辽宁省部分高中2023-2024学年高二下学期期中考试生物试题

这是一份辽宁省部分高中2023-2024学年高二下学期期中考试生物试题，共12页。试卷主要包含了单项选择题，不定项选择题，非选择题等内容，欢迎下载使用。

考试时间：75分钟满分：100分
第Ⅰ卷（选择题，共45分）
一、单项选择题：本题共15小题，每小题2分，共30分。在每小题给出的四个选项中，只有一项符合题目要求。
1．下列有关生态足迹的叙述，正确的是（ ）
A．生态足迹是指维持某一人口单位生存所需生产资源的土地及水域面积
B．农牧业生产中延长食物链有利于减小生态足迹
C．当生态承载力（地球提供资源的能力）小于生态足迹时，表现为生态赤字
D．生态足迹越大，人类所需的资源越少，对环境和生态的影响越小
2．2021年，习近平主席在《生物多样性公约》领导人峰会上的主旨讲话中指出：“生物多样性使地球充满生机，也是人类生存和发展的基础。”下列有关生物多样性的说法，正确的是（ ）
A．长江禁渔计划主要是保护生物多样性的直接价值，维持生态稳定
B．野生远东豹曾因被猎杀而导致数量骤减，直接降低了生物多样性中的种群多样性
C．建立种子库、基因资源库属于易地保护生物多样性
D．外来物种入侵可能导致生物多样性丧失
3．湿地作为地球上最高效的碳汇，对于吸收大气中的温室气体，减缓全球气候变暖，助力我国实现碳达峰、碳中和目标具有重要作用。湿地修复需要考虑水生植物的污染物净化能力，更需要遵循生态学的基本原理。下列相关叙述错误的是（ ）
A．湿地修复需以生态系统的自组织、自我调节功能为基础
B．碳中和后大气中的二氧化碳能保持稳态，有助于解决全球温室效应问题
C．选择净化能力强且能互利共存的多种水生生物修复湿地，体现了协调原理
D．湿地修复中建立缓冲带，尽量减少人类干扰，使湿地依靠自然演替等机制恢复其生态功能
4．下列关于传统发酵技术应用的叙述，正确的是（ ）
A．家庭制作果醋和泡菜时，表面产生的菌膜分别由酵母菌和乳酸菌形成
B．果酒、果醋的酿制过程也是微生物生长繁殖的过程
C．果醋制作过程中发酵液pH逐渐降低，果酒制作过程中情况相反
D．泡菜腌制过程中，腌制时间过长、温度过低和食盐用量过少都可能导致亚硝酸盐含量增加
5．营养缺陷型菌株是突变后某些酶被破坏，导致代谢过程中某些合成反应不能进行的菌株。下图是科研人员利用影印法（用无菌绒布轻盖在已长好菌落的原培养基上，然后不转动任何角度，“复印”至新的培养基上）初检某种氨基酸缺陷型菌株的过程。下列叙述错误的是（ ）
A．①过程接种方法为稀释涂布平板法，接种后的培养皿不能立即进行倒置培养
B．进行②过程的顺序是先将丝绒布“复印”至基本培养基，再“复印”至完全培养基上
C．氨基酸缺陷型菌株应从基本培养基上没有、完全培养基上对应位置有的菌落中挑选
D．①过程接种方法统计出的菌落数往往比活菌的实际数目多，因此统计结果用菌落数而不是用活菌数表示
6．工业上利用谷氨酸棒状杆菌生产谷氨酸。关于谷氨酸的工厂化生产，下列说法错误的是（ ）
A．工厂化生产谷氨酸的菌种一般从自然界中筛选或者通过诱变育种、基因工程获得
B．发酵结束后，采用过滤、沉淀等方法进行分离和干燥，即可得到产品
C．发酵过程中，中性或弱碱性的条件有利于谷氨酸的积累
D．发酵罐内的发酵是工厂化生产谷氨酸的中心环节，需严格控制发酵条件
7．为探究提高辽宁地区蓝莓品质和产量的新途径，以丹东蓝莓的主要品种——H5蓝莓为实验材料进行脱毒处理，其技术路线为：取材→消毒→愈伤组织培养→出芽→生根→移栽。下列有关叙述错误的是（ ）
A．诱导形成愈伤组织期间一般不需要光照，后续培养中，每日需要给予适当时间和强度的光照
B．消毒时需用酒精处理，无菌水清洗后，再用次氯酸钠溶液对幼嫩的茎段等进行处理
C．分化出芽和生根所用的激素浓度、用量的比例不相同
D．实验中使用的培养基和所有的器具都要消毒，接种过程必须在酒精灯火焰旁进行
