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2025届高考生物一轮总复习选择性必修3第十单元生物技术与工程第49讲动物细胞工程课件
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这是一份2025届高考生物一轮总复习选择性必修3第十单元生物技术与工程第49讲动物细胞工程课件，共60页。PPT课件主要包含了培养液，胰蛋白酶，胶原蛋白酶，单个细胞，②动物细胞培养，停止分裂增殖，相互接触，分裂和分化能力，所有组织和器官，特定的细胞或组织等内容，欢迎下载使用。
【课标要求】 1.阐明动物细胞培养是从动物体获得相关组织，分散成单个细胞后，在适宜的培养条件下让细胞生长和增殖的过程。动物细胞培养是动物细胞工程的基础。2.阐明动物细胞核移植一般是将体细胞核移入一个去核的卵母细胞中，并使重组细胞发育成新胚胎，继而发育成动物个体的过程。3.阐明动物细胞融合是指通过物理、化学或生物学等手段，使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。4.概述细胞融合技术是单克隆抗体制备的重要技术。5.简述干细胞在生物医学工程中有广泛的应用价值。
考点一 动物细胞培养 1．动物细胞培养(1)培养条件。
(2)培养过程。①制备细胞悬液。
[易错提醒] 区分原代培养和传代培养的关键是看用胰蛋白酶处理的对象和是否分瓶。分瓶前，第一次用胰蛋白酶对动物组织进行处理后的培养是原代培养；第二次用胰蛋白酶处理，使细胞从瓶壁上脱离下来，分瓶后的细胞培养为传代培养。
2．干细胞培养及其应用(1)干细胞的概念：动物和人体内仍保留着少数具有__________________的细胞。(2)来源：早期胚胎、骨髓和脐带血等。(3)分类：包括胚胎干细胞(ES细胞)和成体干细胞等。
植物组织培养和动物细胞培养的比较
考向1 动物细胞培养1．(2022·湖北选择考)某兴趣小组开展小鼠原代神经元培养的研究，结果发现其培养的原代神经元生长缓慢，其原因不可能的是( )A．实验材料取自小鼠胚胎的脑组织B．为了防止污染将培养瓶瓶口密封C．血清经过高温处理后加入培养基D．所使用的培养基呈弱酸性
解析：小鼠胚胎脑组织中含有丰富的原代神经元，细胞增殖能力强，不会造成生长缓慢，A项符合题意；培养瓶瓶口密封会使培养液中缺氧，影响细胞有氧呼吸，造成供能不足，可能使细胞生长缓慢，B项不符合题意；血清经过高温处理后，其中活性成分变性，失去原有功能，细胞生存环境严重恶化，可能使细胞生长缓慢，C项不符合题意；小鼠内环境为弱碱性，所使用的培养基呈弱酸性，细胞生存环境恶劣，可能造成细胞生长缓慢，D项不符合题意。
解析：动物细胞培养需要无毒、无菌的环境，甲过程表示从实验小鼠身上取下皮肤组织，该过程需要对小鼠进行消毒处理，A项正确；乙过程表示将皮肤组织分散成单个细胞制备成细胞悬液，可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶进行处理，B项正确；丙过程表示原代培养，C项正确；丁过程表示传代培养，需要对丙过程得到的细胞用胰蛋白酶处理并离心收集，将收集细胞制成细胞悬液，然后分瓶培养，D项错误。
考向2 干细胞的培养及应用3．(2024·汕头一模)通过大量实验，在多种候选基因中筛选出Sx2、Klf4、Oct4、c Myc(简称SKOM)4种基因。将这些基因导入高度分化的体细胞，可使其重编程，形成类似胚胎干细胞(ES细胞)的一种细胞类型，称为iPS细胞。下列说法正确的是( )A．不同类型的干细胞分裂和分化潜能基本相同B．胚胎干细胞因需要从胚胎中获取涉及伦理问题而限制了其应用C．诱导产生iPS细胞的过程中需用到基因工程技术和核移植技术D．iPS细胞和ES细胞具有相同的基因组成且都能体现出细胞的全能性
解析：不同类型的干细胞分化潜能是有差别的，如胚胎干细胞的分化潜能大于造血干细胞，A项错误；胚胎干细胞(ES细胞)是从早期胚胎中分离出来的一类细胞，全能性较高，但会涉及伦理问题，其对在医学上的应用有一定限制，B项正确；根据题意可知，将Sx2、Klf4、Oct4、cMyc基因导入高度分化的体细胞可使其重编程，形成iPS细胞，需要用到基因工程，没有应用核移植技术，C项错误；根据ES细胞的来源及iPS细胞的形成可知，它们基因组成不同，D项错误。
