黑龙江省实验中学2023-2024学年高二下学期期中考试生物试题（学生版+教师版）

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考试时间：75分钟 总分：100分
一、单选题（本题共30道题，每题 1.5分，共45分。每小题给出的四个选项中，只有一项符合题意要求。）
1. 被古人称为“琼浆玉液”的就是利用传统发酵技术加工制成的一种米酒。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 制作米酒所需微生物主要是酵母菌
B. 制作米酒时温度控制在30～35℃更利于酒精发酵
C. 原料小米或大米应淘洗干净蒸熟后立即接种酒曲
D. 米酒制作过程中，在发酵菌种快速增长阶段，菌种进行无氧呼吸
2. 某同学在制作泡菜前，查阅资料得知，可以向泡菜坛中加入一些“陈泡菜水”。在制作泡菜时，他在不同时间测定了泡菜中的亚硝酸盐含量，结果如图所示。下列有关叙述错误的是（ ）
A. 泡菜发酵过程中亚硝酸盐的含量会先升高后降低，可通过检测亚硝酸盐含量确定泡菜取食时间
B. 该同学制作出的泡菜“咸而不酸”，可能的原因是食盐浓度过高、发酵温度过低等
C. 亚硝酸盐含量第3天较低，此时是泡菜的取食的最佳时间
D. 泡菜制作过程中加入的“陈泡菜水”不需要进行灭菌处理
3. 研究人员用刚果红培养基从蔗渣堆肥中筛选、分离出 4 株具有降解纤维素能力的真菌（图示①~④）。下列说法正确的是（ ）
A. 图中培养基应在灭菌后调节pH
B. ①号真菌降解纤维素的能力最强
C. 实验中，需培养基中添加动物血清
D. 可用平板划线法对 4 种菌株进行分离培养
4. 发酵工程一般包括菌种的选育、扩大培养、培养基的配制、灭菌、接种、发酵、产品的分离、提纯等环节。下面有关分析正确的是（ ）
A. 优良菌种只能通过基因工程育种来获得
B. 扩大培养采用液体培养基的目的是增大接种时发酵罐中菌种的数目
C. 发酵时的环境条件不影响微生物代谢物的形成
D. 若发酵产品是微生物细胞本身，可采用提取、纯化措施来获得产品
5. “林都”伊春盛产蓝莓，下图是当地居民以鲜蓝莓为原料天然发酵制作蓝莓酒和蓝莓醋的过程简图。下列叙述正确的是（ ）
A. 发酵过程中的菌种不需要专门接种，去梗后再清洗是为了较少杂菌污染
B. 过程③在氧气、糖源都充足条件下可直接发酵为蓝莓醋
C. 过程③、④中主要发酵菌种的细胞结构相同，后者在过程⑤中已经失去了发酵能力
D. 过程④⑤的发酵条件不同，过程④所需的最适温度高于过程⑤
6. 诗句“也是人间玉，无非香不同。初闻封鼻孔，细品引馋虫。”描述的正是我国古代劳动人民创造出的一种经过微生物发酵制作的大豆食品—腐乳。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 微生物产生的脂肪酶能将豆腐中的脂肪分解为甘油和氨基酸
B. 腐乳味道鲜美主要是因为豆腐中蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸
C. 低温有利于毛霉的菌丝会生长，易进入豆腐块的深层
D. 只有毛霉参与了豆腐的发酵，所以制作腐乳的过程中必须保持无菌操作
7. 做酵母菌的纯培养实验时，既要配制适宜的培养基，又要防止杂菌污染。下列说法错误的是（ ）
A. 实验中的目的是获得菌落都是由单个酵母菌繁殖形成的
B. 煮熟的马铃薯滤液中加入适量的葡萄糖或蔗糖，对酵母菌生长有利
C. 配制好的培养基可以采用高压蒸汽灭菌，以防止杂菌污染培养基
D. 在酒精灯火焰旁进行划线操作，划线前后都要灼烧接种环
8. 芽孢杆菌耐高温，是常见的蛋白酶生产菌。培养基中的蛋白质可被蛋白酶降解后在菌落周围形成透明圈。如图是筛选蛋白酶高产菌株的过程，下列叙述正确的是（ ）
