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    【生物】福建省泉州市第十六中学2018-2019学年高二下学期期中考试试题 (解析版)

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    【生物】福建省泉州市第十六中学2018-2019学年高二下学期期中考试试题 (解析版)

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    福建省泉州市第十六中学2018-2019学年高二下学期
    期中考试试题
    一、选择题
    1. 下列关于生态系统信息传递特征的描述,正确的是
    A. 生态系统的物理信息都来源于环境 B. 植物都通过化学物质传递信息
    C. 信息沿食物链从低营养级向高营养级传递 D. 信息可以调节生物种间关系
    【答案】D
    【解析】
    试题分析:A项,生态系统中的光、声、温度、湿度、磁力等,通过物理过程传递的信息称为物理信息,可以来源于无机环境,也可来源于生物,如花朵鲜艳的颜色,故A项错误。B项,除了化学信息外,植物经常利用光来传递信息,不少植物利用花朵鲜艳的颜色吸引昆虫为其传粉,故B项错误。C项,信息可以在同种生物间传递,可以在不同物种间传递,也可以在生物与无机环境之间传递,故C项错误。D项,食物链上相邻的物种的个体行为和种群特征为对方提供了大量有用信息,例如狼可以利用兔留下的气味去捕食兔,可见信息可以调节生物种间关系,故D项正确。

    2.如图是毛白杨树林中两个营养级的能量流动图解,方框中字母代表能量(A代表第二营养级摄入的能量),已知毛白杨树同化的总能量为M。下列叙述不正确的是

    A. A到E的箭头中含有的能量属于生产者同化的能量
    B. 毛白杨树输入下一营养级的能量传递效率为A/M
    C. C是第二营养级用于生长发育和生殖的能量
    D. D是指第二营养级生物呼吸作用消耗的能量
    【答案】B
    【解析】
    已知A表示初级消费者摄入的能量,则A到E的箭头中含有的能量是下一营养级没有同化而流向分解者的能量,属于生产者同化的能量,A正确;毛白杨树同化的总能量为N,B表示初级消费者同化的能量,故从毛白杨树输入下一营养级的能量传递效率为B/M,B错误;B表示初级消费者同化的能量,C表示第二营养级用于生长、发育和繁殖的能量,D表示第二营养级呼吸作用消耗的能量,E表示分解者利用的能量,CD正确。
    【点睛】解答本题的关键是弄清楚图中各个字母代表的能量属于什么营养极、用于什么的能量,明确A中没有被同化的能量不属于第二营养级。

    3. 下列关于消费者的叙述中,错误的是
    A. 消费者在食物网中可占有任何一个营养级
    B. 绝大多数动物是消费者
    C. 消费者都直接或间接以绿色植物为食
    D. 消费者都是异养生物
    【答案】A
    【解析】
    试题分析:消费者在食物网中不能占第一个营养级,第一营养级是生产者,故A错误。绝大多数的动物是消费者,还有部分是分解者,如蜣螂,故B正确。消费者都是直接或者间接以绿色植物为食的,故C正确。消费者都是异养生物,故D正确。
    考点:本题考查消费者相关知识,意在考察考生对知识点的识记理解掌握程度。

    4.下列有关生态系统稳定性叙述正确的是
    A. 生态系统稳定性的原因是具有一定的自我调节能力
    B. 生态系统稳定性的高低通过种群内个体数目的多少来体现
    C. 北极苔原带抵抗力稳定性低于森林生态系统,但恢复力稳定性强于森林生态系统
    D. “野火烧不尽,春风吹又生”,体现了生态系统的抵抗力稳定性
    【答案】A
    【解析】
    【分析】
    生态系统的稳定性:生态系统所具有的保持或恢复自身结构和功能相对稳定能力。
    (1)种类:抵抗力稳定性:抵抗干扰保持原状;恢复力稳定性:遭到破坏恢复原状两者往往是相反关系。
    (2)原因:自我调节能力(负反馈调节是自我调节能力的基础)。
    (3)能力大小由生态系统的组分和食物网的复杂程度有关,生态系统的组分越多和食物网越复杂自我调节能力就越强;但自我调节能力是有限度的,超过自我调节能力限度的干扰会使生态系统崩溃。
    【详解】生态系统之所以具有稳定性,是由于生态系统具有一定的自我调节能力,A正确;生态系统稳定性的高低不能只通过种群内个体数目的多少来体现,还取决于物种数目的多少和营养结构的复杂程度,B错误;北极苔原带的抵抗力稳定性和恢复力稳定性都低于森林生态系统,C错误;“野火烧不尽,春风吹又生”,体现了生态系统的恢复力稳稳定性,D错误。

    5.下列有关生态系统功能及稳定性的描述,正确的是
    A. “墙角数枝梅,凌寒独自开”体现了生态系统中行为信息的传递
    B. 农业生态系统中的物质可自我循环,能量需系统外提供
    C. 动物尿液中所含能量不属于该动物的同化量
    D. 建立濒危动物精子库,有利于保护濒危动物的基因多样性
    【答案】D
    【解析】
    “墙角数枝梅,凌寒独自开”体现了生态系统中物理信息的传递,A错误;农业生态系统中的物质也是不能自给自足的,必须从系统外补充,B错误;动物尿液中能量(如尿素中所含的能量)是经过动物吸收营养物质并经过细胞转化的,属于其同化的能量,C错误;建立濒危动物精子库,有利于保护濒危动物的基因(遗传)多样性,D正确。

    6.如图所示为某湖泊生态系统能量流动的定量分析图解,图中A、B、C代表三个营养级,数字均为实际测得的能量数值,单位为J/(cm2·a)。已知该生态系统受到的太阳辐射总能量为118 872 J/(cm2·a),但其中118 761 J/(cm2·a)的能量未被利用。下列叙述不正确的是( )

    A. A固定的总的太阳能是111 J/(cm2·a)
    B. 从第一营养级到第二营养级的能量传递效率是18.4%
    C. 在B同化的总能量中,细胞呼吸消耗的能量约占16.7%
    D. 相邻营养级之间的能量传递效率一般是10%~20%
    【答案】B
    【解析】
    根据题意和图示分析可知:A是生产者,B是初级消费者,C是次级消费者。A固定的总能量:118 872-118 761=111 J/(cm2·a),所以从第一营养级到第二营养级的传递效率为15/111×100%≈13.5%,所以本题答案为B。
    【考点定位】生态系统的能量流动
    【名师点睛】每一营养级能量来源与去路的分析
    (1)能量来源
    (2)能量去向:流入某一营养级(最高营养级除外)的能量去向可从以下两个角度分析:
    ①定量不定时(能量的最终去路)
    ②定量定时:流入某一营养级的一定量的能量在一定时间内的去路可有四条:
    a.自身呼吸消耗;b.流入下一营养级;c.被分解者分解利用;d.未被自身呼吸消耗,也未被下一营养级和分解者利用,即“未利用”。如果是以年为单位研究,这部分的能量将保留到下一年。
    (3)能量流动特点及原因
    ①单向流动——捕食关系是长期自然选择的结果,不能“逆转”;散失的热能不能利用,无法“循环”。
    ②逐级递减——自身呼吸消耗+分解者分解+未被利用。
    (4)能量传递效率
    =×100%
    一般来说,能量传递的平均效率大约为10%~20%。

