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    [生物]江苏省镇江市2024-2025学年高三上学期开学考试(解析版)
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    [生物]江苏省镇江市2024-2025学年高三上学期开学考试(解析版)

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    这是一份[生物]江苏省镇江市2024-2025学年高三上学期开学考试(解析版),共26页。

    1.本试卷共8页,满分为100分,考试时间为75分钟。考试结束后,请将答题卡交回。
    2.答题前,请务必将自己的姓名、准考证号用0.5毫米黑色墨水的签字笔填写答题卡的规定位置。
    3.请认真核对答题卡上所粘贴的条形码上的姓名、准考证号与本人是否相符。
    4.作答选择题,必须用2B铅笔将答题卡上对应选项的方框涂满、涂黑;如需改动,请用橡皮擦干净后,再选涂其他答案。作答非选择题,必须用0.5毫米黑色墨水的签字笔在答题卡上的指定位置作答,在其他位置作答一律无效。
    5.如需作图,必须用2B铅笔绘、写清楚,线条、符号等须加黑、加粗。
    一、单项选择题:本题包括15小题,每小题2分,共30分。每小题只有一个选项最符合题意。
    1. 下列关于细胞中化合物的叙述,正确的是( )
    A. 构成不同种类多糖的单体均为葡萄糖
    B. 不同磷脂的元素组成均为C、H、O、N、P
    C. 不同蛋白质的空间结构的维持均需要氢键
    D. 不同细胞遗传物质的碱基种类均有五种
    【答案】C
    【分析】化合物的元素组成:(1)蛋白质的组成元素有C、H、O、N元素构成,有些还含有S等;(2)核酸的组成元素为C、H、O、N、P;(3)脂质的组成元素有C、H、O,有些还含有N、P;(4)糖类的组成元素一般为C、H、O。
    【详解】A、多糖包括几丁质等,几丁质的组成单位不是葡萄糖,A错误;
    B、磷脂的元素组成通常是C、H、O,还含有P甚至N,磷脂不一定含有N元素,B错误;
    C、由于氨基酸之间能够形成氢键等,从而使得肽链能够盘曲折叠,形成具有一定空间结构的蛋白质分子,C正确;
    D、RNA病毒的遗传物质是RNA,其基本组成单位是核糖核苷酸,含氮碱基是A、C、G、U;细胞生物和DNA病毒的遗传物质是DNA,含氮碱基是A、C、G、T,D错误。
    故选C。
    2. 海水稻具有优良的耐盐碱性,下图表示不同物质进出根部成熟区细胞的作用示意图,其中①和②为水进入细胞的过程。下列叙述正确的是( )
    A. H+进出液泡的过程均离不开ATP的供能
    B. Na+进入细胞和液泡过程均需与膜转运蛋白结合
    C. 过程②的运输速率高于①体现了载体的高效性
    D. Na+在液泡中的积累可提高成熟区细胞吸水能力
    【答案】D
    【分析】一、被动运输:简单来说就是小分子物质从高浓度运输到低浓度,是最简单的跨膜运输方式。不需能量的被动运输,又分为两种方式:
    (1)自由扩散:不需要转运蛋白的协助。如:氧气,二氧化碳,脂肪。
    (2)协助扩散:需要转运蛋白的协助。如:氨基酸,核苷酸。特例:葡萄糖进出红细胞。
    二、主动运输:小分子物质从低浓度运输到高浓度。如:矿物质离子。
    三、胞吞、胞吐:大分子物质的跨膜运输,需要消耗能量。
    【详解】A、由图可知出液泡的过程,利用的是Na+的转移势能,A错误;
    B、由图可知,进入细胞不需要消耗能量,经过的是通道蛋白,不需要与膜转运蛋白结合,B错误;
    C、图中未能显示实际的速率比较,不能确定②速率高于①,C错误;
    D、Na+ 在液泡中积累,会增加细胞溶液的渗透压,从而提高细胞吸水能力,D正确。
    故选D。
    3. 下列关于细胞结构与功能观的表述,错误的是( )
    A. 高等植物成熟的筛管细胞细胞核退化有利于运输营养物质
    B. 骨细胞中骨骼肌线粒体特化的肌质网结构有利于能量供应
    C. 阴生植物叶肉细胞的叶绿体颗粒大呈深绿色有利于适应弱光环境
    D. 鸟类的卵细胞体积较大有利于细胞与外界环境进行物质交换
    【答案】D
    【分析】细胞的表面积与体积的比值叫做相对表面积,细胞越小该比值越大,细胞与外界的物质交换速率越快,有利于细胞的生长。
    【详解】A、在高等植物中,光合作用的产物常以蔗糖的形式运输,高等植物成熟的筛管细胞细胞核退化有利于运输营养物质,A正确;
    B、线粒体是细胞的动力车间,骨细胞中骨骼肌线粒体特化的肌质网结构有利于能量供应,B正确;
    C、叶绿体是光合作用的场所,阴生植物生长在光线较弱的环境中,它们的叶绿体颗粒大和颜色深绿,有助于更好地捕获和利用微弱的光线进行光合作用,C正确;
    D、卵细胞的体积较大,主要是为了更好地支持受精和早期胚胎发育,而不是为了利于细胞与外界环境进行物质交换。实际上,细胞的体积越大,其相对表面积越小,物质交换的效率反而越低,D错误。
    故选D。
    4. 下列关于酶的叙述,正确的是( )
    A. 绝大多数酶的化学本质为蛋白质,反应前后空间结构不变
    B. 消化酶易被消化液降解,应选用注射方式使用
    C. ATP合成酶位于线粒体内膜上,具有催化和调节作用
    D. RNA聚合酶可与起始密码子结合,催化转录起始
    【答案】A
    【分析】酶是由活细胞产生的具有催化作用的有机物,其中绝大多数为蛋白质,少数为RNA。酶的特性:高效性、专一性、作用条件温和。
    【详解】A、绝大多数酶的化学本质为蛋白质,少部分酶是RNA,反应前后空间结构不变,A正确;
    B、消化酶经过特殊处理不易被消化液降解,一般口服使用,B错误;
    C、ATP合成酶位于线粒体内膜,线粒体基质等,具有催化作用,C错误;
    D、RNA聚合酶可与启动子结合,催化转录起始,D错误。
    故选A。
