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【生物】吉林省吉林市吉化第一高级中学校2018-2019学年高二下学期3月月考试题 （解析版）
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吉林省吉林市吉化第一高级中学校2018-2019学年
高二下学期3月月考试题
一、选择题
1.下列叙述错误的是
A. 醋酸菌在无氧条件下利用乙醇产生醋酸
B. 乳酸菌在无氧条件下利用葡萄糖产生乳酸
C. 泡菜腌制利用了乳酸菌的乳酸发酵
D. 腐乳制作利用了毛霉等微生物的蛋白酶和脂肪酶
【答案】A
【解析】
【分析】
1、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。
2、参与腐乳制作的微生物主要是毛霉，其新陈代谢类型是异养需氧型。腐乳制作的原理：毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸。
3、泡菜制作过程中利用了乳酸菌无氧呼吸产生乳酸的原理。
【详解】醋酸菌属于需氧菌，在有氧、糖源不足的情况下，可将乙醇转变为乙醛，再将乙醛转变为醋酸，A错误；乳酸菌为厌氧菌，在无氧条件下可利用葡萄糖产生乳酸，B正确；泡菜腌制利用了乳酸菌的乳酸发酵，C正确；参与腐乳制作的微生物主要是毛霉，腐乳制作的原理是毛霉等微生物的蛋白酶和脂肪酶能将豆腐中的蛋白质和脂肪分解成易于吸收的小分子，D正确。
故选A。
2.下列关于果酒、果醋、腐乳制作的叙述,正确的是
A. 制作果酒时应反复冲洗葡萄以避免杂菌污染
B. 制作果醋时应适时通入空气以保证有关菌种正常代谢
C. 制作腐乳时酒精的含量过高时会加快腐乳的成熟
D. 三种发酵技术涉及的微生物均具有核膜包被的细胞核
【答案】B
【解析】
【分析】
果酒制作的菌种是酵母菌，酵母菌是兼性厌氧的真核生物；制作果醋的菌种是醋酸菌，醋酸菌是好氧菌，且是原核生物，无核膜包被的细胞核，腐乳制作的主要菌种是毛霉，毛霉是真核生物，酒精的含量会影响腐乳的品质，酒精含量低不足以抑制杂菌生长，豆腐易腐败且不易成形，酒精含量过高，会延长腐乳成熟的时间。
【详解】果酒制作过程中不能反复冲洗葡萄，以免葡萄皮上的菌种酵母菌大量丢失，A错误；醋酸菌是好氧菌，制作果醋时应适时通入空气以保证醋酸杆菌菌种正常代谢，B正确；腐乳制作时酒精的含量高于12%时会延长腐乳的成熟期，C错误；制作果醋时的醋酸杆菌是原核生物，不具有核膜包被的细胞核，D错误。
故选B。
3.下列关于果酒和果醋的制作原理、发酵过程的叙述中，错误的是
A. 果酒和果醋的发酵菌种不同，但代谢类型相同
B. 制作果酒和果醋时都应用体积分数为70%的酒精对发酵瓶消毒
C. 变酸果酒的表面观察到的菌膜可能是醋酸菌种群
D. 果酒和果醋的制作可用同一装置，但需控制不同发酵条件
【答案】A
【解析】
【分析】
一、果酒制作的原理：（1）利用的微生物是酵母菌，其异化作用类型是兼性厌氧型。（2）影响酒精发酵的主要环境条件有温度、氧气和pH。①酒精发酵是一般将温度控制在18～25℃范围内，在20℃时最适宜。②酒精发酵过程中，要保持缺氧、酸性环境。
二、果醋制作的原理：醋酸菌是—种好氧性细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动。变酸的酒的表面观察到的菌膜就是醋酸菌在液面大量繁殖而形成的。实验表明，醋酸菌对氧气的含量特别敏感，当进行深层发酵时，即使只是短时间中断通入氧气，也会引起醋酸菌死亡。当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。醋酸菌的最适生长温度为30℃～35℃。
【详解】果酒的发酵菌种是酵母菌，其代谢类型是异养兼性厌氧型；果醋的发酵菌种是醋酸菌，其代谢类型是异养需氧型，两者的代谢类型不同，A错误；发酵装置要清洗干净，并用70％的酒精消毒，防止杂菌污染，B正确；果酒在酿造过程中变酸是醋酸菌引起的，故变酸果酒的表面观察到的菌膜可能是醋酸菌种群，C正确；果酒和果醋的制作可用同一个装置，但根据上述分析可知，二者的发酵条件如是否密闭，发酵温度，时间等都有差异，D正确。
故选A。
4.以下是草莓酒制作的步骤.下列分析中正确的是
挑选草莓榨汁装瓶发酵放气.
A. 步骤(2)是对草莓进行灭菌处理
B. 步骤(5)为加入酵母菌液或含酵母菌的凝胶珠
C. 发酵过程中放气量先减少后增加
D. 利用溴麝香草酚蓝水溶液检测酒精的含量
【答案】B
【解析】
【分析】
果酒制作的操作过程：
（1）材料的选择与处理：选择新鲜的草莓，榨汁前先将草莓进行冲洗。
（2）灭菌：①榨汁机要清洗干净，并晾干。②发酵装置要清洗干净，并用70%的酒精消毒。
（3）榨汁：将冲洗并除去枝梗的草莓放入榨汁机榨取草莓汁。
（4）发酵：①将草莓汁装入发酵瓶，要留要大约1/3的空间，并封闭充气口。②制草莓酒的过程中，将温度严格控制在18℃～25℃，时间控制在10～12d左右，可通过出料口对发酵的情况进行及时的监测。
【详解】步骤（2）是对草莓进行冲洗，不能进行灭菌，否则会杀死草莓上的野生酵母菌，A错误；步骤（5）为加入酵母菌液或含酵母菌的凝胶珠，从而使发酵效果更好，B正确；酒精发酵过程中除了产生酒精，还会产生大量的二氧化碳，但随着发酵的进行，由于营养物质逐渐减少等原因，酵母菌酒精发酵的速率减慢，产生的二氧化碳也随之减少，因此发酵过程中放气量先增加后减少，C错误；是否产生CO2可以用溴麝香草酚蓝水溶液进行检测，现象由蓝变绿再变黄，利用酸性重铬酸钾溶液可检测酒精的含量，D错误。
故选B。
5. 在腐乳制作过程中，加盐和加酒所发挥的作用相同的是（ ）
A. 析出豆腐中的水分，使豆腐块变硬
B. 抑制微生物的生长，避免豆腐块腐败变质
C. 使腐乳具有独特的香味
D. 促进蛋白质水解成多肽和氨基酸
【答案】B
【解析】
腐乳制作过程中，加盐的目的是析出豆腐中的水分，使豆腐块变硬，同时抑制微生物的生长，避免豆腐块腐败变质；加酒的目的是抑制微生物的生长，同时使腐乳具有独特的香味；加香料的目的是调制腐乳的风味，也具有防腐杀菌的作用。
6.测定泡菜中亚硝酸盐含量的操作中，错误的是（ ）
A. 质量浓度为4mg/mL的对氨基苯磺酸溶液呈酸性
B. 对氨基苯磺酸溶液和N-1-萘基乙二胺盐酸盐溶液，应避光保存
C. 操作步骤为：配制溶液―制备标准显色液―制备样品处理液―比色
D. 制备样品处理液，加入氢氧化铝的目的是中和氢氧化钠
【答案】D
【解析】
【分析】
1、测定亚硝酸盐含量的原理：
在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料。将显色反应后的样品与已知浓度的标准液进行目测对比，可以大致估算出亚硝酸盐的含量。
2、亚硝酸盐含量的测定操作过程：
配制溶液―制备标准显色液―制备样品处理液―比色。
【详解】质量浓度为4mg/mL的对氨基苯磺酸溶液和N-1-萘基乙二胺盐酸盐溶液都呈酸性，要保证其稳定性，应低温避光保存，AB正确；测定亚硝酸盐的操作步骤为：配制溶液―制备标准显色液―制备样品处理液―比色，C正确；制备样品处理液，加入氢氧化铝的目的是使滤液中色素脱色，使滤液变得无色透明，D错误。
故选D。
【点睛】本题为测定亚硝酸盐含量的实验，对于此类试题，需要考生识记参与泡菜制作的微生物及其代谢类型，掌握亚硝酸盐含量的测定操作过程，能结合所学的知识准确判断各选项，难度不大。
7.已知某种细菌以CO2为唯一碳源，下列相关叙述正确的是
A. 可推测该细菌的代谢类型为自养需氧型
B. 无机盐是该细菌不可缺少的营养物质
C. 培养过程中碳源同时充当该细菌的能源物质
D. 培养该细菌的培养基中无需添加氮源
【答案】B
【解析】
某种细菌以CO2为唯一碳源，可推测该细菌的代谢类型为自养型，但不确定是否为需氧型，A项错误；无机盐参与复杂有机物的组成，是该细菌不可缺少的营养物质，B项正确；CO2不能作为能源，C项错误；氮元素参与核酸、蛋白质的组成，培养该细菌的培养基中需要添加氮源，D项错误，
8.在微生物培养的过程中，需要通过选择培养或鉴别培养的方法来筛选出目标菌种，下列与之相关的叙述中不正确的是
A. 纤维素分解菌能够分解刚果红染料，从而使菌落周围出现透明圈
B. 尿素分解菌能够将尿素分解为氨，从而使酚红指示剂变红
C. 在培养基中加入抗生素能够筛选出具有相应抗性菌株
D. 在含有碳酸钙的培养基上生长的乳酸菌菌落周围会出现“溶钙圈”
【答案】A
【解析】
纤维素分解菌能够分解纤维素，在培养基中加入刚果红，可与培养基中的纤维素形成红色复合物，当纤维素被分解后，红色复合物不能形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，A错误；尿素分解菌能够将尿素分解为氨，使培养基呈碱性,从而通使酚红指示剂变红，B正确；在培养基中加入抗生素能够筛选出具有相应抗性的菌株，C正确；在含有碳酸钙的培养基上生长的乳酸菌菌落周围会出现“溶钙圈”，D正确。
9.下列有关细菌纯化培养的说法，不正确的是
A. 实验操作者接种前要用70%的酒精棉球擦手消毒
B. 每次划线后接种环要在酒精灯火焰上灼烧灭菌
C. 培养基上的单个菌落都是一个细菌细胞繁殖而来的
D. 菌液梯度稀释后用涂布法接种，得到单菌落便于计数
【答案】C
【解析】
【分析】
1．无菌技术的主要内容：
①对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒；
②将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌；
③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行；
④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。
2、微生物常见的接种方法：
①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。