    7.下列对应关系不正确的是(  )
    ①冬虫夏草是一种名贵药物 
    ②每个物种都维系着它们所在的生态系统的结构和功能 
    ③某种不知名的植物 
    ④雄伟秀丽的名山大川与五颜六色的花鸟鱼虫相配合构成赏心悦目、流连忘返的美景
    A. ①属于直接价值 B. ②属于间接价值
    C. ③属于潜在价值 D. ④属于间接价值
    【答案】D
    【解析】
    ①冬虫夏草是一种名贵药物,对人类有药用意义,应该为直接价值,A正确。②每个物种都维系着它们所在的生态系统的结构和功能,属于对生态系统起到重要调节功能的间接价值,B正确。③某种不知名的植物,属于目前人类尚不清楚的潜在价值,C正确。④雄伟秀丽的名山大川与五颜六色的花鸟鱼虫相配合构成赏心悦目、流连忘返的美景,属于有旅游观赏的非实用意义的直接价值,D错误。
    【点睛】学生对生物多样性的价值理解不清
    生物多样性的价值

    8.关于土壤微生物的叙述,错误的是( )
    A. 土壤微生物参与生态系统的物质循环
    B. 土壤微生物可作为生态系统的分解者
    C. 不适合用取样器取样法对其丰富度进行调査
    D. 土壤中的硝化细菌是异养生物,不属于生产者
    【答案】D
    【解析】
    土壤微生物包括细菌、真菌等微生物,多数为分解者,能参与生态系统的物质循环,A、B正确;土壤微生物包括细菌、真菌、病毒等生物,无法用取样器取样法调查,C正确;硝化细菌通过化能合成作用将二氧化碳合成有机物,是自养型生物,属于生产者,D错误。

    9.图A、B、C、D表示某生态系统的四种成分,箭头表示各种成分之间的关系,下列相关叙述正确的是( )

    A. 生态系统的结构是指A、B、C、D和无机环境
    B. C1的同化量是流经该生态系统的总能量
    C. 在食物链C1→C2→……中C1为第一营养级生物
    D. A一定是自养型生物,D不一定是微生物
    【答案】D
    【解析】
    【分析】
    本题考查学生对生态系统的组成成分及营养级的理解,意在考查考生能理解所学知识要点,把握知识间内在联系的能力。分析题图:图中A为生产者,B为无机环境,C为消费者,其中C1为初级消费者,D为分解者。
    【详解】生态系统的结构是指其组成成分(包括生产者、消费者、分解者及非生物的物质和能量)及营养结构(食物链与食物网),图中A、B、C、D是生态系统的组成成分,A错误;生产者A固定的太阳能为流经该生态系统的总能量,B错误;在食物链A→C1→C2→…中A为第一营养级生物,C1为初级消费者是第二营养级食生物,C错误;A生产者一定是自养型生物,D分解者不一定是微生物,也可以是营腐生的动物,D正确;故正确的选D。
    【点睛】生态系统的成分包括生产者、消费者、分解者及非生物的物质和能量;生产者主要指绿色植物,能够通过光合作用制造有机物,为自身和生物圈中的其他生物提供物质和能量,植物体的光合作用的原料是二氧化碳和水;消费者主要指各种动物,在促进生物圈中的物质循环起重要作用;分解者是指细菌和真菌等营腐生生活的微生物,它们能将动植物残体中的有机物分解成无机物归还无机环境,促进了物质的循环。

    10.林德曼对某天然湖泊生态系统能量流动进行定量分析,部分结果如图,由图可知

    A. 第一营养级为②
    B. 初级消费者为③
    C. 该生态系统有4个营养级
    D. 能量在食物链流动过程中逐级递减
    【答案】D
    【解析】
    根据图解分析,第一营养级为①,A错误;初级消费者为第二营养级,是②,B错误;该生态系统有3个营养级,①②和③,C错误;因为每个营养级都要消耗部分能量,故能量在食物链的流动过程中逐级递减,D正确。

    11.下列有关植物体细胞杂交与动物细胞融合的比较,正确的是
    A. 两者都已用于大量生产分泌蛋白
    B. 两者都可用聚乙二醇(PEG)诱导细胞融合
    C. 两者应用的原理都是高度分化的细胞具有全能性
    D. 两者最终都能获得杂种生物
    【答案】B
    【解析】
    【分析】
    植物体细胞杂交包括植物细胞融合和植物组织培养两个过程,最终获得完整植株。动物细胞融合是将两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。
    【详解】细胞的全能性是指发育成一个完整个体的潜能,动物细胞融合的过程只是形成杂种细胞,不是细胞全能性,A、D错误。植物体细胞杂交用的的融合技术有物理法和化学法,化学法一般用聚乙二醇作为诱导剂,动物细胞融合除了物理法和化学法,还有灭活的病毒进行诱导,两者都可用化学法聚乙二醇(PEG)诱导细胞融合,B正确。植物体细胞杂交主要主要是产生杂种植株,动物细胞融合用以制备单克隆抗体,C错误。
    【点睛】本题考查植物体细胞杂交和动物细胞融合的相关知识,意在考查考生的识记能力和理解所学知识要点,把握知识间联系,形成知识网络的能力;能对所学知识进行比较和归纳总结.

    12.下列关于基因工程的叙述,不正确的是
    A. 基因拼接技术能够定向改造生物的遗传形状
    B. 一种限制酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸或核糖核苷酸序列
    C. 用同种限制酶切割后的人与猪的DNA末端可以相互粘合,并被DNA连接酶缝合
    D. 质粒存在于多种原核生物及真核生物细胞中
    【答案】B
    【解析】
    【分析】
    本题考查基因工程的相关知识,要求考生识记基因工程技术的概念、原理、操作步骤及意义,能结合所学的知识准确判断各选项.
    【详解】基因拼接技术即基因工程技术,能定向改造生物的遗传性状,A正确;限制酶能切割DNA,一种限制酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸,B错误;同种限制酶切割后的人与猪的DNA末端相同,可以被DNA连接酶连接成一个DNA分子,C正确;质粒是存在于拟核和细胞核外的小型环状DNA,D正确。
    【点睛】基因工程又叫DNA重组技术,是指按照人们的意愿,进行严格的设计,并通过体外DNA重组和转基因等技术,赋予生物以新的遗传特性,从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。

