四川省内江市2020届高三上学期第一次质量检测理综生物试题

四川省内江市2020届高三上期生物第一次质量检测

一、选择题

1.下列实验中，没有用到酸的是(  )

A. 观察细胞中DNA和RNA的分布 B. 测定胃蛋白酶的最适温度

C. 观察植物根尖细胞的有丝分裂 D. 绿叶中色素的提取和分离

【答案】D

【解析】

【分析】

观察DNA和RNA在细胞中的分布实验的原理是甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同，其中甲基绿能将DNA染成绿色，吡罗红能将RNA染成红色；胃蛋白酶在酸性条件下才具有生物学活性，测定胃蛋白酶催化蛋白质水解的最适温度需要在酸性条件下进行；观察植物根尖细胞的有丝分裂实验的步骤是解离、漂洗、染色、制片；叶绿体色素溶于有机溶剂而不溶于水。

【详解】A、观察DNA和RNA在细胞中的分布实验中，要使用8%的盐酸处理，使细胞失去活性，并使染色体中的DNA与蛋白质分离，便于DNA与染色剂的结合，A错误；

B、胃蛋白酶在酸性条件下才具有生物学活性，测定胃蛋白酶催化蛋白质水解的最适温度需要在酸性条件下进行，B错误；

C、观察植物根尖细胞的有丝分裂实验的距离步骤，需要用酒精和盐酸作为解离液，C错误；

D、绿叶中色素的提取和分离实验中，用到的试剂或物质有无水乙醇、碳酸钙、二氧化硅、层析液，但是没有用到酸，D正确。

故选D。

2.下列关于细胞生命现象的叙述错误的是

A. 细胞间信息交流大多与膜的结构和功能有关

B. 秋水仙素能抑制纺锤体的形成从而影响细胞分裂

C. 硅尘通过破坏溶酶体膜导致细胞坏死

D. 紫外线使膜蛋白变性导致细胞癌变

【答案】D

【解析】

细胞间信息交流大多与细胞膜上的糖蛋白有关，体现了细胞膜的信息交流功能，A项正确；秋水仙素能抑制纺锤体的形成，使染色体不能平均分配进两个子细胞，从而影响细胞分裂，B项正确；溶酶体内的水解酶不能水解硅尘，使溶酶体膜被破坏而导致细胞坏死，C项正确；细胞癌变的原因是原癌基因和抑癌基因的突变，D项错误。

3.下列对真核细胞中蛋白质及其合成过程的叙述，正确的是

A. 构成蛋白质的基本元素是C、H、O、N、P

B. 转录和翻译过程中碱基互补配对的方式是相同的

C. 密码的简并可在一定程度上提高蛋白质的合成速率

D. 遗传信息从碱基序列到氨基酸序列的传递中不会发生损失

【答案】C

【解析】

【分析】

基因控制蛋白质合成的过程包括转录和翻译两个阶段，转录是以DNA的一条链为模板合成RNA的过程，翻译是以mRNA为模板合成蛋白质的过程。

【详解】组成蛋白质的元素是C、H、O、N，有的含有P和S，A错误。转录时的碱基配对是：A—U、T—A、C—G、G—C，翻译时是mRNA与tRNA上的碱基配对：A—U、U—A、C—G、G—C，B错误。因为密码子的简并性，一种氨基酸可能对应有多个密码子，因此一种氨基酸可以由多种tRNA运载，这样可在一定程度上提高蛋白质的合成速率，C正确。基因中的非编码区以及内含子不能编码蛋白质，另外mRNA上终止密码子也不代表氨基酸，且终止密码子之后的碱基序列不能翻译，因此遗传信息从碱基序列到氨基酸序列的传递中会发生损失，D错误。

