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【生物】河南省周口中英文学校2018-2019学年高二下学期第一次月考试题(解析版)
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河南省周口中英文学校2018-2019学年高二下学期
第一次月考试题
一.选择题
1.科学家们经过多年的努力,创立了一种新兴生物技术——基因工程,实施该工程的最终目的是 ( )
A. 定向提取生物体的DNA分子
B. 定向地对DNA分子进行人工“剪切”
C. 定向地改造生物的遗传性状
D. 在生物体外对DNA分子进行改造
【答案】C
【解析】
【分析】
基因工程是指在基因水平上,按照人类的需要进行设计,然后按设计方案创建出具有某种新的性状的生物新品系,并能使之稳定地遗传给后代。
【详解】基因工程的核心技术是DNA重组技术,即利用供体生物的遗传物质,或人工合成的基因,经过体外切割后与适当的载体连接起来,形成重组DNA分子,然后将重组DNA分子导入到受体细胞或受体生物构建转基因生物,该种生物就可以按人类事先设计好的蓝图表现出另外一种生物的某种性状. 因此基因工程的最终目的是定向地改造生物的遗传性状.故选C。
【点睛】关键:基因工程的最大意义就在于可以跨物种实现生物遗传性状的定向改变。
2.基因工程中,切割运载体和含有目的基因的DNA片段时需使用 ( )
A. 同种限制酶 B. 两种限制酶
C. 同种DNA连接酶 D. 两种DNA连接酶
【答案】A
【解析】
【分析】
1、基因工程的基本操作步骤主要包括四步:①目的基因的获取;②基因表达载体的构建;③将目的基因导入受体细胞;④目的基因的检测与表达。
2、基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建,其一般过程为:首先用同种限制酶切割载体和含有目的基因的DNA片段;其次用DNA连接酶将两者连接形成重组DNA分子。
【详解】基因工程中,切割载体和含有目的基因的DNA片段时,需要使用同种限制酶,以产生相同的黏性末端,再在DNA连接酶的作用下形成重组DNA分子.故选A。
【点睛】关键:用限制酶切割的运载体以及切割DNA获取目的基因后,目的需要将二者连接起来,为了让它们的黏性末端能正好进行碱基配对,所以二者切割的限制酶必须是相同的。
3.在下列基因操作的四个基本步骤中,不需要进行碱基互补配对的步骤是( )
A. 人工合成目的基因
B. 将目的基因导入受体细胞
C. 目的基因与运载体结合
D. 目的基因的检测与鉴定
【答案】B
【解析】
【分析】
基因工程的基本操作步骤主要包括四步:①目的基因的获取;②基因表达载体的构建;③将目的基因导入受体细胞;④目的基因的检测与鉴定.其中人工合成目的基因、基因表达载体的构建、目的基因的检测都进行碱基互补配对原则。
【详解】人工合成目的基因的方法是逆转录法,需要进行碱基互补配对,A正确;将目的基因导入受体细胞时,不进行碱基互补配对,B错误;目的基因与运载体结合时,进行碱基互补配对,C正确;检测目的基因时需要用到基因探针,进行碱基互补配对;基因表达包括转录和翻译过程,都要进行碱基互补培养,D正确。
4. 人的糖蛋白必须经内质网和高尔基体进一步加工合成。通过转基因技术,可以使人的糖蛋白基因得以表达的受体细胞是( )
A. 大肠杆菌 B. 酵母菌
C. T4噬菌体 D. 质粒DNA
【答案】B
【解析】
糖蛋白必须经过内质网、高尔基体加工将蛋白质糖基化,形成成熟的蛋白质,所以只有真核生物细胞内含有内质网和高尔基体,选项中只有酵母菌是真核生物,所以B选项正确。
5.下列关于基因工程技术的叙述,不正确的是( )
A. 重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、DNA连接酶和运载体
B. 某限制酶能识别GAATTC序列并在G和A之间切开利用了酶的专一性
C. 选用细菌作为重组质粒的受体细胞是因为细菌繁殖快
D. 成功将抗虫基因导入棉花后产生的变异属于基因重组
【答案】A
【解析】
【分析】
1、DNA重组技术至少需要三种工具:限制性核酸内切酶(限制酶)、DNA连接酶、运载体。
2、限制酶:主要从原核生物中分离纯化出来.特异性:能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。
3、DNA连接酶是在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键,而DNA聚合酶只能将单个脱氧核苷酸加到已有的核苷酸片段上,形成磷酸二酯键。
【详解】重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、DNA连接酶,运载体不是酶,A错误;限制酶具有专一性,一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并在特定位点切割磷酸二酯键,B正确;细菌作为受体细胞原因有多个,如细胞体积小,繁殖周期短,遗传物质少等,C正确;将目的基因导入受体细胞并与受体细胞原有的基因重新组合,属于基因重组,D正确。
【点睛】注意两点:一是不能将基因工程的操作工具与工具酶混淆,操作工具包括三种,即限制酶、DNA连接酶和运载体,而工具酶只有两种限制酶、DNA连接酶;二是基因工程的实质是基因重组。
6.下列各项不属于基因工程的应用的是( )
A. 转基因抗虫棉的培育成功
B. 利用DNA探针检测饮用水中有无病毒
C. 利用工程菌生产胰岛素
D. 将甲植物的叶绿体移入乙植物,使光合效率提高
【答案】D
【解析】
【分析】
基因工程是指按照人们的意愿,进行严格的设计,并通过体外DNA重组和转基因等技术,从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品;
植物基因工程的应用:①抗虫转基因植物;②抗病转基因植物;③抗逆转基因植物;④转基因改良植物品质;
动物基因工程的成果:①提高动物的生长速度:外源生长激素基因;②改善畜产品的品质;③转基因动物生产药物;④转基因动物作器官移植的供体;⑤基因工程药物,如人胰岛素、细胞因子、抗体、疫苗、生长激素、干扰素等。
【详解】转基因抗虫棉的培育成功属于植物基因工程的应用,A错误;探针是用放射性同位素(或荧光分子)标记的含有目的基因单链DNA片段,所以属于基因工程在实际中的应用,B错误;工程菌是指利用基因工程技术将外源基因导入受体细胞的过程,所以属于基因工程在实际中的应用,C错误;将甲植物细胞内的叶绿体移入乙植物细胞内属于细胞工程,不属于基因工程在实际中的应用,D正确。
【点睛】注意细胞工程与基因工程的本质区别是解答本的关键。
7.你认为支持基因工程技术的理论有( )
①遗传密码的通用性 ②不同基因可独立表达 ③不同基因表达可互相影响 ④DNA作为遗传物质能够严格地自我复制
A. ①②④ B. ②③④
C. ①③ D. ①④
【答案】A
【解析】
【分析】
不同生物的DNA具有相同的结构和化学组成,因此一种生物的基因能与另一种生物的基因连接起来;自然界中所有的生物共用一套遗传密码,因此一种生物的基因可以在另一种生物体内表达。
【详解】①遗传密码具有通用性,这可以保证一种生物的基因在另一种生物细胞中表达,①正确;②基因可独立表达,这可以保证基因的表达不受受体生物体内基因的影响,②正确;③基因可独立表达,不受受体细胞中基因的影响,③错误;④DNA作为遗传物质能够严格地自我复制,这可以保证目的基因在受体内其上的遗传信息扩大,④正确.故选A。
8.水母发光蛋白由236个氨基酸构成,其中Asp、Gly和Ser构成发光环,现已将这种蛋白质的基因作为生物转基因的标记。在转基因技术中,这种蛋白质的作用是
A. 促使目的基因导入受体细胞中 B. 促使目的基因在受体细胞中复制
C. 筛选出获得目的基因的受体细胞 D. 使目的基因容易成功表达
【答案】C
【解析】
标记基因表达出的蛋白质不能促使目的基因导入受体细胞中,A错误;标记基因表达出的蛋白质不能促使目的基因在受体细胞中复制,B错误;发光蛋白作为标记基因,便于重组后重组DNA分子的筛选,也就是有利于对目的基因是否导入进行检测,C正确;目的基因的表达与标记基因无关,D错误。
9. 关于转基因技术的应用,不正确的是
A. 可以将抗病虫害、抗除草剂等基因转入农作物使其具有相应的抗性
B. 可以使用DNA重组的微生物,生产稀缺的基因药物
C. 可以通过转基因技术使奶牛变成生物反应器,使它们的奶中富含某种营养物质、珍贵药材或人类所需要的蛋白质
D. 将不同生物的DNA进行转移和重组,可以创造出新物种
【答案】D
【解析】
试题分析:可以将抗病虫害、抗除草剂等基因转入农作物使其具有相应的抗性,A正确;可以使用DNA重组的微生物,生产稀缺的基因药物,B正确;可以通过转基因技术使奶牛变成生物反应器,使它们的奶中富含某种营养物质、珍贵药材或人类所需要的蛋白质,C正确;将不同生物的DNA进行转移和重组,可以创造出新品种,但不能产生新物种,D错误.
