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山东省济宁市曲阜市2023-2024学年高二下学期期中考试生物试卷
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这是一份山东省济宁市曲阜市2023-2024学年高二下学期期中考试生物试卷，共10页。试卷主要包含了04等内容，欢迎下载使用。
高二生物试题
2024.04
注意事项：
1．本试卷分选择题和非选择题两部分。满分100分，考试时间90分钟。
2．答题前，考生务必将姓名、考生号等个人信息填写在答题卡指定位置。
3．考生作答时，请将答案答在答题卡上。选择题每小题选出答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑；非选择题请用直径0.5毫米黑色墨水签字笔在答题卡上各题的答题区域内作答。超出答题区域书写的答案无效，在试题卷、草稿纸上作答无效。
一、选择题（本题共15小题，每小题2分，共30分。每小题给出的四个选项中，只有一个选项最符合题目要求）
1．《本草纲目》中记载了酿制烧酒的过程：以糯米或粳米等蒸熟，“酿瓮中七日……人甑蒸令汽上，用器承取滴露”“凡酸坏之酒，皆可蒸烧”。下列说法正确的是
A．为使酵母菌进行酒精发酵，酿制时“瓮”应装满后密封
B．“糯米或粳米”中所含物质只能为微生物提供碳源和氮源
C．在利用酵母菌发酵的“七日”中，水和酒精是同时产生的
D．发酵过程中密封不严，醋酸菌将酒精转化为乙酸使酒“酸坏”
2．目前市场上的果蔬汁发酵产品所利用的菌种主要为乳酸菌，而利用酵母菌、醋酸菌、乳酸菌等多种益生菌混合发酵果蔬汁风味更协调、营养更丰富。下列相关叙述正确的是
A．乳酸菌、醋酸菌和酵母菌均属于原核生物
B．果蔬汁中的糖类物质可为益生菌提供碳源和氮源
C．果蔬汁发酵过程中需要防止杂菌污染
D．混合发酵是把所有益生菌混合并在相同条件下发酵
3．我国科学家从北极分离、鉴定出了一种耐冷细菌，过程如下：①接种在人造海水中，15℃条件下振荡培养3h；②梯度稀释后将样品涂布在TYS培养基中，15℃条件下培养7d；③挑取生长菌落，进行划线，15℃条件下培养；④选择不同形态的菌落进行培养、鉴定和保藏。下列叙述错误的是
A．过程①中的振荡培养可以提高培养液中的溶氧量
B．过程②中的TYS培养基灭菌前需将pH调至酸性
C．过程②③使用的接种器具均需灼烧并冷却后接种
D．涂布后再次划线培养的目的是进一步纯化所得菌种
4．用“麦汁酸化”法酿造的酸啤酒既有麦芽清香，又酸甜适口。它是通过微生物发酵将麦汁中的麦芽糖和其他糖类转化为醋酸和乳酸，再结合酒精发酵制作而成。下列说法错误的是
A．前期利用醋酸菌和乳酸菌在同一容器中同时进行醋酸和乳酸发酵
B．达到一定酸度的麦汁需经熬煮、冷却后才可接种抗酸性高的酵母菌
C．后期发酵产生酒精时，应将发酵温度控制在18～30℃范围内
D．酒精发酵时发酵罐内液面不再有气泡产生，说明发酵基本完毕
5．海洋杜氏藻是一种单细胞绿藻，具有耐盐特性；紫球藻是一种单细胞红藻，是制备重要医药原料花生四烯酸的良好材料，且对青霉素有抗性。通过植物细胞工程技术，培育出了能在高盐海水中养殖且高产花生四烯酸的杂种藻类。下列说法错误的是
A．需将杂种细胞在黑暗的条件下诱导形成愈伤组织后大量养殖
B．用聚乙二醇处理可诱导两种原生质体融合
C．用酶解法获取原生质体的过程需在等渗或略高渗溶液中进行
D．在高盐培养基中添加青霉素可选择出所需的杂种细胞
6．紫罗兰和油菜均为二倍体植物，紫罗兰具有改变油菜花色，提高油菜抗虫性，改善油菜品质等优良基因资源。实验小组利用紫罗兰和油菜通过体细胞杂交技术培育新品种，如图表示不同浓度的PEG作用下原生质体两两融合和多（三个或三个以上）原生质体融合的比率。下列说法中错误的是
A．图中诱导原生质体两两融合的最佳PEG浓度为40%左右
B．两两融合的细胞有三种类型，均含有四个染色体组
C．不同原生质体细胞膜完全融合是植物杂种细胞形成的标志
D．植物体细胞杂交技术的突出优点是可克服远缘杂交不亲和的障碍
7．目前精子载体法逐渐成为最具诱惑力的制备转基因动物方法之一，该方法以精子作为外源基因的载体，使精子携带外源基因进入卵细胞受精。下图表示利用该方法制备转基因鼠的基本流程。下列说法错误的是
A．①过程需将成熟的精子放入ATP溶液中进行获能处理
B．将外源基因整合到精子的染色体上，可保证外源基因稳定遗传
C．②采用体外受精技术，受精完成的标志是雌雄原核融合
D．精子载体法与显微注射法相比，对受精卵中核的影响更小
8．某研究小组为测定药物对体外培养细胞毒性的大小，准备对某种动物的肝肿瘤细胞（甲）和正常肝细胞（乙）进行动物细胞培养。下列说法正确的是
A．制备肝细胞悬液时，可用胃蛋白酶代替胰蛋白酶处理肝组织
B．CO2培养箱中CO2浓度维持在5%左右，以促进细胞呼吸
