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湖北省武汉市新洲区2023-2024学年高二下学期6月期末生物试卷(解析版)
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这是一份湖北省武汉市新洲区2023-2024学年高二下学期6月期末生物试卷(解析版)，共20页。
2024.6
注意：本试卷分为第I卷和第Ⅱ卷两部分。第I卷为选择题，第Ⅱ卷为非选择题。I卷请考生用2B 铅笔将答案填涂在答题卡上；Ⅱ卷请考生用黑色中性笔将自己的姓名、班级、学校等信息及所有答案填写在答题卷相应的位置上。
第Ⅰ卷（选择题 共 36分）
一、选择题（本题共18小题，每小题2分，共36分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。）
1. 下列关于种群和群落的叙述正确的是（ ）
A. 年龄结构和性别比例都可通过影响出生率和死亡率来间接影响种群密度
B. 使用标记重捕法调查种群密度时，所得结果往往比真实结果偏大
C. 高山不同海拔分布着不同的植被带，属于群落的垂直结构
D. 使用性引诱剂诱杀某种害虫的雄性个体来降低其种群密度，这属于化学防治
【答案】B
【分析】种群是指在一定定自然区域内， 同种生物的全部个体形成种群。调查种群密度的方法主要包括标志重捕法和样方法。
群落是指在相同时间聚集在一定地域中各种生物种群的集合，群落水平上研究的问题主要包括群落的物种组成、群落的结构、群落演替、群落的范围和边界、优势种以及群落内的种间关系等。
【详解】A、年龄结构通过影响出生率和死亡率来间接影响种群密度，性别比例通过影响出生率来间接影响种群密度，A错误；
B、使用标记重捕法调查种群密度时，被标记的动物更难被重捕，所得结果往往比真实结果偏大，B正确；
C、高山的不同海拔分布着不同的植被带，属于不同的群落，不属于群落的垂直结构，C错误；
D、使用性引诱剂诱杀害虫的雄性个体来降低种群密度，这属于生物防治，D错误。
故选B。
2. 根据群落的外貌和物种组成可以将群落分成多种类型。某群落中的植物多为仙人掌属、骆驼刺属，骆驼刺植株才几厘米高，而根长可达15米。请判断该群落最可能是（ ）
A. 荒漠生物群落B. 草原生物群落
C. 森林生物群落D. 海洋生物群落
【答案】A
【分析】不同群落的主要区别是物种组成的不同，不同群落的生物都能适应各自的环境，具有与环境相适应的特征。
【详解】A、群落中的植物多为仙人掌属、骆驼刺属，骆驼刺植株才几厘米高，而根长可达15米，由此推断该地区极度干旱，A正确；
B、草原上的植物往往叶片狭窄，表面有茸毛或蜡质层，以减少水分散失，能抵抗干旱，但根系一般不会太长，B错误；
C、热带雨林中的乔木高大，往往有板状根，树的分支不发达，只在树顶形成树冠，以争夺阳光，C错误；
D、湿地群落介于水生和陆生群落之间，所以湿地生物群落中的动植物物种十分丰富，既有水生生物也有陆生生物，D错误；
故选A。
3. “踧（dí）踧（平坦的状态）周道（大路），鞠（jū，阻塞）为茂草”出自《诗经·小雅·小弁》，下列与此诗句描述的关于群落水平上的问题明显不一样的是______。
①、山有榛，隰（低下的湿地）有苓（甘草）
②、远芳侵古道，晴翠接荒城
③、无田（治理）甫田，维莠（杂草）骄骄
④、野火烧不尽，春风吹又生
【答案】①
【分析】踧（dí）踧（平坦的状态）周道（大路），鞠（jū，阻塞）为茂草”意思是昔日繁华平直的大道,如今长满茂盛的杂草，体现了群落的次生演替。
【详解】①、“踧（dí）踧（平坦的状态）周道（大路），鞠（jū，阻塞）为茂草”意思是昔日繁华平直的大道,如今长满茂盛的杂草，体现了群落的次生演替。山有榛，隰有苓指榛树长在山上， 甘草长在低下的湿地，体现了群落的水平结构，①符合题意；
②、“远芳侵古道，晴翠接荒城”意思是晴空下，翠绿的野草连成一片，淹没古道，伸向远方，连接着荒凉的古城，体现了群落的次生演替，②不符合题意；
③、无田（治理）甫田，维莠（杂草）骄骄是指大田宽广不可耕，田里的野草高高长势旺，体现了群落的次生演替，③不符合题意；
④、野火烧不尽，春风吹又生意思是不管烈火怎样无情地焚烧，只要春风一吹，又是遍地青青的野草，体现了群落的次生演替，④不符合题意。
故选①。
4. 2023年4月，习近平总书记赴湛江考察了麻章区湖光镇金牛岛红树林片区，了解当地对红树林的保护情况。湿地被誉为“地球之肾”，是极其珍贵的自然资源，也是重要的生态系统，具有不可替代的综合功能。下列叙述错误的是（ ）
A. 红树林湿地提供了良好的休闲观光场所，体现了生物多样性的直接价值，是生物多样性最重要的价值
B. 建立红树林湿地保护区是对红树林湿地最有效的保护
C. 在湿地修复过程中要有效选择生物组分并合理布设，这是遵循生态工程的自生原理
D. 保护生物多样性的关键是要处理好人与自然的相互关系
【答案】A
【分析】生物多样性的保护：（1）就地保护（自然保护区）：就地保护是保护物种多样性最为有效的措施。（2）易地保护：动物园、植物园。
生物多样性的价值：包括直接价值、间接价值、潜在价值。
【详解】A、红树林湿地为人类提供了良好的休闲观光场所，这体现了生物多样性的直接价值，但不是生物多样性最重要的价值，生物多样性的间接价值明显大于它的直接价值，A错误；
B、对生物多样性保护最有效的措施是就地保护，即建立保护区，B正确；
C、在湿地修复过程中要有效选择生物组分并合理布设，这是遵循生态工程的自生原理，C正确；
D、保护生物多样性的关键是要处理好人与自然的相互关系 ，做到协调发展，D正确。
故选A。
5. 以下有关传统发酵食品叙述，错误的是（ ）
A. 腐乳是豆腐经过毛霉、曲霉等混合菌种发酵制作的食品
B. 制作泡菜时，要用煮沸后冷却的白开水浸没新鲜蔬菜
C. 果酒发酵瓶内留有1/3空间，可以促进酵母菌的繁殖
D. 醋酸菌将果酒中的糖和乙醇转化为乙酸需要消耗氧气
【答案】B
【分析】参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。
参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。
【详解】A、腐乳的制作需要毛霉、曲霉等混合菌种参与，A正确；
B、制作泡菜时，要用煮沸后冷却的盐水浸没新鲜蔬菜，B错误；
C、果酒发酵瓶内留有1/3空间，保证发酵初期有氧气供应，可以促进酵母菌的繁殖，C正确；
D、醋酸菌是好氧菌，将果酒中的糖和乙醇转化为乙酸需要消耗氧气，D正确。
故选B。
6. 下列关于微生物培养的叙述正确的是（ ）
A. 培养基的配方中不一定都含有碳源、氮源
B. 微生物的纯培养物就是不含有代谢废物的微生物培养物
C. 用稀释涂布平板法对微生物计数，通过菌落数推测出活菌数与实际值相等
D. 用平板划线法对微生物计数，统计结果比实际偏小
【答案】A
【分析】培养基除了含有水、碳源、氮源和无机盐等营养物质外，还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及O2的需求。
由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物，获得纯培养物的过程就是纯培养。
【详解】A、某些特殊种类微生物的培养基中可不含氮源或碳源，如硝化细菌能够利用空气中的CO2，其培养基中可以不添加碳源，A正确；
B、微生物的纯培养物是由单一个体繁殖所获得的不含杂菌的微生物，而不是不含代谢废物，B错误；
C、使用稀释涂布平板法对微生物进行计数时，当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，因此用稀释涂布平板法统计的菌落数往往比活菌的实际数目少，C错误；
D、平板划线法能分离纯化菌种，获得单菌落，但不能对微生物进行计数，D错误。
故选A。
7. 灭菌、消毒是生物学实验中常见的无菌操作操作。下列叙述正确的是（ ）
A. 动、植物细胞DNA的提取必须在无菌条件下进行
B. 微生物、动物细胞培养基中需添加一定量的抗生素以防止污染
C. 制作果酒的发酵瓶在清洗干净后还需用70%的酒精消毒处理
D. 牛肉膏蛋白胨培养基灭菌后蛋白质变性失活不利于培养微生物
【答案】C
【分析】使用强烈理化因素杀死物体内外一切微生物的细胞、芽孢和孢子的过程称为灭菌，常用的方法有灼烧灭菌、干热灭菌和湿热灭菌。消毒是指用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体体表或内部的一部分微生物的过程。
【详解】A、动、植物细胞DNA的提取不需要在无菌条件下进行，A错误；
B、动物细胞培养基中需添加一定量的抗生素以防止污染，保证无菌环境，但抗生素具有杀菌作用，因此微生物的培养不一定能加入抗生素，B错误；
C、发酵瓶使用前要清洗干净，并用体积分数为70%的酒精消毒，是为了避免杂菌污染，C正确；
D、一般用湿热灭菌法对牛肉膏蛋白胨培养基进行灭菌，以防止杂菌污染，培养基中的蛋白质变性失活不影响微生物的利用，D错误。
故选C。