②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
3、菌落是由单个细菌（或其他微生物）细胞或一堆同种细胞在适宜固体培养基表面或内部生长繁殖到一定程度，形成肉眼可见的子细胞群落。
【详解】实验操作者接种前要用70%的酒精棉球擦手消毒，A正确；每次划线后接种环要在酒精灯火焰上灼烧灭菌，以保证下一次划线的菌种来自上一次划线的末端，B正确；培养基上的单个菌落是一个细菌细胞或几个同种细菌细胞的克隆，C错误；在稀释度足够高的菌液中，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落，所以菌液梯度稀释后用涂布法接种，可得到单菌落便于计数，D正确。
故选C。
10. 下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述，其中错误的是
A. 用蒸馏水配制牛肉膏蛋白膝培养基，经高温、高压灭菌后倒平板
B. 取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1ml，分别涂布于各组平板上
C. 将实验组和对照组平板倒置，370C恒温培养24-48小时
D. 确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数
【答案】D
【解析】
检测土壤中细菌总数，用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板，取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1ml，分别涂布于各组平板上，将实验组和对照组平板倒置，37℃恒温培养24-48小时，在确定对照组无菌后，选择菌落数在30-300的一组平板为代表进行计数。所以D不对。
11.某研究小组从有机废水中分离微生物用于废水处理，下列叙述正确的是
A. 培养基倒平板后进行灭菌
B. 转换划线角度后需灼烧接种环再进行划线
C. 接种后的培养皿须放在光照培养箱中培养
D. 培养过程中每隔一周观察一次
【答案】B
【解析】
【分析】
制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是计算、称量、溶化、灭菌、倒平板。微生物接种的核心是防止杂菌的污染，保证培养物的纯度。在每次划线前后都要对接种环进行灭菌，接种环的灭菌方法应是在火焰上灼烧，接种时划线操作是在火焰旁边进行的；每一种细菌都有最适的生长温度，需要在恒温培养箱中进行培养。
【详解】培养基要先进行灭菌再倒平板，A错误；转换划线角度后要对接种环进行灼烧灭菌再进行划线，以保证下一次划线的菌种来自上一次划线的末端，B正确；有机废水中的微生物属于异养型生物，不能进行光合作用，培养不需要光照，接种后的培养皿应放置在恒温培养箱中进行培养，C错误；培养过程中观察的间隔时间不能太长，适宜条件下一般不超过24h，D错误。
故选B。
【点睛】本题考查微生物和培养的相关知识，此类试题需要考生注意的细节较多，如培养基的制备、灭菌的方法、接种方法的选择、结果的分析等，需要考生在平时的学习过程中注意积累，络结构，对选项作出准确的判断。
12.微生物培养中，要十分重视无菌操作。现代生物学实验中许多方面也要进行无菌操作，防止杂菌污染。请分析下列操作中错误的是
①煮沸消毒可以杀死微生物的营养细胞 ②接种操作要在酒精灯火焰附近进行③土壤浸出液稀释后不需灭菌 ④家庭制葡萄酒时要将容器和葡萄进行灭菌⑤培养基要进行高压蒸汽灭菌 ⑥加入培养基中的指示剂和染料不需要灭菌
A. ③④⑥ B. ③⑥ C. ④⑥ D. ①②⑤
【答案】C
【解析】
【分析】
微生物培养过程中，许多方面也要进行无菌操作，为防止杂菌污染，对实验器材和材料一般要消毒或灭菌，操作过程也要防止污染。而家庭制作葡萄酒时，酵母菌菌种由葡萄提供，所以葡萄不需要灭菌。培养基中的指示剂和染料都是先与其他成分混合后，一起进行灭菌。
【详解】①100℃煮沸5～6min可以杀死微生物细胞和一部分芽孢，①正确；②酒精灯火焰附近存在一个无菌区，为了无菌操作，接种操作要在酒精灯火焰附近进行，②正确；③土壤浸出液稀释后不需要灭菌，③正确；④家庭制作葡萄酒时起主要作用的是附着在葡萄皮上的野生型酵母菌，因此不能对葡萄进行灭菌，以免杀死酵母菌，④错误；⑤培养基的灭菌方法是高压蒸汽灭菌，⑤正确；⑥指示剂和染料混有微生物，为了防止杂菌污染，加入培养基中的指示剂和染料也需要灭菌，⑥错误。综上所述，C符合题意，ABD不符合题意。
故选C。
13.下表为某种培养基的配方，根据表格可以判断出
成分
含量
成分
含量
K2HPO4
2g
(NH4)2SO4
1.4g
MgSO4·7H2O
0.3g
CaCl2
0.3g
纤维素粉
20g
琼脂
20g
水
1000mL
pH
5.5
A. 此培养基可以用来筛选生产纤维素酶的菌种
B. 此培养基因原料来源广泛，可用于工业生产
C. 此培养基可以用来筛选自生固氮菌
D. 此培养基中含有微生物所必需的五类营养要素
【答案】A
【解析】
【分析】
选择培养基是根据某一种或某一类微生物的特殊营养要求或对一些物理、化学抗性而设计的培养基。利用这种培养基可以将所需要的微生物从混杂的微生物中分离出来。上述培养基中纤维素粉作为唯一的碳源，只有能合成纤维素酶的微生物可以利用纤维素作为碳源，故该培养基可用来筛选能够分解纤维素的微生物。该培养基中的氮源是(NH4)2SO4。
【详解】根据培养基中的成分以及上述分析可知，只有能够分解纤维素的微生物能在该培养基上生长，故此培养基可以用来筛选生产纤维素酶的菌种，A正确；此培养基中含有琼脂，为固体培养基，不适用于工业生产，B错误；筛选自生固氮菌应用不含氮源的培养基，而该培养基含有氮源，C错误；此培养基只含有碳源、氮源、水和无机盐共4类营养要素，D错误。
故选A。
14.利用农作物秸秆等纤维质原料生产的乙醇，经加工可制成燃料乙醇，从而减少了对石油资源的依赖，下图为生产燃料乙醇的简要流程，据图分析错误的一项是
A. 要得到微生物A，最好选择富含纤维素的土壤采集土样
B. 图中②过程常用的微生物B是酵母菌
C. 微生物A和微生物B可利用的碳源相同
D. 可用纤维素酶制剂代替微生物A起作用
【答案】C
【解析】
试题分析：根据图解可知，微生物A的碳源是纤维素，故要想获得微生物A最好选择富含纤维素的土壤采集，A项正确；图中②过程表示生产乙醇的过程，常用微生物是酵母菌，B项正确；微生物A所用碳源为纤维素，微生物B所用碳源为纤维素降解物，C项错误；微生物A之所以能利用纤维质原料是因为其含有纤维素酶，故可用纤维素酶制剂代替微生物A起作用，D项正确。
考点：本题考查生产乙醇的过程中的原料，微生物的种类等知识，意在考查考生能运用所学知识与观点，通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理，做出合理的判断的能力。
15.下表是对四种生物的能源、碳源、氮源、新陈代谢类型的描述，正确的一组是
硝化细菌
乳酸菌
根瘤菌
衣藻
A
能源
NH3
乳酸
N2
光能
B
碳源
CO2
糖类等
糖类等
CO2
C
氮源
NH3
N2
N2
NO3-
D
代谢类型
自养需氧型
异养厌氧型
自养需氧型
自养需氧型
A. A B. B C. C D. D
【答案】B
【解析】
【分析】
硝化细菌是化能合成型微生物，能利用氧化NH3释放的化学能进行化能合成作用合成有机物，属于自养需氧型生物；乳酸菌是厌氧型生物，其代谢类型为异养厌氧型；根瘤菌能固定N2，其代谢类型为异养需氧型；衣藻是光能自养型生物，其代谢类型为自养需氧型。
【详解】乳酸菌的代谢过程可产生乳酸，其不能利用乳酸作为能源物质，根瘤菌为异养型生物，能源物质是糖类等有机物，A错误；硝化细菌和衣藻为自养型生物，可利用CO2为碳源，乳酸菌和根瘤菌为异养生物，可以糖类等有机物为碳源，B正确；乳酸菌没有固氮能力，不能利用N2作为氮源，C错误；根据分析可知，根瘤菌的代谢类型为异养需氧型，D错误。
故选B。
16.蛋白酶洗衣粉容易洗去奶渍、血渍，可是不易洗去油渍，这体现了酶的
A. 高效性 B. 专一性 C. 需适宜的条件 D. 多样性
【答案】B
【解析】
利用酶的专一性原理，加酶洗衣粉加入的主要碱性蛋白酶 和 碱性脂肪酶，所以能洗去奶渍、血渍，可是不易洗去汗渍。
17.在“探索果胶酶的用量”实验中，下列说法错误的是
A. 实验时可配制不同浓度的果胶酶溶液
B. 底物浓度一定时，酶用量越大，滤出果汁越多
C. 本实验应控制在适宜温度和pH条件下
D. 反应液pH必须相同
【答案】B
【解析】
【分析】
果胶酶包括多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶和果胶酯酶等；探究果胶酶的用量时，实验的自变量是果胶酶的用量，因变量是滤出果汁的体积和果汁的澄清度，无关变量包括温度、pH等。
【详解】由于要探究果胶酶的最适用量，故可配制不同浓度的果胶酶溶液，并在各组中加入等量的该溶液，A正确；在一定的范围内，随着酶用量的增大，酶促反应速率加快，滤出的果汁增多，当酶用量达到一定值，反应物的浓度成为限制因素，由于反应物的量一定，再增加酶的用量，反应速率也不再增大，滤出果汁不再增多，B错误；该实验中果胶酶的用量为自变量，温度、pH值为无关变量，故各组中的温度、pH值应相同而且处于适宜状态，C、D正确；
故选B。
18.如图表示某研究小组探究果胶酶的用量的实验结果。有关说法不正确的是
A. 在ab段限制反应速率的主要因素是酶的用量
B. 在ac段增加反应物浓度，可以明显加快反应速率
C. 在bc段限制反应速率的因素是温度、pH、反应物浓度等
D. 在该实验给定条件下，果胶酶的最佳用量是b点对应的值
【答案】B
【解析】
【分析】
由图可知，在ab段随着酶的用量增加，反应速率加快，说明该阶段的反应速率是酶的用量。超过b点之后，酶的用量再增加，反应速率不再发生变化，此时的限制因素是反应物的浓度、温度等无关变量。