考点:基因工程的原理及技术
10. 为达到相应的目的,必须通过分子检测的是
A. 携带链霉素抗性基因受体菌的筛选
B. 产生抗人白细胞介素-8抗体的杂交瘤细胞的筛选
C. 转基因抗虫棉植株抗虫效果的鉴定
D. 21三体综合征的诊断
【答案】B
【解析】
熟悉检测手段应用的范围是解决本题的关键。逐项解析如下:携带链霉素抗性基因受体菌的筛选方法有两种:①可利用含链霉素的培养基培养菌体进行,②用标记的链霉素抗性基因通过分子杂交技术筛选;A项错误。筛选出抗人白细胞介素-8抗体的杂交瘤细胞,只能用抗原——抗体杂交技术;B项正确。转基因抗虫棉植株抗虫效果的鉴定,属于个体生物学水平的鉴定,需要做抗虫的接种实验来确定;C项错误。21三体综合征是由于患者的21号染色体比正常者的多一条导致,因此该病的诊断科可通过显微镜下对染色体的观察确定;D项错误。
【考点定位】本题考查分子水平、个体水平上的鉴定方法,意在考查考生对知识的识记及理解应用能力。
11. 下列有关人胰岛素基因表达载体的叙述,正确的是( )
A. 表达载体中的胰岛素基因可通过人肝细胞mRNA反转录获得
B. 表达载体的复制和胰岛素基因的表达均启动于复制原(起)点
C. 借助抗生素抗性基因可将含胰岛素基因的受体细胞筛选出来
D. 启动子和终止密码子均在胰岛素基因的转录中起作用
【答案】C
【解析】
人肝细胞中胰岛素基因不表达,因而不存在胰岛素mRNA;A错误。复制原点是基因表达载体复制的起点,而胰岛素基因表达的起点是启动子;B错误。借助抗生素抗性基因可将含胰岛素基因的受体细胞筛选出来;C正确。启动子与RNA聚合酶结合启动转录过程,终止密码子是翻译的终止信号;D错误。
【考点定位】本题主要是考查利用基因工程改造生物体性状的操作要点。
12.下列关于基因工程技术的叙述,正确的是( )
A. 切割质粒的限制性核酸内切酶均特异性地识别6个核苷酸序列
B. PCR反应中温度的周期性改变是为了DNA聚合酶催化不同的反应
C. 载体质粒通常采用抗生素合成基因作为筛选标记基因
D. 抗虫基因即使成功地插入到植物细胞染色体上也未必能正常表达
【答案】D
【解析】
【分析】
能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂.大多数限制性核酸内切酶识别6个核苷酸序列,少数限制酶识别序列由4、5或8个核苷酸组成。PCR技术的过程:高温解链、低温复性、中温延伸。质粒中的标记基因一般用抗生素抗性基因或荧光标记基因。
【详解】大多数限制性核酸内切酶识别6个核苷酸序列,少数限制酶识别序列由4、5或8个核苷酸组成,A错误;PCR反应中温度的周期性改变是为了变性、复性、延伸,B错误;载体质粒通常采用抗生素抗性基因作为筛选标记基因,C错误;抗虫基因即使成功地插入到植物细胞染色体上也未必能正常表达,需要进行检测和鉴定,D正确。
【点睛】易错选项C,容易将“抗生素抗性基因”与“抗生素合成基因”混淆,前者可作为标记基因,而后者却不是。
13.以下说法正确的是( )
A. 所有的限制酶只能识别同一种特定的核苷酸序列
B. 质粒是基因工程中惟一的运载体
C. 运载体必须具备的条件之一是:具有一个或多个限制酶切点,以便与外源基因连接
D. 基因治疗主要是对有缺陷的细胞进行修复
【答案】C
【解析】
【分析】
DNA重组技术至少需要三种工具:限制性核酸内切酶(限制酶)、DNA连接酶、运载体。
限制酶:主要从原核生物中分离纯化出来.特异性:能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。
常用的运载体:质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒。
作为运载体必须具备的条件:①要具有限制酶的切割位点;②要有标记基因(如抗性基因),以便于重组后重组子的筛选;③能在宿主细胞中稳定存在并复制;④是安全的,对受体细胞无害,而且要易从供体细胞分离出来。
【详解】一种限制性核酸内切酶只能识别一种特定的核苷酸序列,说明酶具有专一性,A错误;质粒是基因工程中常用的载体,除此之外还有动植物病毒、噬菌体等,B错误;载体必须具备条件之一是:具有一个或多个限制性核酸内切酶切点,以便与外源基因连接,C正确;基因治疗是把正常基因导入病人体内有缺陷的细胞中,使该基因的表达产物发挥功能,从而达到治疗疾病的目的,D错误。
【点睛】熟悉基因工程中三种操作工具是解答本题的关键。
14. 下列与基因工程无关的是
A. 利用“工程菌”生产胰岛素 B. 基因治疗
C. 蛋白质工程 D. 杂交育种
【答案】D
【解析】
试题分析:“工程菌”是指利用基因工程技术将外源基因导入受体细胞的过程,所以与基因工程有关,故A不合题意;基因治疗是指把正常基因导入病人体内有缺陷的细胞中,使该基因的表达产物发挥功能,从而达到治疗疾病的目的,所以与基因工程有关,故B不合题意;蛋白质工程的本质是通过基因改造或基因合成,对先有蛋白质进行改造或制造新的蛋白质,所以被形象地称为第二代基因工程,所以与基因工程有关,故C不合题意;杂交育种是利用基因重组的原理将具有不同优良性状的个体杂交,从子代杂合体中逐代自交选出能稳定遗传的符合生产要求的个体,属于常规育种,与基因工程无关,故D符合题意。
考点:本题考查基因工程的有关知识,意在考查考生理解所学知识的要点,把握知识间的内在联系的能力。
15.关于如图所示DNA分子的说法,正确的是( )
A. 限制酶作用于①部位,DNA连接酶作用于③部位
B. 该DNA的特异性表现在碱基种类和比例上
C. 若该DNA中A为p个,占全部碱基n/m(m>2n),则G的个数为(pm/2n)﹣p
D. 把该DNA放在含15N的培养液中复制两代,子代中含15N的DNA占1/2
【答案】C
【解析】
【分析】
1、DNA分子是由2条反向平行的脱氧核苷酸链组成的规则的双螺旋结构,两条链上的碱基遵循A与T配对、G与C配对的碱基互补配对原则,配对的碱基相等;
2、不同DNA分子的碱基种类一般相同,都含有A、T、G、C四种碱基,DNA分子中特定的脱氧核苷酸的排列顺序构成DNA分子的特异性;
3、限制酶又叫限制性核酸内切酶,作用是识别特定的核苷酸序列并水解特定的核苷酸之间磷酸二酯键,DNA连接酶是在限制酶水解的磷酸二酯键部位形成磷酸二酯键;
4、DNA分子的复制方式是半保留复制,新合成的DNA分子是由1条模板链和一条子链双螺旋形成的。
【详解】限制酶是识别特定的核苷酸序列并水解特定的核苷酸之间磷酸二酯键,DNA连接酶是在限制酶水解的磷酸二酯键部位形成磷酸二酯键,A错误;DNA分子的碱基比例体现DNA分子的特异性,碱基种类不能体现特异性,不同DNA分子的碱基种类都是A、T、G、C四种,B错误;DNA分子中A+G=T+C=50%,如果DNA中含有p个A,占全部碱基n/m,则DNA分子的碱基总数是mp/n,所以G的个数为(mp/2n)-p,C正确;DNA分子是半保留复制,新合成的DNA分子都含有新合成的子链,因此DNA放在含15N的培养液中复制两代,子代中含15N的DNA占100%,D错误。
【点睛】本题易错点:容易忽视所给的双链DNA中一条链带15N,而一条链带14N。
16. 下列有关基因工程的叙述,正确的是( )
A. DNA连接酶能将碱基对之间的氢键连接起来
B. 目的基因导入受体细胞后,受体细胞即发生基因突变
C. 限制性核酸内切酶识别序列越短,则该序列在DNA中出现的几率就越大
D. Taq酶是PCR过程中常用的一种耐高温的DNA连接酶
【答案】C
【解析】
DNA连接酶是催化断开的DNA链连接起来的酶,催化连接的是DNA链的磷酸骨架,即催化磷酸二酯键的形成,A错误;目的基因导入受体细胞后,受体细胞即发生基因重组,B错误;限制性核酸内切酶识别序列越短,则该序列在DNA中出现的几率就越大,C正确;Taq酶是PCR过程中常用的一种耐高温的DNA聚合酶,D错误。
17. 科学家利用生物技术将人的生长激素基因导入小鼠受精卵的细胞核中,经培育获得一种转基因小鼠,其膀胱上皮细胞可以合成并分泌人的生长激素,在医学研究及相关疾病的治疗方面都具有重要意义。下列有关叙述错误的是( )
A. 选择受精卵作为外源基因的受体细胞是因为该细胞全能性较高
B. 采用DNA分子杂交技术可检测外源基因在小鼠细胞内是否成功表达
C. 人的生长激素基因能在小鼠细胞中成功表达,说明遗传密码具有通用性
D. 与乳腺生物反应器相比,膀胱生物反应器不受性别等限制,受体来源更广泛
【答案】B
【解析】
试题分析:动物基因工程中,选择受精卵作为外源基因的受体细胞是因为该细胞全能性较高,A正确;采用DNA分子杂交技术可检测外源基因在小鼠细胞内是否稳定存在及是否正常转录,但不能检测其是否翻译,B错误;人的生长激素基因能在小鼠细胞中成功表达,说明遗传密码具有通用性,C正确;与乳腺生物反应器相比,膀胱生物反应器不受性别等限制,受体来源更广泛,D正确。
考点:本题考查基因工程及其应用的相关知识,意在考查考生能理解所学知识的要点,把握知识间的内在联系,形成知识网络的能力。
18.下图1表示含有目的基因的DNA片段和部分碱基序列,图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有MspⅠ、BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ4种限制性核酸内切酶切割的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、G↓GATCC.↓GATC.CCC↓GGG。下列叙述正确的是( )
A. 上述4种限制性核酸内切酶中BamHⅠ、MboⅠ切出的粘性末端不相同
B. BamHⅠ、MboⅠ酶切DNA后加DNA连接酶重新拼接,都能被MboⅠ再次切割
C. MspⅠ、SmaⅠ切出的两个末端可以用DNA连接酶相互连接
D. 作为载体的质粒上,原本一定就有抗生素A抗性基因
【答案】B
【解析】
限制酶BamHⅠ和MboⅠ的识别序列分别为G↓GATCC和↓GATC,所以切出的粘性末端相同,都是GATC,A错误;BamHⅠ、MboⅠ酶切DNA后加DNA连接酶重新拼接,形成的序列含GATC,所以都能被MboⅠ再次切割,B正确;限制酶MspⅠ、SmaⅠ的识别序列分别为C↓CGG、CCC↓GGG,所以切出的粘性末端不相同,因而不能用DNA连接酶相互连接,C错误;作为载体的质粒上,原本不一定就有抗生素A抗性基因,D错误。
19.以下有关蛋白质工程的叙述,不正确的是( )
A. 蛋白质工程是在基因工程的基础上延伸出来的第二代基因工程
B. 蛋白质工程的原理是从预期的蛋白质功能出发最终找到脱氧核苷酸序列的过程
C. T4溶菌酶中引入二硫键提高了它的热稳定性是蛋白质工程应用的体现
D. 蛋白质工程只能改造现有的蛋白质而不能制造新的蛋白质
【答案】D
【解析】
试题分析:蛋白质工程是将控制蛋白质合成的基因进行加工修饰改造或合成新的基因,然后运用基因工程合成新的蛋白质;蛋白质工程的原理是从预期的蛋白质功能出发最终找到脱氧核苷酸序列的过程;T4溶菌酶中引入二硫键提高热稳定性,属于新蛋白质,是蛋白质工程应用的体现;蛋白质工程可合成新的蛋白质。
考点:本题考查蛋白质工程的知识。
点评:本题难度中等,属于考纲理解层次。解答本题的关键是理解蛋白质工程和基因工程的区别,前者是合成新的蛋白质,后者是合成原有的蛋白质。
20.基因工程常用土壤农杆菌Ti质粒作为载体,需把目的基因插入Ti质粒的T-DNA才能整合到植物染色体DNA上。下图表示抗虫棉培育中使用的三种限制酶A.B.C的识别序列以及Ti质粒上限制酶切割位点的分布,抗虫基因内部不含切割位点,两侧标明序列为切割区域。下列叙述错误的是
A. 应该使用酶B和酶C切取抗虫基因
B. 应该使用酶A和酶B切割Ti质粒
C. 成功建构的重组质粒含1个酶A的识别位点
D. 成功建构的重组质粒用酶C处理将得到2个DNA片段
【答案】C
【解析】
试题分析:由图中DNA序列和酶切位点序列可知应使用酶B和酶C切割抗虫基因,故A正确。导入的目的基因时应在T-DNA上,因此Ti质粒应用酶A和酶B切割,因为酶A和酶C也能互补配对,可以将目的基因连接进去,故B正确。成功构建的重组质粒含2个酶A识别位点,故C错误。成功构建的重组质粒用酶C处理能得到2个DNA片段,应是A-C,和C-A片段,故D正确。
考点:本题考查基因工程相关知识,意在考察考生对知识点的理解掌握和对图形信息的分析能力。
21. 下面是3种限制性核酸内切酶对DNA分子的识别序列和剪切位点图(箭头表示切点,切出的断面为粘性末端)。下列叙述错误的是( )
限制酶1:——↓GATC——;
限制酶2:——CCGC↓GG——;
限制酶3:——G↓GATCC——
A. 不同的限制酶有不同的识别序列和切割位点,体现了酶的专一性
B. 限制酶2和3识别的序列都包含6个碱基对
C. 限制性酶1和酶3剪出的粘性末端相同
D. 能够识别和切割RNA分子内一小段核苷酸序列的酶只有限制酶2
【答案】D
【解析】
酶具有专一性,不同的限制酶有不同的识别序列和切割位点,A正确;图中可得,限制酶2和3识别的序列分别是CCGCGG和GGATCC,均为6个碱基对,B正确;限制酶1和3剪出的粘性末端相同,均为-GATC-,C正确;限制酶只能识别特定的DNA序列,因此三种限制酶均不能识别和切割RNA中核糖核苷酸序列,D错误。
22.下图是利用基因工程技术培育转基因植物、生产可食用疫苗的部分过程示意图,其中PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ为四种限制性内切酶。下列说法错误的是( )
A. 图示过程是基因工程的核心步骤
B. 表达载体构建时需要用到限制酶SmaⅠ
C. 抗卡那霉素基因的存在有利于将含有抗原基因的细胞筛选出来
D. 除图示组成外,表达载体中还应该含有启动子和终止子等结构
【答案】B
【解析】
【分析】
根据题意和图示分析可知:图示表示基因表达载体的构建过程,含抗原基因的DNA分子中含有PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ三种限制性核酸内切酶的识别序列,其中SmaⅠ的识别序列位于目的基因上;质粒中含有PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ四种限制性核酸内切酶的识别序列。
【详解】图示表示基因表达载体的构建过程,这是基因工程的核心步骤,A正确;限制酶SmaⅠ的识别序列位于目的基因上,因此表达载体构建时不能用限制酶SmaⅠ,应用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ,B错误;抗卡那霉素基因属于抗性基因,其存在有利于将含有抗原基因的细胞筛选出来,C正确;基因表达载体一般包括目的基因(抗原基因)、标记基因(抗卡那霉素基因)、启动子和终止子,D正确。
【点睛】选择限制酶需要满足两个条件:一是所选的限制酶不能破坏目的基因的内在结构;二是不能全部破坏运载体上的标记基因。
23.下图四种质粒含有E1和E2两种限制酶的识别位点,Apr表示抗青霉素的抗性基因,Tcr表示抗四环素的抗性基因。将两端用E1切开的Tcr基因与用E1切开的质粒混合连接,连接后获得的质粒类型不可能是( )