【点睛】密码子具有简并性是指一种氨基酸可以有几种密码子代表，密码子的简并性可以降低有害突变，使物种较为稳定。

4.如表为某患者血浆化验部分结果：据此分析，其体内最不可能发生的是（　　）

A. 会出现抽搐等症状 B. 神经细胞膜静息电位的绝对值增大

C. 胰岛促进肝细胞合成糖原 D. 此患者易产生渴感

【答案】A

【解析】

【分析】

1、静息时，K+外流，造成膜两侧的电位表现为内负外正；受刺激后，Na+内流，造成膜两侧的电位表现为内正外负。

2、部分无机盐离子的具体功能分析：

【详解】血液化验的结果血钙含量偏高，血钙低时才会出现抽搐症状，A错误；由于静息时，K+外流，造成膜两侧的电位表现为内负外正，若血液中K+浓度偏低，膜内外的浓度差加大，导致K+外流增加，会导致静息电位的绝对值增大，B正确； 胰岛素是唯一降低血糖的激素，胰岛素促进肝细胞合成糖原，从而降低血糖，C正确； 血液化验的结果血糖过高，细胞外液渗透压升高，产生渴觉，D正确。

【点睛】本题考查内环境的理化性质、无机盐离子的作用和神经细胞膜电位变化的相关知识，所以牢记相关基础知识是解答本题的关键。

5.种子萌发的过程中，在赤霉素的诱导下，胚乳的糊粉层中会大量合成α－淀粉酶，此过程会受到脱落酸的抑制。下列相关叙述正确的是(　　)

A. 在种子萌发的过程中这两种激素是拮抗关系

B. 赤霉素与生长素作用机理相同，可以互相代替

C. 赤霉素能够直接催化胚乳中淀粉的水解

D. 在保存种子的过程中应尽量降低脱落酸含量

【答案】A

【解析】

本题考查植物的激素调节，要求考生识记并理解各种植物激素的功能，能利用所学知识解读题干信息，判断出赤霉素能促进种子萌发，而脱落酸会抑制种子萌发，进而分析、判断各选项。

根据题意，种子萌发的过程中，在赤霉素的诱导下，胚乳的糊粉层中会大量合成α－淀粉酶，此过程会受到脱落酸的抑制，说明赤霉素能促进种子萌发，而脱落酸能抑制种子萌发，因此在种子萌发的过程中这两种激素是拮抗关系，A正确；赤霉素与生长素作用机理不同，两者不可以互相代替，B错误；从题意可知，赤霉素能诱导合成α－淀粉酶，α－淀粉酶直接催化胚乳中淀粉的水解，C错误；脱落酸能抑制种子萌发，因此在保存种子的过程中应尽量维持较高的脱落酸含量，D错误。

【点睛】易错知识点拨——不同植物激素之间的相互作用分析：

(1)果实与激素

(2)具有协同作用的激素

①促进生长的激素：生长素、赤霉素、细胞分裂素。

②延缓叶片衰老的激素：细胞分裂素和生长素。

(3)具有拮抗作用的激素

①器官脱落

②种子萌发

③叶片衰老：生长素、细胞分裂素抑制叶片衰老，脱落酸促进叶片衰老。

6.某农场引进一批羔羊,群内繁殖七代后开始出现“羔羊失调症”。病羊于出生数月后发病,表现为起立困难、行起不稳,甚至完全不能站立,此病在羊群中的总发病率为2.45%,同胞羔羊中的发病率为25%,病羊中雌雄比为101:103。下列对此病的分析不正确的是（    ）

A. 此病的致病基因很可能位于常染色体上

B. 此病很可能是隐性遗传病

C. 再次引进多只羔羊与本群羊交配,可有效降低发病率

D. 因为此病无法医治,羊群中的致病基因频率会迅速降为0

【答案】D

【解析】

【分析】

该病在雌雄中发病率相同，故控制该病的基因可能位于常染色体上，又因为后代中发病率较低，故可能为隐性遗传病。

【详解】该病在雌雄中发病率相同，故可能位于常染色体上，A正确；此病在羊群中的总发病率为2.45%，发病率较低，故可能是隐性遗传病，B正确；新引入的羊可能不携带致病基因，故引进多只羔羊与本群羊交配,可有效降低发病率，C正确；致病基因的频率不会降为0，因为杂合子表现正常，D错误。故选D。