A. 70～80℃水浴10分钟的目的是给芽孢杆菌提供培养的适宜温度
B. 在酒精灯火焰旁将样品用蒸馏水稀释并涂布接种
C. 以奶粉为唯一氮源的培养基能起到选择作用
D. 通过透明圈大小可筛选出蛋白酶高产菌株
9. 我国科研人员构建了一株嗜盐单胞菌H，并以糖蜜（甘蔗榨糖后的废弃液，含较多蔗糖）或餐厨垃圾等为原料，在实验室生产PHA等新型高附加值可降解材料，工艺流程如图。下列分析合理的是（ ）
A. 为避免杂菌污染，可适当降低发酵液中盐的浓度
B. 搅拌器能使菌株H与培养液充分接触，提高原料利用率
C. 嗜盐单胞菌H的选育和扩大培养是该发酵工程的中心环节
D. 嗜盐单胞菌H是厌氧菌，通过无氧呼吸过程获得PHA产品
10. 青霉素别名盘尼西林，它是最早发现、最先提纯、临床上应用最广的一种抗生素，发酵工程中常利用产黄青霉来生产青霉素，产黄青霉生长最适温度和产生青霉素的适宜温度不同。下列相关叙述错误的是（ ）
A. 选育菌种时，可以借助诱变育种获取高产青霉素的产黄青霉菌株
B. 黄青霉可以产生抗生素，发酵设备和培养基无需严格灭菌处理
C. 了提高青霉素产量，发酵时不同阶段要控制不同温度
D. 发酵结束后，可采用提取、分离和纯化等方法从发酵液中提取青霉素
11. 藿香是一味重要的中草药，《本草纲目》记载“豆叶曰藿，其叶似之，故名”。如图为藿香叶片植物组织培养流程。下列叙述错误的是（ ）
A. 外植体可用酒精和次氯酸钠溶液消毒
B. 过程②为脱分化，不需要光照
C. 过程③为再分化，需要赤霉素诱导
D. 诱导生芽和生根的植物激素比例不同
12. 某研究小组为测定药物对体外培养细胞毒性的大小，准备对某种动物的肝肿瘤细胞（甲）和正常肝细胞（乙）进行动物细胞培养。下列说法正确的是（ ）
A. 制备肝细胞悬液时，可用胃蛋白酶处理肝组织
B. CO2培养箱中O2浓度维持在95%左右，以促进细胞呼吸
C. 本实验是对比实验，以检测药物对甲、乙的毒性大小，无需设置对照组
D. 培养过程中，需要对培养液定期更换，创造无毒环境
13. 某公司引进了几头纯种荷斯坦奶牛，想利用胚胎工程技术繁育良种奶牛群体。下列叙述正确的是（ ）
A. 采集的精子和卵母细胞可直接用于体外受精，在体外培育成早期胚胎
B. 为一次获得更多成熟卵子，可以给优良供体母牛注射外源生长激素
C. 对奶牛胚胎进行分割时，应选择发育良好、形态正常的桑葚胚或囊胚进行均等分割
D. 进行胚胎移植前，需对供体和受体进行免疫检查，以防止发生免疫排斥反应
14. 大剂量的X射线能随机破坏染色体的结构，使其发生断裂、易位、染色体消除等，使细胞不再持续分裂。碘乙酰胺可使植物细胞质中某些酶失活，导致细胞无法分裂。现欲利用上述方法及植物体细胞杂交技术确保小麦在不改变自身染色体数目的情况下获得偃麦草的耐盐性状。下列叙述正确的是（ ）
A. 融合前需要用纤维素酶和蛋白酶处理小麦和偃麦草的体细胞
B. 融合前应用X射线处理小麦的原生质体，用碘乙酰胺处理偃麦草的原生质体
C. 只有融合成功的杂种细胞才能在培养基上正常生长、分裂
D. 诱导两种植物的原生质体融合时可用PEG融合法、灭活病毒诱导法等
15. 草莓是无性繁殖的作物，它感染的病毒很容易传播给后代。病毒在草莓体内逐年积累，会导致产量降低，品质变差。下图是育种工作者选育高品质草莓的流程图。下列说法错误的是（ ）
A. 因为甲是分生区，细胞的分生能力强，所以被选作组织培养材料
B. 需要用体积分数70%的酒精和质量分数5%次氯酸钠溶液对甲进行消毒
C. 植物组织培养过程中，更容易受到培养条件和诱变因素的影响而产生突变
D. 需要用不同的方法对两种选育方式的效果进行鉴定
16. 2013年8月，世界上第一个“试管汉堡”问世，其中的“牛肉饼”是科学家通过体外培养牛的细胞而得到的，其基本流程如下图所示。下列叙述正确的是（ ）
