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新高考生物三轮冲刺易错点17 生物工程的“四个”不相等（含解析）
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这是一份新高考生物三轮冲刺易错点17 生物工程的“四个”不相等（含解析），共18页。
01 易错陷阱（四大陷阱）
02 举一反三
【易错点提醒一】脱毒苗≠抗毒苗
【易错点提醒二】杂交瘤细胞≠分泌所需抗体
【易错点提醒三】卵子受精≠受精完成
【易错点提醒四】受体细胞有抗性≠导入重组DNA
03 易错题通关
易错陷阱1：利用植物组织培养技术培养植物分生区可获得抗毒苗
【分析】植物组织培养技术培养植物分生区获得的是脱毒苗，没有抗病毒的能力不是抗毒苗（基因工程可得到）。
易错陷阱2：第一次筛选得到的杂交瘤细胞即可分泌所需的抗体
【分析】经过克隆化培养和抗体检测筛选后得到的杂交瘤细胞才能分泌所需抗体。
易错陷阱3：卵子受精就代表受精作用完成
【分析】形成两个极体代表卵子受精，常以观察到两个极体或者雌、雄原核作为受精的标志。
易错陷阱4：受体细胞表现抗性就表示导入重组DNA
【分析】受体细胞表现抗性也有可能导入空载体。
【易错点提醒一】脱毒苗≠抗毒苗
【例1】甘薯由于具有增强免疫功能、防癌抗癌、抗衰老、防止动脉硬化等作用，故越来越被人们喜爱。但甘薯属于无性繁殖作物，同时又是同源六倍体，具有自交不育和杂交不亲和性，这使甘薯生产和育种存在诸多常规方法难于解决的问题。下列相关操作不合理的是（ ）
A．用于快速繁殖优良品种的植物组织培养技术，可以解决种苗用量大、成本高的问题
B．利用茎尖分生组织培养脱毒苗，使植株具备抗病毒的能力，产品质量得到提高
C．利用原生质体融合实现体细胞杂交，克服杂交不亲和，可以充分利用遗传资源
D．利用培养的愈伤组织进行诱变育种，可以显著提高变异频率，有利于缩短育种年限
易错分析：脱毒苗不具备抗病毒的能力。
【答案】B
【解析】植物细胞工程应用之一是：用于快速繁殖优良品种的植物组织培养技术，被人们形象地称为植物的快速繁殖技术，也叫作微型繁殖技术。它不仅可以高效、快速地实现种苗的大量繁殖，还可以保持优良品种的遗传特性。A正确；茎尖等分裂旺盛部位基本无病毒感染。目前采用茎尖组织培养技术脱去病毒，已在许多作物上获得成功。脱毒的作物不仅能增产而且品质也明显优于没有脱毒的作物。脱毒≠抗病毒，B错误；原生质体的融合原理是细胞膜具有一定的流动性，通过去壁、促融、细胞壁再生、组织培养技术后可培育出异源杂合体，C正确；愈伤组织具有分裂旺盛的优点，适合用于诱变育种，能提高突变频率，有利于缩短育种年限。D正确。
【变式1-1】下列实例培育过程中应用到植物组织培养技术的是（ ）
①制造人工种子
②培育抗盐转基因植物
③培育抗病毒转基因烟草
④培育单倍体
A．②③④B．①③④C．①②④D．①②③④
【答案】D
【解析】①通过植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料，通过人工薄膜包装得到的种子，①正确；②利用基因工程获得含抗盐基因的重组细胞，经过植物组织培养获得抗盐转基因植物，②正确；③利用基因工程获得抗病毒转基因烟草细胞，也需要经过植物组织培养获得抗病毒转基因烟草，③正确；④利用花粉离体培养技术培育单倍体幼苗，其中运用到植物组织培养，④正确；
【变式1-2】辣椒素作为一种生物碱广泛用于食品保健、医药工业等领域。辣椒素的获得途径如图。下列表述正确的是（ ）
A．实现①过程的条件是外植体细胞发生基因突变
B．①过程受外源激素的调控，②过程受内源激素的调控
C．获得脱毒苗常用的外植体是根和芽，脱毒苗具有更强的抗病毒能力
D．通过细胞培养获得辣椒素的过程不需要体现细胞的全能性
【答案】D
【解析】①和②分别表示脱分化和再分化，细胞核中的遗传物质不变，基因发生了选择性表达，但没发生基因突变，A错误；在进行植物组织培养时，需要添加外源激素如生长素和细胞分裂素，需要在培养基中添加适当比例的生长素和细胞分裂素诱导生根、生芽，B错误；因为植物顶端分生区附近的病毒极少，甚至没有病毒，所以将茎尖进行离体培养能获得脱毒植株，脱毒苗不具有更强的抗病毒能力，C错误；由题图可知辣椒素是细胞代谢产物，通过细胞培养得到高产细胞系时就可产生，不需要发育成植株，所以不需要体现植物细胞的全能性，D正确。
【变式1-3】束顶病毒能够引起香蕉的严重病害，科研人员用感病植株的茎尖作为外植体进行培养获得脱毒苗，实验结果如下图所示。下列有关叙述正确的是（ ）
A．感病植株的茎尖需经灭菌处理后才能用于脱毒苗的培育
B．可使用光学显微镜观察病毒颗粒来检测茎尖脱毒率
C．超低温保存感病植株茎尖可提高其脱毒率，降低成活率
D．茎尖脱分化形成的愈伤组织是一团呈正方形的薄壁细胞
【答案】C
【解析】灭菌会将植株的茎尖杀死，只能需要对感病植株的茎尖消毒处理，细胞保持活性，A错误；光学显微镜无法观察到病毒颗粒，B错误；从图中可以看出，经过超低温处理后，感病植株的脱毒率增加，但成活率由93.75%下降至55%，C正确；
愈伤组织是无定形状态，D错误。
【易错点提醒二】杂交瘤细胞≠分泌所需抗体
【例2】已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基蝶呤阻断。人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但其一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤细胞中尽管没有S途径，但其能不断分裂增殖。如图是科研人员为制备抗新冠病毒单克隆抗体而设计的流程图。下列叙述正确的是（ ）
A．图中过程①获得的淋巴细胞都能产生抗新冠病毒的抗体
B．过程③使用的HAT培养基中要有糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，通常还需加入血清等天然成分；除此之外，还必须加入动物激素
C．可分别从④的各个小室中提取抗体，与新冠病毒混合，出现阴性反应的小室中的细胞就是所需的杂交瘤细胞
D．制备的单克隆抗体可以用于新冠病毒的检测，利用了抗原抗体特异性结合的原理
易错分析：第二次筛选后得到的杂交瘤细胞才能分泌所需抗体。
【答案】D