二、非选择题

7.环境因素对两种植物光合作用影响如图所示。请回答下列问题：

(1)据图分析，植物1和植物2这两种植物呼吸作用较弱的是____。植物1和植物2两种植物更适合在林下种植的是____。 

(2)当光照强度为p时，植物2叶肉细胞中可以产生ATP的细胞器是______。当光照强度为q时，单位时间内植物2固定CO2的量为_____(用图中字母表示)。若光照强度突然由r变为q，则短时间内植物1叶肉细胞中C3的含量会增加，其原因是____。 

(3)如果图1环境温度对应于图2中的M，现适当提高温度，则图1中a、b的差值将会____(“增大”“不变”或“减小”)，而c的变化情况为________。

【答案】    (1). 植物2    (2). 植物2    (3). 线粒体和叶绿体    (4). b+c    (5). 光照强度减弱，植物1光反应产生的[H]和ATP减少，C3的还原速率减慢，而短时间C3的生成速率不变    (6). 减小    (7). 增大或减小

【解析】

【分析】

题目结合图示考查光合作用与呼吸作用的联系、叶绿体中相关物质含量的变化、坐标图中点的移动等知识，意在考查识图、析图及利用基本知识分析问题的能力。

【详解】(1)据图1分析，当光照强度为0时，纵坐标对应字母表示呼吸速率，即c、d分别表示植物2和植物1的呼吸速率，则植物2呼吸作用较弱。从图1中可以看出，植物2的光饱和点以及光补偿点都比植物1低，即植物2适合在光照强度较弱的环境中生长，因此更适合在林下种植的是植物2。

(2)当光照强度为p时，植物2的呼吸速率等于光合速率，即细胞同时进行呼吸作用和光合作用，此时叶肉细胞中可以产生ATP的细胞器有线粒体和叶绿体。单位时间内植物固定CO2的量表示实际光合速率，而实际光合速率=净光合速率+呼吸速率，当光照强度为q时，植物2的净光合速率为b，呼吸速率为c，故植物2实际光合速率为(b+c)。若光照强度突然由r变为q，即光照强度减弱，则植物1光反应产生的[H]和ATP减少，C3的还原速率减慢，而短时间内C3的生成速率不变，故短时间内植物1叶肉细胞中C3的含量会增加。

(3)图1中a、b分别为植物1和植物2的最大净光合速率。图2中，温度为M时两植物的净光合速率差值最大，若适当提高温度后，它们的差值将变小，故图1中a、b的差值将会减小。图2中的M是植物净光合速率最大时对应的温度，而净光合速率=实际光合速率-呼吸速率，故此温度不一定是呼吸作用的最适温度，若M低于植物2呼吸作用的最适温度，则适当提高温度，其呼吸作用可能增强，c可能增大;若M等于或高于植物2呼吸作用的最适温度，则适当提高温度，其呼吸作用减弱，c减小

【点睛】关键点：

图1中二氧化碳的吸收和释放表示的是净光合作用速率，植物释放二氧化碳则只进行呼吸作用或呼吸作用速率大于光合作用速率；曲线与X轴相交的点表示光合作用速率等于呼吸作用速率。

图2表示的是净光合作用与温度的关系。

8.某生物兴趣小组做了“探究NAA(萘乙酸)促进红薯插条生根的最适浓度”实验，实验记录如下，请回答：

(注：“+”表示生根，“-”表示不生根)