8．珍稀植物红豆杉因能产生具有良好抗癌作用的紫杉醇而闻名。下图所示为相关实验流程，相关叙述错误的是（ ）
A．诱导愈伤组织需要考虑外植体的取材部位、培养基组成和激素种类等
B．利用植物细胞培养技术获得初生代谢产物紫杉醇能避免大量破坏野生红豆杉种群
C．用液体培养基扩大培养愈伤组织生产紫杉醇时，通常要通入无菌空气
D．同一株植物不同部位的组织细胞经诱导培养获得的植株基因型不一定相同
9．对某种动物的肝肿瘤细胞进行细胞培养，下列说法正确的是（ ）
A．传代培养时，用胰蛋白酶处理悬浮的细胞，再用离心法收集
B．细胞培养应在含的恒温培养箱中进行，CO₂的主要作用是刺激细胞呼吸
C．定期更换培养液是为了给体外培养的细胞提供无菌环境
D．在合成培养基中，通常需加入血清等天然成分
10．2017年，某国批准了首例使用细胞核移植技术培育“三亲婴儿”的申请。其培育过程可选用如下技术路线。下列叙述错误的是（ ）
A．捐献者的卵母细胞去核实质是去除细胞中的纺锤体—染色体复合物
B．该技术涉及动物细胞培养、动物细胞核移植等操作
C．该技术可以有效避免母亲红绿色盲致病基因遗传给后代
D．对捐献者的卵母细胞去核可以采用显微操作法
11．下列有关胚胎工程的叙述，正确的是（ ）
A．自然条件下，哺乳动物的精子获能发生在睾丸的曲细精管内
B．受精的标志是在卵细胞膜和透明带之间观察到两个第二极体
C．对桑葚胚进行胚胎分割时，应将内细胞团均等分割
D．在胚胎移植前，可以取滋养层细胞做DNA分析来进行遗传病的筛查
12．下列关于“DNA的粗提取与鉴定”实验的叙述，错误的是（ ）
A．利用DNA不溶于酒精溶液，而某些蛋白质能溶于酒精溶液，可将DNA与蛋白质分离
B．将实验材料的研磨液倒入离心管中，离心后取沉淀物备用
C．在用预冷的酒精沉淀DNA时，要用玻璃棒沿一个方向搅拌，防止DNA断裂
D．利用DNA能溶于2ml/LNaCl溶液的原理，可将提取的丝状物或沉淀物溶解于其中
13．图甲为培育转基因生物时选用的载体，图乙是含有目的基因的一段DNA序列，图中标注了相关限制酶的酶切位点。下列叙述错误的是（ ）
A．若通过PCR技术获取该目的基因，应该选用引物a和引物c
B．构建表达载体时，为防止目的基因自身环化，可选用Bc1Ⅰ和HinⅢ两种限制酶切割
C．若将基因表达载体导入大肠杆菌中，需用Ca²⁺处理大肠杆菌
D．利用含四环素的培养基就可以直接筛选出成功导入表达载体的受体细胞
14．红细胞生成素（EPO）是人体内促进红细胞生成的一种糖蛋白，可用于治疗肾衰性贫血等疾病。由于天然EPO来源极为有限，某科研团队采用基因工程培育转基因羊作为乳腺生物反应器，使其能合成EPO。下列说法错误的是（ ）
A．将含EPO基因的表达载体导入羊的乳腺细胞中，可得到乳腺生物反应器
B．构建基因表达载体时，需将EPO基因与乳腺中特异表达的基因的启动子重组在一起
C．该转基因羊中的EPO基因可在羊的乳腺细胞中表达
D．可通过PCR技术检测EPO基因是否插入羊的基因组
15．科研人员借助蛋白质工程定向设计改变了胰岛素中的某些氨基酸，提高了胰岛素在患者体内的稳定性，延长了其作用时间。下列有关叙述错误的是（ ）
A．蛋白质工程的实质是通过改造或合成基因来改造现有蛋白质或制造一种新的蛋白质
B．蛋白质工程是在基因工程基础上延伸出来的第二代基因工程
C．改造胰岛素应首先从设计胰岛素基因中的脱氧核苷酸序列出发
D．蛋白质工程难度很大，因为蛋白质发挥功能必须依赖于正确的高级结构
二、不定项选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。在每小题给出的四个选项中，有一项或多项符合题目要求。全部选对得3分，选对但不全得1分，有选错得0分。