    5. 下图为蓝细菌光合作用部分过程示意图,其中甲表示细胞结构。相关叙述正确的是( )
    A. 甲为叶绿体,磷脂双分子层构成其基本骨架
    B. 过程①可为叶绿素转化光能提供电子
    C. 除外,光反应其他产物均直接参与过程②
    D. 提高水体中浓度,可降低蓝细菌中的值
    【答案】B
    【分析】光合作用可以分为光反应和暗反应两个阶段。光反应的产物主要有氧气、ATP和还原氢,其中ATP和还原氢可以参与暗反应,暗反应包括二氧化碳的固定和三碳化合物的还原两个过程。
    【详解】A、该生物为蓝细菌,原核生物没有叶绿体,A错误;
    B、叶绿素转化光能时失去电子,需要从水中获取电子使水发生分解,B正确;
    C、过程②为CO2的固定,该过程不需要光反应产生的ATP和NADPH参与,C错误;
    D、提高水体中浓度,则C3的含量增加,C5含量减少,蓝细菌中的值增大,D错误。
    故选B。
    6. 体外培养人体造血干细胞进行细胞分裂的研究过程中,①→②→③为所记录到分裂过程中染色体a和b(分别用红色荧光和绿色荧光标记)位置的变化路径。下列叙述正确的是( )
    A. 位置①时,细胞内的染色体数等于核DNA数
    B. 位置②时,同源染色体联会形成23个四分体
    C. 位置②到位置③过程中,细胞内发生基因的自由组合
    D. 到达位置③后,细胞中会发生核膜重建和细胞膜缢裂
    【答案】D
    【分析】造血干细胞只能进行有丝分裂,①是有丝分裂前期,②是中期,③是后期,④是末期。
    【详解】A、当染色体处于位置①时,这是有丝分裂前期,由于DNA进行了复制,所以细胞内的染色体数目为核DNA的一半,A错误;
    BC、造血干细胞只能进行有丝分裂,不能进行减数分裂,所以不会发生同源染色体联会形成四分体和基因自由组合的过程,BC错误;
    D、染色体到达位置③后,细胞将进行有丝分裂末期,此时,细胞中会发生核膜重建和细胞膜缢裂,D正确。
    故选D。
    7. 下列实验过程中,生物材料不需要始终保持生物活性的是( )
    A. 观察黑藻叶肉细胞的细胞质流动
    B. 探究洋葱表皮细胞的吸水和失水
    C. 探究酵母菌细胞呼吸的方式
    D. 观察洋葱分生区组织细胞的有丝分裂临时装片
    【答案】D
    【分析】黑藻叶肉细胞中的叶绿体,呈绿色、扁平的椭球形或球形,散布于细胞质中,可以在高倍显微镜下观察它的形态。观察细胞质的流动,可用细胞质基质中的叶绿体的运动作为标志。
    【详解】A、细胞只有在有活性的前提下,细胞质才能流动,所以观察黑藻叶绿体和细胞质的流动必需保持细胞活性状态,A不符合题意;
    B、观察洋葱外表皮细胞的吸水和失水,要求细胞先发生质壁分离后复原,实验材料需要保持活体状态,B不符合题意;
    C、探究酵母菌细胞呼吸的方式实验中,酵母菌无论是有氧呼吸还是无氧呼吸都只有在活体状态下才能进行,C不符合题意;
    D、观察洋葱根尖分生区组织细胞有丝分裂时,需制作临时装片,步骤为解 离、漂洗、染色和制片,其中解离后细胞已经死亡,D符合题意。
    故选D。
    8. 下列关于传统发酵的叙述,错误的是( )
    A. 制作果醋时,醋酸菌可将糖或酒精转化为醋酸和水
    B. 制作泡菜时,需对菜料进行消毒以保证发酵过程无杂菌污染
    C. 制作米酒时,需将蒸熟的糯米冷却后加酒曲以防止杀死菌种
    D. 制作酱油时,不断进行搅拌有利于黑曲霉等微生物快速繁殖
    【答案】B
    【分析】一、当氧气和糖源都充足时,醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸;当缺少糖源时,醋酸菌将乙醇变为乙醛,再将乙醛变为醋酸。
    二、泡菜制作过程中,乳酸发酵过程即为乳酸菌进行无氧呼吸产生乳酸的过程。
    【详解】A、当氧气、糖源都充足时,醋酸菌将葡萄汁中的糖分解为醋酸和水;当氧气充足、缺少糖源时,醋酸菌将乙醇变为乙醛,再将乙醛变为醋酸和水,A正确;
    B、制作传统泡菜是利用植物体表面天然的乳酸菌进行发酵,不需要对菜料进行消毒,B错误;
    C、酿制米酒时,将糯米蒸熟后立即加入酒曲,容易杀死酵母菌种,因此加酒曲之前需将蒸熟的糯米冷却以避免高温杀死菌种,C正确;
    D、利用米曲霉发酵生产酱油过程中,不断搅拌会使发酵液中溶解氧增多,有利于其通过有氧呼吸快速繁殖,D正确。
    故选B。
    9. 聚乙烯醇(PVA)是化工污水中的一种难以降解的大分子有机物,PVA分解菌能产生PVA酶对其进行降解。下列关于PVA分解菌的筛选与培养的叙述,正确的是( )
    A. 土壤样品应加到以PVA为唯一碳源的鉴别培养基中培养
    B. 直接选择水解圈直径最大的菌株以利于快速获得高效降解菌
    C. 利用平板划线法进行计数得出的微生物数量常比实际值小
    D. 可利用不含PVA的培养基对筛选出的PVA分解菌进行扩大培养
    【答案】D
    【分析】选择培养基:在微生物学中,将允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基,称为选择培养基。
    【详解】A、以PVA为唯一碳源的选择培养基上只有能分解PVA的微生物生长,其它微生物一般不能生长,因此采用以PVA为唯一碳源的选择培养基(而非鉴别培养基)筛选能降解PVA的细菌,A错误;
    B、菌落周围的透明圈越大,说明细菌降解PVA的能力强,因此菌落直径/透明圈的值越小,说明细菌降解PVA的能力越强,B错误;
    C、平板划线法可用于获得单菌落,但不能用于微生物的计数,C错误;
    D、扩大培养是对筛选后的菌种进行的培养,可利用不含PVA的培养基对筛选出的PVA分解菌进行扩大培养,通常用液体培养基,D正确。
    故选D。
    10. 防止杂菌污染是获得纯净的微生物培养物的关键。下列叙述错误的是( )
    A. 利用微生物能够寄生于多种细菌体内使细菌裂解,可实现生物消毒