考点二 动物细胞融合技术与单克隆抗体 1．动物细胞融合技术
[易错提醒] 灭活病毒诱导法是动物细胞融合特有的方法。
2．单克隆抗体及其应用(1)制备原理：一种B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体，B淋巴细胞在体外_______无限增殖；骨髓瘤细胞能在体外________；B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合得到的________细胞，既能无限增殖，又能产生特异性抗体。
[易错提醒] 血清抗体与单克隆抗体的比较
(3)优点。①能准确地识别________的细微差异。②与特定_______发生特异性结合。③可以大量制备。(4)用途。①作为诊断试剂，如利用同位素或荧光标记的单克隆抗体定位诊断肿瘤、心血管畸形等疾病。②用于治疗疾病和____________，如抗体—药物偶联物(ADC)。
[模型命题点思考]为研制抗病毒A的单克隆抗体，某同学以小鼠甲为实验材料设计了以下实验流程。
回答下列问题：(1)上述实验前必须给小鼠甲注射病毒A，该处理的目的是_____________________________________________________。提示：诱导小鼠甲产生能够分泌抗病毒A抗体的B淋巴细胞 (2)写出以小鼠甲的脾脏为材料制备单细胞悬液的主要实验步骤：_____________________________________________________。提示：取小鼠甲的脾脏用机械法或用胰蛋白酶处理，使其分散成单个细胞，加入培养液制成单细胞悬液
(3)为了得到能产生抗病毒A的单克隆抗体的杂交瘤细胞，需要进行筛选。图中筛选1所采用的培养基属于_______________________，使用该培养基进行细胞培养的结果是_____________________________。图中筛选2含多次筛选，筛选所依据的基本原理是_____________________________。
只有杂交瘤细胞能够生存
抗原与抗体的反应具有特异性
(4)若要使能产生抗病毒A的单克隆抗体的杂交瘤细胞大量增殖，可采用的方法有________________________________(答出2点即可)。提示：将杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔内增殖；将杂交瘤细胞在体外条件下大规模培养
1．植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较
2．单克隆抗体制备过程中两次筛选的原因、方法及目的
考向1 动物细胞融合1．(2022·江苏选择考改编)下图表示利用细胞融合技术进行基因定位的过程，在人—鼠杂交细胞中人的染色体会以随机方式丢失，通过分析基因产物进行基因定位。现检测细胞 Ⅰ 、 Ⅱ 、Ⅲ中人的4种酶活性，只有 Ⅱ 具有芳烃羟化酶活性，只有Ⅲ具有胸苷激酶活性， Ⅰ 、Ⅲ 都有磷酸甘油酸激酶活性， Ⅰ 、 Ⅱ 、 Ⅲ 均有乳酸脱氢酶活性。下列相关叙述错误的是( )
A．加入灭活仙台病毒的作用是促进细胞融合B．细胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ分别为人—人、人—鼠、鼠—鼠融合细胞C．芳烃羟化酶基因位于2号染色体上，乳酸脱氢酶基因位于11号染色体上D．胸苷激酶基因位于17号染色体上，磷酸甘油酸激酶基因位于X染色体上
解析：动物细胞融合过程中，可以利用灭活的仙台病毒促进细胞融合，A项正确。细胞Ⅲ中保留了人的X、11、17号染色体，故不会是鼠—鼠融合细胞，B项错误。分析题图可知，Ⅰ保留X、11号染色体，Ⅱ保留2、11号染色体，具有芳烃羟化酶活性，Ⅲ保留X、11、17号染色体，具有胸苷激酶活性，Ⅰ、Ⅲ都有磷酸甘油酸激酶活性，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ均有乳酸脱氢酶活性，所以控制芳烃羟化酶合成的基因位于2号染色体上，控制胸苷激酶合成的基因位于17号染色体上，控制磷酸甘油酸激酶合成的基因位于X号染色体上，控制乳酸脱氢酶合成的基因位于11号染色体上，C项、D项正确。
