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江苏省泰州市靖江市靖江高级中学2023-2024学年高二下学期4月期中生物试题(无答案)
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这是一份江苏省泰州市靖江市靖江高级中学2023-2024学年高二下学期4月期中生物试题(无答案)，共11页。试卷主要包含了单选题，多项选择题，非选择题等内容，欢迎下载使用。
（考试时间：75分钟；总分：100分）
一、单选题：本题包括14小题，每小题2分，共28分。每小题只有一个选项最符合题意。
1.下列有关细胞中化合物的叙述，正确的是
A.ATP、DNA和NADPH的组成元素相同
B.食物中的Na2CO3进入血液可作为调节血浆pH平衡的缓冲物质
C.构成血红蛋白的某些氨基酸中含有S、Fe等元素
D.煮熟牛肉中的蛋白质，不能与双缩脲试剂发生反应
2.细胞的结构与功能是相适应的。下列叙述错误的是
A.巨噬细胞中含有较多的溶酶体，有利于消化分解侵入的病毒和细菌
B.线粒体内膜凹陷折叠形成嵴，增大膜面积，有利于葡萄糖分解酶的附着
C.叶绿体在细胞内的流动受光照强度的影响，在弱光下会汇集到细胞项面
D.细胞内的生物膜把细胞区室化，保证了生命活动高效有序地进行
3.细胞内的钙稳态是靠Ca2+的跨膜运输来调节的，植物细胞的Ca2+运输系统如图所示，①~⑤表示相关的转运蛋白。下列说法错误的是
A.ATP水解释放的磷酸基团可以使①和④磷酸化，进而导致其空间结构发生变化
B.抑制呼吸作用会影响③转运Ca2+的速率
C.③转运H+的机制和②⑤转运Ca2+的机制类似，都不需要与其转运的离子结合
D.①③④介导的转运过程保证了细胞质基质中低Ca2+水平
4.下列关于酶的叙述，正确的是
A.含有二硫键的酶分子，其二硫键形成早于肽键
B.同一细胞在幼嫩时期和衰老时期所含酶的种类相同
C.在人体成熟红细胞中，与呼吸酶合成有关的基因始终处于活动状态
D.细胞分裂间期DNA聚合酶和RNA聚合酶都参与了活化能的降低
5.蛋白激酶A（PKA）由两个调节亚基和两个催化亚基组成，其活性受cAMP（腺苷酸环化酶催化ATP环化形成）调节（如下图）。活化的PKA催化亚基能将ATP上的磷酸基团转移到特定蛋白质的丝氨酸或苏氨酸残基上进行磷酸化，改变这些蛋白的活性。下列有关说法正确的是
A.只有催化亚基和调节亚基同时存在时，PKA才能保持较高的活性
B.蛋白质的丝氨酸或苏氨酸残基上进行磷酸化的过程伴随着ATP的合成
C.ATP不仅是生物的直接供能物质，还是合成cAMP、DNA等物质的原料
D.CAMP与调节亚基结合，使调节亚基和催化亚基分离，释放出高活性的催化亚基
6.下表中的“方法与结果”和“结论或观点”能匹配的是
7.下列有关酵母菌的纯培养的叙述正确的是
A.培养基和培养皿分别必须进行高压蒸汽灭菌和干热灭菌
B.纯培养要配制牛肉膏蛋白胨培养基，在容量瓶中用蒸馏水定容
C.平板划线完成，待培养基吸收菌液后，与空白平板一起倒置培养
D.自然界中的酵母菌对人类无害，其培养基使用后无需灭菌处理
8.芽孢杆菌耐高温，是常见的蛋白酶生产菌。培养基中的蛋白质可被蛋白酶降解后在菌落周围形成透明圈。如图是筛选蛋白酶高产菌株的过程，下列叙述错误的是
A.70~80℃水浴10min的目的是杀死非芽孢杆菌
B.在酒精灯火焰旁将样品用无菌水稀释并涂布接种
C.以奶粉为唯一氮源的培养基能起到选择作用
D.通过透明圈大小可筛选出蛋白酶高产菌株
9.发酵广泛应用于农业、食品工业、医药工业等工业生产。下列叙述正确的是
A.菌落的大小、有无荚膜、隆起程度等肉眼可见的特征都可作为菌种鉴定的依据
B.筛选出高产柠檬酸的黑曲霉菌种后可直接接种到发酵罐中进行发酵生产
C.单细胞蛋白是从微生物细胞中提取的蛋白质，常用作微生物饲料等
D.在生产酸奶时采用巴氏消毒法，杀死大部分微生物但基本不破坏营养成分
10.下图为啤酒生产过程的简要流程。下列叙述正确的是
A.利用大麦作原料时，淀粉是酵母菌的主要碳源
B.过程②破碎有利于淀粉与α-淀粉酶充分接触，缩短糖化过程的时间
C.过程③的主发酵阶段要始终保持无氧环境，以便完成酒精的生成
D.“精酿”啤酒不进行过滤和消毒，故发酵过程不需要在无菌条件下进行
11.DHA俗称脑黄金，是神经系统细胞生长及维持的一种主要成分，是构成大脑和视网膜的重要脂肪酸。某科研团队以富含DHA的自养微藻绿色巴夫藻和生长迅速的异养微藻四鞭藻两种二倍体单细胞藻类为材料，通过植物体细胞杂交技术成功培育出了生长迅速且DHA含量高的单细胞藻（X藻）。下列说法正确的是
A.植物体细胞杂交成功的标志是细胞核的融合
B.X藻是绿色巴夫藻和四鞭藻通过体细胞杂交获得的二倍体藻
C.培育X过程中还可能获得四倍体绿色巴夫藻和四倍体四鞭藻
D.培育的X藻具备两亲本所有的优良性状
12.中药藿香长期种植会出现种质退化、易感染病虫害等问题。为解决这些问题，研究者对组织培养过程中不同阶段的藿香进行了辐射处理（如下图），以期获得性状优良的突变株。下列叙述正确的是