    B. 利用紫外线对超净工作台进行消毒前,喷洒消毒液可加强消毒效果
    C. 利用干热灭菌箱对培养基进行灭菌时,应在160℃的热空气中维持2~3h
    D. 利用酒精灯对金属用具进行灼烧灭菌时,应在酒精灯火焰充分燃烧层进行
    【答案】C
    【分析】获得纯净培养物的关键是防止杂菌污染。无菌技术主要包括消毒和灭菌,常用的消毒方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法等;灭菌的方法有湿热灭菌、干热灭菌和灼烧灭菌等。
    【详解】A、有的微生物能够寄生于多种细菌体内使细菌裂解,因此可以使用这些微生物进行生物消毒,如净化污水、污泥,A正确;
    B、用紫外线照射30min,可以杀死物体表面或空气中的微生物,在照射前,适量喷洒石炭酸等消毒液,可以加强消毒效果,B正确;
    C、利用干热灭菌箱对培养基进行灭菌时,应在160℃-170℃的热空气中维持1~2h,C错误;
    D、接种环等金属用具一般用灼烧灭菌,即直接在酒精灯火焰充分燃烧层灼烧灭菌,D正确。
    故选C。
    11. 模型构建是开展生物学研究的常用方法。关于下图所示的概念模型的叙述错误的是( )
    A. 若为体细胞核移植技术模型,B可能为去核的卵母细胞
    B. 若为转基因技术模型,C为重组质粒,D为受体细胞
    C. 若为动物细胞融合模型,形成C的过程离不开膜的流动性
    D. 若为植物体细胞杂交技术模型,需对A、B去分化后再诱导融合
    【答案】D
    【分析】据图可知,A和B可融合成为C,C再经过发育或培养可成为D,据此分析作答。
    【详解】A、体细胞核移植是将细胞核移植到去核的卵母细胞中,若为体细胞核移植技术模型,B可能为去核的卵母细胞,A正确;
    B、若为转基因技术模型,C为重组质粒,是目的基因和载体相连形成的,则D为受体细胞,为重组质粒的表达提供条件,B正确;
    C、若图示为动物细胞融合技术,涉及细胞膜的融合,形成C的过程离不开膜的流动性,C正确;
    D、若为植物体细胞杂交技术模型,需对A、B去除植物细胞壁(而非去分化)后再诱导融合,此后融合的原生质体经脱分化形成愈伤组织,D错误。
    故选D。
    12. 植物组织培养是植物细胞工程的基本技术。下列关于菊花组织培养的叙述,正确的是( )
    A. 培养前需要用适宜浓度的乙醇和次氯酸钠的混合液对外植体进行消毒
    B. 培养基中需添加一定量的葡萄糖以利于调节渗透压和提供营养物质
    C. 脱分化过程中需在培养基中添加特定的激素以诱导形成胚状体
    D. 组培苗移植前需用流水清洗掉根部的培养基,经炼苗后再移栽大田
    【答案】D
    【分析】植物组织培养过程是:离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织,然后再分化生成根、芽,最终形成植物体。植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性。
    【详解】A、自然生长茎段的消毒属于外植体消毒,先用70%乙醇,再用无菌水清洗,再用5%次氯酸钠消毒处理,最后再用无菌水清洗,而不能用混合液处理,A错误;
    B、植物培养过程中添加的糖类是蔗糖,培养基中添加蔗糖的目的是提供营养和调节渗透压,因为培养过程中需要蔗糖供能,在培养得到叶绿体之前,植物无法进行光合作用,B错误;
    C、脱分化形成的是愈伤组织,再分化过程中需在培养基中添加特定的激素以诱导形成胚状体,C错误;
    D、用流水清洗掉根部的培养基后,将幼苗移植消过毒的蛭石或珍珠岩环境中,待其长壮后移栽入土,D正确。
    故选D。
    13. 某牧场引进一只产肉性能优异的良种公羊,为了在短时间内获得具有该公羊优良性状的大量后代,该牧场利用胚胎工程技术进行了相关操作。下列叙述正确的是( )
    A. 采集到的精子需用高浓度的ATP溶液进行获能处理
    B. 在雌性个体饲料中添加促性腺激素有利于超数排卵
    C. 产生的受精卵在卵裂阶段会发生有丝分裂
    D. 分割体外受精得到的胚胎所产生的子代表型完全相同
    【答案】C
    【分析】胚胎移植的基本程序主要包括:
    ①对供、受体的选择和处理(选择遗传特性和生产性能优秀的供体,有健康的体质和正常繁殖能力的受体)。用激素进行同期发情处理,用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理。
    ②配种或人工授精。
    ③对胚胎的收集、检查、培养或保存(对胚胎进行质量检查,此时的胚胎应发育到桑葚胚或胚囊胚阶段。
    ④对胚胎进行移植。
    ⑤移植后的检查。
    【详解】A、采集到的精子需用专门的获能液处理使其获能,A错误;
    B、促性腺激素属于蛋白质类激素,在饲料中添加的促性腺激素,因在动物的消化道中被分解而失去促进超数排卵的作用,B错误;
    C、产生的受精卵在卵裂阶段会发生有丝分裂进行增殖,C正确;
    D、对囊胚进行胚胎分割获得的后代个体基因型完全相同,但环境会影响基因的表达,故表现型可能不完全相同,D错误。
    故选C。
    14. 下列有关生物技术的安全性和伦理性问题的叙述,正确的是( )
    A. 人类基因组编写计划是测定人类的基因组序列的一项伟大工程
    B. 我国对农业转基因生物实行标识制度,需在标签上警示性注明可能危害
    C. 中国政府不反对治疗性克隆,但可以有限制地进行生殖性克隆研究
    D. 生物武器包括病菌类、病毒类和生化毒剂类等,其特点为致病能力强
    【答案】D
    【分析】一、转基因技术给人类带来了琳琅满目的产品,也引发了社会对转基因产品安全性的关注和争论。
    二、生殖性克隆是指通过克隆技术产生独立生存的新个体,它面临很多伦理问题。我国不赞成、不允许、不支持、不接.受任何生殖性克隆人实验。
    三、生物武器的种类包括致病菌、病毒和生化毒剂等,它曾对人类造成严重的伤害。我国反对生物武器及其技术和设备的扩散。