8. 《齐民要术》记载了古人在生产中运用发酵技术加工食品积累的许多宝贵经验。其中关于桃醋的做法有如下记载：“桃烂自零者，收取，内之于瓮中，以物盖口。七日之后，既烂，漉去皮核，密封闭之。三七日酢成，香美可食。”下列相关叙述错误的是（ ）
A. “七日之后”发酵液中的pH会降低，其表面可能形成一层菌膜
B. “漉去皮核”可增加微生物与营养物质的接触面积，提高发酵效率
C. “以物盖口”和“密封闭之”都是为了防止杂菌污染、创设无氧环境
D. 与未成熟的桃子相比，成熟的桃子单糖含量更高，利于酵母菌发酵
【答案】C
【分析】果醋制作中起到主要作用的微生物是醋酸菌，醋酸菌是一种好氧细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动，其代谢类型属于异养需氧型。当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的葡萄糖分解为醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。醋酸菌的最适生长温度为30-35℃。
【详解】A、“七日之后”主要进行醋酸发酵，该过程产生的醋酸可以使发酵液中的pH降低，发酵液表面会出现一层醋酸菌膜，A正确；
B、过滤皮核后，发酵微生物与营养物质的接触机会增加，发酵效率提高，B正确；
C、“密封闭之”的主要目的只是为了防止杂菌污染，醋酸发酵是需氧过程，C错误；
D、桃子在成熟过程中，多糖转化成单糖，单糖含量不断增高，利于酵母菌发酵，D正确。
故选C。
9. 如图是微生物平板划线示意图，划线的顺序为12345，下列说法中错误的是（ ）
A. 接种环的灭菌方法可在酒精灯火焰上灼烧或用酒精消毒
B. 平板划线操作应在火焰旁进行而不能在火焰上进行
C. 在5个区域中只要有单个活细菌就可能获得所需要的菌落
D. 在1、2、3、4、5区域中划线前后都要对接种环进行灼烧灭菌
【答案】A
【分析】平板划线法通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。
【详解】A、进行平板划线操作之前，以及每次划线前后都要对接种环进行灭菌，接种环的灭菌方法应是在酒精灯火焰上灼烧，不能用酒精消毒，A错误；
B、平板划线操作应在火焰旁进行，不能在火焰上进行，B正确；
C、由题图可知，5区域是最后一个区域，在5个区域中，只要有单个活细菌，通过培养即可获得所需菌落，故有可能在5区域获得所需要的菌落，其它区域也有可能得到所需要的菌落，C正确；
D、在1、2、3、4区域中划线前后都要对接种环进行灼烧灭菌，保证每次划线的菌种来自上一区域的末端，在1区域前灼烧是为了杀死杂菌，在5区域后灼烧灭菌，是防止接种环上的细菌污染环境，D正确。
故选A。
10. 栽培马铃薯为四倍体，野生马铃薯为二倍体。传统育种方法难以将野生马铃薯的优质基因转移到栽培马铃薯中。运用植物体细胞杂交技术，有望解决该问题。以下叙述错误的是（ ）
A. 因野生种与栽培种杂交的子代高度不育，存在生殖隔离
B. 用纤维素酶与果胶酶处理马铃薯细胞以便获得原生质体
C. 可以用灭活的病毒或PEG促进两种马铃薯的原生质体融合
D. 植物体细胞杂交技术能够打破生殖隔离，实现远源杂交育种
【答案】C
【分析】植物细胞融合的方法∶ 物理法（离心、振动、电刺激等）和化学法（聚乙二醇）;动物细胞融合的方法∶物理法（离心、振动、电刺激等）、化学法（聚乙二醇）和生物法（灭活的病毒）。
【详解】A、野生种马铃薯和栽培种马铃薯是两个不同的物种，存在生殖隔离，A正确；
B、制备马铃薯的原生质体，可用纤维素酶和果胶酶处理植物细胞，去除细胞壁，B正确；
C、可用聚乙二醇、电激等方法诱导原生质体融合，而灭活的病毒只能诱导动物细胞融合，C错误；
D、植物体细胞杂交技术能够打破生殖隔离，实现远源杂交育种，D正确。
故选C。
11. 植物细胞工程在农业、医药和工业等方面有着广泛应用。以下叙述错误的是（ ）
A. 用组织培养技术可以实现名贵兰花快速繁殖，且能保持亲本优良性状
B. 取草莓根尖成熟区细胞进行组织培养，可以实现作物脱毒并提高产量
C. 玉米可由花药离体培养、人工诱导染色体加倍，获得纯合二倍体
D. 离体条件下大规模培养红豆杉细胞，可获得紫杉醇的工厂化生产
【答案】B
【分析】植物细胞工程技术的应用：植物繁殖的新途径（微型繁殖、作物脱毒、人工种子）、作物新品种的培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产。
【详解】A、植物组织培养技术可以实现名贵兰花快速繁殖，同时植物组织培养属于无性繁殖，故能保持亲本优良性状，A正确；
B、茎尖分生区病毒数量少甚至没有，故取草莓茎尖分生区细胞进行组织培养，可以获得脱毒苗并提高产量，B错误；
C、可用玉米的花药进行离体培养获得单倍体，再用秋水仙素处理萌发的幼苗，人工诱导染色体加倍，可获得纯合二倍体，C正确；
D、离体条件下大规模培养红豆杉细胞（即植物细胞培养），可实现紫杉醇的工厂化生产，D正确。
故选B。
12. 以下有关动物细胞培养所需的条件，叙述错误的是（ ）
A. 进行动物细胞培养时常用胃蛋白酶分散细胞
B. 哺乳动物细胞培养的温度在36.5℃左右
C. 气体环境由95%空气和5%CO2组成，加入CO2用于维持培养液pH
D. 需定期更换培养液，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害
【答案】A
【分析】动物细胞培养的基本条件
（1）无菌、无毒的环境：对培养液和所有培养用具进行灭菌处理；定期更换培养液以清除代谢废物。
（2）营养：除糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等之外，通常还需要加入血清等一些天然成分。
（3）温度、pH和渗透压：（哺乳动物）最适温度为（36.5±0.5）℃，多数动物细胞生存的最适pH为7.2~7.4。
（4）气体环境：所需气体主要有O2和CO2，O2是细胞代谢所必需的，CO2的作用是维持培养液的pH。
【详解】A、进行动物细胞培养时，常用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理动物组织，将动物组织分散成单个细胞，A错误；
B、哺乳动物细胞培养的温度多以（36.5±0.5）℃为宜，B正确；
C、动物细胞培养的气体环境为95%空气（其中的O2是细胞代谢所必需的）加5%CO2，CO2的作用是维持培养液的pH，C正确；
D、动物细胞培养时需定期更换培养液，以清除代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害，D正确。
故选A。
13. 某夫妇中妻子患线粒体基因遗传病，丈夫正常。他们用正常女性捐献的卵母细胞，通过“三亲婴儿”的技术，生下了正常的孩子，其培育过程如下。据图分析，以下叙述错误的是（ ）
A. 若这对夫妇正常生育，孩子患该病概率是100%
B. 图中甲为患病妻子，乙为卵母细胞捐献者
C. 培育过程运用了核移植技术和胚胎移植技术
D. 三亲婴儿的染色体基因全部来自于这对夫妇
【答案】B
【分析】由题干信息：夫妇中妻子患线粒体基因遗传病，丈夫正常，他们用正常女性捐献的卵母细胞，通过“三亲婴儿”的技术生下了正常的孩子可知，志愿者提供去核的卵母细胞、妻子提供丽母细胞的细胞核，丈夫提供正常的精子。
【详解】A、夫妇中妻子患线粒体基因遗传病，属于细胞质遗传，若这对夫妇正常生育，孩子患该病概率是100%，A正确；
B、由图示可知，图中乙提供细胞核，为患病妻子，甲提供去核的卵母细胞，为卵母细胞捐献者，B错误；
C、由图示可知，培育过程运用了核移植技术和胚胎移植技术，C正确；
D、三亲婴儿的染色体基因是由精子和卵细胞的细胞核融合而来，全部来自于这对夫妇，D正确。
故选B。
14. 某生物活动小组为探究当地农田土壤中分解尿素的细菌的数量，进行了取样、系列梯度稀释、涂布平板、培养、计数等步骤，实验操作过程如下，下列说法不正确的是（ ）
A. 图中接种的培养基是以尿素为唯一氮源的固体培养基，能生长的微生物可能不能合成脲酶
B. 若每支试管稀释10倍，则图中a的数值应为2.7，5号试管共稀释了 106倍
C. 图中左上角培养基菌落连成一片，可能是涂布不均匀造成的
D. 若仅以4号试管接种培养基计数，5g该土壤中含分解尿素菌的估算数目是1.4×108个
【答案】D
【分析】土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
（1）分离原理：
①土壤中的细菌之所以能分解尿素，是因为它们能合成脲酶。
②配制以尿素为唯一氮源的选择培养基，能够生长的细菌就是能分解尿素的细菌。
（2）鉴定原理
分解尿素的细菌合成的脲酶可以将尿素分解为氨，氨会使培养基的碱性增强，在培养基中加入酚红指示剂培养细菌，若指示剂变红，则可确定该细菌能分解尿素。
稀释涂布平板法除可以用于分离微生物外，还能用来统计样品中活菌的数目。当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个单菌落来源于样品稀释液中的一个活菌，通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多个活菌。
