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四川省成都市树德中学2023-2024学年高二下学期期中考试生物试题
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这是一份四川省成都市树德中学2023-2024学年高二下学期期中考试生物试题，共12页。试卷主要包含了单选题，非选择题，共52分等内容，欢迎下载使用。
命题人：隆沂峄 审题人：刘宇 谭姣
一、单选题：本大题共24小题，每题2分，共48分。
1．泡菜的制作方法是：新鲜的蔬菜经过整理、清洁后，放入彻底清洗并用白酒擦拭过的泡菜坛中，然后向坛中加入盐水、香辛料及一些“陈泡菜水”，密封后置于阴凉处。下列方法中错误的是（ ）
A．先用沸水短时间处理蔬菜，再添加陈泡菜水可以缩短腌制时间
B．泡菜坛边加水的目的是隔绝空气，创造无氧环境有利于发酵
C．腌制过程中泡菜坛内液体表面长出白膜可能是由于氧气进入酵母菌大量繁殖形成的
D．泡菜腌制过程中，腌制时间过长、温度过低和食盐用量过少都可能导致亚硝酸盐含量增加
2．以宣木瓜为材料制作果醋时，首先要对果实进行软化；然后在溶液中加入一定量白砂糖；再接入酵母菌，敞口培养一天左右，当有大量CO2产生时开始密闭发酵；最后接入醋酸菌，进行醋酸发酵。下列叙述正确的是（ ）
A．加入白砂糖的目的主要是提高溶液的渗透压，特异性抑制杂菌的生长
B．敞口的目的是提供氧气，当大量CO2产生时表明酵母菌的数量已大幅增加
C．密闭发酵时酵母菌在线粒体基质中产生了大量的酒精和CO2
D．接入醋酸菌后要保持体系的密闭性，并定时放气排走CO2
3．下列有关发酵技术在食品加工中应用的叙述，不正确的是（ ）
A．为了避免杂菌污染，乳酸菌发酵成酸奶时在牛奶中添加一定量的抗生素
B．为了提高果酒品质，挑选新鲜的葡萄榨汁前应先用清水冲洗1至2次，再去除枝梗
C．为了防止果酒变酸，果酒发酵排气时应避免空气进入及发酵引起的升温
D．腐乳制作中酵母、曲霉和毛霉等多种微生物参与了发酵，其中起主要作用的是毛霉
4．油炸臭豆腐是我国一些地方的风味小吃，制作时需要将豆腐浸入含有乳酸菌、芽孢杆菌等微生物的卤汁中发酵，下列叙述正确的是（ ）
A．经煮沸灭菌的卤汁需冷却后才能浸入豆腐
B．乳酸菌发酵产生了乳酸和CO2
C．卤汁中的乳酸菌和芽孢杆菌不存在竞争关系
D．制作臭豆腐时，豆腐相当于微生物生长的培养基
5．野生型大肠杆菌菌株能在基本培养基上生长，氨基酸营养缺陷型突变株无法合成某种氨基酸，只能在完全培养基上生长，如图为纯化某氨基酸营养缺陷型突变株的部分流程图，①②③④代表培养基，A、B、C表示操作步骤，D、E为菌落。下列叙述错误的是（ ）
A．图中①②④为完全培养基，③为基本培养基
B．A操作的目的是提高突变率，增加突变株的数量
C．B操作是用涂布器将菌液均匀地涂布在②表面
D．经C过程原位影印及培养后，可从④中挑取E进行纯化培养
6．纤维素被纤维素分解菌分解后可以用来生产乙醇。实验室中常用刚果红培养基鉴别纤维素分解菌，其原理是在含纤维素的培养基中添加刚果红，刚果红会与纤维素形成红色复合物，若纤维素被分解，则不能形成该复合物，培养基中就会出现以这些菌落为中心的透明圈。下列相关叙述正确的是（ ）
A．刚果红培养基中除了纤维素、刚果红，还必须添加足量碳源物质
B．实验中需要将富集培养后的待测菌液直接涂布在刚果红培养基中
C．应选择菌落直径与周围透明圈直径比值大的菌落进行纯化培养
D．在刚果红培养基上长出的有透明圈的菌落需要进一步确定其产纤维素酶的能力
7．我国科学家利用如下图所示的液态厌氧发酵工艺，实现了高效产出乙醇和乙醇梭菌蛋白。下列叙述错误的是（ ）
A．乙醇梭菌以CO、CO2为主要的碳源，具有较强的固碳潜力
B．乙醇梭菌是自养厌氧型细菌，其厌氧发酵的过程需要进行搅拌
C．通过该工艺可高效生产清洁能源乙醇
D．乙醇梭菌单细胞蛋白是通过发酵工程从微生物细胞中提取出来的一类蛋白质
8．啤酒是以大麦为主要原料经酵母菌发酵制成的，发酵过程分为主发酵和后发酵两个阶段。在工业化生产中，具体流程包括：大麦经发芽、焙烤、碾磨、糖化、蒸煮、发酵、消毒等工序后，最终过滤、调节、分装。下列有关啤酒工业化生产流程说法错误的是（ ）
A．焙烤过程加热会杀死种子但不使淀粉酶失活
B．酵母菌的繁殖和代谢物的生成都在后发酵阶段完成
C．蒸煮过程可以终止淀粉酶的进一步作用，并对糖浆灭菌
D．精酿啤酒发酵完成后，一般不进行过滤和消毒处理，故保质期比较短
9．某生物活动小组为探究当地农田土壤中分解尿素的细菌的数量，进行了取样、系列梯度稀释、涂布平板、培养、计数等步骤，实验操作过程如下，下列说法正确的是（ ）
A．图中接种的培养基是以尿素为唯一氮源的固体培养基，能生长的微生物都能合成脲酶
B．若每支试管稀释10倍，则图中a的数值应为2.7，5号试管共稀释了106倍
C．图中左上角培养基菌落连成一片，可能是稀释倍数不够造成的
D．若仅以4号试管接种培养基计数，5g该土壤中含分解尿素菌的估算数目是1.4×108个
10．组织培养可快速繁殖植物，得到的试管苗常先移至草炭土或蛭石中炼苗，苗健壮后可移栽定植。关于菊花的组织培养及幼苗的移栽，下列说法错误的是（ ）
A．MS培养基的碳源一般用蔗糖而不用葡萄糖，以减少微生物污染
B．用酒精对外植体进行消毒持续的时间不能太长，消毒后应立即用蒸馏水清洗2～3次
C．接种时用镊子夹取菊花茎段，注意茎段的形态学上下端，避免倒插
D．对试管苗炼苗（驯化）的操作步骤之一是用流水除去根部培养基
11．人参皂苷具有抗肿瘤等作用，科研人员设计如图1所示流程制备人参皂苷Rg3，并研究了过程③生物反应器中人参细胞产量、人参皂苷Rg3产量随培养时间的变化，结果如图2。下列相关叙述正确的是（ ）
图1 图2
A．人参皂苷属于次级代谢产物，为人参细胞生命活动所必需
B．过程①、②体现了植物细胞的全能性
C．过程③采用静置培养，并加入适量蔗糖有利于维持渗透压
D．由图2可知，人参细胞的数量和培养时间等因素会影响人参皂苷Rg3产量
12．Ver细胞是从非洲绿猴的肾脏上皮细胞中分离培养出来的，可无限增殖且能悬浮培养。因不能合成抗病毒蛋白干扰素，因而广泛应用在病毒性疫苗生产上，下列叙述错误的是（ ）