【解析】图中过程①获得的淋巴细胞不都能产生抗新冠病毒的抗体，A错误；过程③使用的HAT培养基中要有糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，通常还需加入血清等天然成分；该培养基为选择培养基，还需要加入氨基蝶呤以抑制骨髓瘤细胞的D途径，使培养基中只有杂交瘤细胞能增殖，B错误；④过程是筛选能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，可分别从各个小室中提取抗体，与新冠病毒混合，出现抗原抗体杂交带（阳性）的小室中的细胞就是所需的杂交瘤细胞，C错误；
抗体能与引起它产生的抗原发生特异性结合反应，制备的单克隆抗体可以用于新冠病毒的检测，就是利用了抗原抗体能发生特异性结合的原理，D正确。
【变式2-1】．“筛选”是生物工程中常用的技术手段。下列相关叙述正确的是（ ）
A．利用以尿素为唯一氮源的培养基可以筛选出尿素分解菌
B．在小鼠胚胎细胞原代培养过程中，一定能筛选出能无限增殖的细胞
C．植物体细胞杂交过程中，原生质体融合后获得的细胞不需要进行筛选
D．单克隆抗体制备过程中，第一次筛选出的细胞既能无限增殖又能产生所需抗体
【答案】A
【解析】以尿素为唯一氮源的培养基上，其他微生物因为缺少氮源而不能生存，故可以筛选出尿素分解菌，A正确；在小鼠胚胎细胞原代培养过程中，细胞分裂能保持正常的二倍体核型，故不一定能筛选出能无限增殖的细胞，B错误；植物体细胞杂交过程中，原生质体融合后获得的细胞有多种融合类型，故需要进行筛选，C错误；单克隆抗体制备过程中，第一次筛选出的细胞既能无限增殖又能产生特定抗体，但不一定是所需抗体，D错误。
【变式2-2】下图表示抗人体胃癌的单克隆抗体的制备过程，有关叙述不正确的是（ ）
A．图中给实验小鼠注射的甲是能与抗人体胃癌抗体特异性结合的抗原
B．电融合法可诱导细胞融合获得乙
C．用特定的选择培养基对乙进行筛选，融合细胞均能生长，未融合细胞均不能生长
D．对丙需进行克隆化培养和抗体检测，多次筛选后可获得大量能分泌所需抗体的丁
【答案】C
【解析】图中给小鼠注射甲，能产生分泌特异性抗体的B淋巴细胞，则甲属于与抗人体胃癌抗体特异性结合的抗原，A正确；利用聚乙二醇（化学法）、灭活的病毒（生物法）和电融合法（物理法）可诱导细胞融合获得杂种细胞，B正确；用特定的选择培养基对乙筛选，具有同种核的融合细胞和未融合的细胞均不能生长，只有融合的杂种细胞能生长，C错误；对丙杂交瘤细胞经过选择培养基的筛选，并经单一抗体检测后，多次筛选后培养能产生特定抗体的杂交瘤细胞即可制备单克隆抗体丁，D正确。
【变式2-3】将特定药物与单克隆抗体相结合制成的“生物导弹”，能够用于杀死人类某些癌细胞，其过程如图所示，下列有关叙述正确的是（ ）
A．B淋巴细胞和骨髓瘤细胞均是从小鼠的脾中提取的
B．经①形成的杂交瘤细胞都能无限增殖并能产生所需抗体
C．①促进细胞融合可利用灭活的病毒，不可以利用聚乙二醇作诱导剂
D．抗体的靶向作用使③过程具有高度特异性
【答案】D
【解析】B淋巴细胞是从小鼠的脾中提取的，骨髓瘤细胞是体内浆细胞的恶性克隆性增生形成的，A错误；经①诱导融合过程形成的细胞不都是能无限增殖并产生相应抗体的细胞，还需要经过两次筛选才能获得无限增殖并产生相应抗体的杂交瘤细胞，B错误；①促进动物细胞融合，可利用灭活的病毒，也可以利用聚乙二醇作诱导剂， C错误；过程③中由于单克隆抗体具有高度特异性，使其靶向作用非常准确，D正确。
【易错点提醒三】卵子受精≠受精完成
【例3】胚胎工程的许多技术，实际是在体外条件下，对动物自然受精和早期胚胎发育条件进行的模拟操作，下列对体外受精的叙述错误的是（ ）
A．受精前精子需要获能，卵子需要成熟
B．防止多精入卵的第一道屏障是顶体反应
C．卵子受精的重要标志是卵细胞膜和透明带的间隙看到两个极体
D．受精过程结束的标志是雌、雄原核的融合
易错分析：卵子受精的重要标志是卵细胞膜和透明带的间隙看到两个极体，受精过程结束的标志是雌、雄原核的融合。
【答案】B
【解析】当次级卵母细胞发育到MⅡ中期时才具备与精子受精的能力，受精前精子需要获能，卵子需要成熟，A正确；受精过程中，防止多精入卵的两道屏障是透明带反应和卵细胞膜反应，其中透明带反应是防止多精入卵的第一道屏障，B错误；
卵子受精的重要标志是卵细胞膜和透明带的间隙看到两个极体，C正确；受精过程结束的标志是雌、雄原核的融合，D正确。
【变式3-1】体外受精和胚胎移植都是在医学和农业生产上应用较多的胚胎工程技术。下列相关叙述错误的是（ ）
A．采集的精子经获能处理后才能用于体外受精，受精完成的标志是雌雄原核融合
B．代孕母畜可以是同种的，也可以是不同物种的，需对其进行同期发情处理
C．在胚胎移植前，可取样滋养层，进行性别鉴定、遗传病筛查等，保证胚胎质量
D．进行胚胎移植前，不需要对供体和受体进行免疫排斥检查
【答案】B
【解析】采集到的卵母细胞需要在体外培养成熟（减数第二次分裂中期）才能与获能的精子受精，受精完成的标志是雌雄原核融合完成，A正确；胚胎工程的代孕母畜要求是同种的、生理状况相同的，B错误；滋养层细胞将来发育为胎膜和胎盘，在胚胎移植前，可取样滋养层，进行性别鉴定、遗传病筛查等，保证胚胎质量，C正确；由于受体几乎不对外来胚胎发生免疫排斥，故进行胚胎移植前，不需要对供体和受体进行免疫排斥检查，D正确。
【变式3-2】科学家采用体外受精技术获得北方白犀牛胚胎，并将其移植到南方白犀牛体内，使后者成功妊娠并产仔，该工作有助于恢复濒危北方白犀牛的种群数量。下列叙述正确的是（ ）
A．此过程涉及的操作有超数排卵、精子获能处理、细胞核移植等
B．体外受精时若观察到雌雄原核核膜融合成一个细胞核，可作为受精标志
C．可通过将桑葚胚阶段的内细胞团均等分割技术增加其数量
D．胚胎移植过程中的两次检查，第二次是对受体母犀牛进行是否妊娠的检查
【答案】D
【解析】分析题意科学家采用体外受精技术获得北方白犀牛胚胎，再通过胚胎移植到南方白犀牛体内，使后者成功妊娠并产仔，因此要进行超数排卵、精子获能处理、并对受精卵进行胚胎培养，该过程为有性生殖，因此不涉及细胞核移植，A错误；
判断卵细胞受精的标志是在卵细胞膜与透明带之间观察到两个极体，B错误；分割囊胚阶段的胚胎时，要将内细胞团均等分割，桑葚胚阶段无内细胞团，C错误；
胚胎移植过程中的两次检查，第一次是对胚胎进行质量检查，第二次是对受体母畜进行是否妊娠的检查，D正确。
【变式3-3】“三亲婴儿”的培育技术过程如图，据图分析下列叙述正确的是（ ）
A．对捐献者的要求是不能患有任何遗传病
B．该技术可避免母亲的线粒体遗传病基因传递给后代
C．“三亲婴儿”的培育过程中可直接将受精卵移植到子宫内