C．本实验应设置对照实验，以检测药物对甲、乙的毒性大小
D．为防止细胞培养过程中细菌的污染，需要对培养液和所有培养用具进行消毒处理以及在无菌环境下进行操作
9．体外受精和胚胎移植都是在医学和农牧业生产中应用较多的胚胎工程技术。下列有关说法正确的是
A．采集的卵母细胞和精子可以直接置于培养液中共同培养以完成受精
B．胚胎移植前，需要选取遗传性状优良、生产能力强的母牛作为受体
C．胚胎移植前，需对供体和受体进行免疫检查，避免发生免疫排斥反应
D．胚胎分割移植以后，经受体孕育的多个后代的遗传性状相同
10．我国科学家最新研究发现，当卵细胞与精子融合后，卵细胞会特异性表达和分泌BF1和BF2这两种蛋白质，这两种蛋白质能避免受精卵再度与精子融合。下列叙述正确的是
A．精子与卵细胞的识别和融合，与细胞膜的选择透过性有关
B．受精过程中，精子和卵细胞的随机结合会导致基因重组
C．多精入卵会导致产生双胞胎甚至多胞胎
D．BF1和BF2有利于维持受精卵中染色体数目的稳定
11．下表为常用的限制性内切核酸酶（限制酶）及其识别序列和切割位点，由此推断以下说法中错误的是
注：Y为C或T，R为A或G。
A．HindⅡ、SmaI两种限制酶切割后形成平末端
B．Sau3AI限制酶的切割位点在识别序列的外部
C．BamHI和Sau3AI两种限制酶切割后形成相同的黏性末端
D．一种限制酶一定只能识别一种核苷酸序列
12．实时荧光RT—PCR可用于RNA病毒的核酸检测，其原理是：在PCR复性过程中探针和引物一起与模板结合，探针两侧分别带有荧光基团和抑制荧光发出的淬灭基团，新链延伸过程中，DNA聚合酶会破坏探针，导致荧光基团与淬灭基团分离而发出荧光。利用RT=PCR进行核酸检测的相关过程如图所示。下列说法错误的是
A．做RT—PCR之前，需要先根据cDNA的核苷酸序列合成引物和探针
B．RNA不能作为PCR扩增的模板，故需要将样本中的RNA逆转录为DNA后再进行扩增
C．若有强烈荧光信号发出，说明被检测者没有感染病毒
D．病毒的检测还可以检测病毒的蛋白类物质或病毒引发产生的抗体，其原理都是抗原—抗体杂交
13．胰岛素可用于治疗糖尿病，但胰岛素注射后易在皮下堆积，需较长时间才能进入血液，进入血液后又易被分解，因此治疗效果受到影响。下图是新的速效胰岛素的生产过程，有关叙述错误的是
A．新的胰岛素的预期功能是构建新胰岛素模型的主要依据
B．新的胰岛素生产过程中不涉及中心法则
C．若用大肠杆菌生产新的胰岛素，常用Ca2+处理大肠杆菌
D．新的胰岛素功能的发挥必须依赖于蛋白质正确的高级结构
14．海南作为中国唯一的热带岛屿省份，其种业发展在气候、资源、科技等方面均有明显优势。在海南，从常见的杂交水稻、高产玉米，到转基因抗虫棉花、耐热菊花，诸多优质新品种在这里被评议审定、种植推广。下列有关叙述错误的是
A．转基因产品需要经过一系列的安全性评价，符合相应标准后才能上市
B．我国对转基因技术的方针是研究上要大胆、推广上要慎重、管理上要严格
C．我国制定的有关法规最大程度保证了转基因技术和已上市转基因产品的安全性
D．对植物的基因改造是基因工程中研究最广泛和取得实际应用成果最多的领域
15．研究人员利用蛋白质工程将细菌纤维素酶的第137、179、194位相应氨基酸替换为赖氨酸后，纤维素酶热稳定性得到了提高。下列有关该技术的说法正确的是
A．对纤维素酶的改造需要以基因工程为基础
B．对纤维素酶的改造是通过直接改造mRNA实现的
C．改造后的纤维素酶和原纤维素酶是同一种酶
D．改造前后纤维素酶在细胞内合成过程中遗传信息的流向不同
二、选择题（本题共5小题，每小题3分，共15分。每小题有一个或多个选项符合题目要求。全部选对的得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分）
16．筛选淀粉分解菌需使用以淀粉为唯一碳源的培养基。接种培养后，若细菌能分解淀粉，培养平板经稀碘液处理，会出现以菌落为中心的透明圈（如图），实验结果见下表。有关本实验的叙述，正确的是
A．培养基除淀粉外还含有氮源等其他营养物质
B．筛选分解淀粉的细菌时，菌液应稀释后涂布
C．以上两种细菌均不能将淀粉酶分泌至细胞外
D．H/C值反映了两种细菌分解淀粉能力的差异
17．下图为单克隆抗体制备过程的示意图。下列相关叙述正确的是
A．每个脾B淋巴细胞可产生一种抗体
B．细胞融合可使用灭活病毒，灭活病毒的抗原结构依然存在
C．细胞筛选和细胞融合时所用的培养液在成分上相同
D．克隆化培养过程中杂交瘤细胞会出现接触抑制的现象
18．第三代试管婴儿技术（PGD/PGS）是对早期胚胎细胞进行基因诊断和染色体检测后再进行胚胎移植。检测包括PGD、PGS（PGD是指胚胎植入前的基因诊断，PGS是指胚胎植入前的染色体数目和结构检测）。下列叙述正确的是
A．采集的卵子需培养至MⅡ期才能与获能的精子进行受精
B．PGS和PGD技术可分别用于筛选唐氏综合征和红绿色盲