A.组织培养过程中细胞分裂旺盛，辐射处理易发生定向突变
B.过程①中外植体通常用无水乙醇和次氯酸钠溶液进行消毒
C.过程③④所用的培养基中添加的植物激素的浓度和比例相同
D.筛选出目标突变株后可利用植物细胞培养技术生产药用成分
13.野生动物郊狼的物种濒临灭绝，科研人员利用种间体细胞核移植技术（iSCNT）培育小郊狼的流程如下图。下列叙述正确的是
A.图中①是第二极体，②是透明带
B.iSCNT技术比胚胎细胞核移植技术难度要大
C.郊狼的耳廓组织培养时一般需提供营养和酸性环境
D.结构③通常需要激活，使其完成减数分裂和发育进程
14.黑藻是一种叶片薄且叶绿体较大的水生植物，分布广泛、易于取材，可用作生物学实验材料。下列说法正确的是
A.黑藻是一种单细胞藻类，制作临时装片时不需切片
B.进行细胞吸水和失水实验时，吸水纸的作用是引流
C.质壁分离过程中，黑藻细胞的液泡绿色会逐渐加深
D.观察细胞质流动时，可进行叶绿体的形态观察和计数
二、多项选择题：本题包括4小题，每小题3分，共12分。全部选对的得3分，选对但不全的得1分，错选或不答的得0分。
15.鱼宰杀后鱼肉中的腺苷三磷酸降解生成肌苷酸，能极大地提升鱼肉鲜味。肌苷酸在酸性磷酸酶（ACP）作用下降解又导致鱼肉鲜味下降。探究鱼类鲜味下降的有关实验结果如下图所示。.下列叙述错误的是
0.24+草鱼
A.本实验的自变量只有pH和温度，因变量是ACP的相对活性
B.不同鱼的ACP的最适温度和pH有差异，直接原因是不同鱼体内的ACP结构不同
C.pH低于3.8、温度超过60℃，对鳝鱼ACP活性影响的机理不同
D.由图可知，将鯝鱼放置在pH5.8、温度40℃条件下，可保持鱼肉鲜味
16.科研人员用分离纯化的核糖体在无细胞体系中用编码免疫球蛋白（IgG）轻链的mRNA指导合成多肽，发现合成的多肽比分泌到细胞外的成熟的免疫球蛋白在N端有一段多出的肽链片段（P）。若添加粗面内质网，翻译的产物长度与活细胞分泌的肽链相同，且不含肽链P片段。据此分析，下列叙述正确的是
A.细胞内IgG轻链的合成起始于附着型核糖体
B.细胞内合成IgG过程中肽链P在粗面内质网内被剪切
C.肽链P可能参与IgG肽链进入粗面内质网
D.若P肽段功能缺失，则蛋白IgG将无法分泌到细胞外
17.以下为现代生物技术与工程操作常涉及的流程，下列说法正确的是
A.若为植物体细胞杂交过程，可用离心技术处理①和②后获得融合的原生质体
B.若为试管牛生产流程，体外受精时，卵母细胞①和精子②要分别进行成熟培养和获能处理
C.若为动物细胞核移植过程，将供体细胞①注入卵母细胞②，两细胞融合后形成重构胚
D.若为动物细胞融合过程，形成的③需置于95%的氧气和5%的CO2混合气体中培养
18.干扰素是由淋巴细胞产生的一种细胞因子，在临床上常用于治疗病毒感染性疾病，科研人员通过构建基因工程菌来生产干扰素。下图为构建工程菌的流程图，图中质粒A上m、n分别是启动子和终止子，目的基因的b链为模板链。下列叙述错误的是
A.②过程需在b链5'端加接NcI的识别序列
B.①过程需要逆转录酶，RNA可从淋巴细胞中获得
C.③过程在酶的催化下形成氢键
D.④过程常用方法为Ca2+处理法
三、非选择题（本题共5小题）
19.（13分）血浆中胆固醇含量过高是导致动脉粥样硬化和冠状动脉疾病的一种重要原因。胆固醇主要在肝细胞中合成，在血液中通过与磷脂和蛋白质结合形成低密度脂蛋白（LDL）颗粒形式运输到其他组织细胞（靶细胞）中，以满足这些细胞对胆固醇的需要，同时降低血浆中胆固醇含量。下图是LDL通过受体介导的胞吞作用进入细胞的途径。
（1）胆固醇除参与构成动物细胞膜的重要成分，还参与____________。LDL能够将包裹的胆固醇准确转运至靶细胞中，与其结构中的____________与靶细胞膜上的LDL受体结合直接相关。
（2）与细胞质膜相比，LDL膜结构的不同点主要是____________。LDL通过途径①____________方式进入靶细胞，形成网格蛋白包被的囊泡，经过脱包被作用后与胞内体（膜包裹的囊泡结构）融合。含有LDL的胞内体可通过途径③被转运到____________中，被其中的水解酶降解，胆固醇被释放进入细胞质基质。由图可知，细胞质膜表面LDL受体的来源有____________（2分）。
（3）由图1可知，当细胞中的胆固醇含量过高时，会通过____________（2分），并且可促进胆固醇酯的储存，从而使游离胆固醇的含量维持在正常水平。
（4）随着生活水平的提高，因糖、脂过量摄入导致的肥胖、非酒精性脂肪肝炎（NASH）等代谢性疾病高发。非酒精性脂肪性肝炎患者血液中甘油三酯和胆固醇偏高。为探究药剂Exendin-4在脂质代谢中的作用，科研人员设计以下实验：
①将非酒精性脂肪性肝炎模型小鼠均分为甲、乙、丙三组。
②甲组给予正常饮食作为对照；乙、丙两组均给予高脂饮食，乙组腹腔注射适量生理盐水，丙组腹腔注射_________________。.