D．观察到两个极体可以作为判断卵子是否受精完成的标志
【答案】B
【解析】捐献者提供的是去核卵母细胞，提供了细胞质遗传物质，只需不患细胞质遗传病即可，A错误；线粒体遗传病属于细胞质遗传，母亲只提供了细胞核，可避免将线粒体遗传基因传给孩子，B正确；“三亲婴儿”的培育过程中受精卵要发育到桑葚胚或囊胚阶段再移植到子宫内，C错误；在卵细胞膜和透明带的间隙观察到两个极体可以作为判断卵子是否受精的标志，D错误。
【易错点提醒四】受体细胞有抗性≠导入重组DNA
【例4】研究人员用下图1中质粒和图2中含目的基因的片段构建重组质粒（图中标注了相关限制酶切割位点），将重组质粒导入大肠杆菌后进行筛选及PCR鉴定。以下叙述正确的是（ ）
A．构建重组质粒的过程应选用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶
B．启动子上有RNA聚合酶的识别和结合位点
C．能在添加四环素的培养基上生存的一定是含有重组质粒的大肠杆菌
D．利用PCR鉴定含目的基因的大肠杆菌时应选用引物甲和引物乙
易错分析：能在添加四环素的培养基上生存的也可能是只含有质粒的大肠杆菌。
【答案】B
【解析】选择的限制酶应在目的基因两端存在识别位点，但BamHⅠ可能使质粒中的两种标记基因都破坏，因此只能选BclⅠ和HindⅢ两种限制酶切割，A错误；启动子上有RNA聚合酶的识别和结合位点 ，启动转录过程，B正确；能在添加四环素的培养基上生存的也可能是只含有质粒的大肠杆菌，C错误；PCR技术要求两种引物分别和目的基因的两条单链结合，沿相反的方向合成子链，故利用PCR鉴定目的基因时所用的引物为引物甲和引物丙，D错误。
【变式4-1】质粒是基因工程中最常用的载体，它存在于许多细菌体内。质粒上有标记基因如图所示，通过标记基因可以推知外源基因（目的基因）是否转移成功。外源基因插入的位置不同，细菌在培养基上的生长情况不同，如图表示外源基因插入位置（插入点有a、b、c），请根据表中提供细菌的生长情况，推测①②③三种重组后细菌的外源基因插入点，正确的一组是（ ）
A．①是c；②是b；③是aB．①是a和b；②是a；③是b
C．①是a和b；②是b；③是aD．①是c；②是a；③是b
【答案】A
【解析】第①组：细胞能在含氨苄青霉素培养基上生长，说明抗氨苄青霉素基因没有被破坏；细菌能在含四环素培养基上的生长，说明抗四环素基因没有被破坏。由此可知，外源基因插入的位置不是a、b，而是c；第②组：细胞能在含氨苄青霉素培养基上生长，说明抗氨苄青霉素基因没有被破坏；细菌不能在含四环素培养基上的生长，说明抗四环素基因被破坏。说明了外源基因插入位置是b，不是a；第③组：细胞不能在含氨苄青霉素培养基上生长，能在含四环素培养基上的生长，说明抗氨苄青霉素基因被破坏，抗四环素基因没有被破坏，由此可知，外源基因插入的位置是a，而不是b。
【变式4-2】将外源基因送入细胞通常是利用质粒作为载体。下列有关质粒的叙述，正确的是（ ）
A．质粒从细胞中提取出来后即可以直接使用，无须人工改造
B．质粒上常有特殊的标记基因，以便于重组DNA分子的筛选
C．质粒是具有自我复制能力的DNA分子，只存在于原核生物中
D．质粒一般只有一个限制酶切制位点，以便于目的基因插入
【答案】B
【解析】天然的质粒不能直接作为载体，基因工程中用到的质粒都是在天然质粒的基础上进行过人工改造的，A错误；载体上需要具有某些标记基因，以便于重组DNA分子的筛选，常见的标记基因有抗生素抗性基因等，B正确；质粒不只存在于原核生物中，如酵母菌中也含有质粒，C错误；质粒一般有一至多个限制酶的切割位点，以便于目的基因插入，D错误。
【变式4-3】乳酸菌经溶菌酶和洗涤剂处理后，其拟核DNA会缠绕在细胞壁碎片上，静置一段时间后，质粒将分布在上清液中，我们由此初步获得质粒DNA．下图为用限制酶处理所提取的产物并进行电泳分析的结果。有关DNA的粗提取与鉴定，下列分析正确的是（ ）
A．以洋葱为材料提取 DNA时可加入预冷的酒精溶液（体积分数为95%），以使蛋白质等物质析出
B．可将提取的DNA溶于2m l/LNaCl溶液中，加入二苯胺试剂并沸水浴5min进行鉴定
C．图中用限制酶Ⅰ和Ⅱ分别处理提取的产物所得到的电泳结果，说明未提取到质粒
D．溶菌酶能破坏乳酸菌的细胞壁，但不会破坏蓝细菌的细胞壁
【答案】B
【解析】以洋葱为材料提取DNA时可加入预冷的酒精溶液（体积分数为95%），是为了让DNA析出，A错误；可将提取的 DNA溶于2ml/LNaCl溶液中，加入二苯胺试剂并沸水浴5min 进行鉴定，B正确；用限制酶Ⅰ和Ⅱ分别处理提取的产物，电泳出现 1条带，说明提取到了环状质粒，且它们在质粒上各有一个切点，单独使用时将环状的质粒切成了链状，故只有一个条带；两种限制酶都使用时，能将其切成2个条带，C错误；细菌和蓝细菌的细胞壁主要成分都是肽聚糖，溶菌酶能溶解细菌和蓝细菌的细胞壁，D错误。
1．下图是将人的生长激素基因导入细菌B细胞内制造“工程菌”的示意图。已知细菌B细胞内不含质粒A，也不含质粒A上的基因。判断下列说法正确的是（ ）
A．工程菌产生的生长激素可以直接使用效果良好
B．将重组质粒导入细菌B常用的方法是用Ca2+处理细菌
C．目的基因成功表达的标志是受体细胞能在含有四环素的培养基上生长
D．将完成导入过程后的细菌涂布在含有四环素的培养基上，能生长的是只导入了质粒A的细菌
【答案】B
【解析】由于细菌无内质网和高尔基体，对合成的生长激素不能加工、修饰，故工程菌产生的生长激素不能直接使用，A错误；将目的基因导入细菌时，常用Ca2+处理细菌，使之处于能够吸收重组质粒的状态，B正确；目的基因成功表达的标志是合成人的生长激素，而不是在含有四环素的培养基上生长，C错误；由于抗氨苄青霉素基因被破坏，抗四环素基因没有被破坏，将重组质粒导入细菌，细菌涂布在含有四环素的培养基上能生长；而质粒A含有抗四环素抗基因，因此导入质粒A的细菌也能在含有四环素的培养基上生长，D错误。
2．下图是4种不同质粒的示意图，其中ri为复制必需的序列，amp为氨苄青霉素抗性基因，tet为四环素抗性基因，箭头表示同一种限制酶的酶切位点。下列有关叙述正确的是（ ）
A．基因amp和tet是一对等位基因，常作为基因工程中的标记基因
B．质粒包括细菌细胞中能自我复制的小型环状DNA和病毒中的DNA
C．限制酶的作用部位是DNA分子中特定的两个核苷酸之间的氢键
D．用质粒4将目的基因导入大肠杆菌，该菌不能在含四环素的培养基上生长
【答案】D