C．进行胚胎移植前需要对夫妻双方进行免疫检查
D．获得的胚胎需培养至原肠胚期才能植入子宫
19．Cre-lxP系统能实现特定基因的敲除（如图1）。把几种荧光蛋白基因和Cre酶能识别并切割的序列（lxP1和lxP2）串在一起，构建表达载体T（如图2）。部分荧光蛋白基因会被Cre酶随机“剪掉”，且两个lxP1之间或两个lxP2之间的基因，最多会被Cre酶敲除一次，剩下的部分得以表达，随机呈现不同的颜色。下列说法错误的是
A．Cre酶切下一个待敲除基因的过程，需要破坏四个磷酸二酯键
B．若小鼠细胞含一个表达载体T（不含Cre酶），其肌肉组织细胞呈红色
C．若小鼠细胞含一个表达载体T（含Cre酶），其脑组织细胞呈红色或黄色或蓝色
D．若小鼠细胞含两个表达载体T（含Cre酶），其一个细胞内可能随机出现两种颜色
20．融合PCR技术采用具有互补末端的引物，形成具有重叠链的PCR产物，通过PCR产物重叠链的延伸，从而将不同来源的任意DNA片段连接起来。其原理如图所示，据图分析正确的是
A．上述过程中使用的引物P2和P3的碱基需要完全互补配对
B．设计引物的目的是为了能够从其3'端开始连接脱氧核苷酸
C．融合PCR的第一步两条链重叠部位可互为另一条链的引物
D．若融合PCR的第二步获得128个融合基因，理论上该过程消耗了254个引物
三、非选择题：本题包括5小题，共55分
21．对生活垃圾进行分类处理，是提高垃圾的资源价值和改善生活环境的重要措施。科研小组欲分离及培养若干种微生物用于处理湿垃圾，如剩菜剩饭、骨头、菜根菜叶、果皮等食品类废物。
（1）科研小组从土壤中筛选产脂肪酶的菌株时，配制的培养基需要以__________为唯一碳源。接种微生物常用的方法是
（2）获得产脂肪酶的菌株后，在处理含油垃圾的同时，可获得单细胞蛋白，实现污染物资源化。现获得可产脂肪酶的A、B两种菌株，并进行了培养研究，结果如图1所示。据图分析，应选择菌株__________进行后续相关研究，理由__________。
（3）科研小组从土壤中筛选淀粉分解菌时，加碘液染色后，选择培养基上出现了A、B和C三种菌落（如图2所示）。若要得到淀粉酶活力最高的菌株，应选择__________菌落进一步纯化。经检测A菌落为硝化细菌，A菌落能在此培养基上生长且没有形成透明圈的原因是__________。
22．如图为科学家采用不同方法培育良种生的过程，请据图回答有关问题：
（1）与一般的繁育良种动物方式相比较，胚胎移植的优势是__________。为提高良种奶生的繁殖能力，在获取卵母细胞之前需用__________对奶生进行处理，目的是超数排卵。
（2）“转基因生D”培育过程中，常用受精卵作为外源基因的受体细胞，主要原因是__________。
（3）图中数字标号①代表的结构为__________，①将来发育为__________，c→d过程需对其均等分割的原因是__________。
（4）在培育良种生的过程中，都运用了动物细胞培养技术。在动物细胞培养过程中，需要定期更换培养液，原因是__________。
23．为降低乳腺癌治疗药物的副作用，科研人员尝试在单克隆抗体技术的基础上，构建抗体—药物偶联物（ADC），过程如图1所示。
（1）本实验中，小鼠注射的特定抗原应取自_________。
（2）步骤①常用方法包括_________融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等。其中灭活病毒诱导融合的原理是：病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与_________发生作用，使细胞互相凝聚，细胞膜上的蛋白质和脂质分子重新排布，_________，细胞发生融合。
（3）步骤②的细胞必须经过步骤③克隆化培养和_________才能筛选得到符合要求的杂交瘤细胞，符合要求的杂交瘤细胞的特点是_________。杂交瘤细胞可采用注射到小鼠腹腔内培养或进行_________培养的方式进行扩大培养。
（4）研究发现，ADC在患者体内的作用如图2所示。
①单克隆抗体除可以运载药物外，还有_________等作用。（答出2点即可）
②ADC进入乳腺癌细胞后，细胞中的溶酶体可将其水解，释放出的药物最终作用于细胞核，可导致_________。
（5）与直接使用抗肿瘤药物相比，构建抗体—药物偶联物（ADC），对人体的副作用更小，原因是_________。
24．人感染乳头瘤病毒（HPV）可诱发宫颈癌等恶性肿瘤，疫苗是预防宫颈癌的主要手段，科研人员针对HPV疫苗的研发做了如下研究。
（1）为构建重组疫苗，如图1所示，科研人员将含有HPV病毒衣壳蛋白L1基因的DNA片段用_________酶和_________酶酶切后，构建重组质粒，导入大肠杆菌。用添加_________的培养基筛选，对长出的单菌落提取质粒，利用_________技术鉴定导入的质粒是否含有L1基因。