【详解】A、分离土壤中分解尿素的细菌时，应配制以尿素为唯一氮源的固体培养基，能生长的微生物可能不能合成脲酶，如固氮菌能利用氮源生存，但其不能合成脲酶，A正确；
B、若每支试管稀释10倍，则将0.3mL上清液与a mL无菌水混合稀释10倍，需要a的数值为2.7。5g土壤加入50mL无菌水中被稀释了10倍，则5号试管共稀释了106倍，B正确；
C、涂布不均匀会造成的培养基中菌落分布不均匀，可能会造成菌落连成一片，C正确；
D、使用稀释涂布平板法进行计数的计算方法为：每克样品中的菌落数=（C/V）×M，其中C表示某一稀释度的平板上生长的平均菌落数，V表示涂布平板时稀释液的体积，M表示稀释倍数。若仅以4号试管接种培养基计数，5g该土壤中含有分解尿素的细菌的估算数目=（275+285+280）÷3÷0.2×105×5=7×108个，D错误。
故选D。
15. 自然情况下，牛的生育率很低，畜牧业生产上可通过下图两种途径实现良种牛的快速大量繁殖。下列相关叙述错误的是（ ）
A. 图中的激素处理是应用外源促性腺激素促使雌性牛超数排卵
B. 途径1受精前，需将采集到的卵母细胞在体外培养到MⅡ期
C. 途径2进行胚胎移植前，不要对供体和受体进行免疫检查
D. 途径1和途径2过程中都有胚胎的形成，均为有性生殖
【答案】D
【分析】试管动物技术是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精，并通过培养发育为早期胚胎后，再经移植进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑葚胚或囊胚，对囊胚阶段的胚胎进行分割时要注意将内细胞团等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。
【详解】A、图中的激素处理是应用外源促性腺激素促使雌性牛超数排卵，从而为获得更多的胚胎做准备，A正确；
B、途径1受精前，需将采集到的卵母细胞在体外培养到MⅡ中期，因为此时的卵母细胞能接受获能的精子完成受精过程，B正确；
C、途径2进行胚胎移植前，需要对供体和受体进行同期发情处理，不需要做免疫检查，因为受体子宫对移入的胚胎基本不发生免疫排斥反应，C正确；
D、途径1获得试管牛的技术流程中包括体外受精、体外胚胎培养和胚胎移植等技术，属于有性生殖；途径2获得是试管牛是通过核移植技术获得的，为无性生殖，D错误。
故选D。
16. 下列关于基因表达载体的说法，不正确的是（ ）
A. 基因表达载体的构建是基因工程的核心步骤
B. 终止子位于目的基因的下游，能够终止翻译过程
C. 基因表达载体包含启动子、目的基因、终止子、标记基因等
D. 不同的目的基因所需的启动子不一定相同
【答案】B
【分析】基因表达载体的构建：（1）目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在并且可以遗传给下一代并表达和发挥作用。（2）基因表达载体的组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因+复制原点。
【详解】A、基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建，A正确；
BC、基因表达载体包含启动子、目的基因、终止子、标记基因和复制原点等，终止子位于目的基因的下游，能够终止转录过程，B错误，C正确；
D、启动子具有组织特异性，不同的目的基因所需的启动子不一定相同，D正确。
故选B。
17. 下图是 4 种限制酶识别序列及其酶切位点，下列叙述错误的是（ ）
A. 不同类型的限制酶切割后，有的产生黏性末端，有的产生平末端
B. 不同类型的限制酶切割后可能产生相同的黏性末端
C. 用酶1和酶2分别切割目的基因和质粒，连接形成重组 DNA 分子后，重组 DNA 分子不能被酶2识别
D. 用酶3和酶4分别切割目的基因和质粒后，其产物经T4DNA连接酶催化能连接形成重组DNA 分子
【答案】C
【分析】限制性核酸内切酶（限制酶）；
（1）来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的；
（2）功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性；
（3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。
题图分析：酶1和酶2切割会形成黏性末端，并且形成的末端序列相同；酶3和酶4切割会形成平末端。
【详解】A、结合图示可知，不同类型的限制酶切割后，有的产生黏性末端（酶1和酶2），有的产生平末端（酶3和酶4），A正确；
B、不同类型的限制酶切割后可能产生相同的黏性末端，如图中的酶1和酶2，B正确；
C、用酶1和酶2分别切割目的基因和质粒，形成的末端序列相同，连接形成重组DNA分子后，重组DNA分子仍能被酶2识别，C错误；
D、用酶3和酶4分别切割目的基因和质粒后，产生的是平末端，而T4DNA连接酶能将平末端连接起来，即用酶3和酶4切割目的基因和质粒形成的产物经T4DNA连接酶催化可以连接形成重组DNA分子，D正确。
故选C。
18. 下图为利用PCR 技术扩增特定DNA片段的部分示意图，图中引物为单链DNA片段，它是子链合成延伸的基础。下列有关描述错误的是（ ）
A. 利用PCR技术扩增目的基因时变性不需要解旋酶
B. 引物是子链合成延伸基础，子链沿着模板链的3'→5'方向延伸
C. 在第三轮循环产物中才开始出现两条脱氧核苷酸链等长的 DNA片段且占 1/4
D. 从理论上推测，第四轮循环产物中只含有引物A的DNA片段所占的比例为15/16
【答案】D
【分析】PCR反应需要的条件
PCR扩增的过程
（1）变形：加热超过90℃时，双链DNA解旋为单链。
（2）复性：当温度下降到50℃左右时，两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合。
（3）延伸：当温度上升到72℃左右时，溶液中的4种脱氧核苷酸在耐高温的DNA聚合酶的作用下，通过碱基互补配对原则合成新的DNA链。
【详解】A、PCR扩增时，当加热超过90℃时，双链DNA解旋为单链，因此不需要解旋酶，A正确；
B、PCR扩增时需要引物和单链DNA结合，引物是子链延伸的基础。DNA聚合酶能够从引物的3，端开始连接脱氧核苷酸，因此子链沿着模板链的3，→5，方向延伸，B正确；
C、引物A或B结合的单链DNA记作长链，引物A或B合成的子链记作中链，以中链为模板合成的子链记作短链，则第一次循环结束后生成2个DNA，其两条链均为长中；第二次循环结束后生成4个DNA，其中2个DNA的两条链为长中， 2个DNA的两条链为短中；第三次循环结束后生成8个DNA，其中2个DNA的两条链为长中，4个DNA的两条链为短中，2个DNA的两条链为短短，这两条脱氧核苷酸链等长，因此在第3次循环产物中才开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段，该DNA片段占1/4，C正确；
D、从理论上推测，第四轮循环产物有16个DNA分子，只含有引物A的DNA片段是与其中一个模板链结合形成的DNA，因此第四轮循环产物中只含有引物A的DNA片段所占的比例为1/16，D错误。
故选D。
第Ⅱ卷（非选择题 共64分）
二、非选择题（本题共4小题，共64分。）
19. 番茄潜叶蛾起源于南美洲的秘鲁，是一种世界检疫性入侵害虫， 目前已经扩散到全球100多个国家，主要危害茄科植物，尤其嗜食番茄，严重威胁全球番茄产业。探究番茄潜叶蛾的有效防治方法，对番茄等作物的种植具有重要意义。请回答下列问题：
（1）番茄潜叶蛾入侵初期其数量往往呈现“J”形增长，主要原因有_____。
（2）杂食性蜂是番茄潜叶蛾的天敌，对番茄潜叶蛾卵的取食量大，且杂食性蜂的取食特点使其在猎物匮乏时仍能在番茄植株上可依赖番茄植株存活，目前已成功用于防治番茄潜叶蛾。杂食性蜂和番茄潜叶蛾的种间关系为_____；在番茄潜叶蛾虫害发生_____（填“前”或“后”）期释放杂食性蜂防治效果较好；在番茄作物周边种植金盏菊有利于保持杂食性蜂的种群数量且降低其对番茄的危害，原因可能是_____。
（3）以番茄长势和番茄潜叶蛾发生程度基本一致的3个大棚分别记为大棚1、大棚2、大棚3，作为3 次重复。将4种不同颜色的诱蛾器放置在大棚内的相同位置，调查统计每种颜色诱蛾器的诱捕数量，结果如下图所示：
据图分析，_____色诱蛾器的诱捕效果最好，.理由是_____。
（4）由于使用杀虫剂防治见效快、效果好，且较为经济，因此这是目前控制番茄潜叶蛾的主要手段。但是目前人们越来越倾向于利用生物关系抑制虫害的生物防治，其优点是_____。（答出两点）
【答案】（1）食物和空间条件充裕、气候适宜、没有天敌等
（2）①. 种间竞争和捕食 ②. 前 ③. 杂食性蜂更喜捕食金盏菊
（3）①. 蓝 ②. 三个大棚中，蓝色诱蛾器的诱捕数量均最多