【解析】等位基因是指同源染色体相同位置控制相对性状的基因，图示质粒无染色体结构，且amp和tet在同一个DNA分子上，不是等位基因，A错误；质粒指细菌细胞中或酵母菌细胞中能自我复制的小型环状的DNA，动植物病毒的DNA不属于质粒，B错误；限制性核酸内切酶的作用部位是DNA分子中特定的两个核苷酸之间的磷酸二酯键，C错误；重组质粒4中，氨苄青霉素抗性基因完好，四环素抗性基因被破坏，因此用质粒4将目的基因导入大肠杆菌，该菌不能在含四环素的培养基上生长，D正确。
3．某科研机构，致力于研究亚洲的一种珍稀的猫科动物的繁育问题，经过长期研究与实践，取得了突破性进展，可以通过胚胎工程技术，让家猫代孕而繁育，主要步骤如图所示，下列相关叙述正确的是（ ）
A．代孕的家猫会对移植的胚胎产生免疫排斥所以移植前要给家猫服用免疫抑制剂
B．实际胚胎工程操作中，常以观察到三个第二极体或雌、雄原核作为受精的标志
C．若受精阶段透明带和卵细胞膜未及时发生相应的生理反应将会产生双胞胎或多胞胎
D．培养到囊胚期，囊胚会进一步扩大，导致透明带破裂，胚胎从其中伸展出来
【答案】D
【解析】同种生理状态的受体一般对移入的胚胎不发生免疫排斥，A错误；多数哺乳动物的第一极体不进行减数第二次分裂，因而不会形成两个第二极体；在实际胚胎工程操作中，常以观察到两个极体或雌、雄原核作为受精的标志；B错误；精子触及卵细胞膜的瞬间发生透明带反应是为了防止多精入卵；若受精阶段没有发生透明带反应、卵细胞膜没有及时发生相应的生理反应，将会导致多精入卵，从而使胚胎无法正常发育，不会产生双胞胎或多胞胎；C错误；囊胚进一步发育，胚胎的内部出现了含有液体的囊腔——囊胚腔。囊胚进一步扩大会导致透明带破裂，胚胎从其中伸展出来，这一过程叫做孵化。孵化非常重要，如果不能正常孵化，胚胎就无法继续发育。D正确。
4．受精是精子与卵子结合形成合子（即受精卵）的过程。下列关于哺乳动物受精的叙述，正确的是（ ）
A．精子和卵子结合形成合子与细胞膜的选择透过性密切相关
B．初级卵母细胞与获能的精子在雌性动物的输卵管内完成受精
C．透明带反应和卵细胞膜反应是防止多精入卵的两道屏障
D．判断受精完成的标志是观察到两个极体或者雌、雄原核
【答案】C
【解析】精子和卵子结合形成合子与细胞膜的流动性密切相关，A错误；MⅡ期次级卵母细胞与获能的精子在雌性动物的输卵管内完成受精，B错误；透明带反应和卵细胞膜反应是防止多精入卵的两道屏障；C正确；判断受精的标志是观察到两个极体，受精完成的标志是观察到雌、雄原核；D错误。
5．甘薯长期营养繁殖会导致病毒蔓延，我国科研人员利用甘薯茎尖培养获得脱毒苗，使甘薯的产量和品质大幅度提高，脱毒流程如下图，下列相关叙述正确的是（ ）
A．茎尖材料消毒时，需用无菌水处理后再用次氯酸钠溶液冲洗
B．诱导组织培养时需更换培养基，通常使愈伤组织先生根再出芽
C．病毒检测时可用抗毒血清进行免疫检测，呈阳性反应则为带毒苗
D．生根试管苗在温室炼苗后，应连带培养基栽植于肥沃疏松基质中
【答案】C
【解析】茎尖材料消毒时，需用次氯酸钠溶液进行消毒，消毒后再用无菌水冲洗，冲洗掉次氯酸钠，以免长时间作用破坏细胞，A错误；脱分化和再分化使用的培养基不同，通常使愈伤组织先生芽再生根，B错误；病毒含有特定的蛋白质抗原，可利用抗毒血清进行检测，呈阳性反应则为带毒苗，C正确；生根试管苗在培养箱内生长几日，用流水清洗掉根部的培养基后，将幼苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境中，待其长壮后再移栽入土，D错误。
6．辣椒素作为一种生物碱广泛用于食品保健、医药工业等领域。辣椒素的获得途径如图。下列叙述正确的是（ ）
A．需要先后用酒精和次氯酸钠对外植体进行灭菌，并均立即用无菌水冲洗
B．外植体的形态学上、下端都可以插入培养基，不需要考虑方向
C．获得脱毒苗可以选择的外植体有茎尖等，脱毒苗不具有更强的抗病毒能力
D．愈伤组织是未分化的有固定形态的薄壁组织团块，具备分裂分化能力
【答案】C
【解析】要先后用酒精和次氯酸钠对外植体进行消毒，并均立即用无菌水冲洗，A错误；外植体的形态学上端插入培养基，方向不可反，B错误；获得脱毒苗可以选择的外植体有茎尖等含病毒极少甚至无病毒的组织，脱毒苗不具有更强的抗病毒能力，C正确；愈伤组织是一团没有特定结构和功能，排列疏松而无规则，高度液泡化的呈无定形状态的薄壁组织团块。愈伤组织是由外植体脱分化形成，它要经过再分化形成植物个体，因此愈伤组织是未分化的，具有分裂分化能力，D错误。
7．盖塔病毒是一种虫媒病毒，能感染多种脊椎动物。研究发现E2蛋白是该病毒囊膜的主要成分，且具有较强的抗原性。实验人员将编码E2蛋白的基因导入大肠杆菌中制备E2蛋白，并用纯化的E2蛋白免疫小鼠制备抗E2蛋白的单克隆抗体。下列有关说法正确的是（ ）
A．该过程涉及的技术有胚胎移植、细胞培养和细胞融合技术
B．使用纯化的E2蛋白免疫小鼠的目的是大量获得抗E2蛋白的抗体
C．选择骨髓瘤细胞进行细胞融合的原因是该细胞具有全能性
D．选择培养基上获得的杂交瘤细胞不一定能分泌所需抗体
【答案】D
【解析】该过程不涉及胚胎移植技术，A错误；使用纯化的E2蛋白免疫小鼠的目的是为了获得能产生抗E2蛋白抗体的致敏B淋巴细胞，B错误；选择骨髓瘤细胞进行细胞融合的原因是该细胞具有无限增殖的能力，可以使融合后的细胞在培养过程中大量增殖，C错误；一种抗原刺激机体可使机体产生多种致敏B淋巴细胞，融合而成的杂交瘤细胞也是多种，所以经选择培养基上获得的杂交瘤细胞也不一定能分泌所需抗体，还需要经过抗体检测和筛选，D正确。
8．将细胞毒素类药物与单克隆抗体结合形成抗体-药物偶联物（ADC），可实现对肿瘤细胞的选择性杀伤。下列叙述错误的是（ ）
A．制备单克隆抗体应用的技术主要是动物细胞培养和动物细胞融合
B．制备单克隆抗体时，至少需经过两次筛选才能得到分泌所需抗体的杂交瘤细胞
C．ADC与肿瘤细胞表面的抗原结合后，以胞吞的方式进入肿瘤细胞
D．ADC中的单克隆抗体起导向作用，能特异性结合并杀伤肿瘤细胞
【答案】D
【解析】单克隆抗体的制备需要用到动物细胞培养，动物细胞融合等技术，A正确；
制备单克隆抗体时，需经过两次筛选才能得到符合要求的杂交瘤细胞，第一次筛选的目的是筛选出杂交瘤细胞；第二次筛选目的是为了筛选出能产生所需的单一抗体的杂交瘤细胞，B正确；将细胞毒素类药物与单克隆抗体结合形成抗体-药物偶联物（ADC），ADC与肿瘤细胞表面的抗原结合后，以胞吞的方式进入肿瘤细胞，C正确；
ADC能借助单克隆抗体的导向作用，将药物定向带到癌细胞所在的位置，实现对肿瘤细胞的选择性杀伤，D错误。