A. 过程①应选择胚胎或幼龄组织以利于全能性表达
B. 过程②需添加经过高压蒸汽灭菌后的动物血清
C. 过程③应采用开放式培养以满足气体需求
D. 此项技术的开发在一定程度上可以缓解某些环境问题
17. 下图表示抗人体胃癌的单克隆抗体的制备过程，下列有关叙述不正确的是（ ）

A. 图中实验小鼠注射的甲是能与抗人体胃癌抗体特异性结合的抗原
B. 利用PEG融合法、灭活的病毒诱导法和电融合法等均可诱导细胞融合获得乙
C. 用特定的选择培养基对乙筛选，融合细胞均能生长，未融合细胞均不能生长
D. 丙需进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选后可获得大量能分泌所需抗体的丁
18. 体细胞核移植技术在畜牧业、医药卫生、拯救濒危动物等方面有着广泛的应用前景。下列关于动物细胞核移植技术应用的叙述，正确的是（ ）
A. 哺乳动物胚胎细胞核移植的难度明显高于体细胞核移植的
B. 利用体细胞核移植技术培育的生物反应器生产医用蛋白需与转基因技术结合
C. 克隆动物与供核动物的遗传性状完全相同，原因是遗传物质主要分布在细胞核中
D. 将患者细胞核移植到胚胎干细胞，诱导重组干细胞发育形成的器官也会发生免疫排斥反应
19. 目前发现的双胞胎有同卵双胞胎、异卵双胞胎和“半同卵双胞胎”。1对“半同卵小姐弟双胞胎”形成过程如图所示，图中染色单体分离后分别移向细胞的三个不同方向，从而分裂成a、b、c三个细胞，染色体全部来自父系的“合子”致死。其中两个细胞发育成姐弟二人。下列说法，正确的是（ ）
A. 卵子在子宫内发育成熟并完成受精过程
B. 受精卵发育为桑葚胚的过程是在透明带内完成的，孵化后进入囊胚期阶段
C. 若细胞a的染色体组成为MP1，则细胞b的染色体组成也为MP1
D. 这对双胞胎来源于母亲的染色体相同，来源于父亲的染色体一定不同
20. 我国研究人员将体外培养的胎猴体细胞注射到去核卵母细胞，形成重构胚，最终培育了两只克隆猴。以下说法正确的是（ ）
A. 体外培养体细胞的原理是动物体细胞具有全能性
B. 核移植技术中去核是指去除细胞核
C. 胚胎移植前应对供体母猴进行同期发情处理
D. 代孕母猴对植入的胚胎不会发生严重的免疫排斥反应
21. 下列关于“DNA粗提取与鉴定”实验的叙述，错误的是（ ）
A. 可选择哺乳动物或鸟类的成熟红细胞作为实验材料
B. 二苯胺试剂和斐林试剂都需要现配现用
C. 使用预冷的无水乙醇能溶解杂质，不能溶解DNA
D. 提取植物细胞的DNA时，加入的研磨液能溶解DNA
22. 下列相关叙述，哪一项不是基因工程中的载体所必需具备的特征（ ）
A. 具有多种限制酶切割位点，以便目的基因的插入
B. 对受体细胞无害，且易从供体细胞分离出来
C. 必需要有青霉素抗性基团，以便对重组DNA进行筛选
D. 能在受体细胞中稳定保存，使目的基因能在受体细胞中稳定保存
23. 下面表示“DNA粗提取与鉴定”实验的基本流程，相关叙述错误的是（ ）
①取材→②破碎细胞→③获得滤液→④去除杂质→⑤进一步提纯→⑥DNA鉴定
A. 本实验使用了体积分数为95%的酒精
B. 步骤①中可以使用猪的肝细胞作为实验材料
C. 步骤③中需要使用纱布对研磨液进行过滤后立即取滤液加入酒精
D. 步骤⑥向试管中加入二苯胺试剂后沸水加热5min冷却后观察颜色
24. 下列关于基因工程基本工具的叙述，正确的是（ ）
A. 限制酶能特异性地识别6个核苷酸序列
B. 限制酶切割DNA分子一次可断开1个磷酸二酯键，产生1个游离的磷酸基团
C. 有些DNA连接酶既能连接黏性末端，又能连接平末端，从而恢复被切开的磷酸二酯键
D. 用做分子运输车的质粒常有特殊的抗生素合成基因，便于重组DNA分子的筛选