16．化学需氧量（COD）是衡量污水中有机污染物含量的重要指标。从某污水处理系统中分离出多种细菌，经分离筛选获得具有高效降低COD能力的菌株，过程如图所示。下列相关说法错误的是（ ）
A．培养具有高效降低COD能力的菌株的培养基常用高压蒸汽灭菌
B．制备牛肉膏蛋白胨固体培养基时，需灭菌处理并冷却到室温再进行倒平板
C．若该固体培养基上长出的平均菌落数为200，则该稀释度符合计数要求
D．从固体培养基中挑取单菌落后接种到液体培养基中培养，目的是纯化菌株
17．运用植物细胞工程技术，可以培育单倍体植株和进行细胞产物的工厂化生产，下列有关说法错误的是（ ）
A．利用植物细胞培养生产紫草宁时，需要把外植体培养成完整的紫草植株
B．细胞产物的工厂化生产主要是利用促进细胞生长的培养条件，提高了单个细胞中次生代谢物的含量
C．单倍体育种中，需经过植物组织培养和诱导染色体加倍，以得到能稳定遗传的优良品种
D．利用花药通过植物组织培养获得的单倍体植株可作为研究遗传突变的理想材料
18．抗体—药物偶联物（ADC）是通过化学键将具有生物活性的小分子药物连接到单克隆抗体上，单克隆抗体可作为载体将小分子药物靶向运输到目标细胞中，ADC的具体制作流程如图所示。下列叙述错误的是（ ）
A．步骤①的常用方法都适用于植物体细胞杂交
B．步骤②是用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞
C．步骤③将多个细胞混合培养得到细胞群
D．ADC能降低药物的副作用，原因是药物能特异性地作用于靶细胞，避免其他细胞受损
19．随着生物科学技术的发展，生产动物新个体的方式变得越来越多样化。下图表示胚胎工程技术研究及应用的相关情况，供体1是良种荷斯坦高产奶牛，供体2是健康的黄牛，下列相关叙述正确的是（ ）
A．应用1、2中获得的良种小牛均为雌性，是有性生殖的产物
B．应用2中需要对供体1和受体母牛同时进行超数排卵处理
C．胚胎移植实质上是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移
D．胚胎移植的优势是可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力，受体的主要职能是生产具有优良遗传特性的胚胎
20．下列关于重组DNA技术的叙述，错误的是（ ）
A．限制酶、DNA连接酶和质粒是重组DNA技术需要使用的基本工具酶
B．限制酶切割DNA分子一次可断开2个磷酸二酯键，产生2个游离的磷酸基团
C．用做分子运输车的质粒常有特殊的抗生素合成基因，便于重组DNA分子的筛选
D．E．cliDNA连接酶既能连接黏性末端，也能连接平末端
三、非选择题：本题共5小题，共55分。
21．（9分）在2023年海洋生态保护修复典型案例中，“辽宁省大凌河口滨海湿地生态修复优秀案例”得到了各界的关注。养殖围堰占用了滨海湿地，割裂了河口天然潮沟，盐沼植被逐渐退化，自然湿地生态系统功能受损。因地制宜地采取潮沟清淤疏浚、盐沼植被修复、海堤生态化等修复措施，使生态修复效果显著，如今的大凌河口重现了“红滩绿苇、鸥鹭齐飞”的生态景观。据此回答下列相关问题：
（1）随着该地区湿地生态环境的有效改善，引来众多久未谋面的珍稀濒危鸟类回归，带动众多摄影、观鸟爱好者到当地打卡、留念，湿地有着蓄水防洪等重要作用，以上体现了生物多样性的__________________价值。
（2）当地政府对国家一级保护动物黑嘴鸥的栖息地进行了生态修复，该措施属于对黑嘴鸥进行______________________________，这是对生物多样性最有效的保护。该保护措施除了建立自然保护区外，还可以在原地建立__________________________。