A. B. C. D.
【答案】D
【解析】
Tcr基因的黏性末端是E1限制酶识别序列,不能与E2限制酶切割形成的黏性末端拼接。
24.运用现代生物技术,将苏云金芽孢杆菌的抗虫基因整合到棉花细胞中,为检测实验是否成功,最方便的方法是检测棉花植株是否有( )
A. 抗虫基因 B. 抗虫基因产物
C. 新的细胞核 D. 相应性状
【答案】D
【解析】
试题分析:AB都要从分子水平检测,分别用到DNA分子杂交和抗原-抗体杂交检测。新细胞核要从细胞水平检测。抗虫性状只需要检测个体对害虫的抗性,最简便,D正确。
考点:本题考查基因工程相关知识,意在考查考生能理解所学知识的要点,把握知识间的内在联系,形成知识的网络结构能力。
25.转基因动物基因的受体细胞是( )
A. 受精卵 B. 精细胞 C. 卵细胞 D. 体细胞
【答案】A
【解析】
【分析】
细胞的全能性是指已经分化的细胞具有发育成完整个体的潜能.一般全能性大小关系为:受精卵>生殖细胞>体细胞。
【详解】由于受精卵的全能性最高,并且能够发育成完整个体,因此转基因动物转基因时的理想的受体细胞是受粗卵,A正确;动物的精细胞不能发育成完整个体,因此不用做基因工程的受体细胞,B错误;只有少数动物的卵细胞能够发育成个体,因此不用做基因工程的受体细胞,C错误;由于体细胞的全能性受到限制,因此不用做基因工程的受体细胞,D错误。
26.下列有关基因工程的应用中,对人类不利的是( )
A. 制造“工程菌”用于药品生产
B. 制造“超级菌”分解石油、农药
C. 重组DNA诱发受体细胞基因突变
D. 导入外源基因替换缺陷基因
【答案】C
【解析】
重组DNA诱发受体细胞基因突变,在导入目的基因的同时,使受体生物发生了不利改变。
27.基因工程中常用细菌等原核生物作受体细胞的原因不包括
A. 繁殖速度快 B. 遗传物质相对较少
C. 多为单细胞,操作简便 D. DNA为单链,变异少
【答案】D
【解析】
原核生物繁殖快,可很快获得大量的转基因生物,A正确;原核生物的遗传物质相对较少,这样减少对目的基因的干扰,B正确;原核生物多为单细胞,一般采用Ca2+处理法,相对简单,C正确;细菌的遗传物质是DNA,且DNA也是双链的,D错误。
28. 下列有关限制性核酸内切酶的叙述中错误的是( )
A. 用限制酶从一个DNA分子中部获取一个目的基因时,4个磷酸二酯键断裂
B. 限制酶识别序列越短,则该序列在DNA中出现的几率就越小
C. —CATG↓—和—G↓GATCC—序列被限制酶切出的黏性末端碱基数相同
D. 用不同的限制酶处理含目的基因的片段和质粒,也可能形成重组质粒
【答案】B
【解析】
用限制酶从一个DNA分子中部获取一个目的基因时,需要对4个切割位点的2个核苷酸之间的磷酸二酯键切割,故4个磷酸二酯键断裂,A正确;限制酶识别序列越短,则该序列在DNA中出现的几率就越大,B错误;—CATG↓被限制酶切出的黏性末端是—CATG,—G↓GATCC—被限制酶切出的黏性末端是GATC—,黏性末端碱基数都是4个,故C正确。不同的限制酶切割也能形成相同的黏性末端,经DNA连接酶连接也能形成重组质粒,故D正确。
29.下列关于生物工程中相关酶的叙述正确的是
A. DNA连接酶可把目的基因与载体连接形成重组DNA
B. 限制酶将DNA分子切成两个片段可产生两分子的水
C. 纤维素酶和果胶酶处理植物细胞直接获得杂种细胞
D. 胰蛋白酶或胃蛋白酶处理动物组织块使细胞分散开
【答案】A
【解析】
DNA连接酶可把目的基因与载体连接形成重组DNA,A正确;限制性核酸内切酶将一个DNA分子片段切成两个片段需消耗两个水分子,B错误;纤维素酶和果胶酶处理植物细胞直接获得原生质体,C错误;动物细胞培养过程中,应该用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理动物组织块使细胞分散开,D错误。
30.基因治疗是( )
A. 把健康的外源基因导入有基因缺陷的细胞中,达到治疗疾病的目的
B. 对有基因缺陷的细胞进行修复,从而使其恢复正常,达到治疗疾病的目的
C. 运用人工诱变的方法,使有基因缺陷的细胞发生基因突变恢复正常
D. 运用基因工程技术,把有基因缺陷的基因切除,达到治疗疾病的目的
【答案】A
【解析】
【分析】
基因治疗是把正常的基因导入病人体内,使该基因表达产物发挥作用,达到治疗疾病的目的。
【详解】基因治疗只是把正常基因导入病人体内,并没有对有基因缺陷的细胞进行修复,A正确;基因治疗是把正常基因导入病人体内,是该基因的表达产物发挥功能,达到治疗疾病的目的,B错误;人工诱变具有不定向性,并且是多害少利的,C错误;基因治疗是把正常基因导入病人体内,达到治疗疾病的目的,并没有切除基因,D错误。
【点睛】解答该题只需识记基因治疗的概念即能解题。
31.SP8噬菌体侵染枯草杆菌后,将产生的mRNA与分开的SP8—DNA的每条单链混合并进行核酸分子的杂交实验,检测发现mRNA只和其中一条富含嘌呤碱的单链形成杂交分子。下列分析错误的是( )
A. 上述mRNA是在酶的作用下利用细菌的原料合成的
B. 转录及上述核酸分子的杂交过程碱基配对方式不同
C. 上述mRNA是以DNA中富含嘌呤碱的单链为模板转录而来
D. 为检测核酸的杂交结果,常将探针用特殊的分子标记
【答案】B
【解析】
【分析】
分析题意可知,“mRNA只和其中一条富含嘌呤碱的单链形成杂交分子”,说明该mRNA是以DNA中富含嘌呤碱的单链为模板转录形成的。
【详解】噬菌体侵染细菌的过程中,只将DNA注入细菌内,因此SP8噬菌体产生mRNA的过程中,转录过程利用的原料、酶是由枯草杆菌提供,A正确;“mRNA只和其中一条富含嘌呤碱的单链形成杂交分子”,说明该mRNA是以DNA中富含嘌呤碱的单链为模板转录形成的,因此转录及上述核酸分子的杂交过程遵循相同的碱基配对原则,B错误;根据碱基互补配对原则,上述mRNA是以DNA中富含嘌呤碱的单链为模板转录而来,C正确;为检测核酸的杂交结果,可用放射性同位素标记SP8噬菌体的DNA,D正确。
【点睛】注意:核酸分子杂交技术的原理是利用碱基配对的原则让两条单链核酸分子能否连接在一起形成杂交分子。
32.利用基因工程的方法能够高效率地生产出各种高质量、低成本的药品。1978年,科学家将人体内能够产生胰岛素的基因用32P进行标记后与大肠杆菌的DNA分子重组,筛选得到含单胰岛素基因的大肠杆菌并且获得成功表达。下列相关叙述,正确的是
A. 胰岛素基因在大肠杆菌体内转录时,遗传信息通过模板链传递给mRNA
B. 胰岛素基因在大肠杆菌体内表达时,RNA聚合酶的结合位点在RNA上
C. 含胰岛素基因的大肠杆菌连续分裂n次后,子代细胞中32P标记的细胞占1/2n+1
D. 如胰岛素基因含n个碱基,则转录产生的mRNA分子的碱基数是n/2个
【答案】A
【解析】
胰岛素基因在大肠杆菌体内转录时,遗传信息通过模板链传递给mRNA,A项正确;RNA聚合酶的结合位点在DNA上,B项错误;含胰岛素基因的大肠杆菌连续分裂n次后,共形成2n个子代细胞,其中32P标记的细胞是2个,所以子代细胞中32P标记的细胞占1/2n-1,C项错误;如胰岛素基因含n个碱基,由于只有基因的编码区能够转录,故转录产生的mRNA分子的碱基数少于n/2个,D项错误。
【考点定位】DNA分子的复制、遗传信息的转录和翻译
【名师点睛】模型法理解DNA复制和细胞分裂的关系
这样来看,最后形成的4个子细胞有3种情况:第一种情况是4个细胞都是;第2种情况是2个细胞是,1个细胞是,1个细胞是;第3种情况是2个细胞是,另外2个细胞是。
33.下列有关生物技术应用的叙述,不正确的是
A. 利用植物组织培养技术培育花药获得单倍体植株
B. 利用转基因技术把正常基因导入病人细胞进行基因治疗
C. 将α-抗胰蛋白酶基因转入乳腺细胞培育乳汁中含有该酶的转基因羊
D. 将愈伤组织细胞进行诱变处理并筛选得到抗盐碱的烟草新品
【答案】C
【解析】
根据细胞的全能性原理,利用植物组织培养技术培育花药可获得单倍体植株,A项正确;利用转基因技术把正常基因导入病人细胞可进行基因治疗,B项正确;受精卵的全能性容易表达,培育转基因动物应把目的基因转入受精卵,C项错误;愈伤组织分裂旺盛,易于发生突变,将愈伤组织细胞进行诱变处理并筛选可得到抗盐碱的烟草新品,D项正确。
34.下图为DNA分子在不同酶作用下所发生的变化,图中作用过程使用酶的顺序是( )
A. 解旋酶、限制酶、DNA聚合酶、DNA连接酶
B. DNA连接酶、限制酶、DNA聚合酶、解旋酶
C. 限制酶、DNA连接酶、解旋酶、DNA聚合酶
D. DNA聚合酶、DNA连接酶、限制酶、解旋酶
【答案】C
【解析】
本题考查目的基因的获取、构建基因表达载体、DNA复制等过程,要求考生能理解上述过程的操作要点,正确区分限制酶、DNA连接酶、解旋酶及DNA聚合酶在相关过程中的作用。
分析图形可知,①图是利用限制酶切割DNA形成黏性末端,②图是利用DNA连接酶将黏性末端连接起来,③图是利用解旋酶使DNA解开双链的过程,④图是利用DNA聚合酶进行DNA复制的过程,所以C正确,ABD错误。
【点睛】与DNA相关的六种酶的比较是考试的热点,也是学生易错的知识点,现归纳整理如下:
名称
作用部位
作用底物
作用结果
限制酶
磷酸二酯键
DNA
将DNA切成两个片段
DNA连接酶
磷酸二酯键
DNA片段
将两个DNA片段连接为一个DNA分子
DNA聚合酶或热稳定DNA聚合酶
磷酸二酯键
脱氧核苷酸
将单个脱氧核苷酸依次连接到单链末端
DNA (水解)酶
磷酸二酯键
DNA
将DNA片段水解为单个脱氧核苷酸
解旋酶
碱基对之间的氢键
DNA
将双链DNA分子局部解旋为单链,形成两条长链
RNA聚合酶
磷酸二酯键
核糖核苷酸
将单个核糖核苷酸依次连接到单链末端
35.关于基因工程技术的叙述中,错误的是( )
A. 可能通过对天然基因库的影响对生物圈的稳态带来不利
B. 全过程都在细胞外进行
C. 可定向地改造生物的遗传性状
D. 实现了物种间的DNA重组
【答案】B
【解析】
【分析】
基因工程又叫DNA重组技术,是指按照人们的意愿,进行严格的设计,并通过体外DNA重组和转基因等技术,赋予生物以新的遗传特性,从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。
【详解】基因工程可能会引发一些安全性问题,对生物圈的稳态不利,A正确;重组DNA需要在体外进行,但目的基因的表达是在细胞内进行,B错误;基因工程可以定向改造生物,使生物获的新的遗传性状或能表达所需产物,C正确;基因工程中可以将物种间的DNA重组,如苏云金芽孢杆菌的一种毒蛋白质基因可以与质粒重组,之后导入到棉花的受精卵中,成功地培育出抗棉铃虫的转基因抗虫棉,D正确。
【点睛】关键:基因工程的最大意义就在于可以跨物种间实现生物遗传性状的定向改变。
二.非选择题
36.β-葡萄糖苷酸酶(GUS)基因来自大肠杆菌。转GUS基因的植物组织浸泡在含有某底物的缓冲液中,GUS能与底物发生反应,使植物组织呈现蓝色。研究人员利用转GUS基因的葡萄植株,以探究干旱条件对葡萄P启动子的功能是否有诱导作用。请回答:
(1)萄P启动子是________识别并结合的位点。欲获得葡萄P启动子,可根据P启动子的核苷酸序列设计引物,利用该引物和从葡萄细胞获取的________为模板进行PCR扩增。
(2)葡萄P启动子与GUS基因等元件构建基因表达载体,利用________方法将该基因表达载体导入葡萄愈伤组织,葡萄愈伤组织在培养基中经________形成转基因葡萄植株。
(3)上述转基因葡萄植株置于正常条件(无干旱处理)培养,作为_______(填“实验组”或“对照组”)。一段时间后取该组葡萄植株幼根,浸泡在含有底物的缓冲液中,观察幼根颜色变化情况。若葡萄P启动子的功能受干旱诱导,则该组的结果为________。
【答案】 (1). RNA聚合酶 (2). DNA (3). 农杆菌转化法(基因枪法、花粉管通道法) (4). 再分化 (5). 对照组 (6). 不显现蓝色
【解析】
【分析】
基因工程技术的基本步骤:
(1)目的基因的获取:方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成;
(2)基因表达载体的构建:是基因工程的核心步骤,基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等;
(3)将目的基因导入受体细胞:根据受体细胞不同,导入的方法也不一样.将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法;将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法;将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法;
(4)目的基因的检测与鉴定:分子水平上的检测:①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术;②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术;③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术.个体水平上的鉴定:抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。
【详解】(1)启动子是RNA聚合酶识别并结合的位点。PCR是体外扩增DNA的技术,其原理是DNA复制,因此PCR扩增的模板是DNA。
(2)将目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法.将转基因细胞培育成转基因植株需要采用植物组织培养技术,该技术包括脱分化和再分化两个过程,其中再分化是指愈伤组织形成个体的过程。
(3)本题实验目的是“探究干旱条件对葡萄P启动子的功能是否有诱导作用”,其实验自变量是是否干旱条件,因变量是检测观察植物组织是否呈现蓝色。其中实验组是在干旱条件下进行,而对照组则是在正常条件下进行。若葡萄P启动子的功能受干旱诱导,则正常条件(无干旱处理)下GUS基因不能表达,其结果为蓝色(或浅蓝色),而干旱条件下GUS基因能正常表达,其结果为不变蓝色。
【点睛】解答本题需要紧扣题干信息“转GUS基因的植物组织浸泡在含有某底物的缓冲液中,GUS能与底物发生反应,使植物组织呈现蓝色”答题。
37.随着科学技术的发展,化学农药的产量和品种逐年增加,但害虫的抗药性也不断增强,对农作物危害仍然很严重。如近年来,棉铃虫在我国大面积暴发成灾,造成经济损失每年达100亿以上。针对这种情况,江苏农科院开展“转基因抗虫棉”的科技攻关研究,成功地将某种能产生抗虫毒蛋白细菌的抗虫基因导入棉花细胞中,得到的棉花新品种对棉铃虫的毒杀效果高达80%以上。
就以上材料,分析回答:
(1)抗虫基因之所以能接到植物体内去,原因是___________________。
(2)“转基因抗虫棉”具有抗害虫的能力,这表明棉花体内产生了抗虫的_____________物质。这个事实说明,害虫和植物共用一套_____________,蛋白质合成的方式是___________的。
(3)“转基因抗虫棉”抗害虫的遗传信息传递过程可表示为___________________。
(4)该项科技成果在环境保护上的作用是___________________。
(5)科学家预言,此种“转基因抗虫棉”独立种植若干代以后,也将出现不抗虫的植株,此现象来源于___________。
【答案】 (1). 细菌与棉花的DNA结构相同 (2). 毒蛋白 (3). 遗传密码 (4). 相同 (5). DNA(基因)→RNA→蛋白质 (6). 减少农药对环境的污染,保护生态环境或生态平衡 (7). 基因突变
【解析】
【分析】
转基因生物的培育都是利用基因工程技术,需要经过目的基因的获取、基因表达载体构建,转化目的基因和检测和鉴定过程.转基因抗虫棉之所以可以培养成功,是因为棉花和苏云金芽孢杆菌的遗传物质都是DNA,而且DNA 是双螺旋结构和化学成分相同,都遵循碱基互补配对原则,这些保证了基因“嫁接”成功.生物界具有统一性,所有生物共用一套遗传密码。
抗虫棉的产生减少农药对环境的污染,保护生态环境或生态平衡.但是对于抗虫棉等转基因生物的出现,人们对于它们存在不同的观点,有的反对,有的支持,总之,人们在食物安全、生物安全和环境安全等方面发生了激烈的争议。
【详解】(1)基因工程中转基因的结构基础是目的基因与受体细胞基因的结构相同,即都是由四种脱氧核苷酸构成的双螺旋结构,同时,由于使用同一种限制酶切割的黏性末端相同,所以能进行碱基互补配对。
(2)“转基因抗虫棉”具有抗害虫的能力,这表明棉花体内产生了抗虫的物质毒蛋白,这个事实说明,细菌的基因能在植物棉花体内表达,表明细菌和植物共用一套遗传密码,蛋白质合成都由DNA按照转录和翻译的方式合成。
(3)“转基因抗虫棉”抗害虫的遗传信息传递过程就是基因控制蛋白质合成的过程,可表示为DNA(基因)→RNA→蛋白质。
(4)转基因抗虫棉减少了药物的使用,进而减少农药对环境的污染,保护了生态环境或生态平衡。
(5)“转基因抗虫棉”独立种植若干代以后,也将出现不抗虫的植株,属于变异中的基因突变。
【点睛】解答本题的几个关键点:
(1)基因工程中转基因的结构基础是目的基因与受体细胞基因的结构相同;
(2)“转基因抗虫棉”具有抗害虫的能力,则表明棉花体内产生了抗虫的物质;
(3)遗传信息的传递过程就是遗传信息的表达过程;
(4)在一定的外界环境条件或生物内部因素作用下,DNA在复制过程中发生偶然差错,使个别碱基发生缺失、增添、替换,因而改变遗传信息。
38.2015年,屠呦呦因发现青蒿素治疗疟疾的新疗法获奖。工业上青蒿素一般从青蒿植株中提取,产量低,价格高。基因工程及细胞工程等为培育出高青蒿素含量的青蒿提供了思路。科学家先通过紫外线处理大量青蒿幼苗后,偶然发现一株高产植株。通过基因测序发现该高产植株控制青蒿素合成相关的一种关键酶的基因发生了突变。
(1)提取了高产植株的全部DNA后,要想快速大量获得该突变基因可以采用_____技术,该技术的原理是________。
(2)如果用青蒿某个时期mRNA反转录产生的双链cDNA片段,用该双链cDNA进行PCR扩增,进行了30个循环后,理论上可以产生约为________个DNA分子,该双链与载体连接后储存在一个受体菌群中,这个受体菌群就叫做青蒿的________,获得的cDNA与青蒿细胞中该基因碱基序列________(填“相同”或“不同”)。
(3)将获得的突变基因导入普通青蒿之前,先构建基因表达载体,图1、2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答:
用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒,不能使用SamIⅠ切割,原因是________,构建好的重组质粒在其目的基因前要加上特殊的启动子,启动子是________识别结合的位点。
(4)检测目的基因是否表达出相应蛋白质,应采取________技术。目的基因导入组织细胞后,通过________技术培育出青蒿幼苗。
【答案】 (1). PCR (2). DNA复制 (3). 230 (4). cDNA文库(或部分基因文库) (5). 不同 (6). SmaⅠ会破坏质粒的抗性基因及外源DNA中的目的基因 (7). RNA聚合酶 (8). 抗原抗体杂交 (9). 植物组织培养
【解析】
【分析】
1、PCR技术扩增目的基因的原理:DNA双链复制;过程:第一步:加热至90~95℃DNA解链;第二步:冷却到55~60℃,引物结合到互补DNA链;第三步:加热至70~75℃,热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。
2、cDNA文库和基因文库的比较表:
文库类型
cDNA
基因组文库
文库大小
小
大
基因中启动子
无
有
基因中内含子
无
有
基因多少
某种生物的部分基因
某种生物的全部基因
物种间的基因交流
可以
部分基因可以
【详解】(1)PCR技术扩增目的基因的原理为DNA双链复制。
(2)由于PCR技术利用的是DNA双链复制的原理,因此用该双链cDNA进行PCR扩增,进行了30个循环后,理论上可以产生约为230个DNA分子;又由于该基因库是由青蒿某个时期mRNA反转录产生的双链cDNA片段,因此只包含某种生物的部分基因,因此该双链与载体连接后储存在一个受体菌群中,这个受体菌群就叫做青蒿的cDNA文库(或部分基因文库).通过逆转录得到的目的基因中缺少基因结构中的非编码区以及编码区的内含子,因此获得的cDNA与青蒿细胞中该基因碱基序列不同。
(3)分析图2可知,目的基因和抗生素抗性基因中含有SmaⅠ限制酶的切割位点,因此用SmaⅠ切割图中的质粒和外源DNA构建重组质粒,SmaⅠ会破坏质粒的抗性基因及外源DNA中的目的基因。构建好的重组质粒在其目的基因前要加上特殊的启动子,启动子是RNA聚合酶识别结合位点。
(4)检测目的基因是否表达出相应蛋白质,应采取抗原抗体杂交技术.目的基因导入组织细胞后,通过植物组织培养技术培育出青蒿幼苗。
【点睛】关键点:一是PCR技术的原理以及过程;二是选择限制酶的要求;三是目的基因以及表达出的检测方法。
39.为获得生长速度加快的番茄,科研人员对番茄的愈伤组织进行了遗传改造,改造过程用到的部分结构如图。
(1)图中结构P、T是基因成功转录的保证,则结构P是_________________。
(2)图中结构属于目的基因的是__________________。构建基因表达载体时,常需要使用限制酶和DNA连接酶,其中既能连接黏性末端又能连接平末端的酶是________________酶。