25. 从自然界中筛选具有优良性状的菌种的一般步骤为：采集样品→富集培养（使菌体数量增多）→纯种分离→性能测定，若取10g土样加入90ml无菌水，摇匀后取1ml上清液加入盛有9ml无菌水，依次等比稀释。采用两种接种方法接种后纯化培养的效果图如a、b。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 一般可使用固体培养基进行富集培养
B. 为获得纯种的目的菌种，需对采集的样品进行灭菌
C. 获得图a所示结果的接种过程中，接种环需灼烧灭菌3次
D. 利用图b计算出样品中菌体浓度为5．85×108个/ml，则接种稀释液的稀释倍数为106倍
26. 青霉素是一种常用的抗生素，其工业化生产流程如图所示。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 过程①、②目的是去除杂菌
B. 过程③可以用化学药物进行灭菌处理
C. 过程④常用的方法是过滤和沉淀
D. 只能利用转基因的方法培育青霉素高产菌株
27. 花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病。野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。用一定剂量的紫外线处理黑芥原生质体可使其染色体片段化，并丧失再生能力。再利用此原生质体作为部分遗传物质的供体与完整的花椰菜原生质体融合，以获得抗黑腐病杂种植株。流程如下图：下列表述正确的是（ ）
A. ③和④过程涉及的激素主要是生长素和赤霉素
B. 用①处理细胞时需要在较低渗透压溶液中进行
C. 灭活是指利用物理或化学手段破坏病毒或细菌的抗原结构进而使其失去感染能力，但是灭活的仙台病毒不可促进②过程
D. 显微镜下供体叶绿体的存在可作为初步筛选杂种细胞的标志
28. 2017年中国科学家利用“聪明的化学方法和操作技巧（10s内去核，15s内核移植）”成功培育了体细胞克隆猴，流程如下，下列叙述错误的是（ ）
A. 科学家多年反复实验带来的娴熟技术使卵细胞受损减少
B. 核移植前用“灭活病毒短暂处理”主要目的是诱导细胞融合
C. “聪明的化学方法”主要指图中①②，通过调节组蛋白修饰而抑制基因表达
D. 上述技术有助于加速针对阿尔茨海默病、免疫缺陷、肿瘤等的新药研发进程
29. 我国科学家领衔在世界上首次将人类多能干细胞（PSC）转化为8细胞阶段的全能性胚胎样细胞（8CLC，相当于受精卵发育3天状态的全能干细胞），并且转化产生的8CLC在体内还能分化成胎盘细胞。下列有关说法错误的是（ ）
A. PSC能发育成多种组织，体现了细胞的全能性
B. 8CLC在体外培养时能被诱导分化为造血干细胞
C. 8CLC在体内可逐渐分化成胎儿的各种组织细胞，体现了基因的选择性表达
D. 人体内胎盘是由囊胚期滋养层细胞发育而来的
30. 下图为不同限制性核酸内切膀识别的序列及切割位置（箭头所指），下列叙述错误的是（ ）

A. 图示4种限制性核酸内切酶均不能够识别和切割RNA分子内的核苷酸序列
B. 用酶Bgl II切出的目的基因与酶BamH I切割的质粒重组后，则不能再被这两种酶切开
C. 酶切时使用两种限制酶同时处理是为了防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化
D. 若DNA上的碱基随机排列，Nt I限制酶切割位点出现频率较其他三种限制性核酸内切酶高
二、不定项选择题（本题共5道题，每题3分，共15分。在每小题给出的四个选项中，有一项或多项符合要求。）
31. 高压蒸汽灭菌条件下持续20分钟会杀死芽孢，因此无菌操作中可以利用非致病性的嗜热脂肪杆菌的芽孢作为指示菌来测定灭菌效果。为检验生物指示剂是否出现阳性变化，灭菌结束后需用工具在塑料瓶外挤破安瓿瓶，使菌片浸没在紫色培养液内并进行培养，若芽孢可以生长会使培养液变为黄色。下列叙述正确的是（ ）