（2）大肠杆菌表达产物衣壳蛋白L1经纯化，加佐剂SA04吸附后，二者共同被免疫系统识别加工，发挥免疫作用，吸附后制成疫苗用于预防HPV，与传统灭活疫苗相比，这样的重组疫苗更安全又有效，其主要原因是_________。
（3）为评价SA04疫苗佐剂能否提高疫苗的免疫效果，科研人员将L1及L1经SA04佐剂吸附后分别注射于小鼠体内，然后在第7、14、21、28天测定相应抗体的相对含量，结果如图2所示。
①实验结果表明_________。
②请指出本实验方案存在的缺陷并改进实验方案：_________。
25．人血清白蛋白（HSA）是由肝脏细胞合成的，具有重要的医用价值，原本只能从血清中提取，现利用基因工程的方法生产HSA。请结合相关知识回答下列问题。
（图甲为获取的含HSA基因的DNA片段及酶切位点；图乙是三种限制酶的识别序列；图丙为质粒结构示意图）
（1）科研人员利用人肝细胞中的_________构建出cDNA文库，通过该方法合成的DNA含量较少，可通过PCR进行扩增获取较多的DNA分子，根据该基因的序列（5'-CTAG-GTCGAAATTC…TCTCCAACGATCGG-3'），应选择_________作为PCR的引物。
A．引物I是5'-CTAGGTCGAAATTC-3'，引物Ⅱ是5'-CCGATCGTTGGAGA-3'
B．引物I是5'-CTAGGTCGAAATTC-3'，引物Ⅱ是5'-TCTCCAACGATCGG-3'
C．引物I是5'-GATCCAGCTTTAAG-3'，引物Ⅱ是5'-AGAGGTTGCTAGCC-3'
D．引物I是5'-GATCCAGCTTTAAG-3'，引物Ⅱ是5'-CCGATCGTTGGAGA-3'
为使HSA基因能与质粒正确连接，根据图甲、乙、丙，应选择限制酶_________切割目的基因。
（2）PCR扩增结束后需要对PCR产物进行检测，常采用电泳的方法。电泳一段时间后进行检测，若电泳带有_________条，且与DNA Marker对比，产物大小正确，表明PCR扩增成功。
（3）目的基因与质粒连接后可以导入到不同的受体细胞中进行表达。若导入到原核生物大肠杆菌中，可用CaCl2处理大肠杆菌，有利于重组质粒的导入。但由于原核细胞中缺少_________等细胞器，不能对表达产物进行加工，可能会影响蛋白质的功能。若将重组质粒导入到真核细胞，如小鼠细胞中，则可避免上述问题的产生。现利用小鼠乳腺作为生物反应器生产该蛋白，可将重组质粒通过_________法导入小鼠的_________细胞中，然后将转化的细胞进行培养，由于无法进行全体外胚胎培养，成为胚胎工程中获得转基因小鼠的唯一方法。利用_________技术检测小鼠乳腺分泌物，可以判断目的基因是否表达。
2023～2024学年度第二学期期中教学质量检测
高二生物参考答案及评分标准
2024.4
1．DCBAA 6．CACDD 11．DCBDA
16．ABD 17．AB 18．AB 19．B 20．BCD
21．（9分）（1）①脂肪（1分） ②稀释涂布平板法和平板划线法
（2）①B（1分） ②该菌株增殖速度快，单细胞蛋白产量高，且脂肪剩余比例小，降解脂肪能力强
（3）①B（1分） ②硝化细菌为自养细菌，能够利用空气中的二氧化碳合成有机物，但硝化细菌不能产生淀粉酶，所以无透明圈
22．（11分）（1）可充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力 促性腺激素（1分）
（2）受精卵的全能性易于表达
（3）内细胞团（1分） 胎儿的各种组织（1分） 有利于胚胎的恢复和进一步发育
（4）清除代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害
23．（11分）（1）人的乳腺癌细胞
（2）PEG 细胞膜上的糖蛋白细胞膜打开
（3）抗体检测 既能大量增殖，又能产生特定抗体 体外
（4）作为诊断试剂、治疗疾病 癌细胞凋亡
（5）将药物送到肿瘤部位，对肿瘤进行特异性杀伤（靶点清楚，毒副作用小）（2分）
24．（12分）（1）BamHI HindⅢ 氨苄青霉素（1分） PCR（或核酸分子杂交或核酸分子测序）（1分）
（2）衣壳蛋白L1无核酸，无侵染能力，但有抗原特性，可刺激机体产生抗体和记忆细胞
（3）①SA04疫苗佐剂能提高抗体含量从而提高疫苗免疫效果
②缺少对照组；增加单独SA04佐剂处理的对照组
25．（12分）（1）mRNA A（2分） EcRI和BamHI（2分）
（2）1（2分）
（3）内质网、高尔基体 显微注射 受精卵 胚胎移植 抗原—抗体杂交
限制酶名称
识别序列和切割位点
限制酶名称
识别序列和切割位点
BamHI
G↓GATCC
KpnI
GGTAC↓C
EcRI
C↓AATTC
Sau3AI
↓GATC
HindⅡ
GTY↓RAC