(3)构建重组质粒后,将该愈伤组织浸入含有上述质粒的_______________菌液中,通过该菌的转化作用使目的基因进入愈伤组织并插入到细胞的___________________上。
(4)为检测转基因番茄中tms基因是否转录出mRNA,首先要从该组织中提取出mRNA,然后将___________作为探针,根据是否形成_________进而判断tms基因是否转录出mRNA。
(5)根据图中原因分析,该转基因番茄生长速度比普通番茄更快,原因是________________。
【答案】 (1). 启动子 (2). tms、tmr (3). T4DNA连接酶 (4). 农杆菌 (5). 染色体DNA (6). 放射性同位素等标记的tms基因 (7). 杂交带 (8). ms和tmr基因编码产物控制合成了生长素和细胞分裂素,促进了番茄的生长
【解析】
本题考查基因工程的相关知识点,解题要点是识记基因工程的操作工具和操作步骤。
(1)据题干分析,T是终止子,结构P是启动子;
(2)据题干可知,图中的tms、tmr属于目的基因,与生长素和细胞分裂素合成有关,可促进植物生长;常用的DNA连接酶中,T4DNA连接酶既能连接黏性末端又能连接平末端。
(3)将目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法,根据农杆菌的特点,将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上,通过农杆菌的转化作用,可使目的基因进入植物细胞,并将其插入到植物细胞中染色体的DNA上。
(4)检测转基因番茄中tms基因是否转录出mRNA,可从该组织中提取出mRNA,用放射性同位素等标记的tms基因作为探针,根据是否形成杂交带进行判断。
(5)据图分析,转基因番茄生长速度比普通番茄更快,是因为转基因番茄中的ms和tmr基因编码产物控制合成了生长素和细胞分裂素,促进了番茄的生长。
[点睛]:本题知识易错点:1.基因表达载体的组成:复制原点、启动子、目的基因、终止子、标记基因等;2. 目的基因的检测与鉴定①分子水平的检测:a.利用DNA分子杂交技术检测目的基因的有无。b.利用分子杂交技术检测目的基因的转录。c.利用抗原—抗体杂交技术检测目的基因的翻译。②个体生物学水平的鉴定,如抗虫、抗病的接种实验等。
第一次月考试题
一.选择题
1.科学家们经过多年的努力,创立了一种新兴生物技术——基因工程,实施该工程的最终目的是 ( )
A. 定向提取生物体的DNA分子
B. 定向地对DNA分子进行人工“剪切”
C. 定向地改造生物的遗传性状
D. 在生物体外对DNA分子进行改造
【答案】C
【解析】
【分析】
基因工程是指在基因水平上,按照人类的需要进行设计,然后按设计方案创建出具有某种新的性状的生物新品系,并能使之稳定地遗传给后代。
【详解】基因工程的核心技术是DNA重组技术,即利用供体生物的遗传物质,或人工合成的基因,经过体外切割后与适当的载体连接起来,形成重组DNA分子,然后将重组DNA分子导入到受体细胞或受体生物构建转基因生物,该种生物就可以按人类事先设计好的蓝图表现出另外一种生物的某种性状. 因此基因工程的最终目的是定向地改造生物的遗传性状.故选C。
【点睛】关键:基因工程的最大意义就在于可以跨物种实现生物遗传性状的定向改变。
2.基因工程中,切割运载体和含有目的基因的DNA片段时需使用 ( )
A. 同种限制酶 B. 两种限制酶
C. 同种DNA连接酶 D. 两种DNA连接酶
【答案】A
【解析】
【分析】
1、基因工程的基本操作步骤主要包括四步:①目的基因的获取;②基因表达载体的构建;③将目的基因导入受体细胞;④目的基因的检测与表达。
2、基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建,其一般过程为:首先用同种限制酶切割载体和含有目的基因的DNA片段;其次用DNA连接酶将两者连接形成重组DNA分子。
【详解】基因工程中,切割载体和含有目的基因的DNA片段时,需要使用同种限制酶,以产生相同的黏性末端,再在DNA连接酶的作用下形成重组DNA分子.故选A。
【点睛】关键:用限制酶切割的运载体以及切割DNA获取目的基因后,目的需要将二者连接起来,为了让它们的黏性末端能正好进行碱基配对,所以二者切割的限制酶必须是相同的。
3.在下列基因操作的四个基本步骤中,不需要进行碱基互补配对的步骤是( )
A. 人工合成目的基因
B. 将目的基因导入受体细胞
C. 目的基因与运载体结合
D. 目的基因的检测与鉴定
【答案】B
【解析】
【分析】
基因工程的基本操作步骤主要包括四步:①目的基因的获取;②基因表达载体的构建;③将目的基因导入受体细胞;④目的基因的检测与鉴定.其中人工合成目的基因、基因表达载体的构建、目的基因的检测都进行碱基互补配对原则。
【详解】人工合成目的基因的方法是逆转录法,需要进行碱基互补配对,A正确;将目的基因导入受体细胞时,不进行碱基互补配对,B错误;目的基因与运载体结合时,进行碱基互补配对,C正确;检测目的基因时需要用到基因探针,进行碱基互补配对;基因表达包括转录和翻译过程,都要进行碱基互补培养,D正确。
4. 人的糖蛋白必须经内质网和高尔基体进一步加工合成。通过转基因技术,可以使人的糖蛋白基因得以表达的受体细胞是( )
A. 大肠杆菌 B. 酵母菌
C. T4噬菌体 D. 质粒DNA
【答案】B
【解析】
糖蛋白必须经过内质网、高尔基体加工将蛋白质糖基化,形成成熟的蛋白质,所以只有真核生物细胞内含有内质网和高尔基体,选项中只有酵母菌是真核生物,所以B选项正确。
5.下列关于基因工程技术的叙述,不正确的是( )
A. 重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、DNA连接酶和运载体
B. 某限制酶能识别GAATTC序列并在G和A之间切开利用了酶的专一性
C. 选用细菌作为重组质粒的受体细胞是因为细菌繁殖快
D. 成功将抗虫基因导入棉花后产生的变异属于基因重组
【答案】A
【解析】
【分析】
1、DNA重组技术至少需要三种工具:限制性核酸内切酶(限制酶)、DNA连接酶、运载体。
2、限制酶:主要从原核生物中分离纯化出来.特异性:能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。
3、DNA连接酶是在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键,而DNA聚合酶只能将单个脱氧核苷酸加到已有的核苷酸片段上,形成磷酸二酯键。
【详解】重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、DNA连接酶,运载体不是酶,A错误;限制酶具有专一性,一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并在特定位点切割磷酸二酯键,B正确;细菌作为受体细胞原因有多个,如细胞体积小,繁殖周期短,遗传物质少等,C正确;将目的基因导入受体细胞并与受体细胞原有的基因重新组合,属于基因重组,D正确。
【点睛】注意两点:一是不能将基因工程的操作工具与工具酶混淆,操作工具包括三种,即限制酶、DNA连接酶和运载体,而工具酶只有两种限制酶、DNA连接酶;二是基因工程的实质是基因重组。
6.下列各项不属于基因工程的应用的是( )
A. 转基因抗虫棉的培育成功
B. 利用DNA探针检测饮用水中有无病毒
C. 利用工程菌生产胰岛素
D. 将甲植物的叶绿体移入乙植物,使光合效率提高
【答案】D
【解析】
【分析】
基因工程是指按照人们的意愿,进行严格的设计,并通过体外DNA重组和转基因等技术,从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品;
植物基因工程的应用:①抗虫转基因植物;②抗病转基因植物;③抗逆转基因植物;④转基因改良植物品质;
动物基因工程的成果:①提高动物的生长速度:外源生长激素基因;②改善畜产品的品质;③转基因动物生产药物;④转基因动物作器官移植的供体;⑤基因工程药物,如人胰岛素、细胞因子、抗体、疫苗、生长激素、干扰素等。
【详解】转基因抗虫棉的培育成功属于植物基因工程的应用,A错误;探针是用放射性同位素(或荧光分子)标记的含有目的基因单链DNA片段,所以属于基因工程在实际中的应用,B错误;工程菌是指利用基因工程技术将外源基因导入受体细胞的过程,所以属于基因工程在实际中的应用,C错误;将甲植物细胞内的叶绿体移入乙植物细胞内属于细胞工程,不属于基因工程在实际中的应用,D正确。
【点睛】注意细胞工程与基因工程的本质区别是解答本的关键。
7.你认为支持基因工程技术的理论有( )
①遗传密码的通用性 ②不同基因可独立表达 ③不同基因表达可互相影响 ④DNA作为遗传物质能够严格地自我复制
A. ①②④ B. ②③④
C. ①③ D. ①④
【答案】A
【解析】
【分析】
不同生物的DNA具有相同的结构和化学组成,因此一种生物的基因能与另一种生物的基因连接起来;自然界中所有的生物共用一套遗传密码,因此一种生物的基因可以在另一种生物体内表达。
【详解】①遗传密码具有通用性,这可以保证一种生物的基因在另一种生物细胞中表达,①正确;②基因可独立表达,这可以保证基因的表达不受受体生物体内基因的影响,②正确;③基因可独立表达,不受受体细胞中基因的影响,③错误;④DNA作为遗传物质能够严格地自我复制,这可以保证目的基因在受体内其上的遗传信息扩大,④正确.故选A。
8.水母发光蛋白由236个氨基酸构成,其中Asp、Gly和Ser构成发光环,现已将这种蛋白质的基因作为生物转基因的标记。在转基因技术中,这种蛋白质的作用是
A. 促使目的基因导入受体细胞中 B. 促使目的基因在受体细胞中复制
C. 筛选出获得目的基因的受体细胞 D. 使目的基因容易成功表达
【答案】C
【解析】
标记基因表达出的蛋白质不能促使目的基因导入受体细胞中,A错误;标记基因表达出的蛋白质不能促使目的基因在受体细胞中复制,B错误;发光蛋白作为标记基因,便于重组后重组DNA分子的筛选,也就是有利于对目的基因是否导入进行检测,C正确;目的基因的表达与标记基因无关,D错误。
9. 关于转基因技术的应用,不正确的是
A. 可以将抗病虫害、抗除草剂等基因转入农作物使其具有相应的抗性
B. 可以使用DNA重组的微生物,生产稀缺的基因药物
C. 可以通过转基因技术使奶牛变成生物反应器,使它们的奶中富含某种营养物质、珍贵药材或人类所需要的蛋白质
D. 将不同生物的DNA进行转移和重组,可以创造出新物种
【答案】D
【解析】
试题分析:可以将抗病虫害、抗除草剂等基因转入农作物使其具有相应的抗性,A正确;可以使用DNA重组的微生物,生产稀缺的基因药物,B正确;可以通过转基因技术使奶牛变成生物反应器,使它们的奶中富含某种营养物质、珍贵药材或人类所需要的蛋白质,C正确;将不同生物的DNA进行转移和重组,可以创造出新品种,但不能产生新物种,D错误.