（4）对环境无污染；效果好且持久；避免害虫抗药性增强
【分析】（1）番茄潜叶蛾入侵某地初期，由于食物和空间条件充裕、气候条件适宜、没有天敌等，因此其数量往往呈现J形增长。
（2）分析题干信息，杂食性蜂是番茄潜叶蛾的天敌，对番茄潜叶蛾卵的取食量大，说明二者之间的关系为捕食；杂食性蜂在猎物匮乏时仍能在番茄植株存活，说明杂食性峰也能食用番茄，和番茄潜叶蛾为竞争关系，由此可知杂食性蜂和番茄潜叶蛾的种间关系为种间竞争和捕食。
在番茄潜叶蛾虫害发生前期，其种群增长速率慢，种群数量少，因此此时释放杂食性蜂防治效果较好。在番茄作物周边种植金盏菊有利于保持杂食性蜂的种群数量且降低其对番茄的危害，其原因可能是杂食性蜂更喜捕食金盏菊，减少对番茄的危害。
（3）分析柱形图可知，三个大棚中，蓝色诱蛾器的诱捕数量均最多，说明蓝色诱捕器的诱捕效果最好。
（4）生物防治采用天然的生物控制剂或有益生物来控制病虫害。其最大的优点就是不污染环境，此外还有效果好且持久、避免害虫抗药性增强等优点。
20. 依据某生态系统构建碳循环模式图1，其中A、B、C为生态系统的组成成分。甲、乙、丙、丁是B中相互关联的四种生物，它们所同化的能量如表格所示。请据图回答：
（1）生态系统的结构包括_____和_____。
（2）图1的碳在无机环境和生物群落中的循环是以_____的形式进行的。
（3）蚯蚓的活动有利于农作物对无机盐离子的吸收，蚯蚓属于图1中生态系统成分中的_____（填A、B或C）。该成分在生态系统中的作用是_____。
（4）若仅依据同化的能量表格请写出由甲、乙、丙、丁所构成的食物链（网）：_____，该食物链（网）中的所有生物是否能构成一个生物群落并说明理由：_____。
【答案】（1）①. 生态系统的组成成分 ②. 营养结构（食物链和食物网）
（2）CO2 （3）①. C ②. 将动植物遗体残骸中的有机物分解成无机物（将有机物分解成无机物）
（4）
不能，该食物网中的生物只包含生产者和消费者，群落应是该生态系统的所有生物，还缺少分解者
【分析】分析题图可知，该图是生态系统碳循环模式图，根据双向箭头判断A为生产者，根据生产者指向消费者、生产者、消费者均指向分解者判断B是消费者，C是分解者。根据表格中四中生物同化的能量可以判断甲、乙是初级消费者，丙是次级消费者，丁是三级消费者。
（1）生态系统的结构包括生态系统的组成成分和营养结构（食物链和食物网）。
（2）绿色植物通过光合作用吸收大气中的CO2，同时绿色植物、动物的呼吸作用释放CO2到大气中，因此碳在无机环境与生物群落之间的主要循环形式为CO2。
（3）分析题图，根据双向箭头判断A为生产者，根据生产者指向消费者、生产者、消费者均指向分解者判断B是消费者，C是分解者。蚯蚓能将动植物遗体残骸中的有机物分解为无机物，是异养生物，在生态系统中属于分解者，即属于C。
（4）根据表格中四中生物同化的能量可以判断甲、乙是初级消费者，丙是次级消费者，丁是三
级消费者。所以构成的食物网为。该食物网中的生物只包含生产者和消费者，群落应该是生态系统所有生物，缺失分解者，因此该食物网中的所有生物不能构成一个生物群落。
21. 尼帕病毒是一种新型人兽共患病毒，能引起广泛的血管炎，感染者有发热、严重头痛、脑膜炎等症状，给人及动物带来严重危害。科研人员以猕猴为实验材料来生产抗尼帕病毒的单克隆抗体，实验流程如图所示，已知B淋巴细胞的基因型为AA、骨髓瘤细胞的基因型为BB，回答以下问题：
（1）图中应向猕猴注射________。
（2）骨髓瘤细胞的生长特点是________。两两融合后的融合细胞可能存在的基因型是________，筛选1需要使用特定的培养基，在该培养基上________的细胞都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞才能生长。
（3）筛选2的两个步骤是________。该过程中通常会使用有限稀释法，即将细胞悬液进行连续倍数稀释，最终调整密度为5个/mL；将稀释好的细胞悬液接种于96孔板，每孔加0.1mL；在显微镜下挑选含1个细胞的孔，补加培养液后继续培养获得细胞克隆。与植物组织培养相比，该培养液中需要添加的特殊成分是________。检测过程发现有些杂交瘤细胞不能分泌抗尼帕病毒抗体，原因是________________________。
【答案】（1）灭活的尼帕病毒
（2）①. 适宜条件下可以无限增殖 ②. AABB、AAAA、BBBB ③. 未融合的细胞和同种融合的细胞
（3）①. 克隆化培养和抗体检测 ②. 血清 ③. 形成杂交瘤细胞的B淋巴细胞种类多，不一定都能分泌抗尼帕病毒抗体
【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。
（1）分析题意，本流程目的是以猕猴为实验材料来生产抗尼帕病毒的单克隆抗体，由于抗原与抗体的结合具有特异性，故图中应向猕猴注射（灭活的）尼帕病毒，诱导其产生特异性免疫。
（2）骨髓瘤细胞的生长特点是在适宜条件下可以无限增殖；细胞的融合具有随机性，结合题干“已知B淋巴细胞的基因型为AA、骨髓瘤细胞的基因型为BB”可知，两两融合后的融合细胞可能存在的基因型是AABB、AAAA、BBBB；筛选1需要使用特定的培养基（通常是HAT培养基），在该培养基上未融合的细胞和同种融合的细胞都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞才能生长。
（3） 筛选2为第二次筛选，是对经选择培养的杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测（专一抗体检验阳性），经多次筛选，获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞；有限稀释法是克隆化培养动物细胞的一种方法：将细胞悬液进行连续倍数稀释，最终调整密度为5个/mL，将稀释好的细胞悬液接种于96孔板，每孔加0.1mL，24h后在显微镜下挑选只含一个细胞的孔，补加培养液后继续培养获得细胞克隆；为保证细胞正常生长，体外培养时与植物组织培养相比，该培养液中需要添加的特殊成分是血清；每种B细胞只能分泌一种抗体，而由于形成杂交瘤细胞的B淋巴细胞种类多，不一定都能分泌抗尼帕病毒抗体，故检测过程有些杂交瘤细胞不能分泌抗尼帕病毒抗体。
22. 人们追求的除草剂的施用效果是既能高效除草，又能确保作物安然无恙。可通过转基因技术将耐受或经修饰的能降解草甘膦的基因导入作物，使其耐除草剂。请据图回答下列问题：
（1）获取抗除草剂基因之后，可以通过PCR特异性快速扩增该基因，该反应需要在一定的_____中进行，需要提供模板、2种特异性引物、4种脱氧核苷酸和_____酶。常采用_____来鉴定 PCR的产物。
（2）为便于目的基因的表达和筛选，在基因表达载体的构建时应选用限制酶_____来切割质粒和目的基因。构建基因表达载体是基因工程的核心步骤，其目的是_____。
（3）启动子的作用是_____。在构建好的基因表达载体中的标记基因是_____，其作用是_____。
【答案】（1）①. 缓冲液 ②. 耐高温的DNA聚合（TaqDNA聚合）③. 琼脂糖凝胶电泳（电泳）法
（2）①. BamH I 和Sau3A I ②. 使目的基因在受体细胞中维持稳定并表达
（3）①. RNA聚合酶识别和结合的部位，驱动基因转录 ②. 四环素抗性基因 ③. 便于对重组DNA分子的筛选
【分析】PCR基本原理：PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解旋成单链，在DNA聚合酶的参与下，根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子拷贝。在实验中发现，DNA在高温时也可以发生变性解链，当温度降低后又可以复性成为双链。因此，通过温度变化控制DNA的变性和复性，加入设计引物，DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。
（1）PCR需要在一定的缓冲液中进行，维持pH，需要提供模板、2种特异性的引物，4种脱氧核苷酸和耐高温的DNA聚合酶（TaqDNA聚合），鉴定产物常用琼脂糖凝胶电泳（电泳）法。
（2）根据图中箭头可知，目的基因应位于启动子和终止子之间，所以不能用Bcl Ⅰ进行切割，为了防止目的基因和运载体的反向连接，不采用同种限制酶，即不用图中的Hind Ⅲ，因此应选用限制酶BamH I和Sau3A I切割质粒和含目的基因的DNA片段。构建基因表达载体的目的是使目的基因在受体细胞中维持稳定并表达。
（3）启动子位于基因的上游，是RNA聚合酶识别和结合的部位，驱动基因转录。使用BamH I切割质粒，将青霉素抗性基因破坏，所以标记基因是四环素抗性基因，抗性基因的作用是便于对重组DNA分子的筛选。条件
在DNA复制中的作用
DNA母链
提供DNA复制模板
4种脱氧核苷酸
合成DNA子链的原料
（耐高温的）DNA聚合酶
催化合成DNA子链
引物
使DNA聚合酶能够从引物的3，端开始连接脱氧核苷酸
缓冲液（含Mg2+）
真核细胞和细菌的DNA聚合酶都需要Mg2+激活