    【详解】A、人类基因组编写计划(Human Genme Prject,HGP)是对人类基因组进行测序和分析,以找到与各种生理功能和疾病相关的基因,而不是仅仅测定基因组序列,A错误;
    B、我国对农业转基因生物实行了标识制度,但没有注明可能的危害,B错误;
    C、中国政府明确禁止生殖性克隆研究,而治疗性克隆研究也是受到严格限制的,C错误;
    D、生物武器包括病菌类、病毒类和生化毒剂类等,其特点为致病能力强,破坏力大,对人类社会构成严重威胁,D正确。
    故选D。
    15. 下列有关“DNA粗提取与鉴定”、“DNA片段的扩增及电泳鉴定”实验的叙述,正确的是( )
    A. 将洋葱研磨液离心后保留沉淀物并加入冷酒精静置后,可收集到DNA
    B. 将提取到的丝状物与二苯胺溶液充分混匀后,溶液即可变为蓝色
    C. 在沸水浴或微波炉内加热至琼脂糖熔化前需将适量的核酸染料加入并进行混匀
    D. 待指示剂前沿迁移接近凝胶边缘时需停止电泳并取出凝胶置于紫外灯下观察和照相
    【答案】D
    【分析】DNA不溶于酒精,而某些蛋白质溶于酒精;鉴定DNA时,需要先将DNA溶解在NaCl溶液中,再与二苯胺溶液混合,并在水浴加热条件下呈现蓝色。
    【详解】A、将洋葱研磨液离心后保留上清液并加入冷酒精静置后,可收集到DNA,A错误;
    B、将丝状物溶于2mL的5mL的NaCI溶液中,然后向试管中加入4mL的二苯胺试剂,沸水浴加热5min,试管冷却后溶液呈现 蓝色,B错误;
    C、在沸水浴或微波炉内加热至琼脂糖熔化,稍冷却后加入适量核酸染料混匀,C错误;
    D、电泳缓冲液加入电泳槽,待指示剂前沿迁移至凝胶边缘时停止电泳,以防止样品流失到缓冲液中,之后取出凝胶置于紫外灯下观察和照相,D正确。
    故选D。
    二、多项选择题:本题包括4小题,每小题3分,共12分。每小题有不止一个选项符合题意。每小题全选对的得3分,选对但不全的得1分,错选或不答的得0分。
    16. 下图为在最适温度下测定并绘制的A、B两种植物的光合作用强度与光照强度的关系图,下列叙述正确的有( )
    A. 光照强度为3klx时,A植物的叶肉细胞的光合速率等于呼吸速率
    B. 光照强度为6klx时,A、B两种植物的光合速率相同
    C. 适当升高温度,B植物的光饱和点和光补偿点的差值将减小
    D. 在测定B植物的温度下测定A植物,其光补偿点和光饱和点的数值一定不变
    【答案】BC
    【分析】光的补偿点是植物光合作用速率与呼吸作用速率相等时所需要的光照强度,光的饱和点是植物最大光合作用强度需要的最低光照强度;
    【详解】A、光照强度为3kx时,光合作用速率与呼吸作用速率相等,由于植物体中有的细胞不进行光合作用,只进行呼吸作用,因此A植物叶肉细胞内的光合速率应该大于呼吸速率,A错误;
    B、光照强度为6klx时,A植物的光合速率=净光合速率+呼吸速率=4+4=8,B植物的光合速率=净光合速率+呼吸速率=6+2=8,A、B两种植物的光合速率相同,B正确;
    C、适当升高温度,B植物的光饱和点将会减小,而光补偿点将会增大,二者的差值会减小,C正确;
    D、在测定B植物的温度下测定A植物,其光补偿点和光饱和点可能会有所变化,不一定不变,因为还有其他因素的影响,D错误。
    故选BC。
    17. PHA是一种重要的可降解材料,中国科学家构建了一株嗜盐单胞菌H,以糖蜜或餐厨垃圾为原料在实验室发酵生产PHA,工艺流程如下图所示。下列叙述错误的有( )
    A. 菌种扩大培养是发酵工程的中心环节
    B. 为避免杂菌污染,可适当降低发酵液中盐的浓度
    C. 发酵罐内发酵要严格控制温度、pH和溶解氧等发酵条件
    D. 发酵结束之后,采取适当的过滤、沉淀措施获得PHA
    【答案】ABD
    【分析】发酵工程,是指采用现代工程技术手段,利用微生物的某些特定功能,为人类生产有用的产品,或直接把微生物应用于工业生产过程的一种新技术。发酵工程的内容包括菌种的选育、培养基的配制、灭菌、扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离提纯等方面。
    【详解】A、发酵工程的中心环节是发酵罐内发酵,A错误;
    B、嗜盐单胞菌H需要一定的盐浓度,其他微生物则不能在较高的盐浓度下生长,提高发酵液中盐的浓度,一定程度上可以避免杂菌污染,B错误;
    C、在发酵过程中,需随时监测培养液中的微生物数量、产物浓度等,以了解发酵进程,还要及时添加必需的营养组分,严格控制温度、pH和溶解氧等条件,C正确;
    D、发酵结束之后,对于菌体可采取适当的过滤、沉淀措施来分离;而对于菌体的代谢物,可根据产物的性质采取适当的提取、分离和纯化措施来获得产品,D错误。
    故选ABD。
    18. 下列关于实验操作的叙述,合理的有( )
    A. 检测酵母菌无氧呼吸产物时,可利用水浴加热收集酒精检测避免葡萄糖的干扰
    B. 分离光合色素时,将滤纸弯曲成桶状竖直插入层析液可提高色素带的平整性
    C. 制作有丝分裂临时装片时,滴加碱性溶液提高甲紫等染液的染色效果
    D. 使用血细胞计数板计数时,应选用较厚的盖玻片以提高加样的精确度
    【答案】ABD
    【分析】观察植物有丝分裂,染色体(质)用碱性染料醋酸洋红或龙胆紫进行染色;
    【详解】A、 检测酵母菌无氧呼吸产物时,可以利用水浴加热收集酒精,因为酒精的沸点较低,可以通过加热使其蒸发而被收集,从而避免葡萄糖的干扰,A正确;
    B、分离光合色素时,将滤纸弯曲成桶状竖直插入层析液可提高色素带的平整性,B正确;
    C、 制作有丝分裂临时装片时,甲紫等染液表现为酸性,滴加碱性溶液不利于甲紫等染液的染色,C错误;
    D、使用血细胞计数板计数时,选用较厚的盖玻片,避免其悬浮,保证计数室体积为0.1mm3,以提高加样的精确度,D正确。
    故选ABD。