【详解】在ab段随着酶的用量增加，反应速率加快，限制反应速率的主要因素是酶的用量，A正确；在ab段，限制反应速率的因素是酶的用量，增加反应物浓度，反应速率不会明显加快；在bc段，限制反应速率的因素有反应物的浓度，此时增加反应物的浓度，反应速率会加快，B错误；根据上述分析可知，在bc段，限制反应速率的因素有反应物的浓度、温度、pH等，C正确；在该实验给定条件下，果胶酶的最佳用量是b点对应的值，此时的果胶酶用量最少，反应速率最快，D正确。
故选B。
19.为了探究一种新型碱性纤维素酶的去污效能，研究性学习小组进行了相关实验，结果如下图。由图中实验结果能直接得出的结论是
A. 碱性纤维素酶对污布类型2的去污力最强
B. 不同类型洗衣粉影响碱性纤维素酶的去污力
C. 碱性纤维素酶对污布类型2、3的去污力不同
D. 加大酶用量可以显著提高洗衣粉的去污力
【答案】C
【解析】
20 U/L的碱性纤维素酶处理对污布类型1，去污力为60%，30 U/L的碱性纤维素酶处理污布类型2，去污力约为80%，则单位碱性纤维素酶对污布类型1去污力最强，A错误；由于污布类型不同，不能探究不同类型的洗衣粉对碱性蛋白酶的去污力的影响，B错误；对污布类型2、3而言，都是Y型洗衣粉，30%的酶用量，但去污力不同，说明碱性纤维素酶对污布类型2、3 的去污力不同，C正确；该实验没有针对同一类型的洗衣粉加大酶用量的探究，则不能判断加大酶用量是否提高洗衣粉的去污力，D错误。
【考点定位】碱性纤维素酶，实验分析。
【名师点睛】本题以碱性纤维素酶为背景考查实验分析，要求学生理解实验分析的两个基本原则：对照原则和单一变量原则。
20.下列关于“酵母细胞的固定化技术”实验的叙述，正确的是（ ）
A. 活化酵母时，将适量干酵母与蒸馏水混合并搅拌成糊状
B. 配制CaCl2 溶液时，需要边小火加热边搅拌
C. 将海藻酸钠溶液滴加到CaCl2 溶液时，凝胶珠成形后应即刻取出
D. 海藻酸钠溶液浓度过高时凝胶珠呈白色，过低时凝胶珠易呈蝌蚪状
【答案】A
【解析】
活化酵母时，将适量干酵母与蒸馏水混合，并搅拌成糊状，A正确；配制CaCl2溶液时，不需进行加热，B错误；CaCl2溶液使酵母细胞可以形成稳定的结构，固定在凝胶珠中，需要一段时间，时间不宜过短或过长，C错误；海藻酸钠溶液浓度过低时凝胶珠呈白色，过高时凝胶珠易呈蝌蚪状，D错误。
【考点定位】固定化酵母细胞。
【名师点睛】本题主要考查酵母细胞的固定化，要求学生理解酵母细胞固定化的过程以及异常情况。
二、非选择题
21.如图是泡菜的制作及测定亚硝酸盐含量的实验流程示意图,请据图回答下面的问题
（1）选用新鲜蔬菜做泡菜,原因是________________________ ．
（2）为了保证既无杂菌,又能使发酵菌发挥正常作用,泡菜所用盐水应____________ 再使用。
（3）在泡菜腌制过程中经常向坛口边缘的水槽中补充水分目的是提供________ 环境。
（4）测定亚硝酸盐含量的方法是________ ,在泡菜腌制过程中定期测定亚硝酸盐含量的目的是__________．因为在_________条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生_____反应后，与N—1—萘基乙二胺盐酸盐结合形成_______色染料。
（5）同样的材料和腌制条件,不同坛中各时期测得亚硝酸盐含量不同, 最可能的原因是___________________________不同。
（6）在制作腐乳、果醋、泡菜的过程中,需要氧气的是_____________________ ．
【答案】 (1). 亚硝酸盐含量低 (2). 先加热煮沸,然后冷却 (3). 无氧 (4). 比色法 (5). 把握取食的最佳时间 (6). 盐酸酸化 (7). 重氮化 (8). 玫瑰红 (9). 各坛中微生物的种类和数量 (10). 腐乳和果醋制作
【解析】
【分析】
制作泡菜时所使用的微生物是乳酸菌，代谢类型是异养厌氧型。泡菜中的亚硝酸盐的含量可以用比色法进行测定，原理是在盐酸酸化的条件下，亚硝酸盐和对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色的染料，将显色反应后的样品与已知浓度标准显色液目测比较，可以大致估算出泡菜中亚硝酸盐含量。
【详解】（1）新鲜的蔬菜亚硝酸盐的含量低，故制作泡菜时常选用新鲜蔬菜。
（2）盐水需要进行加热煮沸处理，其主要目的是杀灭杂菌等微生物，但要等到冷却后使用是为了保证乳酸菌等微生物的生命活动不受影响。
（3）向坛盖边沿的水槽中注满水，这一操作的目的是保证坛内的无氧环境。
（4）泡菜中的亚硝酸盐含量可以用比色法测定，即在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N—1—萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料。泡菜制作过程中亚硝酸盐的含量先增加后减少，在泡菜腌制过程中定期测定亚硝酸盐含量的目的是为了准确把握取食的最佳时间。
（5）同样的材料和腌制条件下，不同坛中所含有的微生物种类和数量可能不同，故各时期测得亚硝酸盐含量不同。
（6）腐乳制作过程所需要的毛霉属于需氧型，果醋制作所需要的醋酸菌属于需氧型，而泡菜制作所需要的乳酸菌为厌氧型，故在制作腐乳、果醋、泡菜的过程中,需要氧气的是腐乳和果醋制作。
【点睛】本题主要考查泡菜的制作过程以及亚硝酸盐含量的检测，意在考查考生对知识点的识记、理解和掌握程度，要求考生具有扎实的基础知识和一定的判断能力，能构建一定的知识网络。
22.下图为葡萄酒和果醋的制作流程图，请据图回答：
（1）图中①表示____________________ 过程。
（2）在冲洗葡萄的过程中，只需简单冲洗而不宜用清洁剂反复冲洗的目的是___________。
（3）要获得纯净的酵母菌菌种，可把葡萄园土壤的稀释液通过________法接种到固体培养基上。
（4）装置中排气口通过一个长而弯曲的胶管与瓶身相连，这样做的目的是：_________。
（5）制备果醋需要用到的微生物是_____，其与酵母菌在结构上最大的区别是__________。
（6）果酒制果醋的反应式为__________________________________________．
（7）①过程通常用________________________试剂检验酒精是否产生。
①②过程所需环境条件（除温度外）的主要区别是________________。在制作果醋过程中，为了提高醋酸菌的利用率可采用___________技术对其进行处理。
【答案】 (1). 酒精发酵 (2). 保留葡萄皮上的酵母菌 (3). 稀释涂布平板法 (4). 防止杂菌污染 (5). 醋酸杆菌 (6). 无以核膜为界限的细胞核 (7). C2H5OH+O2→CH3COOH+H2O (8). 酸性重铬酸钾溶液 (9). 是否需氧气 (10). 固定化细胞
【解析】
【分析】
据图分析：图中是果酒和果醋制作的实验流程，过程①为酒精发酵，过程②为醋酸发酵，酒精发酵后还可以进行果醋发酵。
【详解】（1）图中①过程为发酵产生酒精的过程，为酒精发酵过程。
（2）果酒制作过程中所需要的菌种来自葡萄上的野生型酵母菌，冲洗葡萄的目的是洗去浮尘，冲洗时不能反复冲洗，以防止葡萄上菌种的流失，保留葡萄皮上的酵母菌。
（3）葡萄园土壤中含有大量酵母菌生长繁殖，要获得纯净的酵母菌菌种，可把葡萄园土壤的稀释液通过稀释涂布平板法接种到固体培养基上。
（4）装置中排气口是为了排出发酵过程中产生的二氧化碳等气体，通过一个长而弯曲的胶管与瓶身相连，目的是防止杂菌污染。
（5）果醋制作的微生物是醋酸杆菌，醋酸杆菌为原核生物，酵母菌为真核生物，醋酸杆菌与酵母菌在结构上最大的区别是无以核膜为界限的细胞核。
（6）果酒制作果醋的过程是将酒精变为乙醛，再将乙醛变为醋酸，反应式为：C2H5OH+O2→CH3COOH+H2O。
（7）①过程为酒精发酵，产生的酒精可用酸性的重铬酸钾检测。①过程为酒精发酵，需在无氧条件下进行，②过程为醋酸发酵，需在有氧条件下进行，故①②过程所需环境条件（除温度外）的主要区别为是否需要氧气。在制作果醋过程中，为了提高醋酸菌的利用率可采用固定化细胞技术对其进行处理。
【点睛】本题结合果酒和果醋制作流程，考查果酒和果醋的制作，要求考生识记果酒和果醋制作的原理、参与果酒和果醋制作的微生物的特点、发酵装置及作用，能结合所学的知识答题。
23.幽门螺杆菌(Hp)感染是急慢性胃炎和消化性溃疡的主要致病因素。在患者体内采集样本并制成菌液后，进行分离培养。实验基本步骤如下：
配制培养基―→灭菌、倒平板―→X―→培养―→观察
请回答：
(1)在配制培养基时，要加入尿素和酚红指示剂，这是因为Hp含有___________，它能以尿素作为氮源；若有Hp，则菌落周围会出现______色环带。
(2)下列对尿素溶液进行灭菌的最适方法是___________灭菌。
A．高压蒸汽 B．紫外灯照射 C．70%酒精浸泡 D．过滤
(3)步骤X表示________。在无菌条件下操作时，先将菌液稀释，然后将菌液__________到培养基平面上。菌液稀释的目的是获得______个菌落。
(4)在培养时，需将培养皿倒置并放在____中。若不倒置培养，将导致________。
(5)临床上用14C呼气试验检测人体是否感染Hp，其基本原理是Hp能将14C标记的________分解为NH3和14CO2。
【答案】 (1). 脲酶 (2). 红 (3). A (4). 接种 (5). 涂布 (6). 单 (7). 恒温培养箱 (8). 无法形成单菌落 (9). 尿素
【解析】
【分析】
由于细菌分解尿素的过程中合成脲酶，脲酶将尿素分解成氨，会使培养基碱性增强，pH升高，所以可以用检测pH变化的方法来判断尿素是否被分解，可在培养基中加入酚红指示剂，尿素被分解后产生氨，pH升高，指示剂变红。微生物接种的方法有稀释涂布平板法和平板划线法。稀释涂布平板法一般是将稀释液涂布到固体培养基上。