温度
控制温度可以使DNA复制在体外反复进行
甲
乙
丙
丁
同化的能量KJ·m-2·a-1
5000
3000
600
120
2024.6
注意：本试卷分为第I卷和第Ⅱ卷两部分。第I卷为选择题，第Ⅱ卷为非选择题。I卷请考生用2B 铅笔将答案填涂在答题卡上；Ⅱ卷请考生用黑色中性笔将自己的姓名、班级、学校等信息及所有答案填写在答题卷相应的位置上。
第Ⅰ卷（选择题 共 36分）
一、选择题（本题共18小题，每小题2分，共36分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。）
1. 下列关于种群和群落的叙述正确的是（ ）
A. 年龄结构和性别比例都可通过影响出生率和死亡率来间接影响种群密度
B. 使用标记重捕法调查种群密度时，所得结果往往比真实结果偏大
C. 高山不同海拔分布着不同的植被带，属于群落的垂直结构
D. 使用性引诱剂诱杀某种害虫的雄性个体来降低其种群密度，这属于化学防治
【答案】B
【分析】种群是指在一定定自然区域内， 同种生物的全部个体形成种群。调查种群密度的方法主要包括标志重捕法和样方法。
群落是指在相同时间聚集在一定地域中各种生物种群的集合，群落水平上研究的问题主要包括群落的物种组成、群落的结构、群落演替、群落的范围和边界、优势种以及群落内的种间关系等。
【详解】A、年龄结构通过影响出生率和死亡率来间接影响种群密度，性别比例通过影响出生率来间接影响种群密度，A错误；
B、使用标记重捕法调查种群密度时，被标记的动物更难被重捕，所得结果往往比真实结果偏大，B正确；
C、高山的不同海拔分布着不同的植被带，属于不同的群落，不属于群落的垂直结构，C错误；
D、使用性引诱剂诱杀害虫的雄性个体来降低种群密度，这属于生物防治，D错误。
故选B。
2. 根据群落的外貌和物种组成可以将群落分成多种类型。某群落中的植物多为仙人掌属、骆驼刺属，骆驼刺植株才几厘米高，而根长可达15米。请判断该群落最可能是（ ）
A. 荒漠生物群落B. 草原生物群落
C. 森林生物群落D. 海洋生物群落
【答案】A
【分析】不同群落的主要区别是物种组成的不同，不同群落的生物都能适应各自的环境，具有与环境相适应的特征。
【详解】A、群落中的植物多为仙人掌属、骆驼刺属，骆驼刺植株才几厘米高，而根长可达15米，由此推断该地区极度干旱，A正确；
B、草原上的植物往往叶片狭窄，表面有茸毛或蜡质层，以减少水分散失，能抵抗干旱，但根系一般不会太长，B错误；
C、热带雨林中的乔木高大，往往有板状根，树的分支不发达，只在树顶形成树冠，以争夺阳光，C错误；
D、湿地群落介于水生和陆生群落之间，所以湿地生物群落中的动植物物种十分丰富，既有水生生物也有陆生生物，D错误；
故选A。
3. “踧（dí）踧（平坦的状态）周道（大路），鞠（jū，阻塞）为茂草”出自《诗经·小雅·小弁》，下列与此诗句描述的关于群落水平上的问题明显不一样的是______。
①、山有榛，隰（低下的湿地）有苓（甘草）
②、远芳侵古道，晴翠接荒城
③、无田（治理）甫田，维莠（杂草）骄骄
④、野火烧不尽，春风吹又生
【答案】①
【分析】踧（dí）踧（平坦的状态）周道（大路），鞠（jū，阻塞）为茂草”意思是昔日繁华平直的大道,如今长满茂盛的杂草，体现了群落的次生演替。
【详解】①、“踧（dí）踧（平坦的状态）周道（大路），鞠（jū，阻塞）为茂草”意思是昔日繁华平直的大道,如今长满茂盛的杂草，体现了群落的次生演替。山有榛，隰有苓指榛树长在山上， 甘草长在低下的湿地，体现了群落的水平结构，①符合题意；
②、“远芳侵古道，晴翠接荒城”意思是晴空下，翠绿的野草连成一片，淹没古道，伸向远方，连接着荒凉的古城，体现了群落的次生演替，②不符合题意；
③、无田（治理）甫田，维莠（杂草）骄骄是指大田宽广不可耕，田里的野草高高长势旺，体现了群落的次生演替，③不符合题意；
④、野火烧不尽，春风吹又生意思是不管烈火怎样无情地焚烧，只要春风一吹，又是遍地青青的野草，体现了群落的次生演替，④不符合题意。
故选①。
4. 2023年4月，习近平总书记赴湛江考察了麻章区湖光镇金牛岛红树林片区，了解当地对红树林的保护情况。湿地被誉为“地球之肾”，是极其珍贵的自然资源，也是重要的生态系统，具有不可替代的综合功能。下列叙述错误的是（ ）
A. 红树林湿地提供了良好的休闲观光场所，体现了生物多样性的直接价值，是生物多样性最重要的价值
B. 建立红树林湿地保护区是对红树林湿地最有效的保护
C. 在湿地修复过程中要有效选择生物组分并合理布设，这是遵循生态工程的自生原理
D. 保护生物多样性的关键是要处理好人与自然的相互关系
【答案】A
【分析】生物多样性的保护：（1）就地保护（自然保护区）：就地保护是保护物种多样性最为有效的措施。（2）易地保护：动物园、植物园。
生物多样性的价值：包括直接价值、间接价值、潜在价值。
【详解】A、红树林湿地为人类提供了良好的休闲观光场所，这体现了生物多样性的直接价值，但不是生物多样性最重要的价值，生物多样性的间接价值明显大于它的直接价值，A错误；
B、对生物多样性保护最有效的措施是就地保护，即建立保护区，B正确；
C、在湿地修复过程中要有效选择生物组分并合理布设，这是遵循生态工程的自生原理，C正确；
D、保护生物多样性的关键是要处理好人与自然的相互关系 ，做到协调发展，D正确。
故选A。
5. 以下有关传统发酵食品叙述，错误的是（ ）
A. 腐乳是豆腐经过毛霉、曲霉等混合菌种发酵制作的食品
B. 制作泡菜时，要用煮沸后冷却的白开水浸没新鲜蔬菜
C. 果酒发酵瓶内留有1/3空间，可以促进酵母菌的繁殖
D. 醋酸菌将果酒中的糖和乙醇转化为乙酸需要消耗氧气
【答案】B
【分析】参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。
参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。
【详解】A、腐乳的制作需要毛霉、曲霉等混合菌种参与，A正确；
B、制作泡菜时，要用煮沸后冷却的盐水浸没新鲜蔬菜，B错误；
C、果酒发酵瓶内留有1/3空间，保证发酵初期有氧气供应，可以促进酵母菌的繁殖，C正确；
D、醋酸菌是好氧菌，将果酒中的糖和乙醇转化为乙酸需要消耗氧气，D正确。
故选B。
6. 下列关于微生物培养的叙述正确的是（ ）
A. 培养基的配方中不一定都含有碳源、氮源
B. 微生物的纯培养物就是不含有代谢废物的微生物培养物
C. 用稀释涂布平板法对微生物计数，通过菌落数推测出活菌数与实际值相等
D. 用平板划线法对微生物计数，统计结果比实际偏小
【答案】A
【分析】培养基除了含有水、碳源、氮源和无机盐等营养物质外，还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及O2的需求。
由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物，获得纯培养物的过程就是纯培养。
【详解】A、某些特殊种类微生物的培养基中可不含氮源或碳源，如硝化细菌能够利用空气中的CO2，其培养基中可以不添加碳源，A正确；
B、微生物的纯培养物是由单一个体繁殖所获得的不含杂菌的微生物，而不是不含代谢废物，B错误；
C、使用稀释涂布平板法对微生物进行计数时，当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，因此用稀释涂布平板法统计的菌落数往往比活菌的实际数目少，C错误；
D、平板划线法能分离纯化菌种，获得单菌落，但不能对微生物进行计数，D错误。
故选A。
7. 灭菌、消毒是生物学实验中常见的无菌操作操作。下列叙述正确的是（ ）
A. 动、植物细胞DNA的提取必须在无菌条件下进行
B. 微生物、动物细胞培养基中需添加一定量的抗生素以防止污染
C. 制作果酒的发酵瓶在清洗干净后还需用70%的酒精消毒处理
D. 牛肉膏蛋白胨培养基灭菌后蛋白质变性失活不利于培养微生物
【答案】C
【分析】使用强烈理化因素杀死物体内外一切微生物的细胞、芽孢和孢子的过程称为灭菌，常用的方法有灼烧灭菌、干热灭菌和湿热灭菌。消毒是指用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体体表或内部的一部分微生物的过程。
【详解】A、动、植物细胞DNA的提取不需要在无菌条件下进行，A错误；
B、动物细胞培养基中需添加一定量的抗生素以防止污染，保证无菌环境，但抗生素具有杀菌作用，因此微生物的培养不一定能加入抗生素，B错误；
C、发酵瓶使用前要清洗干净，并用体积分数为70%的酒精消毒，是为了避免杂菌污染，C正确；
D、一般用湿热灭菌法对牛肉膏蛋白胨培养基进行灭菌，以防止杂菌污染，培养基中的蛋白质变性失活不影响微生物的利用，D错误。
故选C。
8. 《齐民要术》记载了古人在生产中运用发酵技术加工食品积累的许多宝贵经验。其中关于桃醋的做法有如下记载：“桃烂自零者，收取，内之于瓮中，以物盖口。七日之后，既烂，漉去皮核，密封闭之。三七日酢成，香美可食。”下列相关叙述错误的是（ ）
A. “七日之后”发酵液中的pH会降低，其表面可能形成一层菌膜