A. 灭菌后培养嗜热脂肪杆菌菌片的紫色培养液属于鉴别培养基
B. 当灭菌锅中的生物指示剂培养结果为阳性时说明灭菌合格
C. 安瓿瓶中培养液的作用是使芽孢复苏
D. 湿热灭菌只能利用高压蒸汽进行灭菌
32. 餐余垃圾的处理一直是困扰人们的问题。为筛选出对抗生素有抗性且能高效降解淀粉的生物，实验小组将餐余垃圾粉碎后，加入装有无菌水的锥形瓶中制备成餐余垃圾浸出液，选过程如图所示①-⑤为培养基上长出的菌落。下列相关叙述正确的是（ ）
A. X培养基是以淀粉为唯一碳源并添加抗生素的选择培养基
B. 与X培养基相比，Y培养基中不含碘液和琼脂
C. 餐余垃圾浸出液在接种前通常需要先灭菌再进行梯度稀释
D. ②~⑤均为淀粉分解菌，其中能高效降解淀粉的微生物是⑤
33. 下列关于动物细胞工程和胚胎工程的叙述，正确的是（ ）
A. 抗体一药物偶联物（ADC）中单克隆抗体主要发挥靶向运输作用
B. 胚胎移植的优势是可以充分发挥雄性优良个体的繁殖潜力
C. 克隆牛技术涉及体细胞核移植、动物细胞培养、胚胎移植等过程
D. 将小鼠桑葚胚分割成2等份获得同卵双胎的过程属于有性生殖
34. 现已建立一种简便快捷、适用于诺如病毒常见流行株的胶体金免疫层析检测方法。即用常见流行株GII.4型诺如病毒的衣壳蛋白P颗粒作为抗原利用小鼠制备单克隆抗体1B10（浓度为5 mg/mL）和1D6（浓度2.2 mg/mL）。利用羊制备羊抗鼠抗体作为控制线组装成胶体金试纸条（见图）。下列错误的是（ ）
A. 单克隆抗体1B10和单克隆抗体1D6特异性识别同一种抗原
B. 胶体金试纸条上使用的三种抗体由同一种杂交瘤细胞合成并分泌
C. 检测时，在控制线和检测线出现两条色带时，表示结果阳性
D. 胶体金试纸条可以用来检测所有类型诺如病毒感染导致的胃肠炎
35. 下列有关基因工程工具的叙述，正确的是（ ）
A. 一种限制性内切核酸酶只能识别某种特定的核糖核苷酸序列
B. E.cli DNA连接酶只能将具有互补黏性末端的DNA片段连接
C. 限制性酶、DNA连接酶和质粒是基因工程中常用的三种工具酶
D. 新冠病毒（RNA病毒）不可以作为基因工程的载体
三、非选择题
36. 黄曲霉和寄生曲霉是常见的真菌，多见于发霉的粮食、粮制品及其它霉腐的有机物上。黄曲霉素是由黄曲霉和寄生曲霉等产生的代谢产物，具有极强的毒性和致癌性。科研人员用黄曲霉素B1（AFB1）的结构类似物——豆香素（C9H6O2）筛选出能高效降解AFB1的菌株，具体过程如下图所示，其中序号代表过程。
（1）为了筛选到AFB1降解菌，应该在_______________（填“霉变的”或“正常的”）食粮上采样。
（2）在筛选AFB1降解菌时，1号培养基的唯一碳源是________，过程③所需要的工具是________。2号培养基加入琼脂的目的是_______________________。
（3）在此过程中，鉴定不同菌落降解AFB1能力的方法是准备含有等量黄曲霉素的液体培养基若干瓶，将挑取不同菌落放置在不同的瓶子中，一段时间后，测量____________________为衡量指标。
（4）经检测发现上清液中存在多种蛋白质，为验证蛋白质K是降解AFB1的有效成分，科研小组设计了实验过程，如下表。表中①、②、③分别表示_________（用“+”或“—”表示）。该实验的自变量是______________；如果验证成功，则④与⑤的大小比较关系是______。
表中“+”表示添加，“—”表示不添加，甲乙试管所加物质的量均相同。
37. 甲、乙两名同学分别以某种植物的绿色叶片和白色花瓣为材料，利用植物组织培养技术繁殖该植物，问答下列问题：
（1）以该植物的绿色叶片和白色花瓣作为外植体，在一定条件下进行组织培养，均能获得试管苗，其原因是______________________________。