    19. 研究人员利用含绿色荧光蛋白基因(GFP)的胚胎干细胞构建发荧光的嵌合体猴,下图为其操作流程和发育过程示意图。相关叙述错误的有( )
    A. 胚胎干细胞会与桑葚胚的细胞发生融合形成四倍体嵌合体猴
    B. 嵌合囊胚中的滋养层细胞将来可发育为嵌合体猴的肝脏等组织
    C. 嵌合原肠胚移植前需要对受体猴进行同期发情处理
    D. 不发出绿色荧光的体细胞可能含GFP基因
    【答案】ABC
    【分析】胚胎干细胞来源于早期胚胎或原始性腺分离出来的一类细胞。胚胎干细胞,是高度未分化的细胞。如果进行体外培养,能够无限的增殖和分化。胚胎肝细胞还可以分化成多功能的细胞。胚胎干细胞具有多能性,可以分化成多种组织的能力但是无法独自发育成一个个体细胞。胚胎里的干细胞被称为一种“全能”细胞,可以分化成所有类型的细胞,并且携带生物体的全套遗传信息。
    【详解】A、在胚胎发育过程中,胚胎干细胞会与桑葚胚(桑椹胚)的细胞发生整合,但不会形成四倍体嵌合体。正常情况下,桑葚胚中的细胞与胚胎干细胞结合形成的嵌合体仍然是二倍体,A错误;
    B、嵌合胚胎中的内细胞团细胞将发育为嵌合体猴的肝脏等组织,B错误;
    C、胚胎移植应选择桑葚胚或囊胚而不是原肠胚,C错误;
    D、有些纯体细胞即使含有绿色荧光蛋白基因(GFP),但由于基因未表达或表达水平过低,不一定会发出绿色荧光,D正确。
    故选ABC。
    三、非选择题:本题包括5小题,共58分。除特别说明外,每空1分。
    20. 人体细胞内合成代谢所需的ATP和NADPH失衡是导致许多疾病发生的原因。我国科研团队通过构建NTUs(纳米类囊体单元)并导入哺乳动物细胞,通过改善细胞的合成代谢功能,实现对软骨关节炎等退行性疾病的治疗。下图1为基本流程示意图,请回答下列问题。
    (1)人体细胞中的ATP主要通过______过程产生,NADPH可由磷酸戊糖途径等代谢途径合成,ATP和NADPH均含有的元素为______。在植物细胞中,ATP和NADPH可同时产生产生于光合作用的______阶段。
    (2)为探究影响NTUs的使用寿命的因素。过程①中科研团队分别检测不同光照时长和不同黑暗时长条件下蛋白质D1、D2的含量和ATP产量变化,图2为部分实验结果。光照开始前测定出的ATP并非是NTUs产生的,原因是______。据图2分析,D1、D2的含量变化与ATP产量变化______;实际利用时采用______措施可延长NTUs的使用寿命。
    (3)过程②将软骨细胞的细胞膜包裹NTUs形成CM-NTUs,该过程体现了膜的______。以CM-NTUs形式导入软骨细胞的意义是一方面可降低了机体的免疫排斥反应又可避免其进入细胞后被______所降解。
    (4)为探索CM-NTUs使用的最优条件,科研团队进行了检测实验。用诱导代谢障碍的IL-1β处理过的软骨细胞与CM-NTUs共孵育,分别探究光照时间、光照强度对ATP含量及封装于CM-NTUs中的铁氧还蛋白(FDX)对NADPH的影响,图3为部分实验结果。据图3分析可知,CM-NTUs使用的最优条件是______。综合图2和图3结果,将NTUs导入哺乳动物软骨细胞可治疗软骨关节炎的机制为______。
    【答案】(1)①. 呼吸作用 ②. C、H、O、N、P ③. 光反应
    (2)①. 没有光照不能进行光合作用 ②. 一致(正相关) ③. 光照和黑暗处理的时间要适宜(按时作息)
    (3)①. 流动性 ②. 酶
    (4)①. 光照时间60min、光照强度106.7uml phtns m-2S-1、FDX浓度为25uM ②. 通过提高D1、D2的含量,使ATP的产生增多,从而改善细胞的合成代谢功能,实现对软骨关节炎等退行性疾病的治疗
    【分析】光合作用包括光反应和暗反应两个阶段,其中光反应包括水的光解和ATP的生成,暗反应包括二氧化碳的固定和三碳化合物的还原等。
    【小问1详解】人体细胞中的ATP主要通过细胞呼吸(呼吸作用)过程产生;ATP和NADPH均含有的元素为C、H、O、N、P;光反应发生场所在叶绿体的类囊体薄膜上,色素吸收、传递和转换光能,并将一部分光能用于水的光解生成NADPH和氧气,另一部分光能用于合成ATP,故在植物细胞中,ATP和NADPH可同时产生产生于光合作用的光反应阶段。
    【小问2详解】分析题意,NTUs是纳米类囊体单元,其发挥作用需要在光照下进行,故光照开始前测定出的ATP并非是NTUs产生的;据图2分析,D1、D2的含量随光照或黑暗时间的延长而减少,ATP的变化与之一致,故两者存在正相关关系;实际利用时采用光照和黑暗处理的时间要适宜的措施延缓使用时间,表现为要定时作息。
    【小问3详解】过程②将软骨细胞的细胞膜包裹NTUs形成CM-NTUs,该过程体现了膜的流动性,体现了其结构特点;以CM-NTUs形式导入软骨细胞的意义是一方面可降低了机体的免疫排斥反应又可避免其进入细胞后被酶降解。
    【小问4详解】据图可知,在光照时间60min、光照强度106.7uml phtns m-2S-1、FDX浓度为25uM的条件下,ATP产生量最多,故该条件是CM-NTUs使用的最优条件;分析题意,人体细胞内合成代谢所需的ATP和NADPH失衡是导致许多疾病发生的原因,综合图2和图3结果,将NTUs导入哺乳动物软骨细胞可治疗软骨关节炎的机制为通过提高D1、D2的含量,使ATP的产生增多,从而改善细胞的合成代谢功能,实现对软骨关节炎等退行性疾病的治疗。
    21. 沙眼衣原体(Ct)为一类非细菌类原核微生物,其引发的疾病范围广泛,可累及眼、生殖道、直肠等多个器官。Ct有独特的发育周期,存在原体(EB)和始体(RB)两种不同形态,下图为Ct侵染人眼结膜上皮细胞及发育周期过程示意图,请回答下列问题。
    (1)衣原体菌体小,可通过细菌滤器,最初被误认为是一种病毒,其与病毒最主要的区别是______。细菌细胞中的三磷酸盐化合物有______;Ct自身不能合成三磷酸盐化合物,必须利用宿主细胞的三磷酸盐和中间代谢产物作为能量来源,据此可知Ct是一类营______(选填“细胞内”或“细胞外”)能量寄生的病原体,也不属于细菌。