A．培养Ver细胞时需要提供5%二氧化碳和95%空气
B．培养液需要定期更换，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害
C．Ver细胞无需胰蛋白酶等处理可传代培养
D．生产病毒性疫苗时，可将病毒接种到Ver细胞，培养后提取病毒可直接成为疫苗
13．试管婴儿技术是20世纪人类辅助生殖技术的杰作，使一部分不能生育的男女重新获得了生育的机会，也为人类的优生优育开辟了新的途径。试管婴儿技术经历了三代发展，第一代试管婴儿技术是体外受精联合胚胎移植技术（IVF），该技术的主要特点是取出成熟的卵细胞进行体外自然受精，发育成早期胚胎后移植到母体子宫内；第二代试管婴儿技术是卵胞浆内单精子注射技术（ICSI），该技术的主要特点是采用显微操作技术进行单精子注射；第三代试管婴儿技术是着床前胚胎遗传诊断（PGD），该技术的主要特点是对体外受精发育成的胚胎进行遗传诊断和筛选。下列有关试管婴儿技术的叙述，错误的是（ ）
A．第一代试管婴儿技术可以解决女性输卵管堵塞造成的不孕
B．第二代试管婴儿技术可以解决男性精子活力不足造成的不育
C．为保证能得到多个受精卵，需要利用雌性激素使女性超数排卵
D．在胚胎移植前进行遗传诊断应选取胚胎滋养层细胞
14．我国科学家成功地用iPS细胞（诱导多能干细胞）克隆出了活体小鼠，部分流程如下图所示，其中Kdm4d为组蛋白去甲基化酶，TSA为组蛋白脱乙酰酶抑制剂。下列说法不正确的是（ ）
A．组蛋白脱乙酰化和去甲基化有利于重构胚后续的胚胎发育过程
B．用电刺激、Ca2+载体等方法激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程
C．诱导小鼠成纤维细胞转化为iPS细胞的过程类似于植物组织培养的脱分化
D．图示流程运用了动物细胞培养、体细胞核移植、胚胎移植等技术
15．目前发现的双胞胎有同卵双胞胎、异卵双胞胎和“半同卵双胞胎”。一对“半同卵姐弟双胞胎”形成过程如图所示，图中染色单体分离后分别移向细胞的三个不同方向，从而分裂成a、b、c三个细胞，染色体全部来自父系的“合子”致死。其中两个细胞发育成姐弟二人。下列说法，不正确的是（ ）
A．图中的卵子位于输卵管中，处于减数分裂II的中期
B．若细胞a的染色体组成为MP1，则细胞b的染色体组成为MP2
C．图中细胞C中含有两个父系染色体组、含有Y染色体的数目为0或1或2
D．“半同卵双胞胎”的产生与透明带反应和卵细胞膜反应异常有关
16．CTLA-4和PD-1均是T细胞表面的受体分子，与特定分子结合后，能抑制T细胞激活或使T细胞凋亡，从而使机体肿瘤细胞免受T细胞攻击。抗CTLA-4或抗PD-1单克隆抗体具有较好的抗肿瘤效果。科研人员通过动物细胞融合技术将两种不同的杂交瘤细胞融合形成双杂交瘤细胞，双杂交瘤细胞能够悬浮在液体培养基中生长繁殖，其产生的抗CTLA-4和抗PD-1的双克隆抗体显示具有更好的疗效，如图所示。下列叙述不正确的是（ ）
A．双杂交瘤细胞无需识别CTLA-4和PD-1抗原，就能产生双特异性抗体
B．双克隆抗体与肿瘤细胞的结合具有更强的特异性，从而减少副作用
C．筛选图中双抗时需要使用CTLA-4和PD-1两种抗原
D．使用双克隆抗体治疗肿瘤的原理是让机体产生更强的细胞免疫反应
17．大肠杆菌经溶菌酶和洗涤剂处理后，拟核DNA就会缠绕在细胞壁碎片上，静置一段时间，质粒分布在上清液中，利用上述原理可初步获得质粒DNA。用三种限制酶分别处理提取的产物，电泳结果如图所示。下列关于质粒的粗提取和鉴定的叙述不正确的是（ ）
A．利用DNA和蛋白质在冷酒精中溶解性的差异可将DNA进一步纯化分离
B．在提取白色丝状物时双向搅拌比单向搅拌更有利于获得结构完整的DNA
C．电泳鉴定DNA利用了DNA在电场中会向着它所带电荷相反的电极移动的原理
D．根据电泳结果，质粒上不一定含有限制酶I和Ⅱ的切割位点，含有限制酶Ⅲ的切割位点
18．镰状细胞贫血是一种单基因遗传病，由正常血红蛋白基因（HbA）突变为异常血红蛋白基因（Hbs）引起，它们的某片段如图甲。现对一胎儿进行基因检测，主要原理：限制酶MstⅡ处理扩增后的DNA，加热使酶切片段解旋后用荧光标记的CTGACTCCT序列与其杂交，最后电泳分离。图乙为电泳后荧光出现的三种可能性。下列叙述不正确的是（ ）
A．利用PCR扩增DNA时反应体系中应加入4种dNTP、TaqDNA聚合酶和含Mg2+的缓冲液
B．若该胎儿检测结果为图乙—b，则其为镰状细胞贫血患者
C．荧光标记序列越长，图乙—c中两个DNA条带间的距离越大
D．用限制酶MstⅡ处理DNA不充分，可能把正常人误判为携带者
19．某植物抗虫基因转录的mRNA下游序列已知，但其上游序列未知。现利用基因工程技术扩增该基因，流程如图，下列分析错误的是（ ）
A．过程①中需要加入RNA聚合酶，以生成杂合双链
B．mRNA的下游序列（已知序列）位于3′端
C．构建基因表达载体时，通常需要在Ⅲ的两端添加限制酶的识别位点
D．过程③需要添加新的引物，其碱基序列应是TTT（T）n
20．Cre-lxP系统能实现特定基因的敲除（如图1）。把几种荧光蛋白基因和Cre酶能识别并切割的序列（lxP1和lxP2）串在一起，构建表达载体T（如图2）。部分荧光蛋白基因会被Cre酶随机“剪掉”，且两个lxP1之间或两个lxP2之间的基因，最多会被Cre酶敲除一次，剩下的部分得以表达，随机呈现不同的颜色。下列说法错误的是（ ）
图1 图2
A．Cre酶切下一个待敲除基因的过程，需要破坏四个磷酸二酯键
B．若小鼠细胞含一个表达载体T（不含Cre酶），其肌肉组织细胞呈红色
C．若小鼠细胞含一个表达载体T（含Cre酶），其脑组织细胞呈红色或黄色或蓝色
D．若小鼠细胞含两个表达载体T（含Cre酶），其一个细胞内可能随机出现两种颜色叠加
21．研究者计划将绿色荧光蛋白第203位的苏氨酸替换为酪氨酸，以获得橙色荧光蛋白。下列方案最可行的是（ ）
A．使用蛋白酶水解第203位氨基酸前后的肽键实现氨基酸替换
B．在mRNA中直接替换第609～611位三个碱基
C．根据新的氨基酸序列推测并合成相应的DNA序列
D．将改造后的橙色荧光蛋白基因直接注入大肠杆菌获得转基因菌株
22．下列关于转基因生物安全性的叙述，错误的是（ ）。