考点:基因工程的原理及技术
10. 为达到相应的目的,必须通过分子检测的是
A. 携带链霉素抗性基因受体菌的筛选
B. 产生抗人白细胞介素-8抗体的杂交瘤细胞的筛选
C. 转基因抗虫棉植株抗虫效果的鉴定
D. 21三体综合征的诊断
【答案】B
【解析】
熟悉检测手段应用的范围是解决本题的关键。逐项解析如下:携带链霉素抗性基因受体菌的筛选方法有两种:①可利用含链霉素的培养基培养菌体进行,②用标记的链霉素抗性基因通过分子杂交技术筛选;A项错误。筛选出抗人白细胞介素-8抗体的杂交瘤细胞,只能用抗原——抗体杂交技术;B项正确。转基因抗虫棉植株抗虫效果的鉴定,属于个体生物学水平的鉴定,需要做抗虫的接种实验来确定;C项错误。21三体综合征是由于患者的21号染色体比正常者的多一条导致,因此该病的诊断科可通过显微镜下对染色体的观察确定;D项错误。
【考点定位】本题考查分子水平、个体水平上的鉴定方法,意在考查考生对知识的识记及理解应用能力。
11. 下列有关人胰岛素基因表达载体的叙述,正确的是( )
A. 表达载体中的胰岛素基因可通过人肝细胞mRNA反转录获得
B. 表达载体的复制和胰岛素基因的表达均启动于复制原(起)点
C. 借助抗生素抗性基因可将含胰岛素基因的受体细胞筛选出来
D. 启动子和终止密码子均在胰岛素基因的转录中起作用
【答案】C
【解析】
人肝细胞中胰岛素基因不表达,因而不存在胰岛素mRNA;A错误。复制原点是基因表达载体复制的起点,而胰岛素基因表达的起点是启动子;B错误。借助抗生素抗性基因可将含胰岛素基因的受体细胞筛选出来;C正确。启动子与RNA聚合酶结合启动转录过程,终止密码子是翻译的终止信号;D错误。
【考点定位】本题主要是考查利用基因工程改造生物体性状的操作要点。
12.下列关于基因工程技术的叙述,正确的是( )
A. 切割质粒的限制性核酸内切酶均特异性地识别6个核苷酸序列
B. PCR反应中温度的周期性改变是为了DNA聚合酶催化不同的反应
C. 载体质粒通常采用抗生素合成基因作为筛选标记基因
D. 抗虫基因即使成功地插入到植物细胞染色体上也未必能正常表达
【答案】D
【解析】
【分析】
能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂.大多数限制性核酸内切酶识别6个核苷酸序列,少数限制酶识别序列由4、5或8个核苷酸组成。PCR技术的过程:高温解链、低温复性、中温延伸。质粒中的标记基因一般用抗生素抗性基因或荧光标记基因。
【详解】大多数限制性核酸内切酶识别6个核苷酸序列,少数限制酶识别序列由4、5或8个核苷酸组成,A错误;PCR反应中温度的周期性改变是为了变性、复性、延伸,B错误;载体质粒通常采用抗生素抗性基因作为筛选标记基因,C错误;抗虫基因即使成功地插入到植物细胞染色体上也未必能正常表达,需要进行检测和鉴定,D正确。
【点睛】易错选项C,容易将“抗生素抗性基因”与“抗生素合成基因”混淆,前者可作为标记基因,而后者却不是。
13.以下说法正确的是( )
A. 所有的限制酶只能识别同一种特定的核苷酸序列
B. 质粒是基因工程中惟一的运载体
C. 运载体必须具备的条件之一是:具有一个或多个限制酶切点,以便与外源基因连接
D. 基因治疗主要是对有缺陷的细胞进行修复
【答案】C
【解析】
【分析】
DNA重组技术至少需要三种工具:限制性核酸内切酶(限制酶)、DNA连接酶、运载体。
限制酶:主要从原核生物中分离纯化出来.特异性:能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。
常用的运载体:质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒。
作为运载体必须具备的条件:①要具有限制酶的切割位点;②要有标记基因(如抗性基因),以便于重组后重组子的筛选;③能在宿主细胞中稳定存在并复制;④是安全的,对受体细胞无害,而且要易从供体细胞分离出来。
【详解】一种限制性核酸内切酶只能识别一种特定的核苷酸序列,说明酶具有专一性,A错误;质粒是基因工程中常用的载体,除此之外还有动植物病毒、噬菌体等,B错误;载体必须具备条件之一是:具有一个或多个限制性核酸内切酶切点,以便与外源基因连接,C正确;基因治疗是把正常基因导入病人体内有缺陷的细胞中,使该基因的表达产物发挥功能,从而达到治疗疾病的目的,D错误。
【点睛】熟悉基因工程中三种操作工具是解答本题的关键。
14. 下列与基因工程无关的是
A. 利用“工程菌”生产胰岛素 B. 基因治疗
C. 蛋白质工程 D. 杂交育种
【答案】D
【解析】
试题分析:“工程菌”是指利用基因工程技术将外源基因导入受体细胞的过程,所以与基因工程有关,故A不合题意;基因治疗是指把正常基因导入病人体内有缺陷的细胞中,使该基因的表达产物发挥功能,从而达到治疗疾病的目的,所以与基因工程有关,故B不合题意;蛋白质工程的本质是通过基因改造或基因合成,对先有蛋白质进行改造或制造新的蛋白质,所以被形象地称为第二代基因工程,所以与基因工程有关,故C不合题意;杂交育种是利用基因重组的原理将具有不同优良性状的个体杂交,从子代杂合体中逐代自交选出能稳定遗传的符合生产要求的个体,属于常规育种,与基因工程无关,故D符合题意。
考点:本题考查基因工程的有关知识,意在考查考生理解所学知识的要点,把握知识间的内在联系的能力。
15.关于如图所示DNA分子的说法,正确的是( )
A. 限制酶作用于①部位,DNA连接酶作用于③部位
B. 该DNA的特异性表现在碱基种类和比例上
C. 若该DNA中A为p个,占全部碱基n/m(m>2n),则G的个数为(pm/2n)﹣p
D. 把该DNA放在含15N的培养液中复制两代,子代中含15N的DNA占1/2
【答案】C
【解析】
【分析】
1、DNA分子是由2条反向平行的脱氧核苷酸链组成的规则的双螺旋结构,两条链上的碱基遵循A与T配对、G与C配对的碱基互补配对原则,配对的碱基相等;
2、不同DNA分子的碱基种类一般相同,都含有A、T、G、C四种碱基,DNA分子中特定的脱氧核苷酸的排列顺序构成DNA分子的特异性;
3、限制酶又叫限制性核酸内切酶,作用是识别特定的核苷酸序列并水解特定的核苷酸之间磷酸二酯键,DNA连接酶是在限制酶水解的磷酸二酯键部位形成磷酸二酯键;
4、DNA分子的复制方式是半保留复制,新合成的DNA分子是由1条模板链和一条子链双螺旋形成的。
【详解】限制酶是识别特定的核苷酸序列并水解特定的核苷酸之间磷酸二酯键,DNA连接酶是在限制酶水解的磷酸二酯键部位形成磷酸二酯键,A错误;DNA分子的碱基比例体现DNA分子的特异性,碱基种类不能体现特异性,不同DNA分子的碱基种类都是A、T、G、C四种,B错误;DNA分子中A+G=T+C=50%,如果DNA中含有p个A,占全部碱基n/m,则DNA分子的碱基总数是mp/n,所以G的个数为(mp/2n)-p,C正确;DNA分子是半保留复制,新合成的DNA分子都含有新合成的子链,因此DNA放在含15N的培养液中复制两代,子代中含15N的DNA占100%,D错误。
【点睛】本题易错点:容易忽视所给的双链DNA中一条链带15N,而一条链带14N。
16. 下列有关基因工程的叙述,正确的是( )
A. DNA连接酶能将碱基对之间的氢键连接起来
B. 目的基因导入受体细胞后,受体细胞即发生基因突变
C. 限制性核酸内切酶识别序列越短,则该序列在DNA中出现的几率就越大
D. Taq酶是PCR过程中常用的一种耐高温的DNA连接酶
【答案】C
【解析】
DNA连接酶是催化断开的DNA链连接起来的酶,催化连接的是DNA链的磷酸骨架,即催化磷酸二酯键的形成,A错误;目的基因导入受体细胞后,受体细胞即发生基因重组,B错误;限制性核酸内切酶识别序列越短,则该序列在DNA中出现的几率就越大,C正确;Taq酶是PCR过程中常用的一种耐高温的DNA聚合酶,D错误。
17. 科学家利用生物技术将人的生长激素基因导入小鼠受精卵的细胞核中,经培育获得一种转基因小鼠,其膀胱上皮细胞可以合成并分泌人的生长激素,在医学研究及相关疾病的治疗方面都具有重要意义。下列有关叙述错误的是( )
A. 选择受精卵作为外源基因的受体细胞是因为该细胞全能性较高
B. 采用DNA分子杂交技术可检测外源基因在小鼠细胞内是否成功表达
C. 人的生长激素基因能在小鼠细胞中成功表达,说明遗传密码具有通用性
D. 与乳腺生物反应器相比,膀胱生物反应器不受性别等限制,受体来源更广泛
【答案】B
【解析】
试题分析:动物基因工程中,选择受精卵作为外源基因的受体细胞是因为该细胞全能性较高,A正确;采用DNA分子杂交技术可检测外源基因在小鼠细胞内是否稳定存在及是否正常转录,但不能检测其是否翻译,B错误;人的生长激素基因能在小鼠细胞中成功表达,说明遗传密码具有通用性,C正确;与乳腺生物反应器相比,膀胱生物反应器不受性别等限制,受体来源更广泛,D正确。
考点:本题考查基因工程及其应用的相关知识,意在考查考生能理解所学知识的要点,把握知识间的内在联系,形成知识网络的能力。
18.下图1表示含有目的基因的DNA片段和部分碱基序列,图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有MspⅠ、BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ4种限制性核酸内切酶切割的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、G↓GATCC.↓GATC.CCC↓GGG。下列叙述正确的是( )
A. 上述4种限制性核酸内切酶中BamHⅠ、MboⅠ切出的粘性末端不相同
B. BamHⅠ、MboⅠ酶切DNA后加DNA连接酶重新拼接,都能被MboⅠ再次切割
C. MspⅠ、SmaⅠ切出的两个末端可以用DNA连接酶相互连接
D. 作为载体的质粒上,原本一定就有抗生素A抗性基因
【答案】B
【解析】
限制酶BamHⅠ和MboⅠ的识别序列分别为G↓GATCC和↓GATC,所以切出的粘性末端相同,都是GATC,A错误;BamHⅠ、MboⅠ酶切DNA后加DNA连接酶重新拼接,形成的序列含GATC,所以都能被MboⅠ再次切割,B正确;限制酶MspⅠ、SmaⅠ的识别序列分别为C↓CGG、CCC↓GGG,所以切出的粘性末端不相同,因而不能用DNA连接酶相互连接,C错误;作为载体的质粒上,原本不一定就有抗生素A抗性基因,D错误。
19.以下有关蛋白质工程的叙述,不正确的是( )
A. 蛋白质工程是在基因工程的基础上延伸出来的第二代基因工程
B. 蛋白质工程的原理是从预期的蛋白质功能出发最终找到脱氧核苷酸序列的过程
C. T4溶菌酶中引入二硫键提高了它的热稳定性是蛋白质工程应用的体现
D. 蛋白质工程只能改造现有的蛋白质而不能制造新的蛋白质
【答案】D
【解析】
试题分析:蛋白质工程是将控制蛋白质合成的基因进行加工修饰改造或合成新的基因,然后运用基因工程合成新的蛋白质;蛋白质工程的原理是从预期的蛋白质功能出发最终找到脱氧核苷酸序列的过程;T4溶菌酶中引入二硫键提高热稳定性,属于新蛋白质,是蛋白质工程应用的体现;蛋白质工程可合成新的蛋白质。
考点:本题考查蛋白质工程的知识。
点评:本题难度中等,属于考纲理解层次。解答本题的关键是理解蛋白质工程和基因工程的区别,前者是合成新的蛋白质,后者是合成原有的蛋白质。
20.基因工程常用土壤农杆菌Ti质粒作为载体,需把目的基因插入Ti质粒的T-DNA才能整合到植物染色体DNA上。下图表示抗虫棉培育中使用的三种限制酶A.B.C的识别序列以及Ti质粒上限制酶切割位点的分布,抗虫基因内部不含切割位点,两侧标明序列为切割区域。下列叙述错误的是
A. 应该使用酶B和酶C切取抗虫基因
B. 应该使用酶A和酶B切割Ti质粒
C. 成功建构的重组质粒含1个酶A的识别位点
D. 成功建构的重组质粒用酶C处理将得到2个DNA片段
【答案】C
【解析】
试题分析:由图中DNA序列和酶切位点序列可知应使用酶B和酶C切割抗虫基因,故A正确。导入的目的基因时应在T-DNA上,因此Ti质粒应用酶A和酶B切割,因为酶A和酶C也能互补配对,可以将目的基因连接进去,故B正确。成功构建的重组质粒含2个酶A识别位点,故C错误。成功构建的重组质粒用酶C处理能得到2个DNA片段,应是A-C,和C-A片段,故D正确。
考点:本题考查基因工程相关知识,意在考察考生对知识点的理解掌握和对图形信息的分析能力。
21. 下面是3种限制性核酸内切酶对DNA分子的识别序列和剪切位点图(箭头表示切点,切出的断面为粘性末端)。下列叙述错误的是( )
限制酶1:——↓GATC——;
限制酶2:——CCGC↓GG——;
限制酶3:——G↓GATCC——
A. 不同的限制酶有不同的识别序列和切割位点,体现了酶的专一性
B. 限制酶2和3识别的序列都包含6个碱基对
C. 限制性酶1和酶3剪出的粘性末端相同
D. 能够识别和切割RNA分子内一小段核苷酸序列的酶只有限制酶2
【答案】D
【解析】
酶具有专一性,不同的限制酶有不同的识别序列和切割位点,A正确;图中可得,限制酶2和3识别的序列分别是CCGCGG和GGATCC,均为6个碱基对,B正确;限制酶1和3剪出的粘性末端相同,均为-GATC-,C正确;限制酶只能识别特定的DNA序列,因此三种限制酶均不能识别和切割RNA中核糖核苷酸序列,D错误。
22.下图是利用基因工程技术培育转基因植物、生产可食用疫苗的部分过程示意图,其中PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ为四种限制性内切酶。下列说法错误的是( )
A. 图示过程是基因工程的核心步骤
B. 表达载体构建时需要用到限制酶SmaⅠ
C. 抗卡那霉素基因的存在有利于将含有抗原基因的细胞筛选出来
D. 除图示组成外,表达载体中还应该含有启动子和终止子等结构
【答案】B
【解析】
【分析】
根据题意和图示分析可知:图示表示基因表达载体的构建过程,含抗原基因的DNA分子中含有PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ三种限制性核酸内切酶的识别序列,其中SmaⅠ的识别序列位于目的基因上;质粒中含有PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ四种限制性核酸内切酶的识别序列。
【详解】图示表示基因表达载体的构建过程,这是基因工程的核心步骤,A正确;限制酶SmaⅠ的识别序列位于目的基因上,因此表达载体构建时不能用限制酶SmaⅠ,应用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ,B错误;抗卡那霉素基因属于抗性基因,其存在有利于将含有抗原基因的细胞筛选出来,C正确;基因表达载体一般包括目的基因(抗原基因)、标记基因(抗卡那霉素基因)、启动子和终止子,D正确。
【点睛】选择限制酶需要满足两个条件:一是所选的限制酶不能破坏目的基因的内在结构;二是不能全部破坏运载体上的标记基因。
23.下图四种质粒含有E1和E2两种限制酶的识别位点,Apr表示抗青霉素的抗性基因,Tcr表示抗四环素的抗性基因。将两端用E1切开的Tcr基因与用E1切开的质粒混合连接,连接后获得的质粒类型不可能是( )