细菌在含氨苄青霉素培养基上生长情况
细菌在含四环素培养基上生长情况
①
能生长
能生长
②
能生长
不能生长
③
不能生长
能生长
01 易错陷阱（四大陷阱）
02 举一反三
【易错点提醒一】脱毒苗≠抗毒苗
【易错点提醒二】杂交瘤细胞≠分泌所需抗体
【易错点提醒三】卵子受精≠受精完成
【易错点提醒四】受体细胞有抗性≠导入重组DNA
03 易错题通关
易错陷阱1：利用植物组织培养技术培养植物分生区可获得抗毒苗
【分析】植物组织培养技术培养植物分生区获得的是脱毒苗，没有抗病毒的能力不是抗毒苗（基因工程可得到）。
易错陷阱2：第一次筛选得到的杂交瘤细胞即可分泌所需的抗体
【分析】经过克隆化培养和抗体检测筛选后得到的杂交瘤细胞才能分泌所需抗体。
易错陷阱3：卵子受精就代表受精作用完成
【分析】形成两个极体代表卵子受精，常以观察到两个极体或者雌、雄原核作为受精的标志。
易错陷阱4：受体细胞表现抗性就表示导入重组DNA
【分析】受体细胞表现抗性也有可能导入空载体。
【易错点提醒一】脱毒苗≠抗毒苗
【例1】甘薯由于具有增强免疫功能、防癌抗癌、抗衰老、防止动脉硬化等作用，故越来越被人们喜爱。但甘薯属于无性繁殖作物，同时又是同源六倍体，具有自交不育和杂交不亲和性，这使甘薯生产和育种存在诸多常规方法难于解决的问题。下列相关操作不合理的是（ ）
A．用于快速繁殖优良品种的植物组织培养技术，可以解决种苗用量大、成本高的问题
B．利用茎尖分生组织培养脱毒苗，使植株具备抗病毒的能力，产品质量得到提高
C．利用原生质体融合实现体细胞杂交，克服杂交不亲和，可以充分利用遗传资源
D．利用培养的愈伤组织进行诱变育种，可以显著提高变异频率，有利于缩短育种年限
易错分析：脱毒苗不具备抗病毒的能力。
【答案】B
【解析】植物细胞工程应用之一是：用于快速繁殖优良品种的植物组织培养技术，被人们形象地称为植物的快速繁殖技术，也叫作微型繁殖技术。它不仅可以高效、快速地实现种苗的大量繁殖，还可以保持优良品种的遗传特性。A正确；茎尖等分裂旺盛部位基本无病毒感染。目前采用茎尖组织培养技术脱去病毒，已在许多作物上获得成功。脱毒的作物不仅能增产而且品质也明显优于没有脱毒的作物。脱毒≠抗病毒，B错误；原生质体的融合原理是细胞膜具有一定的流动性，通过去壁、促融、细胞壁再生、组织培养技术后可培育出异源杂合体，C正确；愈伤组织具有分裂旺盛的优点，适合用于诱变育种，能提高突变频率，有利于缩短育种年限。D正确。
【变式1-1】下列实例培育过程中应用到植物组织培养技术的是（ ）
①制造人工种子
②培育抗盐转基因植物
③培育抗病毒转基因烟草
④培育单倍体
A．②③④B．①③④C．①②④D．①②③④
【答案】D
【解析】①通过植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料，通过人工薄膜包装得到的种子，①正确；②利用基因工程获得含抗盐基因的重组细胞，经过植物组织培养获得抗盐转基因植物，②正确；③利用基因工程获得抗病毒转基因烟草细胞，也需要经过植物组织培养获得抗病毒转基因烟草，③正确；④利用花粉离体培养技术培育单倍体幼苗，其中运用到植物组织培养，④正确；
【变式1-2】辣椒素作为一种生物碱广泛用于食品保健、医药工业等领域。辣椒素的获得途径如图。下列表述正确的是（ ）
A．实现①过程的条件是外植体细胞发生基因突变
B．①过程受外源激素的调控，②过程受内源激素的调控
C．获得脱毒苗常用的外植体是根和芽，脱毒苗具有更强的抗病毒能力
D．通过细胞培养获得辣椒素的过程不需要体现细胞的全能性
【答案】D
【解析】①和②分别表示脱分化和再分化，细胞核中的遗传物质不变，基因发生了选择性表达，但没发生基因突变，A错误；在进行植物组织培养时，需要添加外源激素如生长素和细胞分裂素，需要在培养基中添加适当比例的生长素和细胞分裂素诱导生根、生芽，B错误；因为植物顶端分生区附近的病毒极少，甚至没有病毒，所以将茎尖进行离体培养能获得脱毒植株，脱毒苗不具有更强的抗病毒能力，C错误；由题图可知辣椒素是细胞代谢产物，通过细胞培养得到高产细胞系时就可产生，不需要发育成植株，所以不需要体现植物细胞的全能性，D正确。
【变式1-3】束顶病毒能够引起香蕉的严重病害，科研人员用感病植株的茎尖作为外植体进行培养获得脱毒苗，实验结果如下图所示。下列有关叙述正确的是（ ）
A．感病植株的茎尖需经灭菌处理后才能用于脱毒苗的培育
B．可使用光学显微镜观察病毒颗粒来检测茎尖脱毒率
C．超低温保存感病植株茎尖可提高其脱毒率，降低成活率
D．茎尖脱分化形成的愈伤组织是一团呈正方形的薄壁细胞
【答案】C
【解析】灭菌会将植株的茎尖杀死，只能需要对感病植株的茎尖消毒处理，细胞保持活性，A错误；光学显微镜无法观察到病毒颗粒，B错误；从图中可以看出，经过超低温处理后，感病植株的脱毒率增加，但成活率由93.75%下降至55%，C正确；
愈伤组织是无定形状态，D错误。
【易错点提醒二】杂交瘤细胞≠分泌所需抗体
【例2】已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基蝶呤阻断。人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但其一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤细胞中尽管没有S途径，但其能不断分裂增殖。如图是科研人员为制备抗新冠病毒单克隆抗体而设计的流程图。下列叙述正确的是（ ）
A．图中过程①获得的淋巴细胞都能产生抗新冠病毒的抗体
B．过程③使用的HAT培养基中要有糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，通常还需加入血清等天然成分；除此之外，还必须加入动物激素
C．可分别从④的各个小室中提取抗体，与新冠病毒混合，出现阴性反应的小室中的细胞就是所需的杂交瘤细胞
D．制备的单克隆抗体可以用于新冠病毒的检测，利用了抗原抗体特异性结合的原理
易错分析：第二次筛选后得到的杂交瘤细胞才能分泌所需抗体。
【答案】D
【解析】图中过程①获得的淋巴细胞不都能产生抗新冠病毒的抗体，A错误；过程③使用的HAT培养基中要有糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，通常还需加入血清等天然成分；该培养基为选择培养基，还需要加入氨基蝶呤以抑制骨髓瘤细胞的D途径，使培养基中只有杂交瘤细胞能增殖，B错误；④过程是筛选能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，可分别从各个小室中提取抗体，与新冠病毒混合，出现抗原抗体杂交带（阳性）的小室中的细胞就是所需的杂交瘤细胞，C错误；