考向2 单克隆抗体的制备及应用2．人绒毛膜促性腺激素(HCG)是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白，制备抗HCG单克隆抗体可用于早孕的诊断。下面是抗HCG单克隆抗体制备流程示意图。下列有关分析错误的是( )
A.体外培养单个B淋巴细胞也可以获得大量抗HCG的抗体B．过程③培养后的细胞均能产生特定抗体C．图中细胞集落a可用于大规模培养，生产抗HCG单克隆抗体D．图中能产生单克隆抗体的细胞在培养过程中不会出现接触抑制的现象
解析：体外培养的单个B淋巴细胞无法无限增殖，故不能获得大量抗HCG的抗体，A项错误；过程③培养后的细胞是经过多孔玻璃板筛选得到的杂交瘤细胞，均能产生特定抗体，B项正确；据题图可知，题图中细胞集落a能够产生阳性反应，故可用于大规模培养，生产抗HCG单克隆抗体，C项正确；由于杂交瘤细胞既保留了鼠瘤细胞无限增殖的特点，又有B淋巴细胞产生特异性抗体的作用，所以题图中能产生单克隆抗体的细胞在培养过程中不会出现接触抑制的现象，D项正确。
3．(2024·广州一模)双特异性抗体(BsAb)是一种能够同时结合两种抗原的抗体。CD19和CD47是淋巴瘤细胞广泛表达的表面标记物(CD19在B细胞表面普遍存在，CD47在正常组织细胞上普遍存在)。研究人员将两种产生不同抗体的杂交瘤细胞融合成双杂交瘤细胞，最终得到了能同时结合CD19和CD47的BsAb，它可以结合同一靶细胞上两种不同的抗原，通过这种“双靶向”模式增强对肿瘤细胞的选择性，在体内、体外实验中均可显著杀伤淋巴瘤细胞。下列叙述错误的是( )
A．同时注射2种抗原后提取B细胞，易得大量同时分泌两种抗体的浆细胞B．获得BsAb的过程中，筛选双杂交瘤细胞的依据是抗原—抗体的特异性结合C．使用BsAb治疗对正常细胞的损伤小于联合使用CD19单抗和CD47单抗D．若BsAb的部分结构发生改变，可能会出现治疗效果降低的情况
解析：一种浆细胞只能分泌一种相应的抗体，不能同时分泌两种抗体，A项错误；双杂交瘤细胞能产生BsAb，根据抗原—抗体的特异性结合，可筛选出能产生抗CD19和CD47的BsAb的双杂交瘤细胞，B项正确；
根据题意可知，CD19在B细胞表面普遍存在，CD47在正常组织细胞上普遍存在，使用BsAb治疗，可识别同时具有CD19和CD47的淋巴瘤细胞，能特异性杀伤淋巴瘤细胞，由于联合使用CD19单抗和CD47单抗在杀伤淋巴瘤细胞的同时，也可杀伤正常细胞，因此使用BsAb治疗对正常细胞的损伤小于联合使用CD19单抗和CD47单抗，C项正确；若BsAb的部分结构发生改变，识别能力减弱，可能会出现治疗效果降低的情况，D项正确。
考点三 动物体细胞核移植技术和克隆动物 1．概念动物细胞核移植技术是将动物一个细胞的_________移入______________中，使这个重新组合的细胞发育成新胚胎，继而发育成动物个体的技术。2．类型______________和______________。
3．体细胞核移植的过程
[易错提醒] 核移植时选MⅡ期(减数分裂Ⅱ中期)的卵母细胞的原因：此类细胞体积大，易于操作；卵黄多，营养物质丰富；卵母细胞的细胞质中存在激发细胞核全能性表达的物质。
4．体细胞核移植技术的应用前景及存在的问题
1．(2024·汕头高三模拟)为研究治疗性克隆技术能否用于帕金森病的治疗，科研人员利用人帕金森病模型鼠进行下图实验，相关叙述错误的是( )
A.过程①中选择MⅡ期的卵母细胞有利于细胞核全能性恢复B．过程②重组细胞培养依次经历了卵裂、桑葚胚、原肠胚和囊胚等过程C．过程③的关键是利用特定条件诱导胚胎干细胞相关基因表达D．过程④对受体小鼠无须注射免疫抑制剂以抑制其细胞免疫功能
解析：过程②重组细胞培养依次经历了卵裂、桑葚胚、囊胚和原肠胚等过程，B项错误。
2．(2021·湖南选择考)M基因编码的M蛋白在动物A的肝细胞中特异性表达。现设计实验，将外源DNA片段F插入M基因的特定位置，再通过核移植、胚胎培养和胚胎移植等技术获得M基因失活的转基因克隆动物A，流程如下图所示。回答下列问题：
