江西省上饶市广丰区洋口中学2023-2024学年高二下学期5月生物检测试卷

这是一份江西省上饶市广丰区洋口中学2023-2024学年高二下学期5月生物检测试卷，共15页。试卷主要包含了选择题，非选择题等内容，欢迎下载使用。

一、选择题：本题共12小题，每小题2分，共24分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。
1．江西糯米酒的主要制作流程为：糯米用清水泡后蒸熟→米酒曲与熟糯米拌匀→装入干净的容器中，用食品保鲜袋包住瓶口，扎紧密封→在28℃下发酵若干天。发酵初期能看到很多气泡上窜，8、9天后，酒体分层，糯米基本下沉，表面发酵基本结束。下列相关叙述错误的是（ ）
A．糯米可为酵母菌提供碳源、氮源、无机盐等营养物质
B．糯米蒸熟后趁热与米酒曲拌匀可以防止杂菌污染
C．发酵初期看到的气泡是酵母菌进行呼吸作用产生的CO2
D．将发酵温度从28℃提高到40℃后不能缩短发酵时间
2．剁辣椒属于发酵辣椒，其传统加工方法是利用乳酸菌的自然发酵和食盐保存作用进行加工处理。湖南农业大学食品科学技术学院的科研人员尝试从剁辣椒中分离安全、耐盐、耐酸同时具有亚硝酸盐降解能力的优良乳酸菌进行辣椒的接种发酵，提高发酵辣椒品质。分离所用MR5培养基的主要成分有蛋白胨、牛肉膏、酵母粉、番茄汁、葡萄糖、碳酸钙（乳酸能与碳酸钙反应出现溶钙圈）、溴甲酚绿（pH显色剂，酸性显示黄色、碱性显示蓝绿色）、琼脂。下列说法错误的是（ ）
A．为乳酸菌提供氮源的主要是蛋白胨和牛肉膏
B．将平板倒置培养可为乳酸菌筛选创造无氧环境
C．在分离、纯化菌种时应挑取平板上呈黄色、有溶钙圈的菌落进行培养
D．还需进行实验检测目的菌对亚硝酸盐的降解能力
3．变质的酸奶会因内部发酵而产生大量气体，如果看到包装很鼓，说明酸奶已经变质，不要喝。某同学选择过期的酸奶，按图中的操作流程，研究其中的某微生物生长情况，有关叙述正确的是（ ）

A．使用巴氏消毒法可以杀死牛奶中的微生物和芽孢，但不破坏其营养成分
B．变质的酸奶会由于其中的微生物进行有氧呼吸产生大量CO2
C．利用图示方法向培养基接种前和接种后都要对接种环进行灼烧灭菌
D．若3个平板的平均菌落数是180个，则1mL酸奶中该微生物个数为9×106个
4．草莓在进行无性繁殖过程中，感染的病毒会在体内逐年积累，导致产量降低、品质变差。下图是培育高品质草莓的流程图。下列叙述正确的是（ ）
注：SMYELV-CP是草莓轻型黄边病毒的抗性基因。
A．甲需经灭菌处理后才能用于无病毒苗的培育
B．选取体积分数为95%的酒精对甲进行30s消毒处理
C．A、C过程与生长素、细胞分裂素的调节密切相关
D．两种培育方法的效果可通过病毒接种实验进行检测
5．球姜酮是一种新型抗肿瘤药物。某研究小组将鼠肝癌细胞和正常肝细胞分别置于相同培养液中培养，进行了相关实验。下列相关叙述错误的是（ ）
A．培养肝癌细胞时，需用含动物血清的培养基并置于CO2培养箱中培养
B．定期更换培养液可以为动物细胞提供充足的营养物质
C．培养鼠正常肝细胞时，在培养瓶壁上可形成多层细胞
D．在进行传代培养时，悬浮培养的细胞直接用离心法收集
6．为了研究多种血糖调节因子的作用，我国科学家开发出胰岛素抵抗模型鼠。为扩增模型鼠数量，科学家通过诱导优良模型雄鼠体细胞转化获得诱导iPS细胞，继而利用iPS细胞培育出与模型鼠遗传特性相同的克隆鼠，具体步骤如图。下列相关叙述正确的是（ ）

A．黑鼠体细胞在诱导因子的作用下转化为iPS细胞，其全能性降低
B．灰鼠体内受精的场所是输卵管，若进行体外受精，精子需先经过获能处理
C．重构胚经①胚胎移植进入代孕白鼠子宫内发育，X鼠的体色为白色
D．提供胚胎的灰鼠、代孕白鼠和克隆X鼠都是雌鼠，供体黑鼠是雄鼠
7．类器官技术是将干细胞培养成具有一定空间结构，并能模拟真实器官部分功能的组织类似物的技术。科学家成功地在体外将肠道干细胞培养成包括隐窝样区域和绒毛样上皮区域的小肠类器官，这一结构能准确模拟肠道上皮生理情况。下列相关叙述正确的是（ ）