B. “漉去皮核”可增加微生物与营养物质的接触面积，提高发酵效率
C. “以物盖口”和“密封闭之”都是为了防止杂菌污染、创设无氧环境
D. 与未成熟的桃子相比，成熟的桃子单糖含量更高，利于酵母菌发酵
【答案】C
【分析】果醋制作中起到主要作用的微生物是醋酸菌，醋酸菌是一种好氧细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动，其代谢类型属于异养需氧型。当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的葡萄糖分解为醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。醋酸菌的最适生长温度为30-35℃。
【详解】A、“七日之后”主要进行醋酸发酵，该过程产生的醋酸可以使发酵液中的pH降低，发酵液表面会出现一层醋酸菌膜，A正确；
B、过滤皮核后，发酵微生物与营养物质的接触机会增加，发酵效率提高，B正确；
C、“密封闭之”的主要目的只是为了防止杂菌污染，醋酸发酵是需氧过程，C错误；
D、桃子在成熟过程中，多糖转化成单糖，单糖含量不断增高，利于酵母菌发酵，D正确。
故选C。
9. 如图是微生物平板划线示意图，划线的顺序为12345，下列说法中错误的是（ ）
A. 接种环的灭菌方法可在酒精灯火焰上灼烧或用酒精消毒
B. 平板划线操作应在火焰旁进行而不能在火焰上进行
C. 在5个区域中只要有单个活细菌就可能获得所需要的菌落
D. 在1、2、3、4、5区域中划线前后都要对接种环进行灼烧灭菌
【答案】A
【分析】平板划线法通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。
【详解】A、进行平板划线操作之前，以及每次划线前后都要对接种环进行灭菌，接种环的灭菌方法应是在酒精灯火焰上灼烧，不能用酒精消毒，A错误；
B、平板划线操作应在火焰旁进行，不能在火焰上进行，B正确；
C、由题图可知，5区域是最后一个区域，在5个区域中，只要有单个活细菌，通过培养即可获得所需菌落，故有可能在5区域获得所需要的菌落，其它区域也有可能得到所需要的菌落，C正确；
D、在1、2、3、4区域中划线前后都要对接种环进行灼烧灭菌，保证每次划线的菌种来自上一区域的末端，在1区域前灼烧是为了杀死杂菌，在5区域后灼烧灭菌，是防止接种环上的细菌污染环境，D正确。
故选A。
10. 栽培马铃薯为四倍体，野生马铃薯为二倍体。传统育种方法难以将野生马铃薯的优质基因转移到栽培马铃薯中。运用植物体细胞杂交技术，有望解决该问题。以下叙述错误的是（ ）
A. 因野生种与栽培种杂交的子代高度不育，存在生殖隔离
B. 用纤维素酶与果胶酶处理马铃薯细胞以便获得原生质体
C. 可以用灭活的病毒或PEG促进两种马铃薯的原生质体融合
D. 植物体细胞杂交技术能够打破生殖隔离，实现远源杂交育种
【答案】C
【分析】植物细胞融合的方法∶ 物理法（离心、振动、电刺激等）和化学法（聚乙二醇）;动物细胞融合的方法∶物理法（离心、振动、电刺激等）、化学法（聚乙二醇）和生物法（灭活的病毒）。
【详解】A、野生种马铃薯和栽培种马铃薯是两个不同的物种，存在生殖隔离，A正确；
B、制备马铃薯的原生质体，可用纤维素酶和果胶酶处理植物细胞，去除细胞壁，B正确；
C、可用聚乙二醇、电激等方法诱导原生质体融合，而灭活的病毒只能诱导动物细胞融合，C错误；
D、植物体细胞杂交技术能够打破生殖隔离，实现远源杂交育种，D正确。
故选C。
11. 植物细胞工程在农业、医药和工业等方面有着广泛应用。以下叙述错误的是（ ）
A. 用组织培养技术可以实现名贵兰花快速繁殖，且能保持亲本优良性状
B. 取草莓根尖成熟区细胞进行组织培养，可以实现作物脱毒并提高产量
C. 玉米可由花药离体培养、人工诱导染色体加倍，获得纯合二倍体
D. 离体条件下大规模培养红豆杉细胞，可获得紫杉醇的工厂化生产
【答案】B
【分析】植物细胞工程技术的应用：植物繁殖的新途径（微型繁殖、作物脱毒、人工种子）、作物新品种的培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产。
【详解】A、植物组织培养技术可以实现名贵兰花快速繁殖，同时植物组织培养属于无性繁殖，故能保持亲本优良性状，A正确；
B、茎尖分生区病毒数量少甚至没有，故取草莓茎尖分生区细胞进行组织培养，可以获得脱毒苗并提高产量，B错误；
C、可用玉米的花药进行离体培养获得单倍体，再用秋水仙素处理萌发的幼苗，人工诱导染色体加倍，可获得纯合二倍体，C正确；
D、离体条件下大规模培养红豆杉细胞（即植物细胞培养），可实现紫杉醇的工厂化生产，D正确。
故选B。
12. 以下有关动物细胞培养所需的条件，叙述错误的是（ ）
A. 进行动物细胞培养时常用胃蛋白酶分散细胞
B. 哺乳动物细胞培养的温度在36.5℃左右
C. 气体环境由95%空气和5%CO2组成，加入CO2用于维持培养液pH
D. 需定期更换培养液，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害
【答案】A
【分析】动物细胞培养的基本条件
（1）无菌、无毒的环境：对培养液和所有培养用具进行灭菌处理；定期更换培养液以清除代谢废物。
（2）营养：除糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等之外，通常还需要加入血清等一些天然成分。
（3）温度、pH和渗透压：（哺乳动物）最适温度为（36.5±0.5）℃，多数动物细胞生存的最适pH为7.2~7.4。
（4）气体环境：所需气体主要有O2和CO2，O2是细胞代谢所必需的，CO2的作用是维持培养液的pH。
【详解】A、进行动物细胞培养时，常用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理动物组织，将动物组织分散成单个细胞，A错误；
B、哺乳动物细胞培养的温度多以（36.5±0.5）℃为宜，B正确；
C、动物细胞培养的气体环境为95%空气（其中的O2是细胞代谢所必需的）加5%CO2，CO2的作用是维持培养液的pH，C正确；
D、动物细胞培养时需定期更换培养液，以清除代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害，D正确。
故选A。
13. 某夫妇中妻子患线粒体基因遗传病，丈夫正常。他们用正常女性捐献的卵母细胞，通过“三亲婴儿”的技术，生下了正常的孩子，其培育过程如下。据图分析，以下叙述错误的是（ ）
A. 若这对夫妇正常生育，孩子患该病概率是100%
B. 图中甲为患病妻子，乙为卵母细胞捐献者
C. 培育过程运用了核移植技术和胚胎移植技术
D. 三亲婴儿的染色体基因全部来自于这对夫妇
【答案】B
【分析】由题干信息：夫妇中妻子患线粒体基因遗传病，丈夫正常，他们用正常女性捐献的卵母细胞，通过“三亲婴儿”的技术生下了正常的孩子可知，志愿者提供去核的卵母细胞、妻子提供丽母细胞的细胞核，丈夫提供正常的精子。
【详解】A、夫妇中妻子患线粒体基因遗传病，属于细胞质遗传，若这对夫妇正常生育，孩子患该病概率是100%，A正确；
B、由图示可知，图中乙提供细胞核，为患病妻子，甲提供去核的卵母细胞，为卵母细胞捐献者，B错误；
C、由图示可知，培育过程运用了核移植技术和胚胎移植技术，C正确；
D、三亲婴儿的染色体基因是由精子和卵细胞的细胞核融合而来，全部来自于这对夫妇，D正确。
故选B。
14. 某生物活动小组为探究当地农田土壤中分解尿素的细菌的数量，进行了取样、系列梯度稀释、涂布平板、培养、计数等步骤，实验操作过程如下，下列说法不正确的是（ ）
A. 图中接种的培养基是以尿素为唯一氮源的固体培养基，能生长的微生物可能不能合成脲酶
B. 若每支试管稀释10倍，则图中a的数值应为2.7，5号试管共稀释了 106倍
C. 图中左上角培养基菌落连成一片，可能是涂布不均匀造成的
D. 若仅以4号试管接种培养基计数，5g该土壤中含分解尿素菌的估算数目是1.4×108个
【答案】D
【分析】土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
（1）分离原理：
①土壤中的细菌之所以能分解尿素，是因为它们能合成脲酶。
②配制以尿素为唯一氮源的选择培养基，能够生长的细菌就是能分解尿素的细菌。
（2）鉴定原理
分解尿素的细菌合成的脲酶可以将尿素分解为氨，氨会使培养基的碱性增强，在培养基中加入酚红指示剂培养细菌，若指示剂变红，则可确定该细菌能分解尿素。
稀释涂布平板法除可以用于分离微生物外，还能用来统计样品中活菌的数目。当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个单菌落来源于样品稀释液中的一个活菌，通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多个活菌。
【详解】A、分离土壤中分解尿素的细菌时，应配制以尿素为唯一氮源的固体培养基，能生长的微生物可能不能合成脲酶，如固氮菌能利用氮源生存，但其不能合成脲酶，A正确；