(1)在构建含有片段F的重组质粒过程中，切割质粒DNA的工具酶是____________________________，这类酶能将特定部位的两个核苷酸之间的_________________断开。(2)在无菌、无毒等适宜环境中进行动物A成纤维细胞的原代和传代培养时，需要定期更换培养液，目的是_____________________________________________________。
限制酶(或限制性内切核酸酶)
清除代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞
(3)与胚胎细胞核移植技术相比，体细胞核移植技术的成功率更低，原因是_________________________________________________。从早期胚胎中分离获得的胚胎干细胞，在形态上表现为________________________________________(答出2点即可)，功能上具有_____________________________。
动物体细胞分化程度高，表现全能性十分困难
体积小、细胞核大、核仁明显(答出2点即可)
(4)鉴定转基因动物：以免疫小鼠的____淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行融合，筛选融合杂交细胞，制备M蛋白的单克隆抗体。简要写出利用此抗体确定克隆动物A中M基因是否失活的实验思路。_________________________________________________________。答案：取该转基因动物的肝组织细胞，提取其蛋白质，加入适量的M蛋白的单克隆抗体，观察有无凝集现象(或有无抗原—抗体特异性结合的现象)，若有则说明M基因没有失活，若无则说明M基因失活
高考真题体验1．(2023·海南等级考)某团队通过多代细胞培养，将小鼠胚胎干细胞的Y染色体去除，获得XO胚胎干细胞，再经过一系列处理，使之转变为有功能的卵母细胞。下列有关叙述错误的是( )A．营养供应充足时，传代培养的胚胎干细胞不会发生接触抑制B．获得XO胚胎干细胞的过程发生了染色体数目变异 C．XO胚胎干细胞转变为有功能的卵母细胞的过程发生了细胞分化D．若某濒危哺乳动物仅存雄性个体，可用该法获得有功能的卵母细胞用于繁育
解析：传代培养的胚胎干细胞增殖到贴满瓶壁时会发生接触抑制，A项错误；据题干“将小鼠胚胎干细胞的Y染色体去除，获得XO胚胎干细胞”可知，该过程中发生了染色体数目变异，B项正确；XO胚胎干细胞转变为有功能的卵母细胞的过程中，细胞的形态、结构和生理功能发生了变化，即发生了细胞分化，C项正确；若某濒危哺乳动物仅存雄性个体，可以通过去除胚胎干细胞的Y染色体等一系列处理获得有功能的卵母细胞，用于繁殖后代，D项正确。
2．(2022·北京等级考)将黑色小鼠囊胚的内细胞团部分细胞注射到白色小鼠囊胚腔中，接受注射的囊胚发育为黑白相间的小鼠(Mc)。据此分析，下列叙述错误的是( )A．获得Mc的生物技术属于核移植B．Mc表皮中有两种基因型的细胞C．注射入的细胞会分化成Mc的多种组织D．将接受注射的囊胚均分为二，可发育成两只幼鼠
解析：由题意可知，获得Mc的生物技术并未利用核移植技术，A项错误；接受注射的囊胚发育为黑白相间的小鼠，说明Mc表皮中有两种基因型的细胞，B项正确；内细胞团能发育成胎儿的各种组织，注射的细胞来自黑色小鼠的内细胞团，会分化成Mc的多种组织，C项正确；利用胚胎分割技术将接受注射的囊胚均分为二，可发育成两只幼鼠，D项正确。
3．(2021·辽宁选择考)下图是利用体细胞核移植技术克隆优质奶牛的简易流程图。有关叙述正确的是( )
A.后代丁的遗传性状由甲和丙的遗传物质共同决定B．过程①需要提供95%空气和5%CO2的混合气体C．过程②常使用显微操作法对受精卵进行处理D．过程③将激活后的重组细胞培养至原肠胚移植
解析：后代丁的遗传性状由提供核基因的甲和提供质基因的乙共同决定，A项错误；动物细胞培养需要提供95%空气和5%CO2的混合气体，B项正确；过程②常通过显微操作法去除卵母细胞中的核，而不是受精卵中的核，C项错误；一般将激活后的重组细胞培养至桑葚胚或囊胚阶段后移植，D项错误。
4．(2020·高考江苏卷改编)小鼠胚胎干细胞经定向诱导可获得多种功能细胞，制备流程如下图所示。下列叙述正确的是( )