【详解】（1）幽门螺杆菌含有脲酶，能分解尿素为菌体提供氮源，因此在配制培养基时要加入尿素；加入酚红指示剂的目的是检验是否有Hp存在，若有Hp存在会分解尿素，培养基pH会升高，酚红指示剂将变红，则菌落周围会出现红色环带。
（2）由于尿素在高温下会分解，不能使用高压蒸汽灭菌法灭菌，A错误；紫外灯照射只能起到消毒作用，B错误；70%酒精浸泡只能起到消毒作用，且与尿素溶液混合成了混合液，C错误；由于尿素加热会分解，对尿素溶液进行灭菌最好用G6玻璃沙漏斗过滤，D正确。
故选D。
（3）微生物的分离和培养步骤是：配制培养基→灭菌、倒平板→接种→培养，故步骤X表示接种。接种时先将菌液稀释，目的是获得单一菌落，然后再涂布到培养基平面上。
（4）在培养时，需将培养皿倒置并放在恒温培养箱中。若不倒置培养，将导致无法形成单菌落。
（5）如果人体感染了Hp，Hp能将尿素分解为NH3和CO2，故而用14C标记尿素中的C，可通过呼吸产物来判断是否感染Hp。
【点睛】本题考查微生物的分离与培养知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构的能力。
24.根据各类微生物的形态结构特点和新陈代谢类型，利用选择培养基和鉴别培养基，结合显微镜检，以及菌落特征，可以把混杂在一起的大肠杆菌、硝化细菌、乳酸菌、酵母菌、金黄色葡萄球菌、圆褐固氮菌分离开来。下面是分离筛选的方法、步骤，请根据各个步骤的条件，填写空格中的内容。
首先配制一系列不同性质的固体培养基，然后进行高温灭菌。再将上述微生物的混合液分别接种到各种培养基上培养。
(1)用无氮培养基可筛选出________。
(2)用不含有机碳源的选择培养基可筛选出________菌。
(3)酵母菌的筛选需要在常规培养基中另外加入_____________
(4)用加了较高浓度NaCl的培养基可选择出__________，或者根据菌落的颜色呈现________色，将其挑取单独培养。
(5)利用伊红和美蓝培养基培养混合菌，菌落呈____色并带有金属光泽的是_______菌，挑取该菌落单独培养。结合显微镜检和进一步用伊红和美蓝培养基鉴别培养来确定。
(6)在无氧环境下培养混合菌，_________可以生长，加入一定浓度的乳酸，使培养基pH充分降低，可抑制____________的生长，利用菌落特征，结合显微镜检，选取生长优势的菌落，即可分离出________。
【答案】 (1). 圆褐固氮菌 (2). 硝化细菌 (3). 某种抗生素，如青霉素 (4). 金黄色葡萄球菌 (5). 金黄 (6). 黑 (7). 大肠杆菌 (8). 乳酸菌和酵母菌 (9). 酵母菌 (10). 乳酸菌
【解析】
【分析】
1、实验室中目的菌株的筛选的原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度、pH等），同时抑制或阻止其他微生物生长。如培养基选择分解尿素的微生物的原理为：培养基的氮源为尿素，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作为氮源。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生长发育繁殖，而受到抑制，所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物。同理：圆褐固氮菌为自生固氮菌，可用不含氮源的培养基进行筛选。硝化细菌为自养型，可用不含碳源的培养基进行筛选。乳酸菌的耐酸性较强，金黄色葡萄球菌的耐盐性较强，可用相应的培养基对其筛选。
2、也可以利用鉴别培养基对不同菌种根据菌落特征进行区分，并进一步分离纯化。如在含伊红-美蓝的培养基上出现的黑色菌落为大肠杆菌。
【详解】（1）在无氮培养基上只有能自生固氮的微生物才能生长，所以利用无氮培养基可筛选出能够固氮的圆褐固氮菌。
（2）在不含有机碳源的培养基上只有自养微生物才能生长，如硝化细菌是化能自养型，所以利用不含有机碳源的选择培养基可筛选出硝化细菌。
（3）由于青霉素能抑制细菌的生长，而对真菌无影响，所以酵母菌的筛选需要在常规培养基中另加入某种抗生素如青霉素。
（4）由于金黄色葡萄球菌能在较高浓度NaCl的培养基生长，所以利用含较高浓度NaCl的培养基可选择出耐盐的金黄色葡萄球菌。或者根据菌落的颜色呈现金黄色，将其挑取单独培养。
（5）由于大肠杆菌在伊红一美蓝培养基上培养时形成的菌落成黑色并带有金属光泽，所以可以利用伊红-美蓝培养基培养混合菌，菌落呈黑色的是大肠杆菌，挑取该菌落单独培养，结合显微镜镜检和进一步用伊红-美蓝鉴别培养基来确定。
（6）在无氧环境下培养混合菌，厌氧和兼性厌氧的菌体可以生长，故上述菌体中厌氧的大肠杆菌、乳酸菌和兼性厌氧的酵母菌能够生长，加入一定浓度的乳酸，使培养基pH充分降低，可抑制酵母菌的生长，利用菌落特征，结合显微镜镜检，选取生长优势的菌落，即可分离出乳酸菌。
【点睛】本题主要考查微生物筛选的有关知识，解答本题的关键是能根据不同微生物的特点配制不同的选择培养基从而达到筛选的目的。
25.现在大力提倡无纸化办公，但是仍然不可避免地每年要产生大量的废纸，其主要成分是木质纤维，人类正努力将其转化为一种新的资源——乙醇。下图是工业上利用微生物由纤维素生产乙醇的基本工作流程，请回答相关问题。
(1)自然界中①环节需要的微生物大多分布在________的环境中。将从土壤中获得的微生物培养在以________为碳源，并加入________染料的培养基上筛选周围有________的菌落。
(2)如上所述的筛选中获得了三个菌落，对它们分别培养，并完成环节②，且三种等量酶液中酶蛋白浓度相同，则你认为三种酶液的活性________(“一定相同”“不一定相同”“一定不同”)，可以通过____________________________方法进行定量测定。
(3)根据测定结果，①环节常选择木霉，则②中获得的酶是____________酶。该酶至少包括____________________________三个组分。
(4)生产中可以满足④环节的常见菌种是________，为了确保获得产物乙醇，⑤环节要注意________，④过程要注意避免________。
【答案】 (1). 富含纤维素(或落叶较多等) (2). 纤维素 (3). 刚果红 (4). 透明圈 (5). 不一定相同 (6). 对纤维素酶分解纤维素后所产生的葡萄糖 (7). 纤维素 (8). C1酶、CX酶、葡萄糖苷酶 (9). 酵母菌 (10). 发酵装置密闭(或保证无氧条件等) (11). 杂菌污染
【解析】
【分析】
据图分析：①表示纤维素分解菌的筛选，②表示纤维素酶的活性鉴定，③表示纤维素发酵，④表示酵母菌的接种培养，⑤表示无氧发酵，据此解答。
【详解】（1）①筛选纤维素分解菌时应该在富含纤维素的土壤中取样，筛选纤维素分解菌常用刚果红染色法，需要使用以纤维素为唯一碳源的选择培养基筛选出较为“浓缩”的该种微生物。由于刚果红与纤维素反应出现红色，而纤维素被分解的产物不能与刚果红反应呈现红色，所以纤维素分解菌的菌落周围会出现透明圈。
（2）不同纤维素分解菌的纤维素酶的活性不一定相同，可以通过对纤维素酶分解纤维素后所产生的葡萄糖进行定量的测定。
（3）木霉能产生纤维素酶，若①环节选择的是木霉，则②中获得的酶是纤维素酶。纤维素酶包括C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶。前两种酶将纤维素分解成纤维二糖。第三种酶能将纤维二糖分解成葡萄糖。
（4）由于⑤过程是发酵产生酒精，故④环节常见的菌种是酵母菌，酒精发酵属于无氧发酵，故⑤环节中发酵装置必须保持密闭环境（或无氧条件），④过程中在接种酵母菌时要防止杂菌污染。
【点睛】本题主要考查纤维素分解菌的筛选与分离及酒精发酵过程，解答本题特点解是掌握相关技术的原理和过程，并具有一定的实验操作与运用能力。
26.某同学进行苹果汁制作实验，工艺如下图所示。
请回答：
(1)黑曲霉提取液中含有的______酶可水解果胶，从而使果汁澄清。该酶是复合酶，包括_______酶______酶________酶等。影响酶活性的因素包括：________、________、____等
(2)固定化柱中的石英砂通过吸附方式将酶固定化，酶被固定后用蒸馏水洗涤固定化柱是为了除去______________________________。
(3)果汁与等量的乙醇混合，如果出现沉淀现象，说明果胶还没有被完全水解。为使果胶完全水解，应将流速调________（快或慢）。
(4)实验后，将洗涤过的固定化柱在低温环境中保存若干天，该固定化柱仍可用于苹果汁制作实验，说明固定化酶可被__________使用。
【答案】 (1). 果胶酶 (2). 多聚半乳糖醛酸 (3). 果胶分解酶 (4). 果胶酯酶 (5). 温度 (6). pH (7). 酶的抑制剂 (8). 未被固定的酶 (9). 慢 (10). 反复
【解析】
【分析】
在制作工艺中必须对原材料消毒，根据题意和图示分析可知：KMnO4是强氧化剂，具有消毒的作用，可将苹果表面的杂菌杀死。苹果汁中因含有果胶而使果汁浑浊，故苹果汁的制作需要果胶酶，该酶来自图中流程A中的黑曲霉。果胶酶将果胶催化水解，提高了果汁的澄清度。
【详解】（1）果胶可被果胶酶分解，图中黑曲霉提取液中含有果胶酶，能将果汁中的果胶分解，以提高出汁率和果汁的澄清度。果胶酶是一种复合酶，包括多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶和果胶酯酶。影响酶活性的因素有温度、pH和酶的抑制剂。
（2）酶被固定后用蒸馏水洗涤固定化柱是为了除去未被固定的酶。
（3）果胶被分解可使果汁变得澄清，果汁与等量的乙醇混合，如果出现沉淀现象，说明果胶还没有被完全水解。为使果胶完全水解，应将流速调慢，降低流速，延长反应时间，使果汁中的果胶被充分分解。
（4）固定化酶的优点之一是被固定的酶可以重复使用。