③注射一周后检测三组小鼠血液中的甘油三酯和胆固醇含量，结果如右图。根据实验结果可判断，Exendin-4对非酒精性脂肪性肝炎小鼠血脂的作用效果是：____________（2分）。为了更好的研究Exerdin-4使用效果，还需要进一步确定该药物的使用量，应增设的实验操作是：___________，分别注入小鼠腹腔，一段时间后检测小鼠血液中的甘油三酯和胆固醇含量
20.（12分）土壤中的磷主要以难溶性无机磷酸盐形式存在，很难被植物吸收利用。已知解磷细菌可以溶解难溶性无机磷酸盐，提高土壤的肥力。请分析回答：
（1）培养基的配制：加热溶化时，边加热边搅拌的目的是防止_________；溶化后的培养基通常用______________（试剂）调节pH、采用____________进行灭菌。
（2）解磷细菌的分离：
（3）步骤二也可采用___________法进行分离纯化，但在分离纯化某稀有的高效突变菌株时，科研工作者一般很少使该方法，可能的原因是______________（2分）。
（4）步骤三也可采用系列稀释、接种、培养来统计菌落数，若对某批次发酵液的统计过程及结果如图，则该批次发酵液中活菌数理论值为_____________个/mL，但实际高于此值，原因是____________。
21.（12分）不对称体细胞杂交是指利用射线破坏供体细胞的染色质，与未经射线照射的受体细胞融合，所得融合细胞含受体全部遗传物质及供体部分遗传物质。红豆杉的次生产物紫杉醇是一种高效抗癌药物，但由于红豆杉野生资源匮乏，且红豆杉植株紫杉醇含量极低，导致了紫杉醇的供应严重不足。因此，研究人员尝试运用不对称体细胞杂交将红豆杉（2n=24）与柴胡（2n=12）进行了融合，培育能产生紫杉醇的柴胡，过程如下图。请回答下列问题。
注：X射线处理能随机破坏染色体结构，使其发生断裂、易位、染色体消除等，使细胞不再持续分裂；碘乙酰胺处理使细胞质中的某些酶失活，抑制细胞分裂。
（1）过程①中需将植物组织经____________后接种于MS培养基上诱导___________过程，产生愈伤组织。
（2）过程②中将愈伤组织加入______________酶液去壁，离心后弃去上清液，加入洗液多次洗涤后获得原生质体。多次洗涤的目的是____________。对红豆杉和柴胡原生质体进行的A、B处理分别为_____________。
（3）采用二乙酸荧光素（FDA）法可测定原生质体活力。已知FDA本身无荧光，当其进入细胞后可被酯酶分解为无毒、具有荧光的物质，该荧光物质不能透过活细胞质膜，会留在细胞内发出荧光。据此应选择______________的原生质体用于融合。
（4）过程③常用的化学试剂是_________，经诱导融合后，只有异源融合的原生质体可持续分裂形成再生细胞团，原因是______________。
（5）科研人员对获得的部分植株细胞进行染色体观察、计数和DNA分子标记鉴定，结果如下：
由表可知，后代植株中_____________类型一定不是所需植株。科研人员推测杂种植株的染色体主要来源亲本_______________的染色体，另一方亲本的遗传物质可能不是以染色体的形式存在于杂种植株细胞中，而是以DNA片段的方式整合进柴胡的基因组，作出以上推测的依据是________________（2分）。
22.（12分）供体细胞的分化状态和表观遗传修饰模式是影响体细胞核移植胚胎发育的重要因素。为研究供体细胞RNAm6A修饰（即RNA某位点的甲基化）水平对猪核移植胚胎发育的影响，研究者进行系列实验。
（1）核移植的受体是_________________细胞，核移植后的重构胚发育至______________阶段可利用_____________技术转移到代孕母体子宫内以获得子代个体，从早期胚胎中分离获得的具有自我更新和分化潜能的______________可用于医学研究。
（2）RNAm6A修饰可通过提高mRNA结构稳定性来影响早期胚胎发育。猪骨髓间充质干细胞（甲组）属于多能干细胞，猪胎儿成纤维细胞（乙组）则是处于分化终端的体细胞。研究者比较了两细胞内RNAm6A修饰水平及其作为核供体时重构胚的发育效率，结果如图1、2。
结果表明，核供体细胞的分化程度越高，_______________（2分）。
（3）研究发现甲组细胞内甲基转移酶M（催化RNAm6A修饰）的表达水平高于乙组，为验证RNAm6A修饰水平与核移植胚胎发育能力的关系，研究者进行如下实验：
导入空载体是为了排除________等对实验结果的干扰。结果表明，___________可提高核移植胚胎的发育能力。