    13.下列关于细胞工程的叙述,正确的是
    A. 细胞的全能性是植物组织培养和动物细胞培养的理论基础
    B. 进行植物组织培养,需先用酶解法去掉细胞壁
    C. 体外培养杂交瘤细胞,可提取大量的单克隆抗体
    D. 动物细胞培养所需的气体环境中需要有CO2目的是刺激细胞呼吸
    【答案】C
    【解析】
    【分析】
    植物组织培养利用的原理是植物细胞具有全能性,动物细胞培养的理论基础是细胞增殖;进行植物体细胞杂交需要去掉细胞壁;制备单克隆抗体时,是将骨髓瘤细胞和B淋巴细胞融合,形成杂交瘤细胞,杂交瘤细胞既能无限增殖又能产生专一性抗体,通过体外培养就能获得单克隆抗体;动物细胞培养的条件有:(1)无菌、无毒的环境;(2)营养物质;(3)适宜温度和pH;(4)气体环境:95%空气(细胞代谢必需的)和5%的CO2(维持培养液的pH)。
    【详解】A. 细胞的全能性是植物组织培养的理论基础,细胞增殖是动物细胞培养的理论基础,A错误;
    B. 进行植物组织培养不需用酶解法去掉细胞壁,B错误;
    C. 杂交瘤细胞为骨髓瘤细胞和B淋巴细胞融合而成,能够大规模生成专一性强的抗体,C正确;
    D. 动物细胞培养所需的气体环境中需要有CO2,目的是维持培养基的pH,D错误。

    14.下列关于基因工程应用的叙述,正确的是
    A. 基因治疗就是把缺陷基因诱变为正常基因
    B. 原核生物的基因不能用于真核生物的遗传改良
    C. 利用DNA探针可以检测饮用水中是否含有某种病毒
    D. 利用基因工程生产乙肝疫苗的目的基因来自肝脏细胞
    【答案】C
    【解析】
    【分析】
    基因工程在实际应用领域应用广泛,通过基因工程可以得到抗虫、抗逆、抗病等植物,可以转基因动物生产药物、转基因动物做器官移植的供体,可以生产基因工程药物和进行基因治疗。
    【详解】基因治疗是把正常基因导入病人体内,使该基因的表达产物发挥作用,从而达到治疗疾病的目的,不是把缺陷基因诱变为正常基因,A错误。原核生物和真核生物的DNA都是规则的双螺旋结构,都以脱氧核苷酸为基本单位,原核生物的基因可以用于真核生物的遗传改良,如抗虫棉用的是苏云金芽孢杆菌的抗虫基因,B错误。利用DNA探针根据DNA分子杂交的原理可以检测饮用水中是否含有某种病毒,C正确。利用基因工程生产乙肝疫苗的目的基因来自乙肝病毒的核酸,D错误。

    15.芦笋是雌雄异株植物,雄株性染色体为XY,雌株为XX;其幼茎可食用,雄株产量高。以下为两种培育雄株的技术路线。有关叙述正确的是( )

    A. 提高生长素与细胞分裂素的比例促进芽生长
    B. 幼苗甲、乙和丙的形成均经过脱分化和再分化过程
    C. 雄株丁亲本的性染色体组成分别为XY、XX
    D. 雄株甲和雄株丁的培育过程中均发生了基因重组
    【答案】B
    【解析】
    【分析】
    本题考查的是伴性遗传与植物组织培养的相关知识。植物组织培养所遵循的原理是植物细胞的全能性,其流程是:离体的植物组织、器官或细胞(也叫外植体)经过脱分化形成愈伤组织、愈伤组织经过再分化长出丛芽,最终形成植物体。
    【详解】生长素与细胞分裂素的使用比例影响植物细胞的发育方向,当二者比值高时,有利于根的分化,抑制芽的形成,比值低时,有利于芽的分化、抑制根的形成,比例适中时,促进愈伤组织的形成,A错误;幼苗甲是通过植物组织培养得到的,幼苗乙与幼苗丙的形成是花药离体培养形成单倍体植株的过程,这些过程所用的原理是植物细胞的全能性,技术手段是植物组织培养技术,因此需要经过脱分化与再分化的过程,B正确;花粉是经过减数分裂产生的,其配子含有X染色体或Y染色体,经过花药离体培养,得到单倍体,再经过染色体加倍处理后得到的植株乙与丙的性染色体组成为XX或YY,因此雄株丁的亲本的性染色体组成分别为XX、YY,C错误;雄株甲是通过无性繁殖形成的,形成过程中不会进行减数分裂,因此也不会发生基因重组,雄株丁是通过有性生殖形成的,形成过程中经过了减数分裂,因此会发生基因重组,D错误。
    【点睛】本题容易错选C,因为易受雌雄异体的生物的性染色体组成是分别是XX、XY的思维定势影响。

    16.下列有关限制酶知识的叙述,错误的是(  )
    A. 产生于细胞内,同时可以在细胞外起作用
    B. 一种限制酶可以识别多种特定的核苷酸序列
    C. 限制酶作用于两个核苷酸之间的磷酸二酯键
    D. 微生物中的限制酶对自身DNA无损害作用
    【答案】B
    【解析】
    【分析】
    限制酶主要从原核生物中分离纯化出来,具有特异性,即能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂,形成黏性末端或平末端。
    【详解】A. 限制酶主要从原核生物中分离纯化出来,可以用于体外基因工程中对目的基因的切割,故其产生于细胞内,同时可以在细胞外起作用,A正确;
    B. 限制酶可以识别特定特定的核苷酸序列,并在特定的位点进行切割,B错误;
    C. 限制酶作用于每一条链中特定部位,使得两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂,C正确;
    D. 微生物中的限制酶对自身DNA无损害作用,主要用于切割外源DNA,D正确。

    17.下图甲、乙、丙分别是目的基因、质粒载体、重组DNA(重组质粒)的三个示意图,限制酶有BglⅡ、EcoRⅠ和Sau3AⅠ。要获得理想的可表达目的基因的重组DNA,最佳的限制酶组合方式是(  )

    A. 用EcoRⅠ切割目的基因和质粒载体
    B. 用BglⅡ和EcoRⅠ切割目的基因和质粒载体
    C. 用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因和质粒载体
    D. 用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和质粒载体
    【答案】D
    【解析】
    【分析】
    本题以图文结合为情境,考查学生对生基因工程的基本操作程序的相关知识的识记和理解能力,以及识图分析能力。
    【详解】依题意并分析图示可知:只有用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和质粒载体,在构建的重组DNA(重组质粒)中,RNA聚合酶在插入目的基因上的移动方向才与图丙相同,A、B、C均错误,D正确。

    18.下列关于基因工程中“目的基因”的相关说法,错误的是
    A. 目的基因可来自动、植物或微生物
    B. 用来修饰改造目的基因的工具是限制酶、DNA连接酶
    C. 目的基因导入双子叶植物一般采用农杆菌转化法
    D. 检测目的基因是否导入受体细胞可用抗原—抗体杂交技术
    【答案】D
    【解析】
    目的基因主要是指编码蛋白质的基因,可来自动、植物或微生物,A正确;用来修饰改造目的基因的工具有限制酶、DNA连接酶,B正确;农轩菌转化法一般用于将目的基因导入双子叶植物受体细菌,C正确;检测目的基因是否导入受体细胞可用DNA分子杂交技术,检测目的基因是否表达可用抗原-抗体杂交技术,D错误。