    (2)EB与人眼结膜上皮细胞上的特异性受体结合,以______方式进入细胞并形成空泡。空泡内的EB经过程①会转变为RB,再经过程②以______方式分裂繁殖形成众多的子代,最终转变为______(选填“RB”或“EB”)释放到细胞外。过程①和③的实质为______。
    (3)机体感染Ct后,产生特异性免疫主要以______为主。外界应激因子如青霉素等处理Ct可导致RB转变为AB,AB状态的Ct不具有传染性,停止发育但可持续扩大,失去外界应激因子作用时可恢复成正常的RB形态。据此推测外界应激因子使Ct转变为AB状态的意义是______。
    (4)研究发现,EB的外膜蛋白具有多样性,是Ct的主要抗原。Ct感染大多数无症状,流行病学史也难以确定,目前尚未有沙眼衣原体的疫苗,根本原因是______。下表为某医院门诊对106例疑似沙眼衣原体感染患者采用常用的三种方法检测的结果。据下表可知,______在三种检测方法中灵敏度最高。
    表不同检测方法阳性率比较(例)
    【答案】(1)①. 有细胞结构 ②. NTP和的dNTP ③. 细胞内
    (2)①. 胞吞 ②. 二分裂 ③. EB ④. 基因的选择性表达
    (3)①. 细胞免疫 ②. 有利于逃避宿主免疫系统的检测,并为在适宜条件下迅速增殖作准备
    (4)①. 外膜蛋白基因容易发生变异,疫苗难以研制 ②. 核酸检测
    【分析】生物包括细胞生物和非细胞生物,非细胞生物是指病毒类生物,而细胞生物分为原核生物和真核生物。原核细胞和真核细胞最主要的区别就是原核细胞没有核膜包被的典型的细胞核。
    【小问1详解】衣原体菌体小,但属于原核生物,其与病毒最主要的区别是有细胞结构;细菌细胞中的三磷酸盐化合物有NTP和的dNTP,其中含有3个磷酸基团;分析题意,Ct必须利用宿主细胞的三磷酸盐和中间代谢产物作为能量来源,据此可知Ct是一类营细胞内能量寄生的病原体,也不属于细菌。
    【小问2详解】EB与人眼结膜上皮细胞上的特异性受体结合,形成大分子物质,大分子物质进入细胞的方式是胞吞;原核生物分裂的方式是二分裂;由题意可知,空泡内的EB经过程①会转变为RB,结合图示可知,最终转变为EB释放到细胞外;通过图示的过程①和③实现了R和B的转化,故实质是基因的选择性表达。
    【小问3详解】Ct是胞内寄生菌,机体感染Ct后,产生特异性免疫主要以细胞免疫为主;分系题意,外界应激因子如青霉素等处理Ct可导致RB转变为AB,AB状态的Ct不具有传染性,停止发育但可持续扩大,失去外界应激因子作用时可恢复成正常的RB形态,据此推测外界应激因子使Ct转变为AB状态的意义是提高对不良环境的适应能力。
    【小问4详解】分析题意,EB的外膜蛋白具有多样性,是Ct的主要抗原,由于抗原具有多样性,且可能菌体本身会发生变异,故目前尚未有沙眼衣原体的疫苗;据表分析可知三种方法中,灵敏度最高的方法核酸检测,因为其阳性检出率最高。
    22. 铁死亡是一种铁依赖性的磷脂过氧化作用驱动的独特的细胞死亡方式,下图为铁死亡的分子调节机制示意图,请回答下列问题。

    (1)人体细胞中的脂肪酸可用于合成甘油三酯和______物质,发生的场所为______。据图分析,多不饱和脂肪酸经过程①转化为多不饱和脂肪酸磷脂后,其在LOXs和FOR的催化下与分子氧反应生成PLOOH,产生的PLOOH可与______反应产生新的脂质自由基,再与多不饱和脂肪酸磷脂、分子氧继续反应产生大量PLOOH,这是一种______调节。
    (2)转铁蛋白需与膜上转铁蛋白受体1结合,才能将转运至细胞内,该过程体现了细胞膜的功能有______。在细胞质基质被还原成并聚集在不稳定的铁池中,可与铁池中的发生反应产生羟自由基。羟自由基一方面会攻击______,导致基因突变和蛋白质活性降低,引起衰老;另一方面可与多不饱和脂肪酸反应,产生大量脂质自由基,进而与多不饱和脂肪酸磷脂、反应,导致______积累,造成细胞中细胞器膜和细胞膜结构破裂,造成铁死亡。铁死亡并不属于细胞凋亡,理由是______。
    (3)胱氨酸经谷氨酸-胱氨酸转运体进入细胞的方式为一种主动运输,该过程利用的能量形式为______。胱氨酸经过程②还原成半胱氨酸,再与谷氨酸、甘氨酸等共同构成GSH。GSH可作为GPX4的辅助因子,将PLOOH进行还原,该过程的还原力最终来自于图中的______。
    (4)近年来,通过传统治疗方法诱导肿瘤细胞死亡常因耐药性而受挫。试从诱导铁死亡的角度提出肿瘤症治疗的可行性措施:______(至少写出2点)。
    【答案】(1)①. 磷脂 ②. 内质网 ③. Fe2+或Fe3+ ④. 正反馈
    (2)①. 信息交流和控制物质进出细胞 ②. DNA和蛋白质分子 ③. PLOOH ④. 并非基因控制的程序性死亡;会造成膜结构的破坏等
    (3)①. 膜两侧的谷氨酸的浓度差(电化学势能) ②. NADPH
    (4)开发诱导铁死亡的药物,如抑制谷氨酸一胱氨酸转运体的活性;抑制GPX4酶的活性;提高 LOXs和FOR的活性;促进细胞对Fe3+的摄取
    【分析】细胞凋亡:由基因所决定的细胞自动结束生命的过程,又称细胞编程性死亡,属正常死亡。细胞坏死是指细胞在受到外界不利因素的条件下发生的非正常死亡。
    【小问1详解】磷脂分子由磷酸、脂肪酸和甘油组成,所以脂肪酸可以用于合成磷脂分子,磷脂属于脂质,合成场所在内质网。
    从图中看出多不饱和脂肪酸转化为多不饱和脂肪酸磷脂后,其在LOXs和FOR的催化下与分子氧反应生成PLOOH,产生的PLOOH可与Fe2+或Fe3+反应生成脂质自由基,再与多不饱和脂肪酸磷脂、分子氧继续反应产生大量PLOOH,这是一种正反馈调节。
    【小问2详解】转铁蛋白需与膜上转铁蛋白受体1结合,体现了细胞膜具有信息交流的功能,将 Fe3+ 转运至细胞内,体现了细胞膜具有控制物质进出细胞的功能。
    羟自由基会攻击DNA分子,引起基因突变,攻击蛋白质分子导致蛋白质活性降低。
    从图中看出,羟自由基与多不饱和脂肪酸反应,产生大量脂质自由基,进而与多不饱和脂肪酸磷脂、 O2 反应,导致PLOOH积累,造成铁死亡。