（4）为研究导致不同供体细胞RNAm6A修饰水平差异的原因，研究者分析了M基因启动子的甲基化水平，发现骨髓间充质干细胞中M基因启动子的甲基化水平为22%，而猪胎儿成纤维细胞则为50%。据此设计实验：实验组用DNA甲基化抑制剂处理骨髓间充质干细胞，对照组不处理，检测两组的M基因启动子甲基化水平。
请修正实验方案：_____________（2分）。
（5）研究表明，RNAm6A修饰水平高的供体细胞核移植胚胎中DNA损伤位点较少。请推测猪骨髓间充质干细胞核移植胚胎发育的能力较高的原因：_________（2分）。
23.（11分）利用基因工程手段构建重金属富集植物是修复土壤重金属污染的重要方向之一。景天科植物伴矿景天是一种镉富集生物，研究人员将伴矿景天的SpHMA2基因（简称S基因）转入油菜，获得了镉富集转基因油菜。以下是主要实验步骤：
I.取伴矿景天的叶，提取总RNA，进一步获取DNA：
II.利用第I步获得的DNA，经PCR扩增S基因：
II.利用凝胶电泳对扩增片段进行鉴定，得到了图1所示的结果（1号泳道为样品，2号泳道为阴性对照，M为已知长度的标准DNA分子；左侧数字为标准DNA分子的碱基数，单位bp），回收S基因；
IV.S基因与pCAMBIA1301质粒（简称pC质粒）重组，转入大肠杆菌，培养后提取重组质粒；
V.用电击法将第IV步提取的重组质粒转入农杆菌，培养；
VI.将第V步培养获得的农杆菌与野生型油菜外植体共培养，利用共培养后的油菜外植体获得转基因油菜植株。
（1）I~VI中，获取目的基因的步骤有_______________。
（2）第II步中，PCR参数设置为：.
其中，60℃20s环节发生______________；72℃1min环节发生___________。（编号选填）
①双链DNA变性形成单链
②引物与单链DNA结合
③DNA解旋酶打开氢键
④DNA聚合酶催化合成DNA子链
⑤RNA聚合酶催化形成磷酸二酯键
（3）已知S基因的序列为 OH，则步骤II中PCR扩增仪中加入的一对引物的碱基序列是（5'→3'，只显示前6个碱基）_____________
A.ATGGCCB.GATGAGC.CTACTCD.TACCGG
（4）由于DNA分子片段带负电荷，所以电泳开始前应将_______________（正/负）电极插在凝胶板上靠近DNA样品的一端。根据图1所示电泳结果，S基因长约_______________bp.
（5）第IV步中，科研人员用一种限制性内切核酸酶A处理S基因，使用另一种限制性内切核酸酶B处理pC质粒。由此可以推测酶A和酶B_______________。（编号选填）
①识别序列相同，产物的黏性末端相同
②识别序列不同，产物的黏性末端相同
③识别序列相同，产物的黏性末端不同。
④识别序列不同，产物的黏性末端不同
（6）pC质粒上有Kar和Hyg两个抗生素抗性基因，I~VI中，需要考虑这两个抗性基因进行筛选才能达到预期目的的步骤有______________（2分）。
（7）为检测转基因油菜的镉富集能力，将野生型油菜（WT）和三个株系的转基因油菜（S1、S2、S3）种植于含200μM氯化镉的培养液中，10天后分别测定各油菜的镉含量，得到了图2所示的结果（*表示存在显著性差异），该结果说明_____________（2分）。
方法与结果
结论或观点
A
罗伯特森在电镜下看到了细胞膜清晰的暗—亮—暗三层结构
细胞膜由脂质—蛋白质—脂质三层结构构成
B
待测样液与斐林试剂50~65℃水浴加热后出现砖红色沉淀
待测样液中含有葡萄糖
C
黑色美西螈胚胎细胞的细胞核移植到白色美西螈去核卵细胞中，发育长大的美西螈全部是黑色
移植后长大的美西螈遗传物质全部来自黑色美西螈
D
毕希纳通过研磨酵母菌获得提取液，发现提取液也能引起发酵现象
引起发酵的是酵母菌所含的酿酶
操作步骤
简要操作过程
操作目的
步骤一
称取土样，在富含难溶性无机磷酸盐的细菌液体培养液中培养4天。
①______________。
步骤二
将一定量的①菌液用移液器滴加到以难溶性无机磷酸盐为唯一磷源的固体平板培养基，用②_____________法接种培养。
③分离获得______________。
步骤三
将③的菌发酵培养。
扩大培养。
发酵过程中对发酵液进行抽样，并利用显微镜和④_______________（一种实验用具）对细菌进行观察和计数。
随时检测发酵液中细菌数量。
后代植株类型
染色体数目、形态
DNA分子标记鉴定
甲
12，形态与柴胡染色体相似
含双亲DNA片段
乙
12，形态与柴胡染色体相似
无红豆杉DNA片段
丙
12，形态与柴胡染色体相似
含双亲DNA片段和新的DNA片段
组别
核移植胚胎发育能力的检测结果
对核供体细胞的处理方法
胚胎总数
胚胎卵裂率
囊胚率
对照组
导入空载体
187
59.4%
16.8%
实验组
导入M基因过表达载体
185
71.3%
27%