（3）为了进一步改善水质，需要有效选择并合理布设多种水生植物，这主要遵循了生态工程的__________________原理。构建“旅游—休闲娱乐—生态保护”为一体的经济模式，在改善生态环境的同时，旅游业也为当地居民提供了更多就业机会，创造了更多的经济价值，这主要遵循了生态工程的______________________原理。
22．（11分）磷是植物生长的重要元素之一，而施入土壤的磷肥中的大部分磷都成了不能吸收的难溶性磷酸盐。科研人员从某果园土壤中选出能将难溶性磷酸盐转化成能吸收的可溶性磷的高效解磷菌株，主要流程见下图，请回答下列问题：
（1）步骤③将土壤悬浮液稀释了____________倍。图中对土壤悬浮液进行系列梯度稀释的目的是________________________________________________。
（2）经步骤①—③的一系列梯度稀释后，若在④所示的3个平板上分别涂布稀释液0.1ml，经适当培养后，培养基上得到的菌落数分别是：39、38、37，则每克土样中的活菌数为______个。除上述活菌计数外，还可以用__________________________法进行微生物计数，这种方法统计的结果往往较实际值__________________（偏低或偏高），原因是__________________________________________________。
（3）步骤④中待菌落长好后挑出溶磷圈直径与菌落直径比值较______________的菌落。为进一步测定初步筛选的三种菌株实际溶解磷的能力，研究人员将它们接种到基础培养基中，摇床培养，定期取上清液，测定溶液中可溶性磷含量，得到如图所示曲线。
结果表明最优良的解磷菌株是__________________________________。
23．（11分）科学家利用白菜（2N=20）、甘蓝（2N=18）设计了如图培育过程，以期获得“白菜一甘蓝”蔬菜新品种，它具有生长期短、耐热性强、易储存等优点，请回答下列问题：
（1）为了得到原生质体A、B，需先用______________________________处理白菜和甘蓝的细胞，人工诱导原生质体融合有物理法和化学法，常用的化学方法包括__________________（写出两种），融合完成的标志是______________________________________________________。
（2）在鉴定杂种原生质体时，科学家利用红色荧光和绿色荧光分别标记白菜和甘蓝原生质体膜上的蛋白质，用显微镜观察，根据细胞膜表面荧光的不同可观察到______________种不同的原生质体（只考虑两两融合的情况），从中筛选出“白菜一甘蓝”原生质体培养获得杂种植株，该杂种植株属于________倍体植株。
（3）这种将白菜和甘蓝的体细胞在一定条件下融合成杂种细胞，并将杂种细胞培育成新植物体的技术称为______________________________________，其依据的生物学原理主要有________________________
______________________________________________。
（4）植物体细胞杂交技术和传统杂交技术相比，优点是___________________________________________
_____________。
24．（12分）番木瓜是一种优质热带水果，在我国有“岭南佳果”之美誉。但番木瓜容易受番木瓜环斑病毒（PRSV）的侵袭，导致产量大大下降。科研人员将PRSV的衣壳蛋白基因导入番木瓜，培育出转基因番木瓜。据此回答下列问题：
（1）常用__________技术快速扩增PRSV的衣壳蛋白基因，该技术需提供DNA模板，分别与两条模板链结合的两种引物，其中引物的作用是______________________________________。若1个DNA分子复制10次，需要在缓冲溶液中至少加入__________________个引物。