A．杂草、害虫从它的近亲获得抗性基因，可能破坏生态系统的稳定性
B．目的基因可通过花粉扩散到作物的近亲生物中，从而污染生物基因库
C．转基因作物被动物食用后，目的基因会转入动物体细胞中
D．种植转基因作物应与传统农业种植区隔离
23．世界首例免疫艾滋病的基因编辑婴儿，是由经CRISPR/Cas9基因编辑技术对CCR5基因进行修改的胚胎细胞孕育的。研究者的初衷是让志愿者生出能抗艾滋病病毒的婴儿。但婴儿诞生后，深圳市医学伦理专家委员会启动对该事件涉及伦理问题的调查。下列有关叙述错误的是（ ）
A．在普通培养液中加入适量的动物血清可以培养艾滋病病毒
B．修改的胚胎细胞孕育出婴儿说明胚胎细胞具有发育的全能性
C．胚胎是人生命的一个自然阶段，不能对其生命属性进行非道德篡改
D．经过基因编辑的个体，有可能影响基因选择性表达，而导致其他疾病的产生
24．生物技术运用于战争或恐怖活动，则后果将更为可怕，下列关于生物武器及相关约定的阐述中，错误的是（ ）
A．生物武器与常规武器相比具有传染性强、不易被发现、不受自然条件影响等特点
B．生物武器的类型包括致病菌类、病毒类和生化毒剂类等
C．转基因微生物制成的生物武器具有目前人类难以预防和治疗的特点
D．我国对于生物武器，采取的态度是不发展、不生产、不储存生物武器、并反对生物武器及其技术和设备的扩散
二、非选择题，共52分
25．（10分）研究发现，感染毛霉能诱导脐橙产生具有抗病活性的红色物质（CPRE）。为探究CPRE能否替代化学杀菌剂保护采收后的脐橙，科研人员进行了研究：
（1）据下表配方配制培养基，溶解后分装到锥形瓶中，用_________法灭菌后冷却至50℃左右。分别加入浓度为25、50、100、200μg/mL的CPRE无菌溶液，摇匀备用。以无菌水作为对照。本培养基的氮源来自于_________。
（2）将含不同浓度CPRE的培养基分别涂于载玻片上凝固后，接种20μL指状青霉孢子悬浮液，在适宜条件下培养一段时间后，用显微镜观察孢子萌发情况。各组萌发率的计算公式为：视野内萌发孢子数/视野内孢子总数×100%；根据萌发率计算实验组的萌发抑制率，计算公式为__________________。
统计结果表明CPRE能抑制指状青霉孢子萌发，且随浓度的增加抑制效果增强。
（3）进一步研究发现，CPRE可抑制指状青霉的生长，且一定范围内随CPRE浓度的增加抑制效果增强。为了探究CPRE抑制指状青霉的机理，研究者进行了如下检测。
①检测不同浓度CPRE处理，菌丝几丁质（真菌细胞壁的主要成分）含量和胞外AKP酶活性，结果如下图。图1和图2的结果表明，CPRE改变了细胞壁的结构和功能，判断依据是_________。
图1 图2
注：AKP酶（碱性磷酸酶）由细胞合成后分泌到细胞壁与细胞膜的间隙。
②再取对照组和实验组的指状青霉菌丝，用碘化丙啶进行染色（与DNA结合产生红色荧光的染料，碘化丙啶不能通过活细胞膜，但却能穿过破损的细胞膜而对核染色）。结果出现_________，证明CPRE破坏了细胞膜的完整性。
（4）请结合以上研究分析说明CPRE抵御指状青霉感染的作用机制：__________________。
26．（10分）甘蓝型油菜是由白菜和甘蓝杂交后染色体数目加倍形成的异源四倍体，引入我国历史较短，其遗传基础狭隘。菘蓝（别名“板蓝根”）是传统中药材，具有广谱抗病毒特性。研究人员利用甘蓝型油菜（体细胞中染色体数为38）与菘蓝（体细胞中染色体数为14）进行体细胞杂交，培育抗病毒的甘蓝型油菜—菘蓝单体附加系，过程如图1：
图1
（1）甘蓝型油菜与菘蓝的体细胞经__________处理后获得原生质体，再经诱导获得融合细胞。融合细胞接种到含有营养物质和_________的培养基上，经___________过程形成愈伤组织，进而发育形成完整的再生植株F1。植物体细胞杂交技术依据的生物学原理有：__________________。（答出两个）
（2）将F1与甘蓝型油菜回交，获得BC1，其染色体组成为____________（只用字母表示）。用BC1与甘蓝型油菜再一次回交，得到的BC2植株群体的染色体数目范围是_________。
（3）研究人员从BC2筛选出7种只含有1条菘蓝染色体的甘蓝型油菜—菘蓝单体附加系（A、B、C、D、E、F、G）。为探究甘蓝型油菜—菘蓝单体附加系在抗新冠病毒（SARS-CV-2）中的作用，研究人员用其提取物处理动物细胞，24h后感染新冠病毒，一段时间后收集病毒细胞培养液，通过免疫印记法检测病毒的含量，结果如图2：
图2
注：GAPDH基因是一种管家基因，GAPDH蛋白的表达量在各个组织中相对稳定。
①免疫印记法可以检测蛋白质的表达情况。各组作为标准参考的GADPH蛋白表达量__________，可排除无关变量对实验结果的影响。
②实验结果表明：甘蓝型油菜—菘蓝单体附加系_________能有效抑制新冠病毒。
27．（12分）女性怀孕后会合成并分泌人绒毛膜促性腺激素（HCG），并且该激素会出现在尿液中。HCG是一种蛋白质，包括α亚基和β亚基。用抗人绒毛膜促性腺激素（HCG）单克隆抗体做成的“早早孕诊断试剂盒”，在妊娠第8天就可以诊断是否怀孕。如图表示早早孕诊断试剂盒内部试纸条的构造，其中抗体1是以HCG的β亚基为抗原利用单克隆抗体技术制备，抗体2是以HCG的α亚基为抗原利用单克隆抗体技术制备，抗体3是针对抗体1的抗体，抗体2和抗体3分别固定在试纸条的检测线（T线）和质控线（C线），抗体1进行了胶体金标记，该标记物可以在T线或C线处显色。回答下列问题：
图1 图2
（1）女性在妊娠第8天左右，尽管体内HCG含量很低，但仍可用抗人绒毛膜促性腺激素单抗制成的“早早孕诊断试剂盒”作出诊断，体现出单克隆抗体具有_____________的优点。
（2）图1中单克隆抗体2制备的过程中，需要反复向小鼠注射______作为抗原，然后从小鼠的脾脏中获取已免疫的B淋巴细胞，与小鼠的骨髓瘤细胞融合。经选择培养后获得的杂交瘤细胞的特点是_______。为了得到能够分泌所需抗体的杂交瘤细胞，需要进行克隆化培养和抗体检测，该过程一般在多孔细胞培养板上进行，先将细胞悬浮液稀释到7～10个细胞/mL，再在每个培养孔中滴入0.1mL细胞稀释液，其目的是___________。最后将抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞在体外条件下大规模培养或________________，从而获取大量的单克隆抗体。