A．肠道干细胞诱导分化成小肠类器官，体现了细胞的全能性
B．肠道干细胞具有组织特异性，一般只能分化成特定的细胞或组织
C．类器官的培养过程中运用的技术有动物细胞培养、体外受精和胚胎移植
D．肠道干细胞培养成小肠类器官的过程中，遗传物质一定会发生改变
8．某细菌DNA分子上有4个Sau3AI的酶切位点，经Sau3AI处理后会形成4个大小不同的DNA片段。若是用BamHI处理，则只会形成2个大小不同的DNA片段。Sau3AI和BamHI的识别序列及切割位点如表所示。下列叙述不正确的是（ ）
A．上述两种限制酶切割后可形成互补的黏性末端
B．该DNA分子上有两个BamHI的酶切位点
C．黏性末端能通过T4DNA连接酶连接
D．若用两种酶共同处理，会形成6个大小不同的DNA片段
9．采用CRISPR/Cas9 基因编辑技术可将增强型绿色荧光蛋白（EGFP）基因定点插入到受精卵的Y染色体上，获得转基因雄性小鼠。该转基因小鼠与野生型雌性小鼠交配，通过观察荧光可确定早期胚胎的性别。下列操作错误的是（ ）
A．基因编辑处理的受精卵在体外培养时，不同发育阶段的胚胎需用不同成分的培养液
B．基因编辑处理的受精卵经体外培养至2细胞期，须将其植入同期发情小鼠的子宫，才可获得表达 EGFP的小鼠
C．分离能表达EGFP的胚胎干细胞，通过核移植等技术可获得大量的转基因小鼠
D．通过观察早期胚胎的荧光，能表达 EGFP 的即为雄性小鼠胚胎
10．水中物质污染会导致鱼类雄性化异常。将绿色荧光蛋白（GFP）基因、Ga14蛋白基因等转入斑马鱼，可用于监测水体物质，下图中ERE和UAS是两种诱导型启动子，分别被物质-受体复合物和蛋白特异性激活，启动下游基因表达。下列叙述错误的是（ ）
A．根据题意可知斑马鱼的某些细胞存在物质的受体
B．用ERE直接驱动GFP基因表达可提高监测的灵敏度
C．用于监测物质污染的转基因斑马鱼最好是不育的
D．基因表达载体最好以显微注射法导入斑马鱼受精卵
11．里德·罗伯茨发现非洲慈鲷科鱼同时拥有XY和ZW两套性染色体。当W染色体不存在时，为XY型性别决定；有W染色体时为雌性。雌性非洲慈鲷科鱼的性染色体只存在三种组成：ZZXX、ZWXY、ZWXX。科学家将一个荧光蛋白基因导入到了性染色体组成为ZWXY非洲慈鲷科鱼的性染色体中并表达。下列说法错误的是（ ）
A．雄性非洲慈鲷科鱼的性染色体组成只有ZZXY
B．非洲慈鲷科鱼可能存在染色体组成YY致死现象
C．各种性染色体组成比例相同的非洲慈鲷科鱼自由交配，子代的性别比例为雌：雄=1：1
D．转基因鱼与与雄鱼交配若子代雌鱼中荧光鱼所占比例为3/4，雄鱼中荧光鱼所占比例为1/2，则说明荧光蛋白基因被整合到X染色体上
12．蛋白质工程开创了按照人类意愿改造、创造符合人类需要的蛋白质的新时代。如通过蛋白质工程，将干扰素结构上的两个半胱氨酸改为丝氨酸，就可以使其保存半年，而活性不受影响。下列关于蛋白质工程的叙述，正确的是（ ）
A．蛋白质工程的操作流程与中心法则的方向相同
B．蛋白质工程需要改造或合成蛋白质的编码基因
C．对干扰素的改造无需考虑其空间结构
D．蛋白质工程需要改变蛋白质分子的所有氨基酸序列
二、选择题：本题共4小题，每小题4分，共16分。在每小题给出的四个选项中，有两个或两个以上选项符合题目要求，全部选对得4分，选对但不全的得2分，有选错的得0分。
13．在曲线模型中，存在以下几种变化趋势：
①相对稳定②上升③下降④先上升后下降⑤先下降后上升
在下列的对应关系（条件→结果→趋势）中，合理的是（ ）
A．环境温度从0℃变化到30℃→小鼠细胞内酶的活性变化→②
B．恒温且持续光照→一定时间内密闭容器内CO2浓度变化→③
C．向植物插条施加IAA→插条生根数随IAA浓度变化→④
D．使用一定量抗生素→细菌数量随时间的变化→⑤
14．下列关于动物细胞工程和胚胎工程的叙述，正确的是（ ）
A．胚胎移植的实质是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移
B．抗体-药物偶联物（ADC）中单克隆抗体主要发挥靶向运输作用