    19.用人的胰岛素基因制成的DNA探针检测下列物质,不能形成杂交分子的是
    A. 该人胰岛A细胞中的DNA
    B. 该人胰岛A细胞中的mRNA
    C. 该人胰岛B细胞中的mRNA
    D. 该人肝细胞中的DNA
    【答案】B
    【解析】
    【分析】
    组成动物的任何完整的正常细胞,都具有胰岛素基因,其DNA都可与该DNA探针进行杂交.而胰岛素基因只在胰岛B细胞中表达,因此只有胰岛B细胞中的mRNA可以与该DNA探针进行杂交。
    【详解】动物胰岛A细胞具有该生物的全套遗传信息,因此具有胰岛素基因,其DNA都可与该DNA探针进行杂交,A错误;胰岛素基因在胰岛A细胞中不表达,不能形成能与该探针进行杂交的mRNA,B正确;胰岛素基因在胰岛B细胞中表达,可形成能与该探针进行杂交的mRNA,C错误;该动物肝细胞同样也具有该生物的全套遗传信息,因此具有胰岛素基因,其DNA都可与该DNA探针进行杂交,D错误,故选B。
    【点睛】本题考查了DNA分子杂交技术的相关知识,意在考查考生理解所学知识的要点,把握知识间的内在联系的能力。

    20.以下不能说明细胞全能性的实验是( )
    A. 玉米花粉粒培育出植株
    B. 转入贮存蛋白基因的向日葵细胞培育出植株
    C. 烧伤病人的健康细胞培养出皮肤
    D. 将番茄与马铃薯细胞融合并培育成植株
    【答案】C
    【解析】
    【分析】
    细胞全能性指已经分化的细胞仍然具有发育成完整个体的潜能。全能性细胞,能发育成完整成熟的个体的细胞(如全能干细胞)。细胞的全能性以产生个体为标志,若无个体产生,则不能体现细胞的全能性。
    【详解】玉米花粉培育出植株,花粉是植物的生殖细胞,体现了细胞的全能性,A不符合题意;转入贮存蛋白基因的向日葵细胞培育出植株,是从细胞获得了植株,体现了细胞的全能性,B不符合题意;烧伤病人的健康细胞培养出皮肤,皮肤属于器官而不是个体,不能提现细胞全能性,C符合题意;将番茄与马铃薯细胞融合并培育成植株体现了细胞的全能性,D不符合题意。因此选C选项。

    21.如图甲、乙中的箭头表示三种限制酶的酶切位点,ampR表示氨苄青霉素抗性基因,neoR表示新霉素抗性基因。下列叙述正确的是

    A. 图甲中的质粒用BamHⅠ切割后,含有4个游离的磷酸基团
    B. 在构建重组质粒时,可用PstⅠ和BamHⅠ切割质粒和外源DNA
    C. 同时用PstⅠ和HindⅢ酶切,加入DNA连接酶后可得到两种重组质粒
    D. 导入目的基因的大肠杆菌可在含氨苄青霉素的培养基中生长
    【答案】C
    【解析】
    【分析】
    分析题图:质粒和外源DNA分子都含有三种限制酶切点,即限制酶BamHⅠ、PstⅠ和Hind III,其中BamHⅠ切割位点在目的基因上,所以不能用该酶切割外源DNA了。用PstⅠ和Hind III酶切质粒切成两个片段,用PstⅠ和Hind III酶能将外源DNA切成三段,只有含目的基因的片段通过DNA连接酶与质粒连接形成的重组质粒符合要求,而另一个重组质粒无目的基因,不符合要求,导入目的基因的大肠杆菌,其重组质粒是用PstⅠ和Hind III酶切割的,其中的Ampr(氨苄青霉素抗性基因)已被破坏,不能抗氨苄青霉素。
    【详解】质粒用BamHⅠ切割后将产生一个切口,打开了2个磷酸二酯键,产生2个游离的磷酸基团,故A错误;由于目的基因中含有一个BamHⅠ的识别位点,若用BamHⅠ切割将破坏目的基因的结构,故B错误;目的基因两侧分别有PstⅠ和HindⅢ的识别位点,且质粒也含有二者的识别位点,同时用这两种酶切割时,目的基因与质粒之间有一种符合要求的连接方式和一种不符合要求的连接方式,故C正确;PstⅠ的识别位点位于氨苄青霉素抗性基因中,用PstⅠ切割后,导致该抗性基因被破坏,从而造成导入目的基因的大肠杆菌不具有抗氨苄青霉素的特性,故D错误,故选C。
    【点睛】考查结合题图,考查基因工程的相关知识,意在考查考生分析题图提取有效信息的能力;能理解所学知识要点,霸把握知识间内在联系,形成知识网络结构的能力;能运用所学知识,解决问题的能力。

    22.科学家通过基因工程的方法,能使马铃薯块茎含有人奶蛋白。以下有关该基因工程的叙述正确的是
    A. 虽然转基因马铃薯与普通马铃薯之间可以相互受粉并产生可育的种子,但二者已不属于同一物种
    B. 人工种植的转基因马铃薯种群的人奶蛋白的基因频率将不会发生改变
    C. 马铃薯的叶肉细胞不可作为受体细胞
    D. 处理质粒和含有目的基因的DNA时通常用同一种限制酶
    【答案】D
    【解析】
    【分析】
    能够在自然状态下相互交配并且产生可育后代的一群生物称为一个物种。突变会导致基因频率改变。植物的体细胞和受精卵都可以作为受体细胞。同一种限制酶切割质粒和目的基因可以形成相同的黏性末端,再用DNA连接酶连接。
    【详解】转基因马铃薯与普通马铃薯之间可以相互受粉并产生可育的种子,故二者属于同一物种,A错误;人工种植的转基因马铃薯种群的人奶蛋白的基因频率将会发生改变,B错误;马铃薯的叶肉细胞可作为受体细胞,C错误;处理质粒和含有目的基因的DNA时通常用同一种限制酶,D正确;因此,本题答案选D。
    【点睛】解答本题的关键是:明确生殖隔离的含义,将目的基因导入到植物细胞的方法,以及影响基因频率的因素,再根据题意作答。