（3）图2表示三位女士的检测结果，其中表示没有怀孕的是______，检测结果无效的是______。出现甲结果的原理是________________________________________。
28．（9分）土壤盐碱化问题已经成为全球性难题，培育耐盐碱农作物是解决人类粮食安全和农业发展的重要途径。
（1）为研究高粱盐碱响应通路中相关基因AT1的作用，研究人员构建过表达植株（AT1-OE）。如图，为了使目的基因定向拼接到质粒中，应选用限制酶______________同时切割图中质粒和目的基因，构建重组质粒并转入农杆菌。
（2）将转化成功的农杆菌与高粱愈伤组织共培养，然后筛选转化细胞，其中转化是指：_____________。
（3）筛选T-DNA成功转入的愈伤组织时，使用既能杀死原核细胞，又能杀死真核细胞的潮霉素，效果优于仅能杀死原核细胞的抗生素（如卡那霉素），原因是_____________。进一步筛选获得所需愈伤组织，并再生成完整植株。同时构建AT1基因敲除植株（AT1-KO）。
（4）检测植株在高碱土壤中的幼苗长势和作物产量，结果发现：相比野生型植株，基因敲除植植株（AT1-KO）_____________，过表达植株（AT1-OE）表型相反，说明AT1在高粱碱胁迫的响应过程中起负调控作用。高碱条件下，植物细胞内H2O2含量升高，推测AT1可能与运输H2O2的通道蛋白PIP2有相互作用。细胞内过量的H2O2积累会导致氧化应激，从而导致植物细胞死亡，降低植物存活率。研究显示PIP2磷酸化能够促进H2O2外排。综合上述信息，解释敲除AT1基因能显著提高植株耐盐碱性的原因是_____________。
29．（11分）人血清白蛋白（HSA）在临床上的需求量大，由于其来源有限和有生物污染的风险，重组人血清白蛋白（rHSA），成为其重要的替代品。回答下列（一）（二）小题：
（一）途径一：基因工程结合发酵工程构建人血清白蛋白工程菌。
科研人员将HSA基因转入酵母菌细胞，获得了重组人血清白蛋白。图为酵母菌基因改造以及工业化发酵生产rHSA的过程示意图。
（1）随着测序技术的发展，为获取人血清白蛋白基因，可通过检索_________获取其编码序列，用化学合成法制备得到。重组基因表达载体中的启动子的作用是_____________。
（2）工业化发酵生产rHSA的过程一般包括菌种的选育，扩大培养、培养基的配制、灭菌、接种、发酵、产品的__________等方面，将rHSA工程菌接种至发酵罐内进行扩增，培养过程中可定期取样并使用细菌计数板对_________（填“菌体”或“菌落”）进行直接计数，以评估增殖情况。在工程菌选择上，选用酵母菌而不选用大肠杆菌，原因是大肠杆菌_________________________________。
（二）途径二：基因工程结合细胞工程构建人血清白蛋白乳腺反应器。
Ⅰ．采集良种供体牛的卵母细胞和精液，通过体外受精，形成奶牛受精卵；
Ⅱ．构建基因的表达载体，并将其导入奶牛受精卵，形成转基因细胞；
Ⅲ．电脉冲刺激转基因细胞促使其形成早期胚胎；
Ⅳ．将胚胎移植到受体母牛的子宫中，最终发育成转基因小牛。
（3）实验步骤Ⅰ中，在体外受精前，需要对奶牛的精子进行_________处理。
（4）实验步骤Ⅳ是进行胚胎移植。筛选出发育状态良好的雌性胚胎进行移植，为实现这一工序，需用相应激素对受体进行_________处理。
（5）有人提议将乳腺反应器改成膀胱反应器，请分析利用膀胱反应器比乳腺反应器产量高的原因__________________________________________。
树德中学高2022级高二下学期半期考试生物参考答案
1-5 DBADD 6-10 DDBBB 11-15 DDCAC 16-20 BBCAB 21-24 CCAA
25．答案：10分
（1）高压蒸汽灭菌（湿热灭菌）（1分）；马铃薯（1分）；
（2）（2分）；
（3）①CPRE使青霉菌细胞壁中几丁质的含量下降；随CPRE浓度和时间的增加，胞外APK酶活性升高（2分）；
②对照组菌内无荧光；实验组菌内出现红色荧光，并随CRPE浓度增加荧光强度增强（2分）；
（4）CPRE破坏指状青霉细胞壁和细胞膜，从而抑制指状青霉孢子的萌发和菌体的生长，减少了指状青霉的感染（2分）。
26．答案：（10分）
（1）纤维素酶、果胶酶（1分，答全给分）；植物激素（生长素和细胞分裂素）（1分）；脱分化（1分）；细胞膜的流动性、植物细胞的全能性（2分）；
（2）PPQQR（1分）；38～45（2分）；
（3）①一致（1分）；②G（1分）
27．答案：（12分）
（1）特异性强，灵敏度高（1分，答到一点即给分）；
（2）HCG的α亚基（1分）；既能大量增殖又能分泌抗体（2分）；使每个孔内不多于一个细胞，达到单克隆培养的目的（2分）；注射到小鼠腹腔内增殖（培养）（1分）；
（3）乙（1分）；丙（1分）；样品中的HCG与抗体1结合后形成的复合物移动至T线（1分），HCG又与抗体2结合，然后被固定在T线并显色（1分），部分复合物继续移动至C线，抗体1与抗体3结合，然后被固定在C线并显色（1分）。（共3分）
28．答案：（9分）
（1）BamHⅠ和EcRⅠ（1分）；
（2）目的基因进入受体细胞内，且在受体细胞内维持稳定和表达的过程（2分）；
（3）潮霉素可作用于植物细胞，未转入T-DNA的植物细胞无法生长（2分）；
（4）幼苗长势好、作物产量高（2分）；高碱环境中AT1与PIP2相互作用抑制其磷酸化（1分）；敲除AT1基因后，PIP2磷酸化上升，促进H2O2外排，作物存活率提高（1分，共2分）。
29．答案：（11分）
（1）序列（基因）数据库（1分）；作为RNA聚合酶识别和结合的位点，驱动基因转录出mRNA（2分）；
（2）分离、提纯（1分）；菌体（1分）；是原核生物，真核生物的基因在其细胞内表达的蛋白活性往往较低甚至失去活性（或无生物膜系统对蛋白质进行加工，导致蛋白活性低）（2分）。
（3）获能（1分）；
（4）同期发情（1分）；
（5）雌性牛只有在哺乳期才能分泌乳汁，而尿液不会受到性别和发育期的影响，尿液的分泌总量要比乳汁的分泌量大（2分）。（性别、时期、分泌总量各1分）马铃薯培养基配方