C．卵子受精的标志是卵细胞膜和透明带的间隙可以看到两个第二极体
D．原肠胚进一步扩大，会导致透明带破裂，胚胎从其中伸展出来，这一过程叫做孵化
15．研究人员以小鼠为实验材料进行实验，将细胞核移植技术与干细胞技术相结合，培养所需要的细胞、组织或器官，其部分实验过程如图所示。下列相关叙述错误的是（ ）
A．成体干细胞具有组织特异性，并且可以发育成完整的个体
B．图中的正常鼠X细胞为卵母细胞，在体外培养到M Ⅰ中期去核
C．动物体细胞核移植往往是将供体细胞直接注入去核的卵母细胞中
D．与体细胞核移植相比，胚胎细胞核移植的难度较低的原因是其细胞分化程度高
16．某种荧光蛋白（GFP）在紫外光或蓝光激发下会发出绿色荧光，这一特性可用于检测细胞中目的基因的表达。某科研团队将某种病毒的外壳蛋白（L1）基因连接在GFP基因的5′末端，获得了L1-GFP融合基因（简称为甲），并将其插入质粒P0，构建了真核表达载体P1，其部分结构和酶切位点的示意图如下，图中E1~E4四种限制酶产生的黏性末端各不相同。下列说法正确的是（ ）

A．据图推断，该团队在将甲插入质粒PO时，使用了E1、E2和E4这三种限制酶
B．将P1转入体外培养的牛皮肤细胞后，若在该细胞中观察到了绿色荧光，则说明L1基因在牛的皮肤细胞中完成了表达
C．为了获得含有甲的转基因牛，最终的操作环节为胚胎移植
D．为了检测甲是否存在于克隆牛的不同组织细胞中，可使用PCR方法进行鉴定
三、非选择题：本题共5小题，共60分。
17．（12分）吃腐烂的水果可能会出现头晕、恶心、呕吐或者更严重的症状，这可能与微生物代谢产生的毒素有关。某研究小组为了寻找腐烂的苹果中可安全食用的区域，开展以下探究实验。选取苹果的腐烂部位、距离腐烂部位1cm和2cm的组织做实验材料，检测不同区域中微生物的种类和数量。已知苹果的pH为3.5~4，操作流程如下图。回答下列问题：
(1)根据题意，本实验选用的接种方法是 。
(2)制备步骤③中的培养基，配方中应含有水、氮源、无机盐、 ，接种后的平板应放在恒温培养箱中 培养。
(3)每隔24h统计一次菌落数目，待菌落数目稳定时统计的菌落数往往比活菌的实际数目少的原因是 。
(4)统计腐烂部位的菌落数目发现，青霉菌、曲霉菌等真菌的数量较多，细菌数目很少。细菌数目很少可能的原因 （答出1点即可）。
(5)分析数据发现，距离腐烂部位越远，微生物的数量越少；距离腐烂部位2cm的样品中微生物数量极少。有人认为，不能仅凭这个实验就得出距离腐烂部位2cm的部分可安全食用的结论，还需要进一步补充检测 。
18．（12分）已知细胞合成DNA有D和S两种途径，其中D途径能被氨基蝶呤阻断。小鼠淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但其一般不分裂增殖。小鼠骨髓瘤细胞中尽管没有S途径，但其能不断分裂增殖。如图是科研人员为制备抗甲型流感病毒的单克隆抗体而设计的流程图。回答下列问题：

(1)过程①的目的是从产生免疫反应小鼠的脾脏中获得 。在获取该细胞前3天需再次注射甲型流感病毒，这样做的目的是 。
(2)过程②选择骨髓瘤细胞进行细胞融合的原因是 。若只考虑细胞两两融合，理论上融合细胞有 种。
(3)过程③使用的HAT培养基中要有糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素、血清等，还必须加入 。在HAT培养基上进行筛选时， 不分裂增殖或会死亡。
(4)可分别从过程④的各个小室中提取 ，与甲型流感病毒混合，出现 （填“阳性”或“阴性”）反应的小室中的细胞就是所需的杂交瘤细胞，筛选出杂交瘤细胞生产抗甲型流感病毒的单克隆抗体。
19．（12分）野化单峰骆驼原产于北非和亚洲西部及南部，多年前野生单峰骆驼就已经灭绝，仅圈养条件下还有部分驯养单峰骆驼存在。近几年，在我国戈壁无人区，科学家又发现了野化单峰骆驼小种群，由于数量极少，科学家欲通过胚胎移植等方法拯救野化单峰骆驼，技术流程如图所示。回答下列问题：
(1)上述图解中涉及到的生物学技术有 、 、 。