SmaI
CCC↓GGG
菌种
菌落直径：C（mm）
透明圈直径：H（mm）
H/C
细菌Ⅰ
5.1
11.2
2.2
细菌Ⅱ
8.1
13.0
1.6
高二生物试题
2024.04
注意事项：
1．本试卷分选择题和非选择题两部分。满分100分，考试时间90分钟。
2．答题前，考生务必将姓名、考生号等个人信息填写在答题卡指定位置。
3．考生作答时，请将答案答在答题卡上。选择题每小题选出答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑；非选择题请用直径0.5毫米黑色墨水签字笔在答题卡上各题的答题区域内作答。超出答题区域书写的答案无效，在试题卷、草稿纸上作答无效。
一、选择题（本题共15小题，每小题2分，共30分。每小题给出的四个选项中，只有一个选项最符合题目要求）
1．《本草纲目》中记载了酿制烧酒的过程：以糯米或粳米等蒸熟，“酿瓮中七日……人甑蒸令汽上，用器承取滴露”“凡酸坏之酒，皆可蒸烧”。下列说法正确的是
A．为使酵母菌进行酒精发酵，酿制时“瓮”应装满后密封
B．“糯米或粳米”中所含物质只能为微生物提供碳源和氮源
C．在利用酵母菌发酵的“七日”中，水和酒精是同时产生的
D．发酵过程中密封不严，醋酸菌将酒精转化为乙酸使酒“酸坏”
2．目前市场上的果蔬汁发酵产品所利用的菌种主要为乳酸菌，而利用酵母菌、醋酸菌、乳酸菌等多种益生菌混合发酵果蔬汁风味更协调、营养更丰富。下列相关叙述正确的是
A．乳酸菌、醋酸菌和酵母菌均属于原核生物
B．果蔬汁中的糖类物质可为益生菌提供碳源和氮源
C．果蔬汁发酵过程中需要防止杂菌污染
D．混合发酵是把所有益生菌混合并在相同条件下发酵
3．我国科学家从北极分离、鉴定出了一种耐冷细菌，过程如下：①接种在人造海水中，15℃条件下振荡培养3h；②梯度稀释后将样品涂布在TYS培养基中，15℃条件下培养7d；③挑取生长菌落，进行划线，15℃条件下培养；④选择不同形态的菌落进行培养、鉴定和保藏。下列叙述错误的是
A．过程①中的振荡培养可以提高培养液中的溶氧量
B．过程②中的TYS培养基灭菌前需将pH调至酸性
C．过程②③使用的接种器具均需灼烧并冷却后接种
D．涂布后再次划线培养的目的是进一步纯化所得菌种
4．用“麦汁酸化”法酿造的酸啤酒既有麦芽清香，又酸甜适口。它是通过微生物发酵将麦汁中的麦芽糖和其他糖类转化为醋酸和乳酸，再结合酒精发酵制作而成。下列说法错误的是
A．前期利用醋酸菌和乳酸菌在同一容器中同时进行醋酸和乳酸发酵
B．达到一定酸度的麦汁需经熬煮、冷却后才可接种抗酸性高的酵母菌
C．后期发酵产生酒精时，应将发酵温度控制在18～30℃范围内
D．酒精发酵时发酵罐内液面不再有气泡产生，说明发酵基本完毕
5．海洋杜氏藻是一种单细胞绿藻，具有耐盐特性；紫球藻是一种单细胞红藻，是制备重要医药原料花生四烯酸的良好材料，且对青霉素有抗性。通过植物细胞工程技术，培育出了能在高盐海水中养殖且高产花生四烯酸的杂种藻类。下列说法错误的是
A．需将杂种细胞在黑暗的条件下诱导形成愈伤组织后大量养殖
B．用聚乙二醇处理可诱导两种原生质体融合
C．用酶解法获取原生质体的过程需在等渗或略高渗溶液中进行
D．在高盐培养基中添加青霉素可选择出所需的杂种细胞
6．紫罗兰和油菜均为二倍体植物，紫罗兰具有改变油菜花色，提高油菜抗虫性，改善油菜品质等优良基因资源。实验小组利用紫罗兰和油菜通过体细胞杂交技术培育新品种，如图表示不同浓度的PEG作用下原生质体两两融合和多（三个或三个以上）原生质体融合的比率。下列说法中错误的是
A．图中诱导原生质体两两融合的最佳PEG浓度为40%左右
B．两两融合的细胞有三种类型，均含有四个染色体组
C．不同原生质体细胞膜完全融合是植物杂种细胞形成的标志
D．植物体细胞杂交技术的突出优点是可克服远缘杂交不亲和的障碍
7．目前精子载体法逐渐成为最具诱惑力的制备转基因动物方法之一，该方法以精子作为外源基因的载体，使精子携带外源基因进入卵细胞受精。下图表示利用该方法制备转基因鼠的基本流程。下列说法错误的是
A．①过程需将成熟的精子放入ATP溶液中进行获能处理
B．将外源基因整合到精子的染色体上，可保证外源基因稳定遗传
C．②采用体外受精技术，受精完成的标志是雌雄原核融合
D．精子载体法与显微注射法相比，对受精卵中核的影响更小
8．某研究小组为测定药物对体外培养细胞毒性的大小，准备对某种动物的肝肿瘤细胞（甲）和正常肝细胞（乙）进行动物细胞培养。下列说法正确的是
A．制备肝细胞悬液时，可用胃蛋白酶代替胰蛋白酶处理肝组织
B．CO2培养箱中CO2浓度维持在5%左右，以促进细胞呼吸
C．本实验应设置对照实验，以检测药物对甲、乙的毒性大小
D．为防止细胞培养过程中细菌的污染，需要对培养液和所有培养用具进行消毒处理以及在无菌环境下进行操作
9．体外受精和胚胎移植都是在医学和农牧业生产中应用较多的胚胎工程技术。下列有关说法正确的是