成分
马铃薯
葡萄糖
琼脂
蒸馏水
含量
200g
20g
15-20g
定容至1000mL
命题人：隆沂峄 审题人：刘宇 谭姣
一、单选题：本大题共24小题，每题2分，共48分。
1．泡菜的制作方法是：新鲜的蔬菜经过整理、清洁后，放入彻底清洗并用白酒擦拭过的泡菜坛中，然后向坛中加入盐水、香辛料及一些“陈泡菜水”，密封后置于阴凉处。下列方法中错误的是（ ）
A．先用沸水短时间处理蔬菜，再添加陈泡菜水可以缩短腌制时间
B．泡菜坛边加水的目的是隔绝空气，创造无氧环境有利于发酵
C．腌制过程中泡菜坛内液体表面长出白膜可能是由于氧气进入酵母菌大量繁殖形成的
D．泡菜腌制过程中，腌制时间过长、温度过低和食盐用量过少都可能导致亚硝酸盐含量增加
2．以宣木瓜为材料制作果醋时，首先要对果实进行软化；然后在溶液中加入一定量白砂糖；再接入酵母菌，敞口培养一天左右，当有大量CO2产生时开始密闭发酵；最后接入醋酸菌，进行醋酸发酵。下列叙述正确的是（ ）
A．加入白砂糖的目的主要是提高溶液的渗透压，特异性抑制杂菌的生长
B．敞口的目的是提供氧气，当大量CO2产生时表明酵母菌的数量已大幅增加
C．密闭发酵时酵母菌在线粒体基质中产生了大量的酒精和CO2
D．接入醋酸菌后要保持体系的密闭性，并定时放气排走CO2
3．下列有关发酵技术在食品加工中应用的叙述，不正确的是（ ）
A．为了避免杂菌污染，乳酸菌发酵成酸奶时在牛奶中添加一定量的抗生素
B．为了提高果酒品质，挑选新鲜的葡萄榨汁前应先用清水冲洗1至2次，再去除枝梗
C．为了防止果酒变酸，果酒发酵排气时应避免空气进入及发酵引起的升温
D．腐乳制作中酵母、曲霉和毛霉等多种微生物参与了发酵，其中起主要作用的是毛霉
4．油炸臭豆腐是我国一些地方的风味小吃，制作时需要将豆腐浸入含有乳酸菌、芽孢杆菌等微生物的卤汁中发酵，下列叙述正确的是（ ）
A．经煮沸灭菌的卤汁需冷却后才能浸入豆腐
B．乳酸菌发酵产生了乳酸和CO2
C．卤汁中的乳酸菌和芽孢杆菌不存在竞争关系
D．制作臭豆腐时，豆腐相当于微生物生长的培养基
5．野生型大肠杆菌菌株能在基本培养基上生长，氨基酸营养缺陷型突变株无法合成某种氨基酸，只能在完全培养基上生长，如图为纯化某氨基酸营养缺陷型突变株的部分流程图，①②③④代表培养基，A、B、C表示操作步骤，D、E为菌落。下列叙述错误的是（ ）
A．图中①②④为完全培养基，③为基本培养基
B．A操作的目的是提高突变率，增加突变株的数量
C．B操作是用涂布器将菌液均匀地涂布在②表面
D．经C过程原位影印及培养后，可从④中挑取E进行纯化培养
6．纤维素被纤维素分解菌分解后可以用来生产乙醇。实验室中常用刚果红培养基鉴别纤维素分解菌，其原理是在含纤维素的培养基中添加刚果红，刚果红会与纤维素形成红色复合物，若纤维素被分解，则不能形成该复合物，培养基中就会出现以这些菌落为中心的透明圈。下列相关叙述正确的是（ ）
A．刚果红培养基中除了纤维素、刚果红，还必须添加足量碳源物质
B．实验中需要将富集培养后的待测菌液直接涂布在刚果红培养基中
C．应选择菌落直径与周围透明圈直径比值大的菌落进行纯化培养
D．在刚果红培养基上长出的有透明圈的菌落需要进一步确定其产纤维素酶的能力
7．我国科学家利用如下图所示的液态厌氧发酵工艺，实现了高效产出乙醇和乙醇梭菌蛋白。下列叙述错误的是（ ）
A．乙醇梭菌以CO、CO2为主要的碳源，具有较强的固碳潜力
B．乙醇梭菌是自养厌氧型细菌，其厌氧发酵的过程需要进行搅拌
C．通过该工艺可高效生产清洁能源乙醇
D．乙醇梭菌单细胞蛋白是通过发酵工程从微生物细胞中提取出来的一类蛋白质
8．啤酒是以大麦为主要原料经酵母菌发酵制成的，发酵过程分为主发酵和后发酵两个阶段。在工业化生产中，具体流程包括：大麦经发芽、焙烤、碾磨、糖化、蒸煮、发酵、消毒等工序后，最终过滤、调节、分装。下列有关啤酒工业化生产流程说法错误的是（ ）
A．焙烤过程加热会杀死种子但不使淀粉酶失活
B．酵母菌的繁殖和代谢物的生成都在后发酵阶段完成
C．蒸煮过程可以终止淀粉酶的进一步作用，并对糖浆灭菌
D．精酿啤酒发酵完成后，一般不进行过滤和消毒处理，故保质期比较短
9．某生物活动小组为探究当地农田土壤中分解尿素的细菌的数量，进行了取样、系列梯度稀释、涂布平板、培养、计数等步骤，实验操作过程如下，下列说法正确的是（ ）
A．图中接种的培养基是以尿素为唯一氮源的固体培养基，能生长的微生物都能合成脲酶
B．若每支试管稀释10倍，则图中a的数值应为2.7，5号试管共稀释了106倍
C．图中左上角培养基菌落连成一片，可能是稀释倍数不够造成的
D．若仅以4号试管接种培养基计数，5g该土壤中含分解尿素菌的估算数目是1.4×108个
10．组织培养可快速繁殖植物，得到的试管苗常先移至草炭土或蛭石中炼苗，苗健壮后可移栽定植。关于菊花的组织培养及幼苗的移栽，下列说法错误的是（ ）
A．MS培养基的碳源一般用蔗糖而不用葡萄糖，以减少微生物污染
B．用酒精对外植体进行消毒持续的时间不能太长，消毒后应立即用蒸馏水清洗2～3次
C．接种时用镊子夹取菊花茎段，注意茎段的形态学上下端，避免倒插
D．对试管苗炼苗（驯化）的操作步骤之一是用流水除去根部培养基
11．人参皂苷具有抗肿瘤等作用，科研人员设计如图1所示流程制备人参皂苷Rg3，并研究了过程③生物反应器中人参细胞产量、人参皂苷Rg3产量随培养时间的变化，结果如图2。下列相关叙述正确的是（ ）
图1 图2
A．人参皂苷属于次级代谢产物，为人参细胞生命活动所必需
B．过程①、②体现了植物细胞的全能性
C．过程③采用静置培养，并加入适量蔗糖有利于维持渗透压
D．由图2可知，人参细胞的数量和培养时间等因素会影响人参皂苷Rg3产量
12．Ver细胞是从非洲绿猴的肾脏上皮细胞中分离培养出来的，可无限增殖且能悬浮培养。因不能合成抗病毒蛋白干扰素，因而广泛应用在病毒性疫苗生产上，下列叙述错误的是（ ）
A．培养Ver细胞时需要提供5%二氧化碳和95%空气
B．培养液需要定期更换，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害
C．Ver细胞无需胰蛋白酶等处理可传代培养
D．生产病毒性疫苗时，可将病毒接种到Ver细胞，培养后提取病毒可直接成为疫苗