(2)若a为体外受精，则在这之前要对采集的卵母细胞培养至 时期；还需要对精子进行 处理，对受体野化单峰骆驼要进行 处理。
(3)若通过染色体测定对野化单峰骆驼进行性别鉴定，选择 细胞。测定的结果是看该细胞中 。
(4)图中c过程，应选择 或 期的胚胎，后者在进行分割时要注意将 。在进行过程b或d之前 （填“需要”或“不需要”）是否需要对受体进行免疫检测。
(5)胚胎移植后，经受体孕育的后代，其遗传特性与 （填“供体”或“受体”）一致。
20．（12分）L-天冬酰胺酶因其能水解L-天冬酰胺（丙烯酰胺的前体），而有效降低油炸食品中潜在致癌物质丙烯酰胺的含量，在食品安全领域受到高度关注。某科研机构欲利用pET22b质粒将L-天冬酰胺酶基因导入对氨苄青霉素敏感的宿主菌中，以构建高效表达L-天冬酰胺酶的菌株。图1是L-天冬酰胺酶基因附近的限制酶切点以及基因两侧的部分碱基序列，图2是pET22b质粒的结构模式图及其涉及的限制酶切点，其中的LacZ基因编码产生的半乳糖苷酶可以分解X-gal产生蓝色物质，使菌落呈蓝色，否则菌落为白色。
(1)利用PCR从提取的DNA中扩增目的基因时需要引物，引物的作用是 。要将L-天冬酰胺酶基因导入到pET22b质粒中，需使用的两种限制酶是 。
(2)若图1下方的序列为目的基因的部分碱基序列，则获取目的基因时设计B端的引物序列是 （只写出16个碱基即可）。
(3)利用感受态法的转化成功率并不是100%，科研人员将转化后的宿主菌接种在含氨苄青霉素和X-gal的固体培养基上，以此筛选出成功导入重组质粒的宿主菌。
①若只使用限制酶EcRI构建重组质粒，导入重组质粒的菌落呈现 色，这些菌落 （填“能”、“不能”或“不一定能”）产生L-天冬酰胺酶，理由是 。
②若使用（1）中的限制酶处理，则菌落呈 色的为符合要求的宿主菌，理由是 。
(4)能够发挥作用的L-天冬酰胺酶是由4个亚基形成的，如果选择大肠杆菌作为受体菌，只能从大肠杆菌中提取到4条单链肽链，不能得到有活性的L-天冬酰胺酶，原因是 。
21．（12分）通过基因工程技术由大肠杆菌合成的人生长激素可用于治疗缺乏生长激素的垂体性侏儒症病人。如图1为通过基因工程技术生产人生长激素的过程。回答下列问题：
(1)图1中①过程中可从人的垂体细胞中提取到生长激素mRNA的原因是 ，②过程为 。
(2)图1中的A为 ，利用PCR获取大量A的过程，若将一个A扩增3次，共需要引物 个。
(3)⑤过程可以先用 处理大肠杆菌，使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的状态。
(4)图2为图1中B的结构示意图，启动子是一段有 。由图2分析可知，若要成功构建基因表达载体，要在A的上游和下游分别添加 、 限制酶的识别位点（假设A的内部不存在相关限制酶的识别位点）。
限制酶名称
识别序列及切割位点
BamHI
G↓GATCC
Sau3AI
↓GATC
高二生物参考答案
1．B
【分析】酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。
【详解】A、糯米可以提供酵母菌生长需要的碳源、氮源、无机盐等营养物质，A正确；
B、糯米蒸熟后应放凉后与米酒曲拌匀，温度太高会杀死酵母菌，B错误；
C、发酵初期看到的气泡主要是酵母菌进行有氧呼吸作用产生的CO2，C正确；
D、酵母菌的最适温度约为28℃，将发酵温度从28℃提高到40℃不能缩短发酵时间，D正确。
故选B。
2．B
【分析】微生物的选择培养和分离：需要配制选择培养基，用稀释涂布平板法、平板划线法分离并培养。
【详解】A、氮源是为生物生长提供氮元素的物质，为乳酸菌提供氮源的主要是蛋白胨和牛肉膏，A正确；
B、平板倒置培养是为了防止培养皿皿盖上的水珠落入培养基造成污染，不是创造无氧环境，B错误；
C、乳酸能与碳酸钙反应出现溶钙圈，乳酸呈酸性，使菌落呈黄色，应挑取平板上呈黄色、有溶钙圈的菌落进行纯化培养，C正确；
D、实验的目的是筛选出安全、耐盐、耐酸同时具有亚硝酸盐降解能力的优良乳酸菌，所以还需要进行实验检测目的菌对亚硝酸盐的降解能力，D正确。