【点睛】本题考查果胶酶在果汁生成中的作用和固定化酶等知识，解答本题的关键是掌握识记、理解相关的知识要点。
高二下学期3月月考试题
一、选择题
1.下列叙述错误的是
A. 醋酸菌在无氧条件下利用乙醇产生醋酸
B. 乳酸菌在无氧条件下利用葡萄糖产生乳酸
C. 泡菜腌制利用了乳酸菌的乳酸发酵
D. 腐乳制作利用了毛霉等微生物的蛋白酶和脂肪酶
【答案】A
【解析】
【分析】
1、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。
2、参与腐乳制作的微生物主要是毛霉，其新陈代谢类型是异养需氧型。腐乳制作的原理：毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸。
3、泡菜制作过程中利用了乳酸菌无氧呼吸产生乳酸的原理。
【详解】醋酸菌属于需氧菌，在有氧、糖源不足的情况下，可将乙醇转变为乙醛，再将乙醛转变为醋酸，A错误；乳酸菌为厌氧菌，在无氧条件下可利用葡萄糖产生乳酸，B正确；泡菜腌制利用了乳酸菌的乳酸发酵，C正确；参与腐乳制作的微生物主要是毛霉，腐乳制作的原理是毛霉等微生物的蛋白酶和脂肪酶能将豆腐中的蛋白质和脂肪分解成易于吸收的小分子，D正确。
故选A。
2.下列关于果酒、果醋、腐乳制作的叙述,正确的是
A. 制作果酒时应反复冲洗葡萄以避免杂菌污染
B. 制作果醋时应适时通入空气以保证有关菌种正常代谢
C. 制作腐乳时酒精的含量过高时会加快腐乳的成熟
D. 三种发酵技术涉及的微生物均具有核膜包被的细胞核
【答案】B
【解析】
【分析】
果酒制作的菌种是酵母菌，酵母菌是兼性厌氧的真核生物；制作果醋的菌种是醋酸菌，醋酸菌是好氧菌，且是原核生物，无核膜包被的细胞核，腐乳制作的主要菌种是毛霉，毛霉是真核生物，酒精的含量会影响腐乳的品质，酒精含量低不足以抑制杂菌生长，豆腐易腐败且不易成形，酒精含量过高，会延长腐乳成熟的时间。
【详解】果酒制作过程中不能反复冲洗葡萄，以免葡萄皮上的菌种酵母菌大量丢失，A错误；醋酸菌是好氧菌，制作果醋时应适时通入空气以保证醋酸杆菌菌种正常代谢，B正确；腐乳制作时酒精的含量高于12%时会延长腐乳的成熟期，C错误；制作果醋时的醋酸杆菌是原核生物，不具有核膜包被的细胞核，D错误。
故选B。
3.下列关于果酒和果醋的制作原理、发酵过程的叙述中，错误的是
A. 果酒和果醋的发酵菌种不同，但代谢类型相同
B. 制作果酒和果醋时都应用体积分数为70%的酒精对发酵瓶消毒
C. 变酸果酒的表面观察到的菌膜可能是醋酸菌种群
D. 果酒和果醋的制作可用同一装置，但需控制不同发酵条件
【答案】A
【解析】
【分析】
一、果酒制作的原理：（1）利用的微生物是酵母菌，其异化作用类型是兼性厌氧型。（2）影响酒精发酵的主要环境条件有温度、氧气和pH。①酒精发酵是一般将温度控制在18～25℃范围内，在20℃时最适宜。②酒精发酵过程中，要保持缺氧、酸性环境。
二、果醋制作的原理：醋酸菌是—种好氧性细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动。变酸的酒的表面观察到的菌膜就是醋酸菌在液面大量繁殖而形成的。实验表明，醋酸菌对氧气的含量特别敏感，当进行深层发酵时，即使只是短时间中断通入氧气，也会引起醋酸菌死亡。当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。醋酸菌的最适生长温度为30℃～35℃。
【详解】果酒的发酵菌种是酵母菌，其代谢类型是异养兼性厌氧型；果醋的发酵菌种是醋酸菌，其代谢类型是异养需氧型，两者的代谢类型不同，A错误；发酵装置要清洗干净，并用70％的酒精消毒，防止杂菌污染，B正确；果酒在酿造过程中变酸是醋酸菌引起的，故变酸果酒的表面观察到的菌膜可能是醋酸菌种群，C正确；果酒和果醋的制作可用同一个装置，但根据上述分析可知，二者的发酵条件如是否密闭，发酵温度，时间等都有差异，D正确。
故选A。
4.以下是草莓酒制作的步骤.下列分析中正确的是
挑选草莓榨汁装瓶发酵放气.
A. 步骤(2)是对草莓进行灭菌处理
B. 步骤(5)为加入酵母菌液或含酵母菌的凝胶珠
C. 发酵过程中放气量先减少后增加
D. 利用溴麝香草酚蓝水溶液检测酒精的含量
【答案】B
【解析】
【分析】
果酒制作的操作过程：
（1）材料的选择与处理：选择新鲜的草莓，榨汁前先将草莓进行冲洗。
（2）灭菌：①榨汁机要清洗干净，并晾干。②发酵装置要清洗干净，并用70%的酒精消毒。
（3）榨汁：将冲洗并除去枝梗的草莓放入榨汁机榨取草莓汁。
（4）发酵：①将草莓汁装入发酵瓶，要留要大约1/3的空间，并封闭充气口。②制草莓酒的过程中，将温度严格控制在18℃～25℃，时间控制在10～12d左右，可通过出料口对发酵的情况进行及时的监测。
【详解】步骤（2）是对草莓进行冲洗，不能进行灭菌，否则会杀死草莓上的野生酵母菌，A错误；步骤（5）为加入酵母菌液或含酵母菌的凝胶珠，从而使发酵效果更好，B正确；酒精发酵过程中除了产生酒精，还会产生大量的二氧化碳，但随着发酵的进行，由于营养物质逐渐减少等原因，酵母菌酒精发酵的速率减慢，产生的二氧化碳也随之减少，因此发酵过程中放气量先增加后减少，C错误；是否产生CO2可以用溴麝香草酚蓝水溶液进行检测，现象由蓝变绿再变黄，利用酸性重铬酸钾溶液可检测酒精的含量，D错误。
故选B。
5. 在腐乳制作过程中，加盐和加酒所发挥的作用相同的是（ ）
A. 析出豆腐中的水分，使豆腐块变硬
B. 抑制微生物的生长，避免豆腐块腐败变质
C. 使腐乳具有独特的香味
D. 促进蛋白质水解成多肽和氨基酸
【答案】B
【解析】
腐乳制作过程中，加盐的目的是析出豆腐中的水分，使豆腐块变硬，同时抑制微生物的生长，避免豆腐块腐败变质；加酒的目的是抑制微生物的生长，同时使腐乳具有独特的香味；加香料的目的是调制腐乳的风味，也具有防腐杀菌的作用。
6.测定泡菜中亚硝酸盐含量的操作中，错误的是（ ）
A. 质量浓度为4mg/mL的对氨基苯磺酸溶液呈酸性
B. 对氨基苯磺酸溶液和N-1-萘基乙二胺盐酸盐溶液，应避光保存
C. 操作步骤为：配制溶液―制备标准显色液―制备样品处理液―比色
D. 制备样品处理液，加入氢氧化铝的目的是中和氢氧化钠
【答案】D
【解析】
【分析】
1、测定亚硝酸盐含量的原理：
在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料。将显色反应后的样品与已知浓度的标准液进行目测对比，可以大致估算出亚硝酸盐的含量。
2、亚硝酸盐含量的测定操作过程：
配制溶液―制备标准显色液―制备样品处理液―比色。
【详解】质量浓度为4mg/mL的对氨基苯磺酸溶液和N-1-萘基乙二胺盐酸盐溶液都呈酸性，要保证其稳定性，应低温避光保存，AB正确；测定亚硝酸盐的操作步骤为：配制溶液―制备标准显色液―制备样品处理液―比色，C正确；制备样品处理液，加入氢氧化铝的目的是使滤液中色素脱色，使滤液变得无色透明，D错误。
故选D。
【点睛】本题为测定亚硝酸盐含量的实验，对于此类试题，需要考生识记参与泡菜制作的微生物及其代谢类型，掌握亚硝酸盐含量的测定操作过程，能结合所学的知识准确判断各选项，难度不大。
7.已知某种细菌以CO2为唯一碳源，下列相关叙述正确的是
A. 可推测该细菌的代谢类型为自养需氧型
B. 无机盐是该细菌不可缺少的营养物质
C. 培养过程中碳源同时充当该细菌的能源物质
D. 培养该细菌的培养基中无需添加氮源
【答案】B
【解析】
某种细菌以CO2为唯一碳源，可推测该细菌的代谢类型为自养型，但不确定是否为需氧型，A项错误；无机盐参与复杂有机物的组成，是该细菌不可缺少的营养物质，B项正确；CO2不能作为能源，C项错误；氮元素参与核酸、蛋白质的组成，培养该细菌的培养基中需要添加氮源，D项错误，
8.在微生物培养的过程中，需要通过选择培养或鉴别培养的方法来筛选出目标菌种，下列与之相关的叙述中不正确的是
A. 纤维素分解菌能够分解刚果红染料，从而使菌落周围出现透明圈
B. 尿素分解菌能够将尿素分解为氨，从而使酚红指示剂变红
C. 在培养基中加入抗生素能够筛选出具有相应抗性菌株
D. 在含有碳酸钙的培养基上生长的乳酸菌菌落周围会出现“溶钙圈”
【答案】A
【解析】
纤维素分解菌能够分解纤维素，在培养基中加入刚果红，可与培养基中的纤维素形成红色复合物，当纤维素被分解后，红色复合物不能形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，A错误；尿素分解菌能够将尿素分解为氨，使培养基呈碱性,从而通使酚红指示剂变红，B正确；在培养基中加入抗生素能够筛选出具有相应抗性的菌株，C正确；在含有碳酸钙的培养基上生长的乳酸菌菌落周围会出现“溶钙圈”，D正确。
9.下列有关细菌纯化培养的说法，不正确的是
A. 实验操作者接种前要用70%的酒精棉球擦手消毒
B. 每次划线后接种环要在酒精灯火焰上灼烧灭菌
C. 培养基上的单个菌落都是一个细菌细胞繁殖而来的
D. 菌液梯度稀释后用涂布法接种，得到单菌落便于计数
【答案】C
【解析】
【分析】
1．无菌技术的主要内容：
①对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒；
②将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌；
③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行；
④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。
2、微生物常见的接种方法：
①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。
②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
3、菌落是由单个细菌（或其他微生物）细胞或一堆同种细胞在适宜固体培养基表面或内部生长繁殖到一定程度，形成肉眼可见的子细胞群落。