13．试管婴儿技术是20世纪人类辅助生殖技术的杰作，使一部分不能生育的男女重新获得了生育的机会，也为人类的优生优育开辟了新的途径。试管婴儿技术经历了三代发展，第一代试管婴儿技术是体外受精联合胚胎移植技术（IVF），该技术的主要特点是取出成熟的卵细胞进行体外自然受精，发育成早期胚胎后移植到母体子宫内；第二代试管婴儿技术是卵胞浆内单精子注射技术（ICSI），该技术的主要特点是采用显微操作技术进行单精子注射；第三代试管婴儿技术是着床前胚胎遗传诊断（PGD），该技术的主要特点是对体外受精发育成的胚胎进行遗传诊断和筛选。下列有关试管婴儿技术的叙述，错误的是（ ）
A．第一代试管婴儿技术可以解决女性输卵管堵塞造成的不孕
B．第二代试管婴儿技术可以解决男性精子活力不足造成的不育
C．为保证能得到多个受精卵，需要利用雌性激素使女性超数排卵
D．在胚胎移植前进行遗传诊断应选取胚胎滋养层细胞
14．我国科学家成功地用iPS细胞（诱导多能干细胞）克隆出了活体小鼠，部分流程如下图所示，其中Kdm4d为组蛋白去甲基化酶，TSA为组蛋白脱乙酰酶抑制剂。下列说法不正确的是（ ）
A．组蛋白脱乙酰化和去甲基化有利于重构胚后续的胚胎发育过程
B．用电刺激、Ca2+载体等方法激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程
C．诱导小鼠成纤维细胞转化为iPS细胞的过程类似于植物组织培养的脱分化
D．图示流程运用了动物细胞培养、体细胞核移植、胚胎移植等技术
15．目前发现的双胞胎有同卵双胞胎、异卵双胞胎和“半同卵双胞胎”。一对“半同卵姐弟双胞胎”形成过程如图所示，图中染色单体分离后分别移向细胞的三个不同方向，从而分裂成a、b、c三个细胞，染色体全部来自父系的“合子”致死。其中两个细胞发育成姐弟二人。下列说法，不正确的是（ ）
A．图中的卵子位于输卵管中，处于减数分裂II的中期
B．若细胞a的染色体组成为MP1，则细胞b的染色体组成为MP2
C．图中细胞C中含有两个父系染色体组、含有Y染色体的数目为0或1或2
D．“半同卵双胞胎”的产生与透明带反应和卵细胞膜反应异常有关
16．CTLA-4和PD-1均是T细胞表面的受体分子，与特定分子结合后，能抑制T细胞激活或使T细胞凋亡，从而使机体肿瘤细胞免受T细胞攻击。抗CTLA-4或抗PD-1单克隆抗体具有较好的抗肿瘤效果。科研人员通过动物细胞融合技术将两种不同的杂交瘤细胞融合形成双杂交瘤细胞，双杂交瘤细胞能够悬浮在液体培养基中生长繁殖，其产生的抗CTLA-4和抗PD-1的双克隆抗体显示具有更好的疗效，如图所示。下列叙述不正确的是（ ）
A．双杂交瘤细胞无需识别CTLA-4和PD-1抗原，就能产生双特异性抗体
B．双克隆抗体与肿瘤细胞的结合具有更强的特异性，从而减少副作用
C．筛选图中双抗时需要使用CTLA-4和PD-1两种抗原
D．使用双克隆抗体治疗肿瘤的原理是让机体产生更强的细胞免疫反应
17．大肠杆菌经溶菌酶和洗涤剂处理后，拟核DNA就会缠绕在细胞壁碎片上，静置一段时间，质粒分布在上清液中，利用上述原理可初步获得质粒DNA。用三种限制酶分别处理提取的产物，电泳结果如图所示。下列关于质粒的粗提取和鉴定的叙述不正确的是（ ）
A．利用DNA和蛋白质在冷酒精中溶解性的差异可将DNA进一步纯化分离
B．在提取白色丝状物时双向搅拌比单向搅拌更有利于获得结构完整的DNA
C．电泳鉴定DNA利用了DNA在电场中会向着它所带电荷相反的电极移动的原理
D．根据电泳结果，质粒上不一定含有限制酶I和Ⅱ的切割位点，含有限制酶Ⅲ的切割位点
18．镰状细胞贫血是一种单基因遗传病，由正常血红蛋白基因（HbA）突变为异常血红蛋白基因（Hbs）引起，它们的某片段如图甲。现对一胎儿进行基因检测，主要原理：限制酶MstⅡ处理扩增后的DNA，加热使酶切片段解旋后用荧光标记的CTGACTCCT序列与其杂交，最后电泳分离。图乙为电泳后荧光出现的三种可能性。下列叙述不正确的是（ ）
A．利用PCR扩增DNA时反应体系中应加入4种dNTP、TaqDNA聚合酶和含Mg2+的缓冲液
B．若该胎儿检测结果为图乙—b，则其为镰状细胞贫血患者
C．荧光标记序列越长，图乙—c中两个DNA条带间的距离越大
D．用限制酶MstⅡ处理DNA不充分，可能把正常人误判为携带者
19．某植物抗虫基因转录的mRNA下游序列已知，但其上游序列未知。现利用基因工程技术扩增该基因，流程如图，下列分析错误的是（ ）
A．过程①中需要加入RNA聚合酶，以生成杂合双链
B．mRNA的下游序列（已知序列）位于3′端
C．构建基因表达载体时，通常需要在Ⅲ的两端添加限制酶的识别位点
D．过程③需要添加新的引物，其碱基序列应是TTT（T）n
20．Cre-lxP系统能实现特定基因的敲除（如图1）。把几种荧光蛋白基因和Cre酶能识别并切割的序列（lxP1和lxP2）串在一起，构建表达载体T（如图2）。部分荧光蛋白基因会被Cre酶随机“剪掉”，且两个lxP1之间或两个lxP2之间的基因，最多会被Cre酶敲除一次，剩下的部分得以表达，随机呈现不同的颜色。下列说法错误的是（ ）
图1 图2
A．Cre酶切下一个待敲除基因的过程，需要破坏四个磷酸二酯键
B．若小鼠细胞含一个表达载体T（不含Cre酶），其肌肉组织细胞呈红色
C．若小鼠细胞含一个表达载体T（含Cre酶），其脑组织细胞呈红色或黄色或蓝色
D．若小鼠细胞含两个表达载体T（含Cre酶），其一个细胞内可能随机出现两种颜色叠加
21．研究者计划将绿色荧光蛋白第203位的苏氨酸替换为酪氨酸，以获得橙色荧光蛋白。下列方案最可行的是（ ）
A．使用蛋白酶水解第203位氨基酸前后的肽键实现氨基酸替换
B．在mRNA中直接替换第609～611位三个碱基
C．根据新的氨基酸序列推测并合成相应的DNA序列
D．将改造后的橙色荧光蛋白基因直接注入大肠杆菌获得转基因菌株
22．下列关于转基因生物安全性的叙述，错误的是（ ）。
A．杂草、害虫从它的近亲获得抗性基因，可能破坏生态系统的稳定性
B．目的基因可通过花粉扩散到作物的近亲生物中，从而污染生物基因库
C．转基因作物被动物食用后，目的基因会转入动物体细胞中
D．种植转基因作物应与传统农业种植区隔离