（2）图中步骤1，90℃高温使DNA双链打开，这一步称为____________________________。当温度降低时，引物与模板3'端结合，在______________________________________的作用下，DNA单链沿模板延伸。
（3）科研人员在一株野生型番木瓜中提取到一种抗PRSV的蛋白M，利用相关技术使蛋白M的某个氨基酸发生改变，提高了蛋白M抗PRSV的性能，该技术属于____________________________________。请选择该技术合适的措施编号并排序：________________________。（用编号和箭头表示）
①重组DNA分子导入受体细胞②随机改变衣壳蛋白基因的序列
③分析突变蛋白功能，设计结构④改变衣壳蛋白基因的特定序列
⑤培养获得高抗PRSV的蛋白M⑥将改变后的衣壳蛋白基因与质粒重组
25．（12分）埃博拉病毒（EBOV）是一种能导致人类出血热的致死性病毒，威胁人类健康。EBOV的NP蛋白在病毒复制中具有重要作用，也是检测EBOV的重要靶蛋白。实验人员用NP蛋白免疫小鼠来制备抗EBOV单克隆抗体，过程如图1所示。图2为实验人员培育表达NP蛋白玉米所需的NP基因片段和Ti质粒。T—DNA是农杆菌的Ti质粒上的DNA片段。回答下列问题：
图1
图2
（1）图1中“筛选1”过程，在特定培养基上不能存活的细胞是____________________________________
________________________________________，“筛选1”得到的杂交瘤细胞能产生____________（填“一种”或“多种”）抗体。“筛选2”得到的细胞群具有___________________________________________
___________的特点。
（2）为了使NP基因能够表达和发挥作用，需要____________________________________，这是培育表达NP蛋白玉米的核心工作。由图2可知，将目的基因导入玉米细胞的方法为_________________________
_________，要筛选出含有NP基因的玉米细胞，需将其接种到含______________（填“潮霉素”或“卡那霉素”）的培养基上培养。
（3）NP基因进入玉米细胞后是否稳定表达其遗传特性，需要通过检测和鉴定才能知道，从玉米中提取NP蛋白，用相应的抗体进行__________________________，检测NP基因是否翻译成NP蛋白。
2023—2024学年度下学期中考试高二试题
生物答案
一、单项选择题
1—5 CDCBD6—10 BDBDC11—15 DBDAC
二、不定项选择题
16—20 BDABACDCACD
三、非选择题
21、【答案】（除标注外，每空2分，共9分）
（1）直接价值和间接
（2）就地保护；国家公园（1分）
（3）自生；整体
22、【答案】（除标注外，每空1分，共11分）
（1）1000；使培养基表面生长的一个单菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌（保证每个菌落都是由一个单细胞繁殖而来）
（2）3．8×10⁶（2分）；显微镜直接计数（2分）；偏高；统计的是死菌数和活菌数的总和（2分）
（3）大；M—3—01
23、【答案】（除标注外，每空1分，共11分）
（1）果胶酶和纤维素酶；聚乙二醇（或PEG）融合法、高Ca²⁺—高pH融合法（2分，1点1分）；杂种细胞再生出新的细胞壁
（2）3；四
（3）植物体细胞杂交；细胞膜的流动性、植物细胞的全能性（答出1点给1分）
（4）打破生殖隔离，实现远缘杂交育种（2分）
24、【答案】（除标注外，每空2分，共12分）