A．采集的卵母细胞和精子可以直接置于培养液中共同培养以完成受精
B．胚胎移植前，需要选取遗传性状优良、生产能力强的母牛作为受体
C．胚胎移植前，需对供体和受体进行免疫检查，避免发生免疫排斥反应
D．胚胎分割移植以后，经受体孕育的多个后代的遗传性状相同
10．我国科学家最新研究发现，当卵细胞与精子融合后，卵细胞会特异性表达和分泌BF1和BF2这两种蛋白质，这两种蛋白质能避免受精卵再度与精子融合。下列叙述正确的是
A．精子与卵细胞的识别和融合，与细胞膜的选择透过性有关
B．受精过程中，精子和卵细胞的随机结合会导致基因重组
C．多精入卵会导致产生双胞胎甚至多胞胎
D．BF1和BF2有利于维持受精卵中染色体数目的稳定
11．下表为常用的限制性内切核酸酶（限制酶）及其识别序列和切割位点，由此推断以下说法中错误的是
注：Y为C或T，R为A或G。
A．HindⅡ、SmaI两种限制酶切割后形成平末端
B．Sau3AI限制酶的切割位点在识别序列的外部
C．BamHI和Sau3AI两种限制酶切割后形成相同的黏性末端
D．一种限制酶一定只能识别一种核苷酸序列
12．实时荧光RT—PCR可用于RNA病毒的核酸检测，其原理是：在PCR复性过程中探针和引物一起与模板结合，探针两侧分别带有荧光基团和抑制荧光发出的淬灭基团，新链延伸过程中，DNA聚合酶会破坏探针，导致荧光基团与淬灭基团分离而发出荧光。利用RT=PCR进行核酸检测的相关过程如图所示。下列说法错误的是
A．做RT—PCR之前，需要先根据cDNA的核苷酸序列合成引物和探针
B．RNA不能作为PCR扩增的模板，故需要将样本中的RNA逆转录为DNA后再进行扩增
C．若有强烈荧光信号发出，说明被检测者没有感染病毒
D．病毒的检测还可以检测病毒的蛋白类物质或病毒引发产生的抗体，其原理都是抗原—抗体杂交
13．胰岛素可用于治疗糖尿病，但胰岛素注射后易在皮下堆积，需较长时间才能进入血液，进入血液后又易被分解，因此治疗效果受到影响。下图是新的速效胰岛素的生产过程，有关叙述错误的是
A．新的胰岛素的预期功能是构建新胰岛素模型的主要依据
B．新的胰岛素生产过程中不涉及中心法则
C．若用大肠杆菌生产新的胰岛素，常用Ca2+处理大肠杆菌
D．新的胰岛素功能的发挥必须依赖于蛋白质正确的高级结构
14．海南作为中国唯一的热带岛屿省份，其种业发展在气候、资源、科技等方面均有明显优势。在海南，从常见的杂交水稻、高产玉米，到转基因抗虫棉花、耐热菊花，诸多优质新品种在这里被评议审定、种植推广。下列有关叙述错误的是
A．转基因产品需要经过一系列的安全性评价，符合相应标准后才能上市
B．我国对转基因技术的方针是研究上要大胆、推广上要慎重、管理上要严格
C．我国制定的有关法规最大程度保证了转基因技术和已上市转基因产品的安全性
D．对植物的基因改造是基因工程中研究最广泛和取得实际应用成果最多的领域
15．研究人员利用蛋白质工程将细菌纤维素酶的第137、179、194位相应氨基酸替换为赖氨酸后，纤维素酶热稳定性得到了提高。下列有关该技术的说法正确的是
A．对纤维素酶的改造需要以基因工程为基础
B．对纤维素酶的改造是通过直接改造mRNA实现的
C．改造后的纤维素酶和原纤维素酶是同一种酶
D．改造前后纤维素酶在细胞内合成过程中遗传信息的流向不同
二、选择题（本题共5小题，每小题3分，共15分。每小题有一个或多个选项符合题目要求。全部选对的得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分）
16．筛选淀粉分解菌需使用以淀粉为唯一碳源的培养基。接种培养后，若细菌能分解淀粉，培养平板经稀碘液处理，会出现以菌落为中心的透明圈（如图），实验结果见下表。有关本实验的叙述，正确的是
A．培养基除淀粉外还含有氮源等其他营养物质
B．筛选分解淀粉的细菌时，菌液应稀释后涂布
C．以上两种细菌均不能将淀粉酶分泌至细胞外
D．H/C值反映了两种细菌分解淀粉能力的差异
17．下图为单克隆抗体制备过程的示意图。下列相关叙述正确的是
A．每个脾B淋巴细胞可产生一种抗体
B．细胞融合可使用灭活病毒，灭活病毒的抗原结构依然存在
C．细胞筛选和细胞融合时所用的培养液在成分上相同
D．克隆化培养过程中杂交瘤细胞会出现接触抑制的现象
18．第三代试管婴儿技术（PGD/PGS）是对早期胚胎细胞进行基因诊断和染色体检测后再进行胚胎移植。检测包括PGD、PGS（PGD是指胚胎植入前的基因诊断，PGS是指胚胎植入前的染色体数目和结构检测）。下列叙述正确的是
A．采集的卵子需培养至MⅡ期才能与获能的精子进行受精
B．PGS和PGD技术可分别用于筛选唐氏综合征和红绿色盲
C．进行胚胎移植前需要对夫妻双方进行免疫检查
D．获得的胚胎需培养至原肠胚期才能植入子宫