A．为获得更多的囊胚，采用激素注射促进雄鼠产生更多的精子B．细胞a和细胞b内含有的核基因不同，所以全能性高低不同C．用胰蛋白酶将细胞a的膜蛋白消化后可获得分散的胚胎干细胞D．胚胎干细胞和诱导出的各种细胞都需在CO2培养箱中进行培养
【课标要求】 1.阐明动物细胞培养是从动物体获得相关组织，分散成单个细胞后，在适宜的培养条件下让细胞生长和增殖的过程。动物细胞培养是动物细胞工程的基础。2.阐明动物细胞核移植一般是将体细胞核移入一个去核的卵母细胞中，并使重组细胞发育成新胚胎，继而发育成动物个体的过程。3.阐明动物细胞融合是指通过物理、化学或生物学等手段，使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。4.概述细胞融合技术是单克隆抗体制备的重要技术。5.简述干细胞在生物医学工程中有广泛的应用价值。
考点一 动物细胞培养 1．动物细胞培养(1)培养条件。
(2)培养过程。①制备细胞悬液。
[易错提醒] 区分原代培养和传代培养的关键是看用胰蛋白酶处理的对象和是否分瓶。分瓶前，第一次用胰蛋白酶对动物组织进行处理后的培养是原代培养；第二次用胰蛋白酶处理，使细胞从瓶壁上脱离下来，分瓶后的细胞培养为传代培养。
2．干细胞培养及其应用(1)干细胞的概念：动物和人体内仍保留着少数具有__________________的细胞。(2)来源：早期胚胎、骨髓和脐带血等。(3)分类：包括胚胎干细胞(ES细胞)和成体干细胞等。
植物组织培养和动物细胞培养的比较
考向1 动物细胞培养1．(2022·湖北选择考)某兴趣小组开展小鼠原代神经元培养的研究，结果发现其培养的原代神经元生长缓慢，其原因不可能的是( )A．实验材料取自小鼠胚胎的脑组织B．为了防止污染将培养瓶瓶口密封C．血清经过高温处理后加入培养基D．所使用的培养基呈弱酸性
解析：小鼠胚胎脑组织中含有丰富的原代神经元，细胞增殖能力强，不会造成生长缓慢，A项符合题意；培养瓶瓶口密封会使培养液中缺氧，影响细胞有氧呼吸，造成供能不足，可能使细胞生长缓慢，B项不符合题意；血清经过高温处理后，其中活性成分变性，失去原有功能，细胞生存环境严重恶化，可能使细胞生长缓慢，C项不符合题意；小鼠内环境为弱碱性，所使用的培养基呈弱酸性，细胞生存环境恶劣，可能造成细胞生长缓慢，D项不符合题意。
解析：动物细胞培养需要无毒、无菌的环境，甲过程表示从实验小鼠身上取下皮肤组织，该过程需要对小鼠进行消毒处理，A项正确；乙过程表示将皮肤组织分散成单个细胞制备成细胞悬液，可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶进行处理，B项正确；丙过程表示原代培养，C项正确；丁过程表示传代培养，需要对丙过程得到的细胞用胰蛋白酶处理并离心收集，将收集细胞制成细胞悬液，然后分瓶培养，D项错误。
考向2 干细胞的培养及应用3．(2024·汕头一模)通过大量实验，在多种候选基因中筛选出Sx2、Klf4、Oct4、c Myc(简称SKOM)4种基因。将这些基因导入高度分化的体细胞，可使其重编程，形成类似胚胎干细胞(ES细胞)的一种细胞类型，称为iPS细胞。下列说法正确的是( )A．不同类型的干细胞分裂和分化潜能基本相同B．胚胎干细胞因需要从胚胎中获取涉及伦理问题而限制了其应用C．诱导产生iPS细胞的过程中需用到基因工程技术和核移植技术D．iPS细胞和ES细胞具有相同的基因组成且都能体现出细胞的全能性
解析：不同类型的干细胞分化潜能是有差别的，如胚胎干细胞的分化潜能大于造血干细胞，A项错误；胚胎干细胞(ES细胞)是从早期胚胎中分离出来的一类细胞，全能性较高，但会涉及伦理问题，其对在医学上的应用有一定限制，B项正确；根据题意可知，将Sx2、Klf4、Oct4、cMyc基因导入高度分化的体细胞可使其重编程，形成iPS细胞，需要用到基因工程，没有应用核移植技术，C项错误；根据ES细胞的来源及iPS细胞的形成可知，它们基因组成不同，D项错误。
考点二 动物细胞融合技术与单克隆抗体 1．动物细胞融合技术
[易错提醒] 灭活病毒诱导法是动物细胞融合特有的方法。