抗体能与引起它产生的抗原发生特异性结合反应，制备的单克隆抗体可以用于新冠病毒的检测，就是利用了抗原抗体能发生特异性结合的原理，D正确。
【变式2-1】．“筛选”是生物工程中常用的技术手段。下列相关叙述正确的是（ ）
A．利用以尿素为唯一氮源的培养基可以筛选出尿素分解菌
B．在小鼠胚胎细胞原代培养过程中，一定能筛选出能无限增殖的细胞
C．植物体细胞杂交过程中，原生质体融合后获得的细胞不需要进行筛选
D．单克隆抗体制备过程中，第一次筛选出的细胞既能无限增殖又能产生所需抗体
【答案】A
【解析】以尿素为唯一氮源的培养基上，其他微生物因为缺少氮源而不能生存，故可以筛选出尿素分解菌，A正确；在小鼠胚胎细胞原代培养过程中，细胞分裂能保持正常的二倍体核型，故不一定能筛选出能无限增殖的细胞，B错误；植物体细胞杂交过程中，原生质体融合后获得的细胞有多种融合类型，故需要进行筛选，C错误；单克隆抗体制备过程中，第一次筛选出的细胞既能无限增殖又能产生特定抗体，但不一定是所需抗体，D错误。
【变式2-2】下图表示抗人体胃癌的单克隆抗体的制备过程，有关叙述不正确的是（ ）
A．图中给实验小鼠注射的甲是能与抗人体胃癌抗体特异性结合的抗原
B．电融合法可诱导细胞融合获得乙
C．用特定的选择培养基对乙进行筛选，融合细胞均能生长，未融合细胞均不能生长
D．对丙需进行克隆化培养和抗体检测，多次筛选后可获得大量能分泌所需抗体的丁
【答案】C
【解析】图中给小鼠注射甲，能产生分泌特异性抗体的B淋巴细胞，则甲属于与抗人体胃癌抗体特异性结合的抗原，A正确；利用聚乙二醇（化学法）、灭活的病毒（生物法）和电融合法（物理法）可诱导细胞融合获得杂种细胞，B正确；用特定的选择培养基对乙筛选，具有同种核的融合细胞和未融合的细胞均不能生长，只有融合的杂种细胞能生长，C错误；对丙杂交瘤细胞经过选择培养基的筛选，并经单一抗体检测后，多次筛选后培养能产生特定抗体的杂交瘤细胞即可制备单克隆抗体丁，D正确。
【变式2-3】将特定药物与单克隆抗体相结合制成的“生物导弹”，能够用于杀死人类某些癌细胞，其过程如图所示，下列有关叙述正确的是（ ）
A．B淋巴细胞和骨髓瘤细胞均是从小鼠的脾中提取的
B．经①形成的杂交瘤细胞都能无限增殖并能产生所需抗体
C．①促进细胞融合可利用灭活的病毒，不可以利用聚乙二醇作诱导剂
D．抗体的靶向作用使③过程具有高度特异性
【答案】D
【解析】B淋巴细胞是从小鼠的脾中提取的，骨髓瘤细胞是体内浆细胞的恶性克隆性增生形成的，A错误；经①诱导融合过程形成的细胞不都是能无限增殖并产生相应抗体的细胞，还需要经过两次筛选才能获得无限增殖并产生相应抗体的杂交瘤细胞，B错误；①促进动物细胞融合，可利用灭活的病毒，也可以利用聚乙二醇作诱导剂， C错误；过程③中由于单克隆抗体具有高度特异性，使其靶向作用非常准确，D正确。
【易错点提醒三】卵子受精≠受精完成
【例3】胚胎工程的许多技术，实际是在体外条件下，对动物自然受精和早期胚胎发育条件进行的模拟操作，下列对体外受精的叙述错误的是（ ）
A．受精前精子需要获能，卵子需要成熟
B．防止多精入卵的第一道屏障是顶体反应
C．卵子受精的重要标志是卵细胞膜和透明带的间隙看到两个极体
D．受精过程结束的标志是雌、雄原核的融合
易错分析：卵子受精的重要标志是卵细胞膜和透明带的间隙看到两个极体，受精过程结束的标志是雌、雄原核的融合。
【答案】B
【解析】当次级卵母细胞发育到MⅡ中期时才具备与精子受精的能力，受精前精子需要获能，卵子需要成熟，A正确；受精过程中，防止多精入卵的两道屏障是透明带反应和卵细胞膜反应，其中透明带反应是防止多精入卵的第一道屏障，B错误；
卵子受精的重要标志是卵细胞膜和透明带的间隙看到两个极体，C正确；受精过程结束的标志是雌、雄原核的融合，D正确。
【变式3-1】体外受精和胚胎移植都是在医学和农业生产上应用较多的胚胎工程技术。下列相关叙述错误的是（ ）
A．采集的精子经获能处理后才能用于体外受精，受精完成的标志是雌雄原核融合
B．代孕母畜可以是同种的，也可以是不同物种的，需对其进行同期发情处理
C．在胚胎移植前，可取样滋养层，进行性别鉴定、遗传病筛查等，保证胚胎质量
D．进行胚胎移植前，不需要对供体和受体进行免疫排斥检查
【答案】B
【解析】采集到的卵母细胞需要在体外培养成熟（减数第二次分裂中期）才能与获能的精子受精，受精完成的标志是雌雄原核融合完成，A正确；胚胎工程的代孕母畜要求是同种的、生理状况相同的，B错误；滋养层细胞将来发育为胎膜和胎盘，在胚胎移植前，可取样滋养层，进行性别鉴定、遗传病筛查等，保证胚胎质量，C正确；由于受体几乎不对外来胚胎发生免疫排斥，故进行胚胎移植前，不需要对供体和受体进行免疫排斥检查，D正确。
【变式3-2】科学家采用体外受精技术获得北方白犀牛胚胎，并将其移植到南方白犀牛体内，使后者成功妊娠并产仔，该工作有助于恢复濒危北方白犀牛的种群数量。下列叙述正确的是（ ）
A．此过程涉及的操作有超数排卵、精子获能处理、细胞核移植等
B．体外受精时若观察到雌雄原核核膜融合成一个细胞核，可作为受精标志
C．可通过将桑葚胚阶段的内细胞团均等分割技术增加其数量
D．胚胎移植过程中的两次检查，第二次是对受体母犀牛进行是否妊娠的检查
【答案】D
【解析】分析题意科学家采用体外受精技术获得北方白犀牛胚胎，再通过胚胎移植到南方白犀牛体内，使后者成功妊娠并产仔，因此要进行超数排卵、精子获能处理、并对受精卵进行胚胎培养，该过程为有性生殖，因此不涉及细胞核移植，A错误；
判断卵细胞受精的标志是在卵细胞膜与透明带之间观察到两个极体，B错误；分割囊胚阶段的胚胎时，要将内细胞团均等分割，桑葚胚阶段无内细胞团，C错误；
胚胎移植过程中的两次检查，第一次是对胚胎进行质量检查，第二次是对受体母畜进行是否妊娠的检查，D正确。
【变式3-3】“三亲婴儿”的培育技术过程如图，据图分析下列叙述正确的是（ ）
A．对捐献者的要求是不能患有任何遗传病
B．该技术可避免母亲的线粒体遗传病基因传递给后代
C．“三亲婴儿”的培育过程中可直接将受精卵移植到子宫内
D．观察到两个极体可以作为判断卵子是否受精完成的标志
【答案】B
【解析】捐献者提供的是去核卵母细胞，提供了细胞质遗传物质，只需不患细胞质遗传病即可，A错误；线粒体遗传病属于细胞质遗传，母亲只提供了细胞核，可避免将线粒体遗传基因传给孩子，B正确；“三亲婴儿”的培育过程中受精卵要发育到桑葚胚或囊胚阶段再移植到子宫内，C错误；在卵细胞膜和透明带的间隙观察到两个极体可以作为判断卵子是否受精的标志，D错误。