【详解】实验操作者接种前要用70%的酒精棉球擦手消毒，A正确；每次划线后接种环要在酒精灯火焰上灼烧灭菌，以保证下一次划线的菌种来自上一次划线的末端，B正确；培养基上的单个菌落是一个细菌细胞或几个同种细菌细胞的克隆，C错误；在稀释度足够高的菌液中，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落，所以菌液梯度稀释后用涂布法接种，可得到单菌落便于计数，D正确。
故选C。
10. 下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述，其中错误的是
A. 用蒸馏水配制牛肉膏蛋白膝培养基，经高温、高压灭菌后倒平板
B. 取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1ml，分别涂布于各组平板上
C. 将实验组和对照组平板倒置，370C恒温培养24-48小时
D. 确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数
【答案】D
【解析】
检测土壤中细菌总数，用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板，取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1ml，分别涂布于各组平板上，将实验组和对照组平板倒置，37℃恒温培养24-48小时，在确定对照组无菌后，选择菌落数在30-300的一组平板为代表进行计数。所以D不对。
11.某研究小组从有机废水中分离微生物用于废水处理，下列叙述正确的是
A. 培养基倒平板后进行灭菌
B. 转换划线角度后需灼烧接种环再进行划线
C. 接种后的培养皿须放在光照培养箱中培养
D. 培养过程中每隔一周观察一次
【答案】B
【解析】
【分析】
制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是计算、称量、溶化、灭菌、倒平板。微生物接种的核心是防止杂菌的污染，保证培养物的纯度。在每次划线前后都要对接种环进行灭菌，接种环的灭菌方法应是在火焰上灼烧，接种时划线操作是在火焰旁边进行的；每一种细菌都有最适的生长温度，需要在恒温培养箱中进行培养。
【详解】培养基要先进行灭菌再倒平板，A错误；转换划线角度后要对接种环进行灼烧灭菌再进行划线，以保证下一次划线的菌种来自上一次划线的末端，B正确；有机废水中的微生物属于异养型生物，不能进行光合作用，培养不需要光照，接种后的培养皿应放置在恒温培养箱中进行培养，C错误；培养过程中观察的间隔时间不能太长，适宜条件下一般不超过24h，D错误。
故选B。
【点睛】本题考查微生物和培养的相关知识，此类试题需要考生注意的细节较多，如培养基的制备、灭菌的方法、接种方法的选择、结果的分析等，需要考生在平时的学习过程中注意积累，络结构，对选项作出准确的判断。
12.微生物培养中，要十分重视无菌操作。现代生物学实验中许多方面也要进行无菌操作，防止杂菌污染。请分析下列操作中错误的是
①煮沸消毒可以杀死微生物的营养细胞 ②接种操作要在酒精灯火焰附近进行③土壤浸出液稀释后不需灭菌 ④家庭制葡萄酒时要将容器和葡萄进行灭菌⑤培养基要进行高压蒸汽灭菌 ⑥加入培养基中的指示剂和染料不需要灭菌
A. ③④⑥ B. ③⑥ C. ④⑥ D. ①②⑤
【答案】C
【解析】
【分析】
微生物培养过程中，许多方面也要进行无菌操作，为防止杂菌污染，对实验器材和材料一般要消毒或灭菌，操作过程也要防止污染。而家庭制作葡萄酒时，酵母菌菌种由葡萄提供，所以葡萄不需要灭菌。培养基中的指示剂和染料都是先与其他成分混合后，一起进行灭菌。
【详解】①100℃煮沸5～6min可以杀死微生物细胞和一部分芽孢，①正确；②酒精灯火焰附近存在一个无菌区，为了无菌操作，接种操作要在酒精灯火焰附近进行，②正确；③土壤浸出液稀释后不需要灭菌，③正确；④家庭制作葡萄酒时起主要作用的是附着在葡萄皮上的野生型酵母菌，因此不能对葡萄进行灭菌，以免杀死酵母菌，④错误；⑤培养基的灭菌方法是高压蒸汽灭菌，⑤正确；⑥指示剂和染料混有微生物，为了防止杂菌污染，加入培养基中的指示剂和染料也需要灭菌，⑥错误。综上所述，C符合题意，ABD不符合题意。
故选C。
13.下表为某种培养基的配方，根据表格可以判断出
成分
含量
成分
含量
K2HPO4
2g
(NH4)2SO4
1.4g
MgSO4·7H2O
0.3g
CaCl2
0.3g
纤维素粉
20g
琼脂
20g
水
1000mL
pH
5.5
A. 此培养基可以用来筛选生产纤维素酶的菌种
B. 此培养基因原料来源广泛，可用于工业生产
C. 此培养基可以用来筛选自生固氮菌
D. 此培养基中含有微生物所必需的五类营养要素
【答案】A
【解析】
【分析】
选择培养基是根据某一种或某一类微生物的特殊营养要求或对一些物理、化学抗性而设计的培养基。利用这种培养基可以将所需要的微生物从混杂的微生物中分离出来。上述培养基中纤维素粉作为唯一的碳源，只有能合成纤维素酶的微生物可以利用纤维素作为碳源，故该培养基可用来筛选能够分解纤维素的微生物。该培养基中的氮源是(NH4)2SO4。
【详解】根据培养基中的成分以及上述分析可知，只有能够分解纤维素的微生物能在该培养基上生长，故此培养基可以用来筛选生产纤维素酶的菌种，A正确；此培养基中含有琼脂，为固体培养基，不适用于工业生产，B错误；筛选自生固氮菌应用不含氮源的培养基，而该培养基含有氮源，C错误；此培养基只含有碳源、氮源、水和无机盐共4类营养要素，D错误。
故选A。
14.利用农作物秸秆等纤维质原料生产的乙醇，经加工可制成燃料乙醇，从而减少了对石油资源的依赖，下图为生产燃料乙醇的简要流程，据图分析错误的一项是
A. 要得到微生物A，最好选择富含纤维素的土壤采集土样
B. 图中②过程常用的微生物B是酵母菌
C. 微生物A和微生物B可利用的碳源相同
D. 可用纤维素酶制剂代替微生物A起作用
【答案】C
【解析】
试题分析：根据图解可知，微生物A的碳源是纤维素，故要想获得微生物A最好选择富含纤维素的土壤采集，A项正确；图中②过程表示生产乙醇的过程，常用微生物是酵母菌，B项正确；微生物A所用碳源为纤维素，微生物B所用碳源为纤维素降解物，C项错误；微生物A之所以能利用纤维质原料是因为其含有纤维素酶，故可用纤维素酶制剂代替微生物A起作用，D项正确。
考点：本题考查生产乙醇的过程中的原料，微生物的种类等知识，意在考查考生能运用所学知识与观点，通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理，做出合理的判断的能力。
15.下表是对四种生物的能源、碳源、氮源、新陈代谢类型的描述，正确的一组是
硝化细菌
乳酸菌
根瘤菌
衣藻
A
能源
NH3
乳酸
N2
光能
B
碳源
CO2
糖类等
糖类等
CO2
C
氮源
NH3
N2
N2
NO3-
D
代谢类型
自养需氧型
异养厌氧型
自养需氧型
自养需氧型
A. A B. B C. C D. D
【答案】B
【解析】
【分析】
硝化细菌是化能合成型微生物，能利用氧化NH3释放的化学能进行化能合成作用合成有机物，属于自养需氧型生物；乳酸菌是厌氧型生物，其代谢类型为异养厌氧型；根瘤菌能固定N2，其代谢类型为异养需氧型；衣藻是光能自养型生物，其代谢类型为自养需氧型。
【详解】乳酸菌的代谢过程可产生乳酸，其不能利用乳酸作为能源物质，根瘤菌为异养型生物，能源物质是糖类等有机物，A错误；硝化细菌和衣藻为自养型生物，可利用CO2为碳源，乳酸菌和根瘤菌为异养生物，可以糖类等有机物为碳源，B正确；乳酸菌没有固氮能力，不能利用N2作为氮源，C错误；根据分析可知，根瘤菌的代谢类型为异养需氧型，D错误。
故选B。
16.蛋白酶洗衣粉容易洗去奶渍、血渍，可是不易洗去油渍，这体现了酶的
A. 高效性 B. 专一性 C. 需适宜的条件 D. 多样性
【答案】B
【解析】
利用酶的专一性原理，加酶洗衣粉加入的主要碱性蛋白酶 和 碱性脂肪酶，所以能洗去奶渍、血渍，可是不易洗去汗渍。
17.在“探索果胶酶的用量”实验中，下列说法错误的是
A. 实验时可配制不同浓度的果胶酶溶液
B. 底物浓度一定时，酶用量越大，滤出果汁越多
C. 本实验应控制在适宜温度和pH条件下
D. 反应液pH必须相同
【答案】B
【解析】
【分析】
果胶酶包括多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶和果胶酯酶等；探究果胶酶的用量时，实验的自变量是果胶酶的用量，因变量是滤出果汁的体积和果汁的澄清度，无关变量包括温度、pH等。
【详解】由于要探究果胶酶的最适用量，故可配制不同浓度的果胶酶溶液，并在各组中加入等量的该溶液，A正确；在一定的范围内，随着酶用量的增大，酶促反应速率加快，滤出的果汁增多，当酶用量达到一定值，反应物的浓度成为限制因素，由于反应物的量一定，再增加酶的用量，反应速率也不再增大，滤出果汁不再增多，B错误；该实验中果胶酶的用量为自变量，温度、pH值为无关变量，故各组中的温度、pH值应相同而且处于适宜状态，C、D正确；
故选B。
18.如图表示某研究小组探究果胶酶的用量的实验结果。有关说法不正确的是
A. 在ab段限制反应速率的主要因素是酶的用量
B. 在ac段增加反应物浓度，可以明显加快反应速率
C. 在bc段限制反应速率的因素是温度、pH、反应物浓度等
D. 在该实验给定条件下，果胶酶的最佳用量是b点对应的值
【答案】B
【解析】
【分析】
由图可知，在ab段随着酶的用量增加，反应速率加快，说明该阶段的反应速率是酶的用量。超过b点之后，酶的用量再增加，反应速率不再发生变化，此时的限制因素是反应物的浓度、温度等无关变量。