    细胞凋亡是由基因决定的程序性死亡,而铁死亡是一种铁依赖性的磷脂过氧化作用驱动的独特的细胞死亡方式,不是由基因决定的,所以不属于细胞凋亡。
    【小问3详解】胱氨酸经谷氨酸-胱氨酸转运体进入细胞是主动运输,该过程中利用的能量形式为谷氨酸的电化学梯度。
    从图中看出GSSR在NADPH作为还原剂的作用下,生成GSH,GSH可作为GPX4的辅助因子,将PLOOH进行还原,该过程的还原力最终来自于图中的NADPH。
    【小问4详解】图中Fe3+和过氧化氢反应生成羟自由基,羟自由基和多不饱和脂肪酸生成脂质自由基,最终生成PLOOH,PLOOH积累导致细胞死亡,所以可以从以下几个方面出发诱导铁死亡:
    1、增加细胞内铁离子含量,例如通过提升转铁蛋白受体1的表达,促进Fe³⁺摄取;
    2、 抑制GPX4的活性或下调其表达,使细胞内PLOOH难以被还原,增加脂质过氧化程度;
    3、 提升LOXs和FOR的活性,促进脂质过氧化反应的进行,从而加速PLOOH的积累。
    23. 卡妥索单抗是一种双特异性抗体,可靶向高效治疗肿瘤性腹水,进而提高肿瘤症患者的生存期。下图1.a和图1.b分别为人体普通抗体(IgM)和构建的卡妥索单抗的结构示意图,图2为利用双杂交瘤细胞法制备卡妥索单抗的过程示意图,请回答下列问题。

    (1)图1.a中的抗体分子由重链和轻链组成,链与链之间通过______键相连;每一条链均含有恒定区和可变区,抗体的特异性主要体现在链可变区特定的______。
    (2)图2中过程①和②中均需将抗原反复注入小鼠,目的是______。过程③可采用______等生物方法诱导细胞融合,过程④筛选目标细胞的方法为______。
    (3)双杂交瘤细胞在体外培养时,会因______、有害代谢物积累和培养液中营养物质缺乏等因素而分裂受阻,分瓶培养时可采用______法收集细胞并制成细胞悬液进行传代培养。
    (4)人的重链和轻链基因分别位于14号和2号、22号染色体上,表达产生的重链先形成二聚体再与轻链多肽随机配对组合构成完整的抗体结构。图2中的双杂交瘤细胞可产生的抗体理论上有______种,但仅一种为图1.b所示结构。为实现异源抗体重链的正确配对,科研人员将一种抗体重链366位的苏氨酸修改为酪氨酸,形成突出的“杵”型结构,另一种抗体重链407位的酪氨酸修改为苏氨酸,形成凹陷的“臼”型结构,利用“杵臼”结构的空间位阻效应实现两种不同抗体重链间的正确装配,该项操作技术属于______工程。
    (5)中晚期肿瘤症患者体内,随肿瘤细胞的转移扩散,淋巴管堵塞,造成腹部______,出现“肿瘤性腹水”。研究发现EpCAM抗原在肿瘤细胞中的表达显著高于正常的腹腔内层细胞,T细胞表面具有CD3抗原,试分析卡妥索单抗能靶向高效治疗肿瘤性腹水的机理是______。
    【答案】(1)①. 二硫 ②. 氨基酸的序列(种类、数目和排列顺序)
    (2)①. 获得更多已免疫的B淋巴细胞 ②. 灭活病毒诱导法 ③. 克隆化培养和抗体检测方法筛选
    (3)①. 细胞密度过大 ②. 离心
    (4)①. 10 ②. 蛋白质
    (5)①. 组织水肿 ②. 卡妥索单抗具有的ECAM抗原结合位点可靶向结合肿瘤细胞,具有的CD3结合位点可募集T细胞, 进而提高T细胞对肿瘤细胞的杀伤力,降低了肿瘤细胞的转移,减少了腹水的产生
    【分析】一、动物细胞融合技术就是使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术,融合后形成的杂交细胞具有原来两个或多个细胞的遗传信息。动物细胞融合最广泛的应用就是用来制备单克隆抗体。
    二、动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理相同。诱导动物细胞融合的常用方法有PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等。
    【小问1详解】据图1.a可知,抗体分子的链与链之间通过二硫键相连。每个抗体分子的可变区都有与抗原相结合的位点,抗体的特异性主要体现在链可变区特定的氨基酸的序列(种类、数目和排列顺序)。
    【小问2详解】据图可知,图2中过程①和②是将抗原注射入小鼠体内,制备能产生相应抗体的B淋巴细胞。将抗原反复注入小鼠的目的是刺激小鼠产生足够的能分泌特定抗体的 B 淋巴细胞。过程③是细胞融合过程,诱导动物细胞融合的常用方法有PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等,其中灭活病毒诱导法属于生物方法。过程④筛选能产生相应抗体的杂交瘤细胞,方法为克隆化培养和抗体检测方法筛选。
    【小问3详解】双杂交瘤细胞在体外培养时,会因细胞密度过大、有害代谢物积累和培养液中营养物质缺乏等因素而分裂受阻,为了获得大量的杂交瘤细胞,可以进行分瓶培养。分瓶培养时可采用离心法收集细胞并制成细胞悬液进行传代培养。
    【小问4详解】假设抗CD3抗体的重链和轻链分别为A、a,抗EpCAM抗体的重链和轻链分别为B、b,则双杂交瘤细胞可形成A、a、B、b四种链。依题意,表达产生的重链先形成二聚体再与轻链多肽随机配对组合构成完整的抗体结构,则重链二聚体形式为AA、AB或BB,结合的轻链形式为aa、ab、bb。图2中的双杂交瘤细胞可产生的抗体理论上有3×2(轻链组合为aa、bb)+4(轻链组合为ab,重链组合为AB时有两种组合形式)=10种。据人们对蛋白质功能的特定需求,对蛋白质的结构进行设计改造,这样的技术属于蛋白质工程。依题意,为了实现异源抗体重链的正确配对,对两条重链进行了加工,故该项操作属于蛋白质工程。
    【小问5详解】依题意,中晚期肿瘤症患者体内,随肿瘤细胞的转移扩散,淋巴管堵塞,造成淋巴循环受阻,使腹部组织水肿,从而导致“肿瘤性腹水”。卡妥索单抗拥有两种特异性抗原结合位点,不仅能与肿瘤细胞表面的EpCAM结合,也能与T细胞表面抗原CD3结合,从而激活T细胞,诱导肿瘤细胞凋亡。肿瘤细胞凋亡后,被堵塞的淋巴管恢复正常功能,“肿瘤性腹水”症状得到缓解。因此,卡妥索单抗能靶向高效治疗肿瘤性腹水。