23．世界首例免疫艾滋病的基因编辑婴儿，是由经CRISPR/Cas9基因编辑技术对CCR5基因进行修改的胚胎细胞孕育的。研究者的初衷是让志愿者生出能抗艾滋病病毒的婴儿。但婴儿诞生后，深圳市医学伦理专家委员会启动对该事件涉及伦理问题的调查。下列有关叙述错误的是（ ）
A．在普通培养液中加入适量的动物血清可以培养艾滋病病毒
B．修改的胚胎细胞孕育出婴儿说明胚胎细胞具有发育的全能性
C．胚胎是人生命的一个自然阶段，不能对其生命属性进行非道德篡改
D．经过基因编辑的个体，有可能影响基因选择性表达，而导致其他疾病的产生
24．生物技术运用于战争或恐怖活动，则后果将更为可怕，下列关于生物武器及相关约定的阐述中，错误的是（ ）
A．生物武器与常规武器相比具有传染性强、不易被发现、不受自然条件影响等特点
B．生物武器的类型包括致病菌类、病毒类和生化毒剂类等
C．转基因微生物制成的生物武器具有目前人类难以预防和治疗的特点
D．我国对于生物武器，采取的态度是不发展、不生产、不储存生物武器、并反对生物武器及其技术和设备的扩散
二、非选择题，共52分
25．（10分）研究发现，感染毛霉能诱导脐橙产生具有抗病活性的红色物质（CPRE）。为探究CPRE能否替代化学杀菌剂保护采收后的脐橙，科研人员进行了研究：
（1）据下表配方配制培养基，溶解后分装到锥形瓶中，用_________法灭菌后冷却至50℃左右。分别加入浓度为25、50、100、200μg/mL的CPRE无菌溶液，摇匀备用。以无菌水作为对照。本培养基的氮源来自于_________。
（2）将含不同浓度CPRE的培养基分别涂于载玻片上凝固后，接种20μL指状青霉孢子悬浮液，在适宜条件下培养一段时间后，用显微镜观察孢子萌发情况。各组萌发率的计算公式为：视野内萌发孢子数/视野内孢子总数×100%；根据萌发率计算实验组的萌发抑制率，计算公式为__________________。
统计结果表明CPRE能抑制指状青霉孢子萌发，且随浓度的增加抑制效果增强。
（3）进一步研究发现，CPRE可抑制指状青霉的生长，且一定范围内随CPRE浓度的增加抑制效果增强。为了探究CPRE抑制指状青霉的机理，研究者进行了如下检测。
①检测不同浓度CPRE处理，菌丝几丁质（真菌细胞壁的主要成分）含量和胞外AKP酶活性，结果如下图。图1和图2的结果表明，CPRE改变了细胞壁的结构和功能，判断依据是_________。
图1 图2
注：AKP酶（碱性磷酸酶）由细胞合成后分泌到细胞壁与细胞膜的间隙。
②再取对照组和实验组的指状青霉菌丝，用碘化丙啶进行染色（与DNA结合产生红色荧光的染料，碘化丙啶不能通过活细胞膜，但却能穿过破损的细胞膜而对核染色）。结果出现_________，证明CPRE破坏了细胞膜的完整性。
（4）请结合以上研究分析说明CPRE抵御指状青霉感染的作用机制：__________________。
26．（10分）甘蓝型油菜是由白菜和甘蓝杂交后染色体数目加倍形成的异源四倍体，引入我国历史较短，其遗传基础狭隘。菘蓝（别名“板蓝根”）是传统中药材，具有广谱抗病毒特性。研究人员利用甘蓝型油菜（体细胞中染色体数为38）与菘蓝（体细胞中染色体数为14）进行体细胞杂交，培育抗病毒的甘蓝型油菜—菘蓝单体附加系，过程如图1：
图1
（1）甘蓝型油菜与菘蓝的体细胞经__________处理后获得原生质体，再经诱导获得融合细胞。融合细胞接种到含有营养物质和_________的培养基上，经___________过程形成愈伤组织，进而发育形成完整的再生植株F1。植物体细胞杂交技术依据的生物学原理有：__________________。（答出两个）
（2）将F1与甘蓝型油菜回交，获得BC1，其染色体组成为____________（只用字母表示）。用BC1与甘蓝型油菜再一次回交，得到的BC2植株群体的染色体数目范围是_________。
（3）研究人员从BC2筛选出7种只含有1条菘蓝染色体的甘蓝型油菜—菘蓝单体附加系（A、B、C、D、E、F、G）。为探究甘蓝型油菜—菘蓝单体附加系在抗新冠病毒（SARS-CV-2）中的作用，研究人员用其提取物处理动物细胞，24h后感染新冠病毒，一段时间后收集病毒细胞培养液，通过免疫印记法检测病毒的含量，结果如图2：
图2
注：GAPDH基因是一种管家基因，GAPDH蛋白的表达量在各个组织中相对稳定。
①免疫印记法可以检测蛋白质的表达情况。各组作为标准参考的GADPH蛋白表达量__________，可排除无关变量对实验结果的影响。
②实验结果表明：甘蓝型油菜—菘蓝单体附加系_________能有效抑制新冠病毒。
27．（12分）女性怀孕后会合成并分泌人绒毛膜促性腺激素（HCG），并且该激素会出现在尿液中。HCG是一种蛋白质，包括α亚基和β亚基。用抗人绒毛膜促性腺激素（HCG）单克隆抗体做成的“早早孕诊断试剂盒”，在妊娠第8天就可以诊断是否怀孕。如图表示早早孕诊断试剂盒内部试纸条的构造，其中抗体1是以HCG的β亚基为抗原利用单克隆抗体技术制备，抗体2是以HCG的α亚基为抗原利用单克隆抗体技术制备，抗体3是针对抗体1的抗体，抗体2和抗体3分别固定在试纸条的检测线（T线）和质控线（C线），抗体1进行了胶体金标记，该标记物可以在T线或C线处显色。回答下列问题：
图1 图2
（1）女性在妊娠第8天左右，尽管体内HCG含量很低，但仍可用抗人绒毛膜促性腺激素单抗制成的“早早孕诊断试剂盒”作出诊断，体现出单克隆抗体具有_____________的优点。
（2）图1中单克隆抗体2制备的过程中，需要反复向小鼠注射______作为抗原，然后从小鼠的脾脏中获取已免疫的B淋巴细胞，与小鼠的骨髓瘤细胞融合。经选择培养后获得的杂交瘤细胞的特点是_______。为了得到能够分泌所需抗体的杂交瘤细胞，需要进行克隆化培养和抗体检测，该过程一般在多孔细胞培养板上进行，先将细胞悬浮液稀释到7～10个细胞/mL，再在每个培养孔中滴入0.1mL细胞稀释液，其目的是___________。最后将抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞在体外条件下大规模培养或________________，从而获取大量的单克隆抗体。
（3）图2表示三位女士的检测结果，其中表示没有怀孕的是______，检测结果无效的是______。出现甲结果的原理是________________________________________。