19．Cre-lxP系统能实现特定基因的敲除（如图1）。把几种荧光蛋白基因和Cre酶能识别并切割的序列（lxP1和lxP2）串在一起，构建表达载体T（如图2）。部分荧光蛋白基因会被Cre酶随机“剪掉”，且两个lxP1之间或两个lxP2之间的基因，最多会被Cre酶敲除一次，剩下的部分得以表达，随机呈现不同的颜色。下列说法错误的是
A．Cre酶切下一个待敲除基因的过程，需要破坏四个磷酸二酯键
B．若小鼠细胞含一个表达载体T（不含Cre酶），其肌肉组织细胞呈红色
C．若小鼠细胞含一个表达载体T（含Cre酶），其脑组织细胞呈红色或黄色或蓝色
D．若小鼠细胞含两个表达载体T（含Cre酶），其一个细胞内可能随机出现两种颜色
20．融合PCR技术采用具有互补末端的引物，形成具有重叠链的PCR产物，通过PCR产物重叠链的延伸，从而将不同来源的任意DNA片段连接起来。其原理如图所示，据图分析正确的是
A．上述过程中使用的引物P2和P3的碱基需要完全互补配对
B．设计引物的目的是为了能够从其3'端开始连接脱氧核苷酸
C．融合PCR的第一步两条链重叠部位可互为另一条链的引物
D．若融合PCR的第二步获得128个融合基因，理论上该过程消耗了254个引物
三、非选择题：本题包括5小题，共55分
21．对生活垃圾进行分类处理，是提高垃圾的资源价值和改善生活环境的重要措施。科研小组欲分离及培养若干种微生物用于处理湿垃圾，如剩菜剩饭、骨头、菜根菜叶、果皮等食品类废物。
（1）科研小组从土壤中筛选产脂肪酶的菌株时，配制的培养基需要以__________为唯一碳源。接种微生物常用的方法是
（2）获得产脂肪酶的菌株后，在处理含油垃圾的同时，可获得单细胞蛋白，实现污染物资源化。现获得可产脂肪酶的A、B两种菌株，并进行了培养研究，结果如图1所示。据图分析，应选择菌株__________进行后续相关研究，理由__________。
（3）科研小组从土壤中筛选淀粉分解菌时，加碘液染色后，选择培养基上出现了A、B和C三种菌落（如图2所示）。若要得到淀粉酶活力最高的菌株，应选择__________菌落进一步纯化。经检测A菌落为硝化细菌，A菌落能在此培养基上生长且没有形成透明圈的原因是__________。
22．如图为科学家采用不同方法培育良种生的过程，请据图回答有关问题：
（1）与一般的繁育良种动物方式相比较，胚胎移植的优势是__________。为提高良种奶生的繁殖能力，在获取卵母细胞之前需用__________对奶生进行处理，目的是超数排卵。
（2）“转基因生D”培育过程中，常用受精卵作为外源基因的受体细胞，主要原因是__________。
（3）图中数字标号①代表的结构为__________，①将来发育为__________，c→d过程需对其均等分割的原因是__________。
（4）在培育良种生的过程中，都运用了动物细胞培养技术。在动物细胞培养过程中，需要定期更换培养液，原因是__________。
23．为降低乳腺癌治疗药物的副作用，科研人员尝试在单克隆抗体技术的基础上，构建抗体—药物偶联物（ADC），过程如图1所示。
（1）本实验中，小鼠注射的特定抗原应取自_________。
（2）步骤①常用方法包括_________融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等。其中灭活病毒诱导融合的原理是：病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与_________发生作用，使细胞互相凝聚，细胞膜上的蛋白质和脂质分子重新排布，_________，细胞发生融合。
（3）步骤②的细胞必须经过步骤③克隆化培养和_________才能筛选得到符合要求的杂交瘤细胞，符合要求的杂交瘤细胞的特点是_________。杂交瘤细胞可采用注射到小鼠腹腔内培养或进行_________培养的方式进行扩大培养。
（4）研究发现，ADC在患者体内的作用如图2所示。
①单克隆抗体除可以运载药物外，还有_________等作用。（答出2点即可）
②ADC进入乳腺癌细胞后，细胞中的溶酶体可将其水解，释放出的药物最终作用于细胞核，可导致_________。
（5）与直接使用抗肿瘤药物相比，构建抗体—药物偶联物（ADC），对人体的副作用更小，原因是_________。
24．人感染乳头瘤病毒（HPV）可诱发宫颈癌等恶性肿瘤，疫苗是预防宫颈癌的主要手段，科研人员针对HPV疫苗的研发做了如下研究。
（1）为构建重组疫苗，如图1所示，科研人员将含有HPV病毒衣壳蛋白L1基因的DNA片段用_________酶和_________酶酶切后，构建重组质粒，导入大肠杆菌。用添加_________的培养基筛选，对长出的单菌落提取质粒，利用_________技术鉴定导入的质粒是否含有L1基因。
（2）大肠杆菌表达产物衣壳蛋白L1经纯化，加佐剂SA04吸附后，二者共同被免疫系统识别加工，发挥免疫作用，吸附后制成疫苗用于预防HPV，与传统灭活疫苗相比，这样的重组疫苗更安全又有效，其主要原因是_________。