2．单克隆抗体及其应用(1)制备原理：一种B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体，B淋巴细胞在体外_______无限增殖；骨髓瘤细胞能在体外________；B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合得到的________细胞，既能无限增殖，又能产生特异性抗体。
[易错提醒] 血清抗体与单克隆抗体的比较
(3)优点。①能准确地识别________的细微差异。②与特定_______发生特异性结合。③可以大量制备。(4)用途。①作为诊断试剂，如利用同位素或荧光标记的单克隆抗体定位诊断肿瘤、心血管畸形等疾病。②用于治疗疾病和____________，如抗体—药物偶联物(ADC)。
[模型命题点思考]为研制抗病毒A的单克隆抗体，某同学以小鼠甲为实验材料设计了以下实验流程。
回答下列问题：(1)上述实验前必须给小鼠甲注射病毒A，该处理的目的是_____________________________________________________。提示：诱导小鼠甲产生能够分泌抗病毒A抗体的B淋巴细胞 (2)写出以小鼠甲的脾脏为材料制备单细胞悬液的主要实验步骤：_____________________________________________________。提示：取小鼠甲的脾脏用机械法或用胰蛋白酶处理，使其分散成单个细胞，加入培养液制成单细胞悬液
(3)为了得到能产生抗病毒A的单克隆抗体的杂交瘤细胞，需要进行筛选。图中筛选1所采用的培养基属于_______________________，使用该培养基进行细胞培养的结果是_____________________________。图中筛选2含多次筛选，筛选所依据的基本原理是_____________________________。
只有杂交瘤细胞能够生存
抗原与抗体的反应具有特异性
(4)若要使能产生抗病毒A的单克隆抗体的杂交瘤细胞大量增殖，可采用的方法有________________________________(答出2点即可)。提示：将杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔内增殖；将杂交瘤细胞在体外条件下大规模培养
1．植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较
2．单克隆抗体制备过程中两次筛选的原因、方法及目的
考向1 动物细胞融合1．(2022·江苏选择考改编)下图表示利用细胞融合技术进行基因定位的过程，在人—鼠杂交细胞中人的染色体会以随机方式丢失，通过分析基因产物进行基因定位。现检测细胞 Ⅰ 、 Ⅱ 、Ⅲ中人的4种酶活性，只有 Ⅱ 具有芳烃羟化酶活性，只有Ⅲ具有胸苷激酶活性， Ⅰ 、Ⅲ 都有磷酸甘油酸激酶活性， Ⅰ 、 Ⅱ 、 Ⅲ 均有乳酸脱氢酶活性。下列相关叙述错误的是( )
A．加入灭活仙台病毒的作用是促进细胞融合B．细胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ分别为人—人、人—鼠、鼠—鼠融合细胞C．芳烃羟化酶基因位于2号染色体上，乳酸脱氢酶基因位于11号染色体上D．胸苷激酶基因位于17号染色体上，磷酸甘油酸激酶基因位于X染色体上
解析：动物细胞融合过程中，可以利用灭活的仙台病毒促进细胞融合，A项正确。细胞Ⅲ中保留了人的X、11、17号染色体，故不会是鼠—鼠融合细胞，B项错误。分析题图可知，Ⅰ保留X、11号染色体，Ⅱ保留2、11号染色体，具有芳烃羟化酶活性，Ⅲ保留X、11、17号染色体，具有胸苷激酶活性，Ⅰ、Ⅲ都有磷酸甘油酸激酶活性，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ均有乳酸脱氢酶活性，所以控制芳烃羟化酶合成的基因位于2号染色体上，控制胸苷激酶合成的基因位于17号染色体上，控制磷酸甘油酸激酶合成的基因位于X号染色体上，控制乳酸脱氢酶合成的基因位于11号染色体上，C项、D项正确。
考向2 单克隆抗体的制备及应用2．人绒毛膜促性腺激素(HCG)是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白，制备抗HCG单克隆抗体可用于早孕的诊断。下面是抗HCG单克隆抗体制备流程示意图。下列有关分析错误的是( )