（1）PCR（1分）；使DNA聚合酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸；211—2
（2）变性（1分）；耐高温的DNA聚合酶（TaqDNA聚合酶）
（3）蛋白质工程；③→④→⑥→①→⑤
25、【答案】（除标注外，每空2分，共12分）
（1）未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞（答出1点给1分）；多种（1分）既能无限增殖，又能产生所需抗体（答不全，不得分）
（2）构建基因表达载体（基因表达载体的构建）；农杆菌转化法；潮霉素（1分）
（3）抗原—抗体杂交
详解：
1、解析：生态足迹是指维持某一人口单位生存所需生产资源及吸纳废物的土地及水域面积，A错误。延长食物链会增大生态足迹，B错误。生态足迹越大，人类所需的资源越大，对环境和生态的影响越大，D错误。
2、解析：长江禁渔计划主要是保护生物多样性的间接价值，维持生态稳定，A错误。生物多样性包括遗传多样性、物种多样性和生态系统多样性，野生远东豹曾经被猎杀导致数量骤减，直接降低了生物多样性中的基因多样性，B错误。建立种子库、基因资源库属于保护生物多样性的重要措施，但不属于易地保护，C错误。
3、解析：生态学的基本原理包括：自生、整体、协调和循环，选择净化能力强且能互利共存的多种水生生物修复湿地，体现了自生原理，C错误。
4、解析：家庭制作果醋时表面观察到的菌膜是醋酸菌在液面大量繁殖形成的，而制作泡菜时形成的白膜是酵母菌繁殖形成的，A错误。果酒、果醋的酿制过程也是微生物生长繁殖的过程，如发酵初期酵母菌大量繁殖，B正确。果醋制作过程中，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成乙酸，随着乙酸增加，溶液的pH逐渐降低；果酒制作过程中，酵母菌无氧呼吸产生CO₂和酒精，CO₂溶于水形成碳酸，随着CO₂浓度的增加，溶液的pH逐渐降低，因此果酒、果醋制作过程中溶液的pH都是逐渐降低，C错误。在制作泡菜的过程中，要注意控制温度、时间和食盐的用量。温度过高、食盐用量过低、腌制时间过短，容易造成细菌大量繁殖，亚硝酸盐含量增加，D错误。
5、解析：据图分析，接种后的菌落均匀分布，据此推测该过程接种的方法为稀释涂布平板法，接种后的培养皿不能立即进行倒置培养，A正确；进行②过程培养时，为了防止将完全培养基中特定营养成分带入基本培养基，应将丝绒布先转印至基本培养基上再“复印”至完全培养基上，B正确；在基本培养基中氨基酸缺陷型菌株不能生长，而在完全培养基中能够生长，比较基本培养基和完全培养基中的菌落可知氨基酸缺陷型菌株应从基本培养基上没有、完全培养基上对应位置有的菌落中挑选，C正确；此种接种方法统计出的菌落数往往比活菌的实际数目少，因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，因此统计结果用菌落数而不是用活菌数表示，D错误。
6、解析：发酵工程选育的菌种一般从自然界中筛选或者通过诱变育种、基因工程获得，A正确；如果发酵产品是微生物细胞本身，可在发酵结束之后，采用过滤、沉淀等方法将菌体分离和干燥，即可得到产品；如果产品是代谢物，可根据产物的性质采取适当的提取、分离和纯化措施来获得产品，谷氨酸属于代谢物，B错误；谷氨酸棒状杆菌是谷氨酸发酵的主要菌种，属于细菌，发酵过程中，中性或弱碱性的条件有利于谷氨酸棒状杆菌的繁殖，有利于谷氨酸的积累，C正确；发酵条件能影响产品的品质和产量，发酵罐内的发酵是工厂化生产谷氨酸的中心环节，需严格控制发酵条件，D正确。