故选B。
3．D
【分析】1、酸奶制作的原理是乳酸菌发酵，乳酸菌属于原核生物，其新陈代谢类型是异养厌氧型。
2、乳酸菌的无氧呼吸可将葡萄糖分解形成乳酸，并释放少量的能量。
【详解】A、无菌技术包括消毒和灭菌两个方面，其中消毒是指使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包括芽孢和孢子），使用巴氏消毒法不可以杀死牛奶中的芽孢，A错误；
B、变质的酸奶会由于其中的微生物进行无氧呼吸产生大量CO2，B错误：
C、图示接种方法为稀释涂布平板法，应该使用涂布器进行接种，C错误；
D、利用公式C÷V×M，可以计算1mL酸奶中该微生物数量为180÷0.2×104=9×106，D正确。
故选D。
4．C
【分析】植物组织培养过程是：离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成伤组织，然后再分化生成根、芽，最终形成植物体。植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性。决定植物脱分化和再分化的关键因素是植物激素的种类和比例，特别是生长素和细胞分裂素的协同作用在组织培养过程中非常重要。
【详解】A、在植物组织培养过程中，甲需经消毒处理后才能用于无病毒苗的培育，A错误；
B、需要用体积分数为70%的酒精和质量分数为5%的次氯酸钠溶液对甲进行消毒，保证植物组织培养的成功，B错误；
C、A、C过程属于植物组织培养，都需要经过脱分化形成愈伤组织和再分化形成根、芽，最终发育成植株，与生长素、细胞分裂素的调节密切相关，C正确；
D、无病毒苗应根据植株性状检测，不抗病毒，不需要接种病毒；抗病毒苗需要通过病毒接种的方式来判断选育方法的效果，因此只有方法二需要通过病毒接种实验，D错误。
故选C。
5．C
【分析】动物细胞培养的条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌②添加一定量的抗生素③定期更换培养液，以清除代谢废物；（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质；（3）温度和pH：（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的PH）。
【详解】A、动物细胞培养时应在培养液中加入动物血清，因此培养肝癌细胞时，需用含动物血清的培养基并置于CO2培养箱中培养，A正确；
B、定期更换培养液是为了给动物细胞提供充足的营养物质，还可以减少代谢废物对细胞的损害，B正确；
C、由于正常细胞之间相互接触而发生接触抑制，正常肝细胞在培养瓶壁上只能形成单层细胞，C错误；
D、在进行传代培养时，悬浮培养的细胞可直接用离心法进行收集，D正确。
故选C。
6．B
【分析】动物细胞培养是指从动物体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后在适宜的培养条件下，让这些细胞生长和增殖的技术。干细胞的培养成功是动物细胞培养领域重大的成就之一。干细胞存在于早期胚胎、骨髓和脐带血等多种组织和器官中，包括胚胎干细胞和成体干细胞等。
【详解】A、黑鼠体细胞在诱导因子的作用下转化为iPS细胞的过程是组织细胞恢复分裂能力的过程；iPS细胞与小鼠内细胞团一样，具有全能性，该过程结束后，细胞的全能性提高，A错误；
B、哺乳动物的受精过程在输卵管内完成；卵子要在输卵管内进一步发育，到M Ⅱ中期时，才具备与精子受精的能力，精子受精前需要进行获能处理，B正确；
C、将重构胚移入白鼠子宫内的技术为胚胎移植；克隆属于无性繁殖，iPS细胞来自黑鼠，所以克隆鼠X的体色为黑色，C错误；
D、提供胚胎的灰鼠和代孕白鼠是雌鼠，体细胞供体黑鼠和克隆鼠X是雄鼠，D错误。
故选B。
7．B
【分析】细胞的全能性是指细胞经分裂和分化后，仍具有产生完整有机体或分化成其他各种细胞的潜能和特性。在多细胞生物中，每个体细胞的细胞核都含有个体发育的全部基因，只要条件许可，都可发育成完整的个体。