(1)用NAA处理红薯插条的方法有___法和__法。 

(2)据表分析，NAA促进红薯插条生根的最适浓度范围是____g·L-1，理由是____。 

(3)该实验还必须增设一组，其NAA浓度应为____g·L-1。 

(4)某兴趣小组同学还对红薯插条生根条数进行统计，实验结果绘制如图，据图可知：

①NAA促进红薯插条生根的最适浓度为__g·L-1。 

②_____________体现了NAA作用的两重性。

【答案】    (1). 浸泡    (2). 沾蘸    (3). 10-7~10-9    (4). 在该浓度范围内时，红薯生根所需时间最短    (5). 0    (6). 10-8    (7). 当NAA浓度为10-4g·L-1时，对红薯生根起抑制作用，浓度在10-5~10-12g·L-1对红薯生根起促进作用

【解析】

【分析】

题目以“探究NAA(萘乙酸)促进红薯插条生根的最适浓度”实验为依托考查对生长素作用两重性的理解、实验基本方法、实验结果分析等知识和能力。

【详解】(1)用NAA处理红薯插条的方法有浸泡法和沾蘸法，其中浸泡法要求溶液的浓度较低，沾蘸法要求溶液的浓度较高。

(2)据表分析可知，NAA浓度在10-7~10-9g·L-1范围内时，红薯生根所需时间最短(水培第2天就生根)，说明促进红薯插条生根的最适浓度范围是10-7~10-9g·L-1。

(3)表中各组NAA浓度均不为0，都是实验组，要探究NAA对插条生根的影响，该实验还必须增设NAA浓度为0g·L-1的对照组。

(4)①图中曲线表明，与对照组和各实验组相比，浓度为10-8g·L-1的NAA处理红薯插条生根数量最多，说明NAA促进红薯插条生根的最适浓度为10-8g·L-1。②图中曲线表明，浓度为10-4g·L-1的NAA处理红薯插条生根数量比对照组少，说明该浓度的NAA抑制红薯插条生根;浓度为10-5~10-12g·L-1的NAA处理红薯插条生根数量均比对照组多，说明该浓度范围的NAA都能促进红薯插条生根，综合分析表明，不同浓度的NAA对红薯插条生根的作用效果不同，体现了NAA作用的两重性。

【点睛】最适浓度：促进插条生根效果最好时的浓度；两重性：既表现促进有表现抑制的现象。

9.白洋淀是华北平原最大的浅水湖型湿地，具有丰富的动植物资源，对其进行合理的开发和利用尤为重要。请回答下列问题：

(1)白洋淀湿地生态系统的功能包括___________。该系统能为居民提供大量鲜活鱼虾，体现了生物多样性的____价值。 

(2)植食性鱼类属于该生态系统中的_____(填组成成分)，要调查鲤鱼的种群密度，通常采用_____法。 

(3)根据白洋淀湿地生态系统能量流动的特点，合理确定其载鱼量，从而保证渔产品的持续高产且资源不被破坏，体现了研究生态系统的能量流动可以_____。

(4)白洋淀水体中浮游动物主要以有机碎屑为食，由此推测，这类生物在生态系统及环境保护中的作用是______。

【答案】    (1). 能量流动、物质循环和信息传递    (2). 直接    (3). 初级消费者    (4). 标志重捕    (5). 合理地调整能量流动的关系，使能量持续高效地流向对人类最有益的部分    (6). 加速水体中物质循环，消除有机物污染

【解析】

【分析】

本题涉及种群密度的调查、生态系统的结构、功能等基本知识的识记和理解，属于辨识和理解层次的考查。

【详解】(1)生态系统的功能包括能量流动、物质循环和信息传递。渔产品给人们带来食物和经济效益，属于直接价值。

(2)鱼类为植食性动物，故属于生态系统的初级消费者。鲤鱼活动范围大，活动能力强，调查其种群密度应采用标志重捕法。

(3)合理确定载鱼量可使能量持续高效地流向对人类有益的部分。

(4)以有机碎屑为食物的动物分解有机物为无机物，归还到无机环境，加速了水体中物质循环，消除有机污染物。

【点睛】生态系统的主要功能是能量流动、物质循环和信息传递。

研究生态系统能量流动的意义：实现能量的多级利用，提高能量利用率；合理调整能量流动方向，使能量更多的流向对人类最有益的部分。

10.科研人员通过诱变得到2种伊红眼果蝇的突变体甲乙，为了研究伊红眼与红眼、白眼性状的关系，将突变体甲、乙分别与野生型（红眼纯合体）果蝇进行杂交，结果如下表所示。请回答下列问题：

