的环境下储存一段时间才能形成澄清、成熟的啤酒。
【小问4详解】
从发酵罐中取样装入甲瓶，初步估测甲瓶中酵母菌量数为3×106个/mL，若要在每个平板上涂布0.1mL用无菌水稀释后菌液，且保证每个平板上长出的菌落数不超过300个，则至少应将甲瓶的菌液稀释倍数为3×106×0.1÷300=1000倍。成分
蛋白胨
葡萄糖
KH2PO4
伊红
亚甲基蓝
蒸馏水
琼脂
含量
10g
10g
2g
0.4g
0.065g
100mL
15g
指示菌
大肠杆菌
金黄色葡萄球菌
蜡状芽孢杆菌
植物乳杆菌
枯草芽孢杆菌
抑菌活性
++
++
+++
+
++