【详解】A、肠道干细胞诱导分化为小肠类器官的过程，没有形成完整个体，未体现出细胞的全能性，A错误；
B、成体干细胞是指存在于一种已经分化组织中的未分化细胞，这种细胞能够自我更新并且能够特化形成组成该类型组织的细胞，即肠道干细胞具有组织特异性，一般只能分化成特定的细胞或组织，B正确；
C、类器官技术是将干细胞培养成具有一定空间结构，并能模拟真实器官部分功能的组织类似物的技术，类器官的培养过程中用到了动物细胞培养技术，没有用到体外受精和胚胎移植技术，C错误；
D、肠道干细胞培养成小肠类器官的过程中发生的是细胞分化和细胞增殖，遗传物质一般不会发生改变，D错误。
故选B。
8．D
【分析】限制酶主要从原核生物中分离纯化出来。特异性：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，形成黏性末端和平末端两种。
【详解】A、BamH I和Sau3A I两种限制酶切割后形成互补的黏性末端为GATC，A正确；
B、该DNA分子上有4个Sau3A I的酶切位点，经Sau3A I处理后形成4个DNA片段，可知该DNA分子为环状DNA，用BamH I处理后，得到2个DNA片段，说明该DNA分子上有两个BamH I的酶切位点，B正确；
C、T4DNA连接酶能将双链DNA片段互补的黏性末端之间连接起来，此外还可以连接平末端，但连接平末端时的效率比较低，C正确；
D、该DNA分子上有4个Sau3A I的酶切位点，有2个BamH I的酶切位点，但是BamH I识别序列中包含Sau3A I的识别序列，所以同时用两种酶共同处理，不会形成6个大小不同的DNA片段，D错误。
故选D。
9．B
【分析】分析题意可知，通过基因编辑技术将EGFP基因定点插入到受精卵的Y染色体上，使含有该Y染色体的小鼠能够发出绿色荧光，转基因鼠将Y染色体传递给子代的雄性个体，通过观察荧光可确定早期胚胎的性别。
【详解】A、依据胚胎在不同发育阶段对培养条件的特定需要，受精卵在体外培养时，不同发育阶段的胚胎需用不同成分的培养液，A正确；
B、基因编辑处理的受精卵一般经体外培养至桑椹胚或囊胚阶段，进行胚胎移植，可获得表达EGFP的小鼠，B错误；
C、分离能表达EGFP的胚胎干细胞，通过核移植、早期胚胎培养、胚胎移植等技术，可获得大量的转基因小鼠，C正确；
D、由分析可知，通过基因编辑技术将Y染色体用绿色荧光蛋白基因标记，通过观察早期胚胎的荧光，能表达EGFP的个体含有Y染色体，即为雄性小鼠胚胎，D正确。
故选B。
10．B
【分析】基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。（4）目的基因的检测与鉴定。
【详解】A、将绿色荧光蛋白（GFP）基因、Ga14蛋白基因等转入斑马鱼，可用于监测水体 E 物质，推测斑马鱼的某些细胞存在 E 物质的受体，A正确；
B、结合题图，ERE诱导Gal4 转录，其翻译产物Gal4蛋白与USA结合驱动GFP基因表达可提高监测的灵敏度，这是一个间接驱动而非直接驱动的过程，B错误；
C、用于监测 E 物质污染的转基因斑马鱼最好是不育的，避免因有性生殖带来的基因污染，C正确；
D、基因表达载体最好以显微注射法导入斑马鱼受精卵，受精卵全能性高，基因成功表达的概率大，D正确。
故选B。
11．C
【分析】伴性遗传是指在遗传过程中的子代部分性状由性染色体上的基因控制，这种由性染色体上的基因所控制性状的遗传上总是和性别相关，这种与性别相关联的性状遗传方式就称为伴性遗传。
【详解】A、分析题意，雄性个体不含有W染色体，则ZW系统中染色体组成为ZZ，XY系统中染色体组成为XY（XX为雌性），因此雄性只有1种染色体组成ZZXY，A正确；
B、经研究发现雌性M.mbenji的性染色体只存在三种组成：ZZXX、ZWXY、ZWXX，据此推测可能存在染色体组成为 YY的致死现象，B正确；