（3）为评价SA04疫苗佐剂能否提高疫苗的免疫效果，科研人员将L1及L1经SA04佐剂吸附后分别注射于小鼠体内，然后在第7、14、21、28天测定相应抗体的相对含量，结果如图2所示。
①实验结果表明_________。
②请指出本实验方案存在的缺陷并改进实验方案：_________。
25．人血清白蛋白（HSA）是由肝脏细胞合成的，具有重要的医用价值，原本只能从血清中提取，现利用基因工程的方法生产HSA。请结合相关知识回答下列问题。
（图甲为获取的含HSA基因的DNA片段及酶切位点；图乙是三种限制酶的识别序列；图丙为质粒结构示意图）
（1）科研人员利用人肝细胞中的_________构建出cDNA文库，通过该方法合成的DNA含量较少，可通过PCR进行扩增获取较多的DNA分子，根据该基因的序列（5'-CTAG-GTCGAAATTC…TCTCCAACGATCGG-3'），应选择_________作为PCR的引物。
A．引物I是5'-CTAGGTCGAAATTC-3'，引物Ⅱ是5'-CCGATCGTTGGAGA-3'
B．引物I是5'-CTAGGTCGAAATTC-3'，引物Ⅱ是5'-TCTCCAACGATCGG-3'
C．引物I是5'-GATCCAGCTTTAAG-3'，引物Ⅱ是5'-AGAGGTTGCTAGCC-3'
D．引物I是5'-GATCCAGCTTTAAG-3'，引物Ⅱ是5'-CCGATCGTTGGAGA-3'
为使HSA基因能与质粒正确连接，根据图甲、乙、丙，应选择限制酶_________切割目的基因。
（2）PCR扩增结束后需要对PCR产物进行检测，常采用电泳的方法。电泳一段时间后进行检测，若电泳带有_________条，且与DNA Marker对比，产物大小正确，表明PCR扩增成功。
（3）目的基因与质粒连接后可以导入到不同的受体细胞中进行表达。若导入到原核生物大肠杆菌中，可用CaCl2处理大肠杆菌，有利于重组质粒的导入。但由于原核细胞中缺少_________等细胞器，不能对表达产物进行加工，可能会影响蛋白质的功能。若将重组质粒导入到真核细胞，如小鼠细胞中，则可避免上述问题的产生。现利用小鼠乳腺作为生物反应器生产该蛋白，可将重组质粒通过_________法导入小鼠的_________细胞中，然后将转化的细胞进行培养，由于无法进行全体外胚胎培养，成为胚胎工程中获得转基因小鼠的唯一方法。利用_________技术检测小鼠乳腺分泌物，可以判断目的基因是否表达。
2023～2024学年度第二学期期中教学质量检测
高二生物参考答案及评分标准
2024.4
1．DCBAA 6．CACDD 11．DCBDA
16．ABD 17．AB 18．AB 19．B 20．BCD
21．（9分）（1）①脂肪（1分） ②稀释涂布平板法和平板划线法
（2）①B（1分） ②该菌株增殖速度快，单细胞蛋白产量高，且脂肪剩余比例小，降解脂肪能力强
（3）①B（1分） ②硝化细菌为自养细菌，能够利用空气中的二氧化碳合成有机物，但硝化细菌不能产生淀粉酶，所以无透明圈
22．（11分）（1）可充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力 促性腺激素（1分）
（2）受精卵的全能性易于表达
（3）内细胞团（1分） 胎儿的各种组织（1分） 有利于胚胎的恢复和进一步发育
（4）清除代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害
23．（11分）（1）人的乳腺癌细胞
（2）PEG 细胞膜上的糖蛋白细胞膜打开
（3）抗体检测 既能大量增殖，又能产生特定抗体 体外
（4）作为诊断试剂、治疗疾病 癌细胞凋亡
（5）将药物送到肿瘤部位，对肿瘤进行特异性杀伤（靶点清楚，毒副作用小）（2分）
24．（12分）（1）BamHI HindⅢ 氨苄青霉素（1分） PCR（或核酸分子杂交或核酸分子测序）（1分）
（2）衣壳蛋白L1无核酸，无侵染能力，但有抗原特性，可刺激机体产生抗体和记忆细胞
（3）①SA04疫苗佐剂能提高抗体含量从而提高疫苗免疫效果
②缺少对照组；增加单独SA04佐剂处理的对照组
25．（12分）（1）mRNA A（2分） EcRI和BamHI（2分）
（2）1（2分）
（3）内质网、高尔基体 显微注射 受精卵 胚胎移植 抗原—抗体杂交
限制酶名称
识别序列和切割位点
限制酶名称
识别序列和切割位点
BamHI
G↓GATCC
KpnI
GGTAC↓C
EcRI
C↓AATTC
Sau3AI
↓GATC
HindⅡ
GTY↓RAC
SmaI
CCC↓GGG
菌种
菌落直径：C（mm）
透明圈直径：H（mm）
H/C
细菌Ⅰ
5.1
11.2
2.2
细菌Ⅱ
8.1
13.0
1.6
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