A.体外培养单个B淋巴细胞也可以获得大量抗HCG的抗体B．过程③培养后的细胞均能产生特定抗体C．图中细胞集落a可用于大规模培养，生产抗HCG单克隆抗体D．图中能产生单克隆抗体的细胞在培养过程中不会出现接触抑制的现象
解析：体外培养的单个B淋巴细胞无法无限增殖，故不能获得大量抗HCG的抗体，A项错误；过程③培养后的细胞是经过多孔玻璃板筛选得到的杂交瘤细胞，均能产生特定抗体，B项正确；据题图可知，题图中细胞集落a能够产生阳性反应，故可用于大规模培养，生产抗HCG单克隆抗体，C项正确；由于杂交瘤细胞既保留了鼠瘤细胞无限增殖的特点，又有B淋巴细胞产生特异性抗体的作用，所以题图中能产生单克隆抗体的细胞在培养过程中不会出现接触抑制的现象，D项正确。
3．(2024·广州一模)双特异性抗体(BsAb)是一种能够同时结合两种抗原的抗体。CD19和CD47是淋巴瘤细胞广泛表达的表面标记物(CD19在B细胞表面普遍存在，CD47在正常组织细胞上普遍存在)。研究人员将两种产生不同抗体的杂交瘤细胞融合成双杂交瘤细胞，最终得到了能同时结合CD19和CD47的BsAb，它可以结合同一靶细胞上两种不同的抗原，通过这种“双靶向”模式增强对肿瘤细胞的选择性，在体内、体外实验中均可显著杀伤淋巴瘤细胞。下列叙述错误的是( )
A．同时注射2种抗原后提取B细胞，易得大量同时分泌两种抗体的浆细胞B．获得BsAb的过程中，筛选双杂交瘤细胞的依据是抗原—抗体的特异性结合C．使用BsAb治疗对正常细胞的损伤小于联合使用CD19单抗和CD47单抗D．若BsAb的部分结构发生改变，可能会出现治疗效果降低的情况
解析：一种浆细胞只能分泌一种相应的抗体，不能同时分泌两种抗体，A项错误；双杂交瘤细胞能产生BsAb，根据抗原—抗体的特异性结合，可筛选出能产生抗CD19和CD47的BsAb的双杂交瘤细胞，B项正确；
根据题意可知，CD19在B细胞表面普遍存在，CD47在正常组织细胞上普遍存在，使用BsAb治疗，可识别同时具有CD19和CD47的淋巴瘤细胞，能特异性杀伤淋巴瘤细胞，由于联合使用CD19单抗和CD47单抗在杀伤淋巴瘤细胞的同时，也可杀伤正常细胞，因此使用BsAb治疗对正常细胞的损伤小于联合使用CD19单抗和CD47单抗，C项正确；若BsAb的部分结构发生改变，识别能力减弱，可能会出现治疗效果降低的情况，D项正确。
考点三 动物体细胞核移植技术和克隆动物 1．概念动物细胞核移植技术是将动物一个细胞的_________移入______________中，使这个重新组合的细胞发育成新胚胎，继而发育成动物个体的技术。2．类型______________和______________。
3．体细胞核移植的过程
[易错提醒] 核移植时选MⅡ期(减数分裂Ⅱ中期)的卵母细胞的原因：此类细胞体积大，易于操作；卵黄多，营养物质丰富；卵母细胞的细胞质中存在激发细胞核全能性表达的物质。
4．体细胞核移植技术的应用前景及存在的问题
1．(2024·汕头高三模拟)为研究治疗性克隆技术能否用于帕金森病的治疗，科研人员利用人帕金森病模型鼠进行下图实验，相关叙述错误的是( )
A.过程①中选择MⅡ期的卵母细胞有利于细胞核全能性恢复B．过程②重组细胞培养依次经历了卵裂、桑葚胚、原肠胚和囊胚等过程C．过程③的关键是利用特定条件诱导胚胎干细胞相关基因表达D．过程④对受体小鼠无须注射免疫抑制剂以抑制其细胞免疫功能
解析：过程②重组细胞培养依次经历了卵裂、桑葚胚、囊胚和原肠胚等过程，B项错误。
2．(2021·湖南选择考)M基因编码的M蛋白在动物A的肝细胞中特异性表达。现设计实验，将外源DNA片段F插入M基因的特定位置，再通过核移植、胚胎培养和胚胎移植等技术获得M基因失活的转基因克隆动物A，流程如下图所示。回答下列问题：
(1)在构建含有片段F的重组质粒过程中，切割质粒DNA的工具酶是____________________________，这类酶能将特定部位的两个核苷酸之间的_________________断开。(2)在无菌、无毒等适宜环境中进行动物A成纤维细胞的原代和传代培养时，需要定期更换培养液，目的是_____________________________________________________。
限制酶(或限制性内切核酸酶)