C、雌性非洲慈鲷科鱼的性染色体组成为：ZZXX、ZWXY、ZWXX，雄性染色体组成ZZXY，雌性数量相当的非洲慈鲷科鱼 种群，则雌性产生的配子为7ZX、1ZY、3WX、1WY，雄性产生的配子为ZX、ZY，由于 YY个体死亡，WW 个体不存在，则杂交一代后子代的性别比例雌∶雄=7∶4，C错误；
D、科学家成功的将一个荧光蛋白基因导入到了性染色体组成为ZWXY（为雌性）的非洲慈鲷科鱼体内并表达，若探究荧光蛋白基因导入到哪一条性染色体上，可通过杂交的方法进行鉴定，实验思路如下：实验思路：让该鱼与雄性鱼（ZZXY）交配，统计后代荧光个体在雌雄中所占比例。产生的后代为：ZZXX（雌）、ZZXY（雄）、ZWXX（雌）、ZWXY（雌）、ZZXY（雄）、ZZYY（死亡）、ZWXY（雌）、ZWYY（死亡），根据上述实验结果可知，若子代雌鱼中荧光鱼所占比例为3/4，雄鱼中荧光鱼所占比例为1/2，则说明荧光蛋白基因被整合到X染色体上，D正确。
故选C。
12．B
【分析】蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求（基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质）。
【详解】A、蛋白质工程的操作流程与中心法则的方向相反，A错误；
B、蛋白质工程是对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，最终通过基因改造或合成新基因来完成，B正确；
C、对干扰素进行改造需要从预期的蛋白质功能出发，设计预期的蛋白质结构，C错误；
D、蛋白质工程不需要改变蛋白质分子的所有氨基酸序列，如通过蛋白质工程，将干扰素结构上的两个半胱氨酸改为丝氨酸，就可以使其保存半年，而活性不受影响，D错误。
故选B。
13．CD
【分析】生长素的作用表现为两重性：既能促进生长，也能抑制生长；既能促进发芽，也能抑制发芽；既能防止落花落果，也能疏花疏果。生长素所发挥的作用，因为浓度、植物细胞的成熟情况和器官的种类不同而有较大的差异。不同植物对生长素的敏感程度不同，双子也植物>单子叶植物，同一植物的不同器官对生长素的敏感程度不同，敏感程度表现为根>芽>茎。
【详解】A、环境温度从0℃变化到30℃→小鼠细胞内酶的活性保持不变，因为小鼠为恒温动物，即对应①，A错误；
B、恒温且持续光照，光合速率大于呼吸速率，CO2浓度下降，会导致光合速率降低，直到光合速率等于呼吸速率，此后CO2浓度不变，故恒温且持续光照会在一定时间内使密闭容器内CO2浓度逐渐下降而后稳定，不能用③表示，B错误；
C、向植物插条施加IAA，IAA能促进扦插枝条生根，且表现出两重性的特征，因此，插条生根数随IAA浓度变化表现为先上升而后下降，即对应④，C正确；
D、抗生素能抑制细菌的生长，且抗药性越来越强，因此，使用一定量抗生素细菌数量随时间的变化表现为先下降而后上升，即对应⑤，D正确。
故选CD。
14．AB
【分析】胚胎移植的生理基础：（1）供体与受体相同的生理变化，为供体的胚胎植入受体提供了相同的生理环境；（2）胚胎在早期母体中处于游离状态，这就为胚胎的收集提供了可能；（3）子宫不对外来胚胎发生免疫排斥反应，这为胚胎在受体内的存活提供了可能；（4）胚胎遗传性状不受受体任何影响。
【详解】A、胚胎移植中，受体对移入的外来胚胎基本上不会发生免疫排斥，这为胚胎在受体内的存活提供了可能，胚胎移植的实质是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移，A正确；
B、抗体-药物偶联物（ADC）是一类特殊的靶向生物药剂，由抗体、连接头和细胞毒性药物三部分组成，其中，单克隆抗体作为高特异性和高亲和力的组分，能够识别和结合目标肿瘤细胞表面的抗原，从而实现将细胞毒性药物精确、高效地运输至目标肿瘤细胞内，B正确；
C、卵子受精的标志是卵细胞膜和透明带的间隙可以看到两个极体，一个第一极体，一个第二极体，C错误；
D、囊胚进一步扩大，会导致透明带破裂，胚胎从其中伸展出来，这一过程叫做孵化，D错误。
故选AB。
15．ABD