A. B. C. D.
【答案】D
【解析】
Tcr基因的黏性末端是E1限制酶识别序列,不能与E2限制酶切割形成的黏性末端拼接。
24.运用现代生物技术,将苏云金芽孢杆菌的抗虫基因整合到棉花细胞中,为检测实验是否成功,最方便的方法是检测棉花植株是否有( )
A. 抗虫基因 B. 抗虫基因产物
C. 新的细胞核 D. 相应性状
【答案】D
【解析】
试题分析:AB都要从分子水平检测,分别用到DNA分子杂交和抗原-抗体杂交检测。新细胞核要从细胞水平检测。抗虫性状只需要检测个体对害虫的抗性,最简便,D正确。
考点:本题考查基因工程相关知识,意在考查考生能理解所学知识的要点,把握知识间的内在联系,形成知识的网络结构能力。
25.转基因动物基因的受体细胞是( )
A. 受精卵 B. 精细胞 C. 卵细胞 D. 体细胞
【答案】A
【解析】
【分析】
细胞的全能性是指已经分化的细胞具有发育成完整个体的潜能.一般全能性大小关系为:受精卵>生殖细胞>体细胞。
【详解】由于受精卵的全能性最高,并且能够发育成完整个体,因此转基因动物转基因时的理想的受体细胞是受粗卵,A正确;动物的精细胞不能发育成完整个体,因此不用做基因工程的受体细胞,B错误;只有少数动物的卵细胞能够发育成个体,因此不用做基因工程的受体细胞,C错误;由于体细胞的全能性受到限制,因此不用做基因工程的受体细胞,D错误。
26.下列有关基因工程的应用中,对人类不利的是( )
A. 制造“工程菌”用于药品生产
B. 制造“超级菌”分解石油、农药
C. 重组DNA诱发受体细胞基因突变
D. 导入外源基因替换缺陷基因
【答案】C
【解析】
重组DNA诱发受体细胞基因突变,在导入目的基因的同时,使受体生物发生了不利改变。
27.基因工程中常用细菌等原核生物作受体细胞的原因不包括
A. 繁殖速度快 B. 遗传物质相对较少
C. 多为单细胞,操作简便 D. DNA为单链,变异少
【答案】D
【解析】
原核生物繁殖快,可很快获得大量的转基因生物,A正确;原核生物的遗传物质相对较少,这样减少对目的基因的干扰,B正确;原核生物多为单细胞,一般采用Ca2+处理法,相对简单,C正确;细菌的遗传物质是DNA,且DNA也是双链的,D错误。
28. 下列有关限制性核酸内切酶的叙述中错误的是( )
A. 用限制酶从一个DNA分子中部获取一个目的基因时,4个磷酸二酯键断裂
B. 限制酶识别序列越短,则该序列在DNA中出现的几率就越小
C. —CATG↓—和—G↓GATCC—序列被限制酶切出的黏性末端碱基数相同
D. 用不同的限制酶处理含目的基因的片段和质粒,也可能形成重组质粒
【答案】B
【解析】
用限制酶从一个DNA分子中部获取一个目的基因时,需要对4个切割位点的2个核苷酸之间的磷酸二酯键切割,故4个磷酸二酯键断裂,A正确;限制酶识别序列越短,则该序列在DNA中出现的几率就越大,B错误;—CATG↓被限制酶切出的黏性末端是—CATG,—G↓GATCC—被限制酶切出的黏性末端是GATC—,黏性末端碱基数都是4个,故C正确。不同的限制酶切割也能形成相同的黏性末端,经DNA连接酶连接也能形成重组质粒,故D正确。
29.下列关于生物工程中相关酶的叙述正确的是
A. DNA连接酶可把目的基因与载体连接形成重组DNA
B. 限制酶将DNA分子切成两个片段可产生两分子的水
C. 纤维素酶和果胶酶处理植物细胞直接获得杂种细胞
D. 胰蛋白酶或胃蛋白酶处理动物组织块使细胞分散开
【答案】A
【解析】
DNA连接酶可把目的基因与载体连接形成重组DNA,A正确;限制性核酸内切酶将一个DNA分子片段切成两个片段需消耗两个水分子,B错误;纤维素酶和果胶酶处理植物细胞直接获得原生质体,C错误;动物细胞培养过程中,应该用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理动物组织块使细胞分散开,D错误。
30.基因治疗是( )
A. 把健康的外源基因导入有基因缺陷的细胞中,达到治疗疾病的目的
B. 对有基因缺陷的细胞进行修复,从而使其恢复正常,达到治疗疾病的目的
C. 运用人工诱变的方法,使有基因缺陷的细胞发生基因突变恢复正常
D. 运用基因工程技术,把有基因缺陷的基因切除,达到治疗疾病的目的
【答案】A
【解析】
【分析】
基因治疗是把正常的基因导入病人体内,使该基因表达产物发挥作用,达到治疗疾病的目的。
【详解】基因治疗只是把正常基因导入病人体内,并没有对有基因缺陷的细胞进行修复,A正确;基因治疗是把正常基因导入病人体内,是该基因的表达产物发挥功能,达到治疗疾病的目的,B错误;人工诱变具有不定向性,并且是多害少利的,C错误;基因治疗是把正常基因导入病人体内,达到治疗疾病的目的,并没有切除基因,D错误。
【点睛】解答该题只需识记基因治疗的概念即能解题。
31.SP8噬菌体侵染枯草杆菌后,将产生的mRNA与分开的SP8—DNA的每条单链混合并进行核酸分子的杂交实验,检测发现mRNA只和其中一条富含嘌呤碱的单链形成杂交分子。下列分析错误的是( )
A. 上述mRNA是在酶的作用下利用细菌的原料合成的
B. 转录及上述核酸分子的杂交过程碱基配对方式不同
C. 上述mRNA是以DNA中富含嘌呤碱的单链为模板转录而来
D. 为检测核酸的杂交结果,常将探针用特殊的分子标记
【答案】B
【解析】
【分析】
分析题意可知,“mRNA只和其中一条富含嘌呤碱的单链形成杂交分子”,说明该mRNA是以DNA中富含嘌呤碱的单链为模板转录形成的。
【详解】噬菌体侵染细菌的过程中,只将DNA注入细菌内,因此SP8噬菌体产生mRNA的过程中,转录过程利用的原料、酶是由枯草杆菌提供,A正确;“mRNA只和其中一条富含嘌呤碱的单链形成杂交分子”,说明该mRNA是以DNA中富含嘌呤碱的单链为模板转录形成的,因此转录及上述核酸分子的杂交过程遵循相同的碱基配对原则,B错误;根据碱基互补配对原则,上述mRNA是以DNA中富含嘌呤碱的单链为模板转录而来,C正确;为检测核酸的杂交结果,可用放射性同位素标记SP8噬菌体的DNA,D正确。
【点睛】注意:核酸分子杂交技术的原理是利用碱基配对的原则让两条单链核酸分子能否连接在一起形成杂交分子。
32.利用基因工程的方法能够高效率地生产出各种高质量、低成本的药品。1978年,科学家将人体内能够产生胰岛素的基因用32P进行标记后与大肠杆菌的DNA分子重组,筛选得到含单胰岛素基因的大肠杆菌并且获得成功表达。下列相关叙述,正确的是
A. 胰岛素基因在大肠杆菌体内转录时,遗传信息通过模板链传递给mRNA
B. 胰岛素基因在大肠杆菌体内表达时,RNA聚合酶的结合位点在RNA上
C. 含胰岛素基因的大肠杆菌连续分裂n次后,子代细胞中32P标记的细胞占1/2n+1
D. 如胰岛素基因含n个碱基,则转录产生的mRNA分子的碱基数是n/2个
【答案】A
【解析】
胰岛素基因在大肠杆菌体内转录时,遗传信息通过模板链传递给mRNA,A项正确;RNA聚合酶的结合位点在DNA上,B项错误;含胰岛素基因的大肠杆菌连续分裂n次后,共形成2n个子代细胞,其中32P标记的细胞是2个,所以子代细胞中32P标记的细胞占1/2n-1,C项错误;如胰岛素基因含n个碱基,由于只有基因的编码区能够转录,故转录产生的mRNA分子的碱基数少于n/2个,D项错误。
【考点定位】DNA分子的复制、遗传信息的转录和翻译
【名师点睛】模型法理解DNA复制和细胞分裂的关系
这样来看,最后形成的4个子细胞有3种情况:第一种情况是4个细胞都是;第2种情况是2个细胞是,1个细胞是,1个细胞是;第3种情况是2个细胞是,另外2个细胞是。
33.下列有关生物技术应用的叙述,不正确的是
A. 利用植物组织培养技术培育花药获得单倍体植株
B. 利用转基因技术把正常基因导入病人细胞进行基因治疗
C. 将α-抗胰蛋白酶基因转入乳腺细胞培育乳汁中含有该酶的转基因羊
D. 将愈伤组织细胞进行诱变处理并筛选得到抗盐碱的烟草新品
【答案】C
【解析】
根据细胞的全能性原理,利用植物组织培养技术培育花药可获得单倍体植株,A项正确;利用转基因技术把正常基因导入病人细胞可进行基因治疗,B项正确;受精卵的全能性容易表达,培育转基因动物应把目的基因转入受精卵,C项错误;愈伤组织分裂旺盛,易于发生突变,将愈伤组织细胞进行诱变处理并筛选可得到抗盐碱的烟草新品,D项正确。
34.下图为DNA分子在不同酶作用下所发生的变化,图中作用过程使用酶的顺序是( )
A. 解旋酶、限制酶、DNA聚合酶、DNA连接酶
B. DNA连接酶、限制酶、DNA聚合酶、解旋酶
C. 限制酶、DNA连接酶、解旋酶、DNA聚合酶
D. DNA聚合酶、DNA连接酶、限制酶、解旋酶
【答案】C
【解析】
本题考查目的基因的获取、构建基因表达载体、DNA复制等过程,要求考生能理解上述过程的操作要点,正确区分限制酶、DNA连接酶、解旋酶及DNA聚合酶在相关过程中的作用。
分析图形可知,①图是利用限制酶切割DNA形成黏性末端,②图是利用DNA连接酶将黏性末端连接起来,③图是利用解旋酶使DNA解开双链的过程,④图是利用DNA聚合酶进行DNA复制的过程,所以C正确,ABD错误。
【点睛】与DNA相关的六种酶的比较是考试的热点,也是学生易错的知识点,现归纳整理如下:
名称
作用部位
作用底物
作用结果
限制酶
磷酸二酯键
DNA
将DNA切成两个片段
DNA连接酶
磷酸二酯键
DNA片段
将两个DNA片段连接为一个DNA分子
DNA聚合酶或热稳定DNA聚合酶
磷酸二酯键
脱氧核苷酸
将单个脱氧核苷酸依次连接到单链末端
DNA (水解)酶
磷酸二酯键
DNA
将DNA片段水解为单个脱氧核苷酸
解旋酶
碱基对之间的氢键
DNA
将双链DNA分子局部解旋为单链,形成两条长链
RNA聚合酶
磷酸二酯键
核糖核苷酸
将单个核糖核苷酸依次连接到单链末端
35.关于基因工程技术的叙述中,错误的是( )
A. 可能通过对天然基因库的影响对生物圈的稳态带来不利
B. 全过程都在细胞外进行
C. 可定向地改造生物的遗传性状
D. 实现了物种间的DNA重组
【答案】B
【解析】
【分析】
基因工程又叫DNA重组技术,是指按照人们的意愿,进行严格的设计,并通过体外DNA重组和转基因等技术,赋予生物以新的遗传特性,从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。
【详解】基因工程可能会引发一些安全性问题,对生物圈的稳态不利,A正确;重组DNA需要在体外进行,但目的基因的表达是在细胞内进行,B错误;基因工程可以定向改造生物,使生物获的新的遗传性状或能表达所需产物,C正确;基因工程中可以将物种间的DNA重组,如苏云金芽孢杆菌的一种毒蛋白质基因可以与质粒重组,之后导入到棉花的受精卵中,成功地培育出抗棉铃虫的转基因抗虫棉,D正确。
【点睛】关键:基因工程的最大意义就在于可以跨物种间实现生物遗传性状的定向改变。
二.非选择题
36.β-葡萄糖苷酸酶(GUS)基因来自大肠杆菌。转GUS基因的植物组织浸泡在含有某底物的缓冲液中,GUS能与底物发生反应,使植物组织呈现蓝色。研究人员利用转GUS基因的葡萄植株,以探究干旱条件对葡萄P启动子的功能是否有诱导作用。请回答:
(1)萄P启动子是________识别并结合的位点。欲获得葡萄P启动子,可根据P启动子的核苷酸序列设计引物,利用该引物和从葡萄细胞获取的________为模板进行PCR扩增。
(2)葡萄P启动子与GUS基因等元件构建基因表达载体,利用________方法将该基因表达载体导入葡萄愈伤组织,葡萄愈伤组织在培养基中经________形成转基因葡萄植株。
(3)上述转基因葡萄植株置于正常条件(无干旱处理)培养,作为_______(填“实验组”或“对照组”)。一段时间后取该组葡萄植株幼根,浸泡在含有底物的缓冲液中,观察幼根颜色变化情况。若葡萄P启动子的功能受干旱诱导,则该组的结果为________。
【答案】 (1). RNA聚合酶 (2). DNA (3). 农杆菌转化法(基因枪法、花粉管通道法) (4). 再分化 (5). 对照组 (6). 不显现蓝色
【解析】
【分析】
基因工程技术的基本步骤:
(1)目的基因的获取:方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成;