（注：“+”表示红眼，“m”表示伊红眼）

（1）根据表中杂交结果分析，甲突变体的伊红眼属于___________性状，且控制伊红眼的基因位于常染色体上，判断理由是_______________________________________________。

（2）乙突变体的突变位点位于_______（填“常”或“X”）染色体上，判断理由是_____。

（3）科研人员进行“♀甲×♂乙”实验时发现F1果蝇全部表现为红眼。让F1中雌雄果蝇相互交配，发现在F2果蝇中红眼个体与伊红眼个体的数量比约为9∶7。则F2雌性果蝇中红眼个体所占比例为_______，F2雄果蝇中红眼个体所占比例为_______。

（4）假设控制红眼、伊红眼、白眼的基因均位于X染色体上，且互为等位基因。请从组别Ⅱ的F2果蝇以及白眼雄果蝇、白眼雌果蝇中选择材料，设计一次杂交实验来确定伊红眼与白眼的显隐性关系。（要求：写出杂交组合和预期结果）___________________________________________。

【答案】    (1). 隐性    (2). F2雌雄果蝇中均有伊红眼果蝇，伊红眼性状与性别无关    (3). X    (4). F1中雌果蝇的眼色与父本的相同，雄果蝇的眼色与母本的相同    (5). 3/4    (6). 3/8    (7). 杂交组合：F2中伊红眼雌果蝇×白眼雄果蝇
        预期结果：若子代果蝇全表现为伊红眼，则伊红眼对白眼为显性；若子代果蝇中既有伊红眼果蝇又有白眼果蝇，则伊红眼对白眼为隐性

【解析】

【分析】

分析表格：F2雌雄果蝇中均有伊红眼果蝇，伊红眼性状与性别无关，所以甲突变体的伊红眼属于隐性性状，且控制伊红眼的基因位于常染色体上。

【详解】（1）根据表中Ⅰ的杂交结果分析，甲与野生型个体杂交，F1中雌、雄果蝇的眼色都是野生型，判断出甲突变体的伊红眼属于隐性性状，根据F2雌雄果蝇中均有伊红眼果蝇，伊红眼性状与性别无关，判断出控制伊红眼的基因位于常染色体上。
（2）乙突变体与野生型个体杂交，F1中雌果蝇的眼色与父本的相同，雄果蝇的眼色与母本的相同，与性别有关，判断出乙突变体的突变位点位于X染色体上。
（3）设甲突变体的基因受A、a控制，乙突变体的基因受B、b控制，“♀甲×♂乙”实验时发现F1果蝇全部表现为红眼，让F1中雌雄果蝇相互交配，根据F2果蝇中红眼个体与伊红眼个体的数量比约为9∶7，推断出F1果蝇的基因型型为AaXBXb、AaXBY，只有A-XB-的个体才表现红眼，则F2雌性果蝇中红眼（A-XBX-）个体所占比例为3/4×1＝3/4，F2雄果蝇中既有红眼又有伊红眼，红眼个体（A-XBY）所占比例为3/4×1/2＝3/8。
（4）假设控制红眼、伊红眼、白眼的基因均位于X染色体上，且互为等位基因，若要确定伊红眼与白眼的显隐性关系，可选杂交组合：F2中伊红眼雌果蝇×白眼雄果蝇，若子代果蝇全表现为伊红眼，则伊红眼对白眼为显性；若子代果蝇中既有伊红眼果蝇又有白眼果蝇，则伊红眼对白眼为隐性。