7、解析：诱导形成愈伤组织期间一般不需要光照，后续培养中，每日需要给予适当时间和强度的光照，A正确；消毒过程先用酒精处理30秒，无菌水清洗两至三次后次氯酸钠溶液处理30分钟，B正确；生长素和细胞分裂素的浓度、用量的比例，对愈伤组织的形成和分化会有影响，直接影响植物细胞的发育方向，C正确；实验中使用的培养基和所有的器具都要灭菌处理，D错误。
8、解析：诱导愈伤组织需要考虑外植体的取材部位、培养基组成和激素种类等，A正确；紫杉醇属于次生代谢产物，B错误；用液体培养基培养固定在一定空间内的愈伤组织生产紫杉醇时，需要通入无菌空气，有利于细胞进行有氧呼吸，C正确；同一植株不同部位的组织细胞经诱导培养获得的植株基因型不一定相同，如由花粉粒培养获得的愈伤组织细胞内染色体数目是正常体细胞的一半，D正确。
9、解析：传代培养时，悬浮的细胞直接用离心法收集，A错；CO₂的主要作用是维持培养液的pH，B错；定期更换培养液是为了保证给体外培养的细胞提供无毒环境，C错；由于人们对细胞所需的营养物质尚未全部研究清楚，因此在使用合成培养基时，通常需要加入血清等一些天然成分，D正确。
10、解析：减数第二次分裂中期卵母细胞中的“核”其实是纺锤体—染色体复合物，“去核”是去除该复合物，A正确；三亲婴儿的受精卵中的核遗传物质来自于母亲和父亲（精子），红绿色盲基因位于X染色体上，故会传给后代，C错误；目前动物细胞核移植技术中普遍使用的去核方法是显微操作法，也有人采用梯度离心、紫外线短时间照射和化学物质处理等方法，D正确。
11、解析：自然条件下，哺乳动物的精子获能发生在雌性动物生殖道内，A错误；受精的标志是在卵细胞膜和透明带之间观察到两个极体或雌、雄原核，多数哺乳动物的第一极体不进行减数第二次分裂，不会形成两个第二极体，观察到这两个极体为一个第一极体和一个第二极体，B错误；在分割囊胚阶段的胚胎时要注意将内细胞团均等分割，C错误；在胚胎移植前可以取滋养层细胞进行性别鉴定、遗传病筛查等，对于人工控制动物性别、动物繁育健康后代具有重要意义，D正确。
12、解析：DNA不溶于酒精溶液，但细胞中的某些蛋白质溶于酒精溶液，可利用这个特性将DNA与蛋白质分离，A正确；将实验材料的研磨液倒入离心管中，离心后DNA片段较轻会上浮，破碎的细胞、组织较重会下沉，故应选上清液备用，B错误；在用预冷的酒精沉淀DNA时，要用玻璃棒沿一个方向搅拌，为了防止丝状的DNA搅碎，同时有利于DNA丝状物的挑出，C正确；DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同，DNA在2ml/L的NaCl溶液中的溶解度最大，可利用此特性将提取的丝状物或沉淀物溶解于NaCl溶液中，D正确。
13、解析：根据图甲可知为防止目的基因自身环化，可选用BclⅠ和HindⅢ两种限制酶切割，B正确；由于选择BclⅠ和HindⅢ这两种限制酶，破坏了氨苄青霉素抗性基因，但没有破坏四环素抗性基因，因此应该先用含四环素的培养基筛选出含有基因表达载体和普通质粒的大肠杆菌，再用含氨苄青霉素的培养基筛选含重组质粒的大肠杆菌，D错误。
14、解析：用显微注射技术将含EPO基因的表达载体导入羊的受精卵中，可得到乳腺生物反应器，A错误；在构建基因表达载体时，需要将EPO基因和乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起，这样才能使目的基因只在乳腺组织中表达，B正确；EPO基因与乳腺蛋白基因的启动子重组在一起，可以在羊的乳腺细胞中表达，其他细胞中不表达，C正确；目的基因进入受体细胞后，是否稳定维持和表达其遗传特性，只有通过检测与鉴定才能知道。可通过PCR技术检测EPO基因是否插入羊的基因组，D正确。
15、解析：蛋白质工程又称为第二代基因工程，其实质是通过改造或合成基因来改造现有蛋白质或制造一种新的蛋白质，A正确；B正确；胰岛素属于蛋白质，改造胰岛素应首先从设计预期的蛋白质结构出发，C错误；多数蛋白质除具有一级结构（即氨基酸顺序）外，还具有复杂的高级结构，即空间结构，而很多蛋白质的空间结构是人们目前还不清楚的，因此实施蛋白质工程的难度很大，D正确。