（考试时间：75分钟；总分：100分）
一、单选题：本题包括14小题，每小题2分，共28分。每小题只有一个选项最符合题意。
1.下列有关细胞中化合物的叙述，正确的是
A.ATP、DNA和NADPH的组成元素相同
B.食物中的Na2CO3进入血液可作为调节血浆pH平衡的缓冲物质
C.构成血红蛋白的某些氨基酸中含有S、Fe等元素
D.煮熟牛肉中的蛋白质，不能与双缩脲试剂发生反应
2.细胞的结构与功能是相适应的。下列叙述错误的是
A.巨噬细胞中含有较多的溶酶体，有利于消化分解侵入的病毒和细菌
B.线粒体内膜凹陷折叠形成嵴，增大膜面积，有利于葡萄糖分解酶的附着
C.叶绿体在细胞内的流动受光照强度的影响，在弱光下会汇集到细胞项面
D.细胞内的生物膜把细胞区室化，保证了生命活动高效有序地进行
3.细胞内的钙稳态是靠Ca2+的跨膜运输来调节的，植物细胞的Ca2+运输系统如图所示，①~⑤表示相关的转运蛋白。下列说法错误的是
A.ATP水解释放的磷酸基团可以使①和④磷酸化，进而导致其空间结构发生变化
B.抑制呼吸作用会影响③转运Ca2+的速率
C.③转运H+的机制和②⑤转运Ca2+的机制类似，都不需要与其转运的离子结合
D.①③④介导的转运过程保证了细胞质基质中低Ca2+水平
4.下列关于酶的叙述，正确的是
A.含有二硫键的酶分子，其二硫键形成早于肽键
B.同一细胞在幼嫩时期和衰老时期所含酶的种类相同
C.在人体成熟红细胞中，与呼吸酶合成有关的基因始终处于活动状态
D.细胞分裂间期DNA聚合酶和RNA聚合酶都参与了活化能的降低
5.蛋白激酶A（PKA）由两个调节亚基和两个催化亚基组成，其活性受cAMP（腺苷酸环化酶催化ATP环化形成）调节（如下图）。活化的PKA催化亚基能将ATP上的磷酸基团转移到特定蛋白质的丝氨酸或苏氨酸残基上进行磷酸化，改变这些蛋白的活性。下列有关说法正确的是
A.只有催化亚基和调节亚基同时存在时，PKA才能保持较高的活性
B.蛋白质的丝氨酸或苏氨酸残基上进行磷酸化的过程伴随着ATP的合成
C.ATP不仅是生物的直接供能物质，还是合成cAMP、DNA等物质的原料
D.CAMP与调节亚基结合，使调节亚基和催化亚基分离，释放出高活性的催化亚基
6.下表中的“方法与结果”和“结论或观点”能匹配的是
7.下列有关酵母菌的纯培养的叙述正确的是
A.培养基和培养皿分别必须进行高压蒸汽灭菌和干热灭菌
B.纯培养要配制牛肉膏蛋白胨培养基，在容量瓶中用蒸馏水定容
C.平板划线完成，待培养基吸收菌液后，与空白平板一起倒置培养
D.自然界中的酵母菌对人类无害，其培养基使用后无需灭菌处理
8.芽孢杆菌耐高温，是常见的蛋白酶生产菌。培养基中的蛋白质可被蛋白酶降解后在菌落周围形成透明圈。如图是筛选蛋白酶高产菌株的过程，下列叙述错误的是
A.70~80℃水浴10min的目的是杀死非芽孢杆菌
B.在酒精灯火焰旁将样品用无菌水稀释并涂布接种
C.以奶粉为唯一氮源的培养基能起到选择作用
D.通过透明圈大小可筛选出蛋白酶高产菌株
9.发酵广泛应用于农业、食品工业、医药工业等工业生产。下列叙述正确的是
A.菌落的大小、有无荚膜、隆起程度等肉眼可见的特征都可作为菌种鉴定的依据
B.筛选出高产柠檬酸的黑曲霉菌种后可直接接种到发酵罐中进行发酵生产
C.单细胞蛋白是从微生物细胞中提取的蛋白质，常用作微生物饲料等
D.在生产酸奶时采用巴氏消毒法，杀死大部分微生物但基本不破坏营养成分
10.下图为啤酒生产过程的简要流程。下列叙述正确的是
A.利用大麦作原料时，淀粉是酵母菌的主要碳源
B.过程②破碎有利于淀粉与α-淀粉酶充分接触，缩短糖化过程的时间
C.过程③的主发酵阶段要始终保持无氧环境，以便完成酒精的生成
D.“精酿”啤酒不进行过滤和消毒，故发酵过程不需要在无菌条件下进行
11.DHA俗称脑黄金，是神经系统细胞生长及维持的一种主要成分，是构成大脑和视网膜的重要脂肪酸。某科研团队以富含DHA的自养微藻绿色巴夫藻和生长迅速的异养微藻四鞭藻两种二倍体单细胞藻类为材料，通过植物体细胞杂交技术成功培育出了生长迅速且DHA含量高的单细胞藻（X藻）。下列说法正确的是
A.植物体细胞杂交成功的标志是细胞核的融合
B.X藻是绿色巴夫藻和四鞭藻通过体细胞杂交获得的二倍体藻
C.培育X过程中还可能获得四倍体绿色巴夫藻和四倍体四鞭藻
D.培育的X藻具备两亲本所有的优良性状
12.中药藿香长期种植会出现种质退化、易感染病虫害等问题。为解决这些问题，研究者对组织培养过程中不同阶段的藿香进行了辐射处理（如下图），以期获得性状优良的突变株。下列叙述正确的是
A.组织培养过程中细胞分裂旺盛，辐射处理易发生定向突变
B.过程①中外植体通常用无水乙醇和次氯酸钠溶液进行消毒
C.过程③④所用的培养基中添加的植物激素的浓度和比例相同