B、若每支试管稀释10倍，则将0.3mL上清液与a mL无菌水混合稀释10倍，需要a的数值为2.7。5g土壤加入50mL无菌水中被稀释了10倍，则5号试管共稀释了106倍，B正确；
C、涂布不均匀会造成的培养基中菌落分布不均匀，可能会造成菌落连成一片，C正确；
D、使用稀释涂布平板法进行计数的计算方法为：每克样品中的菌落数=（C/V）×M，其中C表示某一稀释度的平板上生长的平均菌落数，V表示涂布平板时稀释液的体积，M表示稀释倍数。若仅以4号试管接种培养基计数，5g该土壤中含有分解尿素的细菌的估算数目=（275+285+280）÷3÷0.2×105×5=7×108个，D错误。
故选D。
15. 自然情况下，牛的生育率很低，畜牧业生产上可通过下图两种途径实现良种牛的快速大量繁殖。下列相关叙述错误的是（ ）
A. 图中的激素处理是应用外源促性腺激素促使雌性牛超数排卵
B. 途径1受精前，需将采集到的卵母细胞在体外培养到MⅡ期
C. 途径2进行胚胎移植前，不要对供体和受体进行免疫检查
D. 途径1和途径2过程中都有胚胎的形成，均为有性生殖
【答案】D
【分析】试管动物技术是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精，并通过培养发育为早期胚胎后，再经移植进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑葚胚或囊胚，对囊胚阶段的胚胎进行分割时要注意将内细胞团等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。
【详解】A、图中的激素处理是应用外源促性腺激素促使雌性牛超数排卵，从而为获得更多的胚胎做准备，A正确；
B、途径1受精前，需将采集到的卵母细胞在体外培养到MⅡ中期，因为此时的卵母细胞能接受获能的精子完成受精过程，B正确；
C、途径2进行胚胎移植前，需要对供体和受体进行同期发情处理，不需要做免疫检查，因为受体子宫对移入的胚胎基本不发生免疫排斥反应，C正确；
D、途径1获得试管牛的技术流程中包括体外受精、体外胚胎培养和胚胎移植等技术，属于有性生殖；途径2获得是试管牛是通过核移植技术获得的，为无性生殖，D错误。
故选D。
16. 下列关于基因表达载体的说法，不正确的是（ ）
A. 基因表达载体的构建是基因工程的核心步骤
B. 终止子位于目的基因的下游，能够终止翻译过程
C. 基因表达载体包含启动子、目的基因、终止子、标记基因等
D. 不同的目的基因所需的启动子不一定相同
【答案】B
【分析】基因表达载体的构建：（1）目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在并且可以遗传给下一代并表达和发挥作用。（2）基因表达载体的组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因+复制原点。
【详解】A、基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建，A正确；
BC、基因表达载体包含启动子、目的基因、终止子、标记基因和复制原点等，终止子位于目的基因的下游，能够终止转录过程，B错误，C正确；
D、启动子具有组织特异性，不同的目的基因所需的启动子不一定相同，D正确。
故选B。
17. 下图是 4 种限制酶识别序列及其酶切位点，下列叙述错误的是（ ）
A. 不同类型的限制酶切割后，有的产生黏性末端，有的产生平末端
B. 不同类型的限制酶切割后可能产生相同的黏性末端
C. 用酶1和酶2分别切割目的基因和质粒，连接形成重组 DNA 分子后，重组 DNA 分子不能被酶2识别
D. 用酶3和酶4分别切割目的基因和质粒后，其产物经T4DNA连接酶催化能连接形成重组DNA 分子
【答案】C
【分析】限制性核酸内切酶（限制酶）；
（1）来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的；
（2）功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性；
（3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。
题图分析：酶1和酶2切割会形成黏性末端，并且形成的末端序列相同；酶3和酶4切割会形成平末端。
【详解】A、结合图示可知，不同类型的限制酶切割后，有的产生黏性末端（酶1和酶2），有的产生平末端（酶3和酶4），A正确；
B、不同类型的限制酶切割后可能产生相同的黏性末端，如图中的酶1和酶2，B正确；
C、用酶1和酶2分别切割目的基因和质粒，形成的末端序列相同，连接形成重组DNA分子后，重组DNA分子仍能被酶2识别，C错误；
D、用酶3和酶4分别切割目的基因和质粒后，产生的是平末端，而T4DNA连接酶能将平末端连接起来，即用酶3和酶4切割目的基因和质粒形成的产物经T4DNA连接酶催化可以连接形成重组DNA分子，D正确。
故选C。
18. 下图为利用PCR 技术扩增特定DNA片段的部分示意图，图中引物为单链DNA片段，它是子链合成延伸的基础。下列有关描述错误的是（ ）
A. 利用PCR技术扩增目的基因时变性不需要解旋酶
B. 引物是子链合成延伸基础，子链沿着模板链的3'→5'方向延伸
C. 在第三轮循环产物中才开始出现两条脱氧核苷酸链等长的 DNA片段且占 1/4
D. 从理论上推测，第四轮循环产物中只含有引物A的DNA片段所占的比例为15/16
【答案】D
【分析】PCR反应需要的条件
PCR扩增的过程
（1）变形：加热超过90℃时，双链DNA解旋为单链。
（2）复性：当温度下降到50℃左右时，两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合。
（3）延伸：当温度上升到72℃左右时，溶液中的4种脱氧核苷酸在耐高温的DNA聚合酶的作用下，通过碱基互补配对原则合成新的DNA链。
【详解】A、PCR扩增时，当加热超过90℃时，双链DNA解旋为单链，因此不需要解旋酶，A正确；
B、PCR扩增时需要引物和单链DNA结合，引物是子链延伸的基础。DNA聚合酶能够从引物的3，端开始连接脱氧核苷酸，因此子链沿着模板链的3，→5，方向延伸，B正确；
C、引物A或B结合的单链DNA记作长链，引物A或B合成的子链记作中链，以中链为模板合成的子链记作短链，则第一次循环结束后生成2个DNA，其两条链均为长中；第二次循环结束后生成4个DNA，其中2个DNA的两条链为长中， 2个DNA的两条链为短中；第三次循环结束后生成8个DNA，其中2个DNA的两条链为长中，4个DNA的两条链为短中，2个DNA的两条链为短短，这两条脱氧核苷酸链等长，因此在第3次循环产物中才开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段，该DNA片段占1/4，C正确；
D、从理论上推测，第四轮循环产物有16个DNA分子，只含有引物A的DNA片段是与其中一个模板链结合形成的DNA，因此第四轮循环产物中只含有引物A的DNA片段所占的比例为1/16，D错误。
故选D。
第Ⅱ卷（非选择题 共64分）
二、非选择题（本题共4小题，共64分。）
19. 番茄潜叶蛾起源于南美洲的秘鲁，是一种世界检疫性入侵害虫， 目前已经扩散到全球100多个国家，主要危害茄科植物，尤其嗜食番茄，严重威胁全球番茄产业。探究番茄潜叶蛾的有效防治方法，对番茄等作物的种植具有重要意义。请回答下列问题：
（1）番茄潜叶蛾入侵初期其数量往往呈现“J”形增长，主要原因有_____。
（2）杂食性蜂是番茄潜叶蛾的天敌，对番茄潜叶蛾卵的取食量大，且杂食性蜂的取食特点使其在猎物匮乏时仍能在番茄植株上可依赖番茄植株存活，目前已成功用于防治番茄潜叶蛾。杂食性蜂和番茄潜叶蛾的种间关系为_____；在番茄潜叶蛾虫害发生_____（填“前”或“后”）期释放杂食性蜂防治效果较好；在番茄作物周边种植金盏菊有利于保持杂食性蜂的种群数量且降低其对番茄的危害，原因可能是_____。
（3）以番茄长势和番茄潜叶蛾发生程度基本一致的3个大棚分别记为大棚1、大棚2、大棚3，作为3 次重复。将4种不同颜色的诱蛾器放置在大棚内的相同位置，调查统计每种颜色诱蛾器的诱捕数量，结果如下图所示：
据图分析，_____色诱蛾器的诱捕效果最好，.理由是_____。
（4）由于使用杀虫剂防治见效快、效果好，且较为经济，因此这是目前控制番茄潜叶蛾的主要手段。但是目前人们越来越倾向于利用生物关系抑制虫害的生物防治，其优点是_____。（答出两点）
【答案】（1）食物和空间条件充裕、气候适宜、没有天敌等
（2）①. 种间竞争和捕食 ②. 前 ③. 杂食性蜂更喜捕食金盏菊
（3）①. 蓝 ②. 三个大棚中，蓝色诱蛾器的诱捕数量均最多
（4）对环境无污染；效果好且持久；避免害虫抗药性增强
【分析】（1）番茄潜叶蛾入侵某地初期，由于食物和空间条件充裕、气候条件适宜、没有天敌等，因此其数量往往呈现J形增长。