【分析】动物核移植是指将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎经过胚胎移植最终发育为动物个体。核移植得到的动物称克隆动物，该过程中采用显微操作去核法去除卵母细胞中细胞核。
【详解】A、干细胞存在于早期胚胎、骨髓和脐带血等多种组织和器官中，包括胚胎干细胞和成体干细胞。成体干细胞具有组织特异性，只能分化成特定的细胞或组织，不可以发育成完整的个体，A错误；
B、采集的卵母细胞在体外培养到MⅡ中期去核，B错误；
C、在实际操作中，动物体细胞核移植往往是将供体细胞直接注入去核的卵母细胞中，C正确；
D、哺乳动物的核移植可以分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植，胚胎细胞核移植获得克隆动物的难度小于体细胞核移植，因为胚胎细胞的分化程度相对较低，恢复其核的全能性更加容易一些，D错误。
故选ABD。
16．BCD
【分析】1、基因工程的工具：（1）限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。（2）DNA连接酶：连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键。（3）运载体：常用的运载体：质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒。
2、动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体。核移植得到的动物称克隆动物。
【详解】A、某种病毒的外壳蛋白（L1）基因连接在GFP基因的5′末端，获得了L1-GFP融合基因（简称为甲），据图分析，选用产生不同黏性末端的两种限制酶E1和E4进行切割，保证了甲的完整，并且保证融合基因和质粒正确连接，A错误；
B、L1基因和GFP基因连接在同一个启动子和终止子之间，因此若在该细胞中观察到了绿色荧光，则说明L1基因在牛的皮肤细胞中完成了表达，B正确；
C、由于目前仍不能全体外培养，因此为了获得含有甲的转基因牛，最终的操作环节为胚胎移植，C正确；
D、为了检测甲是否存在于克隆牛的不同组织细胞中，可使用PCR方法进行鉴定目的基因甲是否存在，D正确。
故选BCD。
17．(1)稀释涂布平板法
(2)碳源 倒置/倒过来放置
(3)两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落
(4)细菌适宜在中性或弱碱性的环境中生长，苹果呈酸性，不适合细菌生长/青霉菌产生的青霉素等抗生素抑制细菌的生长
(5)检测上述区域中微生物产生的毒素含量
18．(1)（能产生特定抗体的）B淋巴细胞 通过二次免疫使产生抗甲型流感病毒抗体的B淋巴细胞增多
(2)骨髓瘤细胞能无限增殖，可以使融合后的细胞在培养过程中大量增殖 3/三
(3)氨基 蝶呤未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞
(4)抗体 阳性
19．(1)胚胎移植 动物细胞培养 胚胎分割/早期胚胎培养
(2)MⅡ 获能 同期发情
(3)滋养层 有无Y染色体
(4)桑葚胚 囊胚 内细胞团均等分割 不需要
(5)供体
20．(1)使DNA聚合酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸 EcRI、KpnI
(2)3′—TAAGTTGTCTCTTAAG—5′
(3)白 不一定能 EcRI切割目的基因和质粒两端的黏性末端相同，构建的重组质粒可能目的基因和质粒反向连接而成，目的基因无法正常表达 白 重组质粒由于LacZ基因被切断，无法合成半乳糖苷酶分解X-gal，菌落呈白色
(4)大肠杆菌细胞内无内质网和高尔基体等细胞器，不能对多肽链进行加工
21．(1)人的生长激素基因在垂体细胞中选择性表达 逆转录
(2)生长激素基因 14
(3)Ca2+
(4)特殊结构的DNA片段 Alu Ⅰ Hind Ⅱ