【易错点提醒四】受体细胞有抗性≠导入重组DNA
【例4】研究人员用下图1中质粒和图2中含目的基因的片段构建重组质粒（图中标注了相关限制酶切割位点），将重组质粒导入大肠杆菌后进行筛选及PCR鉴定。以下叙述正确的是（ ）
A．构建重组质粒的过程应选用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶
B．启动子上有RNA聚合酶的识别和结合位点
C．能在添加四环素的培养基上生存的一定是含有重组质粒的大肠杆菌
D．利用PCR鉴定含目的基因的大肠杆菌时应选用引物甲和引物乙
易错分析：能在添加四环素的培养基上生存的也可能是只含有质粒的大肠杆菌。
【答案】B
【解析】选择的限制酶应在目的基因两端存在识别位点，但BamHⅠ可能使质粒中的两种标记基因都破坏，因此只能选BclⅠ和HindⅢ两种限制酶切割，A错误；启动子上有RNA聚合酶的识别和结合位点 ，启动转录过程，B正确；能在添加四环素的培养基上生存的也可能是只含有质粒的大肠杆菌，C错误；PCR技术要求两种引物分别和目的基因的两条单链结合，沿相反的方向合成子链，故利用PCR鉴定目的基因时所用的引物为引物甲和引物丙，D错误。
【变式4-1】质粒是基因工程中最常用的载体，它存在于许多细菌体内。质粒上有标记基因如图所示，通过标记基因可以推知外源基因（目的基因）是否转移成功。外源基因插入的位置不同，细菌在培养基上的生长情况不同，如图表示外源基因插入位置（插入点有a、b、c），请根据表中提供细菌的生长情况，推测①②③三种重组后细菌的外源基因插入点，正确的一组是（ ）
A．①是c；②是b；③是aB．①是a和b；②是a；③是b
C．①是a和b；②是b；③是aD．①是c；②是a；③是b
【答案】A
【解析】第①组：细胞能在含氨苄青霉素培养基上生长，说明抗氨苄青霉素基因没有被破坏；细菌能在含四环素培养基上的生长，说明抗四环素基因没有被破坏。由此可知，外源基因插入的位置不是a、b，而是c；第②组：细胞能在含氨苄青霉素培养基上生长，说明抗氨苄青霉素基因没有被破坏；细菌不能在含四环素培养基上的生长，说明抗四环素基因被破坏。说明了外源基因插入位置是b，不是a；第③组：细胞不能在含氨苄青霉素培养基上生长，能在含四环素培养基上的生长，说明抗氨苄青霉素基因被破坏，抗四环素基因没有被破坏，由此可知，外源基因插入的位置是a，而不是b。
【变式4-2】将外源基因送入细胞通常是利用质粒作为载体。下列有关质粒的叙述，正确的是（ ）
A．质粒从细胞中提取出来后即可以直接使用，无须人工改造
B．质粒上常有特殊的标记基因，以便于重组DNA分子的筛选
C．质粒是具有自我复制能力的DNA分子，只存在于原核生物中
D．质粒一般只有一个限制酶切制位点，以便于目的基因插入
【答案】B
【解析】天然的质粒不能直接作为载体，基因工程中用到的质粒都是在天然质粒的基础上进行过人工改造的，A错误；载体上需要具有某些标记基因，以便于重组DNA分子的筛选，常见的标记基因有抗生素抗性基因等，B正确；质粒不只存在于原核生物中，如酵母菌中也含有质粒，C错误；质粒一般有一至多个限制酶的切割位点，以便于目的基因插入，D错误。
【变式4-3】乳酸菌经溶菌酶和洗涤剂处理后，其拟核DNA会缠绕在细胞壁碎片上，静置一段时间后，质粒将分布在上清液中，我们由此初步获得质粒DNA．下图为用限制酶处理所提取的产物并进行电泳分析的结果。有关DNA的粗提取与鉴定，下列分析正确的是（ ）
A．以洋葱为材料提取 DNA时可加入预冷的酒精溶液（体积分数为95%），以使蛋白质等物质析出
B．可将提取的DNA溶于2m l/LNaCl溶液中，加入二苯胺试剂并沸水浴5min进行鉴定
C．图中用限制酶Ⅰ和Ⅱ分别处理提取的产物所得到的电泳结果，说明未提取到质粒
D．溶菌酶能破坏乳酸菌的细胞壁，但不会破坏蓝细菌的细胞壁
【答案】B
【解析】以洋葱为材料提取DNA时可加入预冷的酒精溶液（体积分数为95%），是为了让DNA析出，A错误；可将提取的 DNA溶于2ml/LNaCl溶液中，加入二苯胺试剂并沸水浴5min 进行鉴定，B正确；用限制酶Ⅰ和Ⅱ分别处理提取的产物，电泳出现 1条带，说明提取到了环状质粒，且它们在质粒上各有一个切点，单独使用时将环状的质粒切成了链状，故只有一个条带；两种限制酶都使用时，能将其切成2个条带，C错误；细菌和蓝细菌的细胞壁主要成分都是肽聚糖，溶菌酶能溶解细菌和蓝细菌的细胞壁，D错误。
1．下图是将人的生长激素基因导入细菌B细胞内制造“工程菌”的示意图。已知细菌B细胞内不含质粒A，也不含质粒A上的基因。判断下列说法正确的是（ ）
A．工程菌产生的生长激素可以直接使用效果良好
B．将重组质粒导入细菌B常用的方法是用Ca2+处理细菌
C．目的基因成功表达的标志是受体细胞能在含有四环素的培养基上生长
D．将完成导入过程后的细菌涂布在含有四环素的培养基上，能生长的是只导入了质粒A的细菌
【答案】B
【解析】由于细菌无内质网和高尔基体，对合成的生长激素不能加工、修饰，故工程菌产生的生长激素不能直接使用，A错误；将目的基因导入细菌时，常用Ca2+处理细菌，使之处于能够吸收重组质粒的状态，B正确；目的基因成功表达的标志是合成人的生长激素，而不是在含有四环素的培养基上生长，C错误；由于抗氨苄青霉素基因被破坏，抗四环素基因没有被破坏，将重组质粒导入细菌，细菌涂布在含有四环素的培养基上能生长；而质粒A含有抗四环素抗基因，因此导入质粒A的细菌也能在含有四环素的培养基上生长，D错误。
2．下图是4种不同质粒的示意图，其中ri为复制必需的序列，amp为氨苄青霉素抗性基因，tet为四环素抗性基因，箭头表示同一种限制酶的酶切位点。下列有关叙述正确的是（ ）
A．基因amp和tet是一对等位基因，常作为基因工程中的标记基因
B．质粒包括细菌细胞中能自我复制的小型环状DNA和病毒中的DNA
C．限制酶的作用部位是DNA分子中特定的两个核苷酸之间的氢键
D．用质粒4将目的基因导入大肠杆菌，该菌不能在含四环素的培养基上生长
【答案】D
【解析】等位基因是指同源染色体相同位置控制相对性状的基因，图示质粒无染色体结构，且amp和tet在同一个DNA分子上，不是等位基因，A错误；质粒指细菌细胞中或酵母菌细胞中能自我复制的小型环状的DNA，动植物病毒的DNA不属于质粒，B错误；限制性核酸内切酶的作用部位是DNA分子中特定的两个核苷酸之间的磷酸二酯键，C错误；重组质粒4中，氨苄青霉素抗性基因完好，四环素抗性基因被破坏，因此用质粒4将目的基因导入大肠杆菌，该菌不能在含四环素的培养基上生长，D正确。