28．（9分）土壤盐碱化问题已经成为全球性难题，培育耐盐碱农作物是解决人类粮食安全和农业发展的重要途径。
（1）为研究高粱盐碱响应通路中相关基因AT1的作用，研究人员构建过表达植株（AT1-OE）。如图，为了使目的基因定向拼接到质粒中，应选用限制酶______________同时切割图中质粒和目的基因，构建重组质粒并转入农杆菌。
（2）将转化成功的农杆菌与高粱愈伤组织共培养，然后筛选转化细胞，其中转化是指：_____________。
（3）筛选T-DNA成功转入的愈伤组织时，使用既能杀死原核细胞，又能杀死真核细胞的潮霉素，效果优于仅能杀死原核细胞的抗生素（如卡那霉素），原因是_____________。进一步筛选获得所需愈伤组织，并再生成完整植株。同时构建AT1基因敲除植株（AT1-KO）。
（4）检测植株在高碱土壤中的幼苗长势和作物产量，结果发现：相比野生型植株，基因敲除植植株（AT1-KO）_____________，过表达植株（AT1-OE）表型相反，说明AT1在高粱碱胁迫的响应过程中起负调控作用。高碱条件下，植物细胞内H2O2含量升高，推测AT1可能与运输H2O2的通道蛋白PIP2有相互作用。细胞内过量的H2O2积累会导致氧化应激，从而导致植物细胞死亡，降低植物存活率。研究显示PIP2磷酸化能够促进H2O2外排。综合上述信息，解释敲除AT1基因能显著提高植株耐盐碱性的原因是_____________。
29．（11分）人血清白蛋白（HSA）在临床上的需求量大，由于其来源有限和有生物污染的风险，重组人血清白蛋白（rHSA），成为其重要的替代品。回答下列（一）（二）小题：
（一）途径一：基因工程结合发酵工程构建人血清白蛋白工程菌。
科研人员将HSA基因转入酵母菌细胞，获得了重组人血清白蛋白。图为酵母菌基因改造以及工业化发酵生产rHSA的过程示意图。
（1）随着测序技术的发展，为获取人血清白蛋白基因，可通过检索_________获取其编码序列，用化学合成法制备得到。重组基因表达载体中的启动子的作用是_____________。
（2）工业化发酵生产rHSA的过程一般包括菌种的选育，扩大培养、培养基的配制、灭菌、接种、发酵、产品的__________等方面，将rHSA工程菌接种至发酵罐内进行扩增，培养过程中可定期取样并使用细菌计数板对_________（填“菌体”或“菌落”）进行直接计数，以评估增殖情况。在工程菌选择上，选用酵母菌而不选用大肠杆菌，原因是大肠杆菌_________________________________。
（二）途径二：基因工程结合细胞工程构建人血清白蛋白乳腺反应器。
Ⅰ．采集良种供体牛的卵母细胞和精液，通过体外受精，形成奶牛受精卵；
Ⅱ．构建基因的表达载体，并将其导入奶牛受精卵，形成转基因细胞；
Ⅲ．电脉冲刺激转基因细胞促使其形成早期胚胎；
Ⅳ．将胚胎移植到受体母牛的子宫中，最终发育成转基因小牛。
（3）实验步骤Ⅰ中，在体外受精前，需要对奶牛的精子进行_________处理。
（4）实验步骤Ⅳ是进行胚胎移植。筛选出发育状态良好的雌性胚胎进行移植，为实现这一工序，需用相应激素对受体进行_________处理。
（5）有人提议将乳腺反应器改成膀胱反应器，请分析利用膀胱反应器比乳腺反应器产量高的原因__________________________________________。
树德中学高2022级高二下学期半期考试生物参考答案
1-5 DBADD 6-10 DDBBB 11-15 DDCAC 16-20 BBCAB 21-24 CCAA
25．答案：10分
（1）高压蒸汽灭菌（湿热灭菌）（1分）；马铃薯（1分）；
（2）（2分）；
（3）①CPRE使青霉菌细胞壁中几丁质的含量下降；随CPRE浓度和时间的增加，胞外APK酶活性升高（2分）；
②对照组菌内无荧光；实验组菌内出现红色荧光，并随CRPE浓度增加荧光强度增强（2分）；
（4）CPRE破坏指状青霉细胞壁和细胞膜，从而抑制指状青霉孢子的萌发和菌体的生长，减少了指状青霉的感染（2分）。
26．答案：（10分）
（1）纤维素酶、果胶酶（1分，答全给分）；植物激素（生长素和细胞分裂素）（1分）；脱分化（1分）；细胞膜的流动性、植物细胞的全能性（2分）；
（2）PPQQR（1分）；38～45（2分）；
（3）①一致（1分）；②G（1分）
27．答案：（12分）
（1）特异性强，灵敏度高（1分，答到一点即给分）；
（2）HCG的α亚基（1分）；既能大量增殖又能分泌抗体（2分）；使每个孔内不多于一个细胞，达到单克隆培养的目的（2分）；注射到小鼠腹腔内增殖（培养）（1分）；
（3）乙（1分）；丙（1分）；样品中的HCG与抗体1结合后形成的复合物移动至T线（1分），HCG又与抗体2结合，然后被固定在T线并显色（1分），部分复合物继续移动至C线，抗体1与抗体3结合，然后被固定在C线并显色（1分）。（共3分）
28．答案：（9分）
（1）BamHⅠ和EcRⅠ（1分）；
（2）目的基因进入受体细胞内，且在受体细胞内维持稳定和表达的过程（2分）；
（3）潮霉素可作用于植物细胞，未转入T-DNA的植物细胞无法生长（2分）；
（4）幼苗长势好、作物产量高（2分）；高碱环境中AT1与PIP2相互作用抑制其磷酸化（1分）；敲除AT1基因后，PIP2磷酸化上升，促进H2O2外排，作物存活率提高（1分，共2分）。
29．答案：（11分）
（1）序列（基因）数据库（1分）；作为RNA聚合酶识别和结合的位点，驱动基因转录出mRNA（2分）；
（2）分离、提纯（1分）；菌体（1分）；是原核生物，真核生物的基因在其细胞内表达的蛋白活性往往较低甚至失去活性（或无生物膜系统对蛋白质进行加工，导致蛋白活性低）（2分）。
（3）获能（1分）；
（4）同期发情（1分）；
（5）雌性牛只有在哺乳期才能分泌乳汁，而尿液不会受到性别和发育期的影响，尿液的分泌总量要比乳汁的分泌量大（2分）。（性别、时期、分泌总量各1分）马铃薯培养基配方
成分
马铃薯
葡萄糖
琼脂
蒸馏水
含量
200g
20g
15-20g
定容至1000mL
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