    23.以下有关基因工程的叙述,不正确的是( )
    A. 基因工程的原理是通过对DNA分子操作实现基因重组
    B. 不同生物共用一套遗传密码为基因工程提供了理论依据
    C. 不同生物的DNA结构大致相同是重组DNA形成的保障
    D. 基因工程工具酶的发现为目的基因导入受体细胞创造了条件
    【答案】D
    【解析】
    【分析】
    基因工程又叫DNA重组技术,是指按照人们的意愿,进行严格的设计,并通过体外DNA重组和转基因等技术,赋予生物以新的遗传特性,从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程的理论依据:不同生物的DNA具有相同的结构和化学组成,因此不同生物的DNA能够连接在一起;不同生物共用一套遗传密码,因此一种生物的基因能在另一种生物体内表达。工具酶的发现为基因工程获取目的基因并构建基因表达载体提供了技术保障,基因转移载体的发现为目的基因导入受体细胞提供可能。
    【详解】A. 基因工程的原理是通过对DNA分子操作实现基因重组,A正确;
    B. 不同生物共用一套遗传密码为基因工程提供了理论依据,B正确;
    C. 不同生物的DNA结构大致相同是重组DNA形成的保障,C正确;
    D. 工具酶的发现可以为基因工程获取目的基因并构建基因表达载体,即为基因工程的实施提供技术支持,D错误。

    24.图1表示DNA的平面结构示意图,图2表示某种限制酶的识别序列和作用位点,下列相关说法正确的是

    A. 图1中a所示部位即图2中箭头所示部位
    B. 图2所示的DNA片段被限制酶切割后获得的末端形式与图1下端相同
    C. E.co1iDNA连接酶可以将两个图1所示结构连接成为一个DNA片段
    D. 基因工程的载体必须具有图2所示的碱基序列
    【答案】A
    【解析】
    【分析】
    DNA连接酶连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键。E·coliDNA连接酶只能缝合黏性末端;T4DNA连接酶黏性末端与平末端都可以缝合,但连接平末端时的效率比较低。图1片段为平末端,图2被限制酶切割后形成的是黏性末端。
    【详解】图2中箭头所示部位为脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键,图1中a所示部位也是脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键,A正确;图2所示的DNA片段被限制酶切割后获得的末端为黏性末端,图1下端为平末端,故图2所示的DNA片段被限制酶切割后获得的末端形式与图1下端不同,B错误;T4DNA连接酶可以连接平末端,因此T4DNA连接酶可以将两个图1所示结构连接成为一个DNA片段,而E·coliDNA连接酶是从大肠杆菌中获得的DNA 连接酶,只能连接黏性末端,C错误;基因工程的载体必须具有限制酶的切割位点,但不一定具有图2所示的碱基序列,D错误。
    故选A。

    25.下列有关细胞工程的叙述,正确的是
    A. PEG是促细胞融合剂,可直接诱导植物细胞融合
    B. 用原生质体制备人工种子,要防止细胞破裂
    C. 骨髓瘤细胞经免疫处理,可直接获得单克隆抗体
    D. 传代培养细胞时,用胰蛋白酶处理贴壁生长的细胞
    【答案】D
    【解析】
    【分析】
    动物细胞培养技术的原理是细胞增殖(有丝分裂);传代培养时需要用胰蛋白酶处理贴壁生长的细胞,然后分瓶继续培养,让细胞继续增殖;癌细胞失去接触抑制,所以癌细胞在培养瓶中不会出现接触抑制现象;动物细胞培养一般需要使用CO2培养箱,目的是维持培养液pH稳定。
    【详解】A、PEG是促细胞融合剂,但是不能直接诱导植物细胞融合,植物细胞需要先去除细胞壁形成原生质体后才能融合,错误;
    B、制备人工种子,需要用完整植物细胞,借助于植物组织培养技术来实现,不需用原生质体,错误;
    C、能产生抗体的是浆细胞,骨髓瘤细胞不能产生抗体,只有与B细胞融合后形成杂交瘤细胞才可以制备单克隆抗体,错误;
    D、传代培养时需要用胰蛋白酶处理贴壁生长的细胞,然后分瓶继续培养,让细胞继续增殖,正确。
    故选D。

    26.1958年,美国科学家斯图尔德应用植物组织培养技术,将二倍体胡萝卜韧皮部的一些细胞进行离体培养,最终发育成完整的新植株(如下图)。关于这一科学事实,下列叙述中错误的是

    A. 该实验证明了植物细胞具有全能性
    B. 此过程的整个阶段必须给予光照
    C. 此过程中细胞只能进行有丝分裂
    D. 利用该技术获得的后代能保持亲本性状
    【答案】B
    【解析】
    【分析】
    植物组织培养就是在无菌和人工控制的条件下,将离体的植物器官、组织、细胞,培养在人工配制的培养基上,给予适宜的培养条件,诱导其产生愈伤组织、丛芽,最终形成完整的植株。植物组织培养的原理是植物细胞具有全能性。无性生殖能保持亲本优良性状,植物组织培养就是无性生殖中的一种。
    【详解】将离体的植物细胞培养成完整植株的过程证明了植物细胞具有全能性,A正确;植物组织培养过程的脱分化阶段不需要光照,B错误;植物组织培养过程中细胞只能进行有丝分裂,C正确;植物组织培养过程的生殖属于无性生殖,产生的后代能保持亲本的性状,D正确。
    【点睛】关键:熟悉植物组织培养技术的原理(细胞的全能性)、繁殖方式(无性生殖)、培育条件(脱分化不需光照,再分化需要适宜光照)等是解答本题的关键。

    27.一般来说,动物细胞体外培养需要满足以下条件
    ①无毒的环境 ②无菌的环境 ③使用合成培养基,但通常需加血浆、血清等天然成分 ④温度与动物的体温相近 ⑤因在二氧化碳培养箱中培养,故不需要O2 ⑥适宜的PH
    A. ①②③④⑤⑥ B. ①②③④
    C. ①②④⑤⑥ D. ①②③④⑥
    【答案】D
    【解析】
    【分析】
    动物细胞培养(animal cell culture)就是从动物机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞(使用胰蛋白酶或胶原蛋白酶)然后放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。
    【详解】①②动物细胞培养需要无菌、无毒的环境,①②正确;
    ③用于动物细胞培养的合成培养基需加入糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等,还需加入血清、血浆等天然物质,③正确;
    ④⑥动物细胞培养需要适宜的温度和PH,其中温度要与动物体温相近,④⑥正确;
    ⑤动物细胞培养需要一定的气体环境,95%空气和5%的CO2,⑤错误。
    故选D。
    【点睛】本题知识点简单,考查动物细胞培养的相关知识,要求考生识记动物细胞培养的具体过程,掌握动物细胞培养的条件,属于考纲识记层次的考查.