D.筛选出目标突变株后可利用植物细胞培养技术生产药用成分
13.野生动物郊狼的物种濒临灭绝，科研人员利用种间体细胞核移植技术（iSCNT）培育小郊狼的流程如下图。下列叙述正确的是
A.图中①是第二极体，②是透明带
B.iSCNT技术比胚胎细胞核移植技术难度要大
C.郊狼的耳廓组织培养时一般需提供营养和酸性环境
D.结构③通常需要激活，使其完成减数分裂和发育进程
14.黑藻是一种叶片薄且叶绿体较大的水生植物，分布广泛、易于取材，可用作生物学实验材料。下列说法正确的是
A.黑藻是一种单细胞藻类，制作临时装片时不需切片
B.进行细胞吸水和失水实验时，吸水纸的作用是引流
C.质壁分离过程中，黑藻细胞的液泡绿色会逐渐加深
D.观察细胞质流动时，可进行叶绿体的形态观察和计数
二、多项选择题：本题包括4小题，每小题3分，共12分。全部选对的得3分，选对但不全的得1分，错选或不答的得0分。
15.鱼宰杀后鱼肉中的腺苷三磷酸降解生成肌苷酸，能极大地提升鱼肉鲜味。肌苷酸在酸性磷酸酶（ACP）作用下降解又导致鱼肉鲜味下降。探究鱼类鲜味下降的有关实验结果如下图所示。.下列叙述错误的是
0.24+草鱼
A.本实验的自变量只有pH和温度，因变量是ACP的相对活性
B.不同鱼的ACP的最适温度和pH有差异，直接原因是不同鱼体内的ACP结构不同
C.pH低于3.8、温度超过60℃，对鳝鱼ACP活性影响的机理不同
D.由图可知，将鯝鱼放置在pH5.8、温度40℃条件下，可保持鱼肉鲜味
16.科研人员用分离纯化的核糖体在无细胞体系中用编码免疫球蛋白（IgG）轻链的mRNA指导合成多肽，发现合成的多肽比分泌到细胞外的成熟的免疫球蛋白在N端有一段多出的肽链片段（P）。若添加粗面内质网，翻译的产物长度与活细胞分泌的肽链相同，且不含肽链P片段。据此分析，下列叙述正确的是
A.细胞内IgG轻链的合成起始于附着型核糖体
B.细胞内合成IgG过程中肽链P在粗面内质网内被剪切
C.肽链P可能参与IgG肽链进入粗面内质网
D.若P肽段功能缺失，则蛋白IgG将无法分泌到细胞外
17.以下为现代生物技术与工程操作常涉及的流程，下列说法正确的是
A.若为植物体细胞杂交过程，可用离心技术处理①和②后获得融合的原生质体
B.若为试管牛生产流程，体外受精时，卵母细胞①和精子②要分别进行成熟培养和获能处理
C.若为动物细胞核移植过程，将供体细胞①注入卵母细胞②，两细胞融合后形成重构胚
D.若为动物细胞融合过程，形成的③需置于95%的氧气和5%的CO2混合气体中培养
18.干扰素是由淋巴细胞产生的一种细胞因子，在临床上常用于治疗病毒感染性疾病，科研人员通过构建基因工程菌来生产干扰素。下图为构建工程菌的流程图，图中质粒A上m、n分别是启动子和终止子，目的基因的b链为模板链。下列叙述错误的是
A.②过程需在b链5'端加接NcI的识别序列
B.①过程需要逆转录酶，RNA可从淋巴细胞中获得
C.③过程在酶的催化下形成氢键
D.④过程常用方法为Ca2+处理法
三、非选择题（本题共5小题）
19.（13分）血浆中胆固醇含量过高是导致动脉粥样硬化和冠状动脉疾病的一种重要原因。胆固醇主要在肝细胞中合成，在血液中通过与磷脂和蛋白质结合形成低密度脂蛋白（LDL）颗粒形式运输到其他组织细胞（靶细胞）中，以满足这些细胞对胆固醇的需要，同时降低血浆中胆固醇含量。下图是LDL通过受体介导的胞吞作用进入细胞的途径。
（1）胆固醇除参与构成动物细胞膜的重要成分，还参与____________。LDL能够将包裹的胆固醇准确转运至靶细胞中，与其结构中的____________与靶细胞膜上的LDL受体结合直接相关。
（2）与细胞质膜相比，LDL膜结构的不同点主要是____________。LDL通过途径①____________方式进入靶细胞，形成网格蛋白包被的囊泡，经过脱包被作用后与胞内体（膜包裹的囊泡结构）融合。含有LDL的胞内体可通过途径③被转运到____________中，被其中的水解酶降解，胆固醇被释放进入细胞质基质。由图可知，细胞质膜表面LDL受体的来源有____________（2分）。
（3）由图1可知，当细胞中的胆固醇含量过高时，会通过____________（2分），并且可促进胆固醇酯的储存，从而使游离胆固醇的含量维持在正常水平。
（4）随着生活水平的提高，因糖、脂过量摄入导致的肥胖、非酒精性脂肪肝炎（NASH）等代谢性疾病高发。非酒精性脂肪性肝炎患者血液中甘油三酯和胆固醇偏高。为探究药剂Exendin-4在脂质代谢中的作用，科研人员设计以下实验：
①将非酒精性脂肪性肝炎模型小鼠均分为甲、乙、丙三组。
②甲组给予正常饮食作为对照；乙、丙两组均给予高脂饮食，乙组腹腔注射适量生理盐水，丙组腹腔注射_________________。.