清除代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞
(3)与胚胎细胞核移植技术相比，体细胞核移植技术的成功率更低，原因是_________________________________________________。从早期胚胎中分离获得的胚胎干细胞，在形态上表现为________________________________________(答出2点即可)，功能上具有_____________________________。
动物体细胞分化程度高，表现全能性十分困难
体积小、细胞核大、核仁明显(答出2点即可)
(4)鉴定转基因动物：以免疫小鼠的____淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行融合，筛选融合杂交细胞，制备M蛋白的单克隆抗体。简要写出利用此抗体确定克隆动物A中M基因是否失活的实验思路。_________________________________________________________。答案：取该转基因动物的肝组织细胞，提取其蛋白质，加入适量的M蛋白的单克隆抗体，观察有无凝集现象(或有无抗原—抗体特异性结合的现象)，若有则说明M基因没有失活，若无则说明M基因失活
高考真题体验1．(2023·海南等级考)某团队通过多代细胞培养，将小鼠胚胎干细胞的Y染色体去除，获得XO胚胎干细胞，再经过一系列处理，使之转变为有功能的卵母细胞。下列有关叙述错误的是( )A．营养供应充足时，传代培养的胚胎干细胞不会发生接触抑制B．获得XO胚胎干细胞的过程发生了染色体数目变异 C．XO胚胎干细胞转变为有功能的卵母细胞的过程发生了细胞分化D．若某濒危哺乳动物仅存雄性个体，可用该法获得有功能的卵母细胞用于繁育
解析：传代培养的胚胎干细胞增殖到贴满瓶壁时会发生接触抑制，A项错误；据题干“将小鼠胚胎干细胞的Y染色体去除，获得XO胚胎干细胞”可知，该过程中发生了染色体数目变异，B项正确；XO胚胎干细胞转变为有功能的卵母细胞的过程中，细胞的形态、结构和生理功能发生了变化，即发生了细胞分化，C项正确；若某濒危哺乳动物仅存雄性个体，可以通过去除胚胎干细胞的Y染色体等一系列处理获得有功能的卵母细胞，用于繁殖后代，D项正确。
2．(2022·北京等级考)将黑色小鼠囊胚的内细胞团部分细胞注射到白色小鼠囊胚腔中，接受注射的囊胚发育为黑白相间的小鼠(Mc)。据此分析，下列叙述错误的是( )A．获得Mc的生物技术属于核移植B．Mc表皮中有两种基因型的细胞C．注射入的细胞会分化成Mc的多种组织D．将接受注射的囊胚均分为二，可发育成两只幼鼠
解析：由题意可知，获得Mc的生物技术并未利用核移植技术，A项错误；接受注射的囊胚发育为黑白相间的小鼠，说明Mc表皮中有两种基因型的细胞，B项正确；内细胞团能发育成胎儿的各种组织，注射的细胞来自黑色小鼠的内细胞团，会分化成Mc的多种组织，C项正确；利用胚胎分割技术将接受注射的囊胚均分为二，可发育成两只幼鼠，D项正确。
3．(2021·辽宁选择考)下图是利用体细胞核移植技术克隆优质奶牛的简易流程图。有关叙述正确的是( )
A.后代丁的遗传性状由甲和丙的遗传物质共同决定B．过程①需要提供95%空气和5%CO2的混合气体C．过程②常使用显微操作法对受精卵进行处理D．过程③将激活后的重组细胞培养至原肠胚移植
解析：后代丁的遗传性状由提供核基因的甲和提供质基因的乙共同决定，A项错误；动物细胞培养需要提供95%空气和5%CO2的混合气体，B项正确；过程②常通过显微操作法去除卵母细胞中的核，而不是受精卵中的核，C项错误；一般将激活后的重组细胞培养至桑葚胚或囊胚阶段后移植，D项错误。
4．(2020·高考江苏卷改编)小鼠胚胎干细胞经定向诱导可获得多种功能细胞，制备流程如下图所示。下列叙述正确的是( )
A．为获得更多的囊胚，采用激素注射促进雄鼠产生更多的精子B．细胞a和细胞b内含有的核基因不同，所以全能性高低不同C．用胰蛋白酶将细胞a的膜蛋白消化后可获得分散的胚胎干细胞D．胚胎干细胞和诱导出的各种细胞都需在CO2培养箱中进行培养
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