    28.2018年中国科学院神经科学研究所宜布,攻克了克隆灵长类动物这一世界难题,首次成功以体细胞克隆出了两只猕猴——“中中”和“华华”,流程如下图。对于该过程的分析错误的是( )

    A. 过程①表示胚胎移植
    B. 克隆猴的性状与核供体性状不完全相同
    C. 克隆猴的成功说明动物体细胞的细胞核具有全能性
    D. 与核供体相比,克隆猴体细胞的染色体数目减半
    【答案】D
    【解析】
    【分析】
    本题考查动物克隆的相关知识。动物克隆过程涉及到核移植技术和早期胚胎培养技术。分析图示克隆猴获取过程:将供体细胞核移入去除核的卵母细胞中,诱导融合成重组细胞,诱导发育形成早期胚胎,将早期胚胎移入代孕母猴子宫中继续发育,获得克隆猴。
    【详解】过程①是将早期胚胎移入代孕母猴子宫中发育,属于胚胎移植,A正确;克隆猴的核遗传物质由供体细胞提供,但细胞质中的遗传物质由去核卵母细胞提供,故克隆猴的性状与核供体性状大部分相同,B正确;克隆猴的成功说明动物细胞核具有发育成完整个体的潜能,即能说明动物细胞核具有全能性,C正确;克隆猴由重组细胞发育而来,重组细胞中的染色体全部来自核供体,重组细胞在生长发育过程中通过有丝分裂增殖,故克隆猴体细胞的染色体数与核供体一样多,D错误;因此,本题答案选D。

    29.下面为制备单克隆抗体过程示意图,相关叙述错误的是

    A. ④中的筛选是为了获得能产生多种抗体的杂交瘤细胞
    B. 上图中有一处明显错误
    C. ②中培养基未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡
    D. ⑤可以无限增殖
    【答案】A
    【解析】
    【分析】
    据图分析,①过程表示获取B淋巴细胞和骨髓瘤细胞;②过程表示细胞融合,可采用离心、电刺激、聚乙二醇、灭活病毒等方式诱导,③筛选出杂交瘤细胞;④中的通过专一抗体检验阳性,筛选出能够产生特异性抗体的细胞群;⑥过程表示动物细胞培养;据此分析。
    【详解】A. 单克隆抗体制备过程中,第二次筛选的目的是获得能产生特定抗体的杂交瘤细胞,A错误;
    B. 图中有一处错误,即没有先给小鼠进行免疫,B正确;
    C. ②中培养基目的是筛选出融合的杂交瘤细胞,未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡,C正确;
    D. 杂交瘤细胞的特点是既能无限增殖又能产生特定抗体,D正确。
    【点睛】本题考查单克隆抗体制备的相关知识,意在考查学生的识图和理解能力,属于中档题,解题的关键是理解单克隆抗体制备的相关过程.

    30.下列属于植物细胞工程实际应用的是(   )
    ①制造人工种子 ②微型繁殖 ③培育抗病毒烟草 ④培育单倍体 ⑤生产脱毒植株
    A. ①②③④ B. ①③④⑤
    C. ①②④⑤ D. ②③④⑤
    【答案】C
    【解析】
    【分析】
    植物细胞工程技术的应用:(1)植物繁殖的新途径:微型繁殖、作物脱毒、制造人工种子;(2)作物新品种的培育:培育单倍体、突变体的利用;(3)细胞产物的工厂化生产,培育抗盐植物是基因工程的应用;制作“生物导弹”是动物细胞工程的应用。
    【详解】①通过植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料,通过人工薄膜包装得到的种子,①正确;②用于快速繁殖优良品种的植物组织培养技术,叫做植物的微型繁殖技术,也叫快速繁殖技术,②正确;③培育抗病毒烟草属于基因工程的应用,并且目前没有获得成功,③错误;④利用花粉离体培养技术培育单倍体幼苗,④正确;⑤利用分生区(如茎尖)细胞进行组织培养,形成脱毒苗,⑤正确;故选C。
    【点睛】本题考查植物细胞工程的应用,意在考查考生的识记能力,属于容易题,植物组织培养依据的原理为植物体细胞的全能性,即已经分化的细胞仍然具有发育成完整植株的潜能;培养过程的顺序是离体植物器官、组织或细胞(外植体)脱分化形成愈伤组织,再分化形成根、芽等器官进而形成新的植物体。

    第II卷非选择题
    31.下图为某生态系统灌草丛带中的几种生物种群及其获得的能量值,请据图分析:
     
    (1)图中共有______条食物链,沙氏变色蜥在食物网中所处的营养级为_________________。除图中所示的生物类群外,该生态系统的生物组成成分还应有__________才能保证其物质循环的正常进行。
    (2)若字母代表能量值,则b、c的大小关系是__________________;图中能量从第一营养级到第二营养级的传递效率是________________________(用图中字母表示);樟毛等植物呼吸消耗的能量________(包含/不包含)在a中。 
    (3)假设沙氏变色蜥只有地面草食动物和小型地面肉食动物两条食物链(其他动物不存在),樟毛等植物中的能量不变,将它的食物比例由地面草食动物:小型肉食动物=1:1调整为2:1,能量传递效率按10%计算,该生态系统传递给沙氏变色蜥的能量是原来的________倍。
    (4)随着时间的推移,本地区内生物的种类和数量还将不断改变,这一过程属于_________演替,该过程中生态系统的___________稳定性逐步提高。
    【答案】 (1). 4 (2). 第三四营养级 (3). 分解者 (4). b>c (5). (b+d+e)/a (6). 包含 (7). 1.375 (8). 次生 (9). 抵抗力
    【解析】
    试题分析:a为生产者固定的总太阳能,其中包括用于自身呼吸消耗的能量、流向下一营养级的能量、流向分解者的能量;用标志重捕法调查该系统某种大型飞行草食动物的种群密度,若部分被标记的生物被捕食,则计算结果大于实际种群数量。
    (1)据图分析,樟毛等植物→小型飞行草食动物→网蜘蛛→沙氏变色蜥,樟毛等植物→大型飞行草食动物→沙氏变色蜥,樟毛等植物→地面草食动物→沙氏变色蜥,樟毛等植物→地面草食动物→小型地面肉食动物→沙氏变色蜥,共4条食物链,其中沙氏变色蜥占第三四营养级。该生态系统的生物组成分只有生产者和消费者,还应包括分解者组分。 
    (2)能量流动是逐级递减的,故b>c;图中第一营养级为樟毛等植物,固定的能量为a,第二营养级为小型飞行草食动物(b)、大型飞行草食动物(d)、地面草食动物(e),因此能量从第一营养级到第二营养级的传递效率为 (b+d+e)/a;a为生产者固定的总太阳能,其中包括用于自身呼吸消耗的能量、流向下一营养级的能量、流向分解者的能量。 
    (3)假设沙氏变色蜥只有地面草食动物和小型地面肉食动物两条食物链,樟毛等植物中的能量不变,小型肉食动物=1:1调整为2:1,能量传递效率按10%计算,该生态系统传递给沙氏变色蜥的能量:解题时应该从沙氏变色蜥出发,设当食物由草食动物:肉食动物为1:1时,沙氏变色蜥的能量为x,需要的生产者1/2x×10%×10%+1/2x×10%×10%×10%=0.0055x.设草食动物:肉食动物为2:1时,沙氏变色蜥的能量为y,需要的2/3y×10%×10%+1/3y×10%×10%×10%=0.004y.由于两种情况下,生产者的数量是一定的,所以0.0055x=0.004y,则y=1.375x。
    (4)随着时间的推移,本地区内生物的种类和数量还将不断改变,这一过程属于次生演替,该过程中生态系统的抵抗力稳定性逐步提高。
    【点睛】本题考查生态系统的能量流动和物质循环等知识,意在考察考生对生物学知识的理解能力和综合分析能力,难度较大。