3．某科研机构，致力于研究亚洲的一种珍稀的猫科动物的繁育问题，经过长期研究与实践，取得了突破性进展，可以通过胚胎工程技术，让家猫代孕而繁育，主要步骤如图所示，下列相关叙述正确的是（ ）
A．代孕的家猫会对移植的胚胎产生免疫排斥所以移植前要给家猫服用免疫抑制剂
B．实际胚胎工程操作中，常以观察到三个第二极体或雌、雄原核作为受精的标志
C．若受精阶段透明带和卵细胞膜未及时发生相应的生理反应将会产生双胞胎或多胞胎
D．培养到囊胚期，囊胚会进一步扩大，导致透明带破裂，胚胎从其中伸展出来
【答案】D
【解析】同种生理状态的受体一般对移入的胚胎不发生免疫排斥，A错误；多数哺乳动物的第一极体不进行减数第二次分裂，因而不会形成两个第二极体；在实际胚胎工程操作中，常以观察到两个极体或雌、雄原核作为受精的标志；B错误；精子触及卵细胞膜的瞬间发生透明带反应是为了防止多精入卵；若受精阶段没有发生透明带反应、卵细胞膜没有及时发生相应的生理反应，将会导致多精入卵，从而使胚胎无法正常发育，不会产生双胞胎或多胞胎；C错误；囊胚进一步发育，胚胎的内部出现了含有液体的囊腔——囊胚腔。囊胚进一步扩大会导致透明带破裂，胚胎从其中伸展出来，这一过程叫做孵化。孵化非常重要，如果不能正常孵化，胚胎就无法继续发育。D正确。
4．受精是精子与卵子结合形成合子（即受精卵）的过程。下列关于哺乳动物受精的叙述，正确的是（ ）
A．精子和卵子结合形成合子与细胞膜的选择透过性密切相关
B．初级卵母细胞与获能的精子在雌性动物的输卵管内完成受精
C．透明带反应和卵细胞膜反应是防止多精入卵的两道屏障
D．判断受精完成的标志是观察到两个极体或者雌、雄原核
【答案】C
【解析】精子和卵子结合形成合子与细胞膜的流动性密切相关，A错误；MⅡ期次级卵母细胞与获能的精子在雌性动物的输卵管内完成受精，B错误；透明带反应和卵细胞膜反应是防止多精入卵的两道屏障；C正确；判断受精的标志是观察到两个极体，受精完成的标志是观察到雌、雄原核；D错误。
5．甘薯长期营养繁殖会导致病毒蔓延，我国科研人员利用甘薯茎尖培养获得脱毒苗，使甘薯的产量和品质大幅度提高，脱毒流程如下图，下列相关叙述正确的是（ ）
A．茎尖材料消毒时，需用无菌水处理后再用次氯酸钠溶液冲洗
B．诱导组织培养时需更换培养基，通常使愈伤组织先生根再出芽
C．病毒检测时可用抗毒血清进行免疫检测，呈阳性反应则为带毒苗
D．生根试管苗在温室炼苗后，应连带培养基栽植于肥沃疏松基质中
【答案】C
【解析】茎尖材料消毒时，需用次氯酸钠溶液进行消毒，消毒后再用无菌水冲洗，冲洗掉次氯酸钠，以免长时间作用破坏细胞，A错误；脱分化和再分化使用的培养基不同，通常使愈伤组织先生芽再生根，B错误；病毒含有特定的蛋白质抗原，可利用抗毒血清进行检测，呈阳性反应则为带毒苗，C正确；生根试管苗在培养箱内生长几日，用流水清洗掉根部的培养基后，将幼苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境中，待其长壮后再移栽入土，D错误。
6．辣椒素作为一种生物碱广泛用于食品保健、医药工业等领域。辣椒素的获得途径如图。下列叙述正确的是（ ）
A．需要先后用酒精和次氯酸钠对外植体进行灭菌，并均立即用无菌水冲洗
B．外植体的形态学上、下端都可以插入培养基，不需要考虑方向
C．获得脱毒苗可以选择的外植体有茎尖等，脱毒苗不具有更强的抗病毒能力
D．愈伤组织是未分化的有固定形态的薄壁组织团块，具备分裂分化能力
【答案】C
【解析】要先后用酒精和次氯酸钠对外植体进行消毒，并均立即用无菌水冲洗，A错误；外植体的形态学上端插入培养基，方向不可反，B错误；获得脱毒苗可以选择的外植体有茎尖等含病毒极少甚至无病毒的组织，脱毒苗不具有更强的抗病毒能力，C正确；愈伤组织是一团没有特定结构和功能，排列疏松而无规则，高度液泡化的呈无定形状态的薄壁组织团块。愈伤组织是由外植体脱分化形成，它要经过再分化形成植物个体，因此愈伤组织是未分化的，具有分裂分化能力，D错误。
7．盖塔病毒是一种虫媒病毒，能感染多种脊椎动物。研究发现E2蛋白是该病毒囊膜的主要成分，且具有较强的抗原性。实验人员将编码E2蛋白的基因导入大肠杆菌中制备E2蛋白，并用纯化的E2蛋白免疫小鼠制备抗E2蛋白的单克隆抗体。下列有关说法正确的是（ ）
A．该过程涉及的技术有胚胎移植、细胞培养和细胞融合技术
B．使用纯化的E2蛋白免疫小鼠的目的是大量获得抗E2蛋白的抗体
C．选择骨髓瘤细胞进行细胞融合的原因是该细胞具有全能性
D．选择培养基上获得的杂交瘤细胞不一定能分泌所需抗体
【答案】D
【解析】该过程不涉及胚胎移植技术，A错误；使用纯化的E2蛋白免疫小鼠的目的是为了获得能产生抗E2蛋白抗体的致敏B淋巴细胞，B错误；选择骨髓瘤细胞进行细胞融合的原因是该细胞具有无限增殖的能力，可以使融合后的细胞在培养过程中大量增殖，C错误；一种抗原刺激机体可使机体产生多种致敏B淋巴细胞，融合而成的杂交瘤细胞也是多种，所以经选择培养基上获得的杂交瘤细胞也不一定能分泌所需抗体，还需要经过抗体检测和筛选，D正确。
8．将细胞毒素类药物与单克隆抗体结合形成抗体-药物偶联物（ADC），可实现对肿瘤细胞的选择性杀伤。下列叙述错误的是（ ）
A．制备单克隆抗体应用的技术主要是动物细胞培养和动物细胞融合
B．制备单克隆抗体时，至少需经过两次筛选才能得到分泌所需抗体的杂交瘤细胞
C．ADC与肿瘤细胞表面的抗原结合后，以胞吞的方式进入肿瘤细胞
D．ADC中的单克隆抗体起导向作用，能特异性结合并杀伤肿瘤细胞
【答案】D
【解析】单克隆抗体的制备需要用到动物细胞培养，动物细胞融合等技术，A正确；
制备单克隆抗体时，需经过两次筛选才能得到符合要求的杂交瘤细胞，第一次筛选的目的是筛选出杂交瘤细胞；第二次筛选目的是为了筛选出能产生所需的单一抗体的杂交瘤细胞，B正确；将细胞毒素类药物与单克隆抗体结合形成抗体-药物偶联物（ADC），ADC与肿瘤细胞表面的抗原结合后，以胞吞的方式进入肿瘤细胞，C正确；
ADC能借助单克隆抗体的导向作用，将药物定向带到癌细胞所在的位置，实现对肿瘤细胞的选择性杀伤，D错误。
细菌在含氨苄青霉素培养基上生长情况
细菌在含四环素培养基上生长情况
①
能生长
能生长
②
能生长
不能生长
③
不能生长
能生长
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