（2）外植体被诱导形成了愈伤组织，愈伤组织的特点是__________________，甲、乙同学在诱导愈伤组织所用的培养基中，均加入一定量的蔗糖，目的之一是________________。
（3）图中A、B、C所示的是不同的培养结果，图中____________（字母）结果在培养过程中需要适当的光照处理。请再写出一个培养过程中需要注意的事项?___________________________。
（4）若该种植物是一种杂合体的名贵花卉，要快速获得与原植株基因型和表现型都相同的该种花卉，可用组织培养方法繁殖。在培养时，能否采用花粉粒作为外植体?如果能，请用流程图写出培养过程；如果不能，解释其原因。_______________。
38. 2017年，我国科学家利用“聪明的化学方法和操作技巧”成功培育出了体细胞克隆猴“中中”和“华华”，该成果一经公布轰动了全世界。如图所示为克隆猴的培育过程。回答下列问题：
（1）我国科学家经过多年的反复试验，可以在10 s之内对卵母细胞进行去核操作，在15秒之内完成核移植，操作迅速使卵细胞受损极小，在技巧上保证了实验的成功。实际操作中，去核前应保证采集的卵母细胞在体外培养至_______期；核移植的具体操作是_______________，再经过电融合从而得到重构胚；核移植前需用灭活的仙台病毒对体细胞进行短暂处理，作用是_____________。
（2）“聪明的化学方法”也是保证实验成功的条件。我国科学家将组蛋白去甲基化酶（Kdm4d）的mRNA注入重构胚，同时用组蛋白脱乙酰酶抑制剂（TSA）处理重构胚，提高了胚胎的发育率和妊娠率。Kdm4d和TSA的作用机理是________________，从而改变组蛋白的表观遗传修饰来调控基因表达。Kdm4d和TSA处理前后基因的碱基序列______（填“会”或“不会”）发生改变。
（3）体细胞克隆可以得到大量遗传背景相似或相同的实验动物，这样的实验动物用于医学研究的好处是________________。
39. 随着生物科学技术的发展，动物的生殖方式变得越来越多样化。如图是胚胎工程技术研究及应用的相关情况，供体1是良种荷斯坦高产奶牛，供体2是健康的黄牛，请据图分析并回答下列问题。
（1）图中产生小牛的几个途径中，属于有性繁殖途径的为应用____（填数字）。
（2）应用1中，使用___________技术获得重组细胞，最终获得的良种小牛性别为______。
（3）应用2过程中得到的胚胎应该移植到________________的雌性动物体内。
（4）应用3可解决良种动物快速大量繁殖的问题：对囊胚阶段的胚胎通过胚胎分割技术获得二分胚①和②，操作时需要注意___________，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。若要进行性别鉴定，取_______细胞。
（5）应用4中在胚胎干细胞培养过程中所用的培养基通常需要加入________等天然的成分；动物细胞培养时需通入CO2的主要作用是__________。
40. 如图为大肠杆菌及质粒载体的结构模式图，据图回答下列问题：

（1）a代表的物质和质粒的化学本质相同，都是________，二者还具有其他共同点，如______________。
（2）若质粒DNA分子的切割末端为 ，则与之连接的目的基因切割末端应为___________；可使用___________酶将___________键连接，从而把质粒和目的基因连接在一起。
（3）氨苄青霉素抗性基因在质粒DNA上称为_________，其作用是___________。不同处理或测定
试管甲
试管乙
培养过降解菌的上清液
①
②
蛋白质K水解酶
＋
③
一段时间后，分别加入含AFB1的培养基
测定培养基中AFB1含量
④
⑤