    32.水蛭素是一种小分子蛋白质,其对凝血酶有极强的抑制作用,是迄今为止所发现的最强凝血酶天然特异抑制剂。通过基因工程技术生产水蛭素的方法如下图所示。请据图回答:

    (1)过程①需要的原料是__________,过程③必需的酶有__________,过程④为提高导入效率,常用__________溶液处理大肠杆菌。
    (2)过程②中可通过__________技术大量扩增水蛭素基因,被扩增的水蛭素基因必须有一段核苷酸序列是已知的,以便根据这一序列合成__________。 
    (3)水蛭素基因不含质粒图谱中限制酶识别序列。为使水蛭素基因重组进该质粒,水蛭素基因两端需分别加入不同限制酶__________和__________的识别序列。
    (4)在导入重组质粒后,过程⑤为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌,一般需要用添加_______的培养基进行培养。
    【答案】 (1). 脱氧核苷酸(dNTP或dATP、dGTP、dCTP、dTTP) (2). 限制酶和DNA连接酶 (3). CaCl2 (4). PCR (5). 引物 (6). AscⅠ (7). BamHⅠ (8). 卡那霉素
    【解析】
    【分析】
    基因工程操作的四个步骤为:1、获取目的基因2、构建基因表达载体3、将目的基因导入受体细胞4、目的基因的检测和表达。获得目的基因的方法:①从基因文库中获取②利用PCR技术扩增③人工合成(化学合成)。限制酶的作用是识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂.
    【详解】(1)①是通过反转录法形成cDNA的过程,此过程需要的原料是脱氧核苷酸(dNTP或dATP、dGTP、dCTP、dTTP)。③是构建重组表达载体的过程,需要用限制酶切割质粒与目的基因,同时需要用DNA连接酶把目的基因与质粒连在一起,过程④为提高导入效率,常用CaCl2溶液处理大肠杆菌。
    (2)过程②中可通过PCR技术大量扩增水蛭素基因,被扩增的水蛭素基因必须有一段核苷酸序列是已知的,以便根据这一序列合成引物。 
    (3)为使水蛭素基因重组进该质粒,需要用与质粒图谱中相同的识别序列的限制酶切割水蛭素基因,而图中的限制酶pvuI可破坏卡那霉素抗性基因,限制酶BssSI破环复制原点,限制酶XbaI破坏启动子,限制酶SalI破环终止子,因此为使水蛭素基因重组进该质粒,水蛭素基因两端需分别加入不同限制酶AscⅠ和BamHⅠ的识别序列。
    (4)在导入重组质粒后,过程⑤为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌,一般需要用添加卡那霉素的培养基进行培养。
    【点睛】熟记并理解基因工程的基本操作程序等相关的基础知识、形成清晰的知识网络。在此基础上从题意中提取信息,对相关问题情境进行解答。

    33.回答下列有关生物技术与基因表达的问题
    如图所示为利用现代生物技术获得能表达某蛋白酶工程菌的过程及工程菌表达目的基因的模式图。选用的质粒A上有I、II、III、IV四种限制酶切割位点。

    (1)据图推断过程①获取目的基因时,应选用的限制酶是______________。过程②是利用___________酶将目的基因与运载体连接形成重组质粒。过程③为重组质粒导入受体细胞,如受体细胞为小鼠受精卵,则选用的常规方法是_______________。
    (2)如同时用酶I和酶IV切割图中质粒A,产生1.8kb和8.2kb的两种片段(1kb=1000对碱基对),如用四种酶同时切割质粒A,则产生0.6kb和8.2kb两种片段,那么用同时用酶II和酶IV切割质粒A,则产生的片段有____________。
    (3)过程⑤表示______________过程,其需要的原料是_______________。
    【答案】 (1). II和III (2). DNA连接酶 (3). 显微注射 (4). 1.2kb和8.8kb (5). 转录 (6). 四种游离的核糖核苷酸
    【解析】
    【分析】
    本题旨在考查基因工程与基因表达的相关知识。分析题图:①提取目的基因,②目的基因与运载体结合,③将目的基因导入受体细胞,④目的基因的表达,⑤目的基因表达过程中的转录;选用的质粒A上有I、II、III、IV四种限制酶切割位点,获取目的基因的DNA分子上有I、II、III三种限制酶切割位点,选用I限制酶切割位点将会破坏目的基因,故选用II、III两种限制酶切割目的基因与运载体质粒。
    【详解】(1)质粒A上有I、II、III、IV四种限制酶切割位点,获取目的基因的DNA分子上有I、II、III三种限制酶切割位点,据图推断过程①获取目的基因时,选用I限制酶切割位点将会破坏目的基因,故选用II、III两种限制酶;两种来源不同的DNA用同种限制酶切割后,末端互补的碱基可以连接起来,脱氧核糖和磷酸交替连接而构成的DNA 骨架上的缺口,需要靠DNA连接酶来“缝合”,将目的基因与运载体连接形成重组质粒。重组质粒导入动物受体细胞,选用的常规方法是显微注射法。
    (2)如同时用酶I和酶IV切割图中质粒A,产生1.8kb和8.2kb的两种片段(1kb=1000对碱基对),说明质粒上含有10000个碱基对;如用四种酶同时切割质粒A,则产生0.6kb和8.2kb两种片段,则说明酶I和酶II、酶II和酶III、酶III和酶IV切割位点间的都含有600个碱基对,那么同时用酶II和酶IV切割质粒A,则产生的片段有600+600=1200对碱基(酶II、酶III和酶IV之间的碱基)和8200+600=8800对碱基(酶IV、酶Ⅰ和酶II之间的碱基),故则产生的片段有1.2kb和8.8kb。
    (3)过程⑤遗传信息传递的过程为DNA→RNA,表示转录过程,其需要的原料是四种游离的核糖核苷酸。
    【点睛】基因工程的操作一般要经历四个步骤:提取目的基因、目的基因与运载体结合、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。基因的工程的三大工具是限制性核酸内切酶、DNA连接酶、运载体。

    34.Ⅰ:狂犬病是由狂犬病病毒引起的人畜共患的烈性传染病,制备鼠源性抗狂犬病病毒单克隆抗体是检测狂犬病病毒、治疗狂犬病的有效措施之一。请回答下列问题:
    (1)用狂犬病病毒的RRIG蛋白免疫小鼠,一段时间后,若小鼠血清中检出_________的抗体,则说明小鼠产生了免疫反应。再从小鼠脾细胞中获取______,然后将其一与骨髓瘤细胞融合。
    (2)在细胞融合完成后,筛选出杂交瘤细胞。杂交瘤细胞的特点是_____________。
    Ⅱ:转基因抗病甜椒的培育过程如图所示。质粒上有Pst I、Sina I、EcoR I、 Apa I等四种限制酶切割位点。请回答:

    (1)构建含抗病基因的表达载体A时,应选用限制酶_________,对含抗病基因的DNA、质粒进行切割。
    (2)通常采用农杆菌转化法将目的基因导入植物细胞时,受体应选_____(填“正常叶”或“损伤叶”),原因是 ____________。
    (3)培养基中的卡那霉素会抑制甜椒愈伤组织细胞的生长,欲利用该培养基筛选己导入抗病基因的甜椒细胞,应使A中含有________,作为标记基因。
    【答案】 (1). 抗RRIG蛋白 (2). B淋巴细胞 (3). 无限增殖且能产生专一性抗体 (4). PstⅠ、EcoRⅠ (5). 损伤叶 (6). 植物受到损伤时伤口处细胞会分泌大量的酚类化合物,吸引农杆菌移向这些细胞 (7). 抗卡那霉素基因
    【解析】
    【分析】
    1.基因工程技术的基本步骤:
    (1)目的基因的获取:方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。
    (2)基因表达载体的构建:是基因工程的核心步骤,基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。
    (3)将目的基因导入受体细胞:根据受体细胞不同,导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法;将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法;将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。
    (4)目的基因的检测与鉴定:分子水平上的检测:①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术;②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术;③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定:抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。
    2.农杆菌转化法的原理:农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞,并且整合到受体细胞染色体的DNA上。根据农杆菌的这一特点,如果将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上,通过农杆菌的转化作用,就可以把目的基因整合到植物细胞中染色体的DNA上。
    【详解】Ⅰ. (1)用狂犬病毒的RRIG蛋白对小鼠进行注射,使小鼠产生免疫反应,若在血清中产生相应的抗体,则可从小鼠的脾脏细胞中得到产生该抗体的B淋巴细胞。
    (2)B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合后,再用特定的选择培养基进行筛选,在培养基上未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡。只有融合的细胞才能生长,这种杂交瘤细胞的特点是既能无限增殖,又能产生专一的抗体。
    (3)单克隆抗体的特点是特异性强、灵敏度高,并可大量制备。
    Ⅱ.(1)含抗病基因的DNA含有限制酶PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ的切割位点,但限制酶SmaⅠ的切割位点位于抗病基因上,对SmaⅠ位点进行切割破坏了抗病基因的结构,所以要获得抗病基因,不能用限制酶SmaⅠ对图中对应的位点进行切割,要获得含抗病基因的重组质粒,应选用PstⅠ、EcoRⅠ限制酶对含抗病基因的DNA、质粒进行切割。
    (2)通常采用农杆菌转化法将目的基因导入植物细胞时,受体应选损伤叶,这是因为植物受到损伤时伤口处细胞会分泌大量的酚类化合物,吸引农杆菌移向这些细胞,增大导入成功率。
    (3)欲利用含卡那霉素的培养基筛选已导入抗病基因的甜椒细胞,重组质粒中应同时含有抗卡那霉素基因,作为标记基因。
    【点睛】本题考查动物细胞工程相关知识,掌握单克隆抗体制备和细胞融合是解决本题的关键。本题考查基因工程相关知识,掌握基因工程操作步骤是解决本题的关键

    35.某研究小组进行药物试验时,以动物肝细胞为材料,测定药物对体外培养细胞的毒性。供培养的细胞有甲、乙两种,甲细胞为肝肿瘤细胞,乙细胞为正常肝细胞。请回答下列有关动物细胞培养的问题:
    (1)将数量相等的甲细胞和乙细胞分别置于培养瓶中培养,培养液及其他培养条件均相同。一段时间后,观察到甲细胞数量比乙细胞数量________(多或少)。
    (2) 在两种细胞生长过程中,当乙细胞铺满瓶壁时,其生长停止。药物试验需要大量细胞,两种细胞频繁传代,甲细胞比乙细胞可以传代的次数更________。若用动物的肝脏组织块制备肝细胞悬液,需用________处理。
    (3)为了防止基因培养过程中细菌的污染,可向培养液中加入适量的________。
    (4)已知癌基因X过量表达与肝肿瘤的发生密切相关,要试验一种抗肿瘤药物Y对甲组细胞生长的影响,可将甲细胞分为A、B两组,A组细胞培养液中加入________,B组细胞培养液中加入无菌生理盐水,经培养后,从A、B两组收集等量细胞,通过分别检验X基因在A、B两组细胞中的________或蛋白质合成水平的差异,确定Y的药效。
    【答案】 (1). 多 (2). 多 (3). 胰蛋白酶 (4). 抗生素 (5). 药物Y (6). mRNA
    【解析】
    【分析】
    1、动物细胞培养的过程:取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中(原代培养)→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞,制成细胞悬液→转入培养液(传代培养)→放入二氧化碳培养箱培养.
    2、动物细胞培养的条件:
    (1)无菌、无毒的环境:①消毒、灭菌;②添加一定量的抗生素;③定期更换培养液,以清除代谢废物.
    (2)营养物质:糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等,还需加入血清、血浆等天然物质.
    (3)温度和PH.
    (4)气体环境:95%空气(细胞代谢必需的)和5%的CO2(维持培养液的PH).
    【详解】(1)肝肿瘤细胞比正常肝细胞的分裂能力强,细胞周期短,因此在其他条件相同时,相同时间内肝肿瘤细胞产生的子代细胞多.
    (2)甲细胞为肿瘤细胞,已经失去接触抑制,而乙细胞为正常肝细胞,存在接触抑制,因此在这两种细胞生长过程中,当乙细胞铺满瓶壁时,其生长停止.甲细胞能无限增殖,因此其传代的次数比乙多.胰蛋白酶能消化组织细胞间的蛋白质,使组织细胞分散成单个细胞.
    (3)为了防止细胞培养过程中细菌的污染,可向培养液中加入适量的抗生素.
    (4)该实验的目的是试验一种抗肿瘤药物Y对甲细胞生长的影响,因此自变量为是否加入Y,B组细胞培养液中加入等量无菌生理盐水,则A组细胞培养液中应加入等量Y.已知基因X表达与肝肿瘤的发生密切相关,而基因X的表达包括转录和翻译两个步骤,抗癌药物Y的作用可能是抑制基因X的转录过程,也可能是抑制其翻译过程,因此通过分别检测基因X在A、B两组细胞中的mRNA或相关蛋白质合成水平的差异,可以确定Y的药效.
    【点睛】本题以药物试验为背景,考查癌细胞的主要特征、动物细胞培养、探究实验,要求考生识记动物细胞培养的过程及动物细胞培养的条件;识记癌细胞的主要特征;明确实验的目的,理解实验的原则,能结合转录和翻译的过程答题.

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