【点睛】易错点：判断基因在染色体上的位置时，可以采用正反交的方式，若结果一致为常染色体的遗传，结果不一致为伴性遗传，选用隐性纯合的母本，显性性状的父本进行反交即可。

11.大肠杆菌是人和许多动物肠道中最主要且数量最多的一类细菌，含有2000种以上的蛋白质；大肠杆菌的数量是检测自来水是否受粪便污染的最直接的指标。

回答下列问题：

(1)利用凝胶色谱法分离提取到的部分大肠杆菌蛋白质时，等样品完全进入凝胶层后，加入pH为7.0、浓度为20mmOl/L的________到适当高度进行洗脱，结果甲蛋白质先洗脱出来，乙蛋白质后洗脱出来，则相对分子质量较大的是______________蛋白质。

(2)通过滤膜法可以测定自来水中大肠杆菌的数目：一定体积的自来水样过滤后，将滤 膜放在伊红-美蓝培养基（主要成分包括：蛋白胨、NaCl、琼脂、乳糖、伊红和美蓝水溶液）上培养，大肠杆菌的代谢产物能与伊红-美蓝反应，使菌落呈黑色。根据培养基上菌落的数目，计算出大肠杆菌的数量。

①伊红-美蓝培养基属于_____(填“选择”或“鉴别”)培养基，蛋白胨作用有_____(答出两点即可）。

②培养大肠杆菌时，在接种前通常需要检测固体培养基是否被污染，检测方法是______。

③用滤膜法进行测定时，滤膜的孔径应 _______(填“大于”或“小于”）大肠杆菌。滤膜法是根据培养基上菌落的数目来推测样品中的活菌数，其原理是___。

【答案】    (1). 磷酸缓冲液    (2). 甲    (3). 鉴别    (4). 提供碳源、氮源、维生素    (5). 将未接种的培养基在适宜的条件下放置一段时间,观察培养基上是否有菌落出现    (6). 小于    (7). (当样品中细菌浓度低时,)培养基表面生长的一个菌落来源于样品中的个活菌

【解析】

【分析】

1、凝胶色谱法的原理是:小分子蛋白质容易进入凝胶内部的通道,路程较长、移动速度较慢,后被洗脱出来:而分子质量较大的蛋白质无法进入凝胶内部的通道,路程较长、移动速度较快,先被洗脱出来。

2、大肠杆菌的代谢产物能与伊红-美蓝发生特定的颜色反应,使菌落呈黑色,故可用含有伊红-美蓝的鉴别培养基鉴别大肠杆菌。

3、滤膜法测定活菌数目的原理：当样品中细菌浓度低时,培养基表面生长的一个菌落来源于样品中的一个活菌。

【详解】(1)凝胶色谱法的原理是:小分子蛋白质容易进入凝胶内部的通道,路程较长、移动速度较慢,后被洗脱出来:而分子质量较大的蛋白质无法进入凝胶内部的通道,路程较长、移动速度较快,先被洗脱出来，则相对分子质量较大的是甲，所用洗脱液是磷酸缓冲液。

(2)①大肠杆菌的代谢产物能与伊红-美蓝发生特定的颜色反应,使菌落呈黑色,该培养基是伊红-美蓝培养基,因此属于鉴别培养基,蛋白陈是将肉、酪素或明胶用酸或蛋白酶水解后干燥而成,富含有机氮化合物,也含有一些维生素和糖类,因此添加在培养基中主要作为氮源,也可提供碳源和维生素；

②检测培养基是否被污染,需在接种前将空白培养基即未接种的培养基放在适宜的条件下放置一段时间,观察培养基上是否有菌落出现,若有菌落出现,则说明培养基被污染或灭菌不彻底,不能用于接种实践。