【详解】在ab段随着酶的用量增加，反应速率加快，限制反应速率的主要因素是酶的用量，A正确；在ab段，限制反应速率的因素是酶的用量，增加反应物浓度，反应速率不会明显加快；在bc段，限制反应速率的因素有反应物的浓度，此时增加反应物的浓度，反应速率会加快，B错误；根据上述分析可知，在bc段，限制反应速率的因素有反应物的浓度、温度、pH等，C正确；在该实验给定条件下，果胶酶的最佳用量是b点对应的值，此时的果胶酶用量最少，反应速率最快，D正确。
故选B。
19.为了探究一种新型碱性纤维素酶的去污效能，研究性学习小组进行了相关实验，结果如下图。由图中实验结果能直接得出的结论是
A. 碱性纤维素酶对污布类型2的去污力最强
B. 不同类型洗衣粉影响碱性纤维素酶的去污力
C. 碱性纤维素酶对污布类型2、3的去污力不同
D. 加大酶用量可以显著提高洗衣粉的去污力
【答案】C
【解析】
20 U/L的碱性纤维素酶处理对污布类型1，去污力为60%，30 U/L的碱性纤维素酶处理污布类型2，去污力约为80%，则单位碱性纤维素酶对污布类型1去污力最强，A错误；由于污布类型不同，不能探究不同类型的洗衣粉对碱性蛋白酶的去污力的影响，B错误；对污布类型2、3而言，都是Y型洗衣粉，30%的酶用量，但去污力不同，说明碱性纤维素酶对污布类型2、3 的去污力不同，C正确；该实验没有针对同一类型的洗衣粉加大酶用量的探究，则不能判断加大酶用量是否提高洗衣粉的去污力，D错误。
【考点定位】碱性纤维素酶，实验分析。
【名师点睛】本题以碱性纤维素酶为背景考查实验分析，要求学生理解实验分析的两个基本原则：对照原则和单一变量原则。
20.下列关于“酵母细胞的固定化技术”实验的叙述，正确的是（ ）
A. 活化酵母时，将适量干酵母与蒸馏水混合并搅拌成糊状
B. 配制CaCl2 溶液时，需要边小火加热边搅拌
C. 将海藻酸钠溶液滴加到CaCl2 溶液时，凝胶珠成形后应即刻取出
D. 海藻酸钠溶液浓度过高时凝胶珠呈白色，过低时凝胶珠易呈蝌蚪状
【答案】A
【解析】
活化酵母时，将适量干酵母与蒸馏水混合，并搅拌成糊状，A正确；配制CaCl2溶液时，不需进行加热，B错误；CaCl2溶液使酵母细胞可以形成稳定的结构，固定在凝胶珠中，需要一段时间，时间不宜过短或过长，C错误；海藻酸钠溶液浓度过低时凝胶珠呈白色，过高时凝胶珠易呈蝌蚪状，D错误。
【考点定位】固定化酵母细胞。
【名师点睛】本题主要考查酵母细胞的固定化，要求学生理解酵母细胞固定化的过程以及异常情况。
二、非选择题
21.如图是泡菜的制作及测定亚硝酸盐含量的实验流程示意图,请据图回答下面的问题
（1）选用新鲜蔬菜做泡菜,原因是________________________ ．
（2）为了保证既无杂菌,又能使发酵菌发挥正常作用,泡菜所用盐水应____________ 再使用。
（3）在泡菜腌制过程中经常向坛口边缘的水槽中补充水分目的是提供________ 环境。
（4）测定亚硝酸盐含量的方法是________ ,在泡菜腌制过程中定期测定亚硝酸盐含量的目的是__________．因为在_________条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生_____反应后，与N—1—萘基乙二胺盐酸盐结合形成_______色染料。
（5）同样的材料和腌制条件,不同坛中各时期测得亚硝酸盐含量不同, 最可能的原因是___________________________不同。
（6）在制作腐乳、果醋、泡菜的过程中,需要氧气的是_____________________ ．
【答案】 (1). 亚硝酸盐含量低 (2). 先加热煮沸,然后冷却 (3). 无氧 (4). 比色法 (5). 把握取食的最佳时间 (6). 盐酸酸化 (7). 重氮化 (8). 玫瑰红 (9). 各坛中微生物的种类和数量 (10). 腐乳和果醋制作
【解析】
【分析】
制作泡菜时所使用的微生物是乳酸菌，代谢类型是异养厌氧型。泡菜中的亚硝酸盐的含量可以用比色法进行测定，原理是在盐酸酸化的条件下，亚硝酸盐和对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色的染料，将显色反应后的样品与已知浓度标准显色液目测比较，可以大致估算出泡菜中亚硝酸盐含量。
【详解】（1）新鲜的蔬菜亚硝酸盐的含量低，故制作泡菜时常选用新鲜蔬菜。
（2）盐水需要进行加热煮沸处理，其主要目的是杀灭杂菌等微生物，但要等到冷却后使用是为了保证乳酸菌等微生物的生命活动不受影响。
（3）向坛盖边沿的水槽中注满水，这一操作的目的是保证坛内的无氧环境。
（4）泡菜中的亚硝酸盐含量可以用比色法测定，即在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N—1—萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料。泡菜制作过程中亚硝酸盐的含量先增加后减少，在泡菜腌制过程中定期测定亚硝酸盐含量的目的是为了准确把握取食的最佳时间。
（5）同样的材料和腌制条件下，不同坛中所含有的微生物种类和数量可能不同，故各时期测得亚硝酸盐含量不同。
（6）腐乳制作过程所需要的毛霉属于需氧型，果醋制作所需要的醋酸菌属于需氧型，而泡菜制作所需要的乳酸菌为厌氧型，故在制作腐乳、果醋、泡菜的过程中,需要氧气的是腐乳和果醋制作。
【点睛】本题主要考查泡菜的制作过程以及亚硝酸盐含量的检测，意在考查考生对知识点的识记、理解和掌握程度，要求考生具有扎实的基础知识和一定的判断能力，能构建一定的知识网络。
22.下图为葡萄酒和果醋的制作流程图，请据图回答：
（1）图中①表示____________________ 过程。
（2）在冲洗葡萄的过程中，只需简单冲洗而不宜用清洁剂反复冲洗的目的是___________。
（3）要获得纯净的酵母菌菌种，可把葡萄园土壤的稀释液通过________法接种到固体培养基上。
（4）装置中排气口通过一个长而弯曲的胶管与瓶身相连，这样做的目的是：_________。
（5）制备果醋需要用到的微生物是_____，其与酵母菌在结构上最大的区别是__________。
（6）果酒制果醋的反应式为__________________________________________．
（7）①过程通常用________________________试剂检验酒精是否产生。
①②过程所需环境条件（除温度外）的主要区别是________________。在制作果醋过程中，为了提高醋酸菌的利用率可采用___________技术对其进行处理。
【答案】 (1). 酒精发酵 (2). 保留葡萄皮上的酵母菌 (3). 稀释涂布平板法 (4). 防止杂菌污染 (5). 醋酸杆菌 (6). 无以核膜为界限的细胞核 (7). C2H5OH+O2→CH3COOH+H2O (8). 酸性重铬酸钾溶液 (9). 是否需氧气 (10). 固定化细胞
【解析】
【分析】
据图分析：图中是果酒和果醋制作的实验流程，过程①为酒精发酵，过程②为醋酸发酵，酒精发酵后还可以进行果醋发酵。
【详解】（1）图中①过程为发酵产生酒精的过程，为酒精发酵过程。
（2）果酒制作过程中所需要的菌种来自葡萄上的野生型酵母菌，冲洗葡萄的目的是洗去浮尘，冲洗时不能反复冲洗，以防止葡萄上菌种的流失，保留葡萄皮上的酵母菌。
（3）葡萄园土壤中含有大量酵母菌生长繁殖，要获得纯净的酵母菌菌种，可把葡萄园土壤的稀释液通过稀释涂布平板法接种到固体培养基上。
（4）装置中排气口是为了排出发酵过程中产生的二氧化碳等气体，通过一个长而弯曲的胶管与瓶身相连，目的是防止杂菌污染。
（5）果醋制作的微生物是醋酸杆菌，醋酸杆菌为原核生物，酵母菌为真核生物，醋酸杆菌与酵母菌在结构上最大的区别是无以核膜为界限的细胞核。
（6）果酒制作果醋的过程是将酒精变为乙醛，再将乙醛变为醋酸，反应式为：C2H5OH+O2→CH3COOH+H2O。
（7）①过程为酒精发酵，产生的酒精可用酸性的重铬酸钾检测。①过程为酒精发酵，需在无氧条件下进行，②过程为醋酸发酵，需在有氧条件下进行，故①②过程所需环境条件（除温度外）的主要区别为是否需要氧气。在制作果醋过程中，为了提高醋酸菌的利用率可采用固定化细胞技术对其进行处理。
【点睛】本题结合果酒和果醋制作流程，考查果酒和果醋的制作，要求考生识记果酒和果醋制作的原理、参与果酒和果醋制作的微生物的特点、发酵装置及作用，能结合所学的知识答题。
23.幽门螺杆菌(Hp)感染是急慢性胃炎和消化性溃疡的主要致病因素。在患者体内采集样本并制成菌液后，进行分离培养。实验基本步骤如下：
配制培养基―→灭菌、倒平板―→X―→培养―→观察
请回答：
(1)在配制培养基时，要加入尿素和酚红指示剂，这是因为Hp含有___________，它能以尿素作为氮源；若有Hp，则菌落周围会出现______色环带。
(2)下列对尿素溶液进行灭菌的最适方法是___________灭菌。
A．高压蒸汽 B．紫外灯照射 C．70%酒精浸泡 D．过滤
(3)步骤X表示________。在无菌条件下操作时，先将菌液稀释，然后将菌液__________到培养基平面上。菌液稀释的目的是获得______个菌落。
(4)在培养时，需将培养皿倒置并放在____中。若不倒置培养，将导致________。
(5)临床上用14C呼气试验检测人体是否感染Hp，其基本原理是Hp能将14C标记的________分解为NH3和14CO2。
【答案】 (1). 脲酶 (2). 红 (3). A (4). 接种 (5). 涂布 (6). 单 (7). 恒温培养箱 (8). 无法形成单菌落 (9). 尿素
【解析】
【分析】
由于细菌分解尿素的过程中合成脲酶，脲酶将尿素分解成氨，会使培养基碱性增强，pH升高，所以可以用检测pH变化的方法来判断尿素是否被分解，可在培养基中加入酚红指示剂，尿素被分解后产生氨，pH升高，指示剂变红。微生物接种的方法有稀释涂布平板法和平板划线法。稀释涂布平板法一般是将稀释液涂布到固体培养基上。
【详解】（1）幽门螺杆菌含有脲酶，能分解尿素为菌体提供氮源，因此在配制培养基时要加入尿素；加入酚红指示剂的目的是检验是否有Hp存在，若有Hp存在会分解尿素，培养基pH会升高，酚红指示剂将变红，则菌落周围会出现红色环带。