16、解析：培养基常用高压蒸汽灭菌，A正确。制备牛肉膏蛋白胨固体培养基时，需灭菌处理并冷却到50摄氏度再进行倒平板，B错误。为了保证结果准确，一般选择菌落数为30到300的平板进行计数。液体培养基中培养的目的是为了扩大培养，D错误。
17、解析：利用植物细胞培养生产紫草宁时，不需要培育出完整植株，培育出能产生紫草宁的组织细胞即可，A错误；细胞产物的工厂化生产是植物细胞工程的重要用途之一，培养过程中需要脱分化形成愈伤组织，然后悬浮培养愈伤组织细胞，培养的愈伤组织需要经过再分化产生特定的组织细胞后才能产生特定的细胞产物，提高了多个细胞次生代谢物的含量，B错误；单倍体育种中得到的单倍体植株需要经过诱导染色体加倍，才能得到能稳定遗传的优良品种，C正确；由于大多数单倍体植株的细胞中只含有一套染色体，染色体加倍后得到的植株的隐性性状容易显现，因此它是进行体细胞诱变育种和研究遗传突变的理想材料，D正确。
18、解析：步骤①的常用方法中包含灭活的病毒诱导，不适用于植物体细胞杂交，A错误；步骤①诱导动物细胞融合之后，需要经过步骤②对融合的细胞进行筛选，用特定的选择培养基筛选杂交瘤细胞，步骤③克隆化培养和抗体检测，B正确；步骤③将选出来的能分泌所需抗体的单个杂交瘤细胞进行培养得到细胞群，C错误；ADC能降低治疗药物的副作用，原因是抗体能特异性地作用于靶细胞，避免其他细胞受损，D错误。
19、解析：应用1获得的小牛为雌性，是无性生殖的产物，应用2获得的小牛由受精卵发育而来，性别未知，是有性生殖的产物。A错误；应用2需要对供体和受体母牛进行同期发情处理，只需要对供体进行超数排卵处理，B错误；供体的主要职能才是生产具有优良遗传特性的胚胎，D错误。
20、解析：质粒不是工具酶，A错，限制酶能够识别双链DNA分子的特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的磷酸二酯键断开，即一条链断1个磷酸二酯键，产生1个游离的磷酸基团，所以限制酶切割DNA分子一次可断开2个磷酸二酯键，产生2个游离的磷酸基团，B正确；作为载体的质粒通常采用抗性基因（四环素抗性基因、氨苄青霉素抗性基因）作为标记基因，便于筛选成功导入重组DNA分子的受体细胞，C错误；E．cliDNA连接酶只能连接黏性末端，不能连接平末端，D错误。
21、答案：（1）直接价值和间接（2分，答对1点给1分）
（2）就地保护（2分） 国家公园（1分）
（3）自生（2分） 整体（2分）
22、答案：（1）1000（1分）保证每个菌落都是由一个单细胞繁殖而来（1分）
（2）3.8×106（2分） 显微镜直接计数（2分） 偏高（1分）统计的是死菌数和活菌数的总数（2分）
（3）大（1分）M—3—01（1分）
23、答案：（1）果胶酶和纤维素酶（1分）聚乙二醇（或PEG）融合法、高Ca²⁺—1高pH融合法（2分，1点1分）杂种细胞再生出新的细胞壁（1分）（2）3（1分）四（1分）（3）植物体细胞杂交（1分）细胞膜的流动性、植物细胞的全能性（2点，1点1分）（4）打破生殖隔离，实现远缘杂交育种（2分）
24、答案：（1）PCR（1分）使DNA聚合酶能够从引物的端开始连接脱氧核苷酸（2分）（2分）
（2）变性（1分）耐高温的DNA聚合酶（TaqDNA聚合酶）（2分）
（3）蛋白质工程（2分）③→④→⑥→①→⑤（2分）
25、答案：（1）未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞（2分，1点1分） 多种（1分）既能无限增殖，又能产生所需抗体（2分，不拆分）
（2）构建基因表达载体（基因表达载体的构建）（2分）农杆菌转化法（2分） 潮霉素（1分）
（3）抗原—抗体杂交（2分）