(2)基因表达载体的构建:是基因工程的核心步骤,基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等;
(3)将目的基因导入受体细胞:根据受体细胞不同,导入的方法也不一样.将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法;将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法;将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法;
(4)目的基因的检测与鉴定:分子水平上的检测:①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术;②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术;③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术.个体水平上的鉴定:抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。
【详解】(1)启动子是RNA聚合酶识别并结合的位点。PCR是体外扩增DNA的技术,其原理是DNA复制,因此PCR扩增的模板是DNA。
(2)将目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法.将转基因细胞培育成转基因植株需要采用植物组织培养技术,该技术包括脱分化和再分化两个过程,其中再分化是指愈伤组织形成个体的过程。
(3)本题实验目的是“探究干旱条件对葡萄P启动子的功能是否有诱导作用”,其实验自变量是是否干旱条件,因变量是检测观察植物组织是否呈现蓝色。其中实验组是在干旱条件下进行,而对照组则是在正常条件下进行。若葡萄P启动子的功能受干旱诱导,则正常条件(无干旱处理)下GUS基因不能表达,其结果为蓝色(或浅蓝色),而干旱条件下GUS基因能正常表达,其结果为不变蓝色。
【点睛】解答本题需要紧扣题干信息“转GUS基因的植物组织浸泡在含有某底物的缓冲液中,GUS能与底物发生反应,使植物组织呈现蓝色”答题。
37.随着科学技术的发展,化学农药的产量和品种逐年增加,但害虫的抗药性也不断增强,对农作物危害仍然很严重。如近年来,棉铃虫在我国大面积暴发成灾,造成经济损失每年达100亿以上。针对这种情况,江苏农科院开展“转基因抗虫棉”的科技攻关研究,成功地将某种能产生抗虫毒蛋白细菌的抗虫基因导入棉花细胞中,得到的棉花新品种对棉铃虫的毒杀效果高达80%以上。
就以上材料,分析回答:
(1)抗虫基因之所以能接到植物体内去,原因是___________________。
(2)“转基因抗虫棉”具有抗害虫的能力,这表明棉花体内产生了抗虫的_____________物质。这个事实说明,害虫和植物共用一套_____________,蛋白质合成的方式是___________的。
(3)“转基因抗虫棉”抗害虫的遗传信息传递过程可表示为___________________。
(4)该项科技成果在环境保护上的作用是___________________。
(5)科学家预言,此种“转基因抗虫棉”独立种植若干代以后,也将出现不抗虫的植株,此现象来源于___________。
【答案】 (1). 细菌与棉花的DNA结构相同 (2). 毒蛋白 (3). 遗传密码 (4). 相同 (5). DNA(基因)→RNA→蛋白质 (6). 减少农药对环境的污染,保护生态环境或生态平衡 (7). 基因突变
【解析】
【分析】
转基因生物的培育都是利用基因工程技术,需要经过目的基因的获取、基因表达载体构建,转化目的基因和检测和鉴定过程.转基因抗虫棉之所以可以培养成功,是因为棉花和苏云金芽孢杆菌的遗传物质都是DNA,而且DNA 是双螺旋结构和化学成分相同,都遵循碱基互补配对原则,这些保证了基因“嫁接”成功.生物界具有统一性,所有生物共用一套遗传密码。
抗虫棉的产生减少农药对环境的污染,保护生态环境或生态平衡.但是对于抗虫棉等转基因生物的出现,人们对于它们存在不同的观点,有的反对,有的支持,总之,人们在食物安全、生物安全和环境安全等方面发生了激烈的争议。
【详解】(1)基因工程中转基因的结构基础是目的基因与受体细胞基因的结构相同,即都是由四种脱氧核苷酸构成的双螺旋结构,同时,由于使用同一种限制酶切割的黏性末端相同,所以能进行碱基互补配对。
(2)“转基因抗虫棉”具有抗害虫的能力,这表明棉花体内产生了抗虫的物质毒蛋白,这个事实说明,细菌的基因能在植物棉花体内表达,表明细菌和植物共用一套遗传密码,蛋白质合成都由DNA按照转录和翻译的方式合成。
(3)“转基因抗虫棉”抗害虫的遗传信息传递过程就是基因控制蛋白质合成的过程,可表示为DNA(基因)→RNA→蛋白质。
(4)转基因抗虫棉减少了药物的使用,进而减少农药对环境的污染,保护了生态环境或生态平衡。
(5)“转基因抗虫棉”独立种植若干代以后,也将出现不抗虫的植株,属于变异中的基因突变。
【点睛】解答本题的几个关键点:
(1)基因工程中转基因的结构基础是目的基因与受体细胞基因的结构相同;
(2)“转基因抗虫棉”具有抗害虫的能力,则表明棉花体内产生了抗虫的物质;
(3)遗传信息的传递过程就是遗传信息的表达过程;
(4)在一定的外界环境条件或生物内部因素作用下,DNA在复制过程中发生偶然差错,使个别碱基发生缺失、增添、替换,因而改变遗传信息。
38.2015年,屠呦呦因发现青蒿素治疗疟疾的新疗法获奖。工业上青蒿素一般从青蒿植株中提取,产量低,价格高。基因工程及细胞工程等为培育出高青蒿素含量的青蒿提供了思路。科学家先通过紫外线处理大量青蒿幼苗后,偶然发现一株高产植株。通过基因测序发现该高产植株控制青蒿素合成相关的一种关键酶的基因发生了突变。
(1)提取了高产植株的全部DNA后,要想快速大量获得该突变基因可以采用_____技术,该技术的原理是________。
(2)如果用青蒿某个时期mRNA反转录产生的双链cDNA片段,用该双链cDNA进行PCR扩增,进行了30个循环后,理论上可以产生约为________个DNA分子,该双链与载体连接后储存在一个受体菌群中,这个受体菌群就叫做青蒿的________,获得的cDNA与青蒿细胞中该基因碱基序列________(填“相同”或“不同”)。
(3)将获得的突变基因导入普通青蒿之前,先构建基因表达载体,图1、2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答:
用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒,不能使用SamIⅠ切割,原因是________,构建好的重组质粒在其目的基因前要加上特殊的启动子,启动子是________识别结合的位点。
(4)检测目的基因是否表达出相应蛋白质,应采取________技术。目的基因导入组织细胞后,通过________技术培育出青蒿幼苗。
【答案】 (1). PCR (2). DNA复制 (3). 230 (4). cDNA文库(或部分基因文库) (5). 不同 (6). SmaⅠ会破坏质粒的抗性基因及外源DNA中的目的基因 (7). RNA聚合酶 (8). 抗原抗体杂交 (9). 植物组织培养
【解析】
【分析】
1、PCR技术扩增目的基因的原理:DNA双链复制;过程:第一步:加热至90~95℃DNA解链;第二步:冷却到55~60℃,引物结合到互补DNA链;第三步:加热至70~75℃,热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。
2、cDNA文库和基因文库的比较表:
文库类型
cDNA
基因组文库
文库大小
小
大
基因中启动子
无
有
基因中内含子
无
有
基因多少
某种生物的部分基因
某种生物的全部基因
物种间的基因交流
可以
部分基因可以
【详解】(1)PCR技术扩增目的基因的原理为DNA双链复制。
(2)由于PCR技术利用的是DNA双链复制的原理,因此用该双链cDNA进行PCR扩增,进行了30个循环后,理论上可以产生约为230个DNA分子;又由于该基因库是由青蒿某个时期mRNA反转录产生的双链cDNA片段,因此只包含某种生物的部分基因,因此该双链与载体连接后储存在一个受体菌群中,这个受体菌群就叫做青蒿的cDNA文库(或部分基因文库).通过逆转录得到的目的基因中缺少基因结构中的非编码区以及编码区的内含子,因此获得的cDNA与青蒿细胞中该基因碱基序列不同。
(3)分析图2可知,目的基因和抗生素抗性基因中含有SmaⅠ限制酶的切割位点,因此用SmaⅠ切割图中的质粒和外源DNA构建重组质粒,SmaⅠ会破坏质粒的抗性基因及外源DNA中的目的基因。构建好的重组质粒在其目的基因前要加上特殊的启动子,启动子是RNA聚合酶识别结合位点。
(4)检测目的基因是否表达出相应蛋白质,应采取抗原抗体杂交技术.目的基因导入组织细胞后,通过植物组织培养技术培育出青蒿幼苗。
【点睛】关键点:一是PCR技术的原理以及过程;二是选择限制酶的要求;三是目的基因以及表达出的检测方法。
39.为获得生长速度加快的番茄,科研人员对番茄的愈伤组织进行了遗传改造,改造过程用到的部分结构如图。
(1)图中结构P、T是基因成功转录的保证,则结构P是_________________。
(2)图中结构属于目的基因的是__________________。构建基因表达载体时,常需要使用限制酶和DNA连接酶,其中既能连接黏性末端又能连接平末端的酶是________________酶。
(3)构建重组质粒后,将该愈伤组织浸入含有上述质粒的_______________菌液中,通过该菌的转化作用使目的基因进入愈伤组织并插入到细胞的___________________上。
(4)为检测转基因番茄中tms基因是否转录出mRNA,首先要从该组织中提取出mRNA,然后将___________作为探针,根据是否形成_________进而判断tms基因是否转录出mRNA。
(5)根据图中原因分析,该转基因番茄生长速度比普通番茄更快,原因是________________。
【答案】 (1). 启动子 (2). tms、tmr (3). T4DNA连接酶 (4). 农杆菌 (5). 染色体DNA (6). 放射性同位素等标记的tms基因 (7). 杂交带 (8). ms和tmr基因编码产物控制合成了生长素和细胞分裂素,促进了番茄的生长
【解析】
本题考查基因工程的相关知识点,解题要点是识记基因工程的操作工具和操作步骤。
(1)据题干分析,T是终止子,结构P是启动子;
(2)据题干可知,图中的tms、tmr属于目的基因,与生长素和细胞分裂素合成有关,可促进植物生长;常用的DNA连接酶中,T4DNA连接酶既能连接黏性末端又能连接平末端。
(3)将目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法,根据农杆菌的特点,将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上,通过农杆菌的转化作用,可使目的基因进入植物细胞,并将其插入到植物细胞中染色体的DNA上。
(4)检测转基因番茄中tms基因是否转录出mRNA,可从该组织中提取出mRNA,用放射性同位素等标记的tms基因作为探针,根据是否形成杂交带进行判断。
(5)据图分析,转基因番茄生长速度比普通番茄更快,是因为转基因番茄中的ms和tmr基因编码产物控制合成了生长素和细胞分裂素,促进了番茄的生长。
[点睛]:本题知识易错点:1.基因表达载体的组成:复制原点、启动子、目的基因、终止子、标记基因等;2. 目的基因的检测与鉴定①分子水平的检测:a.利用DNA分子杂交技术检测目的基因的有无。b.利用分子杂交技术检测目的基因的转录。c.利用抗原—抗体杂交技术检测目的基因的翻译。②个体生物学水平的鉴定,如抗虫、抗病的接种实验等。
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