（2）由于尿素在高温下会分解，不能使用高压蒸汽灭菌法灭菌，A错误；紫外灯照射只能起到消毒作用，B错误；70%酒精浸泡只能起到消毒作用，且与尿素溶液混合成了混合液，C错误；由于尿素加热会分解，对尿素溶液进行灭菌最好用G6玻璃沙漏斗过滤，D正确。
故选D。
（3）微生物的分离和培养步骤是：配制培养基→灭菌、倒平板→接种→培养，故步骤X表示接种。接种时先将菌液稀释，目的是获得单一菌落，然后再涂布到培养基平面上。
（4）在培养时，需将培养皿倒置并放在恒温培养箱中。若不倒置培养，将导致无法形成单菌落。
（5）如果人体感染了Hp，Hp能将尿素分解为NH3和CO2，故而用14C标记尿素中的C，可通过呼吸产物来判断是否感染Hp。
【点睛】本题考查微生物的分离与培养知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构的能力。
24.根据各类微生物的形态结构特点和新陈代谢类型，利用选择培养基和鉴别培养基，结合显微镜检，以及菌落特征，可以把混杂在一起的大肠杆菌、硝化细菌、乳酸菌、酵母菌、金黄色葡萄球菌、圆褐固氮菌分离开来。下面是分离筛选的方法、步骤，请根据各个步骤的条件，填写空格中的内容。
首先配制一系列不同性质的固体培养基，然后进行高温灭菌。再将上述微生物的混合液分别接种到各种培养基上培养。
(1)用无氮培养基可筛选出________。
(2)用不含有机碳源的选择培养基可筛选出________菌。
(3)酵母菌的筛选需要在常规培养基中另外加入_____________
(4)用加了较高浓度NaCl的培养基可选择出__________，或者根据菌落的颜色呈现________色，将其挑取单独培养。
(5)利用伊红和美蓝培养基培养混合菌，菌落呈____色并带有金属光泽的是_______菌，挑取该菌落单独培养。结合显微镜检和进一步用伊红和美蓝培养基鉴别培养来确定。
(6)在无氧环境下培养混合菌，_________可以生长，加入一定浓度的乳酸，使培养基pH充分降低，可抑制____________的生长，利用菌落特征，结合显微镜检，选取生长优势的菌落，即可分离出________。
【答案】 (1). 圆褐固氮菌 (2). 硝化细菌 (3). 某种抗生素，如青霉素 (4). 金黄色葡萄球菌 (5). 金黄 (6). 黑 (7). 大肠杆菌 (8). 乳酸菌和酵母菌 (9). 酵母菌 (10). 乳酸菌
【解析】
【分析】
1、实验室中目的菌株的筛选的原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度、pH等），同时抑制或阻止其他微生物生长。如培养基选择分解尿素的微生物的原理为：培养基的氮源为尿素，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作为氮源。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生长发育繁殖，而受到抑制，所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物。同理：圆褐固氮菌为自生固氮菌，可用不含氮源的培养基进行筛选。硝化细菌为自养型，可用不含碳源的培养基进行筛选。乳酸菌的耐酸性较强，金黄色葡萄球菌的耐盐性较强，可用相应的培养基对其筛选。
2、也可以利用鉴别培养基对不同菌种根据菌落特征进行区分，并进一步分离纯化。如在含伊红-美蓝的培养基上出现的黑色菌落为大肠杆菌。
【详解】（1）在无氮培养基上只有能自生固氮的微生物才能生长，所以利用无氮培养基可筛选出能够固氮的圆褐固氮菌。
（2）在不含有机碳源的培养基上只有自养微生物才能生长，如硝化细菌是化能自养型，所以利用不含有机碳源的选择培养基可筛选出硝化细菌。
（3）由于青霉素能抑制细菌的生长，而对真菌无影响，所以酵母菌的筛选需要在常规培养基中另加入某种抗生素如青霉素。
（4）由于金黄色葡萄球菌能在较高浓度NaCl的培养基生长，所以利用含较高浓度NaCl的培养基可选择出耐盐的金黄色葡萄球菌。或者根据菌落的颜色呈现金黄色，将其挑取单独培养。
（5）由于大肠杆菌在伊红一美蓝培养基上培养时形成的菌落成黑色并带有金属光泽，所以可以利用伊红-美蓝培养基培养混合菌，菌落呈黑色的是大肠杆菌，挑取该菌落单独培养，结合显微镜镜检和进一步用伊红-美蓝鉴别培养基来确定。
（6）在无氧环境下培养混合菌，厌氧和兼性厌氧的菌体可以生长，故上述菌体中厌氧的大肠杆菌、乳酸菌和兼性厌氧的酵母菌能够生长，加入一定浓度的乳酸，使培养基pH充分降低，可抑制酵母菌的生长，利用菌落特征，结合显微镜镜检，选取生长优势的菌落，即可分离出乳酸菌。
【点睛】本题主要考查微生物筛选的有关知识，解答本题的关键是能根据不同微生物的特点配制不同的选择培养基从而达到筛选的目的。
25.现在大力提倡无纸化办公，但是仍然不可避免地每年要产生大量的废纸，其主要成分是木质纤维，人类正努力将其转化为一种新的资源——乙醇。下图是工业上利用微生物由纤维素生产乙醇的基本工作流程，请回答相关问题。
(1)自然界中①环节需要的微生物大多分布在________的环境中。将从土壤中获得的微生物培养在以________为碳源，并加入________染料的培养基上筛选周围有________的菌落。
(2)如上所述的筛选中获得了三个菌落，对它们分别培养，并完成环节②，且三种等量酶液中酶蛋白浓度相同，则你认为三种酶液的活性________(“一定相同”“不一定相同”“一定不同”)，可以通过____________________________方法进行定量测定。
(3)根据测定结果，①环节常选择木霉，则②中获得的酶是____________酶。该酶至少包括____________________________三个组分。
(4)生产中可以满足④环节的常见菌种是________，为了确保获得产物乙醇，⑤环节要注意________，④过程要注意避免________。
【答案】 (1). 富含纤维素(或落叶较多等) (2). 纤维素 (3). 刚果红 (4). 透明圈 (5). 不一定相同 (6). 对纤维素酶分解纤维素后所产生的葡萄糖 (7). 纤维素 (8). C1酶、CX酶、葡萄糖苷酶 (9). 酵母菌 (10). 发酵装置密闭(或保证无氧条件等) (11). 杂菌污染
【解析】
【分析】
据图分析：①表示纤维素分解菌的筛选，②表示纤维素酶的活性鉴定，③表示纤维素发酵，④表示酵母菌的接种培养，⑤表示无氧发酵，据此解答。
【详解】（1）①筛选纤维素分解菌时应该在富含纤维素的土壤中取样，筛选纤维素分解菌常用刚果红染色法，需要使用以纤维素为唯一碳源的选择培养基筛选出较为“浓缩”的该种微生物。由于刚果红与纤维素反应出现红色，而纤维素被分解的产物不能与刚果红反应呈现红色，所以纤维素分解菌的菌落周围会出现透明圈。
（2）不同纤维素分解菌的纤维素酶的活性不一定相同，可以通过对纤维素酶分解纤维素后所产生的葡萄糖进行定量的测定。
（3）木霉能产生纤维素酶，若①环节选择的是木霉，则②中获得的酶是纤维素酶。纤维素酶包括C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶。前两种酶将纤维素分解成纤维二糖。第三种酶能将纤维二糖分解成葡萄糖。
（4）由于⑤过程是发酵产生酒精，故④环节常见的菌种是酵母菌，酒精发酵属于无氧发酵，故⑤环节中发酵装置必须保持密闭环境（或无氧条件），④过程中在接种酵母菌时要防止杂菌污染。
【点睛】本题主要考查纤维素分解菌的筛选与分离及酒精发酵过程，解答本题特点解是掌握相关技术的原理和过程，并具有一定的实验操作与运用能力。
26.某同学进行苹果汁制作实验，工艺如下图所示。
请回答：
(1)黑曲霉提取液中含有的______酶可水解果胶，从而使果汁澄清。该酶是复合酶，包括_______酶______酶________酶等。影响酶活性的因素包括：________、________、____等
(2)固定化柱中的石英砂通过吸附方式将酶固定化，酶被固定后用蒸馏水洗涤固定化柱是为了除去______________________________。
(3)果汁与等量的乙醇混合，如果出现沉淀现象，说明果胶还没有被完全水解。为使果胶完全水解，应将流速调________（快或慢）。
(4)实验后，将洗涤过的固定化柱在低温环境中保存若干天，该固定化柱仍可用于苹果汁制作实验，说明固定化酶可被__________使用。
【答案】 (1). 果胶酶 (2). 多聚半乳糖醛酸 (3). 果胶分解酶 (4). 果胶酯酶 (5). 温度 (6). pH (7). 酶的抑制剂 (8). 未被固定的酶 (9). 慢 (10). 反复
【解析】
【分析】
在制作工艺中必须对原材料消毒，根据题意和图示分析可知：KMnO4是强氧化剂，具有消毒的作用，可将苹果表面的杂菌杀死。苹果汁中因含有果胶而使果汁浑浊，故苹果汁的制作需要果胶酶，该酶来自图中流程A中的黑曲霉。果胶酶将果胶催化水解，提高了果汁的澄清度。
【详解】（1）果胶可被果胶酶分解，图中黑曲霉提取液中含有果胶酶，能将果汁中的果胶分解，以提高出汁率和果汁的澄清度。果胶酶是一种复合酶，包括多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶和果胶酯酶。影响酶活性的因素有温度、pH和酶的抑制剂。
（2）酶被固定后用蒸馏水洗涤固定化柱是为了除去未被固定的酶。
（3）果胶被分解可使果汁变得澄清，果汁与等量的乙醇混合，如果出现沉淀现象，说明果胶还没有被完全水解。为使果胶完全水解，应将流速调慢，降低流速，延长反应时间，使果汁中的果胶被充分分解。
（4）固定化酶的优点之一是被固定的酶可以重复使用。
【点睛】本题考查果胶酶在果汁生成中的作用和固定化酶等知识，解答本题的关键是掌握识记、理解相关的知识要点。
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