③注射一周后检测三组小鼠血液中的甘油三酯和胆固醇含量，结果如右图。根据实验结果可判断，Exendin-4对非酒精性脂肪性肝炎小鼠血脂的作用效果是：____________（2分）。为了更好的研究Exerdin-4使用效果，还需要进一步确定该药物的使用量，应增设的实验操作是：___________，分别注入小鼠腹腔，一段时间后检测小鼠血液中的甘油三酯和胆固醇含量
20.（12分）土壤中的磷主要以难溶性无机磷酸盐形式存在，很难被植物吸收利用。已知解磷细菌可以溶解难溶性无机磷酸盐，提高土壤的肥力。请分析回答：
（1）培养基的配制：加热溶化时，边加热边搅拌的目的是防止_________；溶化后的培养基通常用______________（试剂）调节pH、采用____________进行灭菌。
（2）解磷细菌的分离：
（3）步骤二也可采用___________法进行分离纯化，但在分离纯化某稀有的高效突变菌株时，科研工作者一般很少使该方法，可能的原因是______________（2分）。
（4）步骤三也可采用系列稀释、接种、培养来统计菌落数，若对某批次发酵液的统计过程及结果如图，则该批次发酵液中活菌数理论值为_____________个/mL，但实际高于此值，原因是____________。
21.（12分）不对称体细胞杂交是指利用射线破坏供体细胞的染色质，与未经射线照射的受体细胞融合，所得融合细胞含受体全部遗传物质及供体部分遗传物质。红豆杉的次生产物紫杉醇是一种高效抗癌药物，但由于红豆杉野生资源匮乏，且红豆杉植株紫杉醇含量极低，导致了紫杉醇的供应严重不足。因此，研究人员尝试运用不对称体细胞杂交将红豆杉（2n=24）与柴胡（2n=12）进行了融合，培育能产生紫杉醇的柴胡，过程如下图。请回答下列问题。
注：X射线处理能随机破坏染色体结构，使其发生断裂、易位、染色体消除等，使细胞不再持续分裂；碘乙酰胺处理使细胞质中的某些酶失活，抑制细胞分裂。
（1）过程①中需将植物组织经____________后接种于MS培养基上诱导___________过程，产生愈伤组织。
（2）过程②中将愈伤组织加入______________酶液去壁，离心后弃去上清液，加入洗液多次洗涤后获得原生质体。多次洗涤的目的是____________。对红豆杉和柴胡原生质体进行的A、B处理分别为_____________。
（3）采用二乙酸荧光素（FDA）法可测定原生质体活力。已知FDA本身无荧光，当其进入细胞后可被酯酶分解为无毒、具有荧光的物质，该荧光物质不能透过活细胞质膜，会留在细胞内发出荧光。据此应选择______________的原生质体用于融合。
（4）过程③常用的化学试剂是_________，经诱导融合后，只有异源融合的原生质体可持续分裂形成再生细胞团，原因是______________。
（5）科研人员对获得的部分植株细胞进行染色体观察、计数和DNA分子标记鉴定，结果如下：
由表可知，后代植株中_____________类型一定不是所需植株。科研人员推测杂种植株的染色体主要来源亲本_______________的染色体，另一方亲本的遗传物质可能不是以染色体的形式存在于杂种植株细胞中，而是以DNA片段的方式整合进柴胡的基因组，作出以上推测的依据是________________（2分）。
22.（12分）供体细胞的分化状态和表观遗传修饰模式是影响体细胞核移植胚胎发育的重要因素。为研究供体细胞RNAm6A修饰（即RNA某位点的甲基化）水平对猪核移植胚胎发育的影响，研究者进行系列实验。
（1）核移植的受体是_________________细胞，核移植后的重构胚发育至______________阶段可利用_____________技术转移到代孕母体子宫内以获得子代个体，从早期胚胎中分离获得的具有自我更新和分化潜能的______________可用于医学研究。
（2）RNAm6A修饰可通过提高mRNA结构稳定性来影响早期胚胎发育。猪骨髓间充质干细胞（甲组）属于多能干细胞，猪胎儿成纤维细胞（乙组）则是处于分化终端的体细胞。研究者比较了两细胞内RNAm6A修饰水平及其作为核供体时重构胚的发育效率，结果如图1、2。
结果表明，核供体细胞的分化程度越高，_______________（2分）。
（3）研究发现甲组细胞内甲基转移酶M（催化RNAm6A修饰）的表达水平高于乙组，为验证RNAm6A修饰水平与核移植胚胎发育能力的关系，研究者进行如下实验：
导入空载体是为了排除________等对实验结果的干扰。结果表明，___________可提高核移植胚胎的发育能力。
（4）为研究导致不同供体细胞RNAm6A修饰水平差异的原因，研究者分析了M基因启动子的甲基化水平，发现骨髓间充质干细胞中M基因启动子的甲基化水平为22%，而猪胎儿成纤维细胞则为50%。据此设计实验：实验组用DNA甲基化抑制剂处理骨髓间充质干细胞，对照组不处理，检测两组的M基因启动子甲基化水平。