（2）分析题干信息，杂食性蜂是番茄潜叶蛾的天敌，对番茄潜叶蛾卵的取食量大，说明二者之间的关系为捕食；杂食性蜂在猎物匮乏时仍能在番茄植株存活，说明杂食性峰也能食用番茄，和番茄潜叶蛾为竞争关系，由此可知杂食性蜂和番茄潜叶蛾的种间关系为种间竞争和捕食。
在番茄潜叶蛾虫害发生前期，其种群增长速率慢，种群数量少，因此此时释放杂食性蜂防治效果较好。在番茄作物周边种植金盏菊有利于保持杂食性蜂的种群数量且降低其对番茄的危害，其原因可能是杂食性蜂更喜捕食金盏菊，减少对番茄的危害。
（3）分析柱形图可知，三个大棚中，蓝色诱蛾器的诱捕数量均最多，说明蓝色诱捕器的诱捕效果最好。
（4）生物防治采用天然的生物控制剂或有益生物来控制病虫害。其最大的优点就是不污染环境，此外还有效果好且持久、避免害虫抗药性增强等优点。
20. 依据某生态系统构建碳循环模式图1，其中A、B、C为生态系统的组成成分。甲、乙、丙、丁是B中相互关联的四种生物，它们所同化的能量如表格所示。请据图回答：
（1）生态系统的结构包括_____和_____。
（2）图1的碳在无机环境和生物群落中的循环是以_____的形式进行的。
（3）蚯蚓的活动有利于农作物对无机盐离子的吸收，蚯蚓属于图1中生态系统成分中的_____（填A、B或C）。该成分在生态系统中的作用是_____。
（4）若仅依据同化的能量表格请写出由甲、乙、丙、丁所构成的食物链（网）：_____，该食物链（网）中的所有生物是否能构成一个生物群落并说明理由：_____。
【答案】（1）①. 生态系统的组成成分 ②. 营养结构（食物链和食物网）
（2）CO2 （3）①. C ②. 将动植物遗体残骸中的有机物分解成无机物（将有机物分解成无机物）
（4）
不能，该食物网中的生物只包含生产者和消费者，群落应是该生态系统的所有生物，还缺少分解者
【分析】分析题图可知，该图是生态系统碳循环模式图，根据双向箭头判断A为生产者，根据生产者指向消费者、生产者、消费者均指向分解者判断B是消费者，C是分解者。根据表格中四中生物同化的能量可以判断甲、乙是初级消费者，丙是次级消费者，丁是三级消费者。
（1）生态系统的结构包括生态系统的组成成分和营养结构（食物链和食物网）。
（2）绿色植物通过光合作用吸收大气中的CO2，同时绿色植物、动物的呼吸作用释放CO2到大气中，因此碳在无机环境与生物群落之间的主要循环形式为CO2。
（3）分析题图，根据双向箭头判断A为生产者，根据生产者指向消费者、生产者、消费者均指向分解者判断B是消费者，C是分解者。蚯蚓能将动植物遗体残骸中的有机物分解为无机物，是异养生物，在生态系统中属于分解者，即属于C。
（4）根据表格中四中生物同化的能量可以判断甲、乙是初级消费者，丙是次级消费者，丁是三
级消费者。所以构成的食物网为。该食物网中的生物只包含生产者和消费者，群落应该是生态系统所有生物，缺失分解者，因此该食物网中的所有生物不能构成一个生物群落。
21. 尼帕病毒是一种新型人兽共患病毒，能引起广泛的血管炎，感染者有发热、严重头痛、脑膜炎等症状，给人及动物带来严重危害。科研人员以猕猴为实验材料来生产抗尼帕病毒的单克隆抗体，实验流程如图所示，已知B淋巴细胞的基因型为AA、骨髓瘤细胞的基因型为BB，回答以下问题：
（1）图中应向猕猴注射________。
（2）骨髓瘤细胞的生长特点是________。两两融合后的融合细胞可能存在的基因型是________，筛选1需要使用特定的培养基，在该培养基上________的细胞都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞才能生长。
（3）筛选2的两个步骤是________。该过程中通常会使用有限稀释法，即将细胞悬液进行连续倍数稀释，最终调整密度为5个/mL；将稀释好的细胞悬液接种于96孔板，每孔加0.1mL；在显微镜下挑选含1个细胞的孔，补加培养液后继续培养获得细胞克隆。与植物组织培养相比，该培养液中需要添加的特殊成分是________。检测过程发现有些杂交瘤细胞不能分泌抗尼帕病毒抗体，原因是________________________。
【答案】（1）灭活的尼帕病毒
（2）①. 适宜条件下可以无限增殖 ②. AABB、AAAA、BBBB ③. 未融合的细胞和同种融合的细胞
（3）①. 克隆化培养和抗体检测 ②. 血清 ③. 形成杂交瘤细胞的B淋巴细胞种类多，不一定都能分泌抗尼帕病毒抗体
【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。
（1）分析题意，本流程目的是以猕猴为实验材料来生产抗尼帕病毒的单克隆抗体，由于抗原与抗体的结合具有特异性，故图中应向猕猴注射（灭活的）尼帕病毒，诱导其产生特异性免疫。
（2）骨髓瘤细胞的生长特点是在适宜条件下可以无限增殖；细胞的融合具有随机性，结合题干“已知B淋巴细胞的基因型为AA、骨髓瘤细胞的基因型为BB”可知，两两融合后的融合细胞可能存在的基因型是AABB、AAAA、BBBB；筛选1需要使用特定的培养基（通常是HAT培养基），在该培养基上未融合的细胞和同种融合的细胞都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞才能生长。
（3） 筛选2为第二次筛选，是对经选择培养的杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测（专一抗体检验阳性），经多次筛选，获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞；有限稀释法是克隆化培养动物细胞的一种方法：将细胞悬液进行连续倍数稀释，最终调整密度为5个/mL，将稀释好的细胞悬液接种于96孔板，每孔加0.1mL，24h后在显微镜下挑选只含一个细胞的孔，补加培养液后继续培养获得细胞克隆；为保证细胞正常生长，体外培养时与植物组织培养相比，该培养液中需要添加的特殊成分是血清；每种B细胞只能分泌一种抗体，而由于形成杂交瘤细胞的B淋巴细胞种类多，不一定都能分泌抗尼帕病毒抗体，故检测过程有些杂交瘤细胞不能分泌抗尼帕病毒抗体。
22. 人们追求的除草剂的施用效果是既能高效除草，又能确保作物安然无恙。可通过转基因技术将耐受或经修饰的能降解草甘膦的基因导入作物，使其耐除草剂。请据图回答下列问题：
（1）获取抗除草剂基因之后，可以通过PCR特异性快速扩增该基因，该反应需要在一定的_____中进行，需要提供模板、2种特异性引物、4种脱氧核苷酸和_____酶。常采用_____来鉴定 PCR的产物。
（2）为便于目的基因的表达和筛选，在基因表达载体的构建时应选用限制酶_____来切割质粒和目的基因。构建基因表达载体是基因工程的核心步骤，其目的是_____。
（3）启动子的作用是_____。在构建好的基因表达载体中的标记基因是_____，其作用是_____。
【答案】（1）①. 缓冲液 ②. 耐高温的DNA聚合（TaqDNA聚合）③. 琼脂糖凝胶电泳（电泳）法
（2）①. BamH I 和Sau3A I ②. 使目的基因在受体细胞中维持稳定并表达
（3）①. RNA聚合酶识别和结合的部位，驱动基因转录 ②. 四环素抗性基因 ③. 便于对重组DNA分子的筛选
【分析】PCR基本原理：PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解旋成单链，在DNA聚合酶的参与下，根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子拷贝。在实验中发现，DNA在高温时也可以发生变性解链，当温度降低后又可以复性成为双链。因此，通过温度变化控制DNA的变性和复性，加入设计引物，DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。
（1）PCR需要在一定的缓冲液中进行，维持pH，需要提供模板、2种特异性的引物，4种脱氧核苷酸和耐高温的DNA聚合酶（TaqDNA聚合），鉴定产物常用琼脂糖凝胶电泳（电泳）法。
（2）根据图中箭头可知，目的基因应位于启动子和终止子之间，所以不能用Bcl Ⅰ进行切割，为了防止目的基因和运载体的反向连接，不采用同种限制酶，即不用图中的Hind Ⅲ，因此应选用限制酶BamH I和Sau3A I切割质粒和含目的基因的DNA片段。构建基因表达载体的目的是使目的基因在受体细胞中维持稳定并表达。
（3）启动子位于基因的上游，是RNA聚合酶识别和结合的部位，驱动基因转录。使用BamH I切割质粒，将青霉素抗性基因破坏，所以标记基因是四环素抗性基因，抗性基因的作用是便于对重组DNA分子的筛选。条件
在DNA复制中的作用
DNA母链
提供DNA复制模板
4种脱氧核苷酸
合成DNA子链的原料
（耐高温的）DNA聚合酶
催化合成DNA子链
引物
使DNA聚合酶能够从引物的3，端开始连接脱氧核苷酸
缓冲液（含Mg2+）
真核细胞和细菌的DNA聚合酶都需要Mg2+激活
温度
控制温度可以使DNA复制在体外反复进行
甲
乙
丙
丁
同化的能量KJ·m-2·a-1
5000
3000
600
120
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