    24. 磷酸吡哆醛(PLP)为多种酶的辅因子,广泛应用于分子生物学的研究。P基因、Z基因和D基因为PLP合成途径中的三个关键酶编码基因,为提高PLP的产量,科研人员利用质粒pET构建表达载体pET-P-Z-D,并导入大肠杆菌BL21中开展相关研究。下图1为构建过程,其中代表氨苄青霉素抗性基因。请回答下列问题。

    表1引物的部分序列表
    表2限制酶识别序列及切割位点
    (1)P基因缺乏相应的限制酶识别序列,科研人员利用PCR技术对P基因进行改造。进行PCR1时,除图中所示条件外,反应体系中还需添加4种脱氧核苷酸、______和的缓冲液。PCR1过程中至少经过______轮扩增才能出现改造后的P基因。结合表1和表2所示分析,过程①需选用限制酶______处理质粒pET,以实现与改造后的P基因定向连接,获得重组质粒pET-P。
    (2)PCR2和PCR3不能同时在同一个反应体系中进行的原因是______。已知Z基因b链序列为,D基因d链序列为5'GTGCGGATAGA……CACCACGAC3',PCR2和PCR3中所使用的引物4、引物5可以为______。
    A. B.
    C. D.
    (3)过程②需经变性、退火和延伸才能得到Z-D融合基因。退火过程中会形成多种杂交双链,其中能延伸得到Z-D融合基因为图中______(填字母)杂交的双链。过程②的退火温度明显低于PCR2和PCR3,原因是______。
    (4)为保证Z-D融合基因与重组质粒pET-P实现如图所示的连接,引物3和引物6中需分别包含限制酶______识别序列。为获得高产PLP的菌株,需将过程③获得的产物与处于______的大肠杆菌BL21混合培养后,再接种至含氨苄青霉素的培养基进行筛选。对存活菌株进行PLP产量检测时,部分菌株PLP产量未显著提高,最可能的原因是______。
    【答案】(1)①. TaqDNA聚合酶(耐高温的DNA聚合酶)②. 3##三 ③. XbaⅠ和NcIⅠ
    (2)①. 引物4会与引物5结合,从而干扰引物与模板链的结合,进而影响PCR过程 ②. BD
    (3)①. b'、c' ②. 提高a'与d'、b'与c'结合效率
    (4)①. NcIⅠ、BamHⅠ ②. 感受态 ③. 导入pET-P质粒
    【分析】基因工程技术的基本步骤: (1)目的基因的获取:方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。(2)基因表达载体的构建:是基因工程的核心步骤,基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。(3)将目的基因导入受体细胞:根据受体细胞不同,导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法;将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法;将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。 (4)目的基因的检测与鉴定。
    【小问1详解】PCR扩增时,除了需要添加模板、引物、4种脱氧核苷酸和含Mg2+的缓冲液外,还需要添加耐高温的DNA聚合酶。PCR1过程中引物多了限制酶的识别序列,进行第一、二轮扩增,得到的是两条不等长链的DNA分子,进行第三扩增才能出现改造后的P基因。将改造后的P基因定向连接到质粒pET中,采用双酶切,根据质粒pET中的四种限制酶识别序列以及引物的部分序列,过程①需选用限制酶XbaⅠ和NcIⅠ。
    【小问2详解】过程2利用了重叠延伸PCR技术将两个目的基因连接,由于引物4和引物5序列存在碱基互补配对,PCR2和PCR3不能同时在同一个反应体系中,以确保单独扩增除目的基因Z和D。引物4和引物5设计的序列需要有部分碱基序列互补配对,按照这个原则,AC选项为一组,BD选项为一组,每组中的每对引物的5'端与另一引物的3'端配对,除此之外,引物还需要与模板链配对,引物4与b链配对,只有D选项的AGATTC与b链中的GAATTC配对,因此PCR2和PCR3中所使用的引物4、引物5可以为BD。
    【小问3详解】引物的延伸方向为5'端往3'端,过程②利用已有的片段作引物,因此其中能延伸得到Z-D融合基因为图中b'、c'。过程②退火的温度较低,可提高a'与d'、b'与c'结合效率。
    【小问4详解】要将Z-D融合基因与P基因连接,P基因下游使用了NcIⅠ限制酶,则Z-D融合基因上游也使用NcIⅠ限制酶,下游则使用限制酶BamHⅠ。为获得高产PLP的菌株,需将过程③获得的产物与处于感受态的大肠杆菌混合培养,使重组质粒易于被大肠杆菌吸收。PLP为多种酶的转化因子,部分存活菌株PLP产量未显著提高,可能原因是导入pET-P质粒,缺少PLP合成过程中Z基因和D基因编码的关键酶,导致含量略有下降。
    性别
    例数
    免疫层析检测
    酶联免疫吸附检测
    核酸检测
    阳性
    阴性
    阳性
    阴性
    阳性
    阴性

    34
    27
    7
    28
    6
    33
    1

    72
    58
    14
    62
    10
    70
    2
    合计
    106
    85
    21
    90
    16
    103
    3
    引物
    部分序列()
    引物1
    GGTCTAGACCTAGG
    引物2
    GGCCATGGGGTTCC
    限制酶
    识别序列及切割位点
    XbaⅠ
    T↓CTAGA
    KpnⅠ
    GGTAC↓C
    NcIⅠ
    C↓CATGG
    BamHⅠ
    G↓GATCC
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