请修正实验方案：_____________（2分）。
（5）研究表明，RNAm6A修饰水平高的供体细胞核移植胚胎中DNA损伤位点较少。请推测猪骨髓间充质干细胞核移植胚胎发育的能力较高的原因：_________（2分）。
23.（11分）利用基因工程手段构建重金属富集植物是修复土壤重金属污染的重要方向之一。景天科植物伴矿景天是一种镉富集生物，研究人员将伴矿景天的SpHMA2基因（简称S基因）转入油菜，获得了镉富集转基因油菜。以下是主要实验步骤：
I.取伴矿景天的叶，提取总RNA，进一步获取DNA：
II.利用第I步获得的DNA，经PCR扩增S基因：
II.利用凝胶电泳对扩增片段进行鉴定，得到了图1所示的结果（1号泳道为样品，2号泳道为阴性对照，M为已知长度的标准DNA分子；左侧数字为标准DNA分子的碱基数，单位bp），回收S基因；
IV.S基因与pCAMBIA1301质粒（简称pC质粒）重组，转入大肠杆菌，培养后提取重组质粒；
V.用电击法将第IV步提取的重组质粒转入农杆菌，培养；
VI.将第V步培养获得的农杆菌与野生型油菜外植体共培养，利用共培养后的油菜外植体获得转基因油菜植株。
（1）I~VI中，获取目的基因的步骤有_______________。
（2）第II步中，PCR参数设置为：.
其中，60℃20s环节发生______________；72℃1min环节发生___________。（编号选填）
①双链DNA变性形成单链
②引物与单链DNA结合
③DNA解旋酶打开氢键
④DNA聚合酶催化合成DNA子链
⑤RNA聚合酶催化形成磷酸二酯键
（3）已知S基因的序列为 OH，则步骤II中PCR扩增仪中加入的一对引物的碱基序列是（5'→3'，只显示前6个碱基）_____________
A.ATGGCCB.GATGAGC.CTACTCD.TACCGG
（4）由于DNA分子片段带负电荷，所以电泳开始前应将_______________（正/负）电极插在凝胶板上靠近DNA样品的一端。根据图1所示电泳结果，S基因长约_______________bp.
（5）第IV步中，科研人员用一种限制性内切核酸酶A处理S基因，使用另一种限制性内切核酸酶B处理pC质粒。由此可以推测酶A和酶B_______________。（编号选填）
①识别序列相同，产物的黏性末端相同
②识别序列不同，产物的黏性末端相同
③识别序列相同，产物的黏性末端不同。
④识别序列不同，产物的黏性末端不同
（6）pC质粒上有Kar和Hyg两个抗生素抗性基因，I~VI中，需要考虑这两个抗性基因进行筛选才能达到预期目的的步骤有______________（2分）。
（7）为检测转基因油菜的镉富集能力，将野生型油菜（WT）和三个株系的转基因油菜（S1、S2、S3）种植于含200μM氯化镉的培养液中，10天后分别测定各油菜的镉含量，得到了图2所示的结果（*表示存在显著性差异），该结果说明_____________（2分）。
方法与结果
结论或观点
A
罗伯特森在电镜下看到了细胞膜清晰的暗—亮—暗三层结构
细胞膜由脂质—蛋白质—脂质三层结构构成
B
待测样液与斐林试剂50~65℃水浴加热后出现砖红色沉淀
待测样液中含有葡萄糖
C
黑色美西螈胚胎细胞的细胞核移植到白色美西螈去核卵细胞中，发育长大的美西螈全部是黑色
移植后长大的美西螈遗传物质全部来自黑色美西螈
D
毕希纳通过研磨酵母菌获得提取液，发现提取液也能引起发酵现象
引起发酵的是酵母菌所含的酿酶
操作步骤
简要操作过程
操作目的
步骤一
称取土样，在富含难溶性无机磷酸盐的细菌液体培养液中培养4天。
①______________。
步骤二
将一定量的①菌液用移液器滴加到以难溶性无机磷酸盐为唯一磷源的固体平板培养基，用②_____________法接种培养。
③分离获得______________。
步骤三
将③的菌发酵培养。
扩大培养。
发酵过程中对发酵液进行抽样，并利用显微镜和④_______________（一种实验用具）对细菌进行观察和计数。
随时检测发酵液中细菌数量。
后代植株类型
染色体数目、形态
DNA分子标记鉴定
甲
12，形态与柴胡染色体相似
含双亲DNA片段
乙
12，形态与柴胡染色体相似
无红豆杉DNA片段
丙
12，形态与柴胡染色体相似
含双亲DNA片段和新的DNA片段
组别
核移植胚胎发育能力的检测结果
对核供体细胞的处理方法
胚胎总数
胚胎卵裂率
囊胚率
对照组
导入空载体
187
59.4%
16.8%
实验组
导入M基因过表达载体
185
71.3%
27%
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