③滤膜法测定活菌数目的原理是,当样品中细菌浓度低时,培养基表面生长的一个菌落来源于样品中的一个活菌，滤膜的孔径应小于大肠杆菌。

【点睛】分析解答本题关键需要明确三个原理：一是凝胶色谱法的原理；二是解答大肠杆菌的原理；三是滤膜法测定活菌数目的原理。

12.如图表示转基因抗冻番茄的培育过程，含抗冻基因的DNA片段和质粒上的箭头表示相关限制酶的酶切位点，Ⅰ、Ⅱ表示相关结构或细胞。回答下列问题：

(1)图中构建重组质粒时，不能使用AluⅠ切割，原因是__________;为了避免目的基因和载体经酶切后产生的末端发生任意连接，应该选用____对含鱼抗冻蛋白质基因的DNA片段和质粒进行切割。 

(2)M抗生素抗性基因在Ⅰ中又称为___基因。①过程所用的DNA连接酶作用的化学键是___。 

(3)常采用农杆菌转化法将抗冻蛋白基因导入番茄细胞。将含有抗冻蛋白基因重组质粒转入农杆菌时，常用Ca2+处理农杆菌，其目的是______。用农杆菌感染番茄叶肉细胞时，应优先选用番茄受伤的叶片与含重组质粒的农杆菌共同培养，选用受伤叶片的理由是__________。 

(4)图中得到的胚状体经过人工薄膜包装可以制造出人工种子。与天然种子相比，人工种子具有的优点有______________(答出两点)。若从个体水平检测获得的转基因番茄植株有无抗严寒能力，可以采用的方法是____。

【答案】    (1). AluⅠ会破坏抗冻蛋白基因    (2). PstⅠ、SmaⅠ    (3). 标记    (4). 磷酸二酯键    (5). 使农杆菌成为感受态细胞(使农杆菌能吸收周围环境中的DNA分子)    (6). 受伤叶片伤口处的细胞会分泌大量酚类物质，可吸引农杆菌移向这些细胞    (7). 可以保持亲本的遗传特性、生产不受季节或气候的限制、生产所用时间短等    (8). 将转基因番茄植株栽种在寒冷环境(低温环境)中

【解析】

【分析】

题目考查基因工程操作的基本程序和植物细胞工程的有关知识，以考查对基本知识的识记和理解分析能力。

【详解】(1)由于题图中抗冻蛋白基因内部有AluⅠ的切割位点，用AluⅠ切割会破坏目的基因，故不能用AluⅠ切割含目的基因的DNA片段。在构建重组质粒时，如果含目的基因的DNA片段和载体用同一种限制酶切割，获得的末端相同，将会发生自身环化现象，应选用不同的限制酶对含目的基因的DNA片段和载体切割，以获得不同的末端，故应选用PstⅠ和SmaⅠ对含鱼抗冻蛋白基因的DNA片段、质粒进行切割。

(2)重组质粒上的抗性基因也称为标记基因。①过程所用的DNA连接酶的作用是恢复被限制酶切开了的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。

(3)用Ca2+处理农杆菌，可使其成为感受态细胞，以便吸收周围环境中的DNA分子。当植物体受到损伤时，伤口处的细胞会分泌大量的酚类物质，吸引农杆菌移向这些细胞，这时农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞的染色体DNA上。可根据农杆菌的这种特点将目的基因导入受体细胞中。

(4)胚状体是经植物组织培养获得的，植物组织培养可以保持优良品种的遗传特性。天然种子的生产会受到季节、气候和地域的限制，人工种子可以克服这些缺陷，生物需要生长数年后才能结出种子，而人工种子的生产只需要较短的时间即可完成。若以个体水平检测获得的转基因番茄植株有无抗严寒能力，可将转基因番茄植株栽种在寒冷环境中或低温环境中，若该植株能正常生长，说明其具有抗严寒能力

【点睛】基因表达载体的构建需注意的事项：选择的限制酶不能破坏目的基因，还要保留标记基因，最好切割后的目的基因和质粒两端的粘性末端不相同。